Αφηρημένο

Οι αλλαγμένες εκφράσεις του κλαουδίνης πρωτεΐνες έχουν αναφερθεί κατά τη διάρκεια της ογκογένεσης καρκίνου του παχέος εντέρου. Πάντως, οι μοριακοί μηχανισμοί που ρυθμίζουν αυτά τα γεγονότα σε αυτόν τον τύπο του καρκίνου δεν είναι καλά κατανοητοί. Εδώ, αναφέρουμε ότι επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGF) αυξάνει την έκφραση του κλαουδίνης-3 σε ανθρώπινο ορθοκολικό αδενοκαρκίνωμα ΗΤ-29 κύτταρα. Η αύξηση αυτή σχετίζεται με αυξημένη κυτταρική μετανάστευση και τον σχηματισμό εξαρτάται από την αγκύρωση και αγκύρωση-ανεξάρτητες αποικίες. Δείξαμε επίσης ότι τα μονοπάτια ERK1 /2 και PI3K-Akt συμμετείχαν στη ρύθμιση αυτών των αποτελεσμάτων λόγω ειδικών φαρμακολογική αναστολή μπλοκάρει αυτά τα γεγονότα. Γενετικός χειρισμός του κλαουδίνης-1 και κλαουδίνης-3 σε κύτταρα ΗΤ-29 έδειξε ότι η υπερέκφραση του κλαουδίνης-1 οδήγησε σε μειωμένη κυτταρική μετανάστευση? Ωστόσο, η μετανάστευση δεν μεταβλήθηκε σε κύτταρα που υπερεκφράζονται κλαουδίνης-3. Επιπλέον, η υπερέκφραση του κλαουδίνης-3, αλλά όχι εκείνη του κλαουδίνης-1, αύξησε την σφιχτή σύνδεση που σχετίζονται παρακυτταρικής ροή των μακρομορίων. Επιπλέον, ένας αυξημένος σχηματισμός αγκύρωσης-εξαρτώμενη και ανεξάρτητη από προσκόλληση αποικίες παρατηρήθηκαν σε κύτταρα που υπερεκφράζονται κλαουδίνης-3, ενώ δεν παρατηρήθηκαν τέτοιες αλλαγές όταν κλαουδίνης-1 υπερεκφράζεται. Τέλος, κλαουδίνης-3 φίμωση μόνος παρά να προκαλέσει αύξηση του πολλαπλασιασμού, και το σχηματισμό των anchoragedependent και ανεξάρτητη από τις αποικίες, ήταν σε θέση να αποτρέψει το ΕΤΠ που προκαλείται από αυξημένη κακοήθους δυναμικού. Συμπερασματικά, τα αποτελέσματά μας δείχνουν μια νέα ρόλο για κλαουδίνης-3 η υπερέκφραση για την προώθηση της κακοήθους δυναμικού των κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου, η οποία είναι δυνητικά ρυθμίζεται από τις ERK1 /2 και ΡΙ3Κ-Akt οδοί EGF-ενεργοποιημένα

Citation.: de Souza WF, Fortunato-Μιράντα Ν, Robbs BK, de Araujo WM, de-Freitas-Τζούνιορ JC, Bastos LG, et al. (2013) κλαουδίνης-3 υπερέκφραση Αυξάνει το Κακοήθη δυναμικό των κυττάρων του καρκίνου του παχέος εντέρου: Οι ρόλοι των ERK1 /2 και PI3K-Akt ως ρυθμιστές της σηματοδότησης EGFR. PLoS ONE 8 (9): e74994. doi: 10.1371 /journal.pone.0074994

Επιμέλεια: Jung Weon Lee, Εθνικό Πανεπιστήμιο της Σεούλ, Δημοκρατία της Κορέας

Ελήφθη: 3 Ιανουαρίου του 2013? Αποδεκτές: 9 Αυγούστου 2013? Δημοσιεύθηκε: 19, Σεπ 2013

