Αφηρημένο

Ιστορικό

Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η δεύτερη πιο διαδεδομένη γυναικολογικό καρκίνο στις γυναίκες. Ωστόσο, αυτό είναι μακράν η πιο θανατηφόρα. Αυτό είναι γενικά αποδίδεται στην απουσία εύκολα ανιχνεύσιμων δεικτών ειδικά για καρκίνους των ωοθηκών, που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την έγκαιρη διάγνωση και ειδικών θεραπευτικών στόχων.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Χρησιμοποιώντας τελικό σημείο PCR βρήκαμε ότι μια οικογένεια retrogenes, πιστευόταν παλαιότερα να εκφράζεται μόνο στο αρσενικό όρχεις κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης στον άνθρωπο, εκφράζονται επίσης σε κανονικό ιστό ωοθήκης και ένα μεγάλο ποσοστό των καρκίνων των ωοθηκών. Στον άνθρωπο υπάρχουν τουλάχιστον ένδεκα τέτοιες αυτοσωματικό retrogenes, τα οποία είναι ιντρόνια αντίγραφα γονιδίων στο χρωμόσωμα Χ, απαραίτητη για τη φυσιολογική σπερματογένεση και εκφράζεται ειδικά στον ανθρώπινο όρχεις. Δοκιμάσαμε για την έκφραση των πέντε από τις γνωστές retrogenes,

UTP14C

,

PGK2, RPL10L

,

RPL39L

και

UBL4B

στην κανονική ανθρώπινη ωοθήκη και ωοθηκών καρκίνους.

Συμπεράσματα /σημαντικότητα

προτείνουμε ότι η ενεργοποίηση των συγκεκριμένων όρχεων retrogenes στην ωοθήκη και των ωοθηκών είναι βιολογικής σημασία για τον άνθρωπο. Επειδή αυτές οι retrogenes εκφράζονται ειδικά στις ωοθήκες και των ωοθηκών στο θηλυκό που μπορεί να αποδειχθεί χρήσιμη για την ανάπτυξη νέων διαγνωστικών ή /και θεραπευτικών στόχων για καρκίνο των ωοθηκών

Παράθεση:. Rohozinski J, Άντερσον ML, Broaddus RE, Edwards CL, Επίσκοπος CE (2009) σπερματογένεση Associated Retrogenes εκφράζονται στο Ανθρώπινο ωοθηκών και των ωοθηκών. PLoS ONE 4 (3): E5064. doi: 10.1371 /journal.pone.0005064

Επιμέλεια: Anja-Katrin Bielinsky, Πανεπιστήμιο της Μινεσότα, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 19 του Αυγούστου, 2008? Αποδεκτές: 6 του Φλεβάρη, 2009? Δημοσιεύθηκε: 31, Μαρ 2009

Copyright: © 2009 Rohozinski et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Χρηματοδότηση Αυτή η εργασία που παρέχεται από Saks Fifth Avenue «Κλειδί για μια θεραπεία» Ιδρύματα, η Joann Ταμείου Rosenberg για καρκίνο των ωοθηκών Έρευνας και ο καρκίνος των ωοθηκών Ερευνητικό Πρόγραμμα του Τμήματος Μαιευτικής και Γυναικολογίας, Baylor College of Medicine και μια ανώνυμη δωρεά διοχετεύεται μέσω CLE. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Αν και ο καρκίνος των ωοθηκών είναι ο δεύτερος συχνότερος γυναικολογικός καρκίνος στις γυναίκες, είναι μακράν η πιο θανατηφόρα. Είναι η πέμπτη κύρια αιτία του καρκίνου που σχετίζονται θανάτου μεταξύ των γυναικών στις Ηνωμένες Πολιτείες, ακόμη και αν αυτό αντιπροσωπεύει λιγότερο από το 4% του συνόλου των καρκίνων διαγνωστεί. Το 2008, εκτιμάται ότι θα υπάρχουν περίπου 21.650 νέες περιπτώσεις καρκίνου των ωοθηκών διαγιγνώσκονται στις Ηνωμένες Πολιτείες και θα υπάρξουν 15.520 αποδίδονται οι θάνατοι [1]. Περίπου το 45% των γυναικών που διαγιγνώσκονται με καρκίνο των ωοθηκών θα πεθάνουν εντός 5 ετών από τη διάγνωση. Αυτό συγκρίνεται με το 14% από αυτούς που διαγνώστηκαν με καρκίνο του μαστού και 30% με τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας και της μήτρας [2]. Αυτό το υψηλό επίπεδο νοσηρότητας πιστεύεται ότι οφείλεται σε μια ανικανότητα να αναγνωρίσει την παρουσία του καρκίνου των ωοθηκών πρώιμο στάδιο στο κλινικό περιβάλλον, λόγω της έλλειψης του καρκίνου ειδικών δεικτών που θα μπορούσαν να βοηθήσουν την έγκαιρη διάγνωση και μετεγχειρητική παρακολούθηση για υποτροπή της νόσου. Η κατάσταση αυτή φαίνεται καθαρά από το γεγονός ότι όταν οι καρκίνοι των ωοθηκών διαγιγνώσκονται στο στάδιο Ι και ΙΙ 82% των θυμάτων επιβιώνουν πέντε χρόνια μετά τη διάγνωση, ενώ αυτούς που διαγνώστηκαν στο στάδιο ΙΙΙ και IV έχουν ένα πενταετές ποσοστό επιβίωσης 25%. Μόνο το 32% των περιπτώσεων διαγιγνώσκονται στο στάδιο Ι και ΙΙ, σε σύγκριση με 68% στο στάδιο ΙΙΙ και IV [3]. Υπάρχει επομένως μεγάλη ανάγκη για την αναγνώριση προτύπων γονιδιακής έκφρασης που είναι ειδικά για τον καρκίνο των ωοθηκών, ώστε να μπορούν να αναπτυχθούν νέες διαγνωστικές και θεραπευτικές στρατηγικές.

