Αφηρημένο

Ιστορικό

Η πνευμονική μετάσταση είναι συχνή σε ασθενείς με πρωτοπαθή καρκίνο του παχέος εντέρου (CRC). πρωτεΐνη θερμικού σοκ 27 (Hsp27) υπερεκφράζεται σε ενεργοποιημένα ινοβλάστες κατά την επούλωση τραυμάτων και συστημικά αυξημένα σε διάφορες ασθένειες. Σχετίζονται με τον καρκίνο ινοβλάστες (CAFS) είναι επίσης πιστεύεται ότι παίζουν ρόλο ως προγνωστικά και προγνωστικά δείκτες σε διάφορες κακοήθειες, συμπεριλαμβανομένων CRC. Παραδόξως, η έκφραση της Hsp27 έχει ποτέ αξιολογηθεί CAFS. Ως εκ τούτου, έχουμε ως στόχο να διερευνήσει το επίπεδο έκφρασης της Hsp27 σε CAFS και κλινικές επιπτώσεις της σε ασθενείς με CRC μεταστάσεις στους πνεύμονες.

Μέθοδοι

δείγματα FFPE ιστού από 51 πνευμονικές μεταστάσεις (PMS) και 33 σε συνδυασμό πρωτογενών όγκοι αξιολογήθηκαν για α-SMA, CD31, Hsp27 και την έκφραση vimentin με ανοσοϊστοχημεία και συσχετίζεται με κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές. 25 ηπατικές μεταστάσεις χρησίμευσαν ως ομάδα ελέγχου. Επιπλέον, δείγματα ορού (n = 10) πριν και μετά την πνευμονική metastasectomy αξιολογήθηκαν για την κυκλοφορία φωσφο-Hsp27 και Hsp27 σύνολο με ELISA.

Αποτελέσματα

στρωματικά έκφραση της Hsp27 παρατηρήθηκε σε όλα τα ΡΜ και έδειξε ισχυρή συσχέτιση με άλφα-SMA (

P

& lt? 0.001) και βιμεντίνης (

P

& lt? 0.001). Ισχυρή στρωματικά Hsp27 σχετίστηκε με υψηλότερη πυκνότητα μικροαγγείων στην πρωτοβάθμια CRC και ΑΣ. Επιπλέον, η υψηλή στρωματικά Hsp27 και την έκφραση αSMA συσχετίστηκαν με μειωμένη επιβίωση χωρίς υποτροπή μετά από πνευμονική metastasectomy (

P

= 0.018 και

P

= 0,008, αντίστοιχα) και τη συνολική επιβίωση (

P

= 0.031 και

P

= 0,017, αντίστοιχα). Τα επίπεδα ορού της φωσφο και το συνολικό Hsp27 μειώθηκε μετά metastasectomy σε επίπεδα συγκρίσιμα με υγιείς μάρτυρες.

Συμπεράσματα

Εδώ περιγράφουμε για πρώτη φορά ότι η Hsp27 εκφράζεται έντονα στο στρώμα του όγκου της CRC. Στρωματικά α-SMA και Hsp27 εκφράσεις συσχετίζονται με το κλινικό αποτέλεσμα μετά από πνευμονική metastasectomy. Επιπλέον, Hsp27 στον ορό μπορεί να αποτελέσει μελλοντικά δείκτης για μεταστατική νόσο σε CRC

Παράθεση:. Schweiger Τ, Nikolowsky C, Starlinger P, Traxler D, Zimmermann Μ, Birner P, et al. (2015) στρωματικά Έκφραση της θερμότητας-Shock Protein 27 συσχετίζεται με χειρότερα Κλινικά αποτελέσματα σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο του πνεύμονα μεταστάσεις. PLoS ONE 10 (3): e0120724. doi: 10.1371 /journal.pone.0120724

Ακαδημαϊκό Επιμέλεια: Gabriele Multhoff, Technische Universitaet Muenchen, Γερμανία

Ελήφθη: 17 του Αυγούστου του 2014? Αποδεκτές: 26 Γενάρη 2015? Δημοσιεύθηκε: 20, Μαρτίου, 2015

Copyright: © 2015 Schweiger et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. η μελέτη αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εργαστήριο Doppler χριστιανικής για καρδιακά και θώρακος Διάγνωση και Αναγέννηση και από το Ιατρικό Πανεπιστήμιο της Βιέννης. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Η μελέτη αυτή υποστηρίζεται από την Doppler Εργαστήριο χριστιανικής για καρδιακά και Θώρακος Διάγνωση και Αναγέννηση και από το Ιατρικό Πανεπιστήμιο της Βιέννης. έχουν προκαταρκτικά αποτελέσματα με περιορισμένο αριθμό ασθενών έχουν παρουσιαστεί στις ετήσιες συνεδριάσεις της Αυστριακής Εταιρείας Καρδιοχειρουργικής και την Αυστριακή Εταιρεία Χειρουργικής. HJA δηλώνει ανταγωνιστικών οικονομικών συμφερόντων (αριθμός διπλώματος ευρεσιτεχνίας WO 2010/000820 (ορός Hsp27 για τη διάγνωση ΧΑΠ) και WO 2012/080303 (ορός Hsp27 για NSCLC διάγνωση)). Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων να PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών. Οι άλλοι συγγραφείς δηλώνουν δεν υπάρχει σύγκρουση συμφερόντων.

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) είναι, μετά τον καρκίνο του πνεύμονα, η δεύτερη πιο κοινή αιτία θανάτου από καρκίνο σχετίζονται στην Ευρώπη [1]. Περισσότερο από το ένα πέμπτο των ασθενών με CRC παρόν με μεταστάσεις ήδη κατά το χρόνο της διάγνωσης της πρωτογενούς καρκίνου και η ίδια αναλογία θα αναπτύξει μεταστάσεις κατά την πορεία της νόσου [1, 2]. Οι πνεύμονες είναι η δεύτερη πιο κοινή ιστοσελίδα των μακρινών μεταστάσεων, καθιστώντας πνευμονικές μεταστάσεις (PM) μια ουσιαστική συμβολή στην υψηλή θνησιμότητα της CRC.

