Αφηρημένο

Ιστορικό

Pigmentosum ξηροδερμίας ομάδα G (XPG) διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην πρόληψη κύτταρα από την οξειδωτική βλάβη του DNA. Αυτή η μελέτη προσπάθησε να διερευνήσει έκφραση πρωτεΐνης XPG σε διαφορετικούς ιστούς γαστρικό και σε ασθενείς με διαφορετικές προγνώσεις, παρέχοντας έτσι γνώσεις σχετικά με το ρόλο της στην ανάπτυξη, εξέλιξη και πρόγνωση του καρκίνου του στομάχου (GC).

Μέθοδοι

Ένα σύνολο 176 GC, 131 γειτονικούς ιστούς μη-όγκου, 53 ατροφική γαστρίτιδα (AG) και 49 επιφανειακή γαστρίτιδα περιελήφθησαν (SG) δείγματα. Ανοσοϊστοχημική χρώση χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση έκφρασης πρωτεΐνης XPG.

Αποτελέσματα

έκφραση XPG ήταν σημαντικά υψηλότερη σε ιστούς GC σε σύγκριση με παρακείμενες μη καρκινικούς ιστούς. Στην προοδευτική ακολουθία ασθένεια ΓΓ → AG → GC, η έκφραση XPG ήταν σημαντικά υψηλότερη σε AG και GC σε σύγκριση με το ΓΓ. Ανάλυση των κλινικοπαθολογοανατομικών παραμέτρων και την επιβίωση σε ασθενείς με GC έδειξε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου έκφρασης XPG και το βάθος της εισβολής όγκου, μακροσκοπικά το είδος, την κατάταξη της Lauren, το κάπνισμα,

Helicobacter pylori

λοίμωξη και το οικογενειακό ιστορικό. Cox πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης έδειξε ότι οι ασθενείς με θετική έκφραση XPG είχαν σημαντικά μεγαλύτερη συνολική επιβίωση (P = 0,020, HR = 0,394, 95% CI 0,179 έως 0,866), κυρίως σε ηλικιωμένους ηλικίας κάτω των 60 ετών (P = 0,027, HR = 0,361, 95 % CI 0,147 έως 0,888) και τους άνδρες ασθενείς (P = 0,002, HR = 0,209, 95% CI 0,077 έως 0,571).

Συμπεράσματα

Αυτή η μελέτη έδειξε ότι η έκφραση XPG πρωτεΐνης που σχετίζονται με το την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση του GC, και θα μπορούσε έτσι να χρησιμεύσει ως μια πιθανή βιοδεικτών για τη διάγνωση και την πρόγνωση της

Παράθεση:. Deng Ν, Liu Jw, Sun Lp, Xu Q, Duan ZP, Dong NN, κ.ά. . (2014) Έκφραση Πρωτεΐνης XPG στην ανάπτυξη, εξέλιξη και πρόγνωση του καρκίνου του στομάχου. PLoS ONE 9 (9): e108704. doi: 10.1371 /journal.pone.0108704

Συντάκτης: Kapil Mehta, Πανεπιστήμιο του Τέξας MD Anderson Cancer Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 29 του Μάρτη του 2014? Δεκτές: 1 του Σεπτεμβρίου 2014? Δημοσιεύθηκε: 30 Σεπτεμβρίου 2014

Copyright: © 2014 Deng et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. Η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Key Πρόγραμμα Βασικής Έρευνας της Κίνας (973 Πρόγραμμα Ref No 2010CB529304.), Και το Ίδρυμα της Επιστήμης και Τεχνολογίας στην επαρχία Liaoning (ref No. 2011225002). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος στομάχου (GC) είναι η τέταρτη πιο κοινή μορφή καρκίνου στον κόσμο και η δεύτερη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο σχετίζονται [1]. Παρά τις πρόσφατες προόδους στη διάγνωση και τη θεραπεία του GC, συχνότητα εμφάνισης και συνδεδεμένων θνησιμότητας παραμένουν σχετικά υψηλές [2]. Οι παράγοντες κινδύνου για GC περιλαμβάνουν τη γενετική προδιάθεση,

Helicobacter pylori

λοίμωξη, και τη διατροφή και τον τρόπο ζωής παράγοντες, κλπ, τα οποία μπορεί να επηρεάσει την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση του GC.

