Αφηρημένο

Ιστορικό

Σε γενικές γραμμές, γαστρικό πρόγνωση του καρκίνου παραμένει φτωχή. Λεπτομερή χαρακτηρισμό των μοριακών δεικτών που διέπουν γαστρικού παθογένεια του καρκίνου είναι δικαιολογημένη για τη δημιουργία καινοτόμων θεραπευτικών επιλογών. HIF-1α υπερέκφραση έχει συνδεθεί με κακή πρόγνωση του γαστρικού καρκίνου. Ωστόσο, αν και ερευνηθεί για χρόνια, ο προγνωστικός ρόλος του HIF-1α σε γαστρικό καρκίνο είναι ακόμα αμφιλεγόμενη. Ως εκ τούτου, ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν η ανάλυση των προγνωστικών τιμές του HIF-1α, TGF-β, VEGF και pERK1 /2 σε ασθενείς με καρκίνο του στομάχου μετά από γαστρεκτομή.

Μέθοδοι

Αυτή η μελέτη περιλαμβάνονται 446 ασθενείς με επιβεβαιωμένη γαστρικό καρκίνο οι οποίοι υποβλήθηκαν σε γαστρεκτομή σε ένα μόνο κέντρο κινεζική Cancer μεταξύ 2005 και 2006. κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά, καθώς και ανοσοϊστοχημική ανάλυση του TGF-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 προσδιορίστηκαν. Μακροπρόθεσμη επιβίωση αυτών των ασθενών αναλύθηκε χρησιμοποιώντας μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση.

Αποτελέσματα

HIF-1α υπερέκφραση ήταν πιο συχνή σε ασθενείς με ηπατικές μεταστάσεις (71,6% έναντι 43,0% στα άτομα χωρίς ηπατική μεταστάσεις,

P

= 0.000, χ

2 = 23.086) και πιο συχνή σε ασθενείς με περιτόναιο μετάσταση κοιλότητα (62,3% έναντι 43,0% στα άτομα χωρίς τέτοια μετάσταση,

P

= 0.000 , χ

2 = 13.691). Στην μονοπαραγοντική ανάλυση, οι ασθενείς με HIF-1α υπερέκφραση είχαν μικρότερη επιβίωση ελεύθερη νόσου (DFS) και τη συνολική επιβίωση (OS) από τους ασθενείς με αδύναμο-έκφραση (DFS: NA VS. 16,8 m,

P

= 0.000 , χ

2 = 74.937? OS: NA VS. 25,5 m,

P

= 0.000, χ

2 = 90.594). Είναι σημαντικό, HIF-1α υπερέκφραση ήταν μια πολλά υποσχόμενη προγνωστικός δείκτης για την κακή επιβίωση από πολυπαραγοντική ανάλυση (DFS: HR 2.766, 95% CI 2,136 έως 2,583,

P

= 0.000? OS: HR 3,529, 95% CI 2.663- 4.667,

P

= 0.000).

Συμπεράσματα

HIF-1α υπερέκφραση θα μπορούσε να θεωρηθεί ένα χρήσιμο ανεξάρτητο προγνωστικό βιοδείκτη στο γαστρικό καρκίνο μετά από γαστρεκτομή, και συσχετίζεται τόσο ένα κακή συνολική επιβίωση και την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε αυτούς τους ασθενείς. έκφραση του HIF-1α μπορεί να χρησιμοποιούνται για τη διαστρωμάτωση των ασθενών που διατρέχουν υψηλότερο κίνδυνο για κακή πρόγνωση, και είναι πιθανώς ένας σημαντικός θεραπευτικός στόχος σε ασθενείς με καρκίνο του στομάχου

Παράθεση:. Chen L, Shi Υ, Yuan J, Han Υ, Qin R, Wu Q, et al. (2014) HIF-1 άλφα υπερέκφραση συσχετίζεται με κακή συνολική επιβίωση και την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε γαστρικό Καρκινοπαθών μετά γαστρεκτομή. PLoS ONE 9 (3): e90678. doi: 10.1371 /journal.pone.0090678

Επιμέλεια: Ju-Seog Λι, του Πανεπιστημίου του Τέξας MD Anderson Cancer Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 15 Αυγούστου, 2013? Αποδεκτές: 3η Φεβρουαρίου, 2014? Δημοσιεύθηκε: 10 Μάρτη 2014

Copyright: © 2014 Chen et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Είμαστε ευγνώμων για όλα τα θέματα που συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη. Η μελέτη αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Ταμείο γιατρός του Απελευθερωτικού Στρατού Γενικό Νοσοκομείο Λαϊκό (10BCZ04). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Γαστρικό καρκίνο (GC) είναι μία από τις πιο κοινές κακοήθειες του κόσμου. Λόγω της έλλειψης συγκεκριμένων πρώιμα συμπτώματα ή αποτελεσματική καρκινικοί δείκτες, οι περισσότεροι ασθενείς με GC δεν διαγιγνώσκεται μέχρι προχωρημένα στάδια. Αν και έχει υπάρξει μεγάλη βελτίωση σε παραδοσιακές θεραπείες, η πρόγνωση παραμένει ανεπαρκής, και 30% έως 50% των ασθενών εμφανίζουν υποτροπή εντός 5 ετών από τη χειρουργική επέμβαση και επικουρική χημειοθεραπεία [1], [2]. Έτσι, είναι ζωτικής σημασίας για τον εντοπισμό συγκεκριμένων δεικτών και την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στρατηγικών για τις προηγμένες και υποτροπιάζοντα καρκίνο του στομάχου.