Εκτός από τα καρκινικά κύτταρα οι ίδιοι, ένας όγκος περιλαμβάνει στρωματικά κύτταρα. Οι αλληλεπιδράσεις των στρωματικών και καρκινικών κυττάρων πιστεύεται ότι είναι ένας σημαντικός καθοριστικός παράγοντας της συμπεριφοράς του όγκου και η απόκριση στη θεραπεία [3, 4]. Κυτταρικά συστατικά του στρώματος είναι ινοβλάστες, ενδοθηλιακά κύτταρα, κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος και περικύτταρα [5]. ινοβλάστες Cancer σχετιζόμενη (CAF), και ειδικότερα ενεργοποιημένων ινοβλαστών, διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στο δίκτυο όγκο στρώματος, παρόμοια με δερματικούς ινοβλάστες στην επούλωση των πληγών. Αυτό συνέβαλε στην περιγραφή των όγκων ως «πληγές που δεν επουλώνονται» από Dvorak

κ.ά.

. στα τέλη της δεκαετίας του ’80 [6]. CAF συμβάλει σε ποικίλα χαρακτηριστικά προαγωγής όγκων, όπως ο κύκλος εργασιών εξω-κυτταρική μήτρα, ανάπτυξη όγκου, αγγειογένεση και μετάσταση [7, 8]. Λόγω της έκφρασης του α-λείου μυός ακτίνη (α-SMA), ενεργοποιημένα CAF συχνά περιγράφονται ως μυοϊνοβλάστες. Έχουν επίσης δειχθεί ότι είναι θετικός για ινοβλαστών-ενεργοποίησης της πρωτεΐνης-α /seprase, Palladin και βιμεντίνη [9-12]. Πρόσφατα, έχουν γίνει προσπάθειες για να χαρακτηριστεί η «υπογραφή» αυτών των ινοβλαστών με πρωτεώματος και γονιδιακή έκφραση προφίλ [13, 14].

Στο πλαίσιο της καλοήθους ασθενειών, επούλωση τραυμάτων και ο σχηματισμός χηλοειδούς είναι γνωστό ότι ενεργοποιημένων ινοβλαστών εκφράζουν υψηλά επίπεδα πρωτεΐνης θερμικού σοκ 27 (Hsp27), η οποία είναι κρίσιμη για την προσκόλληση των ινοβλαστών, συσταλτικότητα και κινητικότητα [15-17]. Η επαγόμενη ΤΟΡ-β μονοπατιού ρ38-ΜΑΡΚ είναι το κλειδί ρυθμιστής στην επαγωγή Hsp27 σε κύτταρα λείου μυός και μυοϊνοβλάστες [18, 19]. Μόλις συντεθούν, δύο κύριες λειτουργίες της Hsp27 είναι κρίσιμη διαδικασία επούλωσης τραυμάτων: προώθηση μυοϊνοβλαστών κινητικότητα και την αγγειογένεση. Hsp27 εμπλέκεται στην σταθεροποίηση των νημάτων της ακτίνης και των σαλιγκαριών, ενός επαγωγέα του επιθηλίου-μεσεγχύματος μετάβασης. Και οι δύο μηχανισμοί αυτοί συμβάλλουν στην επαγωγή της μυοϊνοβλαστικά φαινότυπο [20, 21]. Μια άλλη λειτουργία του Hsp27 εκτελούνται με παρακρινή τρόπο ενισχύει την αγγειογένεση. Απεδείχθη ότι εξωκυτταρικό Hsp27 οδηγεί στην ενεργοποίηση ΝΡκΒ και την επακόλουθη έκφρασή του προ-αγγειογόνος παραγόντων VEGF και ιντερλευκίνη-8 (IL-8) σε ενδοθηλιακά κύτταρα [22]. Μαζί με τους άλλους, η ομάδα μας θα μπορούσε να δείξει ότι η υπερέκφραση της Hsp27 συνδέεται στενά με διάφορες καλοήθεις και κακοήθεις παθολογίες του πνεύμονα που σχετίζεται με την ενεργοποίηση των ινοβλαστών, συμπεριλαμβανομένου του εμφυσήματος /χρόνια αποφρακτική πνευμονοπάθεια (ΧΑΠ), η ιδιοπαθής πνευμονική ίνωση και μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα καρκίνος [21, 23-26].

Δεδομένου του γεγονότος ότι ενεργοποιούνται οι ινοβλάστες παίζουν σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη της κακοήθους νόσου, καθώς και σε διάφορες μη κακοήθεις παθήσεις του πνεύμονα, στοχεύσαμε να ερευνήσει την επικράτηση της Hsp27 στρώματος όγκων θετικά σε CRC μεταστάσεις στους πνεύμονες και τις αντίστοιχες πρωτογενείς όγκους. Επιπλέον, επιδιώξαμε να περιγράψει τις επιπτώσεις στην κλινική έκβαση μετά metastasectomy και την παρουσία των κυτταρικών και εκκρίνεται Hsp27 σε αυτούς τους ασθενείς.