Κινητά DNA είναι συνεχώς σε ο κίνδυνος ζημίας από ενδογενείς και εξωγενείς διεγέρσεις, που οδηγεί σε μια δυναμική ισορροπία μεταξύ των ζημιών και την επισκευή. Μια ανισορροπία μεταξύ βλάβης του DNA και επιδιόρθωση συμβάλλει στην έναρξη του καρκίνου [3]. Η οξειδωτική βλάβη του DNA μπορεί να οδηγήσει σε ελλείψεις σε μεταγραφή, και σε επικάλυψη, η μετάλλαξη και η αστάθεια του γονιδιώματος, η οποία μπορεί με τη σειρά του να οδηγήσει σε κυτταρικό δυσλειτουργία [4]. ικανότητα επιδιόρθωσης DNA παίζει έτσι σημαντικό ρόλο στη διατήρηση των φυσιολογικών λειτουργιών των φυσιολογικών κυττάρων. Το σύστημα επιδιόρθωσης DNA αποτελείται από επισκευής νουκλεοτιδίων εκτομής (NER), βάση επισκευή εκτομής και επισκευή mistmach. οθόνες NER και επισκευές μια ποικιλία από βλάβες του DNA, όπως η υπεριώδης επαγόμενη διμερή πυριμιδίνης κυκλοβουτάνιο, ογκώδη προϊόντα προσθήκης και DNA διασυνδέσεις [5], [6], [7]. Η διαδικασία περιλαμβάνει διάφορα ένζυμα, συμπεριλαμβανομένων ομάδα επισκευής εκτομή cross-συμπλήρωση (ERCC) 1, XPD (ERCC2), XPF (ERCC4), XPG (ERCC5), XPC και ERCC6 (Cockayne σύνδρομο Β πρωτεΐνη) [8]. Έχει προταθεί ότι γενωμική αστάθεια εμπλέκεται στην έναρξη του όγκου, και πολλαπλών βημάτων μεταλλάξεις συμβαίνουν σε όλη τη ζωή [9]. NER είναι ένα ευέλικτο σύστημα σε θέση να επισκευάσει πολλαπλές βλάβες του DNA που προκαλείται από γενετική αστάθεια και έτσι παίζει σημαντικό ρόλο στην πρώιμη σχηματισμό όγκων.

Pigmentosum ξηροδερμίας ομάδα G (XPG) είναι μία νουκλεάση ειδικής δομής που ανήκουν σε η οικογένεια Fen1, η οποία κωδικοποιείται από το

ERCC5

(επισκευή εκτομή cross-συμπλήρωση ομάδα 5) [10], [11], [12]. XPG είναι ένα απαραίτητο μέλος της οδού NER υπεύθυνος για την «εκτομή της βλάβης του DNA στα θηλαστικά [13] 3. Πρόσφατες έρευνες έχουν επικεντρωθεί σχετικά με τη σύνδεση μεταξύ XPG και χημειοθεραπευτικών ευαισθησία. Ωστόσο, λίγες μελέτες έχουν ανιχνεύσει την έκφραση της πρωτεΐνης XPG σε φυσιολογικούς ιστούς και όγκους. Αν και οι προηγούμενες μελέτες έχουν διεξαχθεί στο περιφερικό αίμα ή μεταστατικό κυτταρικές γραμμές, χωρίς να λαμβάνονται υπόψη τα προφίλ έκφρασης σε ζεύγη ιστών. Επιπλέον, καμία μελέτη μέχρι σήμερα δεν έχει διερευνηθεί η έκφραση του XPG στον καρκίνο με ανοσοϊστοχημική χρώση, ειδικά σε GC, ατροφική γαστρίτιδα (AG) και επιφανειακή γαστρίτιδα (SG), και η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης XPG και τη βιολογική συμπεριφορά και πρόγνωση παραμένει GC σε μεγάλο βαθμό άγνωστη.

στην παρούσα μελέτη, διαπιστώσαμε τα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης XPG σε ιστούς από ασθενείς με διάφορες παθήσεις του στομάχου με ανοσοϊστοχημική χρώση, και να διερευνηθούν προφίλ έκφρασης του στην ακολουθία της νόσου ΓΓ → AG → GC. Ερευνήσαμε επίσης τις σχέσεις μεταξύ της έκφρασης XPG πρωτεΐνης και κλινικοπαθολογικών παραμέτρων και την επιβίωση σε ασθενείς με GC, να ρίξει φως σχετικά με τους πιθανούς ρόλους των XPG στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση του GC.

