Αφηρημένο

Ιστορικό

Με βάση το δυναμικό των ενώσεων Schiff βάση για να δράσει ως πηγές για την ανάπτυξη του καρκίνου με χημειοθεραπευτικούς παράγοντες, αυτό το

in vivo

μελέτη διεξήχθη για να ερευνήσει τις ανασταλτικές ιδιότητες των συνθετικών Schiff βάσης ένωση Cu (BrHAP)

2 επί του κόλου παρεκκλίνουσα κρυπτικές εστίες (ACF).

Μεθοδολογία

Αυτή η μελέτη αφορούσε πέντε ομάδες αρσενικών αρουραίων. Η ομάδα αρνητικού ελέγχου εγχύθηκε με φυσιολογικό ορό μία φορά την εβδομάδα για 2 εβδομάδες και τροφοδοτείται 10% Tween 20 για 10 εβδομάδες, η ομάδα ελέγχου του καρκίνου εγχύθηκε υποδόρια με 15 mg /kg αζοξυμεθάνιο μία φορά την εβδομάδα για δύο διαδοχικές εβδομάδες, η ομάδα θετικού ελέγχου εγχύθηκε με 15 mg /kg αζοξυμεθάνιο μία φορά την εβδομάδα για δύο διαδοχικές εβδομάδες και 35 mg /kg 5-φθοριοουρακίλη (ένεση ενδο-περιτοναϊκώς) για 4 εβδομάδες, και οι πειραματικές ομάδες είχαν πρώτα ένεση με /kg αζοξυμεθάνιο 15 mg μία φορά την εβδομάδα για δύο συνεχόμενες εβδομάδες και στη συνέχεια τροφοδοτείται 2,5 ή 5 mg /kg της βασικής ένωσης Schiff μία φορά την ημέρα για 10 εβδομάδες. Εφαρμογή της βασικής ένωσης Schiff κατέστειλε σύνολο του κόλου σχηματισμός ACF έως και 72% έως 74% (

P

& lt? 0,05) σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου. Ανάλυση του παχέος δειγμάτων αποκάλυψε ότι οι θεραπείες με την ένωση βάσης Schiff μείωσε τις μέσες κρύπτη βαθμολογίες σε αρουραίους αζοξυμεθάνιο-θεραπεία. Παρατηρήθηκαν επίσης σημαντικές αυξήσεις της υπεροξειδική δισμουτάση, γλουταθειόνη υπεροξειδάση και δραστηριότητες καταλάσης και μείωση του επιπέδου των μηλονοδιαλδεΰδης. Ιστολογικά, όλες οι ομάδες θεραπείας εμφάνισαν σημαντικές μειώσεις στην δυσπλασία σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου (

P

& lt? 0,05). Ανοσοϊστοχημική χρώση αποδεικνύεται κάτω ρύθμιση της πρωτεΐνης PCNA. συγκριτική ανάλυση western blot αποκάλυψε ότι η COX-2 και Bcl2 ήταν μέχρι ρυθμιζόμενα και Bax ήταν κάτω-ρυθμίζονται σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου ΑΟΜ.

Συμπέρασμα

Η τρέχουσα μελέτη κατέδειξε ότι ο Cu (BrHAP )

2 ένωση έχει πολλά υποσχόμενη χημειοπροστατευτικής δραστηριότητες που αποδεικνύεται από σημαντικές μειώσεις στον αριθμό των ACFs σε αζοξυμεθάνιο που προκαλείται από τον καρκίνο του παχέος εντέρου

Παράθεση:. Hajrezaie Μ, Hassandarvish P, Moghadamtousi SZ, Gwaram NS, Golbabapour S , NajiHussien A, et al. (2014) Χημειοαποτρεπτική Αξιολόγηση της παράγωγης βάσης Schiff χαλκού (II) Συγκρότημα κατά αζοξυμεθάνιο-προκληθέντα καρκίνο του παχέος εντέρου σε αρουραίους. PLoS ONE 9 (3): e91246. doi: 10.1371 /journal.pone.0091246

Επιμέλεια: Ασράφ Β Abdel-Ναΐμ, Τμήμα Φαρμακευτικής, Πανεπιστήμιο Ain Shams, την Αίγυπτο

Ελήφθη: 10 Οκτ 2013? Αποδεκτές: 10η Φεβρουαρίου 2014? Δημοσιεύθηκε: 11 Μαρτίου του 2014

Copyright: © 2014 Hajrezaie et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς θα ήθελα να ευχαριστήσω το Πανεπιστήμιο της Μαλαισίας για την υποστήριξη αυτού του PV069-2012A του έργου, και HIR-Mohe (F000009-21001) από το Υπουργείο Ανώτατης Εκπαίδευσης της Μαλαισίας. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ορθοκολικό καρκίνο, επίσης γνωστή ως καρκίνο του παχέος εντέρου, μπορεί να περιλαμβάνουν μη φυσιολογική όγκων στο παράρτημα, του παχέος εντέρου και του ορθού και είναι μεταξύ των τριών πλέον διαδεδομένες μορφές καρκίνου [1]. Παρά τη σημαντική έρευνα και την πρόοδο σχετικά με την πρόληψη και τη θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου, σημαντική καταστολή των όγκων εξακολουθεί σπάνια επιτυγχάνεται, και θεραπεία με γνωστούς παράγοντες μπορούν να οδηγήσουν σε εξέλιξη του όγκου σε ορισμένες περιπτώσεις [2]. Η ανίχνευση και θεραπεία του καρκίνου του παχέος εντέρου πρώιμου σταδίου με την κατάλληλη παράγοντες διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στη μείωση του αριθμού των θυμάτων παχέος καρκίνο [3]. Η (ΑΟΜ) μοντέλο αζοξυμεθάνιο του πειραματικού καρκίνου του παχέος εντέρου μιμείται τις εκτεταμένες μοριακές, κλινικά και ιστολογικά χαρακτηριστικά του ανθρώπινου καρκίνου του παχέος εντέρου [4]. Η ένωση αζοξυμεθάνιο (μεθυλ-μεθυλιμινο-oxidoazanium) είναι ένα οξείδιο του azomethane (μοριακός τύπος C

2Η

6Ν

2O) και χρησιμοποιείται συνήθως για την πρόκληση καρκίνου του παχέος εντέρου σε πειραματικά μοντέλα [5], [6] .

