Αφηρημένο

Ιστορικό

Τα στοιχεία εμπλακεί η διαγνωστική σημασία των microRNAs στο σύνολό ιζήματα ούρων /ούρων σε καρκίνωμα ουροφόρων της ουροδόχου κύστης (UCB). Ωστόσο, τα μολυσμένα κύτταρα του αίματος σε ασθενείς με haematouria μεταβληθεί σημαντικά τα προφίλ έκφρασης του ουροποιητικού microRNA, επηρεάζοντας την ακρίβεια της δοκιμής.

Μέθοδοι

προφίλ microRNA των υπερκειμένων ούρα ασθενών UCB και μάρτυρες χωρίς οποιαδήποτε κακοήθεια και τα προφίλ των κακοήθων και αντίστοιχων φυσιολογικών ιστών βλεννογόνου από ασθενείς προσδιορίστηκαν με microRNA μικροσυστοιχιών και συγκρίθηκε με τον εντοπισμό διαφορικά εκφρασμένων microRNAs. Η διαφορική έκφραση επαληθεύεται στους ιστούς ενός ανεξάρτητου κοόρτης του ασθενούς με RT-qPCR. Η διαγνωστική σημασία των επιλεγμένων microRNAs ως βιοδείκτες στο υπερκείμενο ούρα ερευνήθηκε στα επεκταθεί ομάδες.

Αποτελέσματα

microRNA-99α και microRNA-125b ήταν κάτω-ρυθμίζονται στα υπερκείμενα ούρα ασθενών UCB . Ο βαθμός της ρύθμισης προς τα κάτω συνδέθηκε με το βαθμό του όγκου. Ένα διαγνωστικό μοντέλο αναπτύχθηκε χρησιμοποιώντας ένα συνδυασμένο δείκτη των επιπέδων του microRNA-99α και microRNA-125b στο υπερκείμενο των ούρων με ευαισθησία 86,7%, ειδικότητα 81,1% και μια θετική προβλεπόμενη τιμή (PPV) του 91,8%. Διάκριση μεταξύ υψηλής και χαμηλής ποιότητας UCB, το μοντέλο που χρησιμοποιεί το επίπεδο των microRNA-125β μόνη παρουσίασαν ευαισθησία 81.4%, ειδικότητα 87,0% και PPV του 93,4%.

Συμπεράσματα

τα αποτελέσματα αποκάλυψαν μια μοναδική υπογραφή έκφραση microRNA στα υπερκείμενα ούρα ασθενών UCB για την ανάπτυξη μοριακών διαγνωστικών εξετάσεων. Μια αποτελεσματική ουροποιητικού μοντέλο ελεύθερο κυττάρων microRNA-based αναπτύχθηκε χρησιμοποιώντας ένα συνδυασμένο δείκτη των επιπέδων του microRNA-99α και microRNA-125b για την ανίχνευση UCB με καλή διακριτική εξουσία, υψηλή ευαισθησία και υψηλή εξειδίκευση

Παράθεση:. Zhang DZ, Lau KM, Chan ΕΣΥ, Wang G, Szeto CC, Wong K, et al. (2014) Cell-Δωρεάν ουροποιητικού microRNA-99α και microRNA-125b είναι διαγνωστικές Συσκευές για την μη επεμβατική Διαλογή καρκίνου της ουροδόχου κύστης. PLoS ONE 9 (7): e100793. doi: 10.1371 /journal.pone.0100793

Επιμέλεια: Rajvir Dahiya, UCSF /VA Medical Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 11η, Φεβρουαρίου 2014? Αποδεκτές: 29 Μάη 2014? Δημοσιεύθηκε: 11 Ιουλίου 2014