Υλικά και Μέθοδοι

ασθενείς και δείγματα ιστών

ένα σύνολο από 278 ασθενείς εντάχθηκαν από το Τμήμα Χειρουργικής Ογκολογίας του πρώτου συνδεδεμένες νοσοκομείο της Κίνας Ιατρικού Πανεπιστημίου και από τα άτομα που συμμετείχαν σε ένα πρόγραμμα για την υγεία έλεγχος περιλαμβάνει γαστροσκόπηση για τη διαλογή GC σε νοσοκομεία που βρίσκονται στο Zhuanghe και Shenyang στην επαρχία Liaoning της Κίνας, μεταξύ του 2008 και του 2011. τα δείγματα ιστού ελήφθησαν από 176 ασθενείς με ιστολογικά επιβεβαιωμένο GC (συμπεριλαμβανομένων συνδυασμό παρακείμενων ιστών μη-όγκου από 131 περιπτώσεις), 49 ασθενείς με SG, και 53 ασθενείς με AG. Οι ασθενείς που (i) είχαν σύγχρονη ή metachronous κακοήθεις όγκους, (ii) νόσος XP, ή (iii) υποβλήθηκαν προεγχειρητικά ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία εξαιρέθηκαν από αυτή τη μελέτη. Παρακολούθηση ολοκληρώθηκε τον Αύγουστο του 2013. Όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε ενδοσκοπική γαστρικού βλεννογόνου βιοψία. Βιοψία δείγματα σε παραφίνη και χρωματισμένο με αιματοξυλίνη και ηωσίνη για ιστολογική διάγνωση, η οποία επιτυγχάνεται με δύο έμπειρους παθολόγους. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των GC, SG, AG και γειτονικές ομάδες μη-καρκινικά όσον αφορά τη σύνθεση του φύλου ή ηλικίας (

P

= 0.330 και

P

= 0,431, αντίστοιχα) (Πίνακας 1). Οι ασθενείς χειρουργικά οργάνωσε σύμφωνα με το τρέχον σύστημα ταξινόμησης Borrmann. Η ιστολογική αποτελέσματα καθορίστηκε με βάση τα κριτήρια του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας, και οι όγκοι οργανώθηκαν με τη χρήση της 7η έκδοση του συστήματος σταδιοποίησης TNM της Διεθνούς Ένωσης κατά του Καρκίνου (UICC) /American μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο (AJCC) (2010), με βάση για μετεγχειρητική παθολογική εξέταση. Ένα σύνολο 176 ασθενών που είχαν ιστολογικά επιβεβαιωμένη με αδενοκαρκίνωμα στομάχου? περισσότερες περιπτώσεις θα μπορούσαν να ταξινομούνται σύμφωνα με την ταξινόμηση Lauren, αλλά 17 δεν θα μπορούσε. Μεταξύ των περιπτώσεων 176 GC, 63 ήταν εντερικού τύπου, 96 ήταν διάχυτη τύπου και 17 ήταν μικτού τύπου. Ιστορία του πόσιμου ορίστηκε ως ο μέσος όρος αλκοόλ καθημερινά ≥50 πρόσληψη g και συνέχισε ≥1 έτους. Το τέλος του χρόνου παρακολούθησης είναι Αυγούστου 2013. Σε 176 περιπτώσεις ασθενών, 169 περιπτώσεις ολοκλήρωσε τις πληροφορίες παρακολούθησης, και ο χρόνος παρακολούθησης κυμάνθηκε από 22 μήνες έως 38 μήνες. 41 από τους 169 ασθενείς (24,3%) με καρκίνο του στομάχου είχε πεθάνει και η διάμεση συνολική χρόνος επιβίωσης των ασθενών ήταν 29 μήνες. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από το Ερευνητικό Ινστιτούτο Ιατρικής Επιτροπής Δεοντολογίας του Πρώτου συνδεδεμένες νοσοκομείο της Κίνας Ιατρικού Πανεπιστημίου. Γραπτή πληροφορημένες συγκαταθέσεις ελήφθησαν από τους συμμετέχοντες. Ιατρικά ιστορικά (συμπεριλαμβανομένης της ηλικίας, του φύλου, το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ) ελήφθησαν από το ερωτηματολόγιο και τα αρχεία έχουν μηχανογραφηθεί.

