Αφηρημένο

εγκεκριμένα φάρμακα στοχεύουν περίπου 400 διαφορετικούς μηχανισμούς δράσης, των οποίων τόσο λίγα όπως 60 χρησιμοποιούνται σήμερα ως αντικαρκινικών θεραπειών. Δεδομένου ότι κατά μέσο όρο διαρκεί 10-15 χρόνια για μια νέα θεραπευτική του καρκίνου που πρόκειται να εγκριθεί, και η πρόσφατη επιτυχία της αναπροσανατολισμό φάρμακο για παράγοντες όπως η θαλιδομίδη, υποθέσαμε ότι η αποτελεσματική, ασφαλή θεραπείες για τον καρκίνο μπορεί να βρεθεί με τη δοκιμή εγκεκριμένα φάρμακα σε νέες θεραπευτικές Ρυθμίσεις. Εδώ, αναφέρουμε

in-vivo

δοκιμή μιας ευρείας ένωσης συλλογή σε μοντέλα ξενομοσχεύματος καρκίνου. Χρησιμοποιώντας 182 ενώσεις οι οποίες στοχεύουν 125 μοναδικών μηχανισμών στόχο, εντοπίσαμε 3 φάρμακα που εμφανίζεται αναπαραγώγιμη δραστικότητα σε συνδυασμό με το χημειοθεραπευτικό τεμοζολομίδη. Υποψήφια φάρμακα φαίνεται αποτελεσματική σε ισοδύναμα δόση που υπερβαίνει τα τρέχοντα επίπεδα συνταγή, γεγονός που υποδηλώνει ότι θα χρειαστούν επιπλέον προ-κλινικές προσπάθειες πριν από αυτά τα φάρμακα μπορεί να ελεγχθεί ως προς την αποτελεσματικότητα σε κλινικές δοκιμές. Συνολικά, προτείνουμε αναπροσανατολισμό των ναρκωτικών είναι μια σχετικά εντάσεως πόρων μέθοδος που μπορεί να προσδιορίσει εγκεκριμένων φαρμάκων με ένα στενό περιθώριο αντικαρκινική δράση

Παράθεση:. Roix JJ, Harrison SD, Rainbolt ΕΑ, Meshaw KR, McMurry AS, Cheung P, et al. (2014) Συστηματική Διαλογή αναπροσανατολισμό σε Μοντέλα ξενομοσχεύματος Αναγνωρίζει εγκεκριμένα φάρμακα με νέα Αντικαρκινική Δράση. PLoS ONE 9 (8): e101708. doi: 10.1371 /journal.pone.0101708

Επιμέλεια: Felipe Prosper, Clinica Universidad de Navarra, Ισπανία

Ελήφθη: 19, Νοεμβρίου του 2013? Αποδεκτές: 10 Ιούνη 2014? Δημοσιεύθηκε: 5 Αύγ, 2014

Copyright: © 2014 Roix et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Όλες οι μελέτες χρηματοδοτήθηκαν και χρηματοδοτούνται από BioMed Valley Ανακαλύψεις, Inc. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. JJR, PS και SS είναι υπαλλήλους της BioMed Valley Ανακαλύψεων, Incorporated, η οποία επιδιώκει να ανακαλύψουν και εμπορική ανάπτυξη νέων θεραπευτικών και διαγνωστικών μέσων για τη νόσο. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων να PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Παρά τις τεράστιες ερευνητικές προσπάθειες, ένας στους τέσσερις Αμερικανούς θα πεθάνουν εξαιτίας του καρκίνου. Η αναζήτηση για την ταυτοποίηση νέων θεραπειών για τον καρκίνο έχει κεντρίσει πολλές, ευρεία καινοτομίες στον τομέα της βιοϊατρικής έρευνας, και τη φροντίδα του καρκίνου είναι στην πρώτη γραμμή της μοριακής ιατρικής, όπου είναι προσαρμοσμένα διαγνωστικά και φάρμακα που χρησιμοποιούνται για να στοχεύουν με ακρίβεια τη γενετική βάση του καρκίνου [1]. Ακόμα, η διαμάχη υπάρχει ως προς το αν οι προσπάθειες και το κόστος της έρευνας και της θεραπείας του καρκίνου έχουν πραγματικά οδήγησε σε επαρκή κοινωνικά οφέλη? είναι ασαφές πότε και πώς μια νίκη στον πόλεμο κατά του καρκίνου μπορεί να κηρυχθεί [2] – [4].

Έχει προταθεί ότι η νέα θεραπευτικά για πολλές ασθένειες, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου μπορεί να βρεθεί με την αξιοποίηση φάρμακα που είναι που έχουν ήδη εγκριθεί για χρήση. [5] Αρκετά προηγούμενα για την ένωση «αναπροσανατολισμό» υπάρχουν, και αναμένεται ότι η διαφορετική φαρμακολογία στόχο έχουν εγκριθεί τα φάρμακα μπορεί να έχουν άγνωστη, απρόσμενη χρησιμότητα σε ασθένειες πέρα ​​από τις ενδείξεις σήμα για το οποίο τα εν λόγω φάρμακα συνταγογραφούνται επί του παρόντος. Όπως πολλοί εγκεκριμένα φάρμακα έχουν ένα καλά τεκμηριωμένο ιστορικό ασφαλούς δοσολογίας σε γενικές πληθυσμούς, οι ενδείξεις μυθιστόρημα αναπροσανατολισμό μπορεί πιθανόν να δοκιμαστεί γρήγορα απ ‘ευθείας στον άνθρωπο, χωρίς την ανάγκη για εκτεταμένες προκαταρκτικές εκτιμήσεις της ασφάλειας.

Με δεδομένη αυτήν την δυνητική αξία, εξετάσαμε μια ευρεία συλλογή των εγκεκριμένων φαρμάκων δόση σε συνδυασμό με χημειοθεραπεία σε μοντέλα ξενομοσχεύματος καρκίνου του ποντικιού. Ενώ αμερόληπτη στρατηγική ελέγχου και επικύρωσης μας προσδιορίζονται εγκεκριμένα φάρμακα με δυναμικό συνδυασμό χημειοθεραπείας, θα ήταν πιθανόν να απαιτηθούν επιπλέον μηχανιστικών και ρυθμιστικές μελέτες πριν θα μπορούσαν να αξιολογηθούν οι παράγοντες αυτοί σε κλινικές δοκιμές.