Η αγγειογένεση είναι ένας σημαντικός καθοριστικός παράγοντας της εξέλιξης του όγκου. Τοπική υποτροπή του όγκου και περιφερικό μετάσταση είναι και τα δύο εξαρτώνται από την νεοαγγείωση, η οποία ρυθμίζεται μέσω παράγοντες αγγειογένεσης. Αρκετοί από αυτούς τους παράγοντες έχουν βρεθεί να παίζουν ένα σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση της αγγειογένεσης των όγκων, και οι επάνω ρυθμίζονται ταυτόχρονα με την ταχεία ανάπτυξη και πρώιμη μετάσταση [3]. Ίσως η καλύτερα χαρακτηρισμένη δείκτες είναι αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF), υποξία διεγέρσιμο παράγοντα-1 άλφα (HIF-1α), εξωκυτταρικό κινάσες σήματος ρυθμιζόμενη (ERK) και μετασχηματιστικής ανάπτυξης παράγοντα β (ΤΟΡ-β) [4].

υποξία και ριζών οξυγόνου συνεργατικά προάγουν την αγγειογένεση των όγκων [5] και να προκαλέσει την ενεργοποίηση του HIF-1α, η οποία με τη σειρά της διεγείρει την έκφραση του VEGF [6], [7]. ΤΟΡ-β είναι επίσης ένας σημαντικός παράγοντας υπεύθυνος για την αυξημένη έκκριση VEGF. ERK είναι ένας καθοδικός τελεστής του μονοπατιού σηματοδότησης VEGF, η οποία ρυθμίζεται μέσω της αγγειογένεσης. Σαφώς, αυτές οι δείκτες συνυφασμένα ως μοριακά συστατικά της αγγειογένεσης. Υποθέσαμε ότι αυτές οι πορείες μπορεί να ευθύνονται για την εξέλιξη του όγκου και τη μετάσταση σε προχωρημένο καρκίνο του στομάχου.

Σε αυτή τη μελέτη, οι συσχετισμοί του ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 εκφράσεις με κλινικοπαθολογική παραμέτρους και την πρόγνωση αξιολογήθηκαν σε ασθενείς με καρκίνο του στομάχου. Επιπλέον, αξιολογήθηκαν η επιρροή αυτών των δεικτών για την επανάληψη και την μακρινή μετάσταση. Τα ευρήματα από την παρούσα μελέτη θα συμβάλει στην πρόβλεψη του κινδύνου υποτροπής και της μετάστασης του καρκίνου του στομάχου μετά από γαστρεκτομή, και να βοηθήσει τον οδηγό εξατομικευμένης θεραπείας και την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στόχων.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική δήλωση

Υπεγράφη ενημερωμένη συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες στη μελέτη και όλες οι κλινικές έρευνες διεξάγονται σύμφωνα με τις αρχές που ορίζονται στη Διακήρυξη του Ελσίνκι. πρωτόκολλα μελέτης εγκρίθηκαν από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review του Απελευθερωτικού Στρατού (PLA) του Γενικού Νοσοκομείου Κινεζικής Λαϊκής. Όλα τα δείγματα προέρχονται από την τράπεζα ιστών του Τμήματος Παθολογίας του PLA Γενικό Νοσοκομείο.

επιλογή των ασθενών και του σχεδιασμού της μελέτης

Ένα σύνολο 446 ασθενών με καρκίνο του στομάχου που υποβλήθηκαν σε γαστρεκτομή εντάχθηκαν σε αυτή τη μελέτη μεταξύ του Ιανουαρίου 2005 και Δεκεμβρίου 2006 σε κινεζικά PLA Γενικό Νοσοκομείο της (Κίνα, Πεκίνο). Όλοι οι ασθενείς είχαν υποβληθεί σε αρχική θεραπευτική γαστρεκτομή. Κανένας από τους ασθενείς έλαβαν χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία πριν την επέμβαση. Μόνο οι ασθενείς οι οποίοι είχαν επαρκή παραφίνη δείγματα ενσωματωμένα όγκου συμπεριλήφθηκαν και ασθενείς με καρκίνωμα αδενοχοληδωτό ή καρκίνωμα νευροενδοκρινικά αποκλείστηκαν. Οι ασθενείς που χάνεται κατά τη διάρκεια παρακολούθησης ή που έχασαν τη ζωή τους μέσα σε ένα χρόνο της χειρουργικής επέμβασης αποκλείστηκαν από την ανάλυση. Όγκου στάσης έγινε σύμφωνα με την έβδομη έκδοση της μεικτής επιτροπής Αμερικής για τον Καρκίνο /Διεθνής Ένωση Κέντρου Ελέγχου ΤΝΜ σταδιοποίηση εγχειρίδιο. Βλάβες ανέβηκε ως Ι έως ΙΙΙ χωρίς απόδειξη μεταστατικής νόσου είχαν συμπεριληφθεί.