Copyright: © 2014 Zhang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από την άμεση επιχορήγηση για την έρευνα (2009.1.096), το κινεζικό Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνωμα ουροθηλιακά της ουροδόχου κύστης (UCB) είναι η δεύτερη πιο συχνή κακοήθεια του ουροποιητικού συστήματος [1]. Λόγω της υψηλής συχνότητας εμφάνισης της και συχνή επανάληψη, αποτελεσματικά εργαλεία διάγνωσης και παρακολούθησης της νόσου είναι ουσιαστικής σημασίας για την κλινική διαχείριση των ασθενών. Κυστεοσκόπηση είναι σήμερα η καθιερωμένη κλινική δοκιμή για τη διάγνωση και την επιτήρηση του καρκίνου. Ωστόσο, η διαδικασία είναι επεμβατική και δυσάρεστη, και έχει αρκετές πρακτικούς περιορισμούς. Για παράδειγμα, μπορεί να μην είναι σε θέση να ανιχνεύσει μικρές ή /και επίπεδη όγκους όπως καρκίνωμα

in situ

. Συνεπώς, απαιτείται μια εναλλακτική μη επεμβατική προσέγγιση που εμφανίζουν υψηλή ειδικότητα και ευαισθησία. Παρά το γεγονός ότι πολλές από αίμα και στα ούρα με βάση βιοδείκτες έχουν εντοπιστεί και αξιολογηθεί στη βιβλιογραφία, κανένας δεν ήταν ιδανικές και αρκετά ισχυρό για να αντικαταστήσει κυστεοσκόπηση [2].

Τα microRNAs, τα οποία είναι μικρά μη-κωδικοποίησης RNAs, έχουν πρόσφατα κατέδειξαν σημαντική διαγνωστική και προγνωστική αξία σε διάφορους τύπους καρκίνου [3] – [5]. Τα microRNAs επιδεικνύουν υψηλή σταθερότητα και εύκολη ανιχνευσιμότητα ακόμα και σε χαμηλά επίπεδα σε διάφορους τύπους κλινικών δειγμάτων [6] – [8]. Θεωρείται ένα εξαιρετικό βιοδείκτης ασθένεια για την ανίχνευση και την παρακολούθηση. Μία μελέτη έδειξε ότι ένας αριθμός από microRNAs έχουν παρεκκλίνοντα εκφράζεται σε ιστούς όγκων UCB και ότι αυτές οι εκτροπές μπορούν να ασχολούνται με τη διάγνωση και τη σταδιοποίηση των βιοψιών καρκίνου της ουροδόχου κύστης [9]. Επιπλέον, η αξιολόγηση των επιπέδων αυτών των παρεκκλίνοντα εκφράζονται microRNAs που δείχνουν μοναδικές υπογραφές εν όλω ούρα ή τα ούρα αποφλοιωμένα κύτταρα είναι ακόμη πιο πολλά υποσχόμενη για τη διάγνωση και την επιτήρηση των ασθένεια UCB [10] – [11]. Ωστόσο, τα αποτελέσματα είναι μερικές φορές αναξιόπιστα κατά τη μελέτη ασθενείς με αιματουρία, εις τον οποίον το μολυσμένο κύτταρα του αίματος μεταβάλλουν σημαντικά τα ουροποιητικού προφίλ microRNA και έτσι να συγκαλύψουν τα υπογραφές. Στην πραγματικότητα, το 85% των ασθενών παρουσιάζουν ποικίλους βαθμούς αιματουρία [12] – [13]. Ως αποτέλεσμα, απαιτείται μια εναλλακτική προσέγγιση για τη μέτρηση microRNAs. Απόδειξη έχει προτείνει ότι η ελεύθερη νουκλεϊκά οξέα, όπως βιοδείκτες DNA σε υπερκείμενα ούρα, παρέχει ένα υψηλότερο ποσοστό ανίχνευσης και υψηλότερη ευαισθησία από εκείνα στα ιζήματα για την UCB διάγνωση [14] – [16]. Ως εκ τούτου, η εκτίμηση των επιπέδων των microRNAs στο υπερκείμενο των ούρων θα μπορούσε να βελτιώσει τη χρήση των microRNAs ως διαγνωστικό βιοδεικτών για την ανίχνευση UCB, ιδιαίτερα σε ασθενείς με αιματουρία. Σε αυτή τη μελέτη, αναπτύχθηκαν η σκοπιμότητα της χρήσης ελεύθερου κυττάρων του ουροποιητικού microRNAs για τη διάγνωση της UCB προσδιορίστηκε και μοντέλα για τη διάγνωση UCB και διακρίσεις βαθμούς όγκου.

