έχουν

Αφηρημένο

Ιστορικό

Είκοσι κοινές γενετικές παραλλαγές έχουν συσχετιστεί με κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) σε μελέτες συσχέτισης ευρύ γονιδίωμα μέχρι σήμερα. Δεδομένου ότι υπάρχουν μεγάλες διαφορές μεταξύ των πληθυσμών, τη γενίκευση των ευρημάτων σε κάθε συγκεκριμένο πληθυσμό πρέπει να επιβεβαιωθεί

Στόχος

Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να γίνει μια μελέτη συσχέτιση μεταξύ παραλλαγών κινδύνου:. Rs10795668, rs16892766 , rs3802842 και rs4939827 και CRC κινδύνου στο κροατικό πληθυσμό.

Μέθοδοι

Μια μελέτη σύνδεσης πραγματοποιήθηκε σε 320 παχέος περιπτώσεις καρκίνου και 594 ελέγχους που προσλαμβάνονται στην Κροατία. Εμείς γονότυπος τέσσερις παραλλαγές προηγουμένως συνδέονται με CRC:. Rs10795668, rs16892766, rs3802842 και rs4939827

Αποτελέσματα

rs4939827 παραλλαγή Smad7 (18q21.1) ήταν σημαντικά σχετίζεται με CRC κινδύνου στο κροατικό πληθυσμό. C αλληλόμορφο συσχετίστηκε με μειωμένο κίνδυνο, αναλογία πιθανοτήτων (OR): 0.70 (95% CI: 0,57 – 0,85, P = 3.5E-04). Σε σύγκριση με το TT ομοζυγώτες, ο κίνδυνος μειώθηκε κατά 34% σε ετεροζυγώτες (OR = 0,66, 95% CI: 0,47 – 0,92) και κατά 52% σε ομοζυγώτες CC (OR = 0,48, 95% CI: 0,33 – 0,72)

.

Συμπέρασμα

Τα αποτελέσματά μας δείχνουν συσχέτιση του rs4939827 με κίνδυνο ορθοκολικού καρκίνου στο κροατικό πληθυσμό. Η υψηλότερη αντοχή του συνδέσμου σε σύγκριση με άλλες μελέτες δείχνουν πληθυσμό-ειδικών περιβαλλοντικών ή γενετικοί παράγοντες μπορεί να τροποποιεί το καταστατικό. Οι περισσότερες μελέτες για να περιγράψουν περαιτέρω το ρόλο του rs4939827 στο CRC. Πιθανή αιτία για την αποτυχία της αντιγραφής για άλλες 3 θέσεις είναι ανεπαρκής δύναμη μελέτη

Παράθεση:. Κιράτς Ι, Matosevic P, Augustin G, Σιμούνοβιτς Ι, Hostić V, Zupančič S, et al. (2013) Smad7 Παραλλαγή rs4939827 συνδέεται με καρκίνο του παχέος εντέρου Κινδύνου στο κροατικό πληθυσμό. PLoS ONE 8 (9): e74042. doi: 10.1371 /journal.pone.0074042

Επιμέλεια: Xiaoping Miao, MOE Βασικά Εργαστήριο Περιβάλλοντος και Υγείας, τη Σχολή Δημόσιας Υγείας, Tongji Medical College, Huazhong Πανεπιστήμιο Επιστήμης και Τεχνολογίας, η Κίνα

Ελήφθη: 29 Μάη του 2013? Αποδεκτές: 24 Ιούλη 2013? Δημοσιεύθηκε: 16 Σεπτέμβρη 2013

Copyright: © 2013 Κιράτς et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) επηρεάζει πάνω από ένα εκατομμύριο ανθρώπους. σε όλο τον κόσμο κάθε χρόνο [1]. Είναι η τρίτη πιο κοινή μορφή καρκίνου και η τέταρτη κύρια αιτία θνησιμότητας από καρκίνο [2]. Ενώ παχέος θνησιμότητα από καρκίνο έχει μειωθεί τις τελευταίες δύο δεκαετίες στην Ευρώπη [3], η αύξηση τόσο της θνησιμότητας και εμφάνισης έχει αναφερθεί για την Κροατία [4]. Σε σύγκριση με άλλες ευρωπαϊκές χώρες, η Κροατία κατατάσσεται 4

