Αφηρημένο

Από τη χορήγηση περιφερειακών φάρμακο δίνει τη δυνατότητα να διατηρήσει μια υψηλή συγκέντρωση του φαρμάκου στους όγκους, συγκρίναμε την συγκέντρωση στο πλάσμα και η βιοκατανομή του δοξορουβικίνη (Dox) από φορτωμένα με φάρμακο συμβατικά λιποσώματα με τοπική ή συστηματική χορήγηση. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η συγκέντρωση του φαρμάκου βελτιώθηκε σημαντικά στο ήπαρ, καθώς και μια μείωση της αρτηριακής και άλλα όργανα με ένεση σπλήνα μιμούνται πύλη διάχυσης φλέβα (περιφερειακή διοίκηση). Για να διερευνηθεί περαιτέρω η στοχευμένη θεραπευτικό αποτέλεσμα των γαλακτοσυλιωμένων ενθυλακωμένη σε λιποσώματα δοξορουβικίνη (Dox) από περιφερειακές χορήγηση, τα λιποσώματα που στοχεύουν το ήπαρ παρασκευάσθηκαν με ενσωμάτωση γαλακτοζυλιωμένο-DPPE με τα συμβατικά λιποσώματα. πρόσληψη λιποσωμάτων και στόχευση επαληθεύτηκαν

in vitro

και

in vivo

με μικροσκόπιο φθορισμού και του συστήματος Xenogen IVIS απεικόνισης, αντίστοιχα. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι γαλακτόζη στοχευόμενα λιποσώματα παρουσίασε ισχυρότερη ειδική πρόσληψη κυττάρων από ανθρώπινα κύτταρα HepG2 ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα σε σύγκριση με τα μη-στοχευόμενα λιποσώματα.

In vivo

φθορισμός απεικόνισης έδειξαν ότι η ενδο-ηπατική εναπόθεση των συμβατικών και γαλακτοσυλιωμένων λιποσώματα μέσω ένεσης σπλήνα ήταν περισσότερο από ότι μέσω χορήγησης φλέβα της ουράς, και γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα είχαν ένταση υψηλότερη φθορισμού πάνω από τα συμβατικά λιποσώματα κατά την απονομή των υστέρων σπλήνα του ήπατος . Η επίδραση κατά των όγκων των διαφόρων οδών χορήγησης φαρμάκου για τους δύο λιποσωμικών σκευασμάτων εκτιμήθηκε χρησιμοποιώντας ένα μοντέλο ποντικού ηπατικής μετάστασης του καρκίνου του παχέος εντέρου. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι εξέλιξης του όγκου σε κόμβους ήπαρ και μεσεντερικά λεμφικά κατεστάλη σημαντικά με Dox φορτωμένα γαλακτοζυλιωμένο λιποσωμάτων μέσω ένεσης σπλήνα, ενώ δεν σημασία παρατηρήθηκε σε μη-στοχευμένες σκευάσματα. Τα δεδομένα μας έδειξε ότι η τοπική αιμάτωση του γαλακτοσυλιωμένες λιποσωμική δοξορουβικίνη είχε μια μεγάλη υπόσχεση για τη θεραπεία των ηπατικών μεταστάσεων από καρκίνο του παχέος εντέρου

Παράθεση:. Zhao C, Feng Q, Dou Ζ, Yuan W, Sui C, Ζανγκ Χ, et al. (2013) Τοπική Στοχευμένη Θεραπεία των ηπατικών μεταστάσεων από καρκίνο του παχέος εντέρου από γαλακτοζυλιωμένο εγκλεισμένης σε λιποσώματα με δοξορουβικίνη. PLoS ONE 8 (9): e73860. doi: 10.1371 /journal.pone.0073860

Επιμέλεια: Guillermo Velasco, Πανεπιστήμιο Complutense, Ισπανία

Ελήφθη: 11 Σεπτέμβρη 2012? Αποδεκτές: 30 Ιουλ 2013? Δημοσιεύθηκε: 11 του Σεπτεμβρίου 2013

Copyright: © 2013 Zhao et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η έρευνα υποστηρίχθηκε από το Εθνικό πρόγραμμα βασικής έρευνας της Κίνας 2011CB911004, Πεκίνο Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας 7.122.150 και το Εθνικό Ίδρυμα Novel Drug Development της Κίνας 2009ZX09303-008. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Μετά λεμφαδένες, το ήπαρ κατατάσσει το δεύτερο όργανο με υψηλή συχνότητα της μετάστασης. Σύμφωνα με τις στατιστικές, υπάρχουν περισσότερα από 70% των ασθενών που παρουσιάζουν ηπατικές μεταστάσεις με πρωτογενείς καρκίνους τους βρίσκονται στο κόλον, πνεύμονα, των οστών ή του εγκεφάλου [1], [2]. Μετάσταση θεωρείται ως ένας από τους σημαντικότερους παράγοντες για την προγνωστικούς ασθενείς με καρκίνο. Για παράδειγμα, το ποσοστό επιβίωσης 5 ετών γαστρικού καρκίνου με μετάσταση στο ήπαρ είναι μικρότερη από 10% [3], [4], [5], [6].

Παρά τις πρόσφατες βελτιώσεις στην πρώτη γραμμή χημειοθεραπευτικούς στρατηγικές για τη θεραπεία ασθενών με ηπατική μετάσταση από πρωτογενή καρκίνο, εκτομή ήπατος προσφέρει τη μοναδική ευκαιρία θεραπεία [7]. Ωστόσο, περίπου μόνο το 15% των ασθενών με ηπατική μετάσταση είναι χειρουργήσιμη [8], το επιπλέον 30% χρειάζεται χημειοθεραπεία πριν από την εκτομή [9], [10], [11], [12]. Είναι, ως εκ τούτου, είναι απαραίτητο να αναπτυχθούν πιο αποτελεσματικές αγωγές για την παράταση της επιβίωσης των ασθενών με ηπατικές μεταστάσεις από την αρχική του καρκίνου.