Μεταλλικά συγκροτήματα έχουν χρησιμοποιηθεί εκτενώς στη φαρμακολογία για αιώνες [7], [8]. Η ανάπτυξη των φαρμάκων με βάση μέταλλο έχει προωθηθεί από σημαντικές επιτυχίες που έχουν επιτευχθεί με βάση την πλατίνα αντικαρκινικών παραγόντων, όπως η οξαλιπλατίνη, σισπλατίνη και καρβοπλατίνη. Εντούτοις, η αγωγή με φάρμακα με βάση την πλατίνα συνδέεται συνήθως με την εξέλιξη της αντίστασης στα φάρμακα και σοβαρές παρενέργειες κατά τη διάρκεια των διαδικασιών της θεραπείας [9]. Ο χαλκός είναι καλά γνωστό ότι είναι ζωτικής σημασίας για την επιβίωση κατιόν κύτταρο, το οποίο παίζει σημαντικό ρόλο ως συμπαράγοντας μερικών μεταλλοενζύμων. Ο χαλκός έχει ένα εξαιρετικό υποψήφιο για τη θεραπεία του καρκίνου από το 1960 [10]. Η οξειδωτική φύση και βιο-δραστικότητα του χαλκού σε ανθρώπους έχει προσελκύσει ανόργανα χημικούς για την αντιμετώπιση των φαρμακολογικές εφαρμογές του χαλκού (II) [11], [12]. Αυτοί οι τύποι των μετάλλων με το μοναδικό χαρακτήρα του επανενεργοποίησης με δι-οξυγόνου που χρησιμοποιείται στο σύστημα του οργανισμού μετά διέρχεται από τα εντερικά τοιχώματα [13]. Λόγω των δυνατοτήτων τους για διάσπαση του DNA μέσω οξειδωτικής ή υδρολυτική μηχανισμών και ισχυρές αλληλεπιδράσεις με το DNA μέσω παρεμβολής ή επιφάνεια ενώσεις, χαλκού (II) σύμπλοκα με ετεροκυκλικές βάσεις έχουν ευρέως διερευνηθεί [14]. βάσεις Schiff είναι μια αξιοσημείωτη τάξη ενώσεων με σημαντικό δυναμικό κατά του έλκους [15], αντιβακτηριακή, αντιμυκητιακή [16], [17], αντι-διαβητικό [18], κατά του όγκου [19] – [23], αντι-πολλαπλασιαστική [24 ], [25] και αντι-φλεγμονώδεις δραστηριότητες [26], [27].

Schiff βάσης προερχόμενο χαλκού (II) σύμπλοκα έχουν ισχυρή αντι-πολλαπλασιαστική, γαστροπροστατευτικά και αντιβακτηριακή δυναμικό λόγω των ιδιοτήτων του μετάλλου τους κέντρα ή συντονίζουν συνδέτες τους, οι οποίες σχετίζονται με την ηλεκτρονική και τις διαρθρωτικές χαρακτηρισμούς που αποδίδονται σε συντονισμό τους [15]. Η παρούσα μελέτη σχεδιάστηκε για να διερευνήσει την ανασταλτική επίδραση του χαλκού (II) σύμπλοκο προέρχεται από Ν, Ν’-διμεθυλο αιθυλενοδιαμίνη και το 2-υδροξυακετοφαινόνη βάση Schiff συνδέτη Cu (BrHAP)

2 έναντι ΑΟΜ-επαγόμενης καρκινογένεσης του παχέος εντέρου σε αρουραίους σε σχέση με την επίπτωση των ACF.

Υλικά και Μέθοδοι

χημικά

Για αυτό το πείραμα, η καρκινογόνος χημική του αζοξυμεθάνιο (ΑΟΜ) αγοράστηκε από Sigma Aldrich (St . Louis, ΜΟ, USA), και 5-φθοριοουρακίλη, καρκίνος του παχέος εντέρου θετική αναφορά, αγοράστηκε από την Calbiochem (San Diego, CA, USA).

Σύνθεση συμπλόκου

Ο χαλκός σύμπλοκο συντέθηκε όπως περιγράφεται προηγουμένως σε ένα δημοσιευμένο άρθρο [15]. Αυτό Cu (BrHAP)

2 Schiff βάσης ένωση επιτεύχθηκε από το Τμήμα Χημείας της Σχολής Θετικών Επιστημών του Πανεπιστημίου Malaya.

Ηθικά ζητήματα

Το πρωτόκολλο για τη μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας για πειράματα σε ζώα από την Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου της Μαλαισίας, Μαλαισία (ηθική Νο μμ /27/07/2010 /ΜΑΑ (R)). Τα ζώα φροντίζονται σύμφωνα με τα κριτήρια της Εθνικής Ακαδημίας Επιστημών Οδηγός για τη Φροντίδα και Χρήση των Ζώων Εργαστηρίου [28], [29].

Οξεία τοξικότητα αξιολόγηση

Για να καταδειχθεί η την ασφάλεια της χρήσης του

2 πολύπλοκη, 36 υγιείς θηλυκούς και αρσενικούς αρουραίους (ζύγιζαν μεταξύ 150-180 g) Cu (BrHAP) που λαμβάνεται από τη Βουλή των ζώων της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Μαλαισίας, Κουάλα Λουμπούρ, υποβλήθηκε οξεία τοξικότητα ανάλυση. Οι αρουραίοι χωρίζονται στις ακόλουθες τρεις ομάδες: μια ομάδα ελέγχου του οχήματος, μια ομάδα που έλαβαν 100 mg /kg χαλκού (II) σύμπλοκο, και μια ομάδα που έλαβε 2000 mg /kg χαλκού (II) σύμπλοκο [15]. Μετά από ολονύκτια νηστεία, οι αρουραίοι τρέφονται του χαλκού (II) σύμπλοκο και στη συνέχεια παρατηρήθηκαν κάθε δύο ώρες πάνω από 24 ώρες, και οποιαδήποτε συμπτώματα τοξικότητας καταγράφηκαν. Η θνησιμότητα καταγράφηκε κατά τη διάρκεια των 14 ημερών του πειράματος. Μετά θανατώθηκαν οι αρουραίοι, το αίμα και τα όργανα συλλέχθηκαν για βιοχημικές, αιματολογικές και ιστολογικές αναλύσεις.