ου για τη θνησιμότητα σε άνδρες (ποσοστό ηλικίας-τυποποιημένο, ASR: 25,4 /100.000) και τις γυναίκες (ASR: 13,1 /100.000), αλλά σύμφωνα με CRC συχνότητα αυτή κατατάσσεται 9

ου στους άνδρες (ASR: 44,4 /100.000) και 15

ου στις γυναίκες (ASR: 24,3 /100.000) [5]. Καρκίνο του παχέος εντέρου είναι η δεύτερη πιο κοινή μορφή καρκίνου και 2η συχνότερη αιτία θανάτου από καρκίνο στην Κροατία [6]. Προγράμματα προσυμπτωματικού ελέγχου έχουν ξεκινήσει σε εθνικό επίπεδο το 2005, η πλήρης αντίκτυπός τους αναμένεται ακόμη [7].

Έχει υπολογιστεί ότι πάνω από το 30% της διακύμανσης του ορθοκολικού καρκίνου ευαισθησία οφείλεται σε γενετικούς παράγοντες και την πλειοψηφία των Αυτό φαίνεται να οφείλεται σε πολλαπλές μεταλλάξεις χαμηλού κινδύνου [8]. Μέχρι σήμερα, το γονιδίωμα-ευρεία μελέτες συσχέτισης (GWAS) έχουν εντοπιστεί 20 ανεξάρτητες πολυμορφισμούς μονών νουκλεοτιδίων (SNP) που σχετίζεται με ορθοκολικό κίνδυνο καρκίνου [9-15].

Είναι γνωστό ότι η συνεισφορά των αλληλομόρφων κινδύνου για CRC κίνδυνο μπορεί να ποικίλει μεταξύ των πληθυσμών, για παράδειγμα λόγω συχνότητες αλληλίου ή ειδικές ανισορροπία (LD) δομή δεσμού, ή λόγω της ιδιαίτερης γενετικών και περιβαλλοντικών υπόβαθρα μπορούν να τροποποιήσουν την επίδραση των παραλλαγών [16,17]. Κατανόηση διαφορική αποτελέσματα σε διαφορετικούς πληθυσμούς μπορεί να βοηθήσει στην αποκάλυψη του μηχανισμού της νόσου, και είναι σημαντικό για τη μετάφραση των αποτελεσμάτων πρόβλεψης σε διαφορετικούς πληθυσμούς κινδύνου.

Ο ρόλος των τόπων κινδύνου ορθοκολικού εμφάνισης καρκίνου είναι σε μεγάλο βαθμό ανεξερεύνητη στο κροατικό πληθυσμό. Στο έγγραφο αυτό, στόχος μας ήταν να διερευνήσει το ρόλο των τόπων τέσσερις κινδύνου:. Rs4939827, rs10795668, rs3802842 και rs16892766, σε κίνδυνο ορθοκολικού καρκίνου στο κροατικό πληθυσμό

Μέθοδοι

Κατά την περίοδο από το Νοέμβριο 2008 έως τον Ιούλιο του 2009, συνολικά 338 παχέος περιπτώσεων καρκίνου είχαν προσληφθεί σε τμήματα της χειρουργικής επέμβασης σε δύο νοσοκομεία στο Ζάγκρεμπ, Κροατία. Παρά το γεγονός ότι και οι δύο βρίσκονται στο Ζάγκρεμπ, αυτά τα νοσοκομεία τριτοβάθμιας περίθαλψης προσέλκυση ασθενών από όλη τη χώρα. Τα στοιχεία σχετικά με την ηλικία κατά τη διάγνωση, το φύλο, την ιστολογία του όγκου και ΤΝΜ στάδιο συλλέχθηκαν από τα ιατρικά αρχεία των ασθενών CRC »και τις εκθέσεις ιστοπαθολογία. Δεκαοκτώ περιπτώσεις αποκλείστηκαν από την ανάλυση επειδή διάγνωση του αδενοκαρκινώματος δεν επιβεβαιώθηκε στην έκθεση ιστοπαθολογία. Μετάσταση προσδιορίζονται διεγχειρητικά ή να επιβεβαιώνεται από τις μεθόδους απεικόνισης κρίθηκαν κατά την αξιολόγηση της εξέλιξης της νόσου. Ορθοκολικό καρκίνο περιπτώσεις ταξινομήθηκαν σε στάδια σύμφωνα με την αμερικανική μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο (AJCC) 7η έκδοση [18].