Αποτελείται από καθετήρα ηπατική αρτηριακή χημειοεμβολισμό (ΤΑΕ) και πύλη χημειοθεραπεία φλέβα, επεμβατική χημειοθεραπεία έχει θεωρηθεί πολλά υποσχόμενη θεραπευτική αγωγή για ηπατική μεταστατικό καρκίνωμα [13], [14]. Σε σύγκριση με συστηματική χημειοθεραπεία, περιφερειακή χορήγηση του φαρμάκου μέσω είτε αρτηριακής έγχυσης ή πυλαίας φλέβας επιτρέπει να διατηρηθεί μια υψηλή συγκέντρωση φαρμάκου και να παρέχουν υψηλά επίπεδα κυτταροστατικά δραστηριότητες εντός του όγκου [15]. Έχει αναφερθεί ότι η περιφερειακή ενδοαρτηριακή χημειοθεραπεία έχει βελτιώσει το ποσοστό ανταπόκρισης και την ποιότητα ζωής των ασθενών με ηπατικές μεταστάσεις από καρκίνους του παχέος [16]. Αυτό έδειξε ότι η επεμβατική θεραπεία είναι ένας αποτελεσματικός τρόπος για σταθερή η εξέλιξη των μεταστάσεων ήπατος.

Ως ένας κοινώς χρησιμοποιούμενων παραγόντων για επεμβατικής θεραπείας, η δοξορουβικίνη έχει σοβαρές συστηματικές παρενέργειες όπως καρδιοτοξικότητα και η καταστολή του μυελού των οστών, τα οποία περιορίζουν κλινική χρήση του. Αυτή η ανεπάρκεια μπορεί να ξεπεραστεί με μεθόδους αυξάνοντας τη συσσώρευση του φαρμάκου εντός του όγκου ή τη χρήση αποτελεσματικών φορέα φαρμάκου που μπορούν να παραδώσουν και να απελευθερώσει το φορτίο του στη θέση στόχο. Τα λιποσώματα, το σύστημα παροχής φαρμάκου πιο ευρέως διερευνηθεί, έχουν υψηλή συσσώρευση στο ήπαρ, ενώ χαμηλή ανοσογονικότητα, βιοσυμβατότητα και την προστασία του φαρμάκου [17]. Επιπλέον, τα λιποσώματα συζευγμένα με ειδικούς συνδετήρες θα μπορούσαν να τροποποιήσουν το φαρμακοκινητικά χαρακτηριστικά και προφίλ κατανομής ιστού των φαρμάκων. Αυτό μπορεί να οδηγήσει σε ενίσχυση της αποτελεσματικότητας, καθώς και μειωμένη τοξικές παρενέργειες των αντικαρκινικών φαρμάκων. Βρίσκεται στο θηλαστικό ηπατοκυτταρικών μεμβρανών, υποδοχέα ασιαλογλυκοπρωτεΐνης (ASGPr) μπορεί να προκαλεί την ειδική δέσμευση λιποσωμάτων γαλακτοζίτη περιέχουν σε ηπατοκύτταρα [18], [19]. Μια τέτοια λιποσωμάτων τροποποιηθεί με

β

-D-γαλακτόζη μπορεί να παρέχει σημαντικά θεραπευτικά οφέλη για τους όγκους στο ήπαρ που οφείλεται στην ενεργό στόχευση. Επιπλέον, λιποσωμικές φορείς μπορούν να εμφανίζουν μια υψηλότερη ειδικότητα προς κακοήθεις ιστούς όγκων, επειδή μπορεί θεωρητικά να διαρρεύσει από τα αιμοφόρα αγγεία στον όγκο που περιβάλλει. Αυτό το φαινόμενο έχει γίνει γνωστό ως το Enhanced περατότητα Διατήρηση (EPR) φαινόμενο, γνωστό και ως παθητική στόχευση [20]. Ως εκ τούτου, είναι λογικό να υποθέσουμε ότι η απασχόληση του Dox-φορτωμένα γαλακτοσυλιωμένες λιποσωμάτων (ενεργητικής και παθητικής στόχευσης σε ενδοηπατική όγκους) στην επεμβατική χημειοθεραπεία (τοπική χορήγηση για την ενίσχυση της συγκέντρωσης φαρμάκου) μπορεί να βελτιώσει θεραπευτική έκβαση για ασθενείς με ηπατική μετάσταση και, την ίδια στιγμή, να μειώσει τη συστηματική παρενέργειες του φαρμάκου.

Σε αυτή τη μελέτη, προτείναμε μια νέα θεραπευτική στρατηγική που συνδυάζονται φάρμακα όργανο που στοχεύουν (γαλακτοσυλιωμένες λιποσωμική Dox) με την περιφερειακή διοίκηση. Ο σκοπός ήταν όχι να στοχεύουν ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC), αλλά το ήπαρ, το οποίο θα μπορούσε να οδηγήσει σε ένα ευρύ φάσμα της θεραπείας για μετάσταση διαφορετικής προέλευσης ιστού στο ήπαρ. Δεδομένου ότι υπάρχουν άφθονα υποδοχέα ασιαλογλυκοπρωτεΐνης ηπατοκυττάρων που εκφράζεται σε, γαλακτοζυλιωμένο λιποσωμάτων επελέγη ως μεσολαβητής για τη στόχευση του ήπατος. Παρόλο που η αντικαρκινική δράση του γαλακτοζυλιωμένο φορτωμένα με φάρμακο λιποσώματα για καρκίνο του ήπατος έχει αποδειχθεί σε επαρκή προκλινικά μοντέλα δεν έχουν πραγματοποιηθεί μελέτες της εφαρμογής της σε μεταστατικούς όγκους του ήπατος έχουν αναφερθεί. Καθώς το αίμα και από τα δύο έντερα και σπλήνα διεξάγεται κανονικά στο ήπαρ μέσω της πυλαίας φλέβας, επελέγη η ένεση σπλήνα να μιμηθεί πύλη αιμάτωσης φλέβα να αξιολογήσουν τα πλεονεκτήματα της γαλακτοζυλιωμένο λιποσωμικής Dox στη θεραπεία του ηπατικού μεταστατικού καρκινώματος. Πριν από την εφαρμογή των στοχευμένων λιποσωμάτων στην περιφερειακή χορήγηση, η συγκέντρωση στο πλάσμα και η βιοκατανομή του doxorubicin από φορτωμένα με φάρμακο συμβατικό liposmes προσδιορίστηκαν για να αξιολογηθεί η ανωτερότητα των τοπικών πάνω συστηματική χορήγηση για την αύξηση της συγκέντρωσης του φαρμάκου στο όργανο-στόχο. Στη συνέχεια, η αντικαρκινική δράση της νέα θεραπευτική στρατηγική για τον καρκίνο του παχέος εντέρου με μετάσταση στο ήπαρ ερευνήθηκε χρησιμοποιώντας ένα ζωικό μοντέλο ηπατικής μετάστασης από καρκίνο του παχέος εντέρου. Απ ‘όσο γνωρίζουμε, αυτό θα ήταν, μέχρι σήμερα, η πρώτη μελέτη για τέτοια θεραπευτική στρατηγική. Τα αποτελέσματά μας μπορεί να παρέχει μια εναλλακτική λύση για τους ασθενείς με ανεγχείρητο ηπατική μετάσταση από πρωτογενείς όγκους.

