Αφηρημένο

Σκοπός

Αξιολογήσαμε αναδρομικά την in vitro χημειοευαισθησία της πρωτογενούς θέσης και μεταστατικούς όγκους ιστοσελίδα στον καρκίνο του παχέος εντέρου

Μέθοδοι

Διάφορα δείγματα εκτομή του όγκου (33 από λεμφαδένες, 42 από το συκώτι, έξι από πνεύμονα, και 68 πρωτογενείς όγκους) αξιολογήθηκαν μέσω ενός πολιτισμού τεστ ευαισθησίας των ναρκωτικών σταγονιδίων ενσωματωμένο τζελ κολλαγόνου για να καθορίσει χημειοευαισθησία σε μονοθεραπεία ή σε συνδυασμό των παραγόντων.

Αποτελέσματα

Ευαισθησία σε συνδυασμό χημειοθεραπείας ήταν σημαντικά υψηλότερο από εκείνο της μονοθεραπείας στην πρωτογενή ομάδα τοποθεσιών, ομάδα λεμφαδένων, και η ομάδα του ήπατος. Υπήρξε σημαντική διαφορά μεταξύ χημειοευαισθησία του πρωτογενούς θέσης και ότι ηπατικής μετάστασης σε κάθε μέσο (5-FU, ρ & lt? 0,001? SN38, ρ = 0.045? 5-FU /SN38, ρ & lt? 0,001? ΟΗΡ, ρ = 0.037? 5- FU /OHP, p = 0,045).

Συμπεράσματα

Οι όγκοι εμφάνισαν μεγαλύτερη in vitro χημειοευαισθησία σε θεραπεία συνδυασμού, σε σύγκριση με τη μονοθεραπεία. Περαιτέρω, οι όγκοι που είχαν υποστεί μετάσταση στο ήπαρ ήταν πιο ανθεκτικά στην χημειοθεραπεία, σε σύγκριση με συμφωνημένα πρωτογενείς όγκους

Παράθεση:. Takebayashi Κ, Mekata Ε, Sonoda Η, Shimizu Τ, Shiomi Η, Naka S, et al. (2013) Οι διαφορές στην χημειοευαισθησία μεταξύ Πρωτοβάθμιας και Μεταστατικό όγκοι στον καρκίνο του παχέος εντέρου. PLoS ONE 8 (8): e73215. doi: 10.1371 /journal.pone.0073215

Επιμέλεια: Sumitra Deb, Βιρτζίνια Πανεπιστήμιο της Κοινοπολιτείας, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 8, Ιουν 2013? Αποδεκτές: 17 Ιουλ του 2013? Δημοσιεύθηκε: 28 Αυγούστου 2013

Copyright: © 2013 Takebayashi et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο χρηματοδοτήθηκε από Shiga Πανεπιστήμιο Ιατρικών Επιστημών, την Ιαπωνία. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ο πολιτισμός τεστ ευαισθησίας των ναρκωτικών τζελ κολλαγόνου σταγόνα-ενσωματωμένα (CD-DST) είναι μια in vitro δοκιμασία αντικαρκινικών ευαισθησία των ναρκωτικών [1] – [6]. Πρόσφατες μελέτες έχουν αναφέρει ότι το CD-DST μπορούν να παρέχουν χρήσιμες θεραπευτικές πληροφορίες για τους ασθενείς με καρκίνο του στομάχου, καρκίνο του πνεύμονα, ορθοκολικό καρκίνο ή παγκρεατικό καρκίνο [7] – [12]. Επιπλέον, CD-DST μπορεί να αξιολογήσει την ευαισθησία σε νεότερα παράγοντες. Περιγράψαμε προηγουμένως την κλινική δυναμικό του CD-DST σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου (CRC) [12], [13] όσον αφορά τον εντοπισμό χημειοθεραπεία και χημειοευαίσθητων όγκων [12], [13]. CRC είναι μια από τις κύριες αιτίες θανάτου σε όλο τον κόσμο και συνεχίζει να αυξάνεται σε συχνότητα. Περισσότεροι από τους μισούς ασθενείς που αρχικά διαγνωστεί με εντοπισμένη νόσο, τελικά αναπτύσσουν στάδιο IV CRC [14]. Στις περισσότερες περιπτώσεις, σύγχρονη μεταστάσεις δεν είναι χειρουργήσιμη. Η κύρια θεραπεία για μεταστατικό CRC είναι η χημειοθεραπεία, και οι πρόσφατες εξελίξεις στην συστηματική χημειοθεραπεία έχει οδηγήσει σε βελτιωμένα αποτελέσματα για τους ασθενείς αυτούς. Ωστόσο, η κλινική απόκριση σε χημειοθεραπεία διαφέρει κατά τη σύγκριση πρωτογενών έναντι μεταστατικών όγκων (π.χ., στους λεμφαδένες, το ήπαρ, ή τους πνεύμονες), και σε ασθενείς με χημειοθεραπεία όγκους θα μπορούσαν να επωφεληθούν από τους άλλους τύπους θεραπευτικών στρατηγικών [15] – [19].

Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να αξιολογηθεί η διαφορά σε in vitro χημειοευαισθησία σε πρωτογενείς έναντι μεταστατικούς όγκους σε ασθενείς με CRC. Η μελέτη μας κατέδειξε τη διαφορά των in vitro χημειοευαισθησία στην πρωτοβάθμια και μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου.

Ασθενείς και Μέθοδοι

Ασθενείς

Το CD-DST διεξήχθη σε 940 ιστούς (588 πρωτογενή όγκους? 78 όγκων στους λεμφαδένες, 124 όγκους στο ήπαρ, και 27 όγκους στον πνεύμονα) που λαμβάνονται από ασθενείς με CRC μεταξύ Αυγούστου 1999 και Δεκεμβρίου 2011 Shiga Πανεπιστήμιο Ιατρικών Επιστημών στην Ιαπωνία. Επιλέχθηκαν 70% ρυθμό ανάπτυξης (33 από λεμφαδένες, 42 από το ήπαρ, έξι από πνεύμονα, και 68 πρωτογενείς όγκους) για μεταγενέστερη ανάλυση? όγκων με & gt. αξιολογήθηκαν συνολικά 68 πρωτογενείς όγκους, καθένα από τα οποία εκτομήθηκε από τον ίδιο ασθενή στον οποίο αποκόπηκαν τα μεταστατικών όγκων. Συγκριτική chemosensitivities σε διάφορες μονές ή συνδυασμό θεραπειών συγκρίθηκαν μεταξύ των διαφόρων χώρων του όγκου.

Όλοι οι ασθενείς ήταν ηλικίας κάτω των 85 χρόνων και είχε ανεπεξέργαστων αξιολογήσιμα μεταστατικές θέσεις που είχαν διαγνωστεί με αξονική τομογραφία (CT), 18F-φλουοροδεοξυγλυκόζη εκπομπής ποζιτρονίων τομογραφία-αξονική τομογραφία (FDG-PET-CT), και /ή διάχυση-weighted imaging μαγνητικού συντονισμού (DW-MRI). Οι πρωτογενείς όγκους και μεταστατικούς όγκους εκτμήθηκαν χειρουργικά, και όλα τα δείγματα ιστών διερευνήθηκαν με CD-DST για την αξιολόγηση chemosensitivities τους. Όλα τα δείγματα ιστολογικά επιβεβαιωμένη ως ορθοκολικό αδενοκαρκίνωμα.

Αυτή η μελέτη ήταν σύμφωνα με τις Οδηγίες Κλινικής Έρευνας του Shiga Πανεπιστήμιο Ιατρικών Επιστημών, και εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας στην έρευνα σε Shiga Πανεπιστήμιο Ιατρικών Επιστημών. Έχουμε λάβει γραπτή συγκατάθεση για να συμμετάσχουν σε αυτή τη μελέτη από όλους τους ασθενείς.

Κολλαγόνο Gel σταγονιδίων-ενσωματωμένη κουλτούρα των ναρκωτικών Ευαισθησία Test (CD-DST)