Στο πλαίσιο της εν εξελίξει προγράμματος μελέτη του ρόλου των γονιδίων κρίσιμων για τη σπερματογένεση, έχουμε ήδη εντοπίσει μια retrogene,

UTP14C

, που συνδέεται με την ανδρική γονιμότητα στον άνθρωπο και το ποντίκι [4] – [6]. Retrogenes προκύπτουν όταν είναι πλήρως ή μερικώς επεξεργασμένα mRNAs μεταγράφεται αντίστροφα σε δίκλωνο DNA και αυτό το αντίγραφο DNA εισάγεται στο γενωμικό DNA που υπάρχει στα χρωμοσώματα. Εάν το αντίγραφο εκφράζεται ως αγγελιοφόρο RNA και μεταφράζεται σε μία πρωτεΐνη το νέο γονίδιο που είναι γνωστό ως ένα λειτουργικό retrogene. Το γονίδιο από το οποίο προήλθε η retrogene ονομάζεται το γονίδιο προγονικών. Στους ανθρώπους

UTP14C

βρίσκεται στο χρωμόσωμα 13 και προέρχεται ως μεταγραφεί αντίστροφα αντίγραφο ενός γονιδίου που βρίσκεται στο χρωμόσωμα Χ,

UTP14A

. Πρόσφατα έχει διαπιστωθεί ότι ένας δυσανάλογος αριθμός των λειτουργικών retrogenes αυτοσωματικό να προέρχεται από το χρωμόσωμα Χ και απέκτησε αρσενικά γεννητικά-line συγκεκριμένη λειτουργία [7] – [9]. Αρκετές διαφορετικές υποθέσεις έχουν προταθεί για να εξηγήσει αυτό το φαινόμενο εξελικτική [10], ωστόσο το πιο συναρπαστικό είναι ότι αποζημίωσης για μεταγραφική αδρανοποίηση των φυλετικών χρωμοσωμάτων που συμβαίνει στα θηλαστικά όταν τα σώματα φύλο σχηματίζουν κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης [11]. Κατά τη διάρκεια της γαμετογένεσης στον άνδρα το φύλο χρωμοσώματα ζεύγος μέσω μιας βραχείας περιοχής ψευδοαυτοσωματ κατά την πρώιμη πρόφαση Ι και συμπυκνώνονται για να σχηματίσουν ένα macrochromatin φορέα γνωστού ως φύλο, ή ΧΥ, το σώμα [11]. Σε αντίθεση με τα αυτοσωμικά χρωμοσώματα που αποτελούν ομόλογα ζεύγη γνωστά ως συγκροτήματα synaptonemal και παραμένουν μεταγραφικά ενεργή σε όλη μειωτικής διαδικασίας, τα φυλετικά χρωμοσώματα είναι μεταγραφικά σιγήσει (μειωτική σεξ χρωμόσωμα αδρανοποίηση) από τη στιγμή του σχηματισμού του σώματος σεξ μέχρι μειωτικής είναι διαγωνίστηκαν και απλοειδή σπερματίδες αποτελούν [12]. Το χρωμόσωμα Χ περιέχει ένα μεγάλο αριθμό γονιδίων housekeeping απαραίτητη για τη φυσιολογική λειτουργία των κυττάρων και την επιβίωση. Έτσι φίμωση του Χ χρωμοσώματος κατά τη διάρκεια της μειωτικής αρσενικό μπορεί να έχουν κάποια μεταβολική μειονέκτημα για μεταγενέστερα στάδια της σπερματογένεσης. Ρετρομετάθεση του Χ συνδεδεμένων γονιδίων καθαριότητας στα αυτοσωμικά, με επακόλουθη απόκτηση των όρχεων ειδική έκφραση, είναι ένας μηχανισμός με τον οποίο, όπως το μεταβολικό μειονέκτημα μπορεί να διορθωθεί κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης, χωρίς να διαταράσσει τη φυσιολογική λειτουργία σε σωματικά ιστό [13]. Στον άνθρωπο υπάρχουν τουλάχιστον ένδεκα όπως αυτοσωματικό retrogenes που έχουν retrotransposed από το χρωμόσωμα Χ και παίζουν σημαντικό ρόλο στη διατήρηση της αποτελεσματικό σπερματογένεση [10].

Χρησιμοποιώντας τελικό σημείο RT-PCR για την διαλογή cDNA που παρασκευάζεται από μια ολοκληρωμένη ομάδα ανθρώπινων ιστών βρήκαμε ότι

UTP14C

εκφράστηκε όχι μόνο στο αρσενικό όρχεις, αλλά και στο γυναικείο ωοθήκη και κανένα άλλο ιστό [6]. Η απρόσμενη έκφραση του

UTP14C

στην ανθρώπινη ωοθήκη μας ώθησε να διερευνήσει κατά πόσον ή όχι

UTP14C

επίσης εκφράζεται σε καρκίνους των ωοθηκών. Για να καθοριστεί εάν η έκφραση των όρχεων συγκεκριμένες retrogenes σε φυσιολογικές ωοθήκες και των ωοθηκών ήταν ένα γενικό φαινόμενο σε ανθρώπους που δοκιμάζονται επίσης για την έκφραση των τεσσάρων άλλων retrogenes (

PGK2

,

RPL10L

,

RPL39L

και

UBL4B

) που είχαν προηγουμένως σκεφτεί να εκφράζεται αποκλειστικά κατά τη διάρκεια σπερματογένεση στον άνδρα.

Εδώ, παρουσιάζουμε τα αποτελέσματα της οθόνης μας για την έκφραση των συγκεκριμένων retrogenes όρχεις σε φυσιολογικό ιστό των ωοθηκών και ένα πάνελ των καρκίνων των ωοθηκών. Προτείνουμε ότι ένα μοτίβο των όρχεων που μοιάζει μεταγραφικής ρύθμισης που έχει ως αποτέλεσμα έκφραση retrogene συχνά συμβαίνει σε καρκίνους των ωοθηκών και θα μπορούσε να συμβάλει στην παθογένεση αυτής της ασθένειας. Επιπλέον, η μοναδική ωοθηκών και των ωοθηκών καρκίνου ειδική έκφραση retrogene κωδικοποιημένων προϊόντων μπορούν να παρέχουν νέα κατανόηση της γονιδιακής έκφρασης στο θηλυκό και να οδηγήσει στην αναγνώριση νέων διαγνωστικών ή /και θεραπευτικών στόχων για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών.

