Αφηρημένο

Στόχος

Οι περισσότεροι καρκίνοι του ενδομητρίου ανιχνεύονται νωρίς και έχουν καλή πρόγνωση, ενώ ορισμένες ενδομητρίου είναι εξαιρετικά επεμβατικές, μεταστάσεις νωρίς και να απαντήσετε υποβέλτιστα στη θεραπεία. Επί του παρόντος, κατάλληλα συστήματα μοντέλο για τη μελέτη η επιθετική φύση αυτών των όγκων λείπουν. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να δημιουργηθεί ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος ποντικού του ενδομητρίου όγκων που προέρχονται από ασθενείς με σκοπό να μελετήσει τα βιολογικά επιθετικά χαρακτηριστικά που διέπουν την εισβολή και τη μετάσταση.

Μέθοδοι

θραύσματα του ενδομητρίου καρκινικού ιστού ( 1,5 mm × 1,5 mm) από ασθενείς που υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση, μεταμοσχεύθηκαν κάτω από τη νεφρική κάψα του NOD

scid ποντίκια

γάμμα. Μετά από 6-8 εβδομάδες, οι όγκοι αποκόπηκαν και σειριακά μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια επιπλέον για τον πολλαπλασιασμό. Ανοσοϊστοχημική ανάλυση των όγκων έγινε για διάφορους καρκινικούς δείκτες.

Αποτελέσματα

τέσσερις περιπτώσεις διαφορετικών υποτύπων καρκίνου του ενδομητρίου αναπτύχθηκαν και αναπαράχθηκαν σε ποντικούς. Τρεις από τις τέσσερις περιπτώσεις όγκων εισβάλει στον νεφρών και να παρακείμενων οργάνων. Ενώ όλοι οι όγκοι εμφάνισαν ελάχιστη έως καθόλου χρώση για α υποδοχέα οιστρογόνου, χρώση υποδοχέα προγεστερόνης παρατηρήθηκε για μοσχεύματα όγκου. Επιπλέον, τα επίπεδα και τον εντοπισμό του Ε-καδερίνης, κυτοκερατίνης και βιμεντίνη μεταβάλλεται ανάλογα με τον υπότυπο. Τέλος, όλα τα ξενομοσχεύματα όγκου χρωματίζονται θετικά για ενεργοποιητή πλασμινογόνου ουροκινάσης ενώ ξενομοσχεύματα 3 όγκου, η οποία έδειξε επεμβατική χαρακτηριστικά, βάφονται θετικά για τον υποδοχέα ενεργοποιητή πλασμινογόνου ουροκινάσης.

Συμπέρασμα

ενδομητρίου όγκων που μεταμοσχεύονται κάτω από την νεφρική κάψα έκθεμα την ανάπτυξη, την εισβολή και την τοπική εξάπλωση. Οι όγκοι αυτοί μπορεί να διαδοθεί και να χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη επιθετικό καρκίνο του ενδομητρίου

Παράθεση:. Unno K, Ono Μ, Γουίντερ μ.Χ., Maniar KP, Ρβιητβΐ AS, Yu Υ, et al. (2014) Σύσταση του Ανθρώπου από ασθενείς με καρκίνο του ενδομητρίου ξενομοσχεύματα σε NOD

SCID

Gamma Ποντίκια για τη Μελέτη της διήθησης και μετάστασης. PLoS ONE 9 (12): e116064. doi: 10.1371 /journal.pone.0116064

Συντάκτης: Eric Asselin, Πανεπιστήμιο του Κεμπέκ στο Trois-Rivieres, Καναδάς

Ελήφθη: δέκατης Ιουλίου 2014? Δεκτές: 1 Δεκ 2014? Δημοσιεύθηκε: 26 Δεκ 2014

Copyright: © 2014 Unno et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. National Cancer Institute RO1CA155513. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του ενδομητρίου είναι η τέταρτη πιο συχνή κακοήθης όγκος των γυναικών στις Ηνωμένες Πολιτείες, με περίπου 49.500 νέες περιπτώσεις και 8.200 θανάτους το 2013 [1]. Υπάρχουν δύο τύποι του ενδομητρίου καρκίνων κατηγοριοποιούνται ως Τύπου Ι και Τύπου II, ανάλογα με ιστολογικές και κλινικές εκβάσεις. Τύπος Ι που εμφανίζεται σε περίπου 75% -85% των περιπτώσεων του καρκίνου του ενδομητρίου συνδέεται με ομόφωνα δράση των οιστρογόνων με παράγοντες κινδύνου όπως η παχυσαρκία, ανωορρηξία, και το σύνδρομο των πολυκυστικών ωοθηκών. Τύπος 1 όγκοι είναι αδενοκαρκινώματα, επίσης ονομαστεί ενδομητριοειδές καρκίνο του ενδομητρίου (ΕΟΚ) [2]. ΕΟΚ χαρακτηρίζεται από μία ποικιλία γενετικών αλλοιώσεων, συμπεριλαμβανομένων ΡΤΕΝ, β-κατενίνης, PIK3CA, ARID1A, KRAS και μεταλλάξεις ARID5B [3]. καρκίνοι τύπου II περιλαμβάνουν ορώδες καρκίνωμα, σαφές καρκίνωμα, κακώς διαφοροποιημένο, βαθμού 3 ενδομητριοειδές καρκίνωμα, και καρκινοσάρκωμα ή κακοήθη μικτό του Muller όγκου (MMMT). Αυτοί οι καρκίνοι έχουν χειρότερη πρόγνωση και αντιπροσωπεύουν το 40% των θανάτων που οφείλονται σε καρκίνο του ενδομητρίου [4], [5]. Μήτρας ορώδης καρκίνωμα (USC) είναι μια πολύ επιθετική βλάβη στην οποία η επιθηλιακή μορφολογία είναι παρόμοια με των ωοθηκών ορώδες καρκίνωμα [6]. USC τείνει να εξαπλωθεί εκτενώς στην αγγειακούς χώρους και μέσα από το μυομήτριο [4]. Οι όγκοι αυτοί συνήθως εξαπλωθεί στα κοιλιακή χώρα και στους λεμφαδένες [7]. Το πιο αξιοσημείωτο γενετική μεταβολή USC είναι μετάλλαξη ρ53, η οποία εμφανίζεται σε περίπου 90% των περιπτώσεων [3]. Η μετάλλαξη ρ53 που οδηγεί σε πρωτεΐνη υπερέκφραση θεωρείται ότι είναι ένα πρώιμο συμβάν του USC καρκινογένεσης, και MSI ή μετάλλαξη ΡΤΕΝ δεν είναι τόσο διαδεδομένη [3].

