Αφηρημένο

Ιστορικό

ErbB2 είναι μέλος της οικογένειας του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα των κινασών τυροσίνης που βρίσκεται σε κεντρική εμπλέκεται στην παθογένεση του καρκίνου του προστάτη και πολλές μελέτες έχουν αναφέρει ότι ένα υψηλό έκφραση αυτής της πρωτεΐνης έχει προγνωστική αξία. Στην παρούσα μελέτη, ερευνήσαμε αν ErbB2 όγκου ανοσολογική αντίδραση (ErbB2-IR) έχει κλινικά χρήσιμη προγνωστική αξία, δηλαδή ότι παρέχει επιπλέον προγνωστικές πληροφορίες αυτές που παρέχονται από συνήθεις κλινικές δοκιμές (σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου).

Μεθοδολογία /Principal Εκτίμηση

ErbB2-IR μετρήθηκε σε ένα καλά χαρακτηρισμένο μικροσυστοιχιών ιστό όγκου και μη κακοηθών δειγμάτων που λαμβάνονται κατά τη διάγνωση. Επιπλέον, τα επίπεδα mRNA του ErbB2-IR στον προστάτη προσδιορίστηκαν στον αρουραίο ακόλουθο χειρισμό των κυκλοφορούντων επιπέδων ανδρογόνων. Όγκου ErbB2-IR συσχετίστηκε σημαντικά με το κατάντη μόριο σηματοδότησης φωσφορυλιωμένο Akt-και με τον δείκτη πολλαπλασιασμού των κυττάρων Ki-67. Η σημαντική συσχέτιση του όγκου ErbB2-IR με το σκορ Gleason κατά τη διάγνωση χάθηκε όταν ελέγχεται για τη σύνδεση των δύο παραμέτρων με Ki-67. Στην προστάτη αρουραίου, το mRNA για ErbB2 συσχετίστηκε αντίστροφα με κυκλοφορούντα επίπεδα ανδρογόνων. Δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ ErbB2-IR και τον υποδοχέα ανδρογόνων (AR)-IR στους όγκους, αλλά μια αλληλεπίδραση μεταξύ των δύο παραμέτρων παρατηρήθηκε σε σχέση με τη σύνδεσή τους με το στάδιο του όγκου. Όγκου ErbB2-IR επιβεβαιώθηκε να είναι ένας προγνωστικός δείκτης για συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωσης, αλλά δεν παρέχουν σημαντικές πληροφορίες πρόσθετο στο Gleason σκοράρει ή να Ki-67.

Συμπεράσματα /Σημασία

συνάγεται το συμπέρασμα ότι ο όγκος ErbB2-IR είναι περιορισμένη κλινική αξία ως προγνωστικός δείκτης για την ενίσχυση αποφάσεις θεραπείας, αλλά θα μπορούσε να είναι παθοφυσιολογικών σημασία στον καρκίνο του προστάτη

Παράθεση:. Hammarsten P, Winther J, Rudolfsson SH, Häggström J, Karalija Α, Egevad L, et al. (2014) ErbB2 Receptor Ανοσοαντιδραστικότητα στον καρκίνο του προστάτη: Σχέση στον υποδοχέα ανδρογόνων, βαρύτητα της νόσου κατά τη διάγνωση και την ασθένεια αποτέλεσμα. PLoS ONE 9 (9): e105063. doi: 10.1371 /journal.pone.0105063

Επιμέλεια: Ramin Massoumi, Πανεπιστήμιο Lund, Σουηδία

Ελήφθη: 16 Φεβ 2014? Αποδεκτές: 19, Ιουλίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 12 Σεπτεμβρίου 2014

Copyright: © 2014 Hammarsten et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από το σουηδικό Συμβούλιο Έρευνας (Grant καμία 12158, ιατρική, CJ Fowler.)? η Σουηδική Εταιρεία Καρκίνου (. Grant δεν CAN2010 /437, C. J. Fowler)? Ίδρυμα λέοντος Cancer Research, Πανεπιστήμιο της Umea (Π Hammarsten και C.J. Fowler)? το Ίδρυμα Έρευνας για τον Καρκίνο στη Βόρεια Σουηδία (Π Hammarsten), και οι Κονδυλίων Έρευνας της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Umea (C. Fowler). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ErbB2 (Her-2 /neu) είναι ένα μέλος της οικογένειας παράγοντα επιδερμικής ανάπτυξης των κινασών τυροσίνης που εμπλέκονται σε μια ποικιλία κυτταρικών αποκρίσεων συμπεριλαμβανομένης της απόπτωσης, τη μετανάστευση, την ανάπτυξη, την προσκόλληση και διαφοροποίηση [1]. ErbB2 σχηματίζει ετεροδιμερή με άλλα μέλη της οικογένειας ErbB και εκκινεί έναν καταρράκτη σηματοδότησης οδών, συμπεριλαμβανομένης της ενεργοποίησης του παράγοντα επιβίωσης Akt [1], [2]. ErbB2 βρίσκεται επίσης σε κύτταρα όγκου, και trastuzumab, ένα μονοκλωνικό αντίσωμα ErbB2, χρησιμοποιείται για την επικουρική θεραπεία του ErbB2-θετικό καρκίνο του μαστού. Άλλες ErbB2 μονοκλωνικά αντισώματα είναι επίσης υπό κλινική ανάπτυξη [3].