Αξιολόγηση της χημειοπροληπτική επίδραση του χαλκού (II) σύμπλοκο

Αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley ελήφθησαν από την η Βουλή των ζώων της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Μαλαισίας. παρατηρήθηκαν διεθνείς αρχές και τους τοπικούς κανονισμούς σχετικά με τη φροντίδα και τη χρήση αυτών των πειραματόζωων. Οι αρουραίοι σταθμισμένη περίπου 180-200 γραμμάρια και ελήφθησαν κατά προσέγγιση ηλικία των 6-8 εβδομάδων. Τα ζώα διατηρήθηκαν κάτω από ελεγχόμενες συνθήκες σε θερμοκρασία δωματίου (22-24 ° C) και 50-60% υγρασία σε ένα κύκλο φωτός-σκότους 12 ώρες με ελεύθερη πρόσβαση σε τυπική δίαιτα και νερό. Τα ζώα εγκλιματίστηκαν στις τυποποιημένες εργαστηριακές συνθήκες για μια περίοδο δύο εβδομάδων πριν από την έναρξη ενός πειράματος

Τριάντα έξι αρσενικοί αρουραίοι ενήλικος χωρίστηκαν τυχαία στις ακόλουθες πέντε ομάδες από έξι αρουραίους η κάθε μία:. Ένα αρνητικό έλεγχο ομάδα (αυτές οι αρουραίοι έλαβαν υποδόριες ενέσεις φυσιολογικού ορού και χορηγήθηκαν από το στόμα 10% Tween 20 κάθε μέρα για 10 εβδομάδες), μια ομάδα ελέγχου του καρκίνου (αυτοί οι αρουραίοι έλαβαν υποδόριες ενέσεις των 15 mg /kg ΑΟΜ μία φορά την εβδομάδα για δύο συνεχόμενες εβδομάδες. αυτά χορηγήθηκαν από του στόματος με 10% Tween 20 (5 mL /kg) ημερησίως), μια ομάδα θετικού ελέγχου (αυτοί οι αρουραίοι έλαβαν υποδόριες ενέσεις των 15 mg /kg ΑΟΜ μία φορά την εβδομάδα για δύο διαδοχικές εβδομάδες και ακολούθησε με ενδο-περιτοναϊκή ενέσεις 35 mg /kg 5-φθοριοουρακίλη για 4 εβδομάδες) και δύο ομάδες θεραπείας (αυτοί οι αρουραίοι έλαβαν την πρώτη υποδόριες ενέσεις 15 mg /kg ΑΟΜ μία φορά την εβδομάδα για δύο συνεχόμενες εβδομάδες και από του στόματος χορήγηση του Cu (BrHAP)

2 Schiff βασικής ένωσης σε δόσεις 2,5 mg /kg ή 5 mg /kg για 10 εβδομάδες) [5]. Κατά τη διάρκεια των πειραμάτων, τα ποντίκια ζυγίστηκαν και παρατηρούνται καθημερινά για σημάδια τοξικότητας.

Η βαθμολόγηση των φυσιολογικών κρυπτών

Για την καταγραφή της επίπτωσης της ACF, οι θέσεις και οι αριθμοί των κρυπτών καταγράφηκαν 10 εβδομάδων μετά η τελευταία ένεση ΑΟΜ. Για να γίνει αυτό, οι αρουραίοι θανατώθηκαν με μία μεγάλη δόση ξυλαζίνης και κεταμίνης αναισθησία, και παχύ έντερο τους εκχυλίστηκαν και ξεπλένονται με ψυχρό ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο διάλυμα (PBS) και στη συνέχεια άνοιξε διαμήκως από τον πρωκτό έως το ορθό. Για τοπογραφική ανάλυση, 0,2% μπλε μεθυλενίου χρησιμοποιήθηκε για τη χρώση του παχέος εντέρου, και το παχύ έντερο παρατηρήθηκε βλεννογόνου πλευρά με ένα ανατομικό μικροσκόπιο Nikon. Το σκορ ACF υπολογίστηκε με βάση τον αριθμό των μη-φυσιολογικών κρυπτών εστίες, οι οποίες είναι γνωστές ως εστίες που περιέχουν περισσότερες από δύο μη-φυσιολογικών κρυπτών. προσδιορίστηκαν ο αριθμός των ACF ανά παχέος εντέρου και του αριθμού των φυσιολογικών κρυπτών σε κάθε εστίαση.

Η ιστολογική ταξινόμηση των ACFs

ρυθμιστικό διάλυμα φορμόλης (10%) χρησιμοποιήθηκε για να διορθώσετε τα δείγματα του παχέος εντέρου μετά από μεταποίηση σε μια παραφίνη μηχανή ιστού επεξεργασίας (Leica, Germany). Οι ιστοί στη συνέχεια ενσωματώνονται σε μπλοκ παραφίνης και κόβονται σε 5-μm τμήματα. Οι τομές χρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη και ηωσίνη (Η &? Ε) και παρατηρήθηκαν με μικροσκόπιο φωτός (Nikon, Ιαπωνία)

Ανοσοϊστοχημεία

Μετά την θέρμανση των διαφανειών τμήμα ιστού σε θερμό αέρα. φούρνο για 25 λεπτά στους 60 ° C, ξυλόλιο και αλκοόλη χρησιμοποιήθηκαν για να απο-παραφίνη από και ενυδάτωση των ιστών, αντίστοιχα, το οποίο στη συνέχεια ανοσοϊστοχημικά χρωματίζονται σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (DakoCytomation, USA). Ένα μπλοκ υπεροξειδάσης χρησιμοποιήθηκε για να εμποδίσει ενδογενούς υπεροξειδάσης (0,03% υπεροξείδιο του υδρογόνου που περιέχει αζίδιο νατρίου) και μετά από έκπλυση με ρυθμιστικό διάλυμα έκπλυσης, οι πλάκες επωάστηκαν με PCNA αραιωμένο ποντικού (1:200, Cat: ab2426) μονοκλωνικό αντίσωμα, το οποίο παρέχεται από η Abcam Εταιρείας. Επαρκείς ποσότητες στρεπταβιδίνης-HRP επωάστηκαν με τα τμήματα για 15 λεπτά. Μετά από πλύση απαλά με ρυθμιστικό διάλυμα έκπλυσης, οι τομές επωάστηκαν με DAB-υποστρώματος-χρωμογόνο για 5 λεπτά και στη συνέχεια χρωματίζονται με αιματοξυλίνη για 5 sec. Στη συνέχεια βυθίζεται σε αμμωνία 10 φορές και πλένεται με απεσταγμένο νερό, και τα πλακίδια τοποθετήθηκαν με μια καλυπτρίδα. Τα θετικά δείγματα εμφανίζεται ένα καστανό χρώμα κάτω από ένα μικροσκόπιο φωτός. Ο δείκτης σήμανσης PCNA (ΡΙ) μετρήθηκε ως η [(αριθμός των θετικών κυττάρων) /(συνολικός αριθμός των επιθηλιακών κυττάρων)] Χ 100 για κάθε πεδίο. Αυτές οι τιμές PI για όλα τα διαφορετικά τμήματα του παχέος εντέρου των αρουραίων που ανήκουν σε παρόμοιες ομάδες ήταν τότε ο μέσος όρος.

