Αφηρημένο

Από καιρό έχει θεωρηθεί, αν και με εκπληκτικά λίγα στοιχεία, ένας ανταγωνισμός μεταξύ Πυρήνας 1 Gal-τρανσφεράσης (C1GalT), Core 3 ΟΙοΝΑο-τρανσφεράσης (C3GnT) και σιαλυλο-τρανσφεράσης (ST6GalNAc-T ) για επιμήκυνση του γλυκάνες βλεννίνης τύπου Ο-συνδεδεμένη αρχίζει με GalNAcα-Ser /Thr. Αυτή η μελέτη δοκιμαστεί αυτό το τεκμήριο με επιλεκτική καταστολή ενός από αυτά τα γλυκοζυλοτρανσφερασών και στη συνέχεια αναλύθηκαν οι εκφράσεις των ενζυμικών προϊόντων των άλλων τριών γλυκοζυλοτρανσφεράσες. Διαπιστώθηκε ότι siRNA καταστολή C1GalT μείωσε σημαντικά την έκφραση του Galβ1,3GalNAcα- (Πυρήνας 1) και στο μεταξύ αύξησε τις εκφράσεις του σιαλυλ-GalNAcα- (σιαλυλο-Τη), GalNAcα- (Tn) και GlcNAcβ1,3GalNAcα- ( core 3) -associated γλυκάνες σε ανθρώπινα ΗΤ29 καρκίνο του παχέος εντέρου και SW620 κυττάρων. Αυτό υποστηρίζει μια ανταγωνιστική τροποποίηση του GalNAcα-Ser /Thr μεταξύ C1GalT, C3GnT και ST6GalNAc-T στη βιοσύνθεση Ο-γλυκάνης. Όπως Tn, TF και σιαλυλο-Τη είναι ογκοεμβρυϊκά αντιγόνα και είναι πάνω-εκφράζεται στους περισσότερους ανθρώπινους καρκίνους, η πληροφορία αυτή είναι χρήσιμη για την ανάπτυξη της γλυκοζυλοτρανσφεράσης στόχευση θεραπευτικών στρατηγικών για τη θεραπεία του καρκίνου

Παράθεση:. Barrow Η, Tam Β, Duckworth CA, Ρόδο JM, Yu LG (2013) καταστολή του πυρήνα 1 Gal-τρανσφεράσης συνδέονται με τη μείωση των TF και αμοιβαία Αύξηση Tn, σιαλυλο-Tn και Core 3 Γλυκανών σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου. PLoS ONE 8 (3): e59792. doi: 10.1371 /journal.pone.0059792

Επιμέλεια: Roger Chammas, Universidade de São Paulo, Βραζιλία

Ελήφθη: 19 του Οκτώβρη 2012? Αποδεκτές: 18η, Φεβρουαρίου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 25 Μαρ 2013

Copyright: © 2013 Barrow et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε εν μέρει από μια επιχορήγηση (CR777) από την North West Καρκίνο Ταμείο Έρευνας και το Πανεπιστήμιο του διδακτορικού Μαθητείας. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Lu-Gang Yu είναι μια Συντακτική μέλος του Διοικητικού Συμβουλίου PLoS ONE. Οι συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι αυτή η συντακτική των μελών του Διοικητικού Συμβουλίου δεν μεταβάλλει την προσκόλλησή τους σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Η βιοσύνθεση των

O

-δεσμευμένα βλεννίνης γλυκάνες τύπος είναι ένα πολυ-ενισχυθεί, διαδοχική, μετα-μεταφραστική διαδικασία που καταλύεται από τις εκφράσεις και δραστηριότητες μιας συστοιχίας γλυκοζυλοτρανσφεράσες. Η διαδικασία βιοσύνθεσης ξεκινά με την προσθήκη του

N

-ακετυλο-γαλακτοζαμίνη (ΟαΙΝΑο) προς την σερίνη (Ser) ή θρεονίνης (Thr) καταλοίπων των πλήρως διπλωμένα /συναρμολογημένο πρωτεΐνες για να σχηματίσει το αρχικό Ο-συνδεδεμένη GalNAcα- Ser /δομή Thr (αντιγόνο τη) καταλύεται από ένα ή δύο από μια μεγάλη οικογένεια μέχρι 20 διακριτές UDP-Ν-ακετυλο-α-D-γαλακτοζαμίνη πολυπεπτίδιο ΟαΙΝΑο-τρανσφερασών (ppGalNAc-Ts) [1], [2]. Αυτά ppGalNAc-T ισοένζυμα έχουν διαφορετικές, αλλά εν μέρει επικαλυπτόμενες, πεπτίδιο ιδιαιτερότητες με τις πρωτεΐνες σε διαφορετικές θέσεις Ser και Thr και εκφράζονται διαφορικά στα κύτταρα και τους ιστούς κατά την ανάπτυξη, τη διαφοροποίηση και την ασθένεια συνθήκες όπως ο καρκίνος [3], [4], [5 ]. Αυτό το πρώτο βήμα της βιοσύνθεσης για Ο-συνδεδεμένες γλυκάνες τύπου βλεννίνης πιστεύεται να ξεκινήσει σε ενδο διαμέρισμα ER-Golgi [6], [7], [8] και φινίρισμα στο σύστημα Golgi [9], [10].