Η σημασία του ErbB2 στην παθογένεση του καρκίνου του προστάτη (PCA) είναι λιγότερο σαφής. ανάπτυξη PCA είναι ρυθμίζεται από υποδοχείς ανδρογόνων (AR), και ένα κλειδί θεραπεία των εξαρτώμενων από ανδρογόνα PCA είναι η μείωση των επιπέδων ανδρογόνων είτε με χειρουργική ή ιατρική ευνουχισμό. Ωστόσο, η επίδραση της θεραπείας είναι προσωρινή, και οι καρκίνοι γίνονται ανδρογόνο ανθεκτικά. Το 1999, Craft et al. [4] ανέφεραν ότι η εισαγωγή ErbB2 σε LNCaP κύτταρα Pca εξαρτώμενων από ανδρογόνα κατέστησε τους μερικώς ανθεκτικά στην παρεμπόδιση της ανάπτυξης που παράγεται από στέρηση ανδρογόνου. Περαιτέρω, σε ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος χρησιμοποιώντας ευνουχισμένους ποντικούς, τα κύτταρα που εκφράζουν ErbB2-παρήγαγε μια πιο γρήγορη σχηματισμό όγκων από τα μη επιμολυσμένα κύτταρα LNCaP [4]. Η προγνωστική εγκυρότητα του ξενομοσχεύματος μοντέλων είναι αμφιλεγόμενη [5], αλλά μια αυξημένη συχνότητα μετάστασης έχει αναφερθεί σε ένα ορθοτοπικό μοντέλο Pca μετά από ένεση μέσα στο κοιλιακό προστάτη γυμνών ποντικών του NBE-1,4 προστατικά κύτταρα αρουραίου που υπερεκφράζουν τον ομόλογο αρουραίου του ErbB2 [ ,,,0],6]. Αντιστρόφως, η αγωγή των θηλυκών BALB /c γυμνά ποντίκια με μια μειωμένη ανάπτυξη του όγκου ΕτοΒ2 μετά την ένεση των κυττάρων 22Rv1 Pca [7]. Απομάκρυνση των ανδρογόνων από το μέσο κυτταρικής καλλιέργειας αυξάνει την έκφραση ErbB2 [8], και μία ελαφρά αύξηση στην έκφραση ErbB2 επτά ημέρες μετά τον ευνουχισμό παρατηρείται σε ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος της ανάπτυξης του όγκου με κύτταρα CWR22 [9].

Ενώ η μελέτες σε κυτταρικές σειρές και ζωικά μοντέλα δείχνουν μια βασικό ρόλο του ErbB2 στην παθογένεση της ΣΕΣ, μελέτες σε ανθρώπους είναι λιγότερο σαφής. Διάφορες μελέτες έχουν αναφέρει πολύ μεγάλες διακυμάνσεις στα επίπεδα έκφρασης ErbB2 σε ιστό όγκου του προστάτη (βλέπε [10] και παραπομπές εκεί). Ωστόσο, μια μετα-ανάλυση της βιβλιογραφίας μεταξύ των ετών 1996 και 2009 διαπιστώθηκε αυξημένος σχετικός κίνδυνος για θάνατο λόγω Pca ή βιοχημικές (ειδικό προστατικό αντιγόνο, PSA) υποτροπή της νόσου σε ασθενείς με μέτρια έως υψηλά επίπεδα έκφρασης ErbB2 όγκου [11 ]. Αυτοί οι συγγραφείς κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι «περαιτέρω κλινικές δοκιμές θα πρέπει να ελεγχθεί η υπόθεση ότι HER-2 /neu είναι ένας δείκτης μιας κλινικά χειρότερη έκβαση σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη και ένα δυνητικό στόχο για θεραπεία». Μια τέτοια έρευνα που ακολούθησε σε ένα μεγάλο (& gt? 1700) ο αριθμός των ασθενών που επιβεβαίωσε ότι οι προγνωστικές ιδιότητες των υπερέκφραση ErbB2 με την PSA υποτροπή ως τελικό σημείο, αν και δεν παρέχουν πρόσθετο προγνωστικές πληροφορίες σε αυτή που δίνεται από το σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου και η προεγχειρητική επίπεδο PSA [10]. Αν και οι ασθενείς δεν υποβλήθηκαν σε θεραπεία κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης, τα δείγματα λήφθηκαν σε ριζική προστατεκτομή και όχι κατά τη διάγνωση. Επομένως, είναι σημαντικό να καθοριστεί αν ErbB2 έχει καλύτερη προγνωστική αξία (δηλαδή παρέχει πρόσθετο πληροφορία με αυτή που δίδεται με τη χρήση του Gleason στείλει και άλλους προγνωστικούς δείκτες) σε μια ομάδα ασθενών, όπου τα δείγματα ιστού ελήφθησαν κατά τη διάγνωση και η φυσική εξέλιξη της νόσου μπορεί να μελετηθεί. Αυτό έχει διερευνηθεί στην παρούσα μελέτη.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική δήλωση

Το ανθρώπινο υλικό συλλέχθηκε σύμφωνα με τη σουηδική κανονισμούς σε μια εποχή που ενημερώθηκαν δεν ήταν απαιτείται η έγκριση . Η έρευνα επιτροπή δεοντολογίας σε Umeå πανεπιστημιακό νοσοκομείο (Περιφερειακό Ηθική Διοικητικού κριτική στο Umeå) ενέκρινε τη μελέτη (αρ. 02-283) και παραιτήθηκε από την ανάγκη για συναίνεση.

Ηθικά άδεια (αρ. A110-12) για τα πειράματα σε ζώα λήφθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας των τοπικών ζώων (Umeå Επιτροπή Δεοντολογίας ζώων Σπουδών, Σουηδία).

τα δείγματα ασθενών

Η ομάδα που χρησιμοποιείται είναι από μια συνεχόμενη σειρά από 412 άνδρες που είχαν διαγνωστεί με καρκίνο του προστάτη εξής διουρηθρική εκτομή για χαμηλότερες symtoms ουροποιητικού συστήματος [12]. Οι περιπτώσεις που συλλέχθηκαν μεταξύ 1975 και 1991 στο Κεντρικό Νοσοκομείο, Västerås, Σουηδία, μια χρονική περίοδο κατά την εξέταση του PSA δεν ήταν ρουτίνα. Δεδομένου ότι οι ασθενείς διαγνώστηκαν μετά τη λειτουργία, που δεν είχαν λάβει ορμονική θεραπεία ή ακτινοθεραπεία πριν από διουρηθρική εκτομή. Τα δείγματα στη συνέχεια σταθεροποιημένο με φορμαλίνη και εγκλεισμένα σε παραφίνη. Χρησιμοποιώντας πυρήνες (διάμετρος 0,6 mm) οι μικροσυστοιχίες ιστού έγιναν χρησιμοποιώντας ένα όργανο Beecher (Sun Prairie, WI, USA). Για κάθε ασθενή, έως και οκτώ πυρήνες (συνήθως 5) του ιστού του όγκου και μέχρι τέσσερα δείγματα μη κακοήθους ιστού από κάθε ασθενή τοποθετήθηκαν [12].