Western Blot αναλύσεις

Μετά τη θανάτωση των αρουραίων, ο ιστός κόλου συλλέχθηκε, και να αναλύσει πρωτεΐνη έκφραση μέσω της ανάλυσης κηλίδος Western, οι πρωτεΐνες εκχυλίστηκαν χρησιμοποιώντας ρυθμιστικό εκχύλισης πρωτεΐνης (Pierce, USA), και το υπερκείμενο υποβλήθηκε σε δοκιμασίες κηλίδος Western.

Εν συντομία, εκχυλίζεται πρωτεΐνες (30 μg) διαχωρίστηκαν σε 10% επίλυση πηκτές πολυακρυλαμιδίου (δηλαδή, SDS-PAGE) και ηλεκτροστυπώθηκαν (25 mA επί 2 ώρες). Εκχυλίσματα πρωτεΐνες μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες PVDF (Pierce, USA) χρησιμοποιώντας ένα Trans-Blot SD ημι-ξηρό κύτταρο μεταφοράς (Bio-Rad, USA) σε 15 V, 95 mA, για 1 ώρα, στη συνέχεια η μεμβράνη PVDF αποκλείστηκε χρησιμοποιώντας Blocker καζεΐνη ( Pierce, USA) για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου και πλύθηκε δύο φορές χρησιμοποιώντας TBST. Μετά από επώαση όλη τη νύκτα σε θερμοκρασία δωματίου με ειδικά πρωτογενή αντισώματα (β-ακτίνη 1:10000 (Cat: ab6276), Βαχ 1:1000 (Cat: ab7977), Bcl-2 1:1000 (Cat: ab183656) και COX-2 1: 1000 (Cat: ab15191), τα στυπώματα επωάστηκαν για 2 ώρες με τα κατάλληλα δευτερεύοντα αντισώματα υπεροξειδάση συζευγμένο, και την επακόλουθη ανίχνευση πραγματοποιήθηκε με φιλμ ΧΟΜΑΤ μέσω ενισχυμένης χημειοφωταύγειας οι xerograms ψηφιοποιήθηκαν με σαρωτή Epson, και οι εντάσεις ζώνης ποσοτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας. IP γέλη εργαστήριο.

Αντιοξειδωτικές δραστηριότητες των ομογενοποιημάτων κόλον

Μετά την έκπλυση των δειγμάτων ιστού του κόλου με παγωμένο αλατούχο διάλυμα, ένα ομογενοποίημα (10% β /ο) παρασκευάστηκε σε παγωμένο 50 mM φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα (ρΗ 7.4) που περιέχει ένα κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης θηλαστικών και φυγοκεντρήθηκε στα 10.000 χ g για 30 λεπτά στους 4 ° C. στη συνέχεια, το υπερκείμενο χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση των δραστηριοτήτων της καταλάσης (CAT), γλουταθειόνη υπεροξειδάσης (GPX), και υπεροξειδική δισμουτάση (SOD) και ένζυμα για δοκιμασία MDA. Τα κιτ παρασχέθηκαν από Cayman Chemical Co. (Michigan, USA).

Στατιστικές αναλύσεις

Πρόβλεψη Λογισμικό Ανάλυσης (PASW) έκδοση 18 χρησιμοποιήθηκε να αναλύσει τα δεδομένα αυτής της μελέτης. Τα πειραματικά δεδομένα αναλύθηκαν με μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ΑΝΟνΑ) ακολουθούμενη από δοκιμασία post-hoc κατά Tukey. Τα δεδομένα που εμφανίζονται ως το μέσο ± το (πρότυπο σφάλμα του μέσου όρου) S.E.M. Το επίπεδο σημαντικότητας ορίστηκε στο

P

& lt?. 0.05

Αποτελέσματα

Οξεία τοξικότητα μελέτη

Όπως αναφέρεται σε προηγούμενα δημοσιευμένο άρθρο μας, με την εφαρμογή του χαλκού (II) Schiff ένωση βάσης παράγεται κανένα σημάδι της αιματολογίας, βιοχημικές ανωμαλία ορού, ή ηπατική ή νεφρική τοξικότητα. Έτσι, το συγκρότημα αυτό φαίνεται να είναι ασφαλής για χρήση [13].

βάρη του σώματος και τη βιοχημεία ορού αναλύσεις της chemopreventive δυναμικό του Cu (BrHAP)

2

Δεν υπάρχουν σημαντικές διαφορές ήταν παρατηρήθηκαν σε σωματικά βάρη των αρουραίων σε όλες τις ομάδες (Πίνακας 1). Οι πίνακες 2 και 3 απεικονίζουν το βιοχημεία αναλύσεις ορού του αίματος που συλλέγονται από τα χαραγμένου ζώα για την εξέταση των παραμέτρων της ηπατικής και νεφρικής λειτουργίας σε σύγκριση με τις ομάδες των οχημάτων τους.

Η

Η

ACF συχνότητα

Η ποσοτικοποίηση του όγκου αναλύσεις των κόλον που βάφτηκαν με μπλε του μεθυλενίου αμέσως μετά τη θυσία συνοψίζονται στον πίνακα 4. Το Σχήμα S1 εμφανίζει τοπογραφικές απόψεις των μεθυλενίου μπλε χρώση ιστών κόλον των διαφόρων ομάδων. ACFs διακρίθηκαν από τα γύρω φυσιολογικό κρύπτες από αυξημένη μεγέθη τους, η αυξημένη απόσταση από το έλασμα στο βασικό επιφάνειες των κυττάρων, και τα εύκολα διακριτό pericryptal ζώνες. Δεν μικροσκοπικές αλλαγές παρατηρήθηκαν στην κανονική ομάδα ελέγχου, και ένας σημαντικά μεγαλύτερος αριθμός ACFs καταγράφηκαν στην ομάδα ελέγχου του καρκίνου. Οι ομάδες που έλαβαν το σύμπλοκο χαλκού (II) παρουσίασαν σημαντικές μειώσεις του αριθμού των ACF (72,2% και 74,7%?