Από τους ασθενείς που συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη, 348 (78,0%) ήταν άνδρες και 98 (22,0%) ήταν γυναίκες, με μέση ηλικία των 59,9 χρόνια (εύρος 22,9 έως 82,4 έτη). Ο μέσος χρόνος παρακολούθησης ήταν 63,9 μήνες (εύρος 55,0 έως 78,8 μήνες) μέχρι το τέλος της περιόδου παρακολούθησης (1, Αυγούστου του 2011). Οι κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των ασθενών που εξετάστηκαν συμπεριλαμβανομένου του φύλου, της ηλικίας, borrmann τύπο, το μέγεθος του όγκου, του όγκου ιστολογική μορφολογία, Lauren ταξινόμηση, τη διαφοροποίηση του όγκου (σύμφωνα με την ταξινόμηση του ΠΟΥ για γαστρικό καρκίνο το 2000), την κατηγορία Τ, Ν κατηγορία, ΤΝΜ στάδιο (ΤΝΜ έκδοση 7η από την αμερικανική μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο), αγγειακή εισβολή, περινευρικές εισβολή, τη λειτουργία και επικουρική χημειοθεραπεία. Κατά την ημερομηνία λήξης παρακολούθησης, 19,7% των ασθενών (88/446) είχαν ηπατικές μεταστάσεις και 29,1% (130/446) είχε περιτόναιο μετάσταση κοιλότητα. Τα κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των ασθενών συνοψίζονται στον πίνακα 1.

Η

Εν απουσία συμπτωμάτων, φυσικής εξέτασης εκτελέστηκε κάθε 3-6 μήνες για 5 συναπτά έτη. αξιολογήσεις Παρακολούθηση αποτελούνταν από φυσική εξέταση, μια γενική αίματος, δοκιμασίες ηπατικής λειτουργίας, πνευμονική, κοιλιακή και πυελική αξονική τομογραφία. Η ημερομηνία της πρώτης υποτροπής και η ημερομηνία του θανάτου καταγράφηκαν, και η επιβίωση υπολογίστηκε από το χρόνο της χειρουργικής επέμβασης μέχρι την τελευταία παρακολούθηση ή θανάτου από οποιαδήποτε αιτία. Ελεύθερη νόσου επιβίωση (DFS) προσδιορίστηκε ως η περίοδος μεταξύ της ημερομηνίας της χειρουργικής επέμβασης και της υποτροπής διάγνωση που λαμβάνονται από τις δοκιμές. Η συνολική επιβίωση (OS) ορίστηκε ως το χρονικό διάστημα σε μήνες μετριέται μεταξύ της ημερομηνίας της εκτομής και θανάτου για οποιαδήποτε αιτία.

Ιστός μικροσυστοιχιών (TMA) Κατασκευή

Για την κατασκευή TMA, φορμόλη σταθερό, δείγματα παραφίνη-ενσωματωμένες περιέχουν πρωτογενείς όγκους και σε συνδυασμό φυσιολογικό βλεννογόνο ανασύρθηκαν από τα αρχεία του Τμήματος Παθολογίας του νοσοκομείου μας. Αντιπροσωπευτικές περιοχές του ιστού καθορίστηκαν με μικροσκοπική επανεξέταση της Η &? Ε χρώση διαφάνειες, και πυρήνες διαμέτρου 1,0 πιπί διάτρητη από τα μπλοκ παραφίνης. Τρία πυρήνες από πρωτογενή καρκίνο και ένας πυρήνας από φυσιολογικούς ιστούς (ύψους τουλάχιστον 2 cm περιφερικά του όγκου) ήταν μαζεύτηκαν. TMAs δημιουργήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα χαρτομάντιλο Microarrayer (ALPHELYS, Minicore ιστών arrayer κεντρική μονάδα, Γαλλία). Όλα τα δείγματα εξετάστηκαν με τουλάχιστον δύο παθολόγους για την πρόληψη προκατάληψη. Όγκου και φυσιολογικών μορφολογία του βλεννογόνου στις συστοιχίες επικυρώθηκαν ως έχοντα υψηλή, σύμφωνα με ότι του συνόλου αρχειοθετημένων τμήμα

Ανοσοϊστοχημεία Χρώση

ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 έκφραση. ανιχνεύθηκαν στο TMAs εξής κιτρικό ρυθμιστικό (ρΗ 6,0) ανάκτηση αντιγόνου χρησιμοποιώντας πρότυπη μεθοδολογία. Τα δείγματα επωάστηκαν με πρωτογενές αντίσωμα έναντι του TGF-β (Rabbit πολυκλωνικό αντίσωμα, 1:150, Abcam), HIF-1α (Rabbit μονοκλωνικό αντίσωμα, 1:600, Epitomics), VEGF (Rabbit πολυκλωνικά, 1:150, Abcam) ή pERK1 /2 (Rabbit μονοκλωνικό αντίσωμα, 1:200, Cell Signaling), και στη συνέχεια επωάστηκαν με το δεύτερο αντίσωμα (Dako REALTM EnVison TM Ανίχνευση Syetem, Δανία). Τομές ιστού βάφτηκαν αντίθετα με αιματοξυλίνη Mayer του. Οι θετικοί μάρτυρες ήταν δείγματα από παθολογία τράπεζα δείγμα μας, ενώ αρνητικοί έλεγχοι ήταν πειραματικά δείγματα επωάστηκαν με ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο (PBS) αντί του πρωτογενούς αντισώματος.