Το CD-DST πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ιστό του όγκου, όπως περιγράφηκε προηγουμένως από τους Kobayashi et al. [4], [5]. Εν συντομία χειρουργικά απομονωμένος δείγματα υπέστησαν πέψη σε ένζυμο διασπορά κολλαγενάση, και τα διεσπαρμένα καρκινικά κύτταρα επωάστηκαν σε φιάλη επιχρισμένο με γέλη κολλαγόνου. Στη συνέχεια, τα βιώσιμα κύτταρα προσκολλώνται στο κολλαγόνο γέλης στρώμα συλλέχθηκαν και προστέθηκαν σε ανακατασκευή διάλυμα κολλαγόνου τύπου 1 (Cell μήτρα Τύπος CD ™, Kurabo, Osaka, Japan). Τρεις σταγόνες αυτών των μιγμάτων τοποθετήθηκαν σε κάθε φρεάτιο ενός έξι-φρεατίων, και στη συνέχεια 5-φθοριοουρακίλη (5-FU) (1,0 μg /ml), ιρινοτεκάνη (SN38) (0,03 μg /ml), οξαλιπλατίνη (ΟΗΡ) ( 0,5 μg /ml), 5-FU /SN38 (1,0 μg /ml, 0,03 μg /ml), ή 5-FU /ΟΗΡ (1,0 μg /ml, 0,5 μg /ml) προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο. Οι πλάκες επωάστηκαν για 24 ώρες. Μετά την απομάκρυνση του μέσου που περιέχει το αντικαρκινικό φάρμακο (-α), το κάθε φρεάτιο επωάστηκε με μέσο PCM-2 (Kurabo) για 7 ημέρες. Η in vitro χημειοευαισθησία επίδραση του κάθε παράγοντα εκφράστηκε ως αναλογία του συνολικού όγκου αποικίας (Τ) των κατεργασμένων κυττάρων με εκείνη των μη κατεργασμένων κυττάρων (C). Ένα δείγμα με αναλογία Τ σε C 60% ή λιγότερο θεωρήθηκε ως χημειοευαίσθητων [6], [12].

Στατιστική Ανάλυση

Στατιστικές αναλύσεις για τα αρχικά χαρακτηριστικά πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το JMP πρόγραμμα λογισμικού έκδοση 9 (SAS Institute Inc. Cary, NC, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής). Η Chi-square test χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση των δεδομένων. t-test του Student χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνουν τα δεδομένα CD-θερινής ώρας. Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του Excel (Microsoft, Redmond, WA) και Statcel2 (OMS εκδότη, Saitama, Japan) λογισμικού. Μία τιμή ρ μικρότερη από 0,05 θεωρήθηκε ότι υποδηλώνουν στατιστική σημαντικότητα.

Αποτελέσματα

Χαρακτηριστικά Ασθενών

Τα χαρακτηριστικά των ασθενών παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Αρχικά χαρακτηριστικά ήταν ισορροπημένα σε κάθε ομάδα . Στην ομάδα μετάσταση λεμφαδένα, πρωτογενείς όγκοι ήταν στο κόλον σε 19 ασθενείς και στο ορθό σε 14 ασθενείς. Στην ομάδα ηπατικών μεταστάσεων, πρωτογενείς όγκοι ήταν στο κόλον σε 24 ασθενείς και στο ορθό σε 18 ασθενείς. Στην ομάδα μετάσταση πνεύμονα, πρωτογενείς όγκοι ήταν στο κόλον σε δύο ασθενείς και στο ορθό σε τέσσερις ασθενείς. αξιολογήθηκαν συνολικά 68 πρωτογενείς όγκους, καθένα από τα οποία εκτομήθηκε από τον ίδιο ασθενή στον οποίο αποκόπηκαν τα μεταστατικών όγκων.

Η

χημειοευαισθησία προς Single χημειοθεραπευτικού παράγοντος έναντι συνδυασμού Chemotherapy

ευαισθησίες στη χημειοθεραπεία συνοψίζονται στον πίνακα 2. Ευαισθησία ήταν μεγαλύτερη στο 5-FU /θεραπεία SN38 από τη θεραπεία 5-FU στους ακόλουθους τύπους όγκου: πρωτογενείς όγκους (ρ & lt? 0.001), οι όγκοι λεμφαδένων (ρ & lt? 0.001), οι όγκοι του ήπατος ( p & lt? 0.001). Ευαισθησία ήταν μεγαλύτερη στο 5-FU /θεραπεία ΟΗΡ από τη θεραπεία 5-FU στους ακόλουθους τύπους όγκου:. Πρωτογενείς όγκους (ρ = 0.0014), οι όγκοι λεμφαδένων (ρ & lt? 0.001), οι όγκοι του ήπατος (ρ = 0,03)

δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στην χημειοευαισθησία σε ενιαίο χημειοθεραπεία παράγοντα σε σχέση με εκείνη του συνδυασμού χημειοθεραπεία σε όγκους του πνεύμονα.