Μέχρι σήμερα, ξενομόσχευμα μελέτες καρκίνου του ενδομητρίου έχουν περιοριστεί σε υποδόρια και ορθοτοπική (μήτρας) ενέσεις αθανατοποιημένες κυτταρικές σειρές [8] – [12]. Ενώ η αύξηση του υποδόριου ξενομοσχευμάτων μπορεί να παρακολουθείται εύκολα σε ένα μη επεμβατικό τρόπο, ξενομοσχεύματα σε ορθοτοπική ή άλλες έκτοπες θέσεις μέσα στην κοιλότητα του σώματος παρέχουν ένα διαφορετικό μικροπεριβάλλον για όγκους να αναπτυχθούν, συχνά επιτρέποντας την καλύτερη ανάπτυξη, την επιβίωση και αγγείωση. Το νεφρό της NOD

SCID

γάμμα είναι ένα site που έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως για μεταμόσχευση ιστού, διότι το όργανο αυτό παρέχει υψηλού επιπέδου των ποσοστών του αίματος και τη ροή της λέμφου, και μια θετική πίεση διάμεσο υγρό [13]. Κύτταρα και ιστοί από καλοήθεις και κακοήθεις ιστούς έχουν επιτυχώς μπολιασμένα κάτω από τη νεφρική κάψα σε αυτά τα ποντίκια. Αυτές περιλαμβάνουν την ανθρώπινη ενδομητρίου και των ινομυωμάτων ιστούς [14] – [16]., Ο καρκίνος του προστάτη, ιστούς του μαστού [17], [18], οι ιστοί του όγκου των ωοθηκών [19], [20]

Ως εκ τούτου, οι στόχοι της Αυτή η μελέτη ήταν να καθιερώσει και να διαδίδονται οι όγκοι από την πρωτοβάθμια προχωρημένο καρκίνο του ενδομητρίου κάτω από την κάψα του νεφρού του NOD

SCID ποντίκια

γάμμα και για τον χαρακτηρισμό των όγκων με τη χρήση διαφόρων δεικτών για τον υπότυπο του όγκου, EMT, στεροειδών υποδοχέων, και την εισβολή.

Υλικά και Μέθοδοι

συλλογή ιστών

ενδομητρίου όγκοι ελήφθησαν από γυναίκες που υποβάλλονται σε υστερεκτομή στο Memorial Hospital Northwestern. Οι ασθενείς με την προϋπόθεση γραπτή συναίνεση πριν από την επέμβαση. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ανθρωπίνων Θέμα του Πανεπιστημίου Northwestern, σύμφωνα με το Τμήμα Υγειονομικού Κανονισμού ΗΠΑ.

υπονεφρικής μεταμόσχευση ανθρώπινων πρωτογενών ενδομητρίου καρκινικούς ιστούς

Όλες οι διαδικασίες που αφορούν τα ζώα είχαν εγκριθεί από το Northwestern University του Animal Care και της Επιτροπής Χρήση (πρωτόκολλο # 2012-2867). Όλες οι χειρουργικές διαδικασίες διεξήχθησαν κάτω από αναισθησία με ενδοπεριτοναϊκή ένεση κεταμίνης /ξυλαζίνης (90/8 mg /kg) και όλες οι προσπάθειες έγιναν για να ελαχιστοποιήσουν την ταλαιπωρία. Ενήλικα θηλυκά NOD

scid

γάμμα (NSG) ποντίκια (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ΜΕ), υποβλήθηκαν σε ωοθηκεκτομή (OVX) και συμπληρωμένο με ή χωρίς 0,36 mg Ε2 σε μορφή σφαιριδίων απελευθέρωσης 90-ημερών (Innovative Research της America Inc., Sarasota, FL) που εμφυτεύθηκαν υποδορίως. Ενδομητρίου θραύσματα ιστού του όγκου ελήφθησαν από ασθενείς μετά από χειρουργική επέμβαση. Οι όγκοι κόπηκαν σε μικρά θραύσματα (1,5 mm × 1,5 mm) και μπολιασμένα κάτω από τη νεφρική κάψα του ενήλικα θηλυκά ποντίκια NSG (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ΜΕ) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [14]. Δύο θραύσματα ανά νεφρό μεταμοσχεύθηκαν στο πρόσθιο και το ουραίο πλευρές και χρησιμοποιήθηκαν δύο νεφρών. Μετά από 6-8 εβδομάδες μεταμόσχευση, οι όγκοι αφαιρέθηκαν, κόπηκαν σε μικρότερα θραύσματα (1,5 mm × 1,5 mm) και στη συνέχεια μεταμοσχεύονται κάτω από την νεφρική κάψα των ποντικών NSG για σειριακή πολλαπλασιασμό. Ξενομοσχεύτηκε ιστοί σημάνθηκαν ως δίοδος 0 (P0), Ρ1, Ρ2, κλπ, ανάλογα με τον αριθμό των περασμάτων από το αρχικό όγκο. ιστοί όγκου σταθεροποιήθηκαν σε 10% ουδέτερη ρυθμισμένη φορμαλίνη που περιέχει 3.8% φορμαλδεΰδη (VWR International, West Chester, ΡΑ) και στη συνέχεια ενσωματωμένα σε παραφίνη για ιστολογική ανάλυση. Τμήματα του όγκου ήταν επίσης καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο ή κρυοσυντηρούνται και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C για επιπλέον ανάλυση.