Μέθοδοι

Ασθενείς και δείγματα

Μια επισκόπηση αυτής της μελέτης παρουσιάζεται στην Εικόνα S1. Με τη γραπτή συγκατάθεση των δωρητών και την έγκριση της κοινής Κινεζικό Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ – Νέα Cluster Εδάφη Ανατολή Κλινική Επιτροπή Ερευνών Δεοντολογίας, τα δείγματα ιστού και ούρων συλλέχθηκαν στη Μονάδα Ουρολογίας, Τμήμα Χειρουργικής, Prince of Wales Hospital, το Χονγκ Κονγκ . Mid-ροή των ούρων συλλέχθηκαν από ασθενείς με καρκίνο της ουροδόχου κύστης πριν την επέμβαση. Τόσο ιστού του όγκου και φυσιολογικού βλεννογόνου κύστη βρίσκεται n = 18. ** σημαίνει ρ ** Σημαίνει ρ & lt? 0,01? * Υποδηλώνει p & lt? 0,05. (Β) ROC καμπύλες του microRNA-99A μόνο (μπλε γραμμή), microRNA-125β μόνο (κόκκινη γραμμή) και microRNA-99α και microRNA-125β σε συνδυασμό (μαύρη γραμμή) για τη διάγνωση της UCB (αριστερά) και διάκριση μεταξύ χαμηλών και όγκους υψηλού βαθμού (δεξιά). Τα σημεία αποκοπής τέθηκαν και οι τιμές AUC προσδιορίζεται με βάση δείκτη Youden του. (C) Τα αποτελέσματα της ανάλυσης συσχέτισης Pearson των επιπέδων των microRNA-99α και microRNA-125b στους ιστούς και τα δείγματα υπερκείμενο των ούρων. Οι Scatter διαγράμματα των σχετικών επιπέδων αυτών των δύο microRNAs στα δείγματα που παρουσιάζονται. Η Pearson συντελεστής συσχέτισης R υπολογίστηκε μέσω ανάλυσης συσχέτισης Pearson και προσδιορίστηκε η τιμή p. (D) χρωμοσωμικές περιοχές των γονιδίων (

HSA-miR-99a

και

HSA-miR-125b-2

). Human Genome Consortium Αναφορά GRCh37 Patch Release 12 συναρμολόγησης χρησιμοποιήθηκε.

HSA-miR-99a

βρίσκεται στο χρωμόσωμα 21: 17,909,409-17,913,489, και

HSA-miR-125b-2

βρίσκεται στο χρωμόσωμα 21:. 17,960,557-17,964,645

τα δείγματα ούρων συλλέχθηκαν από 20 ασθενείς UCB πριν (προ-εγχειρητική) και μετά (μετεγχειρητική) transurethial εκτομή. Το συνολικό RNA εκχυλίστηκε από τα υπερκείμενα των ούρων και υποβλήθηκαν σε RT-qPCR για την ποσοτικοποίηση των επιπέδων του microRNA-99α (αριστερά) και microRNA-125b (δεξιά). Μια Wilcoxon signed-rank test δύο σχετίζονται με δείγματα διεξήχθη για να συγκρίνουν τα επίπεδα του microRNA-99α και microRNA-125b μεταξύ των προ- και μετεγχειρητικά δείγματα. * Υποδηλώνει p & lt?. 0.01