Αποτελέσματα

Η φαρμακοκινητική Μελέτες για Dox-φορτωμένο συμβατικά λιποσώματα

Για να αξιολογηθεί η επίδραση των διαφόρων οδοί χορήγησης από την συγκέντρωση και την βιοκατανομή των φαρμάκων από λιποσωματικής φορείς, εκτελέστηκαν οι μελέτες φαρμακοκινητικής για Dox-φορτωμένο συμβατικά. Λιποσωματική ντοξορουμπικίνη σε μία δόση εφόδου των 6 mg /kg εισήχθη σε ποντίκια Balb /c-nu μέσω είτε έγχυση του σπλήνα ή ί.ν. ένεση. Όπως φαίνεται στο σχήμα 1, η μέγιστη συγκέντρωση στο πλάσμα του Dox από ομάδα ένεση σπλήνα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη από την ε.φ. ομάδα ένεση (ρ & lt? 0,01). Δώδεκα ώρες μετά την ένεση, η συγκέντρωση στο πλάσμα του φαρμάκου από τις δύο ομάδες έγινε παρόμοια. Επιπλέον, η συγκέντρωση του φαρμάκου ήταν ουσιαστικά βελτιωμένη σε ήπαρ εντός 10 ώρες μετά την τοπική χορήγηση σε σύγκριση με ί.ν. ένεση (ρ & lt? 0,01), ενώ ήταν χαμηλότερη στην καρδιά και τους νεφρούς. Αυτό το μοναδικό προφίλ pharmacolinetics μπορεί να οδηγήσει σε παρατεταμένη κλινικά οφέλη με αποτέλεσμα μία βελτιωμένη θεραπευτική δράση για ενδοηπατική όγκους και μειωμένη παρενέργεια σε άλλα όργανα. Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η δοκιμαστική ιδέα των λιποσωμικών φορέων σε συνδυασμό με την τοπική χορήγηση για τη θεραπεία όγκων του ήπατος μεταστατικού ήταν εφικτή. Με βάση αυτό το αποτέλεσμα, μπορούμε περαιτέρω σχεδίασε το νέο σχήμα θεραπείας σε αυτή την μελέτη η οποία σε συνδυασμό στοχευμένων λιποσωμάτων με ένεση σπλήνα να ερευνήσει εάν θα μπορούσε να προκύψει καλύτερη αντικαρκινική δράση. Για να επιτευχθεί αυτό, γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα παρασκευάστηκαν με την ενσωμάτωση γαλακτοζυλιωμένο DPPE με τα συμβατικά λιποσώματα.

λιποσωμιακή δοξορουβικίνη σε δόση εφόδου των 6 mg /kg εισήχθη σε ποντίκια Balb /c-nu μέσω είτε έγχυση του σπλήνα ή ί.ν. ένεση. Μετά τη χορήγηση του φαρμάκου, το αίμα, το ήπαρ, την καρδιά και τα νεφρά συλλέχθηκαν από ποντικούς που υπέστησαν αγωγή. Οι συγκεντρώσεις Doxorubicin συναρτήσει του χρόνου στο πλάσμα (Α), το ήπαρ (Β), καρδιάς (C) και νεφρού (D) καθορίστηκαν με HPLC.

Η

Ο χαρακτηρισμός του γαλακτοζυλιωμένο DPPE (Gal-ϋΡΡΕ)

Για την προετοιμασία γαλακτοσυλιωμένη λιποσώματα, ένα από τα έκδοχα, γαλακτοσυλιωμένες DPPE, Παρήχθη για πρώτη φορά. Το σχέδιο για τη σύνθεση της Gal-DPPE παρουσιάστηκε στην υποστήριξη των πληροφοριών (Εικόνα S1). Το ενδιάμεσο προϊόν 5 (υποδεικνύεται στο Σχήμα S1) έχει ταυτοποιηθεί από το

1Η NMR (400 ΜΗζ,

3): δ 4.97 (br s, 1Η, Η-1), 4.7 – 4.3 (m, 2Η), 3,95-3,93 (m, 1Η), 3,81 (m, 1Η), 3,72-3,64 (m, 3Η), 3,57 (m, 1Η), αυτά τα 8Hs περιελάμβανε την -CH- και -CH

2- σε γαλακτόζη (εκτός του Η-1) και -OCH

2-, 2,79 (s, 4Η, -COCH

2CH

2CO-), 2,39 – 2,38 (t, 2Η, -CH

2COO -), 1,61 – 1,58 (m, 4Η, -OCH

2C

Η

2 και -C

Η

2CH

2COO-), 1.32 (m, 8Η, 4 × -CH

2-) ppm.

Το τελικό προϊόν Gal-ϋΡΡΕ έχει χαρακτηριστεί ως ακολούθως.

1Η NMR (400 MHz, CD

3OD): δ 5,36 – 5,32 (m, 1 Η, -CHOCOR), 5.30 – 5.18 (br s, 1 Η, Η-1), 4,04 – 3,34 (m , 16 η, -CH

2OCOR, 2 × -CH

2OP-, -OCH

2, -CH

2Ν- και το -CH- και το -CH

2 σε γαλακτόζη εκτός του Η-1), 2,35 – 2,11 (m, 6 Η, 2 χ -CH

2COO-, -CH

2CON-), 1,74 – 1,50 (m, 8 Η, -C

H

2CH

2CON-, 2 × -C

Η

2CH

2COO-, -C

Η

2CH

2Ο-), 1,44 – 1,24 (m, 56 Η, -CH

2-), 0,93-0,86 (t, 6 Η, 2 χ -CH

3) ppm. Το αποτέλεσμα αυτό ήταν ουσιαστικά συνεπής με ότι σε μια προηγούμενη έκθεση [21]. ESI-MS: m /z υπολογίστηκε για C

52H

100NNaO

15P (Μ + Η)

1032,7, βρέθηκε 1032,0

λιποσώματα Χαρακτηρισμός

. τυπικά, όλα εξωθημένο εναιωρήματα λιποσώματος εμφάνισε το μέγεθος των σωματιδίων κυμαίνεται από 100 ως 140 nm, και η PDI των λιποσωμάτων έπεσαν μέσα στην κλίμακα από 0,1 έως 0,2 (Πίνακας 1). Η κατανομή του μεγέθους των λιποσωμάτων κάθε παρουσιάστηκε στην υποστήριξη των πληροφοριών (Εικόνα S2). Η διάμετρος του γαλακτοσυλιωμένων λιποσωμάτων (Gal-λιπο, 130,5 nm) ήταν ελαφρώς μεγαλύτερη από εκείνη των συμβατικών λιποσωμάτων (CL, 106.2 nm) λόγω της ενσωμάτωσης του Gal-DPPE. Τόσο Dox-φορτωμένο CL (114,9 nm) και Gal-Lipo (134,8 nm) παρουσίασε ένα ελαφρώς υψηλότερες τιμές διαμέτρου z-μέσο όρο από εκείνες των κενών λιποσωμάτων που προκύπτουν από τα έγκλειστα μόρια δοξορουβικίνη. Παρ ‘όλα αυτά, τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τα λιποσώματα που παρασκευάζονται σε αυτή τη μελέτη θα μπορούσε να παραδώσει το φάρμακο στο συκώτι από το μέγεθος των ενδοθηλιακών θυρίδων σε κολποειδή του ήπατος ποντικού είναι πάνω από 140 nm [22].