σ

& lt? 0,05). Η κατανομή των ACFs στην ομάδα ελέγχου του καρκίνου επικεντρώθηκε στη μέση του παχέος εντέρου στην ομάδα ελέγχου του καρκίνου, και ο χαλκός (ΙΙ) που έλαβαν ομάδες παρουσίασαν σημαντικά μειωμένη περιφερική, μεσαία και εγγύς διανομές ACF σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου ( Πίνακας 5).

η

Ιστολογική αξιολόγηση

Οι μακροσκοπικές παθολογικές διαφορές στους ιστούς κόλου των διαφόρων ομάδων έδειξαν ότι το ACFs περιείχε στενό του αυλού των επιθηλιακών κυττάρων και παραμορφωμένα λαγηνοειδών κυττάρων με επιμήκη πυρήνες. Απώλειες της κυτταρικής πολικότητας και αυξήσεις στις μιτώσεις παρατηρήθηκαν επίσης σε δυσπλαστικών ACFs σε σύγκριση με τις κανονικές κυκλικές σε σχήμα κυττάρων με basally βρίσκεται πυρήνες. Η ιστολογική φωτογραφίες των ιστών κόλον από την ομάδα θετικού ελέγχου εμφάνισαν μειώσεις του αριθμού των κυττάρων με παθολογικά διαφορές, και μια παρόμοια μείωση παρατηρήθηκε στη στοματική χαλκού (II) σύμπλοκο ομάδες θεραπείας (Σχήμα S2).

Ανοσοϊστοχημεία

η ανοσοϊστοχημική χρώση PCNA πρωτεΐνη των τμημάτων του παχέος εντέρου από την ομάδα αζοξυμεθάνιο αποκάλυψε ένα πάνω ρύθμιση της πρωτεΐνης. Η ομάδα θετικού ελέγχου εμφάνισαν μικρότερο αριθμό των θετικών κυττάρων σε σύγκριση με την ομάδα αζοξυμεθάνιο, και παρόμοια αποτελέσματα παρατηρήθηκαν στην χαλκού (II) σύμπλοκο αγωγή ομάδες. Οι PCNA-θετικών κυττάρων (%) του ιστού του παχέος εντέρου στην ομάδα ελέγχου του καρκίνου ήταν 100%, ενώ PCNA-θετικών κυττάρων (%) από την ομάδα που έλαβε αγωγή είχαν 47.4% και 35.4%, αντίστοιχα (

ρ

& lt ? 0,05) (Σχήμα 1)

Α) Κανονική βλεννογόνο του παχέος εντέρου.. Β) Colon βλεννογόνο της ομάδας που εκτίθενται σε ΑΟΜ. C) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 5-φθοριοουρακίλη. Δ) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 2,5 mg /kg χαλκού (σύμπλοκο II). Ε) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με /συγκρότημα 5 mg kg χαλκού (II). Η ανοσοϊστοχημική χρώση για PCNA πρωτεΐνη αποκάλυψε ένα προς τα κάτω ρύθμιση πρωτεΐνης PCNA στους αρουραίους που έλαβαν θεραπεία με το Cu (BrHAP)

2 συμπλόκου. Μεγέθυνση: 100χ. Όλες οι τιμές εκφράζονται ως μέσο ± τυπικό σφάλμα του μέσου όρου. Η μέση διαφορά ήταν σημαντική στο ρ & lt? 0,05 επίπεδο σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου

Η

κηλίδος Western αναλύσεις

αναλύσεις

κηλίδος Western αποκάλυψε ότι η Βαχ (23 kDa) πρωτεΐνη ήταν κάτω. -regulated στην ομάδα ελέγχου του καρκίνου και ότι ο Cu (BrHAP)

2 συγκρότημα αύξησε την έκφραση αυτής της πρωτεΐνης. Η Cu (BrHAP)

2 πολύπλοκη και 5-φθοριοουρακίλη προκαλούνται κάτω-κανονισμούς της COX-2 (69 kDa) και Bcl2 (26 kDa) πρωτείνες στα επεξεργασμένα αρουραίους σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου. Πρωτεΐνη εκφράσεις από κηλίδες Western ποσοτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το πρόγραμμα Image J λογισμικού. Οι πυκνότητες για την ομάδα του καρκίνου (Α) τέθηκαν σε 1 και οι σχετικές πυκνότητες για τα θετικά και αγωγή ομάδες απεικονίσθηκαν. Τα δεδομένα είναι η μέση τιμή ± SEM. Η στατιστική σημαντικότητα, εκφρασμένο σε p & lt?. 0.05 (Σχήμα 2)

Α) Colon βλεννογόνο της ομάδας που εκτίθενται σε ΑΟΜ. Β) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 5-φθοριοουρακίλη. C) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 2,5 mg /kg χαλκού (σύμπλοκο II). Δ) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 5 mg /kg χαλκού (σύμπλοκο II). COX-2 και Bcl2 εκφράσεως είναι αυξημένο και η έκφραση Bax μειώθηκε στην ομάδα αγωγής σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου ΑΟΜ. β-ακτίνη χρησιμοποιήθηκε ως ένας εσωτερικός έλεγχος για την επιβεβαίωση της ίσης δείγμα φόρτωσης. Το πρόγραμμα Image J χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση της έκφρασης πρωτεϊνών. Όλες οι τιμές εκφράζονται ως μέσο ± τυπικό σφάλμα του μέσου όρου. Η μέση διαφορά ήταν σημαντική στο ρ & lt? 0.05 επίπεδο σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου

Η

Αντιοξειδωτικές δραστηριότητες ένζυμο

Ο Cu (BrHAP)

2 συγκρότημα αύξησε σημαντικά τα επίπεδα. του SOD, CAT και GPX σε ομογενοποιημένα δείγματα κόλου σε σύγκριση με εκείνα της ομάδας ελέγχου του καρκίνου (

ρ

& lt? 0,05). Το επίπεδο της MDA μειώθηκε σημαντικά κατά τα πολύπλοκα επεξεργασμένο βάσης ομάδες Schiff, και η ομάδα ελέγχου του καρκίνου παρουσίασαν τα πάνω ρύθμιση του επιπέδου έκφρασης του MDA (