Η

Συζήτηση

Αυτή η μελέτη ανέπτυξε ένα αποτελεσματικό ουροποιητικού μοντέλο ελεύθερο κυττάρων microRNA-βάση για την ανίχνευση UCB με καλή διακριτική εξουσία (AUC = 0,876) και υψηλή ευαισθησία (86,7%) και η ειδικότητα (81,1%). Η σκοπιμότητα της χρήσης του ουροποιητικού microRNAs όπως ο καρκίνος της ουροδόχου κύστης διαγνωστικών βιοδεικτών είχε διερευνηθεί προηγουμένως. Η αναλογία των microRNA-126 για να microRNA-152 στα ούρα μελετήθηκε για τον εντοπισμό UCB σε ευαισθησία 82% και ειδικότητα 72%, με μια τιμή της AUC 0.768 [7]. Με τη μελέτη των επιπέδων έκφρασης των microRNA-96 και microRNA-183 σε ιζήματα ούρων, τεστ χρησιμοποιώντας αυτές τις δύο βιοδείκτες microRNA ανεξάρτητα έδειξε ευαισθησίες 71% και 74%, ιδιαιτερότητες του 89% και 77% και της AUC του 0,8331 και 0,817, αντίστοιχα [ ,,,0],18]. Χρησιμοποιώντας το CI του microRNA-99Α και microRNA-125b επίπεδα σε υπερκείμενο ούρα εδώ βελτίωσε σημαντικά την αποτελεσματικότητα της διαγνωστικό τεστ για την ανίχνευση UCB. Επιπλέον, η διαγνωστική απόδοση ήταν καλύτερη από εκείνη των εμπορικά διαθέσιμων ούρων που βασίζεται βιοδείκτες (Πίνακας S1).

Σε αντίθεση με mRNA, το οποίο είναι ευάλωτος σε περιβαλλοντικές RNase, microRNAs είναι σχετικά σταθερές σε κλινικά δείγματα. Τα microRNAs παραμένουν άθικτα, ακόμη και υπό δυσμενείς συνθήκες, όπως υψηλές θερμοκρασίες, ακραία επίπεδα ρΗ και 10 κύκλους ψύξης-απόψυξης [6]. Επιπλέον, είναι εύκολα ανιχνεύεται στο ανθρώπινο πλάσμα ή ορό με RT-qPCR, ακόμη και σε πολύ χαμηλά επίπεδα [7] – [8]. Tumor-σχετίζεται αλλαγές στο προφίλ έκφρασης microRNA στο σύστημα κυκλοφορίας έχουν παράσχει μία νέα προσέγγιση για τη διάγνωση του καρκίνου και την πρόγνωση. Το 2008, Lawrie et al. [19] ανέφεραν ότι ένα αυξημένο επίπεδο microRNA-21 ορός που συνδέονται με την ελεύθερη υποτροπής επιβίωση των ασθενών με διάχυτο μεγάλα Β-κύτταρα λεμφώματος. Ng et al. [20] κατέδειξε τη διαγνωστική σημασία των microRNAs πλάσματος σε ορθοκολικού καρκίνου. Οι μελέτες αυτές έδειξαν την δυνατότητα των κυκλοφορούντων microRNAs σε ορό /πλάσμα ως βιοδείκτες για την ανίχνευση του καρκίνου. Εκτός από ορό /πλάσμα, microRNAs είναι πολύ σταθερά στα ούρα [17] – [18] και έτσι η ανίχνευση των ανέπαφων microRNAs στα ούρα είναι ελπιδοφόρα. Wang et al. [21] εντοπίζονται ελεύθερο κυττάρων του ουροποιητικού microRNA-146a και microRNA-155 ως αποτελεσματικά διαγνωστικά βιοδείκτες για συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, εμπλέκοντας την κλινική σημασία του ελεύθερου κυττάρων του ουροποιητικού microRNAs στη διάγνωση της νόσου και πιθανώς πρόγνωση. Παρά το γεγονός ότι η απόδοση των microRNAs από το υπερκείμενο των ούρων είναι σχετικά χαμηλό σε σύγκριση με εκείνα από ολόκληρη ούρα ή ιζήματα στα ούρα, το υπερκείμενο των ούρων θεωρείται η καλύτερη επιλογή ως βιοδείκτη για τη διάγνωση της νόσου και την πρόγνωση [21]. Συγκρίνοντας τη χρησιμότητα του ουροποιητικού DNA στο υπερκείμενο και το ίζημα για την ανίχνευση UCB, Szarvas et al. [11] συγχρόνως αναλύονται ουροποιητικού DNA σε υπερκείμενα και τα ιζήματα σε ασθενείς και να τους σε σύγκριση με τους ελέγχους. Τα αποτελέσματά τους έδειξαν ότι τα υπερκείμενα ούρα απέδωσε υψηλότερη ευαισθησία από ό, τι το ίζημα [11]. Αυτό πιθανώς σχετίζεται με την μόλυνση των κυττάρων του αίματος στα δείγματα ούρων των ασθενών αιματουρία. Τα μολυσμένα κύτταρα του αίματος μπορεί να έχουν αλλάξει τα ουροποιητικού προφίλ microRNA /DNA στα δείγματα και έτσι παρενέβαινε με την ταξινόμηση ανίχνευση του καρκίνου. Σε αντίθεση, ακόμη και τα υπερκείμενα τα ούρα από ασθενείς με ακαθάριστα αιματουρία ήταν σχετικά πιο ομοιογενής χωρίς παρεμβολή λόγω των μολυσμένων κυττάρων του αίματος στα προφίλ microRNA. Ως εκ τούτου, τα υπερκείμενα των ούρων μπορεί να παρέχει πιο βολική, αξιόπιστη δείγματα για τη διάγνωση του καρκίνου και την παρακολούθηση της νόσου.