Η

Liposome πρόσληψη Ανάλυση

Η επίδραση της συγκέντρωσης λιποσωμάτων επί της προσλήψεως από ASGPr

+ κύτταρα HepG2 και ASGPr

– τα HCT-8 κύτταρα που φαίνεται στο Σχ. 2. Η μέση ένταση φθορισμού των κυττάρων μετά από 2 ώρες επώαση με λιποσώματα προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας Image-Pro Plus απεικόνισης λογισμικό (Media Cybernetics) για ποσοτική αξιολόγηση. Οι διαφορές του φθορισμού μεταξύ των δύο κυτταρικών σειρών επωάζονται με τους αντίστοιχους λιποσώματα δεν μπορούν να διαχωριστούν αν η συγκέντρωση των λιπιδίων ήταν κάτω από τα 100 μΜ (Σχήμα 2Β φαίνεται), αν και τα κύτταρα HepG2 που έλαβαν θεραπεία με Gal-λιπο παρουσιάζονται ελαφρώς υψηλότερη ένταση φθορισμού από τους άλλους. Αυτό μπορεί να αποδοθεί στο υψηλό επίπεδο μη ειδικής κυτταρικής πρόσληψης όταν λιπιδίων συγκέντρωση ήταν χαμηλή. Η ειδική δέσμευση εκ τούτου, δεν ήταν αρκετή για να εμφανίσετε τις σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων. Με την αύξηση της συγκέντρωσης του Gal-λιπο (100 μΜ), τα κύτταρα HepG2 θα μπορούσαν να βάφονται σαφώς κάτω από την μικροσκοπία φθορισμού σε Ex /Em 488 nm /505 nm, που δείχνει σημαντικά υψηλότερη πρόσληψη των κυττάρων σε σύγκριση με την ένταση φθορισμού παρουσιάζεται από HCT-8 κύτταρα κατεργασμένα με είτε Gal-λιπο ή CL ή κύτταρα HepG2 σε επεξεργασία με CL στην ίδια λιπιδική συγκέντρωση (ρ & lt? 0.001). Αυτό έδειξε ότι ειδικής πρόσληψης του Gal-λιπο με ASGPr

+ κυττάρων HepG2 ήταν αυξημένη με την αυξανόμενη συγκέντρωση λιπιδίων σε ένα επίπεδο σημαντική διαφορά. Η κυτταρική πρόσληψη των HepG2 και HCT-8 κύτταρα επωάζονται με 100 μΜ διαφόρων λιποσωμάτων για 4 ώρες παρατηρήθηκε επίσης, και δεν βρέθηκαν διαφορές μεταξύ των ομάδων (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα). Αυτό πρότεινε ότι η μη ειδική πρόσληψη θα πρέπει να βελτιωθεί σημαντικά όταν ο χρόνος επώασης ήταν αρκετά μεγάλο χρονικό διάστημα, με αποτέλεσμα την μειωμένη διαφορά του φθορισμού που παράγεται από ειδική πρόσληψη. Η συγκέντρωση των 100 μΜ λιπιδίου θα μπορούσε να εξασφαλίσει επαρκή σήματα φθορισμού να αντικατοπτρίζει την επίδραση της πρόσληψης λιποσωμάτων με μεσολάβηση υποδοχέα κατά την διάρκεια 2 ωρών. Έτσι, 100 μΜ της λιπιδικής συγκέντρωσης επελέγη για τα ακόλουθα πειράματα.

Το HCT-8 κύτταρα (ASGPR-) και κύτταρα HepG2 (ASGPr +) επωάστηκαν είτε με συμβατικά λιποσώματα (CL) ή γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα (Gal- λιπο) για 2 ώρες σε διαφορετικές συγκεντρώσεις λιπιδίου κυμαινόμενες από 10 μΜ έως 100 μΜ. Κυτταρική πρόσληψη των λιποσωμάτων οπτικοποιήθηκε υπό μικροσκοπία φθορισμού λόγω της ενσωμάτωσης του 25-NBD-χοληστερόλης σε λιποσώματα. Η μέση ένταση φθορισμού παρουσιάζεται από τα κύτταρα προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας Image-Pro Plus λογισμικό απεικόνισης (Media Cybernetics). Α) φθορισμού απεικόνιση της κυτταρικής πρόσληψης των λιποσωμάτων. Β) Ποσοτική ανάλυση της μέση ένταση φθορισμού. «*» Υποδηλώνει σημαντική διαφορά (p & lt? 0.001). CL: συμβατικά λιποσώματα? Gal: γαλακτοσυλιωμένες λιποσώματα

Η

Για την αξιολόγηση της ειδικής πρόσληψης κυττάρων, HCT-8 και HepG2 κύτταρα επωάστηκαν με CL /gal-Lipo για διαφορετικές διάρκεια του χρόνου, αντίστοιχα.. Βασικά, η επώαση του NBD-χοληστερόλης που ενσωματώνονται λιποσωμάτων με τα κύτταρα στους 37 ° C οδήγησε σε εξαρτώμενη από το χρόνο πρόσληψης (Σχ. 3). HepG2 κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με Gal-Lipo παρουσίασε μια μικρή πρόσληψη μέσα σε 15 λεπτά επώασης, ενώ δεν πράσινου φθορισμού παρατηρήθηκε όταν τα κύτταρα HepG2 επωάστηκαν με CL. Τέτοια φθορισμός έγινε τοποθέτηση σε 30 λεπτά και 1 ώρα επώασης. Η μέση ένταση φθορισμού των κυττάρων HepG2 επωάστηκαν με Gal-Lipo για 1 ώρα ήταν σημαντικά ισχυρότερη από ό, τι εκείνες των άλλων ομάδων θεραπεία (p & lt? 0.001), υποδεικνύοντας υψηλότερη πρόσληψη των κυττάρων. Αντιθέτως, τα κύτταρα HCT-8 επωάστηκαν είτε με CL ή Gal-λιπο δύσκολα επάγει την οποιαδήποτε κυτταρική πρόσληψη ανά πάσα χρονική περίοδο επώασης. Σε 2 ώρες επώαση σημείο, καμία σημαντικά αυξημένη ένταση φθορισμού παρατηρήθηκε στα κύτταρα που υπέστησαν κατεργασία Gal-Lipo σύγκριση με εκείνη της 1 ώρας επώασης (δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Ως εκ τούτου, 1 ώρα επώασης θεωρήθηκε επαρκές για να αντικατοπτρίζεται ειδική πρόσληψη κυττάρων. Αυτό το αποτέλεσμα έδειξε ότι καλά γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα θα μπορούσαν ταχέως συνδέεται προς ASGPr