Η

Η ανοσοϊστοχημεία

φορμόλη-σταθερό, κόπηκαν ιστούς παραφίνης σε 4-μm πάχους τομές και τοποθετήθηκαν σε γυάλινες πλάκες με πολυ-L-λυσίνη. Εν συντομία, πλάκες αποπαραφινοποιήθηκαν σε ξυλόλιο, επανυδατώθηκαν σε διαβαθμισμένη σειρά αλκοόλης και πλύθηκε με νερό της βρύσης. Οι τομές ιστών επωάστηκαν σε ζέον ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού νατρίου (ρΗ 6.0) για 100 s σε μια χύτρα ταχύτητας ατμού για ανάκτηση αντιγόνου. Η ενδογενής υπεροξειδάση παρεμποδίστηκε με τη χρήση 3% υπεροξειδίου του υδρογόνου για 10 λεπτά, και οι τομές μετά πλύθηκαν με ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο (PBS), ρΗ 7.4. κολλαγόνο ιστών μπλοκαρίστηκε για την αποφυγή μη ειδικής σύνδεσης με την προσθήκη 10% φυσιολογικό ορό κατσίκας σε 37 ° C για 10 λεπτά. Το αντι-XPG πολυκλωνικό αντίσωμα (ab-99248, 1:300 αραίωση? Abcam, Cambridge, UK) χρησιμοποιήθηκε ως το πρωτογενές αντίσωμα για την ανίχνευση έκφρασης πρωτεΐνης XPG, και επωάστηκαν για 4 ° C όλη τη νύκτα. Μετά από ξέπλυμα τρεις φορές με PBS για 5 λεπτά η κάθε μία, οι τομές επωάστηκαν με βιοτινυλιωμένο δευτερεύον αντίσωμα (αντίσωμα κατσίκας αντι-κουνελιού, Maixin Inc., Fujian, Κίνα) και στρεπταβιδίνης-βιοτίνης υπεροξειδάσης επί 10 λεπτά κάθε στους 37 ° C. Τα πλακίδια στη συνέχεια πλύθηκαν σε PBS και χρωματίστηκαν με 3, 3-διαμινοβενζιδίνη τετραϋδροχλωρική και βάφτηκαν αντίθετα με αιματοξυλίνη. Τέλος, οι τομές αφυδατώθηκαν και τοποθετήθηκαν. Πρωτογενή αντισώματα αντικαταστάθηκαν με ρυθμιστικό διάλυμα PBS ως αρνητικός μάρτυρας.

Αξιολόγηση της ανοσοϊστοχημείας

Τα ανοσοϊστοχημική αποτελέσματα αξιολογήθηκαν και βαθμολογήθηκαν ανεξάρτητα από δύο ερευνητές που δεν γνώριζαν την κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά των ασθενών. Πυρηνική θετικότητα για XPG πρωτεΐνη αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας ένα κριτήριο βαθμολόγησης ημι-ποσοτική με βάση την ένταση χρώσης (0, καμία χρώση? 1, ανοιχτό καφέ χρώση? 2, καφέ χρώση? Και 3, βαριά καφέ χρώση) και η αναλογία των χρώση επιθηλιακών κυττάρων ( 0, ≤5%? 1, 5-25%? 2, 25-50%? 3, 50-75%? και 4, ≥75%). Ένταση χρώσης μετρήθηκε στις θέσεις του άντρου του στομάχου και του γαστρικού αδένα του σώματος. Το ποσοστό θετικότητας των επιθηλιακών κυττάρων και χρώση ένταση στη συνέχεια πολλαπλασιάζεται για να δημιουργηθεί ένα σκορ ανοσοαντιδραστικότητα (IS) για κάθε δείγμα [14]. Η έκφραση βαθμολογήθηκε ως: αρνητικό (-), βαθμολογία = 0? ασθενής έκφραση (+), βαθμολογία = 1-4? μέτρια έκφραση (++), βαθμολογία = 5-8? και ισχυρή έκφραση (+++), βαθμολογία = 9-12.

Η στατιστική ανάλυση

Η στατιστική ανάλυση έγινε με τη χρήση του SPSS (16.0) στατιστικού λογισμικού (SPSS, Chicago, IL, USA). Μη παραμετρικές δοκιμασίες χρησιμοποιήθηκαν για να αναλυθούν οι διαφορές στην έκφραση XPG στην αλληλουχία SG-AG-GC, και οι διαφορές μεταξύ GC και των παρακείμενων ιστών μη-όγκου. Συσχετίσεις μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών παραγόντων και της έκφρασης XPG αναλύθηκαν από το χ

2 δοκιμή ή την ακριβή δοκιμασία πιθανότητας του Fisher. Ανάλυση επιβίωσης πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας καμπύλες Kaplan-Meier και οι διαφορές μεταξύ των ομάδων αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ log-rank. ανάλυση παλινδρόμησης Cox διεξήχθη για πολυπαραγοντική ανάλυση. Δύο ουρά

P

τιμές & lt?. 0.05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές

Αποτελέσματα

Η έκφραση της πρωτεΐνης XPG σε καρκίνο του στομάχου και μη καρκινικών ιστών

XPG ανοσοχρώση επέδειξε κυρίως πυρηνικού εντοπισμού (Σχήματα 1 και 2). Στην εξέλιξη των γαστρικών ασθενειών, υπήρχαν σημαντικές διαφορές στα επίπεδα έκφρασης XPG μεταξύ AG και SG (

P1

& lt? 0.001), καθώς και μεταξύ GC και SG (

Ρ2

= 0,031). έκφραση XPG ήταν σημαντικά υψηλότερη σε AG και GC σε σχέση με το SG, αντίστοιχα (Mann-Whitney U-test, πίνακας 2). Επιπλέον, βρήκαμε τα επίπεδα έκφρασης XPG με CG ήταν σημαντικά υψηλότερα από ό, τι σε παρακείμενες μη καρκινικούς ιστούς (Ρ & lt? 0.001). Την ίδια στιγμή, εμείς ταξινομούνται παρακείμενων ιστών μη-όγκου σε 41 περιπτώσεις AG και 88 περιπτώσεις SG. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η έκφραση XPG ήταν σημαντικά υψηλότερη σε GC από γειτονικούς ιστούς της SG (Ρ & lt? 0.001)? δεν παρατηρήθηκε σημαντική συσχέτιση μεταξύ GC και των παρακείμενων ιστών AG της (P = 0,244). Η σχέση της έκφρασης XPG στα δείγματα του γειτονικού ιστού και συζευγμένο GC εμφανίστηκαν στον Πίνακα 3.