Ουροποιητικού προφίλ microRNA υποβάλλεται σε διάφορες τροποποιήσεις, όπως η άμεση απελευθέρωση microRNAs από καρκινικούς ιστούς, η ανοσολογική απάντηση στον καρκίνο και τα κύτταρα του αίματος από ασθενείς αιματουρία. Μια μελέτη σκοπιμότητας που περιλαμβάνει έναν υποψήφιο προσέγγιση microRNA με qPCR διεξήχθη για να εξετάσει ένα μικρό πάνελ microRNAs στα υπερκείμενα ούρα των ασθενών με καρκίνο της ουροδόχου κύστης [22]. Εδώ, πλήρης προφίλ microRNA ελήφθησαν με μικροσυστοιχίες microRNA του άνευ κυττάρων υπερκείμενα ούρων από ασθενείς UCB και τους ελέγχους οι οποίοι επιβεβαιώθηκαν να έχουν καμία cystological ανωμαλίες ή άλλες ταυτόχρονες κακοήθειες, και συγκρίθηκαν με τον προσδιορισμό εκφράζονται διαφορικά ελεύθερα κυττάρων ουροδόχου microRNAs για την UCB. Τα microRNAs έγιναν το επίκεντρο λόγω της άμεσης απελευθέρωσής τους από καρκινικό ιστό και τα επίπεδα αυτών των υποψηφίων σε καρκινικούς ιστούς και την κανονική τους ομολόγους τους συγκρίθηκαν με την επικύρωση των ιστών. Τα microRNAs που εντοπίστηκαν είναι μάλλον λειτουργικά εμπλέκονται στην ανάπτυξη UCB και /ή εξέλιξη της νόσου. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως βιοδείκτες για την ανίχνευση και την παρακολούθηση της νόσου. Τα αποτελέσματα της ανάλυσης των μικροσυστοιχιών microRNA έδειξε την παρουσία περισσότερων από 100 microRNAs στα υπερκείμενα ούρα. Μεταξύ αυτών, υπήρχαν περισσότερες κάτω-ρυθμίζονται microRNAs από up-ρυθμίζονται microRNAs στα υπερκείμενα ούρα των ασθενών με καρκίνο ». Αυτό το εύρημα ήταν παρόμοιο με ένα προηγούμενο εύρημα ότι η πλειοψηφία των διαφορικά εκφρασμένων microRNAs στην κύστη καρκινικούς ιστούς ήταν ρυθμισμένα προς τα κάτω [23]. Αυτά τα κάτω-ρυθμίζονται microRNAs μπορεί να παίξει όγκου κατασταλτικό ρόλο στην καρκινογένεση [24]. Η αλλαγμένη έκφραση των έξι υποψηφίων microRNA προσδιορίζονται από συγκρίσεις των ουροφόρων άνευ κυττάρου προφίλ microRNA των ασθενών UCB και ελέγχων παρατηρήθηκαν επίσης σε ιστό όγκου της ουροδόχου κύστης σε. Χρησιμοποιώντας ένα ανεξάρτητο σύνολο δειγμάτων ούρων, τα κάτω ρυθμισμένα εκδήλωσης τέσσερα microRNAs επιβεβαιώθηκαν . Όπως ιστός όγκου μπορεί να εκκρίνουν απευθείας microRNAs στο πλάσμα ενός ασθενούς [25], είναι πιθανό ότι η ακράτεια microRNAs είναι αρχικά εκκρίνονται από ιστούς καρκίνου της ουροδόχου κύστης και /ή απελευθερώνονται από τις νεκρωτικές /αποπτωτικών κακοήθη και ακόμη και μη κακοηθών επιθηλιακών κυττάρων, χύτευση των προφίλ microRNA των υπερκειμένων ούρα. Έτσι, τα πρότυπα έκφρασης των διαφόρων microRNAs σε καρκινικά κύτταρα της ουροδόχου κύστης μπορεί να εκφράζεται μέσω προφίλ υπερκείμενο των ούρων τους. Ωστόσο, δεν είναι όλα τα διαφορικά εκφρασμένων microRNAs σε καρκινικούς ιστούς μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως διαγνωστικό ουροποιητικού βιοδείκτες για την UCB. Οι εκφράσεις του microRNA-1 και microRNA-133α είχαν προηγουμένως αναφερθεί ότι ρυθμίζεται προς τα κάτω σε ιστούς καρκίνου της ουροδόχου κύστης και έδειξε λειτουργική σημασία στην καρκινογένεση μέσω στόχευσης TAGLN2 στα καρκινικά κύτταρα [26]. Στην παρούσα μελέτη, εξετάστηκαν τα επίπεδα τους στο υπερκείμενο ούρα, αλλά όχι στατιστικά σημαντική διαφορά φάνηκε μεταξύ των ασθενών με καρκίνο και των ελέγχων. Αυτό μπορεί να συνεπάγεται άλλους παράγοντες που δημιουργούν σύγχυση όπως η απελευθέρωση των microRNAs από φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα του ουροποιητικού και κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος χύτευση του προφίλ microRNA στα υπερκείμενα ούρων για να συγκαλύψουν την διαφορική έκφραση κάποιων σχετίζονται με τον καρκίνο microRNAs.