+ κύτταρα μέσω του υποδοχέα αλλά όχι το ASGPr

-. Κύτταρα, το οποίο είναι ένα πιο αποτελεσματικό τρόπο για την πρόσληψη γαλακτόζη στόχευση λιποσωμάτων από πινοκύτωσης

Ο κύτταρα (ASGPR-) και κύτταρα HepG2 (ASGPr +) 8 ΗΟΤ-επωάστηκαν είτε με συμβατικά λιποσώματα (CL) ή γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα (Gal-λιπο) στους 37 ° C για διαφορετικές διάρκεια του χρόνου. Κυτταρική πρόσληψη των λιποσωμάτων επισημασμένου με 25-NBD-χοληστερόλης γίνεται ορατή κάτω από μικροσκοπία φθορισμού. Η μέση ένταση φθορισμού που εκπροσωπούν durg πρόσληψη προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας Image-Pro Plus λογισμικό απεικόνισης. Α) φθορισμού απεικόνιση της κυτταρικής πρόσληψης των λιποσωμάτων. Β) Ποσοτική ανάλυση της μέση ένταση φθορισμού για τη θεραπεία της 1 ώρας επώασης. «*» Υποδηλώνει σημαντική διαφορά (p & lt? 0.001). CL: συμβατικά λιποσώματα? Gal:. Γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα

Η

Η μη ειδική εσωτερικοποίηση των λιποσωμάτων από τα κύτταρα μέσω ενδοκυττάρωσης μπορεί να μειωθεί λόγω της ασθενούς ρευστότητα της μεμβράνης, η οποία θα μπορούσε να προκληθεί από τις αλλαγές της ακαμψίας του λιπιδική διπλοστοιβάδα, του λειτουργικότητα και /ή το επίπεδο της κυτταρικής ενέργειας υπό χαμηλή θερμοκρασία [23]. Ωστόσο, με μεσολάβηση υποδοχέα δέσμευσης μεταξύ κυττάρων στόχων και συνδετήρα-συζευγμένα λιποσώματα μπορεί να συμβεί τόσο σε 4 ° C και 37 ° C [24]. Αυτό πρότεινε ότι μεσολάβηση υποδοχέα ενδοκύτωση θα ήταν η κύρια οδός για την κυτταρική πρόσληψη των λιποσωμάτων υπό συνθήκες χαμηλής θερμοκρασίας. Ως εκ τούτου, η στόχευση των γαλακτοσυλιωμένη λιποσωμάτων ερευνήθηκε περαιτέρω για ASGPr

+/- κύτταρα σε διαφορετική θερμοκρασία επώασης. Όπως απεικονίζεται στο Σχ. 4, και τα δύο CL και Gal-Lipo απέτυχε να μεταφέρει φθορισμού για HCT-8 κύτταρα μετά από 1 ώρα επώαση στους 4 ° C κάτω από μικροσκοπία φθορισμού. Τα κύτταρα HepG2, ωστόσο, έδειξαν σχετικά αδύναμη αλλά ορατό πράσινου φθορισμού μετά την επώαση με Gal-Lipo για 1 ώρα στους 4 ° C. Επιπλέον, η μέση ένταση φθορισμού από επεξεργασμένα HepG2 κύτταρα Gal-Lipo ήταν σημαντικά ισχυρότερη από ότι από τα κύτταρα CL αγωγή ή Gal-lipo κατεργασμένων κυττάρων HepG2 (p & lt? 0.001). Αυτό έδειξε ότι Gal-Lipo μπορούσαν να στοχεύουν κύτταρα HepG2 και διαμεσολαβούμενη από υποδοχέα ενδοκύτωση συνέβαλε στην προφανώς αυξημένη κυτταρική πρόσληψη των στοχευμένων λιποσωμάτων. Μετά την αύξηση της θερμοκρασίας στους 37 ° C, μπορεί να παρατηρηθεί αδύναμη fluorencence όλων των κυττάρων ομάδα ελέγχου. Περαιτέρω, τα κύτταρα HepG2 επωάστηκαν με Gal-λιπο αντιπροσωπεύουν ισχυρότερη ένταση φθορισμού από ότι στους 4 ° C. Αυτά τα δεδομένα πρότειναν η μη ειδική κυτταρική πρόσληψη των λιποσωμάτων θα συνέβαινε στη θερμοκρασία του σώματος.

Τα HCT-8 κύτταρα και κύτταρα HepG2 επωάστηκαν είτε με συμβατικά λιποσώματα (CL) ή γαλακτοζυλιωμένο λιποσώματα (Gal-λιπο) στους 4 ° C για 1 ώρα, και στη συνέχεια θερμάνθηκε στους 37 ° C με συνεχιζόμενη επώαση για επιπλέον 1 ώρα. Κυτταρική πρόσληψη των λιποσωμάτων επισημασμένου με 25-NBD-χοληστερόλης γίνεται ορατή κάτω από μικροσκοπία φθορισμού. Η μέση ένταση φθορισμού προσδιορίστηκε ποσοτικά χρησιμοποιώντας Image-Pro Plus λογισμικό απεικόνισης. Α) φθορισμού απεικόνιση της κυτταρικής πρόσληψης των λιποσωμάτων. Β) Ποσοτική ανάλυση της μέση ένταση φθορισμού. «*» Υποδηλώνει σημαντική διαφορά (p & lt? 0.001). CL: συμβατικά λιποσώματα? Gal:. Γαλακτοσυλιωμένες λιποσώματα