Υλικά και Μέθοδοι

Πηγές δείγματα ιστών και RNA

δείγματα πριν και μετά την εμμηνόπαυση οι ωοθήκες προοπτικά συλλέγονται κατά τη διάρκεια των κλινικών που υποδεικνύεται χειρουργικές επεμβάσεις που εκτελούνται στο Baylor College of Medicine συμβεβλημένα νοσοκομεία από γυναικολογικές χειρουργούς. Εκτός από τα δείγματα των καρκίνων flash-κατεψυγμένα ωοθηκών ελήφθησαν από την Διεπιστημονική γυναικολογικές Tumor Bank στο Πανεπιστήμιο του Τέξας MD Anderson Κέντρο Καρκίνου (MDACC, Χιούστον, Τέξας), το ανθρώπινο συνολική όρχεις και το RNA ωοθηκών αγοράστηκε από Panomics (Fremont, Καλιφόρνια, ΗΠΑ . Προϊόν # NA2007) και ο πίνακας ανθρώπινο RNA αγοράστηκε από Clontec (Clontech Laboratories Inc., Mountain View της Καλιφόρνια των ΗΠΑ. Μάστερ πίνακα ΙΙ, Προϊόν # 636643).

Όλα συλλογής έγινε υπό την έγκριση από το θεσμικό Review Board στο Baylor College of Medicine (πρωτόκολλο H-14372). Την άδεια να χρησιμοποιήσουν ανθρώπινους ιστούς ελήφθη από κάθε ασθενή με τη γραπτή συγκατάθεση χρησιμοποιώντας μια μορφή που έχει εγκριθεί από το Διοικητικό Συμβούλιο κριτική Θεσμικό Baylor College of Medicine και τα συνδεδεμένα ιδρύματα. Γραπτή συγκατάθεση παρομοίως λαμβάνονται από ασθενείς που δίνουν δείγματα ιστού στο Διακλαδικής Γυναικολογικής Tumor Bank στο Πανεπιστήμιο του Τέξας MD Anderson Κέντρο Καρκίνου.

εκχύλιση RNA και τη σύνθεση του πρώτου κλώνου

δείγματα Προοπτικά συλλέγονται ιστού τοποθετήθηκαν σε 10 ml RNAlater (Ambion, Inc. Austin Texas, USA) και αποθηκεύτηκαν στους -20 ° C μέχρι την εκχύλιση του RNA. RNA εκχυλίστηκε από δείγματα ιστού βάρους με τήξη σε Αντιδραστήριο ΤΚΙζοΙ (Invitrogen Corp. Carlsbad California USA) που ακολουθείται από άμεση ομογενοποίηση χρησιμοποιώντας έναν ομογενοποιητή ιστών-Tearor (Biospec Products, Inc. Bartlesville Oklahoma, USA). RNA ανακτήθηκε χρησιμοποιώντας το πρωτόκολλο αντιδραστηρίου ΤΚΙζοΙ. RNA επαναιωρήθηκε σε νερό χωρίς νουκλεάση και αποθηκεύτηκε στους -80 ° C. Για την παραγωγή cDNA 5 μg RNA υπέστη επεξεργασία με ϋΝάση (Turbo DNA-free kit, Ambion Inc.), καταβυθίστηκε και επαναιωρήθηκε σε μια συγκέντρωση 1 μα ανά μΙ. Ένα RETROscript Kit (Ambion, Inc.) χρησιμοποιήθηκε για τη σύνθεση πρώτου κλώνου cDNA από 2 μg του RNA με ένα συνδυασμό ολιγο (dT)

18 και τυχαία (DN)

15 εκκινητές. Μετά τη σύνθεση τα μείγματα αντίδρασης 20 μΐ αραιώθηκαν στα 150 μΙ με νερό χωρίς νουκλεάση και αποθηκεύεται στους -20 °.

RT-PCR

γονίδια ενδιαφέροντος ανιχνεύθηκαν με τελικό σημείο PCR χρησιμοποιώντας ειδικές γονίδιο εκκινητές (Πίνακας 1). όγκους αντίδρασης 20 μΐ αραιωμένου AccuPrime Σούπερ Mix II (Invitrogen, Corp.) που περιέχει 1 μΐ cDNA και retrogene ειδικοί εκκινητές θερμάνθηκαν στους 94 ° C για 2 λεπτά και στη συνέχεια ανακυκλώθηκε 35 φορές μέσω 94 ° C για 20 δευτερόλεπτα, 58 ° C για 20 δευτερόλεπτα, 68 ° C για 30 δευτερόλεπτα, και διατηρήθηκε στους 15 ° C μετά τον τελικό κύκλο. Τα προϊόντα PCR διέτρεξαν επί πηγμάτων αγαρόζης 1,75% που περιέχει βρωμιούχο αιθίδιο και ζώνες οπτικοποιούνται με φωτισμό υν. Πηκτώματα φωτογραφήθηκαν χρησιμοποιώντας Kodak Gel Logic System 200 Imaging.

Η

Αποτελέσματα και Συζήτηση

Στο πλαίσιο της εν εξελίξει προγράμματος μελέτη του ρόλου των γονιδίων ζωτικής σημασίας για τη σπερματογένεση έχουμε αναφερθεί στο παρελθόν την αναγνώριση των ένα retrogene που σχετίζεται με ανδρική γονιμότητα στον άνθρωπο και το ποντίκι [4] – [6]. Στους ανθρώπους αυτό retrogene,

UTP14C

, βρίσκεται στο χρωμόσωμα 13 και προέρχεται ως ιντρόνια, αντίστροφη μεταγραφεί αντίγραφο του γονιδίου φυλοσύνδετη,

UTP14A

. Αν και η λειτουργία του

UTP14A

και

C

και τα προϊόντα τους δεν είναι γνωστή, αναλογία με το προϊόν από το γονίδιο ζύμης,

Utp14

, δείχνει ότι τα ανθρώπινα πεπτίδια, UTP14A και Γ, αποτελούν μέρος της μικρής υπομονάδας (SSU) processome η οποία είναι υπεύθυνη για τη δημιουργία 18S rRNA από τον πρόδρομο της, το U3 snoRNA, στην πυρηνίσκο [14], [15]. Χρησιμοποιώντας τελικό σημείο RT-PCR για την διαλογή cDNA που παρασκευάζονται από μια ολοκληρωμένη ομάδα ανθρώπινων ιστών βρήκαμε

UTP14C

να εκφράζεται όχι μόνο στο αρσενικό όρχεις, αλλά επίσης και στο γυναικείο ωοθήκη [6]. Αυτή η απροσδόκητη έκφραση

UTP14C

στην ανθρώπινη ωοθήκη μας ώθησε να δούμε αν

UTP14C

επίσης εκφράζεται σε καρκίνους των ωοθηκών με την ελπίδα να τον εντοπισμό συγκεκριμένων δεικτών ιστού εκφράζεται επιλεκτικά σε φυσιολογικές ωοθήκες και των ωοθηκών. End σημείο RT-PCR χρησιμοποιήθηκε για να ανιχνεύσει μεταγραφές για

UTP14A

και

C

σε πρωτογενείς καρκίνους των ωοθηκών και καθιερωμένες κυτταρικές γραμμές καρκίνου των ωοθηκών. Ο προσδιορισμός της έκφρασης του

UTP14C

με RT-PCR περιπλέκεται από το γεγονός ότι βρίσκεται μέσα σε ένα ενεργά μεταγράφεται γονίδιο ξενιστή,

GT8

.