σ

& lt? 0,05). (Σχήμα 3)

α) αρνητική ομάδα του παχέος εντέρου, Β) ομάδα που εκτίθεται σε ΑΟΜ, C) ομάδα επεξεργάστηκε με 5-φθοριοουρακίλη, D) ομάδα που υπέστη αγωγή με 2,5 mg /kg χαλκού (II) σύμπλοκο, Ε ομάδα) που έλαβαν θεραπεία με 5 mg /kg χαλκού (II) σύμπλοκο. Όλες οι τιμές εκφράζονται ως μέσο ± τυπικό σφάλμα του μέσου όρου. Η μέση διαφορά ήταν σημαντική σε ρ & lt?. 0.05 σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου του καρκίνου

Η

Συζήτηση

Αντικαρκινικό ανακάλυψη φαρμάκων με βάση τη βιολογική στρατηγικές που χρησιμοποιούν μεταβατική χημείας μετάλλου να στοχεύσουν οδούς της ανάπτυξης του καρκίνου και ενεργοποιήσετε καρκινικών κυττάρων απόπτωσης έχουν αναπτυχθεί για να μειώσει τη σοβαρότητα του καρκίνου σε ασθενείς [30], [31].

Σύμφωνα με πρόσφατη έρευνα που δείχνει ότι για τον έλεγχο της ανάπτυξης του καρκίνου, δεν είναι αρκετό να βασίζονται σε ένα ενιαίο κυτταρική ή φυσιολογικό γεγονός, ψάχνει για τους παράγοντες με έλεγχο ρόλο σε πολλές ογκογόνο εκδηλώσεις και συναφείς μηχανισμοί είναι εξαιρετικά σημαντική [32], [33]. Schiff ομάδες βάσης των ενώσεων έχουν μελετηθεί εκτενώς για χημειοπροστατευτική επιδράσεις τους. Το σύμπλοκο χαλκού έχει την ικανότητα να αναστέλλουν τις δραστηριότητες των κυττάρων που σχετίζονται με τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, και ως εκ τούτου συμπεράνουμε τους δείκτες πολλαπλασιασμού και την ανύψωση των οδών απόπτωσης [10], [15]. Οι προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι οι αναστολείς πρωτεασώματος διεγείρουν απόπτωση και έχουν δυνητικές αντικαρκινικές ρόλους [34], [35]. Μια μελέτη από Xiao

et al

. [36] αποκάλυψε την ανασταλτική ρόλο του Schiff βάσης χαλκού κατά δραστηριότητα πρωτεόσωμα, επιτρέποντας την επαγωγή της απόπτωσης να αυξηθεί.

Στην παρούσα μελέτη, αποδείξαμε ότι Cu (BrHAP)

2 μπορεί να μειώσει το σχηματισμό ACF και Ως εκ τούτου, του παχέος εντέρου συχνότητα εμφάνισης όγκου σε αρουραίους. Μηχανιστικά, η ένωση έδειξε πολλά υποσχόμενη χημειοπροληπτική επιδράσεις έναντι σχηματισμού ACF με αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων του όγκου και ελέγχεται η έκφραση συγκεκριμένων πρωτεϊνών κλειδιών και επαγωγή απόπτωσης των μιτοχονδρίων. Φαίνεται ότι ο έλεγχος των επιπέδων έκφρασης των αντιοξειδωτικών ενζύμων »με την ένωση παίζει σημαντικό ρόλο στην αναστολή του σχηματισμού ACF (Σχήματα 1, 2 3,).

Όταν ζωικά μοντέλα που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη, οι κλινικές και τοξικολογικές έρευνες του νέων συνθετικών ενώσεων είναι ζωτικής σημασίας για την εξασφάλιση της ασφάλειας και της αποτελεσματικότητας αυτών των ενώσεων. Όπως αναφέρεται σε προηγούμενα δημοσιευμένο άρθρο μας, το LD

50 Cu (BrHAP)

2 παρατηρήθηκαν στη μελέτη αυτή μπορεί να θεωρηθεί ως ασφαλής βάση για το παγκόσμιο εναρμονισμένο σύστημα ταξινόμησης και επισήμανσης των χημικών προϊόντων [15], [28]. Έτσι, τα αποτελέσματά μας έδειξαν την τοξικολογική ασφάλεια του στόματος χορήγηση αυτής της ένωσης, διότι δεν υπήρχαν σημάδια ανωμαλίες συμπεριφοράς ή απώλεια βάρους. Δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές στις θεραπευόμενες ομάδες σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου από την άποψη της ηπατικής και νεφρικής λειτουργίας. Έτσι, τα ευρήματά μας υποστηρίζουν την λογική χρήση αυτής της νέας συνθετικής βάσης Schiff ένωσης.

Η καρκινογόνος ένωση διμεθυλο διαζενίου-1-οξείδιο (αζοξυμεθάνιο) έχει αποδειχθεί ότι είναι σε θέση να παράγουν όγκων του παχέος εντέρου μετά τη χορήγηση σε αρσενικούς αρουραίους για μια συγκεκριμένη χρονική περίοδο [37]. Τα μεγέθη και οι αριθμοί των εστιών παρεκκλίνουσα κρυπτών που χρησιμοποιείται ως ενδιάμεσος βιοδείκτες και συσχετίζονται με τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του παχέος εντέρου. Έτσι, τα μεγέθη και οι αριθμοί των παρεκκλίνουσα κρυπτικές εστίες παρέχουν ένα γρήγορο μέτρο για ενώσεις διαλογή που μπορεί να είναι αποτελεσματική στην καταστολή της ανάπτυξης του καρκίνου του παχέος εντέρου [38] – [40]. Όπως εξηγήθηκε προηγουμένως, μέσω της επαγωγής της ενεργοποίησης απόπτωσης μέσω της μιτοχονδριακής οδού, το συγκρότημα χαλκός έχει την ικανότητα να προλαμβάνει καρκίνων [10]. Η παρούσα μελέτη έδειξε ότι η χορήγηση του Cu (BrHAP)

2 σε δόσεις των 2,5 mg /kg και 5 mg /kg μείωσε σημαντικά την ολική ΑΟΜ που προκαλείται παχέος σχηματισμό ACF και Multicrypt ανώμαλη αύξηση των κρυπτών κατά 72% και 74% (