Υλικά και Μέθοδοι

πληθυσμός Μελέτη

Από Απρίλιος 2009 – Νοέμβρης 2013, όλα τα συνεχόμενα κρούσματα πνευμονικής metastasectomy από την πρωτοβάθμια CRC και κατάλληλα δείγματα ιστού που περιλαμβάνονται σε αυτή τη μελέτη. Οι ασθενείς έλαβαν διαγνωστική εργασία-up συμπεριλαμβανομένων θωρακική και κοιλιακή αξονική τομογραφία (CT). Εάν οι ασθενείς είχαν υποβληθεί σε πνευμονική metastasectomy πριν, δείγμα της πρώτης metastasectomy Εξετάστηκε επίσης και η ημερομηνία της πρώτης metastasectomy χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό αποτέλεσμα. Lung μετάσταση επιβίωση χωρίς (LMFS) ορίστηκε ως ο χρόνος μεταξύ διάγνωσης του πρωτογενούς όγκου και τη διάγνωση της διασποράς στον πνεύμονα μεταστατικό. R0 εκτομή επιτεύχθηκε σε όλους τους ασθενείς. Από 33 ασθενείς, θα μπορούσαν να ληφθούν δείγματα του αντίστοιχου πρωτογενούς όγκου. Παρακολούθηση εξετάσεις διεξήχθησαν σε διαστήματα 3 έως 6 μήνες. Επιβίωσης χωρίς υποτροπή (RFS) ορίστηκε ως η περίοδος από την πρώτη πνευμονική metastasectomy με την απόδειξη της υποτροπιάζουσας νόσου σε οποιαδήποτε θέση επαληθεύεται από αξονική τομογραφία. Στις 10 συνεχόμενες περιπτώσεις, δείγματα ορού που λαμβάνονται πριν metastasectomy και κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης ήταν διαθέσιμα. Δείγματα Παρακολούθηση ορού συλλέχθηκαν 3 έως 6 μήνες μετά την επέμβαση. Επιπλέον, δείγματα ορού από την ηλικία, το φύλο και το κάπνισμα κατάσταση- συμφωνημένα υγιείς εθελοντές συλλέχθηκαν. Όλοι οι ασθενείς έδωσαν γραπτή συγκατάθεση τους πριν από τη συλλογή του αίματος και τη συμμετοχή. Μια ομάδα μελέτη 25 διαδοχικών ασθενών με εκτομή ηπατικές μεταστάσεις CRC υπηρέτησε ως πρόσθετη ομάδα ελέγχου. Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Βιέννης (EK 91/2006, EK1194 /2011 και EK1044 /2012) και διεξήχθη σύμφωνα με τη δήλωση του Ελσίνκι. Η σημερινή ομάδα μελέτη βασίζεται σε προηγούμενες δημοσιευμένες εργασίες από την ομάδα μας. [27, 28]

ανοσοϊστοχημείας και ανοσοφθορισμού

χρώση ανοσοϊστοχημική διεξήχθη σύμφωνα με ένα τυποποιημένο πρωτόκολλο. Σύντομα,, δείγματα ιστών εγκλεισμένα σε παραφίνη σταθεροποιημένα με φορμαλίνη κόπηκαν σε 4-μm πάχους τομές και αποπαραφινοποιήθηκαν. Heat-διαμεσολαβούμενη ανάκτηση αντιγόνου εκτελέστηκε. Η ενδογενής δραστικότητα υπεροξειδάσης αποσβέστηκε με υπεροξείδιο του υδρογόνου 0,3%. Οι τομές επωάστηκαν με το κατάλληλο πρωτογενές αντίσωμα για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου. Για ανοσοϊστοχημεία, ως δευτερεύουσα βαθμίδα, το κιτ ImmPRESS πολυμερισμού κατά βάση (Vector Laboratories, Burlingame, Καλιφόρνια) χρησιμοποιήθηκε σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. 3,3′-διαμινοβενζιδίνη (DAB) χρησιμοποιήθηκε ως υπόστρωμα (Vector Laboratories, Burlingame, California). Τέλος, οι τομές με αιματοξυλίνη. χρώση vimentin πραγματοποιήθηκε σε ένα Ventana ES ανοσοκηλιδωτή Συστήματος (Ventana Medical Systems Inc., Tucson, AZ, USA). Για ανοσοφθορισμό, κατάλληλα φθορίζοντα δευτερεύοντα αντισώματα χρησιμοποιήθηκαν και οι πυρήνες των κυττάρων βάφτηκαν αντίθετα με DAPI (Sigma Aldrich, St. Louis, ΜΟ, USA). Ως αρνητικοί έλεγχοι, το πρωτογενές αντίσωμα παραλείφθηκε. Οι θετικοί μάρτυρες ήταν δείγματα ιστού με γνωστά παρουσία της αντίστοιχης πρωτεΐνης-στόχου. Μια λεπτομερής κατάλογος των αντισωμάτων και αραιώσεις παρέχεται ως συμπληρωματικές πληροφορίες (S1 πίνακα).

Βαθμολόγηση της χρωματισμένο καρκινικών κυττάρων.

Η ανοσοϊστοχημεία βαθμολογία χρώσης (βαθμολογία IHC) υπολογίστηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [29] . Το ποσοστό των θετικών κυττάρων όγκου θα μπορούσε να φθάσει τιμές μεταξύ 0 και 100%, και πολλαπλασιάστηκαν από την ένταση χρώσης (0 έως 3). Έτσι, IHC σκορ μπορεί να κυμαίνεται από 0 έως 300. Δύο τυφλούς παρατηρητές βαθμολόγησαν το λέκιασμα. Σε περίπτωση που διέφεραν οι δύο αξιολογήσεις, η διαφάνεια συζητήθηκε και επαναξιολογούνται. Η συνεχής βαθμολογία IHC ήταν διαχωρίστηκαν μεταξύ τους με την εφαρμογή του Μέσος όρος των μεταστάσεων ή πρωτογενών όγκων ως τιμή αποκοπής.

Βαθμολόγηση της χρωματισμένο στρωματικά κύτταρα.

Οι τομές βαθμολογήθηκαν ημιποσοτικά όπως περιγράφηκε προηγουμένως [10 ]. Εν συντομία, τα πλακίδια υποβλήθηκαν σε διαλογή σε χαμηλή μεγέθυνση και αξιολογήθηκαν για ένταση χρώσης τους στα στρωματικά κύτταρα στο κέντρο του όγκου. Η χρώση στρωματικά αξιολογήθηκε ως βαθμός 0 (αρνητική, & lt? 1% θετικά στρωματικά κύτταρα), βαθμού 1+ (χαμηλή, 1-10% θετικά στρωματικά κύτταρα), Βαθμός 2+ (ενδιάμεσο, & gt? 10-50% θετικά στρωματικά κύτταρα ) και του βαθμού 3+ (ισχυρή, & gt? 50% θετικά στρωματικά κύτταρα) από δύο τυφλούς παρατηρητές. Σε περίπτωση που οι δύο αξιολογήσεις διέφεραν, η διαφάνεια συζητήθηκε, επανεκτιμηθεί και συναίνεση επιτεύχθηκε σε όλες τις διαφάνειες.

Προσδιορισμός της πυκνότητας μικροαγγείων.