χημειοευαισθησία Δημοτικής Versus Μεταστατικό όγκοι

δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στην χημειοευαισθησία όταν συγκρίνονται οι όγκοι λεμφαδένων και συμφωνημένα πρωτογενείς όγκους (Πίνακας 3). Χημειοευαισθησία ήταν σημαντικά χαμηλότερη σε όγκους του ήπατος από εκείνη συνταιριασμένων πρωτοπαθών όγκων (5-FU, ρ & lt? 0,001? SN38, ρ = 0.045? 5-FU /SN38, ρ & lt? 0,001? ΟΗΡ, ρ = 0.037? 5-FU /ΟΗΡ? p = 0,045) (Πίνακας 4). Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στην χημειοευαισθησία κατά τη σύγκριση των όγκων του πνεύμονα και συμφωνημένα πρωτογενείς όγκους (Πίνακας 5).

Η

Η

Συζήτηση

Η παρούσα μελέτη κατέδειξε τη διαφορά του στην vitro χημειοευαισθησία ορθοκολικού πρωτογενών και μεταστατικών όγκων, και έδειξε ότι η χημειοθεραπεία συνδυασμού ήταν περισσότερο από αποτελεσματικότερη από τη μονοθεραπεία

Τα αποτελέσματα της in vitro δοκιμή αντικαρκινικού ευαισθησία φαρμάκου CD-DST [1] – [6]. συσχετίζονται καλά με εκβάσεις των ασθενών? ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με θεραπευτικά σχήματα που κρίθηκαν «ευαίσθητες» σύμφωνα με τη δοκιμασία CD-DST είχε καλύτερα αποτελέσματα σε σύγκριση με τους ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με θεραπευτικά σχήματα που κρίθηκαν «μη ευαίσθητα» [12], [13]. Δεδομένου ότι οι ασθενείς των οποίων οι όγκοι θεωρούνται χημειοθεραπεία με βάση τις δοκιμές CD-DST δεν μπορούν να επωφεληθούν από μία τέτοια θεραπεία, άλλες θεραπευτικές προσεγγίσεις θα πρέπει να θεωρείται για εκείνους τους ασθενείς [15] – [19]

Διαχείριση του μεταστατικού CRC μπορεί να αποτελείται από. ιατρικές θεραπείες (π.χ., συμβατικά συστηματική χημειοθεραπεία, μοριακά παράγοντες στόχοι) και /ή χειρουργική επέμβαση. Ενώ 5-FU, SN38, και ΟΗΡ είναι τα πρότυπα της φροντίδας για τη θεραπεία του CRC, ορισμένοι ασθενείς μπορεί να είναι ανθεκτικά σε αυτές τις θεραπείες. Ως εκ τούτου, θα ήταν χρήσιμο να προσδιοριστούν προληπτικά οι οποίοι παράγοντες αναμένεται να είναι αποτελεσματικές έναντι εκείνων αναμένεται να είναι αναποτελεσματική. George et al. ανέφερε ότι το 93% των ασθενών με σύγχρονη σταδίου IV CRC που έλαβαν χημειοθεραπεία δεν χρειάζονται παρηγορητική χειρουργική επέμβαση για τον πρωτογενή όγκο [20]. Πρωτογενής εκτομή του όγκου γίνεται εάν ο ασθενής είναι συμπτωματική και ως εκ τούτου εξετάζονται σε ατομική βάση. Mentha et al. περιγράφεται μια νέα στρατηγική για τη διαχείριση των ηπατικών μεταστάσεων [21] στην οποία αρχικό έλεγχο και downstaging ηπατικής μετάστασης πριν πρωτογενή εκτομή του όγκου οδήγησε σε μεγαλύτερη τέλεσης οπισθοεκτομής και καλύτερο αποτέλεσμα. Μετάσταση στο ήπαρ θεωρείται ότι είναι ένας σημαντικός προγνωστικός παράγοντας, και μπορεί να επηρεάσει το αποτέλεσμα. Η θεραπεία της μετάστασης ήπατος μπορεί να δοθεί προτεραιότητα σε σχέση με εκείνη των πρωτογενών όγκων. Σε αυτή τη μελέτη, μετάσταση στο ήπαρ ήταν ευαίσθητη στη χημειοθεραπεία, σε σύγκριση με τον πρωτογενή όγκο, η οποία υποστηρίζει τη στρατηγική που προτείνει Mentha et al. Okumura et al. ανέφεραν ότι μετάσταση στο ήπαρ ήταν σημαντικά πιο ανθεκτικά στην 5-FU, σε σύγκριση με τον πρωτογενή όγκο σε ένα μοντέλο ποντικού [9], [22]. Στη μελέτη αυτή, αφυδρογονάση διυδροπυριμιδίνης (DPD) και θυμιδυλική φωσφορυλάση επίπεδα (TP) mRNA αυξήθηκε με επανειλημμένη μετάσταση στο ήπαρ. DPD και TP μπορεί να μεσολαβήσει απόκτηση χημειοαντίσταση με 5-FU κατά την μετάσταση στο ήπαρ. Μετάσταση στο ήπαρ μπορεί να έχει μια μακρά ανάρρωση από ένα σημείο της in vitro χημειοευαισθησίας.