Από τις τέσσερις microRNAs , microRNA-99α και microRNA-125β είχε τις μεγαλύτερες τιμές AUC στις καμπύλες ROC για την ανίχνευση και θα μπορούσαν να λειτουργήσουν ως διαγνωστικοί βιοδείκτες για τον καρκίνο της ουροδόχου κύστης. Αυτοί επίσης βρέθηκαν να είναι πιο σημαντικά ρυθμίζεται προς τα κάτω σε υψηλού βαθμού UCB ό, τι σε χαμηλού βαθμού UCB. Μετά από μια πλήρη διουρηθρική εκτομή των όγκων, τα επίπεδα του προηγουμένως κάτω ρυθμισμένα microRNA-99α και microRNA-125b στα υπερκείμενα ούρα αυξάνεται, εμπλέκοντας μια ισχυρή συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων τους και τις καταστάσεις του όγκου των ασθενών. Αυτό υποστηρίζει περαιτέρω το δυναμικό ρόλο τους ως διαγνωστικοί βιοδείκτες για την UCB και βιοδείκτες επιτήρησης για υποτροπή παρακολούθηση του όγκου. Με βάση αυτά τα μοντέλα, όταν ένας ασθενής έχει θετική υπερκείμενο ούρων αποτέλεσμα της δοκιμής με ένα CI μεγαλύτερη από το cut-off (0,6244), αυτός ή αυτή κατά πάσα πιθανότητα έχει καρκίνο της ουροδόχου κύστης, με ποσοστό ακρίβειας του 91,8%. Εάν το κανονικοποιημένο επίπεδο έκφρασης του microRNA-125b είναι χαμηλότερη από 2

1.71, υπάρχει μια πιθανότητα 93,4% ότι ο ασθενής έχει καρκίνο υψηλής ποιότητας. Ωστόσο, επειδή η αρνητική τιμή πρόβλεψης ήταν 71,4% σε αυτή τη μελέτη, τα αρνητικά αποτελέσματα δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν για να αποκλείσει την πιθανότητα του καρκίνου της ουροδόχου κύστης σε ασθενείς.