Ανοσοϊστοχημική

εκτίμηση

Η ανοσοϊστοχημική χρώση αξιολογήθηκε ανεξάρτητα από δύο παθολόγους χωρίς τη γνώση των αποτελεσμάτων των ασθενών (διπλά τυφλή) ανάλογα με την περιοχή χρώσης και την ένταση [8] – [10]? η συμφωνία μεταξύ παρατηρητών ήταν & gt? 90%. Για να αποκτήσει ακριβείς απόψεις των όγκων, τρεις πυρήνες των αντιπροσωπευτικών περιοχών συλλέχθηκαν από πρωτογενή καρκίνο για μικροσυστοιχιών ιστού. Παθολόγοι αξιολογήθηκαν συνολικά ανοσοϊστοχημική χρώση των τριών πυρήνων, τότε παρέχεται ένα τελικό σκορ αντικατοπτρίζει τόσο το ποσοστό των θετικών κυττάρων και την ένταση του σήματος σε θετικά κύτταρα (σειρά H-0-12). Η ανοσοϊστοχημική σκορ εφαρμόστηκε όπως φαίνεται στον Πίνακα 2, με τη διάμεση τιμή H-score χρησιμοποιείται ως αποκοπής. Σύμφωνα με τα H-βαθμολογίες των ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2, κάθε ασθενής είχε ανατεθεί είτε στην ομάδα υπερέκφραση ή την ομάδα αδύναμους-έκφραση.

Η

Στατιστική ανάλυση

για την στατιστική ανάλυση, στατιστική Πακέτο για τις Κοινωνικές Επιστήμες (SPSS), έκδοση 19.0 χρησιμοποιήθηκε. Οι συσχετίσεις μεταξύ των εκφράσεων του ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 διερευνήθηκαν χρησιμοποιώντας τεστ rank Spearman, το συσχετίσεις μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών παραγόντων και την έκφραση του ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας Chi του Pearson -πλατεία δοκιμή ή Ακριβής δοκιμασία Fisher. Το ποσοστό επιβίωσης υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier, και μονοπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας δοκιμασία log-rank. Πολυπαραγοντική ανάλυση των προγνωστικών παραγόντων διεξήχθη από Cox μοντέλο αναλογικού κινδύνου?

P

& lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

TGF-β, HIF-1α, VEGF και pERK 1/2 εκφράσεις σε ασθενείς με καρκίνο του στομάχου

.

ΤΟΡ-β (Σχ. 1Α και 1Β) και VEGF (Σχ. 1 Ε και 1 F) διασπείρεται granularly εντός του κυτταροπλάσματος των καρκινικών κυττάρων, που εκφράζεται σε διάφορα επίπεδα (υποδεικνύεται με ένταση επίπεδο ανάπτυξης χρώματος). HIF-1α εκφράστηκε σε κύτταρο όγκου πυρήνες (Εικ. 1C και 1D). pERK1 /2 παρατηρήθηκε τόσο σε κυτόπλασμα και οι πυρήνες (Εικ. 1 G και 1 Η) των καρκινικών κυττάρων. Μεταξύ του συνόλου των 446 γαστρικού δειγμάτων καρκίνου, ΤΟΡ-β υπερέκφραση ανιχνεύθηκε σε 181 (40,6%), HIF-1α υπερέκφραση σε 217 (48,7%), υπερέκφραση του VEGF σε 194 (43,5%), και pERK υπερέκφραση σε 149 (34,3% ).

Α. Η ανοσοϊστοχημική χρώση του ΤΟΡ-β βρισκόταν κυρίως στο κυτταρόπλασμα των καρκινικών κυττάρων (θετική έκφραση × 400)? Β ΤΟΡ-β αρχική μεγέθυνση χ 100? Γ HIF-1α βρισκόταν κυρίως στον πυρήνα των κυττάρων του όγκου (θετική έκφραση × 400)? Δ HIF-1α αρχική μεγέθυνση χ 100? Ε VEGF βρισκόταν κυρίως στο κυτταρόπλασμα των καρκινικών κυττάρων (θετική έκφραση × 400)? ΣΤ VEGF αρχική μεγέθυνση × 100? Γ pERK1 /2 βρισκόταν στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα των καρκινικών κυττάρων (θετική έκφραση × 400)? Η pERK1 /2 αρχική μεγέθυνση × 100.

Η

Χρησιμοποιώντας τεστ κατάταξης Spearman, το συσχετίσεις μεταξύ των εκφράσεων του TGF-β, HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 διερευνήθηκαν. Υπάρχει σημαντική συσχέτιση μεταξύ της υπερέκφραση του οποιουδήποτε δύο από αυτές τις τέσσερις πρωτεΐνες (

P

& lt? 0,05).

συσχετίσεις μεταξύ TGF-β, HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 εκφράσεις και κλινικοπαθολογοανατομικές παράγοντες

οι συσχετίσεις μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών παραγόντων και την έκφραση του TGF-β, HIF-1α, VEGF και pERK1 /2 παρατηρήθηκαν χρησιμοποιώντας δοκιμασία Chi-Square Pearson ή ακριβής δοκιμασία του Fisher. Τα λεπτομερή χαρακτηριστικά φαίνονται στον Πίνακα 3 και Πίνακας 4. TGF-β υπερέκφραση ήταν πιο συχνή σε ασθενείς με περιτόναιο μετάσταση κοιλότητα (50,8% έναντι 36,4% στα άτομα χωρίς περιτόναιο μετάσταση κοιλότητα,

P

= 0,005, χ

2 = 7.895). HIF-1α υπερέκφραση ήταν πιο συχνή σε ασθενείς με ηπατικές μεταστάσεις (71,6% έναντι 43,0% στα άτομα χωρίς ηπατικές μεταστάσεις,

P

= 0.000, χ

2 = 23.086) και ήταν πιο συχνές σε ασθενείς με περιτόναιο κοιλότητα μετάσταση (62,3% έναντι 43,0% στα άτομα χωρίς περιτόναιο μετάσταση κοιλότητα,

P

= 0.000, χ

2 = 13.691).