Υλικά και Μέθοδοι

Ζώων ξενομοσχεύματος Μελέτες

ηλικίας 9 εβδομάδων θηλυκά αθυμικά γυμνά ποντίκια (CRL: NU (NCR) –

Foxn1nu

, Charles River) διατηρήθηκαν σε πρότυπο κύκλο φωτός και τροφοδοτείται

κατά βούληση

νερό και ΝΙΗ 31 δίαιτα χρησιμοποιήθηκαν για τις μελέτες. ξενομοσχεύματα όγκου ξεκίνησαν με εμφύτευση 1 mm

3 θραυσμάτων όγκου από ξενομόσχευμα πηγή ιστού διατηρήθηκε με σειριακή μεταμόσχευση. Η ανάπτυξη του όγκου παρακολουθήθηκε όπως το μέσο μέγεθος προσέγγισε το εύρος-στόχο των 80 έως 120 mm

3, και τα ζώα στη συνέχεια τυχαιοποιήθηκαν σε μεταγενέστερα ομάδες θεραπείας. Οι όγκοι μετρήθηκαν σε δυο διαστάσεις χρησιμοποιώντας δαγκάνες, και ο όγκος υπολογίστηκε με τη χρήση των τυποποιημένων.

Η τεμοζολομίδη χορηγείται από του στόματος, μία φορά ημερησίως για τις πρώτες πέντε ημέρες της μελέτης. θεραπείες συνδυασμού χορηγήθηκαν μια φορά ημερησίως χρησιμοποιώντας την ενδεικνυόμενη οδό και τυποποίηση? . Πειραματικά φάρμακα χορηγήθηκαν τόσο κατά τη διάρκεια και μετά τη χορήγηση τεμοζολομίδη να εντοπίζονται οι επιπτώσεις ευαισθητοποίηση τόσο από την ταυτόχρονη και παρακολούθησης σχετικά με την έκθεση

Όλα κτηνοτροφία, θεραπείες και την κτηνιατρική φροντίδα διεξήχθησαν από εκπαιδευμένους προσωπικά σε AAALAC διαπιστευμένο εγκαταστάσεις? πρωτόκολλα και τη διεξαγωγή της μελέτης ήταν το αντικείμενο της επανεξετάσεως IACUC και έγκριση στο Charles River.

Στατιστικές Μέθοδοι, Screening εκτιμήσεις δύναμης

Για να καταγράψετε τα δεδομένα της χρονικής πορείας των σπουδών ξενομοσχεύματος, χρησιμοποιήσαμε log-rank Mantel -COX ανάλυση επιβίωσης, όπου η επιβίωση αποκοπής ορίστηκε από την εμφάνιση ενός συγκεκριμένου φορτίο όγκου για μελέτη. Μετά από αναλύσεις των πιλοτικών μελετών, διαπιστώσαμε ότι 500 mm

3 όγκου αποκοπής του όγκου λαμβάνονται επαρκώς υπόψη τα θεραπευτικά αποτελέσματα των αυξημένη δόση τεμοζολομίδης. Log-rank chi-square είχε χρησιμοποιηθεί για τον υπολογισμό και την αναφορά δοκιμών σημασία? Τα μεγέθη αναφέρονται ως αποτέλεσμα αναλογίες κινδύνου Mantel-Haenzel, όπου ένας προστατευτικός δείκτης απεικονίζει την ικανότητα της πειραματικής θεραπείας για καθυστερήσουν ή να αποτρέψουν την εξέλιξη του όγκου πέραν 500 mm

3. Όπως συζητήθηκε στα αποτελέσματα, επιλέγοντας cut-offs μεγαλύτερο από το όριο αυτό δεν επηρεάσουν σημαντικά τα αποτελέσματα. 1.000 χιλιοστά

3 ήταν κάπως πιο μεταβλητή, με συστηματική επηρεάζουν επιπτώσεις στην στατιστική ακρίβεια εντός και μεταξύ των ομάδων? ανάπτυξη σε 500 mm

3 εμφανίστηκε πιο ομοιογενής.

Για διαλογή, τυπικά 10 ζώα για να λάβουν 5 mg /kg τεμοζολομίδη μονοθεραπεία, ενώ πιο συχνά 5 ζώα αποδόθηκαν σε θεραπεία συνδυασμού. υπολογισμοί ρεύματος που υποδεικνύεται αυτό το σχέδιο της μελέτης ήταν επαρκής για να διακρίνει μια μείωση 2,6-φορές στην επιβίωση κίνδυνο επιτοκίου με 80% της ισχύος σε επίπεδο σημαντικότητας 0,05 (που προκύπτουν χρησιμοποιώντας τους τύπους που περιέχονται σε: https://www.cct.cuhk.edu. HK /STAT /επιβίωση /Rubinstein1981.htm). Όπως συζητείται παρακάτω, ο πρακτικός αντίκτυπος της αποκάλυψης μεγεθών επίδραση αυτού του μεγέθους απέδωσε παρατηρήσεις όπου η πειραματική συνδυασμός παρέχεται προστέθηκε ισοδύναμη αποτελεσματικότητα σε 2-πλάσια αύξηση στη δόση της τεμοζολομίδης. Σε ένα άλλο πρίσμα, η προσέγγιση τροφοδοσία μας θα είναι τυπικά αποδώσει τα εξής: ενώ όλα τα 10 ζώα που έλαβαν μονοθεραπεία με τεμοζολομίδη φτάσει βάρη όγκου πέραν των 500 mm

3 εντός 15 ημερών, θα μπορούσαν να εντοπιστούν σημαντικές επιτυχίες της οθόνης όταν δεν υπερβαίνει το 1 από 5 ζώα ο συνδυασμός ομάδα είχε ένα φορτίο όγκου άνω των 500 mm

3 μετά από 30 ημέρες θεραπείας και την παρακολούθηση.

αναπροσανατολισμό Βιβλιοθήκη

Ένας υποψήφιος κατάλογο των εγκεκριμένων φαρμάκων συντάχθηκε από DrugBank [ ,,,0],6], η θεραπευτικοί στόχοι στη βάση δεδομένων [7], και το Εγχειρίδιο Merck της διάγνωσης και θεραπείας. Μετά την αξιολόγηση του κόστους και της διαθεσιμότητας, τα αποθέματα ένωση gram-κλίμακας τροφοδοτείται από πολλούς προμηθευτές. σκευάσματα δόση και διαδρομές κατάλληλες για χρόνια χορήγηση εντοπίστηκαν από την αναζήτηση βιβλιογραφίας. φαρμακευτικών στόχων και μηχανισμοί ερωτηθούν κατά την τελευταία έκδοση από τους θεραπευτικούς στόχους βάσης δεδομένων. Μέχρι σήμερα, TTD κατηγοριοποιεί 364 στόχους ως «επιτυχημένη», έχει στόχο εγκεκριμένα φάρμακα. πειραματική διάταξη μας χαρτογραφήθηκε με 124 επιτυχείς στόχους, ή περίπου 35% κάλυψη. εκτίμηση της κάλυψης μας είναι συντηρητική, καθώς αγνόησε τις σχέσεις ένα-προς-πολλά για φάρμακα που αντιστοιχίζονται σε πολλαπλούς στόχους? πολλαπλούς στόχους του κάθε φαρμάκου δεν ήταν διπλά υπολογίζονται εάν τουλάχιστον μία από τις πολλές στόχοι ενός φαρμάκου ήταν άσκοπα στοχευμένες με άλλο φάρμακο.