UTP14C

είναι το αποτέλεσμα ενός γεγονότος ρετρομετάθεσης όπου μια εσώνια αντίγραφο DNA του

UTP14A

κωδική αλληλουχία εισάγεται αμέσως ανάντη της περιοχής κωδικοποίησης που υπάρχει στο τερματικό εξώνιο του

GT8

στο χρωμόσωμα 13. Εν συνεχεία

UTP14C

έχει αποκτήσει έναν υποκινητή που οδηγεί την έκφραση του κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης. Επειδή οι μεταγραφές του

UTP14C

και

GT8

επικαλύπτουν το ενδεχόμενο ενός ενιαίου μεταγραφή που περιέχει ανοιχτά πλαίσια ανάγνωσης από τα δύο γονίδια προκύπτει. Για να γίνει διάκριση μεταξύ των επικαλυπτόμενων μεταγραφές που παράγονται από την retrogene και ξενιστή του, ζεύγη εκκινητών σχεδιάστηκαν για να ενισχύσουν ειδικά είτε

UTP14C

ή

GT8

[6] και να ανιχνεύσουν οποιαδήποτε μεταγραφή που μπορεί να περιέχουν τόσο ανοικτά πλαίσια ανάγνωσης. Σύκο. 1 δείχνει τα προφίλ έκφρασης του

UTP14A

,

UTP14C

και

GT8

σε ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα των έξι διαφορετικά θηλώδους ορώδες καρκίνους των ωοθηκών, την πιο συχνή ιστολογική υποτύπου αυτής της κακοήθειας, δύο σαφείς κυττάρων και δύο ενδομητριοειδές δείγματα.

UTP14A

, το Χ χρωμόσωμα συνδέεται προγονικών γονίδιο από το οποίο

UTP14C

προέκυψαν, εκφράστηκε σε όλα τα δείγματα καρκίνου (διαδρομή Α). Ομοίως,

GT8

, το γονίδιο υποδοχής για

UTP14C

, εκφράστηκε σε όλα τα δείγματα (λωρίδα C). Η σπερματογένεση που σχετίζεται retrogene,

UTP14C

, εκφράστηκε σε όλα, αλλά ένα από τα δείγματα καρκίνου (λωρίδα D). Δοκιμάσαμε επίσης δείγματα μας χρησιμοποιώντας το συνδυασμό ενός 5′-εκκινητή ειδικό για

GT8

(δηλαδή μέχρι ρεύμα της θέσης έναρξης της μεταγραφής UTP14C) και 3′-εκκινητή ειδικό για

UTP14C

( δηλαδή πριν από το

GT8

απομαγνητοφώνηση) [6]. Η απουσία ενός προϊόντος PCR χρησιμοποιώντας αυτό το ζεύγος εκκινητών επιβεβαιώνει ότι το mRNA για ανάγνωση μέσω του, που εκτείνονται τόσο το

GT8

και

UTP14C

γονίδια, δεν παράγεται και καθιερώνει την ανεξαρτησία των δύο επικαλυπτόμενων μεταγραφές (λωρίδα Β). Παρόμοια αποτελέσματα ελήφθησαν για όλους τους συνδυασμούς εκκινητή όταν ένα πάνελ καθιερωμένων κυτταρικών σειρών καρκίνου των ωοθηκών δοκιμάσθηκαν υπό τις ίδιες συνθήκες (2774, ES-2, TOV112D, OV90, SKOV3, TOV21G, Hey και OVCAR3? Εικ. 2). Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι πολλά από τα δείγματα κυτταρικής γραμμής έδειξαν επίσης την παρουσία μεταγράφων RNA που διήρκεσε τόσο το γονίδιο ξενιστή (

GT8

) και

UTP14C

υποδηλώνοντας παρεκκλίνουσα ρύθμιση μεταγραφικής σε ορισμένες από οι κυτταρικές γραμμές καρκίνου των ωοθηκών. Εμείς ποτέ δεν έχουν παρατηρηθεί μεταγραφή που διήρκεσε δύο γονίδια σε δείγματα ανθρώπινου ιστού.

Η λωρίδα Α δείχνει το προϊόν ειδικά για

UTP14A

. Λωρίδα Β δείχνει το προϊόν της αντίδρασης από ένα ζεύγος εκκινητών ειδικά για

GT8

(5 ‘άκρο) και

UTP14C

(3′ άκρο), αυτά τα δύο γονίδια επικαλύπτονται στο ανθρώπινο χρωμόσωμα 1 και της απουσίας ένα προϊόν PCR δείχνει ότι οι μεταγραφές από τα δύο γονιδίων είναι αποκλειστική. Λωρίδα C δείχνει το

GT8

γονιδίου συγκεκριμένο προϊόν και, λωρίδα D, το PCR προϊόν από

UTP14C

. Μοριακού δείκτη βάρους τρέξει στη λωρίδα Μ

Η

Διαδρομή Α:

UTP14A

συγκεκριμένο προϊόν. Λωρίδα Β: Το προϊόν από το κοινό και στα δύο εκκινητών

UTP14C

και

GT8

. Αυτός ο συνδυασμός εναρκτήρα αποτυγχάνει να δώσει ένα προϊόν PCR σε δείγματα καρκινικού ιστού των ωοθηκών ή των ωοθηκών. Λωρίδα C:

GT8

ειδικό προϊόν RT-PCR. Λωρίδα D: ειδικά για

UTP14C

προϊόντων. Οι συνδυασμοί εκκινητών που περιγράφονται στο κείμενο. Ιδρύθηκε κυτταρικές σειρές καρκίνου των ωοθηκών που χρησιμοποιήθηκαν ήταν 1. 2774, 2. ES-2, 3. TOV112D, 4. OV90, 5. SKOV3, 6. TOV21G, 7. HEY, 8. OVCAR3, και Μ, δείκτης μοριακού μεγέθους.