μικροαγγειακή πυκνότητα (MVD) μετρήθηκε με τη χρήση η μέθοδος «hotspot», όπως δημοσιεύθηκε αλλού [30]. Εν συντομία, τα πλακίδια προβληθεί σε μικρή μεγέθυνση για να ταυτίζουν την περιοχή με τον μεγαλύτερο αριθμό των CD31-θετικών μικροαγγείων ( «hotspot»). MVD προσδιορίστηκε με καταμέτρηση όλων των μικροαγγεία σε μεγέθυνση 200χ (που αντιστοιχεί σε 0,95 mm

2). Μέσες τιμές υπολογίσθηκαν από δύο ανεξάρτητα μετρήθηκαν πυκνότητες. Σε περίπτωση ισχυρών ασυμφωνίας μεταξύ του παρατηρητή, η διαφάνεια ήταν επαναξιολογηθεί.

Ένζυμο-συνδεδεμένη ανοσορροφητική δοκιμασία (ELISA)

Τα δείγματα ορού αξιολογήθηκαν από εμπορικά διαθέσιμο ανθρώπινο Hsp27, φωσφο-Hsp27 και ιντερλευκίνης 8 κιτ ELISA (όλα R &? D Systems, Minneapolis, USA). Μέτρηση διεξήχθη σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Τα δείγματα αναλύθηκαν εις διπλούν. Η απορρόφηση μετρήθηκε στα 450 nm χρησιμοποιώντας αναγνώστη πλακός (PerkinElmer, Waltham, USA), σε σύγκριση με μια πρότυπη καμπύλη με γνωστή περιεκτικότητα σε πρωτεΐνες και μετατρέπεται σε pg /mL.

Στατιστική ανάλυση

Όλα λαμβάνεται δεδομένα αξιολογήθηκαν στατιστικά χρησιμοποιώντας SPSS 19 (SPSS Inc., Chicago, USA) και GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc., California, USA). t-test του Student χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνει τη βοήθεια δύο ανεξάρτητων ομάδων, paired t-test για εξαρτημένα ομάδες και εκφράζονται ως μέση τιμή ± τυπική απόκλιση (SD). Kaplan-Meier καμπύλες και δοκιμασία log-rank χρησιμοποιήθηκαν για να συγκρίνουν τις λειτουργίες επιβίωσης. Chi-square test και ακριβής δοκιμασία Fisher χρησιμοποιήθηκαν για να συγκρίνουν διωνυμικό μεταβλητές. Όλες οι δοκιμασίες ήταν δύο όψεων. P-τιμές ίσες ή κάτω του 0,05 θεωρήθηκαν ως στατιστικά σημαντικές.

Αποτελέσματα

δείγματα ιστών του PM από συνολικά 51 συνεχόμενες ασθενείς ήταν διαθέσιμοι. Η διάμεση ηλικία κατά metastasectomy ήταν τα 63 έτη (εύρος 33-83). 29 (56.9.1%) άνδρες και 22 (43,1%) γυναίκες ασθενείς συμπεριλήφθηκαν. Τα κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των περιελάμβανε ασθενείς συνοψίζονται στον Πίνακα 1.

Η

Hsp27 εκφράζεται έντονα σε καρκίνο που σχετίζεται με στρώμα των πνευμονικών μεταστάσεων

Για να αξιολογηθεί το επίπεδο έκφρασης της Hsp27 σε καρκινογόνες συνδέονται στρώμα, τομές ιστών χρωματίστηκαν για Hsp27 και βιμεντίνη (Εικ. 1). Η έκφραση Hsp27 του στρώματος του όγκου σε ΡΜ βαθμολογήθηκε σε 0 περιπτώσεις (0%), 17 (33%), 17 (33%), 17 (33%) ως 0, 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα. Η συσχέτιση του στρωματικών Hsp27 χρώση με τα χαρακτηριστικά του ασθενούς και του όγκου απεικονίζεται στον Πίνακα 1. ένταση χρώσης των κυττάρων όγκου προσδιορίστηκε ξεχωριστά (S1A Εικ). 23 (45%) μεταστάσεις βαθμολογήθηκαν ως Hsp27 ιδιαίτερα θετική και 28 (55%) μεταστάσεις τόσο χαμηλά /αρνητικά (IHC εύρος βαθμολογίας 0-160? Μεσαίο /αποκοπεί 30). Δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ του όγκου και στρωματικά έκφραση Hsp27 σε πνευμονικές μεταστάσεις (Chi-square test?

P

= 0,237). 33 αντίστοιχα πρωτογενείς όγκους ήταν διαθέσιμα. Η στρωματική Hsp27 έκφραση στο πρωτογενείς όγκους 0 (0%), 6 (18%), 15 (46%) και 12 (36%) βαθμολογήθηκαν ως 0, 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα. Καθορισμό της χρώσης Hsp27 στα καρκινικά κύτταρα στον πρωτογενή ιστό του όγκου, 14 (42%) των περιπτώσεων βαθμολογήθηκαν ως Hsp27 θετικά και 19 (58%) φάσμα, όπως το χαμηλό /αρνητική (βαθμολογία IHC 5-100? Μεσαίο /αποκοπεί 70 ).

στρωματικά ινοβλάστες περαιτέρω προσδιορίζονται από χρώση vimentin. (Υπόστρωμα DAB, ίδιο δείγμα όγκου ανά σειρά, 200x μεγέθυνση).

Η

Hsp27 είναι συν-εκφράζεται με α-SMA και βιμεντίνης στο στρώμα του PMS

Ενεργός στρώματος του όγκου έχει περιγράφεται ως ιδιαίτερα α-SMA θετικά στην πρωτοβάθμια και μεταστατικό CRC [12, 31]. Ως εκ τούτου, τα δείγματα υπέστησαν βαφή για α-SMA. Η έκφραση του α-SMA στο στρώμα βαθμολογήθηκε με τον ίδιο ημιποσοτικό τρόπο όπως η χρώση Hsp27. 0 (0%), 13 (25,5%), 24 (51%) και 13 (25,5%) περιπτώσεις βαθμολογήθηκαν ως 0, 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα. Η κατανομή σκορ χρώσης σύμφωνα με τις κλινικοπαθολογοανατομικών μεταβλητές απεικονίζεται στον Πίνακα 1. Τα επίπεδα έκφρασης του α-SMA συσχετίζεται σημαντικά με την έκφραση Hsp27 σε PMs (

P

& lt?. 0,001, Σχήμα 2Α). Αυτό παρατηρήθηκε επίσης σε μεταστάσεις ήπατος (S2 Εικ). Για να αξιολογηθεί περαιτέρω η στρωματική συν-έκφραση α-SMA και Hsp27, εκπρόσωπος διαφάνειες των πρωτογενών και μεταστατικών όγκων συν-επισημασμένο για α-SMA και Hsp27 με ανοσοφθορισμό. Μια ισχυρή συν-έκφραση μπορεί να παρατηρηθεί κυρίως σε PMs (Σχ. 2D). Tumor στρώμα με ισχυρές Hsp27 και χρώση α-SMA ήταν επίσης πολύ θετικά για βιμεντίνη (S3 πίνακα).