Temozolomide /Καντεσαρτάνη PK μελέτη αλληλεπίδρασης

επισημανθεί Ραδιο-ισότοπο τεμοζολομίδη ( 4-μεθυλο

14C-5-οξο-2,3,4,6,8-pentazabicyclo [4.3.0] εν-2,7,9-triene- 9-καρβοξαμίδιο) συντέθηκε (Moravek) έτσι ώστε απαρίθμηση σπινθηρισμών θα μπορούσε να αξιολογηθεί η ακόλουθη: άθικτο ένωση? ενεργούς μεταβολίτες? καθώς επίσης και ομοιοπολική προσαγωγές είναι γνωστό ότι σχηματίζονται ακόλουθα αντιδραστικά μεταβολισμό της τεμοζολομίδης σε ιστούς-στόχους [8]

Δόση πειράματα αλληλεπίδρασης διεξήχθησαν σε θηλυκούς γυμνούς ποντικούς που φέρουν ξενομοσχεύματα U87MG θραύσμα όγκου, όπως περιγράφεται παραπάνω.? ζώα είχαν φορτίο όγκου του ~ 400 mm

3 κατά τη στιγμή της χορήγησης. Στους ποντικούς χορηγήθηκε είτε όχημα ή candesartan ε.π. για μία ημέρα που προηγείται συνδυασμό δόσεων με C14-τεμοζολομίδη. Την επόμενη ημέρα, μια δόση kg /5 mg C14-temozolomide χορηγείται από του στόματος είτε μόνη της είτε αμέσως μετά από μια δόση των 10 mg /kg candesartan με ί.ρ. διοίκηση.

Στα χρονικά σημεία που αναφέρονται, οι ιστοί συλλέχθηκαν και αξιολογήθηκαν για τη διανομή ραδιο-ισότοπο με πρότυπες μεθόδους σπινθηρογραφία.

Συνδυασμός ανεκτικότητας Μελέτη

ηλικίας 8-10 εβδομάδων, υγιείς άρρενες C57BL /6J ποντικούς χορηγήθηκε είτε τεμοζολομίδη μόνη της σε 25 mg /kg, ή μαζί με συνδυασμό παραγόντων στις υποδεικνυόμενες διαδρομές και επίπεδα δόσεων. Μετά από έξι ημέρες συνδυασμού δοσολογίας, η χορήγηση temozolomide διεκόπη, ενώ οι παράγοντες συνδυασμού χορηγήθηκαν για άλλες 4 ημέρες. Τα ζώα θυσιάστηκαν στα υποδεικνυόμενα χρονικά σημεία, και τα δείγματα αίματος αναλύθηκαν για την πλήρη παραμέτρους γενική αίματος χρησιμοποιώντας τυπικές αιματολογικές μεθόδους.

Δόσης Εύρος Μελέτη Απόκρισης Ιστορικό Πληροφορίες

συνταγογραφικές πληροφορίες ετικέτες χρησιμοποιήθηκαν για να καθοδηγήσει τη δόση επιλογής για τις μελέτες απόκρισης δόσης-φάσμα

για ρισεδρονάτη (εμπορική ονομασία: Actonel [9])., μη κλινικές μελέτες carcionogenicity 80 εβδομάδων διεξήχθησαν σε ποντίκια σε 32 mg /kg /ημέρα. Χρησιμοποιώντας επιφάνειας σώματος κανονικοποίηση, η ετικέτα υπολογίζει αυτή είναι η ισοδύναμη δόση 6,5 φορές τη μέγιστη συνιστώμενη ημερήσια δόση σε ανθρώπους (30 mg /ημέρα), η οποία ενδείκνυται για χρήση στη νόσο του Paget. Ως εκ τούτου, η διαλογή και ανώτατο επίπεδο εύρημα δόσης εμβέλειας στα πειράματα του ποντικιού μας των 7,5 mg /kg /ημέρα είναι μόνο ελαφρώς πάνω από τη μέγιστη συνιστώμενη ανθρώπινη ημερήσια δόση (MHRD), με βάση το σωματικό εξομάλυνση επιφάνειας. Η χαμηλότερη δόση ποντίκι δοκιμάστηκε, 1.5 mg /kg /ημέρα, είναι σε μεγάλο βαθμό ισοδύναμο με το κατώτερο ανθρώπινης ημερήσιας δόσης (5 mg /ημέρα), που είναι προτείνουμε σε θεραπεία οστεοπόρωσης

Για candesartan (εμπορική ονομασία:. Atacand [10 ]), μη κλινικές μελέτες 104 καρκινογένεσης σε ποντικούς διεξήχθησαν στα 100 mg /kg /ημέρα. Η ετικέτα Atacand εκτιμά ότι αυτή η δόση προκάλεσε συστηματική έκθεση σε ποντίκια (με βάση την AUC) που ήταν περίπου 7 φορές αυτές που επιτυγχάνονται στον άνθρωπο μετά από χορήγηση του MHRD, 32 mg /ημέρα. Επομένως, η διαλογή και ανώτατο επίπεδο εύρημα δόσης σειρά σε πειράματα ποντικού μας 10 mg /kg /ημέρα ήταν πιθανόν πάνω από το MHRD, σε βάση AUC κανονικοποιημένης έκθεση, ιδίως λόγω αρχική μας δοσολόγηση με ί.ρ., αντί ρ.ο. διαδρομή. πειράματα ποντικού σε 2.5 mg /kg /ημέρα ρ.ο. θα πρέπει να είναι σε μεγάλο βαθμό αντανακλά την χαμηλή δόση έναρξης ενδείκνυται για χρήση σε υπερτασικούς ενήλικες (8 mg /ημέρα)

Για τερβιναφίνης. (εμπορική ονομασία: Lamisil [11]), οι μελέτες καρκινογένεσης σε αρουραίους 28 μήνες διεξήχθησαν σε 69 mg /kg /ημέρα? Αυτή η δόση αναφέρεται ότι είναι 2 φορές το MHRD, με βάση την AUC συγκρίσεις έκθεση. μελέτες διαλογής και της δόσης-σειρά μας σε ποντίκια χρησιμοποιούνται ε.π. χορήγηση, γεγονός που υποδηλώνει την kg δόση ημέρες 50 mg //μέσω αυτής της οδού είναι πιθανό πολύ πάνω από το ισοδύναμο MHRD, δεδομένου ότι η εμφανίζει φάρμακο μέτρια βιοδιαθεσιμότητα μεταξύ των ειδών [12], [13]. Προς υποστήριξη αυτού, 50 mg /kg από του στόματος δόσεις σε ποντικούς είχαν προηγουμένως δείξει ότι εκμαιεύουν κορυφή συστηματικές συγκεντρώσεις της τάξης του 1 μg /mL [14], η οποία είναι ισοδύναμη με Cmax που παρατηρήθηκε σε ανθρώπους μετά από μια δόση 250 mg. Εμείς δεν ακολουθήσει μια μελέτη εύρεσης δόσης από του στόματος περιοχή σε μοντέλα ποντικών μας, με δεδομένες τις φτωχές απαντήσεις παρατηρήθηκαν μετά από τιτλοποίηση της δόσης με ε.π. διαδρομή.