ErbB2 ανοσοαντιδραστικότητα (ErbB2-IR) σε Pca μικροσυστοιχίες

Ο ιστός τμήματα μικρο συστοιχία 4 μm εγκλεισμένοι σε παραφίνη τοποθετήθηκαν σε διαφάνειες, ψήνονται στους 60 ° C, 1 ώρα και στη συνέχεια αφαιρείται η παραφίνη και επανυδατώθηκαν. μπλοκ υπεροξειδίου με 3% H

2O

2 σε μεθανόλη για 20 λεπτά αναλήφθηκε. Το αντιγόνο ανάκτηση διεξήχθη με τομές τοποθετήθηκαν σε ένα κιτρικό ρυθμιστικό διάλυμα ρΗ 6,0 και στον ατμό σε ένα φούρνο μικροκυμάτων για 2 λεπτά. Το διάλυμα αφέθηκε να κρυώσει για 5 λεπτά, πλύθηκαν σε απεσταγμένο νερό και στη συνέχεια ρυθμιστικό διάλυμα TBS. Η πρωτεΐνη-μπλοκ (ϋΑΚΟ, Στοκχόλμη, Σουηδία) διεξήχθη για 15 λεπτά μετά την οποία τα τμήματα εκτέθηκαν στο πρωτογενές μονοκλωνικό αντίσωμα (ποντικού c-erbB-2 Προ-αραιωμένος κοκτέιλ αντισωμάτων (PM070AA), Biocare, CA, USA) για 2 ώρες σε RT. Στη συνέχεια, το δευτερεύον αντίσωμα (αλόγου αντι-ποντικού (BA-2000), Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) επωάστηκε σε 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου ακολουθούμενο από αβιδίνη-βιοτίνη συγκρότημα tagging για 30 λεπτά σε RT με τη χρήση της Elite ABC Kit (Vector Laboratories ) και τέλος DAB (DAKO) ενίσχυση για 40 s σε θερμοκρασία δωματίου.

όγκων (n = 1.822) και μη-κακοήθεις (n = 1.170) πυρήνες βαθμολογήθηκαν για ErbB2 σε προστάτη επιθηλιακά κύτταρα και κύτταρα όγκου από ψηφιακά σαρωμένα εικόνες από έναν αξιολογητή (JW), οι οποίοι δεν είχαν κατά τη χρονική στιγμή της αξιολόγησης έχουν πρόσβαση στα κλινικά δεδομένα. Τα δείγματα όγκου βαθμολογήθηκαν με βάση την ένταση ανοσοδραστικών (που κυμαίνεται από 0 = καμία χρώση για 4 = χρώση μέγιστη) και διανομής (0, 25, 50, 75, 100%). Σημειώστε ότι οι βαθμολογίες διανομής δεν περιλαμβάνουν στρώμα, δεδομένου ότι αυτό δεν εκφράζουν ErbB2-IR. Έτσι, ένα δείγμα με μόνο ένα μικρό ποσοστό των επιθηλιακών κυττάρων αλλά με μεγάλη ποσότητα στρώματος μπορεί να σκοράρει ακόμα μία κατανομή του 100% και σε ένταση 4. Στη συνέχεια, για κάθε πυρήνα σύνθετο αξία προσδιορίστηκε (μεταξύ 1-4). Για παράδειγμα, ένας πυρήνας με όπου το 25% του μετρήσιμου δείγμα είχε ένταση 2 και το 75% είχε ένταση 3 θα λάβει σύνθετη βαθμολογία (0,25 × 2 + 0,75 χ 3) = 2,75. Διάμεση τιμές στη συνέχεια προσδιορίστηκαν για κάθε περίπτωση. Για τον προσδιορισμό της συνέπειας, 301 πυρήνες όγκου σκόραρε και στη συνέχεια αναβαθμολόγηση. Interclass συντελεστής συσχέτισης για τη συνοχή (μικτό μοντέλο) έδωσε άλφα του Cronbach 0,90, 254 301 σκορ ήταν στο 0,5 μονάδες βαθμολογίας της κάθε άλλο. Οι μη-κακοήθεις πυρήνες επιπλέον σκόραρε για βασική και αυλού κυττάρων χωριστά, όταν αυτό είναι δυνατόν. Μερικοί πυρήνες (n = 482) είχε σαφώς αναγνωρίσιμα βασική και αυλού κύτταρα και αυτά έχουν επιστραφεί ως βασική και του αυλού στη βάση δεδομένων. Μια διάχυτη βασική στιβάδα (n = 436), παρατηρήθηκε σε ορισμένους άλλους πυρήνες και στα υπόλοιπα πυρήνες (n = 252), τα βασικά κύτταρα δεν μπορούσαν να αναγνωριστούν. Αυτοί οι πυρήνες δεν έχουν χρησιμοποιηθεί εδώ, γι ‘αυτό θα πρέπει να μείνει στην ιστορία ως μια προειδοποίηση ότι οι βαθμολογίες για βασική και αυλού μη κακοήθεις ErbB2-IR αντιπροσωπεύουν ένα περιορισμένο σύνολο δεδομένων. δείκτης Ki67, pAkt-IR, υποδοχέα ανδρογόνου (AR)-IR και τα κλινικά χαρακτηριστικά για κάθε ασθενή ήταν διαθέσιμα στη βάση δεδομένων και έχουν αναφερθεί εν όλω ή εν μέρει προηγουμένως [12] – [15].

Ζώα και αγωγές

Σαράντα δύο ενήλικα αρσενικά Sprague-Dawley (284-430 g) αναισθητοποιήθηκαν με pentobarbitalnatrium (50 mg /kg) και ευνουχισμένων μέσω του οσχέου. Έξι άθικτα ζώα χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Μετά από 7 ημέρες, είκοσι ένα από τα ζώα έλαβαν μια υποδόρια ένεση μακράς δράσης τεστοστερόνης (5 mg /kg, Sustanon, Organon, Oss, The Netherlands) που δίνεται ως μία μοναδική δόση κάθε δεύτερη ημέρα όπως περιγράφηκε προηγουμένως [16]. Προστάτη ιστός αφαιρέθηκαν σε διαφορετικούς χρόνους μετά τον ευνουχισμό (1, 3, 7 ημέρες) και σε διαφορετικούς χρόνους μετά την αγωγή τεστοστερόνης (1 ημέρα, 2 ημέρες, 3 ημέρες) ευνουχισμό + και καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο. Υπήρχαν επτά ομάδες, συμπεριλαμβανομένης της ομάδας ελέγχου και κάθε ομάδα αποτελείτο από έξι ζώα.