CD31-θετικά μικροαγγείων που περιβάλλεται από στρώματος του όγκου δίπλα σε καρκινικά κύτταρα (αστερίσκος) (Β). MVD ήταν σημαντικά αυξημένη σε πρωτογενείς όγκους και μεταστάσεις με έκφραση Hsp27 ισχυρή στρωματικών (C). Ανοσοφθορισμός έδειξε μια συν-έκφραση των στρωματικών Hsp27 και α-SMA ειδικά σε ΡΜ (μεγέθυνση 400Χ) (D).

Η

MVD είναι αυξημένη σε δείγματα ιστού με Hsp27 θετικά στρώματος του όγκου

Πρόσφατα δείχθηκε ότι Hsp27 μεσολαβεί αγγειογένεση [22]. Ως εκ τούτου, καθορίζεται η MVD με χρώση CD31 και συσχετίζονται με τις εκφράσεις Hsp27 (Εικ. 2Β και 2Γ). Σε μμ, βρήκαμε μια τάση προς υψηλότερα MVD σε δείγματα με υψηλά επίπεδα Hsp27. MVD ήταν 33,0 ± 2,9, 40,1 ± 3,8 και 43,0 ± 4,7 για 1+, 2+ και της έντασης 3+ Hsp27 (μέση τιμή ± SD). Ωστόσο, η τάση αυτή δεν έφτασε το επίπεδο σημαντικότητας (

P =

0,081). Ομοίως, στην πρωτοβάθμια CRC με υψηλά επίπεδα στρώμα της Hsp27, σημαντικά πιο μικροαγγείων θα μπορούσε να βρεθεί (27.7 ± 3.2, 37.2 ± 4.0 και 46.4 ± 5.2 για 1+, 2+ και 3+ Hsp27 ένταση, αντίστοιχα?

P =

0.031). Μια λεπτομερής περιγραφή της MVD στρωματοποιημένη κατά κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά παρέχεται σε S2 πίνακα.

στρωματικά Hsp27 συνδέεται με φτωχή έκβαση μετά από πνευμονική metastasectomy

Είμαστε αξιολόγησε τη συσχέτιση των σχετικών κλινικοπαθολογοανατομικών μεταβλητές με LMFS, RFS και OS μετά metastasectomy (Πίνακας 2). Δεν μεταβλητή είχε σημαντική επίδραση στις LMFS. Οι γυναίκες ασθενείς είχαν μια ισχυρή τάση για μικρότερο χρονικό διάστημα στο PMS (

P =

0.091). Η έκφραση του στρωματικά ούτε α-SMA ούτε Hsp27 συσχετίστηκε με σημαντικά μειωμένη LMFS. Ωστόσο, και οι δύο ιστολογικούς δείκτες είχαν σημαντική προγνωστική επίδραση στις RFS μετά πνευμονική metastasectomy (

Ρ = 0,018

και

Ρ = 0,008

για στρωματικά Hsp27 και α-SMA, αντιστοίχως) (Σχ. 3 ). Και πάλι, οι γυναίκες ασθενείς εμφάνισαν μια ισχυρή τάση μειώθηκε RFS. Επιπλέον, οι ασθενείς με ιστορικό προηγούμενης ηπατικές μεταστάσεις είχαν μειωμένο RFS σε σύγκριση με ασθενείς χωρίς ηπατικές μεταστάσεις στην ιστορία. Ωστόσο, και οι δύο μεταβλητές, το φύλο και η ιστορία των προηγούμενων ηπατικές μεταστάσεις, δεν είχε σημαντική επίδραση στην RFS. Επιπλέον σε αυτό, εκτεταμένες στρωματικά Hsp27 στρωματικά Hsp27 και α-SMA συσχετίστηκαν με μειωμένη συνολική επιβίωση μετά metastasectomy (

P =

0.031 και

P = 0,017

για στρωματικά Hsp27 και α-SMA, αντίστοιχα). Λόγω του υψηλού ποσοστού της αντιστοιχίας, στρωματικά Hsp27 και α-SMA ήταν κανένα ανεξάρτητους παράγοντες στην ανάλυση αποτελεσμάτων κατά την προσθήκη δύο μεταβλητών σε μια πολυμεταβλητή ανάλυση (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Η

Διαλυτό Hsp27 συστημικά αυξημένη σε ασθενείς πριν από πνευμονική metastasectomy

Τα αυξημένα επίπεδα του διαλυτού Hsp27 μπορεί να ανιχνευθεί συστημικά σε διάφορες κακοήθεις και μη κακοήθεις νόσους. Σε ένα υποσύνολο 10 ασθενών μας ζευγαρωμένα δείγματα ορού (προ- και μετα-metastasectomy) ήταν διαθέσιμα (Εικ. 4). Συγκρίναμε το επίπεδο ορού της συνολικής Hsp27 και φωσφο-Hsp27 να ταιριάζουν υγιείς εθελοντές (S3 Πίνακας). Ορός ολικά επίπεδα Hsp27 ήταν 2276 ± 905, 3245 ± 1684 και 2064 ± 1226 pg /ml (μέση ± SD) για τον έλεγχο, πριν και μετά την metastasectomy δείγματα, αντίστοιχα. Σύνολο Hsp27 μειώθηκαν σημαντικά μετά metastasectomy (