Αποτελέσματα

Σχεδιάσαμε μια σταδιακή πειραματική στρατηγική δοκιμών, προκειμένου να ελέγξουν, την επιβεβαίωση και επικύρωση εγκεκριμένα φάρμακα που θα μπορούσαν να έχουν δυναμικό δραστηριότητα ως παράγοντες συνδυασμό χημειοθεραπείας (Εικόνα 1Α). Πρώτον, επιχειρήσαμε μια σχετικά γρήγορη οθόνη πρωτογενούς αποτελεσματικότητας χρησιμοποιώντας χαμηλούς αριθμούς των ζώων (συνήθως 10 ελέγχου και 5 πειραματόζωα ανά συνδυασμό), τη δοκιμή κάθε ένωση σε ένα ενιαίο επίπεδο δόσης. Ελπιδοφόρα επιτυχίες από την πρωτεύουσα διαλογή εκ νέου δοκιμαστεί στο ίδιο μοντέλο για την εκτίμηση της αναπαραγωγιμότητας. Επαναλήψιμη επιτυχίες ήταν επόμενο δοκιμάστηκε σε δύο επιπλέον μοντέλα ξενομοσχεύματος για να ελέγξετε αν τα ευρήματα ήταν γενικεύσιμων. Αρκετές ενώσεις ελέγχθηκαν σε μελέτες δόσης-απόκρισης, καθώς και πρόσθετες πιλοτικές μελέτες με στόχο την χαρακτηρίζουν την πιθανή μηχανιστική δραστηριότητα πίσω από κάθε χτύπημα. Τελικά, τον έλεγχο του σχήματος μας (Εικόνα 1Α) σχεδιάστηκε για να ταυτοποιήσουν ενώσεις που αποδεικνύεται επαναλήψιμη, ισχυρό φαρμακολογία άξια ταχεία μετάφραση σε κλινικό περιβάλλον.

Α. Πειραματική χοάνη δοκιμές. Εγκεκριμένα φάρμακα εντοπίστηκαν και επανα-επιβεβαιώθηκε σε ένα μοντέλο διαλογής. Επισκέψεις δοκιμάσθηκαν περαιτέρω συμπληρωματικά μοντέλα, και η οποία χαρακτηρίζεται από μελέτες πιλοτικής φαρμακολογία. Β U87-MG Screening Model Design και χαρακτηρισμός. Σε πειράματα κλίμακα των δόσεων, το επίπεδο δόσης 5 mg /kg του temozolomide επιλέχθηκε ως μερικώς αποτελεσματική δόση που χρησιμοποιήθηκε σε επακόλουθες μελέτες συνδυασμού. Γ επισκόπηση Πρωτοβάθμια οθόνη. Οι αναλογίες κινδύνου των εγκεκριμένων φαρμάκων στην ανάλυση επιβίωσης (500 mm

3 όγκου βάρος αποκοπής) απεικονίζονται με τάξη. Οι εκτιμήσεις εμπιστοσύνη δύο όψεων που παρουσιάζεται, με σημαντικές επιτυχίες (Ν = 12, Πίνακας 1) επισημαίνονται με κόκκινο χρώμα. Δ Hit ανάλυση ρυθμού. Τα μεγέθη πειραματικά παρατηρηθεί ανάλυση επιβίωσης αποτέλεσμα (ιζ) συναρτήσει της chi-square κατανομή? το στατιστικό Kolmogorov-Smirnov επιβεβαιώνει τη μηδενική, ότι κάθε προέρχονται από την ίδια υποκείμενη κατανομή.

Η

Έχουμε δημιουργήσει ένα πρότυπο σύστημα και τη συλλογή ένωση να ερευνήσει ένα ευρύ φάσμα της φαρμακολογίας σε μια κλινικά σχετική ρύθμιση. Εστιάσαμε σε γλοιοβλάστωμα ως ασθένεια ρύθμιση με υψηλή ανικανοποίητες κλινική ανάγκη. πρωτεύουσα διαλογή μας διεξήχθη με τον U87-MG γλοιοβλαστώματος κυτταρική γραμμή που λαμβάνεται ανθρώπινου καρκίνου? ξενομοσχευμάτων αυτής της γραμμής αναπτύχθηκαν χρησιμοποιώντας θραύσμα όγκου μεθόδους σειριακό πέρασμα. Επιβεβαιώσαμε αυτό το μοντέλο ήταν ανταποκρίνεται σε ένα χημειοθεραπευτικό πρότυπο-of-care για γλοιοβλάστωμα? η τεμοζολομίδη φάρμακο αλκυλίωσης προκάλεσαν πλήρεις αποκρίσεις όγκου σε πλειονότητα των ζώων σε μια δόση 100 mg /kg. Με βάση τις μελέτες πριν από τη φαρμακολογία, σημειώνουμε το μοντέλο U87-MG φαίνεται σχετικά με τη θεραπεία πυρίμαχων: ανοίγματα επιτυγχάνεται κοντά στην πλήρη δόση απόκρισης (AUC

0-inf ~125 ug * hr /mL, τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται) πιθανόν υπέρβαση εκείνων που λαμβάνονται στον άνθρωπο, όταν μετά από τις πρότυπες κατευθυντήριες οδηγίες δοσολογίας (AUC

0-inf περίπου 20 ug * hr /mL).

Έχουμε συγκεντρώσει μια διαφοροποιημένη συλλογή ένωση για να δοκιμαστεί η πλειοψηφία των φαρμακολογικών μηχανισμών στόχαστρο σήμερα εγκεκριμένα φάρμακα. Οι περίπου 1200 συνταγογραφούμενα φάρμακα στοχεύουν πιθανόν όχι περισσότερα από 300 μοναδικά φαρμακολογικών μηχανισμών [15], [16] -Έχουμε εκτιμούν επιλεγμένη βιβλιοθήκη μας 182 ενώσεις ανακεφαλαιώνει περίπου 35% τοις εκατό της φαρμακολογίας στόχο την ανθρώπινη Φαρμακοποιία (μεθόδους). Σε πρακτική βάση, στηριχθήκαμε σε δημοσιευμένη βιβλιογραφία για να βοηθήσει επέλεξε επίπεδα δόσης και τα σκευάσματα φαρμάκων. Κυρίως, επιλέχθηκαν δοσολογία επίπεδα και οδούς χορήγησης για την απόκτηση εκθέσεις ναρκωτικών κοντά ή πέρα ​​από εκείνες που επιτυγχάνονται με τη χρήση δόσεων που έχουν μέγιστη ανεκτή σε ανθρώπους (Πίνακας S1 στο S1 αρχείου). Εν ολίγοις, ακολουθήσαμε ένα «άπληστο» στρατηγική, η οποία διερευνάται το πρώτο υπερ-φαρμακολογικές επιδράσεις στη λειτουργία ελέγχου, ακολουθούμενη από επικύρωση χτύπημα σε εκθέσεις πιο κοντά την κατάσταση στην καθημερινή κλινική χρήση.