Η

Διανομή Προφίλ του CL και Gal-Lipo

Για να διερευνηθεί η δυνατότητα στόχευσης του Gal-Lipo, οι δύο λιποσώματα σημάνθηκαν με μία λιπόφιλη φθορίζουσα βαφή DIR και εισήγαγε σε ποντικούς με iv και σπλήνα ένεση, αντίστοιχα. Η

in vivo

βιοκατανομή και σε πραγματικό χρόνο διακίνησης των CL και Gal-Lipo απεικονίστηκαν χρησιμοποιώντας ζουν τεχνολογία απεικόνισης φθορισμού. Όπως θα κόστιζε αρκετά λεπτά για να ολοκληρωθεί η έγχυση σπλήνα, μόνο ένας ποντικός που περιλαμβάνονται σε κάθε ομάδα. Ωστόσο, αυτό το πείραμα διεξήχθη τρεις φορές, και ένας εκπρόσωπος αποτέλεσμα φαίνεται στο Σχ. 5. Διαπιστώθηκε ότι τα λιποσώματα κυρίως κατατεθεί στο ήπαρ και τον σπλήνα, ανεξάρτητα από λιποσωμικής σύνθεσης και η οδός χορήγησης (Εικ. 5Α). Η ενδο-ηπατική ένταση φθορισμού αυξήθηκε σταδιακά σε όλους τους ποντικούς που υπέστησαν αγωγή και η κορυφή επιτεύχθηκε σε 2 ώρες μετά τη χορήγηση λιποσωματικής που ακολουθείται από μια πτώση σε ένα χρονοεξαρτώμενο τρόπο (Εικ. 5Β). Το κόκκινο φθορισμό στο ήπαρ από γαλακτοσυλιωμένες λιποσώματα δεν παρουσιάζουν την κυριαρχία στο πρώτο χρονικό σημείο παρατήρησης (30 λεπτά μετά την ένεση). Αντιστρόφως, ήταν χαμηλότερη από εκείνη από συμβατικά λιποσώματα μέσω δύο ουραία φλέβα και ενέσεις σπλήνας. Ωστόσο, η ενδο-ηπατική ένταση φθορισμού της Gal-λιπο γρήγορα αυξήθηκε σε 1 ώρα και υπερέβη εκείνη του CL και για τις δύο οδούς χορήγησης, υποδεικνύοντας ότι πιο γαλακτοσυλιωμένη λιποσώματα συσσωρεύτηκαν στο ήπαρ από το CL. Επιπλέον, οι εντάσεις φθορισμού και από τις δύο λιποσώματα μέσω ένεσης σπλήνα διατηρήθηκαν σε υψηλότερα επίπεδα από αυτά που μέσω ένεσης φλέβας της ουράς, υποδεικνύοντας ότι η ενδο-ηπατική εναπόθεση λιποσώματος θα μπορούσε να βελτιωθεί με την μέθοδο ένεση σπλήνα. Επιπλέον, η ισχυρότερη φθορισμός παρατηρήθηκε στο ποντίκι ενίεται με Gal-λιπο μέσω σπλήνα σε 2 ώρες μετά την ένεση, υποδηλώνοντας ότι και οι δύο όργανο στόχευσης του φορέα και την οδό περιφερειακή διοίκηση θα μπορούσε να ενισχύσει τη συσσώρευση του συστήματος χορήγησης φαρμάκου (λιπόσωμα) στο ήπαρ, η οποία θα μπορούσε να βελτιώσει ουσιαστικά την συγκέντρωση του φαρμάκου στο όργανο-στόχο.

Τα συμβατικά λιποσώματα (CL) και γαλακτοσυλιωμένες λιποσώματα (Gal-λιπο) επισημάνθηκαν από σκην. Κάθε λιπόσωμα περιέχει ένα σύνολο 200 μα λιπιδίου ininjected σε /c-nu ποντικούς Balb μέσω είτε ουρά ενδοφλέβια ή σπλήνα χορήγηση. Η

in vivo

βιοκατανομή παρακολουθήθηκε από ένα ζωντανό σύστημα απεικόνισης των ζώων με Ex /Em 745 nm /820 nm σε διάφορα χρονικά σημείο μετά την ένεση. Η ακτινοβολία φωτονίων στην επιφάνεια του ήπατος ενός ζώου εκφράστηκε ως φωτόνια ανά δευτερόλεπτο ανά τετραγωνικό εκατοστό ανά στερακτίνιο (p /sec /cm

2 /sr). Οι εικόνες είναι ένωση εικόνες που δημιουργούνται από Ζώντας λογισμικό Image. Α) In vivo διαμήκη παρακολούθηση και των δύο λιποσωμάτων. Β) Η ανάλυση της απεικόνισης φθορισμού χρησιμοποιώντας Ζώντας λογισμικό Image.

Η

In Vivo

Μελέτες

Ο στόχος αυτής της μελέτης είναι να αναπτυχθεί μια νέα θεραπευτική αγωγή για την θεραπεία παρέμβαση του μεταστατικού καρκίνου του ήπατος. Η στρατηγική είναι να στοχεύσει όργανο-το ήπαρ, αλλά όχι τα καρκινικά κύτταρα. Ως εκ τούτου, ένα τεχνητό μοντέλο μεταστατικού ήπατος καρκίνου του παχέος εντέρου καθορίστηκε χρησιμοποιώντας ανθρώπινου κόλον καρκινικές κυτταρικές HCT-8. Δεδομένου ότι HCT-8 κύτταρα έχουν υψηλό μέγεθος της κακοήθειας, το εμβολιασμένο όγκος στο ήπαρ θα μπορούσε περαιτέρω μεταστάσεις σε μεσεντερικός λεμφαδένας. Η εξέλιξη της όγκου αξιολογήθηκε από δύο σημεία: 1) ως ο όγκος στο ήπαρ παρουσιάζονται ακανόνιστο σχήμα, είναι δύσκολο να μετρηθεί με ακρίβεια το μέγεθος του όγκου. Το βάρος του όγκου στο ήπαρ ήταν παρόν χρησιμοποιείται για να αξιολογηθεί η ηπατική εξέλιξης του όγκου? 2) το βάρος του καρκινώματος σε μεσεντερικών λεμφαδένων. Μεσεντερικά λεμφικά μετάσταση στους λεμφαδένες θα μπορούσε να βρεθεί σε 2 εβδομάδες μετά ενδοηπατικού τον ενοφθαλμισμό των κυττάρων. Στη συνέχεια, η μετάσταση εξαπλωθεί γρήγορα μέσα σε 3-4 ημέρες και να οδηγήσει στο θάνατο των ζώων, εφόσον δεν θεραπεία προχώρησε. Ως εκ τούτου, όλοι οι ποντικοί σε αυτό το πείραμα έλαβε θεραπεία χρησιμοποιώντας φορτωμένα με φάρμακο λιποσώματα /ελεύθερο Dox την ημέρα 8 μετά τον εμβολιασμό των κυττάρων και θανατώθηκαν την ημέρα 10 μετά χορηγήσεις του φαρμάκου. Η δόση του φαρμάκου της 6 mg επελέγη /kg για

in vivo

θεραπεία.