Ο πειραματικός σχεδιασμός αυτής της μελέτης προχώρησε σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές για τη φροντίδα και τη διαχείριση των πειραματόζωων και εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας των τοπικών ζώων ( Umeå Επιτροπή Δεοντολογίας ζώων Σπουδών, Σουηδία). Τα ζώα στεγάστηκαν υπό ελεγχόμενη θερμοκρασία σε ένα τεχνητά φωτίζεται δωματίου (12-h φως /12-h σκοτάδι). Τροφή και νερό της βρύσης ελεύθερα διαθέσιμα.

παρασκεύασμα RNA και Ποσοτική PCR αντίστροφης μεταγραφής

Το συνολικό RNA από ιστούς απομονώθηκε σύμφωνα με την μέθοδο ΤΚΙζοΙ (Invitrogen, Στοκχόλμη, Σουηδία). Οι συγκεντρώσεις RNA ποσοτικοποιήθηκαν φασματοφωτομετρικά στα 260 nm (DU 640 φασματοφωτόμετρο, Beckman Coulter, Bromma, Σουηδία) και η ακεραιότητα του RNA επαληθεύεται δια 28 S και 18 S rRNA ακεραιότητα μετά από ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Πέντε εκατό ng ολικού RNA αντιστράφηκε μεταγραφή χρησιμοποιώντας τυχαία εξαμερή (Applied Biosystems, Sundbyberg, Σουηδία) και Superscript II αντίστροφη μεταγραφάση (Invitrogen, Στοκχόλμη, Σουηδία) σε μία αντίδραση 10 μΐ σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Όλες οι αντιδράσεις cDNA διεξήχθησαν εις διπλούν.

Η ποσοτικοποίηση του ErbB2 mRNA έγινε με πραγματικού χρόνου ποσοτική PCR με τη χρήση του ΑΒΙ PRISM 7900HT Μέσο (Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA). Οι αντιδράσεις διεξήχθησαν σε ένα όγκο 20 μΐ χρησιμοποιώντας προσδιορισμούς γονιδιακής έκφρασης TaqMan Rn00566561_m1 (Applied Biosystems, Life Technologies Europe BV, Στοκχόλμη, Σουηδία) με την έκφραση του γονιδίου TaqMan βασικού μείγματος σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Κάθε δείγμα αναλύθηκε για Rpl13a (Rn00821946_gl, Applied Biosystems) και β-ακτίνη (Rn00667869_ml, Applied Biosystems) έκφραση να χρησιμοποιούν ως ομαλοποίηση έλεγχοι αναφοράς. Για να επιβεβαιωθεί η ειδικότητα της ενίσχυσης τα PCR προϊόντα υποβλήθηκαν σε ανάλυση της καμπύλης τήξης. Τα δεδομένα ποσοτικοποίηση αναλύθηκαν με SDS 2.4 Software (Applied Biosystems) και οι σχετικές τιμές του ErbB2 mRNA στα δείγματα υπολογίζονται από μία πρότυπη καμπύλη που λαμβάνεται με ενίσχυση του πέντε-φορές σειριακή αραίωση αντιστραφεί μεταγράφονται ολικού RNA από ένα δείγμα αναφοράς. Ένα θέμα σε αυτό το είδος της μελέτης είναι η κατάλληλη υπηρεσία καθαριότητας στη χρήση, δεδομένου ότι τα επίπεδά τους μπορούν να ποικίλουν σε έρευνα για τον καρκίνο μελέτες [17], [18]. Έχουμε εκλεγεί για να παρουσιάσει τα δεδομένα κανονικοποιούνται σε δύο γονίδια: β-ακτίνη και rpl13a, προκειμένου να δώσει μια εκτίμηση της αξιοπιστίας των δεδομένων

Στατιστικά

Ο εσωτερικός συντελεστής συσχέτισης, δυαδικό. υλικοτεχνική και Cox αναλύσεις παλινδρόμησης αναλογικών κινδύνων διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό SPSS (IBM). Τακτικός αναλύσεις παλινδρόμησης χρησιμοποιείται λογισμικό που αναπτύχθηκε στο πλαίσιο του έργου R για στατιστικούς υπολογισμούς (έκδοση 2.15.2) [19]. Όλα τα άλλα στατιστικούς υπολογισμούς χρησιμοποιήθηκε το στατιστικό πακέτο ενσωματωμένη στο πρόγραμμα υπολογιστή GraphPad Prism 6 για Macintosh (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Για τις περιπτώσεις που ακολουθείται από το προσδόκιμο, λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη (ROC) καμπύλη με όριο παρακολούθησης 15 ετών χρησιμοποιήθηκαν για να καθορίσουν cut-offs για ErbB2-IR. Για αυτές τις καμπύλες και για τις καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier, ένα γεγονός ορίστηκε ως ο θάνατος οφείλεται σε καρκίνο του προστάτη και είναι νηολογημένα στη βάση δεδομένων ως «συμβάν = 1». Ασθενείς με θάνατο από άλλες αιτίες και περιπτώσεις όπου οι ασθενείς ήταν ζωντανοί κατά το χρόνο της παρακολούθησης είχαν λογοκριθεί και καταχωρηθεί στη βάση δεδομένων ως εκδήλωση = 0.