Η υψηλή συχνότητα με την οποία em

UTP14C

εκφράστηκε σε αρχική μας έρευνα μας οδήγησε να διερευνήσει τη συχνότητα εμφάνισης της έκφρασης του σε ένα μεγάλο πάνελ ωοθηκών καρκίνους με διαφορετικές κλινικές ιστολογία. Συνολικά, βρήκαμε ότι ότι τα μεταγραφήματα για

UTP14C

μπορεί να ανιχνευθεί εύκολα σε 41/51 (80%) του θηλώδους ορώδες καρκίνων, η πιο κοινή μορφή καρκίνου που εξετάστηκαν, και τα περισσότερα άλλα υποτύπους καρκίνου. Η συχνότητα των

UTP14C

έκφραση σε μια ποικιλία του καρκίνου των ωοθηκών ιστολογικών υποτύπων παρουσιάζεται στον Πίνακα 2.

Η

Για να καθοριστεί εάν η ενεργοποίηση του όρχεως ειδικών retrogenes στις ωοθήκες και των ωοθηκών είναι μια γενική φαινόμενο η έκφραση των τεσσάρων άλλων retrogenes, τι εθεωρείτο μέχρι σήμερα να είναι όρχεις συγκεκριμένες, μελετήθηκε. Οι retrogenes σχετίζονται σπερματογένεση δοκιμαστεί κωδικοποιηθεί για διάφορες σημαντικές κυτταρικές λειτουργίες: μεταβολικά ένζυμα (

PGK2

) [13], ριβοσωμικές πρωτεΐνες (

RPL10L

και

RPL39L

) [16 ] και μετα-μεταφραστική τροποποίηση πρωτεϊνών (

UBL4B

) [17]. Τα ζεύγη εκκινητών ειδικά για τις retrogenes και Χ συνδέονται προγόνων τους χρησιμοποιήθηκαν για μοριακό χαρακτηρισμό της γονιδιακής έκφρασης στο ίδιο πάνελ ιστών του καρκίνου των ωοθηκών που περιγράφηκε προηγουμένως.

Στον άνθρωπο, φωσφογλυκερική κινάση κωδικοποιείται από δύο γονίδια,

PGK1

και

PGK2

. Φωσφογλυκερική κινάση μετατρέπει 1,3-διφωσφογλυκερικό σε 3-φωσφογλυκερική στην οδό γλυκόλυση. Αυτό οδηγεί στην παραγωγή του πυροσταφυλικού από γλυκόζη και φρουκτόζη [18].

PGK1

βρίσκεται στο χρωμόσωμα Χ και εκφράζεται παντού ενώ

PGK2

, ένα retrotransposed αντίγραφο του

PGK1

, βρίσκεται στο χρωμόσωμα 6 και δείχνει ένα ειδικό πρότυπο έκφρασης των όρχεων [13]. Ένα άλλο retrotransposed αντίγραφο του

PGK1

είναι παρούσα στο χρωμόσωμα 19, αλλά αυτό μεταφράζεται σε μια κολοβωμένη πρωτεΐνη και είναι πιθανώς ανενεργός καθώς δεν ESTs (εκφρασμένη αλληλουχία Tags) θα μπορούσε να βρεθεί στο ανθρώπινο βάση δεδομένων. Πάνω από την έκφραση της πρωτεΐνης PGK1 έχει συνδεθεί με την αντίσταση paclitaxel [19] και την αγγειογένεση των όγκων [20]. Επιπλέον, τα επίπεδα πρωτεΐνης PGK1 αυξημένα σε ορό από ασθενείς παγκρεατικού πόρου αδενοκαρκίνωμα [20], [21]. Έτσι, φαίνεται ότι

PGK1

πάνω έκφραση μπορεί να είναι βιολογικής σημασίας σε ορισμένες μορφές καρκίνου. Ανίχνευση

PGK1

και

PGK2

σε ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα των ωοθηκών, των όρχεων και πριν και μετά την εμμηνόπαυση οι ωοθήκες φαίνεται στο Σχ. 3. Έκφραση του

PGK2

ανιχνεύθηκε σε όλους τους τύπους όγκου ωοθηκών με την υψηλότερη συχνότητα στο θηλώδες ορώδες (78%) και αναμίχθηκε ιστολογία (76%) των όγκων (Πίνακας 2). Όπως ήταν αναμενόμενο για ένα γονίδιο καθαριότητας,

PGK1

εκφράστηκε σε όλα τα δείγματα όγκων. Ωστόσο, λόγω του μικρού μεγέθους του δείγματος του σπάνιου καρκίνου των ωοθηκών υποτύπων την πραγματική συχνότητα του

PGK2

έκφραση σε αυτούς τους όγκους δεν μπορούσε να εκτιμηθεί. Απομένει να καθοριστεί εάν

PGK2

έκφραση συνδέεται με τη βιολογία του όγκου.

α. Retrogene έκφραση σε ένα πάνελ των καρκίνων των ωοθηκών ανιχνεύθηκε με RT-PCR. Δείγματα και ιστολογία του καρκίνου ήταν: 1-6. Θηλώδες υδαρής, 7 & amp? 8 Clear κυττάρων, 9 & amp? 10 ενδομητριοειδές, 11 προ-εμμηνοπαυσιακές ωοθήκη, 12 μετα-εμμηνοπαυσιακές ωοθήκη. Αρνητικός μάρτυρας C και δείκτη Μ β. Retrogene έκφραση σε φυσιολογικό ιστό ωοθηκών: 1-4. προ-εμμηνοπαυσιακές ωοθήκες, 5-8. μετά την εμμηνόπαυση οι ωοθήκες, αρνητικό μάρτυρα C και δείκτη Μ

Η

θηλαστικών ριβοσώματα αποτελούνται από τουλάχιστον 80 ριβοσωμικές πρωτεΐνες [22] εκ των οποίων τέσσερις κωδικοποιούνται στο χρωμόσωμα Χ [23]. Τρία από αυτά,

RPL10

,

RPL36A

και

RPL39

, έχουν αυτοσωματικό retrotransposed αντίγραφα. Δύο βρίσκονται στο χρωμόσωμα 14 (

RPL10L

και

RPL36AL

) και η τρίτη στο χρωμόσωμα 3 (

RPL39L

) [16].