Πολλά αξιοσημείωτα ευρήματα θα μπορούσαν να παρατηρηθούν κατά τη διάρκεια της πρωτοβάθμιας μας οθόνη αποτελεσματικότητα του 182 ένωσης που στο μοντέλο U87-MG (Σχήμα 1C, Πίνακας S1 στο S1 αρχείου). Κατ ‘αρχάς, με τη χρήση πειραματικών μεθόδων που ήταν τεχνικά εφικτό και εύλογο αποδοτικότερες, θα μπορούσαμε να παρατηρήσουμε ότι η τεμοζολομίδη και εγκεκριμένα φάρμακα έδειξαν συνδυασμό αποτελεσματικότητας κατά τη διάρκεια της σχετικά διαλογής υψηλής απόδοσης. Δώδεκα πρωτογενή επιτυχίες πιστοποιήθηκαν που καθυστέρησαν το χρόνο που απαιτείται για να επιτευχθεί ψηλαφητό φορτίο όγκου σε ζώα που υπέστησαν αγωγή (Πίνακας 1). Αυτές οι επιτυχίες επέδειξαν αποτελεσματικότητα σε συνδυασμό με την τεμοζολομίδη σε μεγάλο βαθμό συγκρίσιμο με αυτό που θα μπορούσε να επιτευχθεί με τον διπλασιασμό της θεραπευτικής δόσης της τεμοζολομίδης (Σχήμα 1C, Μέθοδοι). Τα αποτελέσματα ήταν επαναλήψιμα: σε 10 από 11 πειράματα, μια ιδιαίτερα δραστική δόση της τεμοζολομίδης (100 mg /kg) ήταν ιδιαίτερα σημαντικά διαφορετική από τη μέτρια δόση (5 mg /kg) που χρησιμοποιούνται στις εξετάσεις συνδυασμό, και έδειξε μέτρια στατιστική διάκριση στα υπόλοιπα μελέτη (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Είναι ενθαρρυντικό, τα γνωστά χημειοθεραπευτικά docetaxel ενώ ετοποσίδη έδειξε αποτελεσματικότητα σε συνδυασμό με τεμοζολομίδη (Πίνακας 1). Επίσης, το συνολικό πρωτογενές ποσοστό επιτυχίας (6,6%) δεν φαίνεται υπερβολικά υψηλή, γεγονός που θα μπορούσε να προτείνει ακατάλληλα αποτελέσματα λόγω των πειραματικών μεταβλητότητα. Την ίδια στιγμή, το ποσοστό επιτυχίας εμφανίστηκε αρκετά διαφορετική από το μηδέν, γεγονός που υποδηλώνει την προσέγγισή μας θα μπορούσε διακρίσεις χτυπήματα, ενώ δεν είναι υπερβολικά περιοριστική. Σε γενικές γραμμές, η κύρια οθόνη αναπροσανατολισμό μας επιβεβαιώνει μια αρκετά προβλέψιμη προσδοκία: το συνολικό ποσό, το οποίο εγκρίθηκε φάρμακα δεν προκαλούν αντικαρκινικά αποτελέσματα, ενώ μια μικρή συλλογή των φαρμάκων μπορεί να εμφανίζουν χρήσιμες φαρμακολογικές σε συνδυασμό με την κλασική χημειοθεραπεία (Σχήμα 1D)

Θα πραγματοποιηθεί μελέτες επιβεβαίωσης για 33 φάρμακα από την κύρια οθόνη που δεν ήταν γνωστά χημειοθεραπευτικά (Σχήμα S1). Οκτώ από έντεκα (73%) των υποψηφίων που επέδειξαν στατιστική σημασία εις την πρωτεύουσα διαλογή επιβεβαιώθηκαν σε μία δεύτερη δοκιμή. Εμείς διερωτήθηκε επίσης 22 επιπλέον φάρμακα τα οποία δεν δείχνουν σημασία αρχικά. Όπως αναμενόταν, λιγότερες (3 22? 14%) από αυτούς τους παράγοντες αποδεδειγμένη αποτελεσματικότητα στη δευτερογενή οθόνη αν ήταν αρνητικά στον πρωτογενή οθόνη, προτείνοντας έναν άλλο βαθμό επικύρωσης για πειραματική προσέγγιση μας. Ως πρόσθετο επιβεβαιωτική βήμα, δοσολογούνται οκτώ από τους πρωταρχικούς χτυπήματα απουσία τεμοζολομίδης (Σχήμα S1). Όπως μπορεί να αναμένεται, κανένα από αυτά τα ασφαλή φάρμακα έδειξαν πρωτογενές αντικαρκινικές επιδράσεις, και πάλι υποδηλώνει ότι η οθόνη μας αποκάλυψε τα νέα φάρμακα με πιθανές επιπτώσεις κατά του όγκου μόνο στο φόντο του προτύπου χημειοθεραπείας.

επικυρωθεί περαιτέρω 15 επιβεβαιώθηκε χτυπήματα σε δύο επιπλέον μοντέλα ξενομοσχεύματος: το μελάνωμα Α375 και SF295 γλοιοβλαστώματος ανθρώπινες γραμμές καρκίνου (Συμπληρωματικό Methods, Σχήμα 2). Έξι φάρμακα επέδειξε δραστικότητα σε μία από αυτές τις ορθογώνιες μοντέλα όταν χορηγήθηκε σε συνδυασμό με την τεμοζολομίδη. Εν ολίγοις, η στρατηγική ελέγχου μας φαίνεται να έχουν ανακαλύψει διάφορα φάρμακα που παρουσιάζουν

καλόπιστους

δραστηριότητα με την τεμοζολομίδη αλκυλιωτικό παράγοντα σε πολλούς τύπους όγκων.