Χαμηλή πυρηνική έκφραση της XPG παρατηρήθηκε στο άντρο του στομάχου σε SG (α). επίπεδα έκφρασης XPG στο AG (β) και GC (γ) ήταν υψηλότερες από ό, τι στην SG. Αρχική μεγέθυνση, × 400.

Η

χρώση XPG στον πυρήνα ήταν έντονα θετική (+++) στο (α), μετρίως θετική (++) στο (Β), ασθενώς θετικό (+) σε (γ) και αρνητικό (-) σε (δ). Μεγέθυνσης, × 400.

Η

Η

Σύλλογοι μεταξύ XPG χρώση και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά

Είμαστε ανέλυσε τις συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης XPG και διάφορα κλινικοπαθολογικών παραμέτρων χρησιμοποιώντας Mann-Whitney U- δοκιμασίες (Πίνακας 4). έκφραση XPG στην εντερική τύπου GC (98,4%) ήταν σημαντικά υψηλότερο σε σχέση με διάχυτη τύπου GC. επίπεδα έκφρασης XPG επίσης συσχετίστηκε σημαντικά με την κατανάλωση (

P

= 0,031) (75,0%), το βάθος της εισβολής του όγκου (στάδιο Pt,

P

= 0,012), μακροσκοπική τύπου (

P

= 0,032) (Πίνακας 4),

H. pylori

καθεστώς μόλυνσης (

P

= 0,039) και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου (

P

= 0,019) (Πίνακας S1). Υψηλή έκφραση XPG παρατηρήθηκε σε ασθενείς που έπιναν, περιπτώσεις Τ4, εντερική τύπου GC,

H. πυλωρού

μόλυνση θετικά, και το οικογενειακό ιστορικό θετικό ομάδες. Ωστόσο, δεν υπήρξε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης XPG και ταξινόμηση Borrmann, στάδιο TNM, μετάσταση λεμφαδένα, πρότυπο ανάπτυξης ή λεμφικό εισβολή (πίνακας 4).

Η

Σχέση μεταξύ της έκφρασης XPG και τη συνολική επιβίωση σε ασθενείς με GC

Ερευνήσαμε τη σχέση μεταξύ της έκφρασης XPG και την επιβίωση σε ασθενείς με GC. Σύμφωνα με μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης, το επίπεδο έκφρασης της XPG δεν ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας (

P

= 0.491), ενώ η μακροσκοπική τύπου (

P

= 0,002), το στάδιο TNM (

P

& lt? 0.001), μετάσταση λεμφαδένα (

P

& lt? 0.001) και το βάθος της εισβολής (

P

& lt? 0.001) ήταν όλα τα σημαντικά προγνωστικοί παράγοντες (Πίνακας 1). Επειδή το στάδιο TNM περιλαμβάνονται ήδη πληροφορίες για λεμφαδένα μετάσταση και το βάθος της εισβολής, πραγματοποιήσαμε πολυπαραγοντική ανάλυση χρησιμοποιώντας μοντέλο αναλογικού κινδύνου του Cox προσαρμόζεται ανάλογα με το φύλο, την ηλικία, το στάδιο TNM και μακροσκοπική τύπου. Είναι ενδιαφέρον, τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το επίπεδο έκφρασης XPG ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας (

P

= 0.020, HR = 0,394, 95% CI 0,179 έως 0,866). Ασθενή με θετική έκφραση είχε πλέον την επιβίωση. Εμείς στρωματοποίηση των ασθενών ανάλογα με την ηλικία και το φύλο να διαφωτίσει πιο λεπτομερείς σχέση μεταξύ XPG και την πρόγνωση GC. ανάλυση στρωματοποίησης πρότεινε ασθενείς ηλικίας κάτω των 60 χρόνων, οι οποίοι είχαν θετική έκφραση XPG ήταν σημαντικά πιο ευνοϊκή από την άποψη της επιβίωσης από εκείνη των ασθενών με αρνητική έκφραση XPG (Σχήμα S1)? έκφραση XPG ήταν ένας προστατευτικός παράγοντας δεν έχει σημασία μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης ή μοντέλο αναλογικών κινδύνων του Cox, (P = 0,021, HR = 0,373, 95% CI 0,154 έως 0,901? P = 0,021, HR = 0,361, 95% CI 0,147 έως 0,888, αντίστοιχα), και άνδρες ασθενείς με XPG θετική έκφραση είχαν σημαντικά ευνοϊκή συνολική επιβίωση (P = 0,021, HR = 0,373, 95% CI 0,154 έως 0,901) (Πίνακας 5).