Η

μονοπαραγοντική ανάλυση

Με τη μέθοδο Kaplan-Meier και τη δοκιμασία log-rank, συσχετίσεις μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών παράγοντες και την έκβαση των ασθενών αξιολογήθηκαν. Από τους 446 ασθενείς, οι 295 (66,1%) ανέπτυξε υποτροπή και /ή μετάσταση, και 263 (59,0%) έχασαν τη ζωή τους πριν από την ημερομηνία λήξης παρακολούθησης (1 Αυγούστου 2011). Η διάμεση DFS ήταν 28,1 μήνες και η διάμεση επιβίωση ήταν 40,2 μήνες. Τα ποσοστά επιβίωσης των 3 ετών και 5 ετών συνολικά ήταν 52% και 39%, αντίστοιχα.

Οι ευρέως αποδεκτές προγνωστικούς παράγοντες του τύπου borrmann, το μέγεθος του όγκου, ιστολογία του όγκου, Lauren τύπου, η διαφοροποίηση του όγκου, εισβολή σκάφος, περινευρικές εισβολή, την κατηγορία Τ, Ν κατηγορία, το στάδιο TNM και επικουρική χημειοθεραπεία συνδέθηκαν με DFS και OS σε γαστρικό καρκίνο μετά από γαστρεκτομή. Ηπατικών μεταστάσεων και του περιτοναίου μετάσταση κοιλότητα συσχετίστηκαν με OS σε γαστρικό καρκίνο μετά γαστρεκτομή. Οι ασθενείς που εμφανίζουν αδύναμη ΤΟΡ-β έκφραση είχαν μεγαλύτερη DFS από εκείνα που εμφανίζουν υπερέκφραση του ΤΟΡ-β, με μία

P

τιμή κοντά στο 0,05. Ωστόσο, καμία διαφορά στο OS παρατηρήθηκε (DFS: 36,4 m VS. 26,1 m,

P

= 0.053, χ

2 = 3.759, Tab 1, Σχήμα 2Α? OS:. 45,3 m VS. 36,6 m,

P

= 0.139, χ

2 = 2.187, Tab 1, Εικ. 3Α). Ασθενείς με HIF-1α αδύναμη έκφραση είχαν μεγαλύτερο χρόνο επιβίωσης από ό, τι τα άτομα με HIF-1α υπερ-έκφραση (DFS: NA VS. 16,8 m,

P

= 0.000, χ

2 = 74.937, Tab . 1, σχήμα 2Β? OS: NA VS. 25,5 m,

P

= 0.000, χ

2 = 90.594, Tab 1, Σχήμα 3Β).. Ασθενείς με pERK αδύναμη έκφραση είχε πλέον OS από τους ασθενείς με υπερέκφραση του pERK (DFS: 37.7 m VS. 19,8 m,

P

= 0,107, χ

2 = 2.595, Tab 1, Εικ . 2D? OS: 49.1 m VS. 27,8 m,

P

= 0,018, χ

2 = 5.594, Tab 1, Σχήμα 3D).. Ωστόσο, η έκφραση του VEGF δεν συσχετίστηκε με DFS και OS (

P

& gt?.. 0.1, Tab 1, Σχήμα 2C, Σχ 3C).

ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK 1/2 υπερέκφραση χωρίστηκαν σε μια ομάδα υπερέκφραση και μία ομάδα αδύναμη έκφραση. Μια δοκιμασία log-rank χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό σημασία. A. ελεύθερη νόσου επιβίωση καμπύλες στρωματοποιημένη κατά την έκφραση TGF-β (

P

= 0.053). Β ελεύθερη νόσου επιβίωση καμπύλες στρωματοποιημένη κατά την έκφραση του HIF-1α (

P

= 0.000). Γ ελεύθερη νόσου επιβίωση καμπύλες στρωματοποιημένη κατά την έκφραση του VEGF (

P

= 0.161). Δ ελεύθερη νόσου επιβίωση καμπύλες στρωματοποιημένη κατά pERK 1/2 έκφρασης (

P

= 0,107).

Η

TGF-β, HIF-1α, VEGF και pERK 1/2 υπερέκφραση χωρίστηκαν σε μια ομάδα υπερέκφραση και μία ομάδα αδύναμη έκφραση. Μια δοκιμασία log-rank χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό σημασία. A. Συνολικά καμπύλες επιβίωσης στρωματοποιημένη κατά την έκφραση TGF-β (

P

= 0.139). Β καμπύλες συνολική επιβίωση στρωματοποιημένη κατά την έκφραση του HIF-1α (

P

= 0.000). Γ καμπύλες συνολική επιβίωση στρωματοποιημένη κατά την έκφραση του VEGF (

P

= 0,217). Δ καμπύλες συνολική επιβίωση στρωματοποιημένη κατά pERK 1/2 έκφρασης (

P

= 0,018).