Α. Hit επικύρωσης σε πρόσθετα μοντέλα. Επιλεγμένα πρωτογενή χτυπήματα οθόνη δοκιμάστηκαν σε συνδυασμό με υπο-αποτελεσματικές δόσεις τεμοζολομίδης σε ένα μοντέλο γλοιοβλαστώματος και ξενομοσχευμάτων μελανώματος μοντέλα. Για να εκτιμηθεί η φαρμακολογική δράση τερβιναφίνης είχε δόση δ.σ. το μοντέλο Α375 σε ένα διάστημα δόση πέντε φορές μεγαλύτερη από τη δόση έλεγχο της χορηγήθηκε με ε.π. διαδρομή. Στην πρωτοβάθμια συγκρίσεις οθόνη, ρισεδρονάτη ήταν σημαντική από την ανάλυση επιβίωσης σε ένα cut-off στα 1000 mm

3, αλλά δεν είναι 500 χιλιοστά

3. συνδυασμοί φαρμάκων Β Υπέρταση. Φάρμακα χορηγήθηκαν σε συνδυασμό στο μοντέλο U87-MG, στη δόση εις την πρωτεύουσα διαλογή, ή όπως υποδεικνύεται στο συμπληρωματικό υλικό. Επιδράσεις στην ανάπτυξη του όγκου αξιολογήθηκαν την ημέρα 20 της μελέτης. Μέσα δείχνεται συν SEM (Ν = 10)? candesartan και τεμοζολομίδη 100 mg /kg σημαντική από την M-ANOVA σ & lt?. 0.05

Η

Εφόσον με κάποιο βαθμό εμπιστοσύνης, επιδιώξαμε να χαρακτηριστούν περαιτέρω προκύπτουσα επιτυχίες μας. Λόγω της αμερόληπτη, εμπειρική φύση του, η οθόνη μας θα πρέπει να αποκαλύψει αντικαρκινικές επιδράσεις που προκαλούνται από μια ποικιλία παραγόντων. Πρώτον, ο συνδυασμός φαρμάκων θα μπορούσαν να ρυθμίζουν την ενδογενή δράση της τεμοζολομίδης, επηρεάζοντας είτε κύρια δραστηριότητα του DNA alkalation, ή τροποποιώντας επακόλουθη αποκρίσεις βλάβη του DNA, συμπεριλαμβανομένων διακοπή του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης. Παρομοίως, η τεμοζολομίδη και επαγόμενη αλκυλίωση DNA θα μπορούσε, σε μία neomorphic μόδα, μετατροπή σηματοδότηση που προκαλείται από ένα συνδυασμό των φαρμάκων σε νέα σήματα κυτταρικής ανάπτυξης ή κυτταρική επιβίωση. Επιπλέον, οποιαδήποτε και όλα αυτά τα σενάρια θα μπορούσαν να είναι το αποτέλεσμα είτε κύτταρο αυτόνομα ή μη-κυττάρου αυτόνομες διαδικασίες: οι δύο παράγοντες θα μπορούσαν να στοχεύουν από κοινού ένα απομονωμένο καρκινικό κύτταρο, ή να επάγει αυτοκρινή ή παρακρινή σηματοδότηση για να προκαλέσει τελικά μειωμένη ανάπτυξη του όγκου και την επιβίωση. Έχουμε διερευνηθούν κάποιες πιθανές μηχανισμούς της αποτελεσματικότητας για ένα υποψήφιο φάρμακο ενδιαφέροντος, η μπλοκέρ της αγγειοτασίνης-ΙΙ-υποδοχέα candesartan.

Κατ ‘αρχάς, θα αξιολογηθεί κατά πόσον η ταυτόχρονη χορήγηση της δόσης candesartan απλώς τροποποίησε τις πρωτογενείς φαρμακοκινητική της τεμοζολομίδης [17], [18 ]. Βρήκαμε candesartan δεν μετέβαλε σημαντικά τη βιοκατανομή τεμοζολομίδη σε διάφορους ιστούς, γεγονός που υποδηλώνει αυτό το αναπροσανατολισμό υποψήφιος δεν μεσολαβούν τα αποτελέσματά της μόνο μέσω αλληλεπιδράσεων μεταβολισμό των φαρμάκων (Πίνακας S2 στο αρχείο S1). Επιπλέον, ελέγξαμε εάν candesartan αύξησε άμεσα την κυτταρική τοξικότητα της τεμοζολομίδης σε καλλιεργημένα κύτταρα U87MG. Ένα σταθερό-αναλογία (1-προς-2.4) συνδυασμός χρησιμοποιήθηκε, ξεκινώντας από suprapharmacologic συγκεντρώσεις 40 μΜ temozolomide και 16,7 μΜ candesartan, αντίστοιχα. Σε αυτές τις συγκεντρώσεις, σημειώσαμε περιορίζεται

in-vitro

δραστικότητα του συνδυασμού candesartan και τεμοζολομίδη (Εικόνα S2), και ως εκ τούτου, γυρίσαμε πίσω στο

in-vivo

μοντέλα για να διερευνήσει τη φύση αυτής της φαρμακολογικής αλληλεπίδραση.

στη συνέχεια, αξιολογείται το πώς άλλα φάρμακα με παρόμοια φαρμακολογική μηχανισμοί θα εκτελέσει στο μοντέλο ελέγχου πρωτογενή U87MG. Είναι ενδιαφέρον, βρήκαμε ότι πολλαπλά αγγειοτενσίνης ΙΙ αναστολέα του υποδοχέα φαρμάκων ( «-artans») ήταν επίσης αποτελεσματικές σε συνδυασμό με την τεμοζολομίδη (Σχήμα 2β). Επιπλέον, επιπρόσθετα φάρμακα όπως η aliskerin αναστολέα ρενίνης, όπως επίσης και αναστολείς των διαύλων ασβεστίου (αμλοδιπίνη) και αναστολείς ΜΕΑ (εναλαπρίλη) εμφανίστηκε επίσης οριακά αποτελεσματικά. Τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν αρκετά ενδιαφέροντα συμπεράσματα: 1.) πρωτογενή αποτελέσματα οθόνη μας μπορεί να επιβεβαιωθεί με φάρμακα που δρουν με παρόμοιους μηχανισμούς δράσης 2.) ένας άγνωστος φαρμακοφόρο αντικείμενο πολλών ικριώματα αναστολέα της αγγειοτενσίνης-II-υποδοχέα μπορεί να κατέχει φαρμακολογία αντικαρκινικές 3.)

in-vivo

οθόνες μπορεί να αποκαλύψει συγκρότημα βιολογική δραστικότητα σε οδούς που μπορεί να ανασταλεί με ποικίλες φάρμακα.