η

Συζήτηση

Στο παρούσα μελέτη, ανιχνεύθηκε έκφραση πρωτεΐνης XPG σε ιστούς από ασθενείς με SG, AG και GC, και σε παρακείμενες μη καρκινικούς ιστούς, με ανοσοϊστοχημική χρώση. Επιπλέον, μελετήσαμε τις σχέσεις μεταξύ πρωτεϊνικής έκφρασης XPG και κλινικοπαθολογικών παραμέτρων και την επιβίωση σε ασθενείς με GC, για να παρέχει γνώσεις σχετικά με τους ρόλους της στην ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση του GC. Για το καλύτερό μας γνωρίζουμε, αυτή είναι η πρώτη έκθεση της σχέσης μεταξύ της έκφρασης XPG πρωτεΐνης και την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση του GC.

Μια ποικιλία των υποκείμενων μηχανισμών θα μπορούσαν να επηρεάσουν την έκφραση της XPG, συμπεριλαμβανομένων των

ERCC5

μετάλλαξη γονιδίων, τη ρύθμιση της μεταγραφής και της μετάφρασης, την υποβάθμιση των πρωτεϊνών και μεθυλίωση υποστηρικτής [15]. Η φυσιολογική ρύθμιση της έκφρασης XPG απαιτεί εξωτερική διέγερση της βλάβης του DNA. Για παράδειγμα, UVC προκαλούμενη βλάβη του DNA μπορεί να ρυθμίζουν την έκφραση XPG [16]. Σε φυσιολογικά άτομα βλάβη του DNA είναι σπάνια, και το γονίδιο επιδιόρθωσης DNA

ERCC5

επομένως εκφράζεται σε χαμηλά επίπεδα. Ωστόσο, διάφοροι τύποι περιβαλλοντικά καρκινογόνα και ενδογενών μεταβολικών προϊόντων μπορεί να προκαλέσει βλάβες στο DNA, ενισχύοντας έτσι τη δραστικότητα επιδιόρθωσης DNA των κυττάρων και τις δραστηριότητες της μεταγραφής και της μετάφρασης [17]. Η παρούσα μελέτη διερεύνησε το προφίλ έκφρασης πρωτεΐνης XPG στην ακολουθία της νόσου ΓΓ → AG → GC και βρήκε έκφραση XPG στην SG ήταν σχετικά χαμηλότερη από ό, τι GC και AG. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι XPG πρωτεΐνης προκλήθηκε και ενεργοποιούνται κατά τη διάρκεια της διαδικασίας της καρκινογένεσης, επισκευή έτσι βλάβη του DNA και τη διατήρηση της ακεραιότητας του γονιδιώματος. XPG ήταν ρυθμισμένα προς τα πάνω σε ιστούς GC, αποκαλύπτοντας έναν πιθανό ρόλο για XPG πρωτεΐνης ως βιοδείκτη για την πρόβλεψη του κινδύνου GC και προκαρκινικές αλλοιώσεις του. Λίγες μελέτες μέχρι σήμερα έχουν αναφερθεί στις σχέσεις μεταξύ της έκφρασης XPG πρωτεΐνης και άλλων μορφών καρκίνου, καθώς και τα αποτελέσματα διέφεραν από τα ευρήματά μας. Για παράδειγμα, Cheng et al. παρατηρούμενη χαμηλή έκφραση XPG σε λευκοκύτταρα περιφερικού αίματος σε ασθενείς με πνεύμονα, της κεφαλής και του τραχήλου, και καρκίνων του μαστού [18], [19], [20], [21], [22], [23]. XPG ήταν ελλιπής ή προς τα κάτω σε καρκίνωμα των όρχεων και του καρκίνου του μαστού [9], [24]. Τα αμφιλεγόμενα συμπεράσματα από αυτές τις διαφορετικές μελέτες θα μπορούσαν να προκύψουν από τα διάφορα βιολογικά χαρακτηριστικά των όγκων που μελετήθηκαν, ή από τις διαφορές στην ανίχνευση μεθόδους και τα μεγέθη των δειγμάτων. Περαιτέρω έρευνες μεγάλης κλίμακας έκφρασης XPG σε διαφορετικούς καρκίνους που απαιτούνται για να επιβεβαιώσουν το ρόλο της.