Αποτελέσματα

ErbB2-IR σε Pca μικροσυστοιχίες ιστού: σύγκριση του όγκου και μη κακοήθεις βαθμολογίες

Ένα σύνολο 357 (όγκου) και 222 (μη-κακοήθεις βασική και αυλού) περιπτώσεις βαθμολογήθηκαν για ErbB2-IR. Παραδείγματα διαφορετικών εντάσεων ErbB2-IR από τέσσερις πυρήνες του όγκου που φαίνεται στο Σχ. 1Α-D. Ένα παράδειγμα μη-κακοήθους ιστού δείχνει μια σαφή διαφορά μεταξύ βασικής και αυλού ErbB2-IR παρουσιάζεται στο Σχ. 1Ε. Τόσο για τον όγκο και μη κακοήθη δείγματα, τα επιθηλιακά κύτταρα έδειξαν ErbB2-IR ενώ στρώματος δεν το έκανε. Οι αθροιστικές βαθμολογίες για το επιθηλιακό όγκου και το μη-κακοήθη βασική και αυλού κύτταρα φαίνεται στο Σχ. 2Α. Για αντίστοιχα δείγματα, τα αποτελέσματα ήταν σημαντικά διαφορετικό από κάθε άλλο (P & lt? 0,0001 για ζεύγη δοκιμές, Wilcoxon ταιριάζουν ζεύγη υπέγραψε τεστ rank). Στο επίπεδο των μεμονωμένων πυρήνων, ο αριθμός των περιπτώσεων με βαθμολογίες βασικής ≥-1, -0,99 -0,01 να, 0 0,01 έως 0,99 1 έως 1,99 και ≥2 μονάδες υψηλότερα από τα συμφωνημένα αυλού βαθμολογίες ήταν 1, 1, 5, 86, 286 και 103, αντίστοιχα

Οι κατ ‘εξουσιοδότηση σκορ ήταν:. Αποτέλεσμα 1 για πάνελ Α? Σκορ 2 για Πάνελ Β? Σκοράρει 2.25 (75% ένταση σκοράρει 2, ένταση 25% βαθμολογία: 3) για τον πίνακα C? Σκορ 4 για Panel D. Το Gleason βαθμολογίες των περιπτώσεων από τα οποία προέρχονται οι πυρήνες ήταν 5 για πίνακες Α και C, και 10 για πάνελ Β και D. πάνελ Ε δείχνει παράδειγμα του ErbB2 ανοσοαντιδραστικότητας σε ένα μη κακοήθη πυρήνα, όπου βασική και χρώση του αυλού θα μπορούσε εύκολα να ταυτοποιηθούν.

η

στο πλαίσιο Α οι αθροιστικές συχνότητες των βαθμολογιών ErbB2-IR παρουσιάζεται για τα δείγματα όγκου (n = 357), και για την βασική και αυλού μη κακοήθη δείγματα (η = 222 και στις δύο περιπτώσεις). Οι μέσες τιμές (με διατεταρτημοριακό εύρος σε παρένθεση) ήταν: όγκος, 3.0 (02/25 – 03/05)? αυλού καλοήθεις, 2,25 (2,0 – 2,625)? βασικά μη-κακοήθεις 3,875 (3,5-4,0). Οι μέσες τιμές ήταν σημαντικά διαφορετικό από κάθε άλλο (p & lt? 0.001, τεστ πολλαπλής σύγκρισης του Dunn εξής σημαντική δοκιμασία Kruskal-Wallis). Πίνακας Β δείχνει ένα διάγραμμα διασποράς των επιμέρους βαθμολογιών για όγκο ErbB2-IR και pAkt-IR (που λαμβάνονται από το [14]).

Η

Σύλλογος ErbB2-IR με τη βαρύτητα της νόσου κατά τη διάγνωση

Η ένωση του ErbB2-IR με την κλινική (ηλικία, σκορ Gleason,% του πυρήνα που σχετίζονται με όγκο) και βιοχημικές (δείκτης Ki67, στρώμα AR-IR και pAkt-IR) μέτρα εντός της ίδιας περιοχής παρουσιάζονται στον πίνακα 1. Πρώτα -Τάξη τιμές rho Spearman στο πίνακα 1 υπολογίστηκαν όπως περιγράφεται στο [20]. Στα δείγματα όγκων, σημαντικές συσχετίσεις με το Gleason σκορ,% του πυρήνα που σχετίζονται με όγκο, ο δείκτης Ki67 και pAkt-IR βρέθηκαν. Ένα διάγραμμα διασποράς που δείχνει τη συσχέτιση μεταξύ ErbB2-IR και pAkt-IR βαθμολογίες όγκου φαίνεται στο Σχ. 2Β. Συνεπής με την αξία του rho σημαντική Spearman, η διανομή των περιπτώσεων με Gleason σκορ 4-5, 6, 7 και 8-10, αντίστοιχα, ήταν διαφορετική για εκείνους με σκορ όγκου ErbB2-IR ≤2.75 (40 [26%], 46 [30%], 26 [17%] και 41 [27%]) σε σχέση με εκείνους με σκορ & gt? 2,75 (21 [10%], 57 [28%], 40 [20%] και 86 [42%]) (P & lt? 0,0005, Chi τετράγωνο τεστ? τιμές που δίνονται είναι ο αριθμός [% για την ομάδα ErbB2-IR] με το εύρος σκορ Gleason κατά τη διάγνωση οι αντίστοιχες τιμές για τη βαθμούς όγκου 1α-1β, 2, 3 και 4, αντίστοιχα,. ήταν: όγκος βαθμολογίας ErbB2-IR ≤2.75, 92 [61%], 30 [20%], 25 [17%] και 3 [2%])? όγκου βαθμολογία ErbB2-IR & gt? 2,75, 83 [41%], 61 [30%], 49 [24%] και 8 [4%] (P & lt? 0.005, χ

2 τεστ).

στη θεωρία, μια σημαντική ένωση των δύο παραμέτρων θα μπορούσε να οφείλεται στο γεγονός ότι και οι δύο παράμετροι που συνδέονται με μια τρίτη παράμετρο. Έτσι, για παράδειγμα, αν περιπτώσεις με υψηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού των κυττάρων, όπως φαίνεται με το δείκτη δείκτη Ki67, έχουν πιο συχνά υψηλές βαθμολογίες Gleason και υψηλότερες βαθμολογίες ErbB2-IR από τις περιπτώσεις με χαμηλά ποσοστά του πολλαπλασιασμού των κυττάρων, τότε ένας συσχετισμός μεταξύ ErbB2- IR και το Gleason σκορ θα μπορούσε να προκληθεί. Συνεπής με αυτή την κατάσταση, οι συσχετίσεις πρώτης τάξης μεταξύ ErbB2-IR και είτε το Gleason σκοράρει ή% του πυρήνα που ήταν σχετίζεται με όγκο έλεγχο για το δείκτη Ki67 όγκου δεν ήταν σημαντικές. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ του όγκου ErbB2-IR και pAkt-IR παρέμειναν σημαντικές (Πίνακας 1). Έτσι, στον ιστό του όγκου, οι βαθμολογίες ErbB2-IR συνδέεται με το κατάντη μόριο σηματοδότησης pAkt και με τον δείκτη τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων Κί67, αλλά όχι σθεναρά με τα κλινικά μέτρα της σοβαρότητας της νόσου. Δεν παρατηρήθηκε σημαντική συσχέτιση μεταξύ ErbB2-IR και είτε το σκορ Gleason, το% του πυρήνα που σχετίζονται με τον όγκο ή το μη-κακοήθεις δείκτη Ki67 παρατηρήθηκε είτε για βασικοκυτταρικό ή αυλού ErbB2-IR. Σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ των βασικών ErbB2-IR και τόσο μη-κακοήθεις pAkt-IR και στρώμα AR είχαν δει.