Τέλος, εκτιμήσαμε αν ο συνδυασμός των candesartan /τεμοζολομίδης προκάλεσε τοξικότητα ειδικά σε καρκινικούς ιστούς, ή γενικότερα αλλάξει τη φαρμακολογική περιθώριο τεμοζολομίδη. Παρατηρήσαμε ότι, σε υψηλές δόσεις, candesartan συνδυασμό μειώθηκε λεμφοκυττάρων και του αριθμού των ερυθροκυττάρων? πρόκειται για δύο περιοριστική της δόσης οι ανεπιθύμητες ενέργειες που επηρεάζουν την εγκεκριμένη χρήση των τεμοζολομίδη σε ανθρώπους (Πίνακας S3 στο αρχείο S1). Επιπλέον, παρατηρήσαμε ότι το candesartan υψηλή δόση επιδεινώνεται απώλεια βάρους και άλλα εξασθενημένη συνταγματική σημάδια της υγείας σε ποντίκια όταν δοσολογείται σε συνδυασμό (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα). Τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν δύο συμπεράσματα. Πρώτον, ενώ η πρόσθετη αποτελεσματικότητα που παρέχεται από την προσθήκη του candesartan μπορεί να είναι επιθυμητό, ​​ο συνδυασμός θα μπορούσε επίσης να αυξήσει ανεπιθύμητα συμβάντα, με αποτέλεσμα ένα προφίλ κινδύνου-οφέλους σε μεγάλο βαθμό αμετάβλητο από μόνη της τεμοζολομίδης δοσολογίας. Δεύτερον, η μηχανιστική φαρμακολογία υποκείμενα τα αποτελέσματά μας είναι πιθανό συγκρότημα: candesartan μπορεί να τροποποιήσει τόσο εγγενή και εκκρίνονται παράγοντες που προκαλούν μειωμένη βιωσιμότητα τόσο ένα κύτταρο-αυτόνομες και μη κυττάρων αυτόνομα, μόδα, αυτό μπορεί να οδηγήσει σε στόχευση αναντίστοιχο του καρκίνου. Ενώ πέρα ​​από το πεδίο της έρευνας αναφέρουμε εδώ, είναι πιθανό ότι οι πρόσθετες προκλινικές μελέτες μπορεί να αποδειχθεί ότι η οθόνη μας αποκάλυψε μυθιστόρημα και επιθυμητό θεραπευτικό ευκαιρίες.

Ενώ η μηχανιστική μελέτη των επισκέψεων ελέγχου μας μπορεί να είναι χρήσιμο, θα μπορούσε επίσης να είναι προτιμότερο να επικυρώσει τους υποψηφίους απευθείας μέσω κλινικών δοκιμών. Για να μεταφράσετε γρήγορα τα ευρήματά μας, παρέμεινε απαιτούνται για να αποδειχθεί η αποτελεσματικότητα σε εκθέσεις του φαρμάκου πιο κοντά αυτό που επιτυγχάνεται στην καθημερινή ανθρώπινη χρήση. Χρησιμοποιήσαμε τα συνταγογράφηση ετικέτες για candesartan, την αντιμυκητιακή τερμπιναφίνη, και το risedrontate διφωσφονικά για να επιλέξετε μια σειρά από του στόματος δόσεις για τη δοκιμή του μοντέλου U87MG (μεθόδους). Σε σύγκριση με τις προσπάθειές μας σε διαλογή μέγιστες ανεκτές δόσεις, η αποτελεσματικότητα του καθενός από αυτά τα φάρμακα μειώθηκε σε ασήμαντα επίπεδα καθώς κάθε δοκιμάστηκε πιο κοντά στην ετικέτα εγκεκριμένη δόση-ισοδύναμα (Σχήμα 3). Σε γενικές γραμμές, αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι οι πρόσθετες μελέτες ασφάλειας, τόσο μόνος και ενδεχομένως σε συνδυασμό με την τεμοζολομίδη, απαιτούνται πριν από αυτά τα υποψήφια φάρμακα μπορούν να δοκιμάζονται σε ασθενείς με καρκίνο του ανθρώπου.

A. Το candesartan επιβεβαίωση εύρος δόσης στο μοντέλο U87-MG. Candesartan επιβεβαιώθηκε σε δόση εξέτασης της και τη διαδρομή? αποτελεσματικότητα μειώθηκε μετά από χορήγηση από το στόμα κοντά και κάτω από το δήλωσε δόση ισοδύναμη MTD των 14,3 mg /kg. Β Risedronate επιβεβαίωση εύρος δόσης. Risedronate εμφάνισε μέτρια αποτελέσματα συνδυασμού όταν χορηγείται από το στόμα σε 7,5 mg /kg, η οποία κοντά MHRDD δόση ισοδύναμο των 5 mg /kg (σε σύγκριση με αποτέλεσμα οθόνη στα 15 mg /kg, ε.π.). Η τάση της έκθεσης δόση ήταν μέτρια, και εμφανίστηκε ισοδύναμο σε δόσεις ελαφρώς κάτω από 5 mg /kg. Γ Τερβιναφίνη δόση επιβεβαίωση φάσμα. Τερβιναφίνη ελέγχθηκε με ε.π. διαχείριση. Η αποτελεσματικότητα μειώνεται ως φάρμακο χορηγήθηκε κάτω από την δόση ισοδύναμο 4 mg /kg του ανθρώπου. Ομάδα σημαίνει δείξει? ομάδα SEM δεν φαίνεται για λόγους σαφήνειας.

Η

Συζήτηση

Πολλά σημαντικά συμπεράσματα που προτείνεται από τις προσπάθειές μας για να ανακαλύψετε τους υποψηφίους αναπροσανατολισμό των ναρκωτικών στον καρκίνο. Πρώτον, παρά την πολυπλοκότητά τους, οι

in-vivo

μελέτες που διεξάγονται μπορεί να εντοπίσει πολλά νέα υποψήφια φάρμακα με διαλογή ανακάλυψη ευρεία βάση σε πολλές δεκάδες, αν όχι εκατοντάδες, των ενώσεων. Η hits έκθεμα φαρμακολογία που εμφανίζεται συνεπής και επαναλήψιμη σε πολλαπλά συστήματα μοντέλο, και μπορεί να προτείνει τις σχέσεις δομής-δραστικότητας και μονοπάτι που ήταν προηγουμένως άγνωστες και απροσδόκητες.

αρχή κίνητρό μας στην εκτέλεση άμεσων in-vivo, σε αντίθεση με την πρωτογενή διαλογής συνδυασμός των κυττάρων, ήταν να αποκαλύψει δραστηριότητες φαρμάκου σε συγκρότημα, πολυκύτταρους περιβάλλοντα που είναι δύσκολο να μοντέλο χρησιμοποιώντας in-vitro συστήματα. Είναι ενθαρρυντικό, σημειώνουμε ότι πρόσφατα, πρόσθετες ομάδες έχουν επιβεβαιώσει σε μεγάλο βαθμό τα ευρήματά μας σχετικά με την αλληλεπίδραση μεταξύ αναστολής της αγγειοτασίνης και χημειοθεραπεία. Οι συγγραφείς προτείνουν ένα σύμπλοκο λειτουργία-of-δράση που περιλαμβάνει αγγειογένεση σε συγκρότημα στρώματος του όγκου των ιστών [19]. Μια συνεχιζόμενη κλινική δοκιμή (NCT01821729) μπορεί να επιβεβαιώσει περαιτέρω το θεραπευτικό δυναμικό του συγκροτήματος φαρμακολογίας ανακαλύφθηκε στο οθόνες μας.