Ερευνήσαμε περαιτέρω τις σχέσεις μεταξύ της έκφρασης XPG και κλινικοπαθολογικών παραμέτρων συμπεριλαμβανομένων στάδιο ΤΝΜ, το βάθος της εισβολής, κομβικών μετάσταση, μακροσκοπική τύπου, λέμφο εισβολή σκάφος και το μοντέλο ανάπτυξης. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η έκφραση XPG πρωτεΐνη συνδέθηκε με το βάθος της εισβολής και μακροσκοπικών τύπου? Εισβολή των καρκινικών κυττάρων στο subserous παρακείμενο ιστό και πιο προηγμένες μακροσκοπικά το είδος και οι δύο βασικοί παράγοντες με μεγάλη επιπτώσεις στην εξέλιξη της νόσου. Προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι η υπερέκφραση του γονιδίου επιδιόρθωσης του DNA ήταν θετικά με την βαθύτερη εισβολή και μια πιο ανεπτυγμένες ταξινόμηση του GC. Ganzinelli Μ et al. πρότεινε ότι κακοήθη μετασχηματισμό συνδέθηκε με την προς τα πάνω ρύθμιση των γονιδίων που εμπλέκονται στην επιδιόρθωση του DNA και η διατήρηση της σταθερότητας γονιδιωματική [25]. Προτάθηκε ότι η μακροπρόθεσμη υποξία και φλεγμονή στο μικροπεριβάλλον του ιστού μπορεί να είναι υπεύθυνη για την επαγωγή βλάβης του DNA [26]. Επιπλέον, έχει αναφερθεί ότι τα γονίδια XPG ήταν σημαντικά λιγότερο εκφράζονται σε στάδιο III από ό, τι στο στάδιο Ι καρκίνωμα των ωοθηκών [25]. Liu et al. πρότεινε ότι τα επίπεδα έκφρασης του mRNA ERCC1 συσχετίστηκε με την ηλικία, με υψηλή έκφραση ERCC1 είναι πιο συχνές σε νεότερους ασθενείς [27]. Τα διαφορετικά αποτελέσματα των διαφόρων ερευνών θα μπορούσαν να προκύψουν από τις διαφορές στους τύπους καρκίνου, εθνότητες, τα μεγέθη δείγματος και περιβαλλοντικούς παράγοντες. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι ισχυρή έκφραση συχνά ανιχνεύθηκε σε Τ4 και προχωρημένο καρκίνο. Λαμβάνοντας υπόψη XPG ήταν λιγότερο εκφράζεται σε διάχυτου τύπου GC σε σχέση με το εντερικό τύπου GC, πενιχρά διαφοροποιημένο καρκινικά κύτταρα μπορεί να στερούνται την ικανότητα να παράγουν XPG η οποία ήταν υπεύθυνη για την επισκευή των ιστών. Διάχυτη τύπου GC θα μπορούσε, επομένως, να έχουν χειρότερη πρόγνωση. Τα παραπάνω στοιχεία δείχνουν ότι η έκφραση XPG συσχετιζόταν θετικά με τον αριθμό των κλινικοπαθολογοανατομικών παράμετροι που αντανακλούν την ανάπτυξη GC, και συνεπώς μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο στην έναρξη και την εξέλιξη του GC και να χρησιμεύσει ως βιοδείκτη για την ανάπτυξη GC, πρόβλεψη βιολογικές δραστηριότητες και το βαθμό εξέλιξης. Επιπλέον, XPG υπερέκφραση συνδέθηκε επίσης με οικογενειακό ιστορικό,

H. pylori

λοίμωξη και το ποτό. Η κατανάλωση αλκοόλ και

H. pylori

λοίμωξη μπορεί να προκαλέσει οξειδωτική βλάβη, αυξάνοντας έτσι την έκφραση των πρωτεϊνών επιδιόρθωσης DNA όπως XPG. XPG ήταν περισσότερο εντόνως εκφρασμένο σε ασθενείς με οικογενειακό ιστορικό καρκίνου, γεγονός που υποδηλώνει ότι θα μπορούσε επίσης να είναι μια γενετική βιοδείκτης του καρκίνου.