Σχέση μεταξύ των όγκων ErbB2 και ανδρογόνων σηματοδότησης

Ricciardelli et al. [21] ανέφεραν ότι τα υψηλά επίπεδα τόσο του όγκου ErbB2-IR και AR-IR ήταν πιο συχνή σε ασθενείς ΣΕΣΣ με το στάδιο 3 όγκους (n = 31) από ό, τι στο στάδιο 2 όγκους (n = 22, τα δείγματα λαμβάνονται σε ριζική προστατεκτομή). Εδώ ερευνήσαμε τη σχέση μεταξύ αυτών των δύο μεταβλητών σε μικροσυστοιχία ιστού μας. Σύμφωνα με την μελέτη του [21], δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ των δύο μεταβλητών

per se

στον ιστό του όγκου (Πίνακας 1). Ωστόσο, σε υλικό μας, οι περιπτώσεις με τα επίπεδα τόσο του όγκου ErbB2-IR και AR-IR πάνω από τη μέση ήταν λιγότερο συχνή σε ασθενείς με σταδίου 3 όγκους (n = 58) από ό, τι για το στάδιο 2 όγκους (n = 82) (Πίνακας 2) . Όπως πρέπει να αναμένεται από τη συσχέτιση των αναλύσεων παρουσιάζονται στον Πίνακα 1, μια σύγχυση θέμα είναι ότι ο δείκτης Ki-67 κυμαίνεται μεταξύ των ομάδων (Πίνακας 2).

Η

Για να λογοδοτήσει γι ‘αυτό, αναλάβαμε τακτικός αναλύσεις παλινδρόμησης με όγκο ErbB2-IR, AR-IR και Ki67-δείκτη ως ανεξάρτητες μεταβλητές και το στάδιο του όγκου ως εξαρτημένη μεταβλητή τακτικό. Ως προειδοποίηση, θα πρέπει να επισημανθεί το Κί67 δείκτη συσχετίζεται τόσο με ErbB2-IR (Πίνακας 1) και AR-IR (rho Spearman είναι -0.17, n = 340, Ρ & lt? 0.005) και έτσι οι τρεις μεταβλητές δεν είναι πραγματικά ανεξάρτητες . Ωστόσο, οι συσχετίσεις, αν και σημαντική, είναι σχετικά χαμηλό, οπότε ο κίνδυνος πολυσυγγραμμικότητα είναι μικρή. Περαιτέρω, η λέξη «τακτικό» σε ανάλυση τακτικός παλινδρόμησης αναφέρεται στην εξαρτημένη μεταβλητή, και οι τιμές των ανεξάρτητων μεταβλητών ορίστηκε ως συνεχής, παρά τακτικό, η οποία είναι στην πραγματικότητα η περίπτωση για τις βαθμολογίες (ως εκ τούτου, για παράδειγμα, το χρήση του rho Spearman και όχι r του Pearson στον πίνακα 1). Ωστόσο, αυτό είναι απολύτως λογικό σε τακτικός μοντέλα παλινδρόμησης όταν η μεταβλητή εν λόγω έχει ένα μεγάλο αριθμό κατηγοριών (υπάρχουν 22 διαφορετικές βαθμολογίες ErbB2 όγκου που κυμαίνεται από 1 έως 4 στην βάση δεδομένων). Στο κύριο μοντέλο αποτελέσματα, οι τιμές επέστρεψαν από την ανάλυση τακτικό παλινδρόμησης για μια μεταβλητή αντιπροσωπεύουν συνολική επίδραση του όταν περιλαμβάνονται οι άλλες μεταβλητές. Στην περίπτωση αυτή, τόσο ο δείκτης Ki67 (θετικό) και το AR-IR (αρνητικό) ήταν σημαντικές, ενώ ErbB2 δεν ήταν (Πίνακας 3). Στον όρο μοντέλο αλληλεπίδρασης, η τιμή για το άτομο μεταβλητή είναι για μία σταθερή τιμή των άλλων μεταβλητών. Σε αυτή την περίπτωση, τα αποτελέσματα για τις τρεις μεταβλητές ήταν η ίδια από την άποψη της σημασίας, ωστόσο, μια σημαντική αλληλεπίδραση ErbB2-IR x AR-IR (θετικό) επεστράφη. Με άλλα λόγια, όταν οι μεταβλητές να παραμένουν σταθερές, υπάρχει μια επίδραση του συνδυασμού του ErbB2-IR x AR-IR, έτσι ώστε η υψηλότερη οι βαθμολογίες, ο μεγαλύτερος είναι ο αριθμός το στάδιο του όγκου. Οι τιμές αναλογία logit και αποδόσεις για τα τέσσερα επίπεδα ανταπόκρισης (επίπεδο 1 είναι το επίπεδο αναφοράς) σε διαφορετικά αποτελέσματα ErbB2-IR και AR-IR παρουσιάζονται στον Πίνακα S1 για να τονίσει αυτό το σημείο για τους αναγνώστες καλά εξοικειωμένος με αυτή τη στατιστική μέθοδο.