Οι ποντικοί στεγάστηκαν σε μια εγκατάσταση φραγμού, η οποία είναι απαλλαγμένη παθογόνου, σε κλουβιά με εμπλουτισμό του περιβάλλοντος, και τρέφονται ακτινοβολημένα τρωκτικών Teklad διατροφή. Οι ποντικοί στεγάστηκαν επί 14 ώρες φως και 10 ώρες σκοτάδι κύκλο. Τα ποντίκια δόθηκαν αναλγητικά (μελοξικάμης) για τη διαχείριση του πόνου για δύο ημέρες μετά την χειρουργική επέμβαση και παρατηρούνται σε καθημερινή βάση για σημάδια δυσφορίας, όπως η επιβράδυνση της αναπνοής, η αποτυχία της περιποίηση και γούνας Ruffling και αδυναμία να ανταποκριθεί σε κλουβί υποκλοπών. Στο τέλος της εβδομάδας 6-8, τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία με CO

2 ακολουθούμενη από αυχενική εξάρθρωση.

Ανοσοϊστοχημεία

τομών εγκλεισμένων σε παραφίνη αποπαραφινοποιήθηκαν και χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας το κιτ Envision DAB HRP (Dako) ή αιματοξυλίνη και ηωσίνη (Η &? Ε). Τα ακόλουθα πρωτεύοντα αντισώματα χρησιμοποιήθηκαν για IHC? αντι-προγεστερόνης υποδοχέα 1:1000 (Dako, Cat # A0098), μονοκλωνικά αντι-οιστρογόνου υποδοχέα κουνελιού πολυκλωνικό α 1:5000 (Abgent, Cat # AJ1268a), μονοκλωνικά αρουραίου αντι-Κί67 1:31250 (Dako, Cat # M7249) , κατσίκα πολυκλωνικό αντι-CD31 1:1000 (Santa Cruz, Cat # Sc-1506), μονοκλωνικό ποντικού αντι-Ε-καδερίνης δύο παρα δέκα (BD Transduction Laboratories, Cat # 610181), μονοκλωνικό ποντικού αντι-Pan-κυτοκερατίνης (αναγνωρίζοντας κυτοκερατίνες 4, 5, 6, 8, 10, 13 και 18) 1:500 (Cell Signaling, Cat # 4545), μονοκλωνικά αντι-βιμεντίνης 1:2500 (Abcam, ab92547), μονοκλωνικά αντι-ρ53 1:160 (Cell Σηματοδοσίας, Cat # 2527), μονοκλωνικά αντι-ΡΤΕΝ 1:125 (Cell Signaling, Cat # 9188), μονοκλωνικό ποντικού αντι-υΡΑ δύο παρα δέκα (American Diagnostic GmbH, Cat # ADG3689). Για το αντίσωμα PTEN, SignalStain αραιωτικό αντισώματος για την αραίωση πρωτογενούς αντισώματος και SignalStain Boost (HRP, Rabbit) για την ανίχνευση από τη Cell Signaling χρησιμοποιήθηκαν. UPAR αντίσωμα (ATN-617 ποντικού) 1:300 παρασχέθηκε ευγενώς από τον Dr. Andrew Μαζάρ (Πανεπιστήμιο Northwestern). Μετά την επώαση του πρωτογενούς αντισωμάτων, τα πλακίδια ξεπλύθηκαν σε ΤΒδ-Τ και συγκεκριμένα είδη (αντι-κουνελιού, αντι-ποντικού και αντι-κατσίκας) δευτερεύον αντίσωμα συζευγμένο με δεξτράνη σημασμένο πολυμερές και υπεροξειδάση κοχλιαρίας εφαρμόστηκε και χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας διάλυμα DAB. Οι εικόνες συλλήφθηκαν σε μια Leica DM5000B μικροσκόπιο.

Κρυοσυντήρηση ξενομοσχευθέντος ιστών

θραυσμάτων ιστού του × μεγέθους 1,5 mm 1,5 mm (περίπου 10 τεμάχια ανά σωλήνα) τοποθετήθηκαν σε ένα διάλυμα 10% DMSO και 90% FBS και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C. θραύσματα του όγκου για ΕΟΚ4 αποψύχθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου, πλύθηκαν δύο φορές με PBS και αμέσως μπολιασμένα κάτω από τη νεφρική κάψα δύο ΟνΧ ποντίκια. Επτά εβδομάδες μετά τη μεταμόσχευση, τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ανατομή και την ανάπτυξη του όγκου αναλύθηκε.