Μετά το σχηματισμό του GalNAcα-Ser /Thr, το υπόλειμμα ΟαΙΝΑο μπορεί να τροποποιηθεί με ένα υπόλοιπο Gal που καταλύεται από το Core 1 Gal-τρανσφεράσης (C1GalT) [11] για το σχηματισμό της δομής πυρήνα 1, Galβ1,3GalNAcα – [Thomsen-Friedenreich (TF) αντιγόνο]. Το υπόλειμμα ΟαΙΝΑο του GalNAcα-Ser /Thr μπορούν επίσης να τροποποιηθούν με ένα κατάλοιπο ΟΙοΝΑο καταλύεται από το Core 3 ΟΙοΝΑο-τρανσφεράση (C3GnT) για το σχηματισμό της Core 3 δομή του GlcNAcβ1,3GalNAcα-. Το υπόλειμμα ΟαΙΝΑο του GalNAcα-Ser /Thr μπορούν επίσης να τροποποιηθούν με ένα κατάλοιπο σιαλικού οξέος με μια σιαλυλ-τρανσφεράσης (ST6GalNAc-Τ) για να σχηματίσει το αντιγόνο του σιαλικού οξέος-β1,6GalNAcα- (σιαλυλο-Τη) [12], [13] . ST6GalNAc-Ι πιστεύεται ότι είναι ο κυρίαρχος σιαλυλο-τρανσφεράσης για το σχηματισμό των σιαλυλ-Τη [13]. Ο σχηματισμός του σιαλυλο-Τη τερματίζει την αλυσίδα σακχάρων, ενώ η ΤΡ και Core 3 δομές μπορούν να ενεργήσει περαιτέρω από άλλες γλυκοζυλοτρανσφεράσες με σταδιακό τρόπο για να δώσει μέχρι και 8 του πυρήνα πολύπλοκες δομές γλυκοζυλίωσης [14]. Ο πυρήνας 1-3 γλυκάνης δομές μπορούν επίσης να τροποποιηθούν με ακετυλίωση, φουκοσυλίωσης, σιαλυλίωσης ή θείωσης.

Από καιρό έχει σκεφτεί ότι η C1GalT, C3GnT και ST6GalNAc-T ανταγωνίζονται για να τροποποιήσετε το υπόλοιπο ΟαΙΝΑο του άρτι συντίθεται GalNAcα-Ser /Thr για το σχηματισμό TF, Core 3 ή sialy-τη δομών στα ζωντανά κύτταρα [15], [16], [17]. Ωστόσο, άμεσα αποδεικτικά στοιχεία που να υποστηρίζει αυτό το ανταγωνιστικό τροποποίηση του GalNA τροποποίησης είναι εκπληκτικά απουσιάζει. Μετάλλαξη ή απενεργοποίηση του Cosmc, ένα ER-εντοπισμένη μοριακός συνοδός που απαιτείται για την ενζυματική δράση του C1GalT [18], έχει αποδειχθεί ότι σχετίζεται με το σύνδρομο Τη, μια σπάνια αυτοάνοση ασθένεια στην οποία υποπληθυσμούς των κυττάρων του αίματος μεταφέρει το ημιτελώς γλυκοζυλιωμένη Τη αντιγόνο [19]. Θεραπεία των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων με τον αναστολέα Ο-γλυκοζυλίωσης Βενζυλ-ΟαΙΝΑο, ένας ανταγωνιστικός αναστολέας για C1GalT τρανσφεράσης και άλφα-2,3-σιαλυλτρανσφεράση, μειώνει την έκφραση των κυτταρικών σιαλικών οξέων και αυξάνει την έκφραση του ΤΡ [20].

σε αυτή τη μελέτη, εκτιμήσαμε την συνέπεια της επιλεκτικής καταστολής της C1GalT με siRNA στις εκφράσεις του TF, ΤΝ, σιαλυλο-τη και Core 3-σχετίζεται γλυκανών σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου.

Υλικά και Μέθοδοι

Υλικά