Τα στοιχεία της Ricciardelli et al. [21] και η παρούσα μελέτη είναι συνεπής με, αλλά όχι αποδείξεις, μια αλληλεπίδραση μεταξύ των ανδρογόνων σηματοδότηση και έκφραση ErbB2. Τέτοια απόδειξη απαιτεί τη χρήση πειραματικών μοντέλων. Ανδρογόνων απομάκρυνση επηρεάζει έκφραση ErbB2 σε κυτταρικές γραμμές όγκου [8] και σε μοντέλα ξενομοσχεύματος [9]. Δεν είναι γνωστό, όμως, αν η ρύθμιση περιορίζεται σε κύτταρα όγκου ή παρατηρείται επίσης σε άθικτα ιστό προστάτη ακόλουθες παραλλαγές μεγάλης κλίμακας στα κυκλοφορούντα επίπεδα τεστοστερόνης. Προκειμένου να προσδιοριστεί αν παρόμοια ρυθμιστικά αποτελέσματα παρατηρήθηκαν στο κανονικό προστάτη, η έκφραση ErbB2 σε επίπεδο mRNA σε αυτόν τον ιστό μετρήθηκε με qPCR ακόλουθη ευνουχισμό σε αρουραίους και εν συνεχεία αποκατάσταση των κυκλοφορούντων επιπέδων των ανδρογόνων με ένεση τεστοστερόνης. Τα αποτελέσματα που παρατηρήθηκαν (Εικ. 3) είναι συνεπείς με τις μελέτες του όγκου προαναφερθείσα

Τα δεδομένα κανονικοποιούνται με Α β-ακτίνης.? Β, Rpl13a. Συντομογραφίες: d pc, τον αριθμό των ημερών μετά τον ευνουχισμό? Τ, τεστοστερόνη. Παρουσιάζονται οι μεμονωμένες τιμές (η = 6 ανά ομάδα)? οι στερεές μπάρες δείχνουν μέσους όρους. Και στις δύο περιπτώσεις, οι δοκιμές Kruskal-Wallis έδειξε μία σημαντική διαφοροποίηση μεταξύ των ομάδων (P & lt? 0.0001).

Η

προγνωστική αξία της όγκου ErbB2-IR

Ένα σύνολο από 255 περιπτώσεις σκόραρε για όγκου ErbB2-IR ακολούθησαν προσδόκιμο μετά τη διάγνωση, αυτή είναι η τυπική θεραπεία κατά τη χρονική στιγμή. Σε αυτές τις περιπτώσεις, η φυσική εξέλιξη της νόσου μπορεί να ακολουθηθεί, και η επίδραση ενός βιοδείκτη κατόπιν αποτέλεσμα μπορεί να διερευνηθεί. Σε γενικές γραμμές, μια τιμή αποκοπής του βιοδείκτη που θα επιλεγεί, και το αποτέλεσμα συγκρίνεται μεταξύ των περιπτώσεων κάτω και πάνω από το cut-off προσδιορίζεται σε αναλύσεις επιβίωσης, όπως η ανάλυση παλινδρόμησης αναλογικού κινδύνου Cox και οικόπεδα Kaplan-Meier. Οι τιμές αποκοπής μπορεί να είναι αυθαίρετη, όπως ένα απλό διάμεση διάσπαση των δεδομένων, ή που ορίζεται από την βάση μιας στατιστικής ανάλυσης. Μια τέτοια προσέγγιση είναι η χρήση του λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη (ROC) αναλύει, το οποίο οικόπεδο για όλες τις πιθανές τιμές διαχωρισμού το πραγματικό θετικό ποσοστό (ευαισθησία) εναντίον της ψευδούς θετικού ρυθμού (1-ειδικότητα). Για μια καμπύλη ROC με εμβαδόν κάτω από την καμπύλη [AUC] σημαντικά μεγαλύτερη από 0,5 (χωρίς προγνωστική αξία), η βέλτιστη τιμή αποκοπής (δείκτη Youden, που αντιπροσωπεύει το cut-off που δίνει την υψηλότερη τιμή για την ευαισθησία + ειδικότητα – 1 ) μπορεί να υπολογιστεί (βλέπε [22] για την περιγραφή). Μια καμπύλη ROC με όριο 15 ετών έδειξε μια σημαντική προγνωστική αξία του όγκου ErbB2-IR (περιοχή κάτω από την καμπύλη [AUC] 0,60, P & lt? 0.05), και ήταν στην διαίρεση ≤2.75 και & gt? 2,75. Συγκριτικά, η περιοχή ROC κάτω από την καμπύλη για το δείκτη Κί67 όγκου ήταν 0.75 (Ρ & lt? 0,0001) και έτσι μία τιμή 0,60, αν και σημαντική, δεν είναι εντυπωσιακό. Το μη-κακοήθεις βασική και αυλού βαθμολογίες ErbB2-IR έλειπε προγνωστική αξία (AUC≤0.55, P≥0.4).

Στη θεωρία, είναι πιθανό ότι αν και η AUC για όγκο ErbB2-IR είναι μέτρια, θα μπορούσε συμβάλλουν σε ένα συνδυασμό δεικτών με χρήσιμες προγνωστική αξία. Προκειμένου να διερευνηθεί αυτή η πιθανότητα, οι δύο προσεγγίσεις έχουν ληφθεί, με τη χρήση του όγκου ErbB2-IR μαζί με τρεις άλλους δείκτες όγκου (δείκτης Ki67, επιθηλιακά AR-IR και pAkt). Τα δεδομένα έχουν κανονικοποιηθεί έτσι ώστε η μέγιστη βαθμολογία σε κάθε περίπτωση είναι 100%, και στην περίπτωση του AR, τα αποτελέσματα εκφράστηκαν ως 100-κανονικοποιημένη βαθμολογία, δεδομένου ότι ένα χαμηλό, και όχι ένα υψηλό, AR-IR συνδέεται με μια φτωχή πρόγνωση [15]. Διαφορετικοί συνδυασμοί ελέγχθηκαν, αλλά καμία έδωσε μια βελτίωση με αυτό που παρατηρείται με Κί67 μόνο (Πίνακας S2). Οι καμπύλες ROC έδωσε ίση στάθμιση των διαφόρων βιοδεικτών, και έτσι θεωρητικά η βέλτιστη στάθμιση μπορεί να έχουν χαθεί. Κατά συνέπεια, μια δυαδική λογιστική ανάλυση παλινδρόμησης με το κλινικό αποτέλεσμα ως εξαρτημένη μεταβλητή διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας τις ίδιες παραμέτρους. Ο καλύτερος συνδυασμός των παραμέτρων όσον αφορά την ορθή πρόβλεψη του θανάτου οφείλεται σε PCA ήταν ~~23% και η συμπερίληψη του ErbB2 δεν βελτιωθεί το ποσοστό αυτό (Πίνακας S3). Συγκριτικά, το σκορ Gleason σε ποσοστό πρόβλεψης του 55,6% (Nagelkerke R