Αποτελέσματα

Καθιέρωση ξενομοσχευμάτων κάτω από τη νεφρική κάψα

ενδομητρίου όγκοι ελήφθησαν από ένα σύνολο 11 ασθενών . Τέσσερις περιπτώσεις τύπου II της μήτρας ορώδες καρκίνωμα (USC), 1 περίπτωση τύπου ΙΙ της μήτρας καρκίνωμα σαφές κυττάρων (UCCC), 1 περίπτωση κακοήθους μικτών του Muller όγκου (MMMT), και 5 περιπτώσεις ενδομητριοειδές καρκίνωμα του ενδομητρίου (ΕΟΚ) μεταμοσχεύθηκαν κάτω από το νεφρική κάψα των ποντικών NSG. Μεταξύ αυτών των όγκων, USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4, που ιδρύθηκε και αναπτύχθηκε κάτω από τη νεφρική κάψα (Πίνακας 1). Οι ρυθμοί απορρόφησης εμφύτευση υπολογίστηκαν ως το ποσοστό του αριθμού των γραφικών παραστάσεων που μεγάλωσε από τον συνολικό αριθμό των μεταμοσχευμένων θραυσμάτων ιστού. USC1 και ΕΟΚ4 λάβει τα ποσοστά δεν διαφέρουν κατά πόσον η οιστραδιόλη ήταν παρόντες ή όχι στα ωοθηκεκτομή ποντίκια. Ο λάβει ποσοστό μεταμόσχευσης για MMMT1 ήταν υψηλότερη απουσία της οιστραδιόλης, ενώ ΕΟΚ2 είχαν υψηλότερα ποσοστά απορρόφησης με οιστραδιόλη, αποδεικνύοντας απόκλιση της εξάρτησης από τα οιστρογόνα για την ανάπτυξη. Γραφική αναπαράσταση των ξενομοσχευμάτων από τις 4 περιπτώσεις και αντιστοιχούν Η &? Χρώση Ε φαίνονται στα Σχ. 1 και 2. Οι ποντικοί που φέρουν ξενομοσχεύματα δεν εμφάνισαν ορατά σημάδια δυσφορίας κατά την διάρκεια της πειραματικής περιόδου χρόνου, παρά βαρύ φορτίο του όγκου σε ορισμένες περιπτώσεις. Επιπλέον, τα ποντίκια δεν πέθανε κατά τη διάρκεια των 6-8 εβδομάδων επώαση του όγκου.

Πρωτογενής ιστούς από μήτρας ορώδες καρκίνωμα (USC1), μεταμοσχεύτηκαν υπό την νεφρική κάψα του immunodefficient ωοθηκεκτομή (OVX) ποντίκια με σφαιρίδιο Ε2. Σε 6 έως 8 εβδομάδες μετά την μεταμόσχευση, όγκος συλλέχθηκε και κόβεται σε πολλαπλά 1,5 × 1,5 mm

3 τεμάχια, τα οποία μεταμοσχεύθηκαν κάτω από τη νεφρική κάψα (1-2 τεμάχια /νεφρού) για τη συνεχή διέλευση. Στο πέρασμα 3 (P3), ιστοί μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια ΟνΧ, με ή χωρίς Ε2. USC1 μοσχεύματα ιστών και H & amp? Οι Ε χρώσεις φαίνονται. Τ, όγκου? Κ, των νεφρών. μπαρ κλίμακα? 200 um.

Η

Α) Πρωτοβάθμια ιστούς από κακοήθη μικτό του Muller όγκου (MMMT1), μεταμοσχεύθηκαν κάτω από τη νεφρική κάψα των ποντικών NSG που ήταν ονχ με ή χωρίς Ε2. Σε 6 έως 8 εβδομάδες μετά την μεταμόσχευση, όγκος συλλέχθηκε και επανα-εμβολιασμένου σε άλλα ποντίκια (1-2 τεμάχια /νεφρό). Στη Ρ2, εισβολή MMMT1 ιστών να πάγκρεας φαίνεται. Β) Πρωτογενής ιστούς από αδενοκαρκίνωμα ενδομητριοειδές (ΕΟΚ2), μεταμοσχεύτηκαν υπό την νεφρική κάψα των Ονχ ποντικών με Ε2. Σε 6 έως 8 εβδομάδες μετά την μεταμόσχευση, όγκος συλλέχθηκε και επανα-εμβολιασμένου σε άλλα ποντίκια (1-2 τεμάχια /νεφρό). Στο Ρ4, ιστοί μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια ΟνΧ χωρίς E2 σφαιρίδιο. Στο Ρ1, εισβολή ιστών ΕΟΚ2 στη μήτρα παρουσιάζεται. C) Πρωτογενής ιστούς από αδενοκαρκίνωμα ενδομητριοειδές (ΕΟΚ4), μεταμοσχεύτηκαν υπό την νεφρική κάψα των Ονχ ποντίκια με ή χωρίς Ε2. Σε 6 έως 8 εβδομάδες μετά την μεταμόσχευση, όγκος συλλέχθηκε και επανα-εμβολιασμένου σε άλλα ποντίκια (1-2 τεμάχια /νεφρό). Στο Ρ3, την εισβολή των ιστών ΕΟΚ4 στη μήτρα εμφανίζεται. Αριστερά πλαίσια δείχνουν Η &? Ε χρώσεις πρωτογενών ιστών. Μέση πάνελ δείχνουν διόδου μοσχεύματα ιστών και H & amp? Ε χρώσεις. Δικαίωμα πίνακες δείχνουν την εισβολή των μοσχευμάτων ιστού και H & amp της? Ε χρώσεις. Τ, όγκου? Κ, των νεφρών? S, σπλήνα? P, το πάγκρεας? Peri, Περιτόναιου? U, Μήτρα? V, Vagina. μπαρ κλίμακα? 200 um.

Η

USC1 ελήφθη από έναν ασθενή με τελικό παθολογία διάγνωση του σταδίου Ι Α βαθμού 3 USC, με lymphovascular χώρο εισβολή (Lvsi). Ο ρυθμός απορρόφησης μεταμόσχευσης ήταν υψηλό για αυτόν τον ιστό με την αύξηση στην πλειονότητα των μοσχευμάτων (Πίνακας 2). Η ιστολογική εξέταση του όγκου στο νεφρό δεν αποκάλυψε σημαντική εισβολή στο νεφρό, με διακριτή σύνορα μεταξύ του νεφρού και του όγκου (Εικ. 1). Ανεξάρτητα από το αν η οιστραδιόλη ήταν παρούσα ή όχι, USC1 όγκοι αναπτύχθηκαν με παρόμοιο τρόπο (σχ. 1, Πίνακας 2).