Αν και η μέθοδος για την πύλη ένεση φλέβα στο ποντίκι έχει αναφερθεί [25], παραμένει να είναι μια περίπλοκη χειρουργική και δύσκολο να πραγματοποιηθεί αποτελεσματικά σε ένα μεγάλο αριθμό ζώων. Ο σπλήνας είναι ένα πρωτεύον λεμφοειδές όργανο το οποίο είναι γνωστό για τη ροή μέσα στο ήπαρ μέσω της σπληνικής και πύλη φλέβες [26]. Ως εκ τούτου, επιλέχθηκε ένεση σπλήνα να μιμούνται πύλη διάχυσης φλέβα. Αυτή η μέθοδος είχε αποδειχθεί ότι είναι αποτελεσματική για την παράδοση λιποσωμάτων εντός του ήπατος σε προηγούμενες μελέτες μας [27].

Όπως αποκάλυψε η μελέτη φαρμακοδυναμική (Εικ. 6), κατεργασία της ελεύθερης Dox δεν είχε θεραπευτικές επιδράσεις στην ηπατική όγκου σε σύγκριση με τον έλεγχο των PBS, ανεξάρτητα από την οδό χορήγησης του φαρμάκου. Η μέση ηπατική βάρος του όγκου της ελεύθερης Dox αντιμετωπίζονται ομάδες μέσω ενδοφλέβιας (0,27 ± 0,14) και την έγχυση του σπλήνα (0,29 ± 0,1) ήταν συγκρίσιμη με εκείνη της ομάδας PBS (0,24 ± 0,06). Παρομοίως, CL-Dox οδήγησε στο περιθωριακό αναστολή στα ηπατικά εξέλιξης του όγκου. Η χορήγηση του φαρμάκου τόσο από ί.ν. (0,23 ± 0,08) και την έγχυση του σπλήνα (0,27 ± 0,12) απέτυχε να μειώσει αποτελεσματικά το βάρος του όγκου στο ήπαρ σε σύγκριση με την ομάδα PBS. Ωστόσο, φορτωμένα με φάρμακο Gal-Lipo μέσω χορήγησης σπλήνα, όπως αναμενόταν, έδειξαν σημαντική επίδραση όσον αφορά την καταστολή της προόδου των όγκων στο ήπαρ (0,15 ± 0,06, ρ

Gal /σπλήνα vs PBS = 0,015), αν και όπως λιποσωμικό σκεύασμα μέσω iv έπαιξε λίγο ρόλο στην αναστολή της ηπατικής προόδου των όγκων (0,22 ± 0,16). Επιπλέον, σημειώνεται αναστολή όγκου μπορούσε να παρατηρηθεί στην ομάδα που υποβλήθηκε σε επεξεργασία με φορτωμένα με φάρμακο Gal-Lipo μέσω σπλήνα έναντι εκείνης με δωρεάν Dox (p

Gal vs Dox /σπλήνα = 0,0011) ή CL-Dox (p

Gal vs CL /σπλήνα = 0,043). Αυτό πρότεινε ότι η αντίδραση κατά του όγκου ενισχύθηκε με στοχευόμενα λιποσώματα και τοπική χορήγηση.

Τρία σκευάσματα (Dox μόνο, CL-Dox και Gal-Dox) εισήχθησαν σε ποντικούς που φέρουν όγκο σε εμβολιασμό ημέρα 7 μετά κυττάρου μέσω δύο οδούς χορήγησης, η ουρά ένεση φλέβα και την έγχυση του σπλήνα. Η δόση του φαρμάκου χορηγείται ήταν 6 mg /kg. Α) Η πρόοδος του όγκου στο ήπαρ αξιολογήθηκε με τη μέση τιμή του ηπατικού βάρους του όγκου. Β) μετάσταση μεσεντερικών λεμφαδένων αξιολογήθηκε από το μέσο βάρος του μεταστατικού καρκινώματος από μεσεντερίων λεμφαδένων. Τα αποτελέσματα αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή ± SE. «*» Υποδεικνύει σημαντική διαφορά (ρ & lt? 0,05).

Η

Ένα από κλινικές ενδείξεις σε αυτό το μοντέλο όγκου είναι η μετάσταση των μεσεντέριων λεμφαδένων, και ως εκ τούτου είναι ένας σημαντικός δείκτης για την εκτίμηση της προόδου του όγκου. Το μέσο βάρος των μετάστασης καρκινώματος να μεσεντερικός λεμφαδένας από ομάδες που υπέστησαν αγωγή με ελεύθερη Dox μέσω ί.ν. (0,86 ± 0,57 g) ή ένεση σπλήνα (0.77 ± 0.56 g) δεν έδειξε σημαντική διαφορά σε σύγκριση με την ομάδα PBS (1,34 ± 0,54 g). Ενθυλάκωση των Dox στο CL έδειξε μια ακόμα πιο σοβαρή μετάσταση από εκείνους που αντιμετωπίζονται από Dox. Αυτό μπορεί να αποδοθεί σε καθυστέρηση της απελευθέρωσης του φαρμάκου από τα λιποσώματα με αποτέλεσμα τη μειωμένη συγκέντρωση ελεύθερου φαρμάκου στο σημείο στόχο. Παρ ‘όλα αυτά, το μέσο βάρος του μεταστατικού καρκινώματος από ζώα ενέθηκαν με CL-Dox μέσω σπλήνα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη μέσω ί.ν. (P

CL /σπλήνα vs ενδοφλεβίως = 0,0059). Αυτό έδειξε ότι η οδός της ένεσης σπλήνα μπορούσε να βελτιώσει την αντικαρκινική δράση. Είναι ενθαρρυντικό, φορτωμένα με φάρμακο Gal-Lipo τόσο μέσω ενδοφλέβιας (0,41 ± 0,27, ρ

Gal /ίν vs PBS = 0.0005) και η χορήγηση σπλήνα (0.3 ± 0.5, ρ

Gal /σπλήνα vs PBS = 0,0028) έδειξε μία σημαντικά ισχυρότερη επίδραση όσον αφορά την καταστολή της προόδου του όγκου σε μεσεντερικά λεμφαδένα σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου. Επιπλέον, βρέθηκαν σημαντικές διαφορές ανάμεσα στα ζώα που έλαβαν θεραπεία με Gal-Dox και CL-Dox είτε μέσω ένεσης σπλήνα (p

Gal vs CL /σπλήνα & lt? 0.001) ή ενδοφλεβίως (Ρ

Gal vs CL /ενδοφλεβίως. = 0,007) στην αναστολή της μετάστασης του μεσεντερίου λεμφαδένα. Αυτά τα αποτελέσματα κατέδειξαν ότι η θεραπευτική επίδραση στην μετάσταση από το ήπαρ θα μπορούσε να βελτιωθεί σημαντικά με γαλακτοζυλιωμένο λιποσωμάτων μέσω χορήγησης σπλήνα μιμούνται πύλη έκχυσης φλέβα.

