Αφηρημένο

Το ασκορβικό οξύ (ΑΑ) εμφανίζει σημαντική αντικαρκινική δράση σε φαρμακολογικές δόσεις μπορεί να επιτευχθεί με παρεντερική χορήγηση που έχουν ελάχιστες επιπτώσεις στα φυσιολογικά κύτταρα. Έτσι, AA έχει πιθανές χρήσεις ως μόνη ή σε συνδυασμό με άλλα θεραπευτικά που στοχεύουν συγκεκριμένα μεταβολισμό καρκινικού κυττάρου σε χημειοθεραπευτικό παράγοντα. Συγκρίναμε τα αποτελέσματα των ΑΑ και συνδυασμούς ΑΑ με τον αναστολέα γλυκόλυση 3- (3-πυριδινυλ) -1- (4-πυριδινυλ) -2-προπεν-1-όνη (3-ΡΟ) στη βιωσιμότητα των τριών μη-μικροκυτταρικού καρκίνος του πνεύμονα (NSCLC) κυτταρικές γραμμές προς τα αποτελέσματα επί ενός αθανατοποιημένο πνεύμονα επιθηλιακή κυτταρική γραμμή. Οι συγκεντρώσεις ΑΑ από 0,5 έως 5 mM προκάλεσε μια πλήρη απώλεια της βιωσιμότητας σε όλες τις γραμμές NSCLC σε σύγκριση με ένα στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (Ρ στατιστικώς σημαντική διαφορά (P στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (Ρ στατιστικώς σημαντική διαφορά (Ρ στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

στατιστικώς σημαντική διαφορά (

P

& lt? 0,05). από θεραπείες ελέγχου και μεμονωμένα ΑΑ και 3-ΡΟ

Η

Ένα από τα πρώτα γεγονότα της απόπτωσης περιλαμβάνει την μετατόπιση φωσφατιδυλοσερίνης στην επιφάνεια του κυττάρου το οποίο μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας δοκιμασίες που βασίζονται στις δέσμευσης αννεξίνης V. Έτσι, για να αξιολογήσει περαιτέρω εάν κυτταρικού θανάτου που επάγεται σε Η1299 κυττάρων με συνδυασμό θεραπειών του ΑΑ και 3-ΡΟ οφείλεται σε απόπτωση, επεξεργασμένα κύτταρα αναλύθηκαν για δέσμευση αννεξίνης V και χρώση με ιωδιούχο προπίδιο για να μετρηθεί πρώιμων αποπτωτικών (αννεξίνη ιωδιούχο V + /προπίδιο -) και αργά αποπτωτικών (αννεξίνη V + /προπίδιο ιωδιούχο +) κυτταρικών πληθυσμών (Σχ. 8Α και Β). Η θεραπεία με 10 μΜ 3-ΡΟ μόνο του δεν έχει σημαντική επίδραση στον αριθμό των νωρίς ή αργά αποπτωτικά κύτταρα σε σύγκριση με τον έλεγχο. Η θεραπεία με 300 μΜ ΑΑ προκάλεσε μία σημαντική (

P

& lt? 0,05) σταδιακή αύξηση τόσο νωρίς και αργά αποπτωτικά κύτταρα. Πρόωρη αποπτωτικά κύτταρα ανιχνεύθηκαν συντομότερο 15 λεπτά μετά την θεραπεία και έφθασε ένα μέγιστο από 29% σε 3 ώρες μετά τη θεραπεία. Το ποσοστό των αποπτωτικών κυττάρων νωρίς μειώθηκε σε 4 ώρες. Μια παρόμοια σταδιακή συσσώρευση αργά αποπτωτικών κυττάρων συνέβη σε κύτταρα ΑΑ-αγωγή κατά τη διάρκεια της περιόδου θεραπείας 4 ώρες, με την πρώτη ανιχνεύσιμη σημαντική διαφορά από τον έλεγχο που παρατηρήθηκε στα 30 λεπτά και έφθασε το 18% σε 4 ώρες. Η θεραπεία συνδυασμού επίσης έδειξε μια σταδιακή αύξηση των πρώιμων αποπτωτικών κυττάρων από 15 λεπτά έως 3 ώρες, ωστόσο, το ποσοστό των πρώιμων αποπτωτικών κυττάρων ήταν σημαντικά υψηλότερη από αυτή που παρατηρήθηκε με μόνη ΑΑ και έφθασε ένα μέγιστο από 56% σε 3 ώρες μετά τη θεραπεία. Παρόμοια με την μόνη θεραπεία AA, ο αριθμός των πρώιμων αποπτωτικών κυττάρων μειώθηκε με ταυτόχρονη αύξηση στα τέλη αποπτωτικά κύτταρα σε 4 ώρες. Το ποσοστό των αποπτωτικών κυττάρων αργά σε 4 ώρες μετά την αγωγή ήταν 50% και ήταν σημαντικά (

P

& lt? 0,05). Υψηλότερο από το 26% που παρατηρήθηκε σε κύτταρα επεξεργασμένα μόνο με ΑΑ

( Α) Ανάλυση των πρώιμων αποπτωτικών κυττάρων και (Β) αργά αποπτωτικά κύτταρα μέσω δέσμευσης αννεξίνης V και χρώση προπιδίου ιωδιούχο. κύτταρα Η1299 υπέστησαν αγωγή είτε με ΑΑ (300 μΜ), 3-ΡΟ (10 μΜ) ή ένα συνδυασμό των ΑΑ και 3-ΡΟ για τους υποδεικνυόμενους χρόνους. Τα κύτταρα στη συνέχεια χρωματίστηκαν με ανεξίνη V και ιωδιούχο προπίδιο και οπτικοποιούνται με μικροσκοπία φθορισμού. Ένα ελάχιστο 200 κύτταρα βαθμολογήθηκαν για κάθε δείγμα και τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± SEM από τρία ανεξάρτητα πειράματα. (C) Ανάλυση της δραστηριότητας κασπάσης 3/7. Chen et al. Chen et al.