Η

MMMT1 από ένα ασθενή με διάγνωση κακοήθη μικτό του Muller όγκου με Lvsi οδήγησε σε μεταμόσχευση λαμβάνουν ποσοστό 42% με την παρουσία οιστραδιόλης και 79% χωρίς οιστραδιόλη στα ποντίκια (Πίνακας 2). Επιπλέον, οι όγκοι ήταν μικρότερα σε ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με οιστραδιόλη σε σύγκριση με μη οιστραδιόλης (εικ. 2Α). Ορατή ανάπτυξη συνέβησαν έξω από το νεφρό και επίσης διεισδύσει στο νεφρό. Αξίζει να σημειωθεί ότι, οι όγκοι σε δεύτερη δίοδο έδειξε διείσδυση σε ολόκληρο το νεφρό, με τις τοπικές εξάπλωση και εισβολή στο πάγκρεας, η οποία στο ποντίκι είναι σε κοντινή απόσταση από το νεφρό (Σχ. 2Α, Πίνακας 3). Διάδοση Ρ2 όγκων σε ποντίκια με οιστραδιόλη είχε σαν αποτέλεσμα υποβέλτιστη ανάπτυξη, υποδεικνύοντας μία αρνητική επίδραση της Ε2 επί της ανάπτυξης MMMT1.

Η

ΕΟΚ2 προήλθε από έναν ασθενή με στάδιο ΙΑ βαθμού 2 ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα χωρίς Lvsi. όγκοι ΕΟΚ2 διαδόθηκαν σε Ονχ ποντίκια με εμφυτεύματα Ε2. Για τον προσδιορισμό της εξάρτησης Ε2, ιστούς στο πέρασμα 4 μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια ΟνΧ χωρίς Ε2. Ως αποτέλεσμα, μόνο 1 ιστών από τα 16 αυξήθηκε (Πίνακας 2). Η &? Χρώση Ε έδειξε νεκρωτικές περιοχές στον ιστό (Εικόνα 2Β).. Με την παρουσία της οιστραδιόλης, όγκους ΕΟΚ2 διείσδυσε στο νεφρό και την εξάπλωση τοπικά για να εγγύς όργανα συμπεριλαμβανομένης της μήτρας και του παγκρέατος με μια τοπική αναλογία εξάπλωση του 11,4% και 2,9%, αντίστοιχα (Σχ. 2Β, πίνακας 3). Τοπική αναλογία εξάπλωσης υπολογίστηκε ως το ποσοστό του αριθμού των εισέβαλαν οργάνων αποκλείοντας νεφρά από τον συνολικό αριθμό των μεταμοσχευμένων θραυσμάτων ιστού (1-2 τεμάχια /νεφρό).

ΕΟΚ4 προήλθε από έναν ασθενή με στάδιο IIIC2 βαθμού 3 ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα με εκτεταμένες Lvsi. Ο όγκος αυτός ήταν ο πιο επιθετική, με μια αναλογία μεταμόσχευση υιοθέτηση του 81% και 85%, με ή χωρίς οιστραδιόλη, και σημαντική εισβολή και την τοπική εξάπλωση σε γειτονικά όργανα. Tumor βρέθηκε στη μήτρα, σπλήνα, το ήπαρ, το πάγκρεας και περιτόναιο (Σχ. 2C, Πίνακας 3). Επιπλέον, μεταστατικών όγκων παρατηρήθηκαν στο ήπαρ (Πίνακας 3). Αριθ εξάρτηση Ε2 παρατηρήθηκε για την ανάπτυξη αυτού του όγκου όπως λάβει και να εξαπλωθεί ποσοστά ήταν παρόμοιες είτε Ε2 ήταν παρόν ή όχι. Για αυτόν τον όγκο αξιολογήσαμε επίσης αν κρυοσυντηρημένα όγκους θα μπορούσε να ξανά-πολλαπλασιάζονται. Μετά την απόψυξη, οι ιστοί μεταμοσχεύθηκαν κάτω από τη νεφρική κάψα σε δύο ποντίκια και 7 εβδομάδες αργότερα, ανάπτυξη του όγκου παρατηρήθηκε με παρόμοιες επεμβατικές και την εξάπλωση μοτίβα όπως τα αρχικά ξενομοσχεύματα.

Έκφραση των ER, PR, Κί67 και CD31

USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 ξενομοσχεύτηκε ιστούς, βάφτηκαν για τους υποδοχείς στεροειδών ορμονών, PR και ΕΡα, το δείκτη πολλαπλασιασμού, Κί67 και το CD31 ενδοθηλιακών κυττάρων δείκτη. Ενώ USC1 και ΕΟΚ2 είχε εστιακό χρώση στικτή PR σε συγκεκριμένες περιοχές του όγκου, MMMT1 και ΕΟΚ4 είχε ένα πιο διάχυτο πρότυπο χρώσης, με ΕΟΚ4 παρουσιάζουν ελάχιστη έως καθόλου χρώση. Σε ΕΟΚ2 ξενομοσχεύματα, PR εκφράστηκε ως επί το πλείστον στην περιοχή του μετώπου εισβολής στα νεφρά (Εικ. 3). επίπεδα ΕΡα ήταν χαμηλή για να απουσιάσει στο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 (Εικ. 3). Η πλειονότητα των κυττάρων ήταν θετικά για Ki67 σε USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 ιστούς, στις 6 εβδομάδες μετά τη μεταμόσχευση που δείχνει ενεργό πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων (Εικ. 3). χρώση CD31 ήταν διαδεδομένη εντός της ξενομοσχεύματος όγκου σε MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4, ειδικά στο μπροστινό εισβολή. Το επίπεδο της χρώσης CD31 σε USC1 ήταν χαμηλότερη σε σύγκριση με τους άλλους όγκους (Εικ. 3).

Η ανοσοχρώση για PR, Ετα, Ki67 και CD31 της USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 ξενομοσχεύτηκε ιστούς έγινε. Οι όγκοι από ποντίκια ΟνΧ (δεν Ε2) για USC1, MMMT1 και ΕΟΚ4 και με Ε2 για ΕΟΚ2 δείξει. USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 ιστοί βάφτηκαν στο χωρίο 3, 2, 1 και 0, respectivelyT, Tumor? Κ, των νεφρών. μπαρ κλίμακα? 200 um.