Ένας από τους πιο σημαντικούς λόγους που περιορίζουν την κλινική εφαρμογή της δοξορουβικίνη συστημικών παρενεργειών της. Αυτή η συστηματική τοξικότητα θα μπορούσε να μειωθεί με την περιφερειακή τη χορήγηση του φαρμάκου. Δεδομένου ότι η θεραπευτική στρατηγική είναι να στοχεύσετε το όργανο-ήπαρ, αλλοιώσεις στο ήπαρ πιθανώς προκαλούνται από τη βελτιωμένη συγκέντρωση του φαρμάκου που προκύπτει από την τοπική χορήγηση του φαρμάκου και στοχευμένες φορέα φαρμάκου (Gal-λιπο) θα πρέπει να θεωρείται. Ως εκ τούτου, φυσιολογικό ήπαρ ιστούς του κάθε όγκου που φέρουν ποντικού μετά την αγωγή με διάφορα σκευάσματα φαρμάκου μέσω ένεσης σπλήνα συλλέχθηκαν και σταθεροποιήθηκαν χρησιμοποιώντας 10% φορμαλίνη για 24 ώρες, και Η &? Χρώση Ε εκτελέστηκε. Από την Η &? Ε αποτελέσματα χρώσης (Σχήμα 7), δεν σοβαρή ηπατική αλλοιώσεις θα μπορούσαν να παρατηρηθούν μεταξύ των δειγμάτων από τις ομάδες που έλαβαν θεραπεία με ελεύθερη Dox, CL-Dox και Gal-Dox μέσω ένεσης σπλήνα σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου PBS. Παρόμοια ελαφρά ήπατος αλλοιώσεις που παρουσιάζονται σε αυτές δείγματα, τα οποία θα μπορούσαν να αποδοθεί στην ενοφθαλμισμό των καρκινικών κυττάρων στο ήπαρ. Επιπλέον, δεν παρατηρήθηκαν διαφορές μεταξύ CL-Dox και ομάδα Gal-Dox. Αυτό το αποτέλεσμα έδειξε ότι η αγωγή της στόχευσης του οργάνου δεν θα προκαλούν τις βλάβες των φυσιολογικών ιστών, αλλά βελτιωθεί το αποτέλεσμα κατά του όγκου αν και η συγκέντρωση του φαρμάκου εντός του ήπατος αυξήθηκε κατά όργανο στοχευμένων λιποσωμάτων και περιφερειακή χορήγηση του φαρμάκου.

Η κανονική ηπατικούς ιστούς από τις ομάδες που έλαβαν θεραπεία με τρία σκευάσματα φαρμάκου μέσω ένεσης σπλήνα και ομάδες PBS συλλέχθηκαν και σταθεροποιήθηκαν χρησιμοποιώντας 10% φορμαλίνη για 24 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου, και στη συνέχεια χρώση αιματοξυλίνης και εοσίνης (Η &? Ε χρώση) πραγματοποιήθηκε. Μεγέθυνση = 400 Χ.

Η

Συζήτηση

Ο καρκίνος παραμένει μια από τις πιο κοινές κύριες αιτίες θανάτου. Η ανάπτυξη αποτελεσματικών θεραπευτικών στρατηγικών είναι το αποκορύφωμα της βιοϊατρικής έρευνας. Καθώς η κακοήθεια του καρκίνου σχετίζεται με την ικανότητά τους να σχηματίζουν μετάσταση, η ανάπτυξη νέων μεθόδων για τον έλεγχο της μετάστασης θα μπορούσε να είναι μια εναλλακτική λύση για τη βελτίωση της έκβαση της θεραπείας. Για την επίτευξη αυτού του στόχου, πιστεύουμε, θα πρέπει να εξεταστούν δύο πτυχές. Η μία είναι να αυξηθεί η αποτελεσματική συγκέντρωση αντικαρκινικών φαρμάκων για να καταστρέψει μεταστατικού μικροπεριβάλλον του όγκου και παρατείνει το χρόνο παραμονής των φαρμάκων. Η άλλη είναι να μειώσει τις παρενέργειες των φαρμάκων σε φυσιολογικούς ιστούς. Αναμφίβολα, τα λιποσώματα έχουν αποδειχθεί ότι είναι ένα ιδανικό φορέα φαρμάκου που έχει μια ισχυρή επίδραση στην φαρμακοκινητική και κατανομή ιστού των ενσωματωμένων φαρμάκων με αποτέλεσμα ενισχυμένη αποτελεσματικότητα, καθώς και σε μεγάλο βαθμό μειωμένη συστηματική τοξικότητα των φαρμάκων. Επιπλέον, η περιφερειακή χημειοθεραπεία όπως πυλαίας φλέβας διάχυσης δημιουργεί μία υψηλή συγκέντρωση φαρμάκου στην στοχευόμενη θέση και συγχρόνως μια χαμηλή συγκέντρωση του φαρμάκου στη συστηματική κυκλοφορία και άλλους ιστούς. Για να αξιολογηθεί η δυνατότητα εφαρμογής των λιποσωμικών σκευασμάτων με την τοπική χορήγηση στη θεραπεία των ηπατικών μεταστατικού όγκου, προσδιορίσαμε πρώτα τη συγκέντρωση στο πλάσμα και η βιοκατανομή του doxorubicin από φορτωμένα με φάρμακο συμβατικά λιποσώματα. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η περιφερειακή λιποσωματική χορήγηση με ένεση δοξορουβικίνη σπλήνα μιμούνται πύλη διάχυσης φλέβα παρουσίασε μια σημαντικά υψηλότερη συγκέντρωση στο ήπαρ αλλά χαμηλότερο στο πλάσμα, την καρδιά και τα νεφρά σε σύγκριση με τη συστηματική χορήγηση (ενδοφλέβια ένεση).