594 έλεγχοι επιλέχθηκαν από τη μελέτη των ’10, 001 σκυλιά της Δαλματίας », σε συνεχή γενετική μελέτη στην Κροατία. Η μελέτη αυτή περιλαμβάνει περίπου τρεις χιλιάδες άτομα από τον γενικό πληθυσμό του Σπλιτ και από Vis και Korčula Νησιά στην Κροατία. Έλεγχοι επιλέχθηκαν τυχαία, αλλά με περιορισμούς όσον αφορά την ηλικία (+/- 5 έτη) και το φύλο. Οι συμμετέχοντες με την προσωπική ιστορία του κακοήθους νόσου αποκλείστηκαν από την ομάδα ελέγχου.

ενημέρωση δόθηκε η συγκατάθεση εγγράφως από όλους τους συμμετέχοντες. Η μελέτη εγκρίθηκε από τις αρμόδιες επιτροπές δεοντολογίας: η Επιτροπή Δεοντολογίας του Πανεπιστημίου του Σπλιτ Ιατρική Σχολή και Ηθική Διοικητικού Συμβουλίου της milosrdnice Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Κέντρο Sestre

Κατά την πρόσληψη, δείγμα περιφερικού αίματος συλλέχθηκαν από κάθε θέμα και αποθηκεύονται. σε EDTA επικαλυμμένα φιαλίδια. DNA εκχυλίζεται με τη χρήση τυποποιημένων διαδικασιών. Σε περιπτώσεις, παραλλαγές rs4939827, rs3802842, rs10795668 και rs16892766 γονότυπος χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία TaqMan SNP γονότυπου. δείγματα DNA των ελέγχων ήταν ο γονότυπος σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή για την Illumina Infinium SNP μικροσυστοιχίες χάντρα (HumanHap300v1 ή HumanCNV370-Quad). Γονότυποι προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό Illumina BeadStudio. Δείγματα με συντελεστή χαμηλότερο του 97% εξαιρέθηκαν. Παραλλαγές rs4939827 και rs3802842 και εκπροσωπήθηκαν στη συστοιχία και ο γονότυπος άμεσα, ενώ rs10795668 και rs16892766 καταλογίστηκαν. Καταλογισμό σε σχέση με HapMap CEU χτίσει 36 απελευθέρωση 22 πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το v1.0.15 MACH λογισμικού μετά τον αποκλεισμό του SNP με MAF & lt? 0,01, καλέστε το ποσοστό & lt? 98% και HWE απόκλιση p & lt? 10-6. ποιότητας καταλογισμό ήταν 99% για rs10795668 και 98% για rs16892766.

Στατιστική Ανάλυση

λογισμικό R χρησιμοποιήθηκε για τις αναλύσεις και R πακέτο GenABEL χρησιμοποιήθηκε για το χειρισμό των γενετικών δεδομένων. χ

2 τεστ που χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση αποκλίσεις από την ισορροπία Hardy-Weinberg. Την ηλικία και το φύλο προσαρμοσμένο ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης της CRC για τη δοσολογία αλληλόμορφο (0, 1 ή 2) διεξήχθη για να εκτιμηθεί η συσχέτιση μεταξύ τεσσάρων παραλλαγών και κίνδυνο ορθοκολικού καρκίνου, με την παραδοχή του πρόσθετου γενετικού μοντέλου. Πολλαπλές δοκιμές διορθωθεί

P

-τιμή του

P

& lt? 0,0125 θεωρήθηκε εκπρόσωπος της στατιστικής σημαντικότητας.