Η

Έκφραση κυτοκερατίνης, βιμεντίνη και Ε-καδερίνη

εισβολή και τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων που σχετίζονται με επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση (ΕΜΤ), όπου τα επιθηλιακά κύτταρα μπορεί να μετατρέψει σε κινητικά μεσεγχυματικά κύτταρα [21]. ξενομοσχεύματα όγκου χρωματίστηκαν για δείκτες EMT συμπεριλαμβανομένων κυτοκερατίνης, βιμεντίνη, και Ε-καδερίνη και σύγκριση με το κανονικό ενδομήτριο, υπερπλαστικό ενδομήτριο, και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου (Εικ. 4). Αδενικό επιθήλιο βάφονται έντονα θετικό για κυτοκερατίνη στην κανονική του ενδομητρίου, υπερπλασία και καρκίνος βαθμού 1 (Εικ. 4). Είναι ενδιαφέρον, USC1 ξενομοσχεύματα χρωματίστηκαν θετικά για κυτοκερατίνη στον πυρήνα, ενώ MMMT1 και ΕΟΚ2 εμφάνισαν κυτταροπλασματική χρώση και ΕΟΚ4 είχαν πολύ ασθενή ή καθόλου χρώση. Αμφότερα τα πρωτογενή και ξενομοσχεύτηκε ιστούς έδειξαν παρόμοια πρότυπα χρώσης με την εξαίρεση των USC1 όπου ξενομοσχευμάτων βάφονται ως επί το πλείστον στον πυρήνα για κυτοκερατίνη (Εικ. 4, S1 Εικ.).

Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για κυτοκερατίνη, βιμεντίνη και Ε -cadherin σε ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκων ΕΟΚ4 στο πέρασμα 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um.

Η

βιμεντίνης ήταν έντονα θετικά και στις δύο ξενομόσχευμα και πρωτογενείς ιστούς για USC1, ΕΟΚ2 και τους ιστούς ΕΟΚ4 καθώς και στρωματικά κύτταρα σε φυσιολογικά ενδομήτριο (Εικ. 4, S2 Εικ.). Βαθμός 1 καρκίνου του ενδομητρίου και η υπερπλασία ιστοί ήταν ασθενώς θετικά για βιμεντίνη και στα δύο κύτταρα επιθηλίου και των στρωματικών (S2 Εικ.). Το αδενικό συστατικό του MMMT1, δεν εμφάνισαν καμία χρώση για βιμεντίνη και στις δύο ξενομόσχευμα και πρωτογενείς ιστούς, ενώ το στρώμα ήταν θετική (Σχ. 4, S2 Εικ.).

χρώση Ε-καδερίνης στην κανονική και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 όγκων εντοπίζεται κυρίως στον αδενικό διαμέρισμα και εμφανίστηκε κυτταροπλασματική (Εικ. 4, S3 Εικ.). Σε αντίθεση, η πυρηνική χρώση Ε-καδερίνης παρατηρήθηκε στα ξενομοσχεύματα και πρωτογενείς όγκους του USC1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 ενώ MMMT1 παρουσίασαν σκοτεινό κυτταροπλασματική χρώση. Η έλλειψη Ε-καδερίνης στην επιφάνεια των κυττάρων που θα τροποποιούσε τις ιδιότητες προσκόλλησης των κυττάρων προώθησης μιας πιο κινητικό φαινότυπο.

Έκφραση των ρ53 και ΡΤΕΝ

Η επικρατέστερη γενετική μεταβολή σε USC εμφανίζεται σε το γονίδιο p53 σε περίπου 90% των περιπτώσεων [3]. Η μετάλλαξη στο ρ53 εκδηλώνεται συχνά ως μια αύξηση στα επίπεδα της πρωτεΐνης p53 [22]. Τα επίπεδα της πρωτεΐνης ρ53 ήταν μη ανιχνεύσιμα στους αδένες και το στρώμα των κανονικών και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου (S4 Εικ.). Παρομοίως, η χρώση p53 ήταν ελάχιστη να απουσιάζει σε MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 τόσο στις ξενομόσχευμα και πρωτογενείς όγκους (Σχ. 5, S4 Σχ.). Σε αντίθεση, χρώση p53 ήταν έντονα θετική το USC1 ξενομοσχεύτηκε και πρωτογενείς όγκους. Τύπος Ι ΕΟΚ χαρακτηρίζεται από μία ποικιλία γενετικών αλλοιώσεων με τις πιο διαδεδομένες μεταλλάξεις στο γονίδιο PTEN [3]. Όλα ξενομόσχευμα και πρωτογενείς όγκους χρωματίστηκαν για ΡΤΕΝ με την εξαίρεση των ΕΟΚ2 η οποία έδειξε ελάχιστη έως καθόλου χρώση στα κύτταρα όγκου (Εικ. 5, S5 Σχ.). Συγκριτικά, το αδενικό διαμέρισμα της υπερπλασίας και του βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου δεν έδειξε καμία χρώση του PTEN, ενώ η κανονική του ενδομητρίου χρωματίστηκαν για PTEN στους αδένες και το στρώμα (S5 Εικ.).

Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για p53, PTEN, υΡΑ και uPAR σε ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκων ΕΟΚ4 στο πέρασμα 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um.