Η παρούσα μελέτη έδειξε ότι τα επίπεδα του microRNA-99α και microRNA- 125b στο υπερκείμενο ούρα ασθενών UCB και μάρτυρες υψηλή συσχέτιση με εκείνους στους ιστούς. Στην πραγματικότητα, τα δύο γονίδια (

HSA-miR-99a

και

HSA-miR-125b-2

) βρίσκονται στο ιντρόνιο 6 της μακράς διαγονιδιακή κωδικοποίησης RNA 478 (μη-πρωτεΐνη

LINC00478

) σε χρωμόσωμα 21. εκφράσεις τους είναι πιθανώς συν-ρυθμίζεται από τον προαγωγό που ελέγχει την μεταγραφή του

LINC00478

γονίδιο. Ο υποκείμενος μηχανισμός για την προς τα κάτω ρύθμιση αυτών των δύο microRNAs σε UCB μπορεί να σχετίζεται με την συχνά παρατηρούμενη απώλεια του γενωμικού 21q σε UCB. Tzai et al. [27] ανέφεραν μία συχνή αλληλική απώλεια του 36,6% του μακρύ βραχίονα του χρωμοσώματος 21, όπου τα δύο γονίδια που βρίσκονται, σε UCB. Επιπλέον, οι ασθενείς με σύνδρομο Down παρουσίασαν μειωμένο κίνδυνο θανάτου από ουρολογικών νεοπλασμάτων, υποδηλώνοντας την παρουσία γονιδίων σε χρωμόσωμα 21 καταστολή ουρολογικές καρκινικών όγκων [28].

microRNA-99α και microRNA-125b έχει αποδειχθεί ότι έχουν όγκο κατασταλτική ρόλους σε διάφορους ανθρώπινους καρκίνους [29] – [34]. Στον καρκίνο του προστάτη, microRNA-99Α καταστέλλει την έκφραση αντιγόνων ειδικού προστατικού και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του καρκίνου του προστάτη παρεμβαίνοντας στην έκφραση των δύο παραγόντων της χρωματίνης αναδιαμόρφωση, SMARCA5 (SWI /SNF σχετίζονται μήτρα που σχετίζονται ακτίνη εξαρτώμενη ρυθμιστής της χρωματίνης υποοικογένειας Ένα μέλος 5) και SMARCD1 (SWI /SNF σχετίζονται μήτρα που σχετίζονται ακτίνη εξαρτώμενη ρυθμιστής της χρωματίνης υποοικογένειας μέλος D 1), και την ανάπτυξη ρυθμιστικής κινάσης mTOR (στόχος της ραπαμυκίνης στα θηλαστικά) [29]. Στην πραγματικότητα, μια υψηλή έκφραση του φωσφορυλιωμένου mTOR βρέθηκε στο 74% των διηθητικό urothelical καρκινώματα, σε συνδυασμό με την αυξημένη παθολογική στάδια και μειωμένη επιβίωση σχετιζόμενα με τη νόσο [30]. Η αναστολή της mTOR βρέθηκε να μειώνει

in vitro

και

in vivo

ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων της ουροδόχου κύστης [30]. Όπως microRNA-99α στοχεύει mTOR σε κύτταρα καρκίνου του προστάτη [29], η ρύθμιση προς τα κάτω του παρόντος microRNA σε UCB αποδεικνύεται στην παρούσα μελέτη μπορεί να καταργήσει τις επιδράσεις προαγωγής του καρκίνου της mTOR στα κύτταρα, με αποτέλεσμα την ανάπτυξη του καρκίνου. Ωστόσο, απαιτείται περαιτέρω απόδειξη της ρύθμισης του mTOR από microRNA-99α στα καρκινικά κύτταρα της ουροδόχου κύστης.