Αποτελέσματα

Ένα σύνολο 320 (40% γυναίκες) του παχέος περιπτώσεις καρκίνου και 594 (45% γυναίκες) μάρτυρες συμπεριλήφθηκαν στην παρούσα μελέτη. Η μέση ηλικία των περιπτώσεων ήταν 68,91 ± 10,08 y και των ελέγχων 66.12 ± 10.23 y. Όπου θέση του όγκου ήταν γνωστή, το 56% των περιπτώσεων καρκίνου του παχέος εντέρου είχαν και 44% είχαν πρωκτική ή rectosygmoid όγκου. Πλειονότητα των περιπτώσεων είχαν νόσο σε AJCC στάδια 2 και 3 (33% και 42%, αντίστοιχα). Τα χαρακτηριστικά των περιπτώσεων και ελέγχων αναλύονται στον πίνακα 1.

Μεταβλητή

υποθέσεις

Έλεγχοι

Αριθμός

320 (35%)

594 (65%)

Sex

Η Male192 (60%) 324 (55%) Female128 (40%) 270 (45%) Ηλικία (έτη) 68,91 ± 10.0866.12 ± 10.23AJCC stageI56 (18%) II107 (33 %) III134 (42%) IV21 (7%) Unknown2 (1%) Total320 (100%) SiteColon128 (40%) rectosigmoid7 (2%) Rectum94 (29%) unknown91 (28%) Total320 (100%) Το μέγεθος του όγκου ( cm) 5,0 ± 2.1range (κόμβοι cm) 1-13Lymph

aSampled15 (ΙΟΚ: 14-19) θετικά (%) 5 (IQR: 0-27) θετικά (%, αν 0 θετικά) 27 (ΙΟΚ: 12- 49) Πίνακας 1. Χαρακτηριστικά του πληθυσμού της μελέτης.

AΕπιτρέπεται να περιπτώσεων με 12 ή περισσότερων λεμφαδένων δειγματοληψία περιλαμβάνονται (Ν = 156) CSV Λήψη CSV

και οι τέσσερις παραλλαγές σύμφωνη με την ισορροπία Hardy-Weinberg. Στα ολοκλήρου του δείγματος (περιπτώσεις και έλεγχοι) συχνότητα αλληλόμορφου του Τ αλληλίου ήταν 49,55%. Στο μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης βρήκαμε στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ rs4939827 και του κινδύνου CRC. Το ποσοστό του καθενός από τους γονότυπους rs4939827 CC, CT και TT ήταν 29%, 49% και 22% σε ελέγχους, αντίστοιχα, και το 21%, 47% και 32% στις περιπτώσεις, αντίστοιχα. C αλληλόμορφο συσχετίστηκε με μειωμένο κίνδυνο, αναλογία πιθανοτήτων (OR) ήταν 0,70 (95% CI: 0,57 – 0,85, P = 3.5E-4). Σε σύγκριση με το TT ομοζυγώτες, ο κίνδυνος ήταν σημαντικά μειωμένος κατά 34% σε ετεροζυγώτες (OR = 0,66, 95% CI: 0,47 – 0,92) και κατά 52% σε ομοζυγώτες CC (OR = 0,48, 95% CI: 0,33 – 0,72) (Πίνακας 2 ).

SNP

γονότυπους

περιπτώσεις

ελέγχους

επίδραση αλληλόμορφο

Ή

95% CI:

P

rs10795668AA/AG/GG34/123/14848/276/270A0.990.80-1.230.93unknown150rs16892766AA/AC/CC248/42/1502/86/6A1.060.73-1.540.74unknown290rs3802842AA/AC/CC132/122/17280/252/62A1.150.92-1.450.23unknown490rs4939827CC/CT/TT63/143/96172/291/131C0.70.57-0.853.5×10-04unknown180Table 2. Η σύνδεση μεταξύ παραλλαγές rs10795668, rs16892766, rs3802842 και rs4939827 και του παχέος εντέρου στο κροατικό πληθυσμό.