P

= 0,016). Ορός επίπεδα φωσφο-Hsp27 ήταν 84 ± 63, 156 ± 82 και 88 ± 114 pg /ml (μέση ± SD) για τον έλεγχο, πριν και μετά την metastasectomy δείγματα, αντίστοιχα. Μια σημαντική διαφορά βρέθηκε μεταξύ υγιών μαρτύρων και δείγματα προ-metastasectomy (

P

= 0,041). Αν και τα επίπεδα μειώθηκαν μετά metastasectomy, η διαφορά δεν ήταν σημαντική. IL-8, ένας προ-αγγειογόνος κυτοκίνη που εμπλέκονται στην σηματοδότηση Hsp27, ανιχνεύθηκε σε πολύ χαμηλές συγκεντρώσεις του 15 ± 8, 45 ± 58 και 9 ± 8 pg /ml (μέση ± SD) στα δείγματα ορού. Οι διαφορές των συστηματικών επιπέδων IL-8 μεταξύ των τριών ομάδων δεν διέφεραν σημαντικά μεταξύ τους. Δεν βρέθηκε συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου έκφρασης στρωματικών Hsp27, Hsp27 όγκου και συστημική επίπεδα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Επιπλέον, δεν υπάρχει σημαντική συσχέτιση μεταξύ της ολικής ή φωσφο-Hsp27 και πρότυπο δείκτες φλεγμονής (CRP και το ινωδογόνο) βρέθηκε (S1B και S1c σχήμα).

Η

έκφραση στρωματικά Hsp27 σε πνευμονικές μεταστάσεις είναι σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με το συκώτι μεταστάσεις

Αξιολογήσαμε περαιτέρω την έκφραση στρωματικά των στρωματικών Hsp27 και α-SMA σε ηπατικές μεταστάσεις από 25 ασθενείς. Όσον αφορά την στρωματική Hsp27 έκφραση 0 (0%), 12 (48,0%), 11 (44,0%) και 2 (8,0%) περιπτώσεις βαθμολογήθηκαν ως 0, 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα. έκφρασης στρωματικών α-SMA αξιολογήθηκε ως έκφραση 0 (0%), 8 (32,0%), 11 (44%) και 6 (24,0%) περιπτώσεις βαθμολογήθηκαν ως 0, 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα. Βρήκαμε μια ισχυρή συσχέτιση μεταξύ των στρωματικών Hsp27 και α-SMA (P & lt? 0.001). Επιπλέον, τα στρωματικά Hsp27 θετικότητα ήταν σημαντικά πιο συχνά βρίσκονται σε πνευμονικές μεταστάσεις σε σύγκριση με μεταστάσεις στο ήπαρ (P = 0,014), ενώ η διαφορά αυτή δεν ήταν σημαντική για την α-SMA (P = 0,625). Επιπλέον, η έκφραση της Hsp27 σε κύτταρα όγκου (διάμεση τιμή 120 (εύρος 0-270)) ήταν σημαντικά αυξημένη σε μεταστάσεις ήπατος σε σύγκριση με πνευμονικές μεταστάσεις (Ρ = 0,037). Αναλύσαμε περαιτέρω τη συνολική επιβίωση των ασθενών με ηπατικές μεταστάσεις, ανάλογα με στρωματικά τους Hsp27, α-SMA και του όγκου της έκφρασης Hsp27, αλλά σημαντικές διαφορές δεν βρέθηκαν (S3 σχήμα).

Συζήτηση

απομακρυσμένες μεταστάσεις είναι η κύρια αιτία θνησιμότητας σχετίζονται με τον καρκίνο. Σήμερα, το μικροπεριβάλλον του όγκου και ειδικότερα ινοβλάστες γίνει με αυξανόμενο ενδιαφέρον, παρέχοντας πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με τη συμπεριφορά του όγκου και των πιθανών θεραπευτικών στόχων [32]. Μυοϊνοβλάστες μπορούν να βρεθούν στο μικροπεριβάλλον διαφόρων όγκων και εκτεταμένη ινοβλαστών-ενεργοποίηση θα μπορούσε να συνδέεται με την ταχεία εξέλιξη της νόσου σε κακοήθους νόσου [32].

Εδώ θα μπορούσαμε να αποδειχθεί, σε ένα καλά καθορισμένο κοόρτης μελέτη που βιμεντίνης

+ αSMA

+ στρωματικά κύτταρα είναι ιδιαίτερα παρούσα σε πνευμονικές μεταστάσεις πρωτογενών CRC. Wikberg

et al

. υπογράμμισε ότι μυοϊνοβλάστες στο κέντρο του όγκου είναι μια καλύτερη μάντης για την κακή πρόγνωση από ινοβλάστες στο περιθώριο του όγκου [33]. Εμείς, ως εκ τούτου, να περιοριστεί το σκορ της ενεργοποίησης υποθετικών ινοβλαστών στο κεντρικό τμήμα του όγκου. Σε σύγκριση με τον Henry

et al

., Οι οποίοι προσδιορίζονται μυοϊνοβλάστες από FAP-χρώση σε πρωτοπαθή καρκίνο του παχέος εντέρου, βρήκαμε μια παρόμοια κατανομή της βαθμολογίας στρωματικών (0%, 20%, 38% και 35% για τα αρνητικά, χαμηλά , ενδιάμεση και ισχυρή χρώση, αντίστοιχα). Επιπροσθέτως, περιγράφεται η σύνδεση των υψηλών ποσοτήτων ενεργοποιημένων ινοβλαστών με μειωμένη συνολική επιβίωση σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου, ειδικά στην μετάσταση κατάσταση [10]. Αυτό ισχύει και σύμφωνα με τα ευρήματά μας δείχνουν ένα μειώθηκε RFS μετά από πνευμονική metastasectomy.