ρ

& lt?. 0.05), αντίστοιχα

Η παρουσία του PCNA χρησιμοποιήθηκε ως ένας δείκτης του πολλαπλασιασμού των κυττάρων (η οποία παίζει σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη του καρκίνου) στους ιστούς του κόλον διότι PCNA υποδεικνύει ένα κύτταρο του επιπλέον δυνατότητα διαίρεσης [41] – [43]. Μελέτες σε ζωικά μοντέλα έδειξαν ότι ανώμαλο πολλαπλασιασμό των επιθηλιακών κυττάρων είναι μία από τις πρώτες ενδείξεις του προ-νεοπλασίας [44] – [45]. Με βάση μια μελέτη από Deschner EE

et al

. [46], τα ζώα που έλαβαν θεραπεία με οποιοδήποτε χημικό καρκινογόνο κόλου αποκάλυψε μια μεγαλύτερη ζώνη πολλαπλασιασμού και ένα υψηλότερο δείκτη επισήμανσης σε σύγκριση με την ομάδα υπό αγωγή με όχημα. Σύμφωνα με τα ανοσοϊστοχημική αποτελέσματα αυτής της έρευνας, Cu (BrHAP)

2 επάγεται κόλον προστασία των ιστών από τα κάτω ρύθμιση PCNA. Ως εκ τούτου, οι ομάδες που έλαβαν θεραπεία με την ένωση είχε ένα μικρότερο ζώνη πολλαπλασιασμού και ένα χαμηλότερο δείκτη σήμανσης, έτσι ώστε τα κύτταρα δεν ήταν πλέον στον κύκλο ανάπτυξης (

ρ

& lt? 0,05). Μια παρόμοια μείωση σε πυρηνικό αντιγόνο πολλαπλασιαζόμενων κυττάρων αναφέρθηκε προηγουμένως σε μια μελέτη που κατέδειξε την επιτυχή χημειοπροφύλαξη έναντι ΑΟΜ-προκληθέντα καρκίνο του παχέος εντέρου σε ένα ζωικό μοντέλο [47]. Έτσι, η ένωση που χρησιμοποιείται σε αυτό το πείραμα μπορεί να αναστέλλει το σχηματισμό ACF τροποποιώντας τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων. Πολλαπλοί παράγοντες στο ανοσοποιητικό μονοπάτι απόπτωσης παίζουν κρίσιμο ρόλο στην επιβίωση ή τον θάνατο των κυττάρων, και αυτοί οι παράγοντες αλληλεπιδρούν για να επηρεάσουν τα τελικά αποτελέσματα [47]. Η επαγωγή του καρκίνου του παχέος εντέρου με ΑΟΜ προκαλεί οξειδωτική τραυματισμούς ακόλουθη λιπιδική υπεροξείδωση παραγωγή σε κύτταρα του παχέος εντέρου και τα ερυθροκύτταρα, τα οποία προκαλούν αυξημένη έκκριση ολικής πρωτεΐνης και λευκωματίνης μέσω των νεφρών, η οποία, με τη σειρά του, έχει ως αποτέλεσμα την ανύψωση των συγκεντρώσεων ουρίας στο αίμα. Αυτή η διαδικασία μπορεί να παίζει ένα ρόλο στην αιτιολογία του καρκίνου του παχέος εντέρου σε αρουραίους [48] – [49] Η ισορροπία μεταξύ των επιπέδων ROS στο σώμα είναι απαραίτητη για την κυτταρική λειτουργία και το αποπτωτικό μονοπάτι σε προκαρκινικά κύτταρα [50]. Αν δεν υπάρχει αποτελεσματική ρύθμιση, η περίσσεια ROS θα έβλαπτε πρωτεΐνες, λιπίδια ή DNA και με τη σειρά αναστέλλουν τη φυσιολογική λειτουργία και τροποποίηση της γονιδιακής έκφρασης, του κυτταρικού κύκλου, το μεταβολισμό των κυττάρων, προσκόλληση κυττάρου και κυτταρικό θάνατο [51]. Η ένωση με βάση Schiff που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη θεωρείται ότι έχει την ικανότητα να αντισταθμίσει αυτά Ross. Ο μηχανισμός δράσης αυτής της ένωσης θα μπορούσε να είναι μέσω ελεύθερων ριζών οξυγόνου και σβέσης του σχηματισμού μονήρους οξυγόνου, η οποία προστατεύει το κόλον κατά του οξειδωτικού στρες και διεγείρεται μηχανισμούς επιδιόρθωσης του παχέος εντέρου. Υπάρχει η πιθανότητα ότι η ένωση έχει προστατευτικές επιδράσεις έναντι σχηματισμού ACF και της ζημίας του παχέος εντέρου μέσω των ενδογενών οξειδωτική ενζυμικά συστήματα που εμπλέκονται στο σύστημα άμυνας του παχέος εντέρου, όπως (CAT), (SOD) και (GPX), τα οποία αντισταθμίζουν τις οξειδωτικό στρες που προκαλείται από ΑΟΜ. Σε αυτή τη μελέτη, καταδείχθηκε ότι η χορήγηση ΑΟΜ προκάλεσε σοβαρές ζημιές σε ενδογενή αντιοξειδωτικό σύστημα του αρουραίου, εκπροσωπούμενη από τη διαταραχή των οξειδωτικών ενζύμων στρες (CAT, SOD και GPX) δραστηριότητες που οδήγησε σε μείωση των επιπέδων τους, παράλληλα με την υπεροξείδωση των λιπιδίων που ήταν που χαρακτηρίζεται από τα άνω ρύθμιση στα επίπεδα MDA.