2 τιμή 0.419) από μόνη της και 45,6% (Nagelkerke R

2 τιμή 0,401) σε συνδυασμό με το AR-IR + Ki67-IR ( τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

ένα μονοπαραγοντική Cox αναλογικό ανάλυση κινδύνων παλινδρόμησης με συγκεκριμένες νόσους επιβίωση ως τελικό σημείο έδειξαν ότι ο σχετικός κίνδυνος για τις περιπτώσεις με σκορ όγκου ErbB2-IR πάνω από το βέλτιστο αποκοπής, όπως ορίζεται από το δείκτη Youden, ήταν περίπου διπλάσιο από εκείνο για εκείνους κάτω από την τιμή αποκοπής (η τιμή Exp (Β) φαίνονται στον πίνακα 4). Η μονοπαραγοντική ανάλυση δεν λαμβάνει υπόψη τυχόν δυνητικών συγχυτικούς παράγοντες. Από τα προηγούμενα αποτελέσματα που παρουσιάζονται στο παρόν έγγραφο, Ki67 είναι μια προφανής παράγοντας σύγχυσης, και αναλύει μια Διμεταβλητά αναλογικών κινδύνων κατά Cox παλινδρόμησης έδειξε ότι ο όγκος ErbB2-IR δεν παρέχουν πρόσθετες προγνωστικές πληροφορίες με αυτό που προβλέπεται είτε από το δείκτη Ki67 όγκου (Πίνακας 3). Από την άποψη της κλινικής χρησιμότητας, ένας δείκτης θα ήταν ενδιαφέρον αν παρείχε πληροφορίες πέρα ​​και πάνω από αυτό που προβλέπεται από το σκορ Gleason. Ωστόσο, μια Διμεταβλητά αναλογικών κινδύνων κατά Cox παλινδρόμησης αναλύσεις έλεγχο για το σκορ Gleason (τρεις ομάδες: 4-6, 7 και 8-10) έδειξε ότι η προγνωστική αξία του όγκου ErbB2-IR δεν είναι πλέον παρέμειναν σημαντικές (Πίνακας 4). Σε συμφωνία με αυτό, Kaplan-Meier οικόπεδα για όλες τις περιπτώσεις που ακολουθείται από το προσδόκιμο έδειξαν σημαντική προγνωστική επίδραση του όγκου ErbB2-IR (Σχήμα 4Α), και για τις περιπτώσεις με Gleason σκορ 4-6 (Σχ. 4Β). Ωστόσο, ένας σημαντικός προγνωστικός δράση δεν παρατηρήθηκε για τις περιπτώσεις με Gleason σκορ 6 μόνο (Σχήμα 4C), Gleason βαθμολογία 7 μόνο (Σχήμα 4D, αν και συνορεύουν με σημασία) ή για περιπτώσεις με Gleason σκορ 8-10 (Εικ. 4Ε).

Ο αριθμός των περιπτώσεων στις οποίες ο θάνατος οφειλόταν σε καρκίνο του προστάτη υποδεικνύονται ως

† Pca στην εικόνα. Οι καταπακτές στις γραμμές δείχνουν λογοκρίνονται δεδομένων (δηλαδή περιπτώσεις εκτός του θανάτου λόγω καρκίνου του προστάτη). Το φάσμα των Gleason σκορ (GS) για τους ασθενείς παρουσιάζονται σε κάθε πάνελ.

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, ερευνήσαμε τη σύνδεση του ErbB2-IR με τη σοβαρότητα της νόσου κατά τη διάγνωση και με την έκβαση της νόσου σε ένα καλά χαρακτηρισμένο ιστού microarray [12]. Υπάρχει ένα μεγάλο σώμα της εργασίας, σχετικά με την προγνωστική αξία της ErbB2 σε Pca (επισκόπηση, βλέπε [11]), αλλά η παρούσα μελέτη παρέχει νέες πληροφορίες σε δύο σημαντικά σημεία: πρώτον, τα δεδομένα που λαμβάνονται σε περιπτώσεις που δεν είχαν λάβει καμία καρκίνο θεραπεία πριν από τα δείγματα ελήφθησαν, αφού είχαν διαγνωστεί μόνο μετά διουρηθρική εκτομή για χαμηλότερες συμπτώματα του ουροποιητικού συστήματος. Επιπλέον, δεδομένου ότι η τυπική θεραπεία εκείνη την εποχή ήταν το προσδόκιμο, η μακρά παρακολούθηση χρησιμοποιείται επιτρέπει την εξέταση της φυσικής πορείας της νόσου. Αυτό είναι εξαιρετικά πολύτιμο για την αξιολόγηση των βιοδεικτών. Δεύτερον, η διαθεσιμότητα των δεδομένων κατά την AR στα ίδια δείγματα επέτρεψε την εξέταση των μεταξύ των σχέσεων μεταξύ ErbB2 και της έκφρασης AR στους όγκους. Σε γενικές γραμμές, τα ευρήματά μας είναι σε καλή συμφωνία με τη βιβλιογραφία. Όσον αφορά τις διαφορές στην έκφραση ιστού του ErbB2, Lyne et al. [23] ανέφεραν ότι το ποσοστό των δειγμάτων με μέτρια έως ισχυρή ανοσοδραστικότητα ErbB2 ήταν 100 για καλοήθη βασικά κύτταρα προστάτη, 11 για καλοήθη κύτταρα του αυλού του προστάτη, 0 για καλοήθη στρώμα του προστάτη, 87 για προστατική ενδοεπιθηλιακή νεοπλασία και 82 για τον καρκίνο του προστάτη. Στην παρούσα μελέτη, δεν παρατηρήσαμε ErbB2-IR στο στρώμα, και ο αριθμός (με% σε παρένθεση) των περιπτώσεων με τα αποτελέσματα ErbB2-IR ≥3 ήταν 196/222 (88%), 39/222 (18%) και 201/357 (56%) για μη-κακοήθεις βασική, του αυλού και του όγκου δειγμάτων, αντίστοιχα.

στα δείγματα όγκων, ErbB2-IR ήταν σημαντικά συνδέεται τόσο με το δείκτη πολλαπλασιασμού των κυττάρων Κί67 και ανοσοαντιδραστικότητας του pAkt η φωσφορυλιωμένη μορφή του παράγοντα επιβίωσης Akt. [21].