Είναι ενδιαφέρον, α-SMA θετικό φαινότυπο σχετίζονται με τον όγκο στρώμα συνοδεύεται από την έκφραση της Hsp27. Από τη μία πλευρά, αυτή η μικρή πρωτεΐνη θερμικού σοκ έχει εξεταστεί σε κύτταρα όγκου CRC ίδιοι [34-36]. Μια αυξημένη έκφραση του Hsp27 σε κύτταρα όγκου πρωτογενών CRC περιγράφηκε ως αρνητικός μάντης για επιβίωση [37, 38]. Από την άλλη πλευρά, Hsp27 που εκφράζουν ινοβλάστες εξετάστηκαν στο πλαίσιο της επούλωσης του τραύματος και ίνωση. Για το καλύτερο της γνώσης μας, τα στρωματικά Hsp27 δεν έχει περιγραφεί ως μια πιθανή προγνωστικός δείκτης στο CRC. Είναι ενδιαφέρον ότι, η ισχυρή έκφραση στρωματικά Hsp27 συσχετίστηκε με υψηλές MVD στις πρωτογενείς όγκους (Ρ = 0.031) και σε ΡΜ (Ρ = 0,081). Λόγω της ισχυρής συσχέτιση της Hsp27 με α-SMA ως καθιερωμένη δείκτης για την ενεργοποίηση των ινοβλαστών, η υπερ-έκφραση της Hsp27 συσχετίστηκε με σημαντικά χειρότερη κλινική έκβαση μετά την πνευμονική metastasectomy (διάμεσος RFS 19, 17 και 8 μήνες για τα 1+, 2+ και 3+, αντίστοιχα), συγκρίσιμη με την προγνωστική επίπτωση των στρωματικών έκφρασης α-SMA. Το RFS μείωση επίσης μεταφραστεί σε σημαντικά διαφορετικό λειτουργικό σύστημα μεταξύ της χαμηλής, μέσης και υψηλής στρωματικά Hsp27 ή α-SMA, αντίστοιχα (Εικ. 3). Ομοίως, Tsujino

et al

. περιγράφεται α-SMA θετική ινοβλάστες, όπως είναι σε θέση να προβλέψει την υποτροπή της νόσου σε μια σειρά ασθενών με σταδίου ΙΙ και ΙΙΙ πρωτοβάθμια CRC [12]. Kahlert

et al

. καταδεικνύεται από μικροδιατομής πρωτογενούς CRC, του πνεύμονα και του ήπατος μεταστάσεις που ένα πάνελ προ-αγγειογόνοι παράγοντες εκφράζονται διαφορικά σε καρκινικά κύτταρα και το στρωματικό διαμέρισμα. Η έκφραση του στρωματικά αγγειοποιητίνη-2 σε πνευμονικές μεταστάσεις ήταν ανεξάρτητη μάντης για κακή επιβίωση μετά από χειρουργική επέμβαση στην πολυμεταβλητή ανάλυση (

P

= 0.044), ακόμη και σε μια μάλλον μικρή ομάδα μελέτης (n = 25) [39]. Τα ευρήματα αυτά υποστηρίζουν τα αποτελέσματα των εργασιών μας, με την οποία θα μπορούσαμε να περιγράψουμε Hsp27 ως περαιτέρω προαγγειογόνος, δείκτης στρωματικά με προγνωστικές επιπτώσεις μετά metastasectomy. Είναι επίσης σημαντικό να αναφερθεί, ότι η Sato

et al

. περιγράφεται η έκφραση υψηλής στρωματικά της περιγραφής παράγοντες ETS1 ως προγνωστικός δείκτης της CRC μεταστάσεις στους πνεύμονες [40]. Είναι ενδιαφέρον, ETS1 έντονα αλληλεπιδρούν με το μικρό δίκτυο πρωτεΐνη θερμικού σοκ [41].

Η ανάλυση των δειγμάτων αίματος σε μια υποομάδα ασθενών έδειξε ότι μεταστατικό CRC είναι σχετικό επαγωγέας ακόμα και της συστημικής εκφράσεις Hsp27. Το επίπεδο του διαλυτού συνολικού Hsp27 και Hsp27 φωσφο-, ένα πολυμερισμένο μορφή Hsp27, μειώθηκαν σημαντικά μετά την πλήρη απομάκρυνση των PMS. Επιπλέον, σε σύγκριση με μια αντίστοιχη ομάδα ελέγχου υγιών εθελοντών, προεγχειρητική ολικά επίπεδα Hsp27 και Hsp27 φωσφο-αυξήθηκαν και μειώθηκαν μετά την επέμβαση σε συγκρίσιμα χαμηλά επίπεδα. Παρόμοια με τα ευρήματά μας, Zhao

et al

. θα μπορούσε να αποδείξει αυξημένα επίπεδα της Hsp27 στον ορό στον καρκίνο των ωοθηκών με περιτοναϊκή μεταστάσεις. Στο ίδιο έργο είχε επίσης δείξει ότι τα επίπεδα μειώθηκαν μετά από χημειοθεραπεία [42]. IL-8, η οποία πιστεύεται ότι μεσολαβεί τοπικά την προ-αγγειογόνος επίδραση της Hsp27, επίσης αυξημένα πριν metastasectomy χωρίς να φθάσει σημασία [22]. Nontheless, τα κυκλοφορούντα επίπεδα του Hsp27 δεν συσχετίζεται με την έκφραση των στρωματικών ή όγκου. Επιπλέον, δεν συσχετίζονται με τις συστημικά επίπεδα CRP ή ινωδογόνου. Έτσι, το κυκλοφορούν Hsp27 μπορεί να επηρεαστεί από άλλους παράγοντες, όπως την έκκριση, την υποβάθμιση και την αποβολή. Με βάση αυτά τα προκαταρκτικά αποτελέσματα, περαιτέρω μελέτες με επαρκή μεγέθη ομάδα θα είναι αναγκαίο να διευκρινιστεί περαιτέρω η πιθανή προγνωστική και προβλεπτική ρόλο των κυκλοφορούντων επιπέδων Hsp27 σε ασθενείς με CRC.

Σε ασθενείς με CRC ηπατικές μεταστάσεις του στρώματος του όγκου Hsp27

+ vimentin

+ αSMA

+ ινοβλάστες ήταν λιγότερο εμφανής από ό, τι στις πνευμονικές μεταστάσεις. Σε αντίθεση με αυτό, η έκφραση Hsp27 σε κύτταρα όγκου ήταν σημαντικά υψηλότερη στην εκτομή ηπατικές μεταστάσεις σε σύγκριση με πνευμονικές μεταστάσεις. Αυτό ισχύει και σύμφωνα με την παρατήρηση ότι η σηματοδότηση p38 ΜΑΡΚ, μια βασική κινάση για φωσφορυλίωση και ενεργοποίηση Hsp27, είναι μειωτικά στο CRC πνευμονικές μεταστάσεις σε σύγκριση με μεταστάσεις στο ήπαρ [43].