RPL36AL

εκφράζεται παντού ενώ

RPL10L

και

RPL39L

έχουν προηγουμένως αναφερθεί ότι εκφράζεται αποκλειστικά σε όρχεις [16]. Η

RPL10

είναι επίσης ένα ογκοκατασταλτικό γονίδιο και η πρωτεΐνη που κωδικοποιεί είναι γνωστή ως η πρωτεΐνη καταστολής όγκου QM [24]. Μειωμένη

RPL10

έκφραση συνδέεται με την αύξηση του βαθμού προστατικού αδενοκαρκινώματος [25]. Εκκινητές ειδικά για

RPL10L

και

RPL39L

χρησιμοποιήθηκαν για τη διαλογή για έκφραση αυτών των όρχεων ειδικών retrogenes σε ένα πάνελ των καρκίνων των ωοθηκών (Πίνακας 2? Εικ. 3). Αντίγραφα από δύο retrogenes ανιχνεύθηκαν σε θηλώδη ορώδες, σαφή δείγματα κυττάρων και endometroid.

RPL10L

εκφράστηκε σε 76% μιας μεγάλης πάνελ ωοθηκών όγκου με έκφραση% 84 σε θηλώδη ορώδες καρκίνους, 76% σε όγκους με μικτή ιστολογία και 44% σε endometroid όγκους (Πίνακας 2).

RPL39L

εκφράστηκε σε ακόμη υψηλότερη συχνότητα με το 98% του θηλώδους ορώδες καρκίνων που περιέχουν μεταγράφημα (Πίνακας 2). Έκφραση σε όγκους με άλλα ιστολογίες ήταν 88% σε AGCT (Ενηλίκων Κοκκιωδών καρκινικών κυττάρων) και 100% σε όλες τις άλλες υποτύπων που δοκιμάστηκαν.

Παρά το γεγονός ότι έχει ακόμη να αποδεικνύεται ότι υπάρχει άμεσος ρόλος για τις ριβοσωμικές πρωτεΐνες στη βιολογία του καρκίνου, το πρέπει να σημειωθεί ότι

RPL39

έκφραση είναι αυξημένη στον καρκίνο του μαστού [26].

RPL39L

έκφραση έχει αναφερθεί σε καρκίνο του τραχήλου [27], καθώς και κυτταρικές σειρές που προέρχονται από μαστού, του πνεύμονα, του προστάτη, του παχέος εντέρου, του παγκρέατος και των ωοθηκών [16], [20] που υποδηλώνει ότι η retrogene

RPL39L

μπορεί να έχει ένα σημαντικό ρόλο στη βιολογία ενός μεγάλου φάσματος καρκίνων. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι μια οθόνη για

RPL39L

έκφραση σε ένα πάνελ ανθρώπινο RNA ιστός είχε ως αποτέλεσμα την ανίχνευση αυτού του retrogene σε ένα μεγάλο αριθμό φυσιολογικών ιστών υποδηλώνοντας ότι αν και

εμφανίζεται RPL39L

έκφραση κυρίως στους όρχεις μπορεί να μην είναι όρχεις ειδική (Εικ. 4). Έκφραση των retrogenes

RPL10L

και

RPL39L

σε καρκίνους θα μπορούσε ενδεχομένως να ενισχύσει ριβόσωμα παραγωγή ή /και μεταφραστική δραστηριότητα. Σε όρχεις, αυτές οι retrogenes εκφράζονται κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης λίγο πριν από την ταχεία παραγωγή των πρωτεϊνών που απαιτούνται για τη διαφοροποίηση των σπερματοζωαρίων και την ωρίμανση.

Η έκφραση του Χ συνδεδεμένων γονιδίων προγονικών

PGK1

,

RPL10

,

RPL39

και

UBL4A

είναι πανταχού παρούσα, όπως θα αναμενόταν για τα γονίδια που κωδικοποιούν βασικές κυτταρικές λειτουργίες. Στην έκφραση αντίθεσης των ειδικών retrogenes σπερματογένεση,

PGK2

,

RPL10L

,

RPL39L

και

UBL4B

, είναι κυρίως περιορίζεται στο όρχι. κλειδί ιστού: AG, στα επινεφρίδια? BM, Bone Marrow? Β, Brain? Η Καρδιά? Κ, των νεφρών? L, ήπατος? Lu, Lung? O, ωοθήκη? Pl, πλακούντας? Pr, του προστάτη? SG, στους σιελογόνους αδένες? SM, σκελετικό μυ? SC, το νωτιαίο μυελό? Τ, Όρχις? Ty, Thyamus? Tr, του θυρεοειδούς? Tch, Τραχεία? U, Μήτρα. Μ είναι ο δείκτης μοριακού μεγέθους και Γ, είναι το έναυσμα ελέγχουν μόνο αντίδραση. Το μοτίβο έκφρασης για

UTP14A

και

UTP14C

έχει προηγουμένως δημοσιευθεί [5].

Η

Ουμπικουϊτίνη όπως πρωτεΐνες (UBLs) είναι μετά μεταφραστικά δεσμεύονται σε μια διαφορετική ομάδα άλλων πρωτεϊνών αυξάνοντας έτσι την λειτουργική ποικιλομορφία του κωδικοποιημένου πρωτεώματος. UBL τροποποιημένες πρωτεΐνες είναι γνωστό ότι επηρεάζει τη δραστηριότητα ενός ευρέος φάσματος κυτταρικών μονοπατιών σηματοδότησης [28], [29].

UBL4A

και

UBL4B

εντοπίζονται πρόσφατα γονίδια που κωδικοποιούν τις μικρές ουβικιτίνης όπως πρωτεΐνες [17]. Στο ποντίκι, το X-συνδέονται

Ubl4A

εκφράζεται σε όλους τους τύπους ιστών, ενώ η retrogene

Ubl4b

φέρεται να εκφράζεται μόνο σε επιμήκυνση σπερματίδες κατά τη διάρκεια της τελευταία στάδια της σπερματογένεσης στους όρχεις [17 ]. Προκαταρκτική εξέταση για

UBL4A

και

UBL4B

έκφραση σε ένα πάνελ ανθρώπινο RNA διαπίστωσε ότι

UBL4A

εκφράστηκε σε όλους τους τύπους ιστών που εξετάστηκαν.