Η

Η έκφραση του συστήματος ενεργοποιητή πλασμινογόνου ουροκινάσης (UPA)

UPA και του υποδοχέα της uPAR προωθεί την πρωτεόλυση που ενισχύει την ανάπτυξη του όγκου και την εισβολή. Τόσο UPA και uPAR έχουν δειχθεί να εκφράζεται σε προχωρημένους καρκίνους [23]. Όλα τα ξενομοσχεύματα όγκου και πρωτογενείς όγκους χρωματίστηκαν θετικά για UPA (Σχ. 5, S6 Σχ.). Ομοίως, η κανονική και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνο του ενδομητρίου, χρωματίστηκαν για UPA και στις δύο αδενικό και στρωματικά διαμερίσματα (S6 Εικ.). Αντίθετα, η χρώση για uPAR ήταν εμφανής στις επεμβατικές όγκους, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 με λίγη χρώση παρατηρήθηκε σε USC1 (Εικ. 5). επίπεδα uPAR απουσίαζαν στο βαθμό 1 του καρκίνου του ενδομητρίου και κανονικό ενδομήτριο (S7 Εικ.). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η έκφραση του υΡΑΚ μπορεί να συμβάλει στην επεμβατική φύση των ενδομήτριων όγκων στο σύστημά μας.

Συζήτηση

Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να διαπιστωθεί ξενομοσχευμάτων όγκου που προέρχεται ασθενής του πρωτογενούς καρκίνου του ενδομητρίου ιστών για τη συνέχιση της διάδοσης να παρέχει ένα μοντέλο για τη μελέτη εισβολή και τη μετάσταση. Αναφέρουμε εδώ δημιουργία όγκων από τέσσερις ασθενείς διαφορετικών ενδομητρίου τύπους καρκίνου και τους βαθμούς που δείχνουν απόκλιση επεμβατική και μεταστατική ικανότητα. Τα ξενομοσχεύματα διατηρούν τα χαρακτηριστικά του αρχικού όγκου και προβολής χαρακτηριστικά που είναι μοναδικά σε τύπου 1 ή τύπου ΙΙ καρκίνο του ενδομητρίου.

Όπως ενδομητρίου όγκους να γίνουν πιο επιθετικοί και ελάχιστα διαφοροποιημένη, έκφραση ορμονικών υποδοχέων, ER και PR μειώνεται, και ορμόνη ανταπόκρισής τους αλλάζει. Η εξάρτηση των μοσχευμάτων όγκου στο Ε2 καταδείχθηκε εδώ. USC1, MMMT1 και ΕΟΚ4 δεν απαιτούν Ε2 για μοσχεύματα για να αναπτυχθούν. Αυτό μπορεί να οφείλεται στα χαμηλά επίπεδα του ER στους όγκους. Σε αντίθεση, ΕΟΚ2 διατηρείται εξάρτηση Ε2 παρά τα χαμηλά επίπεδα ER ανιχνευθεί. Ε2 θα μπορούσε να είναι ένας συνδετήρας προς την G-πρωτεΐνη υποδοχέα 30 (GPR30), το οποίο υπερεκφράζεται σε υψηλό βαθμό καρκίνο του ενδομητρίου [24]. Επιπλέον, είναι πιθανό ότι GPR30 μεσολαβεί μη-μεταγραφικό επιδράσεις των οιστρογόνων επί της ενεργοποίησης των ΡΙ3Κ /Akt μονοπάτι σε αυτή του όγκου και την προώθηση της ανάπτυξης [25]. Είναι ενδιαφέρον ότι, ενώ όλοι οι τέσσερις ξενομοσχεύτηκε ιστοί ήταν Ετα χαμηλή σε αρνητικό, όλα τα μοσχεύματα όγκων εκφράζεται διαφορετικά επίπεδα του PR. Η PR κύτταρα που εκφράζουν του ΕΟΚ2 εντοπίστηκαν γύρω από το μπροστινό εισβολή του νεφρού. Ο λόγος για την έκφραση των PR στο συγκεκριμένο τομέα και το ρόλο της στην εισβολή παραμένει ασαφής. Στην πραγματικότητα, ο μηχανισμός δράσης της προγεστερόνης μέσω του υποδοχέα του στην προχωρημένη, επεμβατική ενδομήτριο καρκίνωμα είναι άγνωστη. Γονίδια που ρυθμίζονται από PR στην κανονική ενδομήτριο είναι διαφορετικές από εκείνες στις καρκίνο του ενδομητρίου [26]. Δεδομένης της πλειοτροπική δράση του PR που εξαρτάται από το κυτταρικό περιβάλλον [15], είναι πιθανό ότι PR θα μπορούσε να έχει τόσο Μεγέθυνση-, invasion- και metastasis- προαγωγή ή αναστολή δράσεις επί του κυττάρου όγκου. μοντέλο ξενομοσχεύματος ασθενής μας θα ήταν ένα χρήσιμο εργαλείο για να αποκρυπτογραφήσει το ρόλο της προγεστερόνης σε αυτούς τους όγκους.

Για τα καρκινικά κύτταρα να εισβάλουν, προσκόλληση κυττάρου-κυττάρου πρέπει να χαθεί για την απόκτηση των κυττάρων κινητικότητα και να ξεφύγει από τον όγκο ιστός. EMT εμπλέκεται στη διάδοση των μεμονωμένων καρκινικών κυττάρων από ιστούς πρωτογενή καρκίνωμα, είτε παροδικά είτε σταθερά [27], [28]. Απώλεια της Ε-καδερίνης είναι το αρχικό βήμα της ΕΜΤ, επιτρέποντας την εισβολή και τη μετάσταση σε πολλά καρκινώματα. Σε USC1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4, Ε-καδερίνης εντοπίστηκε στον πυρήνα ενώ MMMT1, βαθμός 1 του καρκίνου του ενδομητρίου, υπερπλασία, και η κανονική ενδομητρίου παρουσίασαν σκοτεινό κυτταροπλασματική χρώση. Μελέτες έχουν δείξει πυρηνικό εντοπισμό του Ε-καδερίνης σε καλοήθεις και κακοήθεις όγκους [29], [30]. Οι διασπασμένων θραυσμάτων Ε-καδερίνης έχουν αναφερθεί ότι μετατοπίζονται στον πυρήνα [31]. Απώλεια των ανέπαφων διαμεμβρανικών Ε-καδερίνης θα μειωθεί αναπόφευκτα κύτταρο σε κυτταρική προσκόλληση.