Τα ευρήματα αυτής της εργασίας είναι της μεταφραστικής ενδιαφέρον λόγω των δύο πτυχές: πρώτον, Hsp27, συστημικά, ή περιορίζεται στην στρώματος του όγκου, μπορεί να διαθέτουν δυναμικό προγνωστική και διαγνωστική αξία. Πνευμονική metastasectomy είναι μια ευρέως προσφέρονται θεραπευτική επιλογή σε ασθενείς με CRC μμ. Ωστόσο, η ταυτοποίηση των ασθενών οι οποίοι θα ωφεληθούν από μόνη της χειρουργικής επέμβασης ή ενός προαιρετικού χημειοθεραπεία ανοσοενισχυτικό είναι ένα θέμα της τρέχουσας έρευνας [44]. Βιοδείκτες όπως Hsp27 μπορεί να βοηθήσει στην αναγνώριση ασθενών με υψηλό κίνδυνο πρόωρης υποτροπής της νόσου μετά από χειρουργική επέμβαση. Επικουρική χημειοθεραπεία και αυστηρή παρακολούθηση θα μπορούσαν να προσφερθούν σε αυτούς τους ασθενείς. Κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης των ασθενών με κακοήθη νόσο, οι δείκτες του ορού, π.χ. CEA, CA19-9 και βήτα-HCG, χρησιμοποιούνται συνήθως στις μέρες μας και επιπλέον δείκτες ενδέχεται να ενισχύσει την ακρίβεια αυτών των εγκατεστημένοι δείκτες. Ένας περιορισμός σε αυτή τη μελέτη, η CEA και τα επίπεδα CA19-9 δεν ήταν συνήθως καθορίζεται πριν metastasectomy. Συσχέτιση αυτών ιδρύθηκε καρκινικών δεικτών με ορό Hsp27 θα αντιμετωπιστούν σε μια μελλοντική μελέτη.

Δεύτερον, Hsp27 είναι ένα πολλά υποσχόμενο φάρμακο στόχο. Apatorsen (OGX-427, Oncogenex, Bothell, Washington, USA), ένα τροποποιημένο ολιγονουκλεοτίδιο αντίθετης φοράς, δεσμεύεται με το μετάγραφο mRNA Hsp27 και συνεπώς αναστέλλει την έκφραση Hsp27 [45]. Επί του παρόντος, οι μελέτες σε εξέλιξη Φάσης ΙΙ πρόσληψη ασθενείς με προχωρημένο προστάτη, της ουροδόχου κύστης, του παγκρέατος και του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα [46]. Τα αυξημένα επίπεδα έκφρασης του Hsp27 στον όγκο που σχετίζεται με στρώμα παρέχουν ένα σκεπτικό για τη χρήση της Hsp27 επίσης σε ασθενείς με πρωτοπαθή CRC. Δεδομένου ότι δεν είναι μόνο μεταστάσεις στους πνεύμονες CRC, αλλά και του ήπατος και των λεμφαδένων μεταστάσεων εμφανίζουν ισχυρή πρόσληψη μυοϊνοβλαστών, ιδιαίτερα σε ασθενείς με μεταστατική νόσο μπορεί να επωφεληθεί από την αναστολή Hsp27.

Εν κατακλείδι, θα μπορούσαμε να αποδείξει ότι Hsp27 είναι συν-εκφράζεται με αSMA στο στρώμα του όγκου του CRC πνευμονικών μεταστάσεων και, επιπλέον, ότι η υπερέκφραση του συνδέεται με χειρότερη κλινική έκβαση μετά metastasectomy. Αξίζει να σημειωθεί ότι, διαλυτό Hsp27 ήταν επίσης συστημικά μετρήσιμη, καθιστώντας ορού Hsp27 ένα δυνητικό δείκτη μέλλον του ορού σε CRC.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πίνακα S1. Αντισώματα και αραιώσεις χρησιμοποιήθηκαν για ανοσοϊστοχημεία και ανοσοφθορισμό

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s001

(DOCX)

S2 πίνακα. Περιγραφικά στοιχεία για τον ασθενή, πρωτοπαθή όγκο και τα χαρακτηριστικά μεταστάσεις στρωματοποιημένη κατά MVD και βιμεντίνης (Ν = 51)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s002

(DOCX)

S3 πίνακα. Χαρακτηριστικά του ταιριάζουν ασθενών και υγιών μαρτύρων

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s003

(DOCX)

S1 Εικ. έκφραση Hsp27 βρέθηκε επίσης στην ίδια καρκινικά κύτταρα (αντι-Hsp27? DAB υπόστρωμα? μεγέθυνση 200χ) (Α)

Συσχετισμός προεγχειρητική Hsp27 και η C-αντιδρώσα πρωτεΐνη (CRP) ή ινωδογόνου (n = 10) (Β. και C). Ούτε συνολική Hsp27 (Β), ούτε φωσφο-Hsp27 (C) συσχετίζεται σημαντικά με CRP ή ινωδογόνου

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s004

(ΔΕΘ)

S2 Εικ. Σε CRC ηπατικές μεταστάσεις στρωματικά Hsp27 και α-SMA βαθμολόγησης συσχετίζονται σημαντικά (n = 25) (Α)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s005

(ΔΕΘ)

S3 Εικ. Η κατανομή των στρωματικών Hsp27 (Α) διέφεραν σημαντικά στις μεταστάσεις ήπατος (n = 25) σε σύγκριση με metasatses πνεύμονα (n = 51).

Αυτή η διαφορά δεν έφθασε σημασία για στρωματικά α-SMA (Β). έκφραση Hsp27 σε κύτταρα όγκου ήταν σημαντικά υψηλότερη σε μεταστάσεις ήπατος σε σύγκριση με τις μεταστάσεις στους πνεύμονες (C). Δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των υποομάδων σχετικά με τη συνολική επιβίωση (D-F)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120724.s006

(ΔΕΘ)