Από την άλλη πλευρά, στην ομάδα μετάσταση πνεύμονα, χημειοευαισθησία μεταξύ πρωτογενών όγκων και μεταστατικούς όγκους δεν ήταν σημαντικά διαφορετική. Gorlick et al. ανέφεραν ότι η έκφραση θυμιδιλική συνθετάση (TS) mRNA ήταν σημαντικά υψηλότερη στην μετάσταση πνεύμονα σε σύγκριση με μετάσταση στο ήπαρ [23]. Ωστόσο, η έκφραση DPD σε μετάσταση πνεύμονα ήταν χαμηλό σε σύγκριση με συμφωνημένα πρωτογενή όγκο, ενώ εκείνη των ηπατικών μεταστάσεων ήταν υψηλό [24]. TP, TS, και DPD συμμετέχουν ενεργά στο μεταβολισμό 5-FU. DPD-χαμηλή έκφραση μπορεί να σχετίζεται με αυτό το μετάσταση στους πνεύμονες δεν είναι στη χημειοθεραπεία για πρωτογενή όγκο, σε σύγκριση με μετάσταση στο ήπαρ.

Η παρούσα μελέτη έδειξε ότι ο συνδυασμός χημειοθεραπείας ήταν περισσότερο από αποτελεσματική από τη μονοθεραπεία. Στην ομάδα ηπατικών μεταστάσεων, η χημειοθεραπεία συνδυασμού είναι απαραίτητη, διότι μετάσταση στο ήπαρ είναι σχετικά χημειοθεραπεία, και μονοθεραπεία σχετίζεται με κακή έκβαση. Το CD-DST μπορεί να αξιολογήσει την ευαισθησία σε σχετικά νεότερη παράγοντες. In vitro ευαισθησία της θεραπείας συνδυασμού χρησιμοποιώντας νεότερα παράγοντες μπορούν να αξιολογηθούν, καθώς και να συνδυαστική θεραπεία με 5-FU /SN38 και 5-FU /ΟΗΡ. Η πιο κατάλληλη αντικαρκινική αγωγή μπορούν να ταυτοποιηθούν χρησιμοποιώντας την ανάλυση CD-θερινής ώρας. Οι ασθενείς στους οποίους οι όγκοι είναι στη χημειοθεραπεία με τις συμβατικές χημειοθεραπείες σύμφωνα με το CD-DST θα πρέπει να θεωρείται για εναλλακτικές στρατηγικές θεραπείας, όπως η εγχείρηση και μοριακά στοχευμένα φάρμακα [15] – [19]. Αυτό θα είχε το πλεονέκτημα της αποφυγής παρενεργειών που σχετίζονται με συστηματικές θεραπείες σε ασθενείς οι οποίοι διαφορετικά δεν θα επωφεληθεί από μία τέτοια θεραπεία [18], [19]. Στην πραγματικότητα, CD-DST θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για να συμπληρώσει πληροφορημένη συναίνεση πριν από την έναρξη της θεραπείας.

Εν περιλήψει, η παρούσα μελέτη έδειξε ότι η in vitro χημειοευαισθησία ηπατικών μεταστάσεων ήταν σχετικά ανθεκτικά σε σύγκριση με πρωτογενείς όγκους, και έδειξε ότι η χημειοθεραπεία συνδυασμού ήταν περισσότερο από ό, τι αποτελεσματικότερη από τη μονοθεραπεία.