Παρά τα πλεονεκτήματα των οθονών in-vivo, σημειώνουμε επίσης διάφορες βασικές περιορισμούς. Το πιο σημαντικό, είναι δεδομένο ότι αναπροσανατολισμό οθόνες διαπιστώσετε φάρμακα τα οποία μπορεί να ελεγχθεί γρήγορα ως προς την αποτελεσματικότητα σε κλινικές δοκιμές. Μέχρι σήμερα, οι προσπάθειές μας απέδωσαν μόνο οι υποψήφιοι που θα απαιτήσει εκτεταμένες μελέτες προκλινικές και κλινικές ασφαλείας πριν την αποτελεσματικότητα θα μπορούσε να δοκιμαστεί σε ασθενείς. Ενώ αυτό μπορεί να φαίνεται να είναι το πιθανό αποτέλεσμα από το «άπληστο» πρωτογενή οθόνες μας που δοκιμάζονται σχεδόν μέγιστες ανεκτές δόσεις, επισημαίνουμε ένα αντίστροφο κίνδυνο: φαίνεται πιθανό ποσοστό επιτυχίας πρωτογενή οθόνη μας θα έχει μειωθεί σε ασήμαντα ή σχεδόν μηδενικά επίπεδα, είχαμε αξιολογούνται χαμηλότερες δόσεις αρχικά.

που λαμβάνονται στο πλαίσιο, προτείνουμε ότι η in-vivo αναπροσανατολισμό οθόνες στο βάθος της θεραπείας του καρκίνου μπορεί να είναι σχετικά πόρων-αναποτελεσματική. Ως υπόβαθρο, η μελέτη αυτή αντικατοπτρίζει το έργο πολλών μελών της ομάδας οι οποίοι συνέβαλαν σημαντικά οι προσπάθειες σε διάστημα περίπου 18 μηνών. Που λαμβάνονται από τη σκοπιά είτε δεσμευμένων κονδυλίων ή συλλογική προσπάθεια, το έργο που καταναλώνεται πόρους σε μεγάλο βαθμό ισοδύναμα με εκείνα που απαιτούνται για τη μετάβαση ενός ενιαίου, νέου φαρμάκου από προκλινικές μελέτες και κλινικές ασφάλειας σε μελέτες αποτελεσματικότητας σε ασθενείς με καρκίνο. Έχουμε ανακαλύψει νέα φαρμακολογία με πιθανή χρήση για την θεραπεία του καρκίνου, αλλά επίσης να αναγνωρίσουμε ότι η εξισορρόπηση της προσπάθειας και την αξία των αναπροσανατολισμό οθόνες έναντι άλλων ερευνητικών προτεραιοτήτων θα μπορούσε να αποδειχθεί δύσκολη σε όλη την ευρύτερη έρευνα για τον καρκίνο κοινότητας.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1.

Μονοθεραπεία αποτελεσματικότητα των υποψήφιων χτυπά σε U87-MG ξενομοσχεύματα. Οι ενώσεις χορηγήθηκαν στην ίδια δόση και οδό που χρησιμοποιείται κατά τη διάρκεια της πρωτογενούς οθόνη. μετρήσεις του όγκου αξιολογήθηκαν για την Ημέρα 16. μέσα του Ομίλου εμφανίζονται? σφάλμα είναι το SEM, Ν = 8-10

doi:. 10.1371 /journal.pone.0101708.s001

(PPTX)

Εικόνα S2.

μέτρια αποτελέσματα συνδυασμό τεμοζολομίδη και candesartan σε κύτταρα U87MG in-vitro. κύτταρα U87MG καλλιεργήθηκαν σε πρότυπες συνθήκες (ϋΜΕΜ με 10% FBS), και εκτέθηκαν για 72 ώρες με ενώσεις σε διάφορες συγκεντρώσεις. Η υψηλότερη συγκέντρωση του temozolomide που χρησιμοποιήθηκε ήταν 300 μΜ, τουλάχιστον το ένα πάνω από το μέσο καταγραφής θεραπευτικές συγκεντρώσεις παρατηρήθηκαν κατά τη διάρκεια κλινική χορήγηση. Το candesartan εξετάστηκε σε συγκέντρωση κυμαίνεται τόσο υψηλή όσο 16.7 μΜ, και πάλι πολύ πέρα ​​από τα ανοίγματα θεραπευτικό φάρμακο. Ενώσεις συνενώθηκαν σε μία σταθερή αναλογία 2,4 προς 1 (π.χ. 40 υΜ τεμοζολομίδη και 16,7 μΜ candesartan). Σισπλατίνη εργαζόταν ως ένωση κυτταροτοξική έλεγχο, σε συγκεντρώσεις που ξεκινούν από 100 μΜ. Η βιωσιμότητα των κυττάρων εκτιμήθηκε χρησιμοποιώντας χρωματομετρικές μεθόδους (MTS αναλύσεις). Η τεμοζολομίδη έδειξαν μικρές επιδράσεις βιωσιμότητα σε U87MG έως και 300 υΜ in-vitro. Η προσθήκη του candesartan έως 16,7 μΜ δεν ενίσχυσε ισχυρώς θεραπεία με έως και 40 μΜ τεμοζολομίδη, σε σύγκριση με τη σισπλατίνη, η οποία επάγεται εξέχουσα αναστολή της βιωσιμότητας των κυττάρων

doi:. 10.1371 /journal.pone.0101708.s002

( PPTX)

αρχείου S1.

Πίνακες S1-S3. Πίνακας S1. Φοίνιξ Βιβλιοθήκη του καρκίνου. Παρέχονται ως αρχείο Excel σε απευθείας σύνδεση συμπληρωματικό υλικό. Πίνακας S2. Μελέτες επιβεβαίωσης στο μοντέλο ξενομοσχεύματος U87MG. Ποντικοί που φέρουν U87-MG δοσολογήθηκαν με τεμοζολομίδη σε συνδυασμό με τους παράγοντες που απαριθμούνται. Ανάλυση επιβίωσης διεξήχθη όπως περιγράφεται? Οι μετρήσεις που παρέχονται για σύγκριση. Πίνακας S3. Αιμοποιητικών αλλαγές από το candesartan σε συνδυασμό με την τεμοζολομίδη. ποντίκια C57BLJ6 δοσολογήθηκαν με τεμοζολομίδη, με ή χωρίς candesartan στις δόσεις και τις οδούς που υποδεικνύεται. συλλέχθηκαν δείγματα αίματος για πλήρη ανάλυση αίματος καταμέτρηση αιματολογίας. Αμετάβλητο παράμετροι δεν εμφανίζονται? Οι κυτταρικοί πληθυσμοί που δείχνουν σημαντικές αλλαγές (με πλάγια γράμματα) σε πολλαπλές ομάδες δόσης φαίνεται παρακάτω. * P & lt? 0.05 με ANOVA, τεστ post-hoc Dunnett. Οι τιμές που παρουσιάζονται είναι μέσοι ομάδα (SEM), Ν = 10.

doi: 10.1371 /journal.pone.0101708.s003

(DOCX)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστήσω το ακόλουθα για εποικοδομητικές συζητήσεις και αποτιμώνται συμβουλή: Δρ. David Τουνγκ, ο Δρ Dean Welsch, ο Δρ Γκάρι DeCrescenzo και ο Δρ Reza Halse