UBL4B

, που βρίσκεται στο χρωμόσωμα 1, εκφράστηκε μόνο στους όρχεις (Εικ. 4), αν και αργότερα προβολή ενός μεγαλύτερου δείγματος πριν και μετά την εμμηνόπαυση οι ωοθήκες έδειξε ότι

UBL4B

εκφράστηκε σε φυσιολογικούς ιστούς των ωοθηκών σε χαμηλή συχνότητα (Πίνακας 2). Αποτελέσματα μιας αρχικής οθόνης για

UBL4B

ενεργοποίηση σε δείγματα όγκων των ωοθηκών φαίνεται στο Σχ. 3. Ο πίνακας 2 δείχνει τη συχνότητα με την οποία

UBL4A

και

UBL4B

έκφραση ανιχνεύθηκε σε ένα εκτεταμένο πίνακα δειγμάτων όγκων των ωοθηκών. Όπως σχεδόν όλες οι κυτταρικές λειτουργίες που επηρεάζονται από ουβικιτινίωση δεν αποτελεί έκπληξη το ότι οι μεταβολές στη δραστικότητα και ουβικιτίνη UBL έχουν ενοχοποιηθεί για τη γένεση διαφορετικών τύπων ανθρώπινου όγκου [30]. UBL τροποποίηση με SUMO-1 (μικρό ουβικιτίνης που σχετίζονται με τροποποιητή, επίσης γνωστή ως UBL1) έχει άμεση σχέση με την τροποποίηση της οδού απόπτωσης σε όγκους των ωοθηκών [31] και είναι γνωστό ότι παίζει ένα σημαντικό ρόλο στην σπερματογένεση [32].

Διαλογή για έκφραση retrogene σε κανονικές προ- και μετά την εμμηνόπαυση οι ωοθήκες αποκάλυψαν ότι τα retrogenes δεν εκφράζονται σε όλες τις γυναίκες. Το Χ συνδεδεμένου γονιδίου προγονικών εκφράζεται σε όλες τις περιπτώσεις (Πίνακας 2? Εικ. 3), όπως θα αναμενόταν για γονίδια που κωδικοποιούν ουσιώδεις λειτουργίες γονίδιο που εκφράζονται παντού στο ανθρώπινο σώμα. Ωστόσο, retrogene έκφρασης σε υγιή ωοθηκικό ιστό μπορεί να είναι τόσο υψηλές όσο 100% (

RPL10L

και

RPL39L

) των δειγμάτων που ελέγχθηκαν ή τόσο χαμηλά όσο 44% (

UBL4B

). Αυτό υποδηλώνει ότι, για τουλάχιστον ορισμένες από τις retrogenes, έκφραση στην ωοθήκη περιορίζεται σε συγκεκριμένα άτομα εντός του γενικού πληθυσμού. Οι περισσότερες εργασίες σχετικά με τις συγκεκριμένες retrogenes σπερματογένεση έχει γίνει με το μοντέλο ποντικού, όπου ωοθηκών έκφραση αυτών των γονιδίων είναι απούσα. Η έκφραση αυτών των retrogenes στην ανθρώπινη ωοθήκη μπορεί να είναι ένα είδος ειδικού φαινόμενο και μπορεί να αντανακλά μια σημαντική βιολογική διαφορά ανάμεσα στον άνθρωπο και το ποντίκι. Η retrogene και των προγονικών γονίδιο Χ ειδικών εκκινητών ελέγχθηκαν έναντι μιας ομάδας RNAs από διαφορετικούς ανθρώπινους ιστούς για να επιβεβαιώσει την πανταχού παρούσα έκφραση της Χ συνδέεται προγονικών και περιορισμένη έκφραση του retrogene (Εικ. 4). Στις περισσότερες περιπτώσεις, η έκφραση retrogene περιορίστηκε στις γονάδες στον άνθρωπο. Αν υπάρχει κάποια σχέση μεταξύ της έκφρασης των όρχεων συγκεκριμένες retrogenes στην ανθρώπινη ωοθήκη και αυξημένη πιθανότητα ανάπτυξης καρκίνου είναι ακόμη να καθιερωθεί.

Από ειδική σημείωση είναι η παρατήρηση μας ότι η Χ συνδέεται γονίδια προγονικά δεν είναι πάντα εκφράζονται σε όλα τα δείγματα των ωοθηκών καρκίνο. Όταν αυτή ήταν η περίπτωση, η δωρεάν retrogene ήταν πάντα εκφράζεται υποδηλώνοντας ότι η retrogene είχε αντισταθμίζουν την απώλεια δραστικότητας γονιδίου στο χρωμόσωμα Χ με έναν τρόπο παρόμοιο με αυτό που συμβαίνει όταν το χρωμόσωμα Χ μεταγραφικά σιγήσει κατά την διάρκεια αρσενικό μείωση. Η διαγραφή των τμημάτων του Χ χρωμοσώματος σε ωοθηκών καρκινικά κύτταρα και την επακόλουθη απώλεια της ετεροζυγωτίας είναι καλά τεκμηριωμένη [33]. Τέτοιες απαλοιφές μπορεί να οδηγήσει σε απώλεια των γονιδίων τα οποία έχουν retrotransposed αντίγραφα. Η απώλεια ενός αντιγράφου του

PGK1

λόγω διαγραφών εντός του χρωμοσώματος Χ έχει προηγουμένως αναφερθεί σε μία ποικιλία ιστολογικών υποτύπων καρκίνου του ωοθηκών [34]. Τέτοια απώλεια θα μπορούσε να είναι βιολογικά σημαντικός εάν η διαγραφή είναι αντίγραφο από την ενεργό χρωμόσωμα Χ ή εάν και τα δύο αντίγραφα ενός γονιδίου είναι μεταγραφικά ενεργή σε φυσιολογικά κύτταρα.

Η υψηλή συχνότητα της σπερματογένεσης ειδική ενεργοποίηση retrogene σε καρκίνους των ωοθηκών που αναφέρθηκαν σε αυτό χαρτί έχει σημαντικές θεωρητικές και πρακτικές συνέπειες για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών και της βιολογίας. Δεδομένου ότι αυτά τα retrogenes εκφράζονται μόνο στην ωοθήκη ή /και των ωοθηκών και πουθενά αλλού στον γυναικείο σώμα τη δυνατότητα να αναπτύξουν όγκους ειδικών δεικτών και θεραπείες παρουσιάζει τον εαυτό της. Προτεραιότητα για αυτό αποδεικνύεται από την έκφραση των γονιδίων του καρκίνου /όρχεων (CT) και αντιγόνα σε ένα ευρύ φάσμα των ανθρώπινων όγκων και είναι ένα φαινόμενο που έχει αναγνωριστεί εδώ και αρκετό καιρό [35], [36]. Η έκφραση των αντιγόνων CT σε καρκίνους αναφέρθηκε για πρώτη φορά με το

