Αφηρημένο

Η μετάσταση και η αντίσταση του φαρμάκου είναι σημαντικότερα εμπόδια για τη θεραπεία του μη-μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC). Για να διερευνήσουν νέες θεραπευτικές επιλογές, μπορούμε έγκλειστα επιτυχία microRNA-34α (miR-34a), ένας ισχυρός ενδογενής ογκοκατασταλτικό στον NSCLC σε S6 απταμερούς-συζευγμένο δενδριμερούς να σχηματίσουν νανοσωματίδια παράδοσης γονιδίου καρκίνο του πνεύμονα στοχευμένες (ΡΑΜ-Ap /pMiR-34α ΣΔ) . PAM-Ap /pMiR-34α NPs είχε διάμετρο 100-200 nm και το δυναμικό Ζήτα του ~ 30 mV σε εφαρμοζόμενες αναλογία Ν /Ρ. Η σύζευξη απταμερές βελτίωσε σημαντικά την κυτταρική πρόσληψη, καθώς και γονίδιο αποτελεσματικότητα επιμόλυνσης του PAM-Ap /pMiR-34α NPs σε καλλιεργημένα κύτταρα NSCLC. Δείξαμε ότι PAM-Ap /pMiR-34α ΣΔ ενισχυμένη τη ρύθμιση των στοχευμένων γονιδίων, BCL-2 και p53

in vitro

. Επιπλέον, αποκάλυψε PAM-Ap /pMiR-34α NPs ανέστειλε σημαντικά την κυτταρική ανάπτυξη, μετανάστευση, εισβολή και απόπτωση που επάγεται από τον καρκίνο του πνεύμονα κυττάρων σε σύγκριση με μη-στοχευμένες ΣΔ. Η μέθοδος παρέχεται μια νέα θεραπευτική στρατηγική για την πειραματική θεραπεία του NSCLC

Παράθεση:. Wang Η, Zhao Χ, Guo C, D Ρεν, Zhao Υ, Xiao W, et al. (2015) Απταμερές-Δενδριμερές βιοσυζυγών για στοχευμένη παράδοση του miR-34a πλασμίδιο που εκφράζει και αντικαρκινικές επιδράσεις σε μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα κύτταρα. PLoS ONE 10 (9): e0139136. doi: 10.1371 /journal.pone.0139136

Επιμέλεια: Valentin Cena, Universidad de Castilla-La Mancha, Ισπανία

Ελήφθη: 5 Μαΐου 2015? Αποδεκτές: 8 Σεπτεμβρίου του 2015? Δημοσιεύθηκε: 25 Σεπτεμβρίου 2015

Copyright: © 2015 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. η έρευνα υποστηρίχθηκε από Επιστήμης και Τεχνολογίας σχέδιο Ανάπτυξης του έργου της επαρχίας Shandong (2013WS0273). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του πνεύμονα είναι η κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο σχετίζονται με όλο τον κόσμο [1]. Περίπου το 85% όλων των κλινικών περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα είναι μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) [2, 3]. Παρά τις πολυάριθμες προόδους στη χειρουργική θεραπεία, χημειοθεραπεία και μοριακή στοχευμένη παράγοντες για NSCLC, μετάσταση και η αντίσταση σε πολλά φάρμακα εξακολουθούν να είναι σημαντικές αιτίες για τις αποτυχίες στη θεραπεία ασθενών με καρκίνο του πνεύμονα [4, 5]. Έτσι, είναι πολύ επιθυμητό να αναπτυχθούν νέες θεραπευτικές προσεγγίσεις πέραν συμβατική θεραπεία για NSCLC. Τα microRNAs (miRNAs) έχουν δειχθεί ότι παίζει σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη των ανθρώπινων καρκίνων και μπορεί να είναι αποτελεσματική στόχοι για τη θεραπεία του καρκίνου [6]. MiRNAs είναι μικρά RNAs των ~ μήκος 22 νουκλεοτιδίων που είναι κρίσιμη ρυθμιστές της γονιδιακής έκφρασης [7]. mRNA στόχου Ώριμη miRNAs σε συμπληρωματικές θέσεις, η οποία οδηγεί σε υποβάθμιση του mRNA και της μεταφράσεως καταστολή [8, 9]. Ανάμεσα σε περισσότερα από 700 ανθρώπινα miRNAs εντοπιστεί, miR-34a είναι ένας μεταγραφικός στόχος της καταστολής όγκου p53 [10], και κάτω-ρυθμιζόμενη έκφραση του miR-34a συσχετίζονται με υψηλή πιθανότητα υποτροπής σε ασθενείς με ΜΜΚΠ [11]. Επιπλέον, η υπερέκφραση του miR-34a αναστέλλει την ανάπτυξη και μετάσταση του NSCLC ρυθμίζοντας αρκετές καταστολείς όγκων ή ογκογονίδια, όπως το ρ53, BCL-2, c-Met και CDK4 [12]. Προηγούμενες εκθέσεις αποκάλυψαν ότι η υπερέκφραση του miR-34a θα μπορούσε να εμποδίσει την πρόοδο και την μετάσταση των NSCLC, καθώς και την ενίσχυση της ευαισθησίας σε χημειοθεραπεία.