Η

Η πολυπαραγοντική ανάλυση

Παράμετροι με

P

τιμαί της ≤0.1 στην μονοπαραγοντική ανάλυση συμπεριλήφθηκαν στην πολυπαραγοντική ανάλυση με τη χρήση των αναλογικών κινδύνων κατά Cox. Τα αποτελέσματα συνοψίζονται στον Πίνακα 5. Τα αποτελέσματα από την αναλογικών κινδύνων κατά Cox μοντέλο χρησιμοποιώντας την προς τα πίσω κατά στάδια μέθοδο που υποδεικνύεται ότι HIF-1α υπερέκφραση ήταν ένα ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα στην πρόβλεψη DFS και OS. Ασθενείς με HIF-1α υπερέκφραση είχαν μικρότερη επιβίωση και υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής και θανάτου από τους ασθενείς με HIF-1α αδύναμο-έκφραση (DFS: HR 2.766, 95% CI 2,136 έως 2,583, P = 0.000? OS: HR 3,529, 95% CI 2,663 έως 4,667, P = 0,000, Πίνακας 5).

Η

Συζήτηση

μετάσταση παραμένει μια σημαντική αιτία της αποτυχίας της θεραπείας για τους ασθενείς με καρκίνο, και την αγγειογένεση είναι για να συμβεί μετάσταση. Στην δεκαετία του 1970, Folkman διαπίστωσαν ότι η ανάπτυξη του όγκου και τη μετάσταση εξαρτώνται από την αγγειογένεση, όταν το μέγεθος του όγκου υπερβαίνει 2-3 mm [7]. Παράγοντες που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την πρόβλεψη της μεταστατικό δυναμικό των καρκινικών ζητήθηκε ενεργά για αρκετές δεκαετίες. Το πιο σημαντικό εύρημα από την παρούσα μελέτη είναι ότι ο ΤΟΡ-β, ο HIF-1α, VEGF και pERK, όλα τα προ-αγγειογόνος και αγγειογόνοι παράγοντες που βρίσκονται μέσα συμπαγών όγκων και μέχρι ρυθμίζονται σε κακοήθεια, συνδέονται με κακή πρόγνωση με την εξέλιξη της νόσου [11] – [ ,,,0],. 12], [4]

Η υποξία είναι ένα από τα πιο σημαντικά περιβαλλοντικούς παράγοντες που επάγουν τον καρκίνο της μετάστασης [13] – [17]. Κάθε βήμα της μεταστατικής διαδικασίας, από την αρχική επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση (ΕΜΤ) στον τελικό organotropic αποικισμό, μπορεί ενδεχομένως να ρυθμίζεται από υποξία, υποδηλώνοντας ένα ρόλο κύριο ρυθμιστή για υποξία και HIFs σε μετάσταση. Επιπλέον, η διαμόρφωση του καρκίνου των βλαστικών κυττάρων αυτο-ανανέωση με HIFs μπορεί επίσης να συνεισφέρει στο πρόγραμμα μετάσταση υποξία ρυθμίζεται [15]. HIF-1α ρυθμίζει δύο μεταγραφικών παραγόντων και τροποποιητών της χρωματίνης να προκαλέσει μετάσταση σε ένα EMT-εξαρτώμενη ή ανεξάρτητη από τον τρόπο. Επιπλέον, διάφορα στόχους ρυθμίζεται από HIF-1α που διαμεσολαβούν άλλες βιολογικές επιδράσεις όπως ο μεταβολισμός θα μπορούσε επίσης να συμβάλλει στην μετάσταση [16]. έκφραση του HIF-1α συσχετίζεται με κακή προγνωστική κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά και επιβίωση σε διάφορους καρκίνους [18]. Σε μια ανάλυση του παγκρέατος αδενοκαρκίνωμα, Wei

et al

διαπίστωσε ότι η υποξία προάγει σημαντικά τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση, με αποτέλεσμα την μετάσταση τόσο

in vitro

και

in vivo

[17] . Wang

κ.ά.

εξέτασε τον πιθανό ρόλο για HIF-1α και HIF-2α κατά τη διαδικασία της διεισδυτικότητας και της μετάστασης του καρκίνου του στομάχου κατά τη διάρκεια της υποξίας, με τη συμμετοχή της οδού σήματος JNK. Τα αποτελέσματά τους έδειξαν ότι HIF-1α και HIF-2α ήταν περισσότερο εντόνως εκφρασμένο σε μεταστατικούς γαστρικών καρκίνων σε σύγκριση με μη-μεταστατικά καρκινώματα [19], υποδεικνύοντας ότι HIF-1α είναι πιθανόν ένας σημαντικός καθοριστικός παράγοντας της εισβολής και της μετάστασης σε αρκετούς τύπους όγκων.

στην πραγματικότητα, η στοχευμένη αναστολή της HIF-1α έχει δειχθεί ότι αναστέλλει την ανάπτυξη των γαστρικών όγκων σε ζώα [20], [21]. Επιπλέον, η προγνωστική ρόλος του HIF-1α σε γαστρικού όγκου είχαν αναζητηθεί σε πολλές δοκιμές. Ωστόσο, αν και ερευνηθεί για χρόνια, ο προγνωστικός ρόλος της υποξίας-διεγέρσιμο παράγοντα 1 άλφα (HIF-1α) σε γαστρικό καρκίνο είναι ακόμα αμφιλεγόμενη. Σε μια μετα-ανάλυση που πραγματοποιήθηκε από τον Zhang et al. [22], με τη συμμετοχή 12 μελέτες (1.555 ασθενείς), αναφέρθηκε ότι ο HIF-1α έκφραση συσχετίστηκε σημαντικά με κακή συνολική επιβίωση των ασθενών με καρκίνο του στομάχου (HR = 1,34, 95% CI: 1,13 – 1,58?