CSV Λήψη CSV

Είμαστε δίπλα διερευνήθηκε η σχέση μεταξύ γονότυπων στο rs4939827, rs10795668, rs3802842 και rs16892766 και όγκου χαρακτηριστικά σε μια εποχή φύλο και προσαρμόζονται πολυμεταβλητή μοντέλο γραμμικής παλινδρόμησης. Δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική συσχέτιση παρατηρήθηκε μεταξύ επιλεγμένων παραλλαγές και τα ακόλουθα χαρακτηριστικά των όγκων:. AJCC στάδιο, το βαθμό του όγκου, το μέγεθος του όγκου ή της αναλογίας των θετικών λεμφαδένων

Συζήτηση

Στη μελέτη αυτή βρήκαμε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ της Smad7 παραλλαγή rs4939827 (18q21.1) και τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου στο κροατικό πληθυσμό. Σε σύγκριση με ομοζυγώτες CC, κίνδυνος αυξήθηκε κατά 58% σε ετεροζυγώτες (CT) και κατά 111% σε ΤΤ ομοζυγώτες.

Ο μηχανισμός με τον οποίο μπορεί να επηρεάσει rs4939827 ορθοκολικό καρκίνο εμπλέκει ανασταλτικό ρόλο της πρωτεΐνης Smad7 στην ανάπτυξη μεταμόρφωσης συντελεστή βήτα (TGF-β) σηματοδότηση μονοπατιού [19,20]. μονοπάτι TGF-β ρυθμίζει την αναστολή της ανάπτυξης και την απόπτωση και παίζει σημαντικό ρόλο στην έναρξη του καρκίνου και προόδους [21,22].

Σε μια περιεκτική μετα-ανάλυση, έχουμε δείξει στο παρελθόν μια πολύ υψηλή αξιοπιστία της σύνδεσης μεταξύ rs4939827 και του παχέος εντέρου [23]. Ωστόσο, στις προηγούμενες μελέτες που αναφέρονται μεγέθη επίδρασης ήταν στο μεγαλύτερο μέρος ασθενέστερη από ό, τι παρατηρήθηκε στο κροατικό πληθυσμό (OR

ανά Τ = 1,43). Σε μία συνδυασμένη μετα-ανάλυση [23], βρήκε μια Ή 1,15 (95% CI: 01.08 – 01.23) και [24] βρήκε μια Ή 1,18 (95% CI: 1.14 – 1.22). Όπως αντανακλάται στο επικαλυπτόμενα διαστήματα εμπιστοσύνης, μέγεθος επίδραση που παρατηρούμε δεν είναι σημαντικά διαφορετική από ό, τι έχει προηγουμένως αναφερθεί. Ωστόσο, τα στοιχεία ετερογένειας μεταξύ των μελετών υπάρχει, και επιπλέον μεγαλύτερες μελέτες που απαιτούνται για να διαπιστωθεί αν διαφορετικές εκτιμήσεις του κινδύνου να προκύψουν λόγω της τυχαίας διακύμανσης, ή αντανακλούν τις πραγματικές διαφορές πληθυσμού.

Οι μελέτες όπου υψηλότερο ή αναφέρθηκαν περιλαμβάνουν [9] ο οποίος βρήκε μια Ή 1,37 (95% CI: 1,18 – 1,58) και [24], ο οποίος βρήκε μια Ή 1,57 (95% CI: 1,27 – 1,94) σε 641 περιπτώσεις και 1037 ελέγχους από την Κίνα [9,10,24] έκθεση υψηλή ή σε ισραηλινό πληθυσμό (OR = 1,48? 95% CI: 1,33 – 1,65), αλλά αυτό μπορεί να είναι, εν μέρει, λόγω της κακής ποιότητας του γονότυπου (του γονότυπου απέτυχε στο & gt? 20% των δειγμάτων και σημαντική απόκλιση από HWE ήταν αναφερθεί) [10]. Η αναπαραγωγή των σημάτων GWAS σε διαφορετικές εθνοτικές ομάδες είναι σημαντικό, καθώς η συχνότητα των ευπαθών αλληλόμορφα σε αυτές τις θέσεις μπορεί να διαφέρουν μεταξύ των παγκόσμιων πληθυσμών [25]. Οι συχνότητες αλληλόμορφου που παρατηρείται σε θέση rs4939827 στο κροατικό πληθυσμό (Τ συχνότητα αλληλόμορφο, AF

T = 49,6%) ήταν πολύ παρόμοια με εκείνη των άλλων ευρωπαϊκών πληθυσμών (CEU-AF

T = 44,7%? EUR-AF

T = 52,9%), ενώ ο επιπολασμός του Τ αλληλόμορφου είναι λιγότερο συχνή στις χώρες της Ασίας και της Αφρικής πληθυσμούς (ASN-AF

T = 25,9%? AFR-AF

T = 28,7%) (http: //www.ensembl.org).