Ο ενεργοποιητής πλασμινογόνου ουροκινάσης συστήματος (UPA) μπορεί να προκαλέσουν αποδόμηση της εξωκυττάριας μήτρας, την ενίσχυση της αγγειογένεσης και να οδηγήσει σε εισβολή και τη μετάσταση [32]. Υπάρχουν λίγα είναι γνωστά για το σύστημα UPA στον καρκίνο του ενδομητρίου. Προηγουμένως εντοπίσαμε αυξημένη έκφραση UPA mRNA σε ένα μήτρας ορώδες κυτταρική γραμμή καρκινώματος (SPEC2) σε σύγκριση με την κυτταρική γραμμή καρκινώματος χαμηλής ποιότητας ενδομητριοειδές (Ishikawa) [33]. Ο υποδοχέας uPAR έχει αποδειχθεί ότι είναι παρόντες σε υψηλότερα επίπεδα σε ασθενείς με επιθετική και αργά καρκίνους ενδομητρίου στάδιο [32], [34]. Στη μελέτη μας, η χρώση UPA παρατηρήθηκε σε όλες τις όγκους δοκιμάστηκαν ενώ uPAR εκφράστηκε στους όγκους που εισέβαλαν μέσω των νεφρών και των τοπικών οργάνων που υποδηλώνει ότι υΡΑΚ μπορούσαν να έχουν ως στόχο να αναστέλλουν την εισβολή σε προχωρημένο καρκίνο του ενδομητρίου.

Συνοπτικά , έχουμε δημιουργήσει με επιτυχία και πολλαπλασιάζονται ασθενή που προέρχεται ενδομητρίου όγκων από 4 περιπτώσεις τη χρήση του νεφρικού συστήματος ξενομοσχευμάτων κάψουλα. Αυτό το μοντέλο θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για τη δοκιμή νέες ενώσεις, καθώς και συνδυαστικές θεραπείες και είναι ανώτερη από τα συμβατικά μοντέλα ξενομοσχεύματος κυτταρικής γραμμής. Επιπλέον, η βιολογία του όγκου μπορεί εύκολα να εκτιμηθεί για τον εντοπισμό προγνωστική δείκτες για τις αποκρίσεις σε θεραπευτικά σχήματα τα οποία σήμερα δεν υπάρχει για τις προηγμένες και υποτροπιάζοντα καρκίνο του ενδομητρίου. Παρά την καλή πρόγνωση που σχετίζεται με τον καρκίνο του βαθμού χαμηλή ενδομητρίου, ειδικά όταν ανιχνευθεί νωρίς, οι προχωρημένες περιπτώσεις είναι θανατηφόρες με πολύ λίγα για να μην αποτελεσματικές θεραπείες για την ασθένεια αυτή. Μελετώντας όγκων των ασθενών ως ξενομοσχεύματα θα παρέχει την τόσο αναγκαία πληροφορίες για να βελτιώσει τις θεραπείες για επιθετικό καρκίνο του ενδομητρίου.

Υποστήριξη Πληροφορίες

S1 Εικ.

Cytokeratin στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για βιμεντίνη σε πρωτογενείς και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 όγκων σε δίοδο 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s001

(TIFF)

S2 Εικ.

βιμεντίνης στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για βιμεντίνη σε πρωτογενείς και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 όγκων σε δίοδο 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s002

(TIFF)

S3 Εικ.

E-cadherin στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για Ε-καδερίνης σε πρωτογενείς και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκων ΕΟΚ4 στο πέρασμα 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s003

(TIFF)

S4 Εικ.

p53 στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για ρ53 στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και ΕΟΚ4 όγκων σε δίοδο 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s004

(TIFF)

S5 Εικ.

PTEN στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για ΡΤΕΝ στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκων ΕΟΚ4 στο πέρασμα 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Τα βέλη δείχνουν PTEN θετικών κυττάρων στην ΕΟΚ 2. Κ, των νεφρών? Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s005

(TIFF)

S6 Εικ.

UPA στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για UPA στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκους ΕΟΚ4 στο πέρασμα 3, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για κανονικά και υπερπλαστικών ενδομητρίου και βαθμού 1 καρκίνου του ενδομητρίου ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s006

(TIFF)

S7 Εικ. επίπεδα

uPAR στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχεύτηκε ιστούς. Η ανοσοϊστοχημική χρώση έγινε για uPAR στην πρωτοβάθμια και ξενομοσχευμένο USC1, MMMT1, ΕΟΚ2 και όγκων ΕΟΚ4 στο πέρασμα 5, 1, 1 και 0, αντίστοιχα. Χρώση έγινε για την κανονική του ενδομητρίου και του βαθμού 1 ενδομητρίου καρκινικούς ιστούς. Καφέ χρώμα σημαίνει θετική χρώση. μπαρ κλίμακα? 200 um

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s007

(TIFF)

S8 Εικ.

ΑΦΙΞΗ λίστα ελέγχου

doi:. 10.1371 /journal.pone.0116064.s008

(PDF)

Ευχαριστίες

Είμαστε ευγνώμονες στην Ογκολογία Ομάδα Γυναικολογικής, Doreine Carson , Cary Passaglia, Racher Bers, Δρ Mario J. Pineda και ο Δρ Κριστίνα Μ Mori για συναινούντων ασθενών και την απόκτηση των ιστών, με τον Δρ Andrew P. Μαζάρ για την παροχή αντισωμάτων uPAR (ATN-617), Vanida Α Serna και Λίντσεϊ Μ Butler για τεχνική βοήθεια, καθώς και τις εγκαταστάσεις του ποντικιού Ιστολογίας και Φαινοτυπική πυρήνα στο Robert Lurie Κέντρο Καρκίνου στο Πανεπιστήμιο Northwestern.