Προηγούμενες μελέτες έχουν αποδείξει το ρόλο των αυξημένων δραστηριοτήτων των αντιοξειδωτικών ενζύμων (SOD, CAT και GPX), οι οποίες προκαλούνται από παράγοντες κατά του όγκου, στο μηχανισμό του χημειοπροληπτική θεραπεία [ ,,,0],52]. Η

in vivo

αξιολόγηση των αντιοξειδωτικών που εκτελούνται σε αυτή τη μελέτη έδειξε σημαντικές αυξήσεις στην SOD, CAT και δραστηριότητες GPX στις ομάδες που έλαβαν θεραπεία με Cu (BrHAP)

2. Ωστόσο, η μειωμένη λιπιδική υπεροξείδωση πρότεινε μια σημαντική μείωση στα επίπεδα MDA. Αν και αυτό το αποτέλεσμα δεν ήταν σημαντικό λόγω της επίδρασης του Cu (BrHAP)

2 για την εξουδετέρωση των τοξικών ενώσεων που παράγονται με μετατροπή ΑΟΜ σε ιδιαίτερα τοξικό μεταβολίτη, τα επίπεδα της ολικής πρωτεΐνης, λευκωματίνη και ουρία αποκαταστάθηκαν σε κανονικές τιμές [53]. Για να διερευνηθεί περαιτέρω η δραστικότητα χημειοπροληπτική αυτής της ένωσης σε καρκίνο του παχέος εντέρου και του μηχανισμού υποκείμενες αυτό το αποτέλεσμα, οι εκφράσεις του Βαχ, προαποπτωτικών πρωτεϊνών, Β-κυτταρικό λέμφωμα 2 (Bcl-2) (η οποία έχει αντιαποπτωτικές επιδράσεις) και κυκλοοξυγενάσης 2 (COX-2 ) στις διάφορες ομάδες αναλύθηκαν. δοκιμασία κηλίδος Western χρησιμοποιήθηκε στην παρούσα μελέτη για την ανίχνευση ειδικών πρωτεϊνών στο ομογενοποιείται εκχυλίζεται κόλον. Αυτές οι πρωτεΐνες παίζουν βασικούς ρόλους στην ανάπτυξη νέων φαρμάκων κατά του καρκίνου [54]. Bcl-2 παίζει ένα ζωτικό ρόλο στον έλεγχο της διαδικασίας του κυτταρικού θανάτου με αποκλεισμό διαφόρων σημάτων απόπτωσης. Σε αντίθεση, η πρωτεΐνη Bax έχει ένα ρόλο στην απελευθέρωση ενός παράγοντα που προάγει την απόπτωση στο κυτταρόπλασμα. Έτσι, η ισορροπία των εκφράσεων του Bcl-2 και Bax είναι σημαντικό στη διαδικασία του κυτταρικού θανάτου [52] – [55]. COX-2 έχει αναφερθεί ότι υπερεκφράζεται σε αρχικό στάδιο, και τα επίπεδα COX-2 έχουν αναφερθεί ότι αυξάνει με την εξέλιξη του καρκίνου. Η COX-2 είναι το περιοριστικό του ρυθμού ένζυμο στη βιοσύνθεση προστανοειδών, τα οποία αυξάνουν τον πολλαπλασιασμό, αποπτωτικά αντίσταση και την αγγειογένεση κατά τη διάρκεια του κόλου καρκινογένεση. Η έκφραση της COX-2 ρυθμίζεται αυξητικά στα κολικά καρκινώματα ΑΟΜ που προκαλείται. Κάτω ρύθμιση του COX-2 έχει αποδειχθεί ότι έχουν ένα κρίσιμο ρόλο στην αντικαρκινικός παράγοντας επαγόμενη καταστολή της ΑΟΜ που προκαλείται ογκογένεση σε ένα ζωικό μοντέλο [53]. Τα αποτελέσματά μας αποκάλυψε ότι Cu (BrHAP)

2 αύξησε την έκφραση της πρωτεΐνης ΒΑΧ, η οποία έρχεται σε αντίθεση με μια προηγούμενη μελέτη από τον Zhang

et al

. [56] οι οποίοι ανέφεραν ότι η επαγωγή έκφρασης πρωτεΐνης ΒΑΧ οδήγησε στην κυτταρική απόπτωση χρησιμοποιώντας ένωση χαλκού βάσης Schiff, και ρυθμισμένα προς τα κάτω την έκφραση της COX-2 και Bcl-2 πρωτεϊνών, και αυτό το μοτίβο της έκφρασης αλλάζει υποδηλώνει έντονα ότι η απόπτωση θα είναι που προκαλείται μέσω της μιτοχονδριακής οδού. Ma

et al

. [10] κατέδειξε επίσης την αντικαρκινική επίδραση ενός συμπλόκου βάσης Schiff νέα χαλκού (II) μέσω της ενεργοποίησης της μιτοχονδριακής οδού. Το αποτέλεσμα αυτής της μελέτης ήταν παρόμοια με την προηγούμενη δημοσιευμένη έρευνα μας για την ίδια ένωση, η οποία αποκάλυψε τον πραγματικό του ρόλο στη γαστρο-πρόληψη. Το αποτέλεσμα έδειξε ότι το σύμπλοκο ήταν σε θέση να μειώσει σημαντικά την έκφραση πρωτεΐνης Bax [15]. Προηγούμενη αξιολογήσεις των αποτελεσματικών χημειοαποτρεπτικών παραγόντων αποκάλυψαν επίσης το ίδιο μοτίβο του Bax, Bcl-2 και η έκφραση της πρωτεΐνης COX-2 [52], [53].

Συμπεράσματα

Με βάση το αποτέλεσμα της μελέτης αυτής, η χημειοπροληπτική δυναμικό του Cu (BrHAP)

2 καταδείχθηκε με μειώσεις του αριθμού των ACFs η οποία θα μπορούσε να αποδοθεί στην προς τα κάτω ρύθμιση των πρωτεϊνών που προάγουν κυτταρικό πολλαπλασιασμό σε καρκινικά κύτταρα και την ανύψωση των επιπέδων αντιοξειδωτικά ένζυμα. Οι αναλύσεις στυπώματος Western αποκάλυψε ότι ο χαλκός (II) σύμπλοκο ενεργοποιημένου απόπτωση μέσω της μιτοχονδριακής οδού από τα κάτω ρύθμιση της COX-2 και Bcl-2 και up-ρύθμιση Bax.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Σχήμα S1.

Τοπογραφικό απόψεις του βλεννογόνου του παχέος εντέρου. Α) Η κανονική βλεννογόνο του παχέος εντέρου. Β) Colon βλεννογόνο της ομάδας που εκτίθενται σε ΑΟΜ. C) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 5-φθοριοουρακίλη. Δ) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με 2,5 mg /kg χαλκού (σύμπλοκο II). Ε) Colon βλεννογόνο της ομάδας που έλαβαν θεραπεία με /συγκρότημα 5 mg kg χαλκού (II). Rat κολικού ιστού χρωματίστηκε με μπλε του μεθυλενίου. Μεγέθυνση:. 20x

doi: 10.1371 /journal.pone.0091246.s001

(ΔΕΘ)

Εικόνα S2.

ιστολογική μελέτη του καρκίνου του παχέος εντέρου σε αρουραίους. Α) Η κανονική βλεννογόνο του παχέος εντέρου.