Copyright: © 2013 de Souza et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη χρηματοδοτήθηκε από Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPq), Coordenação de Aperfeiçõamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES), Ministério da Saúde – Brasil, Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo á Pesquisa κάνει Estado de Rio de Janeiro (FAPERJ) και Instituto Nacional de Επιστημών e Tecnologia em καρκίνο (573.806 /2008-0 και 170.026 /2008). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Σφιχτά κόμβους (TJS) αποτελούν σημαντικά δομικά συστατικά του κορυφαίου συνδετική συγκρότημα στο επιθήλιο, όπου ρυθμίζουν διάφορες ενδοκυτταρικές διεργασίες, όπως η δημιουργία του κορυφαίου-βασική πολικότητα και τη ροή των ουσιών σε όλη τη μεσοκυττάριο χώρο [1 ]. Claudins είναι οι κύριες πρωτεΐνες που ρυθμίζουν τις λειτουργίες του TJs και ταξινομούνται ως οικογένεια tetraspan αναπόσπαστο μεμβρανικών πρωτεϊνών, η οποία περιλαμβάνει σήμερα 27 μέλη [2]. Μία μυριάδα των ασθενειών, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου, έχουν συσχετιστεί με μεταβολές στην έκφραση, τη σταθερότητα και υποκυτταρικός εντοπισμός της κλαουδίνης μελών της οικογένειας [3], [4], [5], [6]. Ωστόσο, οι ακριβείς μοριακοί μηχανισμοί που ρυθμίζουν την έκφραση και τη λειτουργία αυτών των πρωτεϊνών, ιδιαίτερα σε καρκίνο του παχέος εντέρου, είναι ελάχιστα κατανοητές.

Ο υποδοχέας του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) διμερίζεται και ενεργοποιείται από εξωκυτταρικό συνδετήρα αυτού, EGF, το οποίο ενεργοποιεί ένα καταρράκτη σηματοδότησης που οδηγεί στην ενεργοποίηση των κυτταροπλασματικών οδών όπως ΜΑΡΚ και ΡΙ3Κ-Akt [7], [8]? Αυτά τα μονοπάτια είναι γνωστό ότι ρυθμίζουν τον πολλαπλασιασμό, τη διαφοροποίηση και την αντίσταση σε κυτταρικό θάνατο [9], [10]. Μελέτες έχουν δείξει ότι αυτές οι οδοί που εμπλέκονται σε εκδηλώσεις που σχετίζονται με τις καρκινογόνες διαδικασίες στην επιδερμική ποντικού και ανθρώπου γαστρικού καρκίνου κύτταρα [11], [12], καθώς και στην αύξηση της μεταναστευτικής και επιθετική πιθανότητα κατά τη διάρκεια της μεταβάσεως επιθηλίου-μεσεγχύματος σε ανθρώπινα ωοθήκης κύτταρα [13]. μονοπάτια σηματοδότησης EGF μεσολάβηση είναι επίσης γνωστό ότι παίζουν σημαντικό ρόλο στην οργάνωση των TJs, στις οποίες ρυθμίζουν την έκφραση και ο εντοπισμός των κλαουδίνης πρωτεϊνών. Για παράδειγμα, ο EGF αναφέρθηκε ότι επάγει την προς τα πάνω ρύθμιση του claudins 1, 3 και 4, και ο EGF-επαγόμενη μειορύθμιση του κλαουδίνης-2 αυξάνει την ισχύ της διακυτταρικής φράγματος, όπως καθορίζεται από μια αυξημένη διεπιθηλιακής ηλεκτρικής αντίστασης (TER) σε MDCK- II κύτταρα [14], [15]. Ωστόσο, χρησιμοποιώντας το ίδιο μοντέλο (κύτταρα MDCK), άλλοι συγγραφείς έχουν αναφέρει ότι η προς τα κάτω ρύθμιση του κλαουδίνης-2 επάγεται υψηλότερη κινητικότητα των κυττάρων, ακόμη και με αυξημένη TER [16]. Πρόσφατα, η EGFR /ΕΚΚ /c-Fos μονοπάτι δείχθηκε να ρυθμίζουν κλαουδίνης-2, μια αύξηση που συσχετίστηκε με αυξημένη μεσοκυττάρια διαπερατότητα και μετανάστευση των κυττάρων σε ανθρώπινα κύτταρα αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα [17], [18].