Η ανάπτυξη θεραπευτικών miRNA με βάση έχει γίνει μια πολλά υποσχόμενη εναλλακτική στρατηγική για την συμβατική θεραπεία, συμπεριλαμβανομένης χημειοθεραπείας και ακτινοθεραπείας για την αγωγή NSCLC. Ωστόσο, η κλινική εφαρμογή των miRNAs αντιμετωπίζει πολλές βιολογικές προκλήσεις, όπως η ταχεία κάθαρση του αίματος, η κακή σταθερότητα στον ορό και η ανεπαρκής κυτταρική πρόσληψη [13]. Συστήματα παράδοσης νανο-στόχευση όγκου έχουν αναπτυχθεί για να ξεπεραστούν αυτά τα προβλήματα [14, 15]. Οι Gene-φορτωμένο nanocomplexes θεωρείται ότι είναι μια καλύτερη τακτοποίηση για τη θεραπεία του καρκίνου, λόγω του παθητικού συσσώρευσή τους σε συμπαγείς όγκους με ενισχυμένη διαπερατότητα τους και κατακράτησης (EPR) ιδιότητες των ταχέως αναπτυσσόμενους όγκους [16]. Η ενεργοποίηση των πολυμερών με ειδικά προσδέματα κυττάρων-στόχευσης μπορεί να ενισχύσει τη συσσώρευση όγκου τους περισσότερο από EPR επίδραση [17], η οποία βελτιώνει την αποτελεσματικότητα της επιμόλυνσης και βιοσυμβατότητα αυτών των γονιδιακών-φορτωμένο nanocomplexes.

πολυαμιδοαμίνης (ΡΑΜΑΜ) είναι κατιονικών με δενδριτικά δομή. Μέσω ηλεκτροστατικών αλληλεπιδράσεων, ΡΑΜΑΜ και αρνητικά φορτισμένα nanocomplexes μορφή ρϋΝΑ τα οποία χρησιμοποιούνται ευρέως ως φορείς γονιδιακής μη-ιικά για την επιμόλυνση εξωγενές DNA ή RNA σε κύτταρα [18]. Είναι σημαντικό ότι, το μόριο βάρος και η πυκνότητα φορτίου του ΡΑΜΑΜ μπορεί εύκολα να υφίστανται χειρισμό για να έχουν ανώτερη ασφάλεια. Μέχρι σήμερα, έχουν ταυτοποιηθεί μία ευρεία ποικιλία δυνητικών βιολογικών δεικτών για καρκίνο του πνεύμονα, όπως EGFR, ΤΡ53, CA-125 και CEA, αλλά η απουσία ειδικότητας και ευαισθησίας ήταν ακόμα ένα πρόβλημα στην πρακτική της στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων [19].

τα απταμερή είναι σύντομες, μονόκλωνα ολιγονουκλεοτίδια (DNA ή RNA) που επιλέγεται από διαδικασία SELEX (συστηματική εξέλιξη προσδεμάτων δι ‘εκθετικού εμπλουτισμού). Σε σύγκριση με τα αντισώματα, τα πλεονεκτήματα της απταμερών είναι διακριτές, όπως εύκολη σύνθεση και τροποποίηση, υψηλή συγγένεια και ειδικότητα με τα μόρια στόχους, χαμηλή ανοσογονικότητα, μικρότερη τοξικότητα, μεγαλύτερη σταθερότητα και διείσδυση ταχεία ιστών [20, 21]. Ως εκ τούτου, απταμερούς-συζευγμένο nanocomplexes μπορεί να παραδώσει ολιγονουκλεοτίδια με ειδικό τρόπο κυτταρικό τύπο με τη βελτιωμένη αποτελεσματικότητα επιμόλυνσης και /ή μειωμένες παρενέργειες στα φυσιολογικά κύτταρα [22]. Αρκετές κυττάρου-ειδικό απταμερή έχουν χρησιμοποιηθεί για απελευθέρωση γονιδίου, αλλά ένα απταμερές-συζευγμένο Νανοσυγκρότημα που χρησιμοποιούνται στη θεραπεία του NSCLC είναι περιορισμένη. Στην εργασία μας, έχουμε αναπτύξει σύνδεση ΡΑΜΑΜ-PEG-απταμερούς (ΡΑΜ-Ap) χρησιμοποιώντας S6, ένα απταμερές επιλέγεται κατά του καρκίνου του πνεύμονα Α549 κύτταρα από κύτταρο-SELEX [23] και εξέδωσε για να ενεργοποιήσουμε ΡΑΜΑΜ G5.0, τότε θα αναμιχθεί το PAM- ap με pMiR-34α για την κατασκευή νανοσωματιδίων PAM-ap /pMiR-34α (ΡΑΜ-ap /pMiR-34α ΣΔ) για να παραδώσει ρϋΝΑ σε καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα. Στη συνέχεια θα αξιολογηθεί το γονίδιο επιμόλυνση της αποτελεσματικότητας και αντικαρκινική δράση του ΡΑΜ-Ap /pMiR-34α ΣΔ σε κύτταρα Α549. Τα στοιχεία μας δείχνουν το σύστημα βιοσυζεύκτες-δενδριμερές Απταμερές είναι ένας αποτελεσματικός τρόπος για να παραδώσει το miR-34a εκφράζει πλασμίδιο με μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα κυττάρων.

Υλικά και Μέθοδοι

Υλικά