Επιπλέον, μελέτες αναπαραγωγής μπορεί να βοηθήσει στον εντοπισμό του πληθυσμού ειδικούς περιβαλλοντικούς παράγοντες που τροποποιούν τη δράση των τόπων κινδύνου. Η σχετικά ισχυρή συσχέτιση μεταξύ της παραλλαγής Smad7 και CRC που αναφέρονται εδώ, αν επαληθευτεί, μπορεί να οφείλεται στην ιδιαίτερη γενετική ή /και περιβαλλοντικών φόντο ειδικά για κροατικό πληθυσμό. Αυτό το εύρημα εντάλματα μεγαλύτερες μελέτες για να διερευνήσει τη συσχέτιση περαιτέρω, όπως η κατανόηση της προέλευσης του ισχυρότερη επίδραση σε αυτό τον πληθυσμό μπορεί να βοηθήσει στην αποκάλυψη των μηχανισμών του παχέος εμφάνισης και εξέλιξης του καρκίνου, και μπορεί στη συνέχεια να οδηγήσει σε μετάφραση των ευρημάτων σε πιο ακριβή πρόβλεψη του κινδύνου και καλύτερα ενημερωμένοι πρόληψη θα πρέπει να βρεθεί η αλληλεπίδραση με το περιβάλλον

απέτυχε να αναπαράγουν τις ενώσεις μεταξύ CRC κινδύνου και rs10795668, rs16892766 και rs3802842.? Ωστόσο, αυτό είναι μπορεί να οφείλεται στο σχετικά μικρό μέγεθος του δείγματος [26-29] Ομοίως, το μικρό μέγεθος του δείγματος μπορεί να είναι ο λόγος για τον οποίο αδυνατούν να αντιληφθούν σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ rs4939827, rs10795668, rs3802842 και rs16892766 και τα χαρακτηριστικά του όγκου (στάδιο AJCC, όγκου βαθμού, το μέγεθος του όγκου ή της αναλογίας των θετικών λεμφαδένων). Με την εξαίρεση του rs1321311, rs3824999 και rs5934683 [15], ο ρόλος των άλλων γνωστών τόπων κινδύνου CRC στην ευαισθησία στις CRC στο κροατικό πληθυσμό είναι διαφορετικά ανεξερεύνητο [9-14].

Περιορισμοί της μελέτης περιλαμβάνουν σχετικά μικρό μέγεθος του δείγματος που μπορεί να συνέβαλαν στην περιορισμένη δύναμη μας για να ανιχνεύσει αδύναμη ενώσεις. Δεύτερον, ενώ οι έλεγχοι ήταν κυρίως από το Σπλιτ και τα νησιά Βις και Korčula, περιπτώσεις ελήφθησαν δείγματα από την τριτοβάθμια νοσοκομεία στο Ζάγκρεμπ. Ωστόσο, αυτό δεν είναι ένα μείζον θέμα για τη μελέτη αυτή: πρώτον, Κροατικά πληθυσμού είναι μικρή και ομοιογενή? δεύτερον, Ζάγκρεμπ και Σπλιτ αντιπροσωπεύουν τα αστικά κέντρα που προσελκύουν μετανάστευση από άλλες περιοχές στην Κροατία, και, τέλος, οι ασθενείς θα αναζητήσουν θεραπεία στο Ζάγκρεμπ λόγω της ενδεχόμενης ανωτερότητα της υγειονομικής περίθαλψης, ανεξαρτήτως του τόπου κατοικίας τους.

Εν κατακλείδι, μια κοινή παραλλαγή rs4939827 συνδέεται με κίνδυνο ορθοκολικού καρκίνου στο κροατικό πληθυσμό. Κατανόηση διαφορική αποτελέσματα σε διαφορετικούς πληθυσμούς μπορεί να βοηθήσει στην αποκάλυψη του μηχανισμού της νόσου και είναι σημαντικό για την μετάφραση των αποτελεσμάτων να διακινδυνεύσει την πρόβλεψη σε διαφορετικούς πληθυσμούς.