P

= 0,0009), αλλά όχι με την κακή ασθένεια ελεύθερη επιβίωση των ασθενών με γαστρικό καρκίνο (HR = 1,67, 95% CI: 0,99 – 2,82?

P

= 0,06). Αυτό είναι και το σημείο όπου η καινοτομία της τρέχουσας χειρογράφου μας γίνεται εμφανής. Από τις 12 μελέτες που αποτέλεσαν τη βάση της προαναφερθείσας μετα-ανάλυση, το μεγαλύτερο μέγεθος του δείγματος ήταν 216 [22]. Το μέγεθος του δείγματος στη μελέτη μας ήταν 446 ασθενείς. Ως εκ τούτου, η παρούσα μελέτη είναι η μεγαλύτερη μέγεθος του δείγματος στην οποία αξιολογήθηκε συσχέτιση του HIF-1α και πρόγνωση του καρκίνου του στομάχου. μονοπαραγοντική ανάλυση μας αποκάλυψε ότι οι ασθενείς με HIF-1α υπερέκφραση είχε τόσο μικρότερη ελεύθερη νόσου επιβίωση (DFS) και τη συνολική επιβίωση (OS) από τους ασθενείς με αδύναμο-έκφραση. Είναι σημαντικό, HIF-1α υπερέκφραση ήταν επίσης ένα ελπιδοφόρο προγνωστικός δείκτης για την κακή επιβίωση από πολυπαραγοντική. Αυτό έρχεται σε πλήρη αντίθεση με τη σύναψη της προαναφερθείσας μετα-ανάλυση [22], όπου δεν είχε σχέση με DFS. Ως εκ τούτου, η μελέτη μας δείχνει για πρώτη φορά ότι HIF-1α υπερέκφραση συσχετίζεται όχι μόνο OS, αλλά και DFS, σε ασθενείς με γαστρικό καρκίνο. Μέσω της ορθολογικής παρέκταση μια τέτοια διαπίστωση θα έρθει στην εξίσωση, όταν θα αξιολογηθεί καινοτόμες θεραπείες που στοχεύουν HIF-1α.

Στην παρούσα μελέτη, η αυξημένη υπερέκφραση του HIF-1α παρατηρήθηκε σε ασθενείς GC με περιτοναίου μετάσταση κοιλότητα. Τα αποτελέσματα αυτά συμφωνούν με προηγούμενες μελέτες βασικής έρευνας. Χρησιμοποιώντας

in vivo

μεταστατικό μοντέλα, Miyake

κ.ά.

παρέχεται ένα πιθανό μηχανισμό με τον οποίο περιτοναϊκή διάχυση του γαστρικού καρκίνου αναπτύσσεται μέσω ενός αγγειακού δικτύου, σύμφωνα με την οποία HIF-1α ενεργοποιεί αγγειογένεσης όγκου [23]. Matsuo

κ.ά.

έδειξε ότι η έκφραση του HIF-1α συσχετίστηκε σημαντικά με την υψηλή συχνότητα εμφάνισης ηπατικών μεταστάσεων σε πόρου αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος [24]. Shimomura

et al

αναλύονται οι ασθενείς που υποβλήθηκαν σε θεραπευτική εκτομή και διαπίστωσε ότι η υπερέκφραση του HIF-1α ήταν ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου ορθοκολικού μετάσταση στο ήπαρ [25]. Στην εργασία παρουσιάζονται εδώ, αυξήθηκε η υπερέκφραση του HIF-1α παρατηρήθηκε σε ασθενείς GC με ηπατικές μεταστάσεις, με αποτέλεσμα σύμφωνα με τις παραπάνω μελέτες δείχνουν μια στενή σύνδεση μεταξύ της HIF-1α και μετάσταση στο ήπαρ.

Πολλές μελέτες δείχνουν ότι ο TGF -β σηματοδότησης μπορεί να δράσει είτε ως υποκινητή όγκου ή ένα ογκοκατασταλτικό. Ορισμένοι ερευνητές έχουν διερευνηθεί ο ρόλος του ΤΟΡ-β1 στον καρκίνο του πνεύμονα, βρίσκοντας σε ασθενείς ότι ο ΤΟΡ-β προβλεπόμενη φτωχή απομακρυσμένη μετάσταση επιβίωση χωρίς (ΒΔΜ) και των φτωχών μετάσταση εγκεφάλου μετά από προσαρμογή για άλλους παράγοντες. Βρήκαν επίσης σε καλλιέργεια που επιμόλυνση με ΤΟΡ-β που διεγείρεται μετανάστευση και εισβολή του καρκίνου του πνεύμονα κυττάρων, γεγονός που υποδηλώνει ότι ο ΤΟΡ-β μπορεί να εμπλέκεται στην αύξηση της μεταστατικό δυναμικό [26], [27], [14]. Επιπλέον, τα καρκινικά κύτταρα που υπερεκφράζουν ενεργού ΤΟΡ-β αυξημένη μεταστατική ικανότητα, και η στόχευση του ΤΟΡ-σηματοδότηση απέτρεψε μετάσταση σε διάφορους καρκίνους όπως του μαστού και του προστάτη [28] – [30]. Άλλοι έχουν προτείνει ότι ο TGF-β πρωτεϊνικά επίπεδα θα μπορούσαν να προβλέψουμε ανεξάρτητα επιβίωση σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα [27], [31]. Σε αυτές τις μελέτες, ο ΤΟΡ-β έκφραση σε πρωτογενείς ιστούς καρκίνου του πνεύμονα ήταν υψηλότερη μεταξύ των ασθενών με πνευμονικές μεταστάσεις από ό, τι σε ασθενείς χωρίς τέτοια μεταστάσεις. Πρόσθετες εργασίες έχει ερευνήσει διαφορές στο ΤΟΡ-β επίπεδα και την ένωσή τους με ορθοκολικό καρκίνο (CRC) εξέλιξη, βρίσκοντας ότι ο ΤΟΡ-β επίπεδα σε αυτό το πλαίσιο είναι ένα ισχυρό προγνωστικό παράγοντα υποτροπής της νόσου [32], [33]. Στον καρκίνο του στομάχου, του Comerci