Ερευνήσαμε περαιτέρω τις σχέσεις μεταξύ έκφρασης XPG και η συνολική επιβίωση. Υπήρξε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης της πρωτεΐνης XPG και πρόγνωση GC σε πολυπαραγοντική ανάλυση, ειδικά σε ασθενείς ηλικίας κάτω των 60 ετών. Θετική επίπεδα έκφρασης XPG πρωτεΐνης θα μπορούσε να προβλέψει πλέον επιβίωση σύμφωνα με την παρούσα μελέτη. Παρομοίως, η υψηλή έκφραση της οικογένειας πρωτεϊνών επιδιόρθωσης DNA, όπως

ERCC1

, προέβλεψε μεγαλύτερη συνολική επιβίωση συγκριτικά με χαμηλή έκφραση ERCC1 [27]. έκφραση υψηλού XPG συσχετίστηκε με μακρύτερη επιβίωση σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών [28]. Σε όρους επιπέδων mRNA, τα υψηλά επίπεδα XPG mRNA ήταν ένα ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα πρόβλεψη πλέον επιβίωσης σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα μη-μικρών κυττάρων και του σαρκώματος [29], [30]. Σε αντίθεση, XPG έχει πρόσφατα αναφερθεί ότι έχει προγνωστική αξία στον καρκίνο των ωοθηκών? χαμηλή έκφραση XPG προέβλεψε πλέον επιβίωσης [31], σύμφωνα με την τρέχουσα ευρήματά μας. Χαμηλά επίπεδα έκφρασης ορισμένων γονιδίων για πρωτεΐνες της οικογένειας επιδιόρθωσης DNA, όπως

ERCC1

, έχουν αναφερθεί να προβλέψει μεγαλύτερες ελεύθερη υποτροπής επιβίωση και συνολική επιβίωση σε GC. Υψηλή XPF έκφραση που σχετίζονται με την πρώιμη εξέλιξη? ασθενείς με υψηλή έκφραση XPF είχαν μικρότερη επιβίωση χωρίς εξέλιξη από ό, τι οι ασθενείς με χαμηλή έκφραση XPF [32]. Liu et al. κατέδειξε ότι οι ασθενείς με χαμηλά επίπεδα έκφρασης του mRNA ERCC1 είχαν πλέον υποτροπή και συνολικής επιβίωσης φορές από ό, τι οι ασθενείς με υψηλά επίπεδα ERCC1. Διαφορετικοί τύποι καρκίνων έχουν διακριτούς μηχανισμούς της καρκινογένεσης και έτσι τον έλεγχό τους διαφέρει μεταξύ των διαφόρων πληθυσμών. Η προγνωστική ρόλος του XPG είναι επομένως επίσης δυνατόν να διαφέρει μεταξύ των διαφόρων τύπων καρκίνου. Επιπλέον, η έκφραση XPG θα μπορούσε να επηρεαστεί από διάφορους παράγοντες, και περαιτέρω μεγάλης κλίμακας πολυκεντρική έρευνες με μακρά παρακολούθηση απαιτούνται για να διευκρινιστεί η σημασία της XPG στην πρόγνωση του καρκίνου. Παρ ‘όλα αυτά, η έκφραση XPG φαίνεται να έχει δυναμικό προγνωστική αξία σε GC, ιδιαίτερα σε ασθενείς ηλικίας κάτω των 60 χρόνων, αν και απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να διευκρινιστούν οι υποκείμενων μηχανισμών.

Εν κατακλείδι, δείξαμε για πρώτη φορά ότι XPG πρωτεϊνική έκφραση ήταν σημαντικά υψηλότερη σε GC από μη καρκινικούς ιστούς, και σημαντικά υψηλότερη σε AG και GC σε σχέση με SG στην αλληλουχία ασθένεια SG → AG → GC. Το επίπεδο της έκφρασης XPG ήταν επίσης σημαντικά που συνδέονται με το βάθος της εισβολής όγκου, μακροσκοπικά το είδος, την κατάταξη της Lauren, το κάπνισμα,

H. pylori

μόλυνση και οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης έδειξε ότι οι ασθενείς με XPG θετική έκφραση είχε σημαντική μεγαλύτερη συνολική επιβίωση, ιδιαίτερα σε ασθενείς ηλικίας κάτω των 60 ετών. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η έκφραση της πρωτεΐνης XPG σχετίζεται με την ανάπτυξη, την εξέλιξη και την πρόγνωση της GC, και μπορεί συνεπώς να χρησιμεύσει ως μια πιθανή βιοδείκτη για τη διάγνωση και την πρόγνωση της νόσου αυτής.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Σχήμα S1.

Α, συσχέτιση της έκφρασης XPG με καμπύλες επιβίωσης των ασθενών με καρκίνο του στομάχου από μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης? Β, η συσχέτιση της έκφρασης XPG με καμπύλες επιβίωσης των ασθενών ηλικίας κάτω των 60 χρόνων στον καρκίνο του στομάχου από μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης? C, η συσχέτιση της έκφρασης XPG με καμπύλες επιβίωσης των ασθενών olderer από 60 χρόνια σε καρκίνο του στομάχου από μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης

doi:. 10.1371 /journal.pone.0108704.s001

(ΔΕΘ)

Πίνακα S1.

βασικά χαρακτηριστικά του πληθυσμού της μελέτης και την έκφραση της XPG

doi:. 10.1371 /journal.pone.0108704.s002

(DOC)