Λίγα στοιχεία είναι γνωστά σχετικά με τους μοριακούς μηχανισμούς που διέπουν τις μεταβολές στο κλαουδίνης έκφραση που σχετίζονται με ορθοκολικό ογκογένεση. Έχουμε δείξει ότι οι ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου παρουσίασε αυξημένα επίπεδα έκφρασης του claudins 1, 3 και 4, το οποίο μετέβαλε την λειτουργία φραγμού του TJs [19]. Πρόσφατες μελέτες έχουν αναφέρει ένα αμφιλεγόμενο ρόλο για κλαουδίνης-1 κατά τη διάρκεια του παχέος καρκινογένεση? αυξημένη έκφραση κλαουδίνης-1 παρατηρήθηκε στην ηπατική μεταστατικών βλαβών του καρκίνου του παχέος εντέρου, αλλά αυτή η έκφραση ήταν μειωμένη στα μεταστάσεις λεμφαδένα από καρκινώματα παχέος εντέρου [20], [21]. Επιπλέον, οι ERK1 /2 και ΡΙ3Κ οδοί έχουν αναφερθεί ότι διαμεσολαβούν αυξήσεις στην έκφραση EGF-επαγόμενη κλαουδίνης-2 σε καρκίνο του παχέος εντέρου κύτταρα? Η εκδήλωση αυτή συνοδεύτηκε από αυξήσεις στον πολλαπλασιασμό, αγκύρωση-ανεξάρτητη ανάπτυξη και την ανάπτυξη του όγκου

in vivo

[22]. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να κατανοήσουμε τους μοριακούς μηχανισμούς που ρυθμίζουν την έκφραση των άλλων κλαουδίνης μέλη της οικογένειας και οι επιπτώσεις της κλαουδίνης υπερέκφραση του παχέος εξέλιξη του καρκίνου.

Στην παρούσα μελέτη, δείχνουμε ότι το ΕΤΠ μεσολάβηση αυξημένη έκφραση του κλαουδίνης-3 σχετίζεται με την αυξημένη μετανάστευση των κυττάρων και το σχηματισμό εξαρτάται από την αγκύρωση και αγκύρωση-ανεξάρτητες αποικίες σε ανθρώπινο ορθοκολικό αδενοκαρκίνωμα ΗΤ-29 κύτταρα. Επιπλέον, δείχνουμε ότι οι εκδηλώσεις αυτές που προκαλούνται από την ERK1 /2 και ΡΙ3Κ-Akt οδούς. Δείξαμε επίσης ότι η αναγκαστική υπερέκφραση του κλαουδίνης-3 σε κύτταρα ΗΤ-29 με γενετικό χειρισμό αύξησε το δυναμικό κακοήθειας, ενώ η υπερέκφραση κλαουδίνης-1 μειώθηκαν κυτταρική μετανάστευση. Το πιο σημαντικό, τα αποτελέσματά μας αποκαλύπτουν ότι κλαουδίνης-3 παίζει ένα ρόλο ως προαγωγού όγκου όταν η έκφραση του δεν είναι ισορροπημένη και εμπλέκουν τα μονοπάτια σηματοδότησης ERK1 /2 και ΡΙ3Κ-Akt ως διαμορφωτές της κλαουδίνης-3 αυξητική ρύθμιση που σχετίζονται με την εξέλιξη του όγκου σε καρκίνο του παχέος εντέρου κύτταρα.

Υλικά και Μέθοδοι

Υλικά