et al

διαπίστωσε ότι εκκρίνεται TGF-β1 μπορεί να προωθήσει έμμεσα την εξέλιξη του όγκου [34]. Ottaviano

κ.ά.

έδειξε ότι ο TGF-β1 με τη μεσολάβηση αλληλοπαρεμβολές μεταξύ γαστρικού καρκινικά κύτταρα και στρωματικά στοιχεία επηρέασαν κύτταρο επιφανειακά και περικυτταρική μήτρα αποικοδόμησης δυναμικού

in vitro

[35]. Fu

κ.ά.

ανέφεραν ότι ΤΟΡ-προώθησε σημαντικά την εισβολή και τη μετάσταση των κυτταρικών γραμμών γαστρικού καρκίνου SGC7901 και BGC823 αυξάνοντας fascin1 έκφραση μέσω των οδών σηματοδότησης ERK και JNK [36]. Επιπλέον, Ma

κ.ά.

κατέληξε στο συμπέρασμα ότι η έκκριση του TGF-β και από τα δύο καρκινικά κύτταρα και στρωματικά θα μπορούσε να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη και τη συντήρηση του μικροπεριβάλλον του όγκου [37]. Οι ερευνητές εξέτασαν επίσης τους ανθρώπινους ιστούς με πρώιμο καρκίνο του στομάχου (EGC) και προχωρημένο γαστρικό καρκίνο (AGC). Θετική χρώση για την ενδοκυτταρική μορφή του ΤΟΡ-β βρέθηκε σε 59,1% του EGC, και 66.7% των δειγμάτων AGC. Αντίθετα, δεν υπήρχε διαφορά στην έκφραση του TGF-β σε σχέση με το ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού (

Hp

) μόλυνσης, ταξινόμηση ή λεμφικό συμμετοχή κόμβο της Lauren. Επιπλέον, κλινικές μελέτες έδειξαν την θετική συσχέτιση της έκφρασης ΤΟΡ-β με λεμφαδένα μετάσταση και φτωχή πρόγνωση σε γαστρικό καρκίνωμα [38], [39]. Παρόμοια με τα αποτελέσματα που έχουμε βρει στην παρούσα μελέτη ότι ο TGF-β υπερέκφραση ήταν πιο συχνή σε ασθενείς με περιτόναιο κοιλότητα μετάσταση από ότι σε ασθενείς χωρίς τέτοια μετάσταση. Ασθενείς με ΤΟΡ-β υπερέκφραση είχε μικρότερη ελεύθερη νόσου χρόνο επιβίωσης από εκείνους με ΤΟΡ-β-αδύναμη έκφραση στο μονοπαραγοντική ανάλυση, ενώ αποκλείστηκε από την πολυπαραγοντική ανάλυση. Ως εκ τούτου, τα ευρήματά μας υποδηλώνουν ότι ο TGF-β μπορεί να διευκολύνει τη μετάσταση του καρκίνου, αλλά δεν αποτελεί ανεξάρτητο παράγοντα.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι ένας περιορισμός αυτής της μελέτης είναι ότι τα στοιχεία που χρησιμοποιήθηκαν ήταν περιορισμένη και εκ των υστέρων. Περαιτέρω έρευνα θα είναι σημαντικό να κατανοήσουν καλύτερα τη σχέση μεταξύ των παραπάνω δεικτών και την επιβίωση.

Συμπεράσματα

Η δουλειά μας εδώ δείχνει ότι η υπερέκφραση του HIF-1α μπορεί να είναι ένας σημαντικός δείκτης της κακής πρόγνωσης σε γαστρική καρκίνο μετά από γαστρεκτομή. Αν και θα χρειαστούν περαιτέρω εργασίες για την επικύρωση των συμπερασμάτων αυτών σε κλινικό περιβάλλον, HIF-1α υπερέκφραση συσχετίζονται καλά με ηπατικές μεταστάσεις και του περιτοναίου μετάσταση κοιλότητας σε ασθενείς με GC. Επιπλέον, περαιτέρω έρευνα για τη σχέση μεταξύ αντιαγγειογόνο θεραπεία και μετάσταση του καρκίνου του στομάχου μπορεί να παρέχει πρόσθετες πιθανοί στόχοι φαρμάκων, με αποτέλεσμα θεραπείες που μπορεί να ενισχύσει τα κλινικά οφέλη του αντί-αγγειογόνο θεραπεία.