MAGE-1

το 1991, ακόμη και αν κατά το χρόνο θεωρήθηκε να είναι ένα γονίδιο που εκφράζεται ειδικά σε ανθρώπινους όγκους μελανώματος [37] και η έκφρασή του στους όρχεις ήταν μη αναγνωρίσιμο. Αργότερα εκθέσεις που προστίθενται

MAGE-3

και

BAGE

στον κατάλογο των CT αντιγόνων που εκφράζονται σε όγκους αλλά δεν εκφράζεται στους φυσιολογικούς ιστούς, εκτός από τους όρχεις [38], [39]. Ταυτοποίηση των άλλων CT αντιγόνων προχωρήσει γρήγορα με την εφαρμογή των ορολογικών ανάλυση της τεχνολογίας (SEREX) ανασυνδυασμένη βιβλιοθήκες έκφρασης [40]. Μέχρι σήμερα έχουν τουλάχιστον σαράντα τέσσερις διαφορετικές CT αντιγόνα έχουν αναγνωριστεί [41]. Ο λόγος για τον οποίο τα γονίδια, τα οποία κωδικοποιούν πρωτεΐνες που είναι απαραίτητες για τη σπερματογένεση στο αρσενικό ή έχουν μια δομικό ρόλο στο σπέρμα, που εκφράζεται σε καρκίνους δεν είναι σαφής. Η κατάσταση περιπλέκεται από το γεγονός ότι ο ρόλος του πολλά από τα γονίδια CT σε σπερματογένεση είναι ελάχιστα κατανοητή [36]. Ωστόσο, αυτό δεν εμπόδισε την χρησιμοποίηση των αντιγόνων CT ως βιοδείκτες για την ανάπτυξη νέων διαγνωστικών καρκίνο [42] και /ή στόχους για θεραπείες, όπως η ανοσοθεραπεία [43]. Ένας περιοριστικός παράγοντας στην πρακτική εφαρμογή της CT αντιγόνων ήταν η χαμηλή συχνότητα με την οποία τα γονίδια του καρκίνου /όρχεων εκφράζονται σε οποιοδήποτε δεδομένο τύπο όγκου. Ο περιορισμός αυτός δεν είναι παρών στην περίπτωση της σπερματογένεσης ειδική έκφραση retrogene σε καρκίνους των ωοθηκών, όπως αυτά τα γονίδια που εκφράζονται σε ένα σχετικά υψηλό ποσοστό των όγκων.

Ένα ενδιαφέρον χαρακτηριστικό των προηγουμένως αναγνωρισμένων καρκίνο γονίδια /όρχεις και τα αντιγόνα τους είναι δυσανάλογη σχέση με το χρωμόσωμα Χ [36]. Το χρωμόσωμα Χ και τα γονίδια κωδικοποιεί φαίνεται να παίζουν καθοριστικό ρόλο στην γένεση και την ανάπτυξη [44] όγκου. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ της βιολογίας όγκου και σπερματογένεση είναι λιγότερο σαφής. Στον άνθρωπο φαίνεται ότι οι όρχεις ειδικές retrogenes επίσης να εκφράζεται στην ωοθήκη. Ωστόσο, οι ειδικοί τύποι κυττάρων εντός του οποίου λαμβάνει χώρα η έκφραση μένει να καθοριστεί. Η έκφραση αυτών των retrogenes μπορεί να έχει ένα διακριτό μεταβολικό πλεονέκτημα για την ανάπτυξη των όγκων των ωοθηκών, καθώς μπορεί να συμπληρώσει τα προϊόντα γονιδίου από το χρωμόσωμα Χ, ιδιαίτερα σε περιπτώσεις όπου η δραστηριότητα του γονιδίου προγονικών ρυθμίζεται προς τα κάτω από μεθυλίωση [45] ή χάνονται λόγω της διαγραφής [34]. Μια σύνδεση μεταξύ μεταβολικά γεγονότα που συμβαίνουν κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης και την ανάπτυξη του καρκίνου μπορεί να συναχθεί από τις πρόσφατες πρόοδοι στην κατανόηση της βιολογίας του καρκίνου. Από ειδική σημείωση είναι η πρόσφατα αναγνωρισμένο ρόλο του BRCA-1 στην ανάπτυξη του μαστού και των ωοθηκών [46]. Η πρωτεΐνη BRCA-1 έχει αποδειχθεί ότι συνδέεται με το ανενεργό χρωμόσωμα Χ σε θηλυκά σωματικά κύτταρα και, κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης, εντοπίζεται στην ανενεργό χρωμόσωμα Χ σε σπερματοκύτταρα παχυτενίου κατά τη διάρκεια της μειωτικής διαδικασίας [47], [48]. Αυτό υποδηλώνει μια κοινή κανονιστική οδό. Χρειάζεται περαιτέρω εργασία για να καθορίσει το λειτουργικό ρόλο των συγκεκριμένων σπερματογένεση προϊόντα retrogene τόσο σπερματογένεση και τον καρκίνο. Η έκφραση των γονιδίων και retrogenes σε σπερματογένεσης κύτταρα οδηγείται από ΤΑΤΑ ανεξάρτητους υποκινητές. θέσεις πολυαδενυλίωσης είναι ανοδικά από εκείνους που χρησιμοποιούνται σε σωματικά κύτταρα και υπάρχει μια υπεροχή των εναλλακτικού ματίσματος του pre-mRNA [49]. Η έκφραση των όρχεων ειδικών γονιδίων και retrogenes υποδηλώνει ότι τα καρκινικά κύτταρα είναι σε θέση να χρησιμοποιήσουν τις οδούς μεταγραφής και RNA επεξεργασίας κανονικά ενεργή μόνο κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης στους άρρενες όρχεις. Κάθε δομική ταυτότητα μοιράζονται οι mRNAs που παράγονται από την CT και άλλα γονίδια που εκφράζονται σε δύο καρκίνους και όρχεις πρέπει να προσδιοριστεί. Αν σπερματογένεση και καρκινογένεση χαρακτηριστικά μερίδιο της γονιδιακής έκφρασης, τη ρύθμιση και RNA επεξεργασία θα μπορούσε κανείς να υποθέσει ότι, σε καιρό έζησε θηλαστικά καρκίνος είναι μια βιολογική ποινή που έχει ξεχωριστή φύλων και την ανάγκη για τη σπερματογένεση ειδικότερα.