Αφηρημένο

Ασυμφωνία επισκευής (MMR) διαδραματίζει κεντρικό ρόλο στη διατήρηση σταθερά το γονιδίωμα. MMR δυσλειτουργία μπορεί να οδηγήσει σε καρκινογένεση από τη συσσώρευση γονιδιακής μετάλλαξης. HMSH2 και hMLH1 είναι δύο βασικά συστατικά της MMR. Υψηλή ή χαμηλή έκφραση αυτών συχνά σηματοδοτούν την κατάσταση της λειτουργίας MMR. Μεταλλάξεις (EGFR, KRAS, κλπ) είναι κοινά σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC). Ωστόσο, δεν είναι σαφές τι ρόλο παίζει MMR σε γονιδιακές μεταλλάξεις NSCLC. Η έκφραση των πρωτεϊνών MMR hMSH2 και hMLH1, και το PCNA δείκτες πολλαπλασιασμού και Κί67 μετρήθηκαν με ανοσοϊστοχημεία σε 181 NSCLCs. EGFR και KRAS μεταλλάξεις ταυτοποιήθηκαν με ανάλυση τήξης υψηλή ανάλυση. Ισχυρότερη έκφραση hMLH1 συσχετίζεται με υψηλότερη συχνότητα των μεταλλάξεων του EGFR στο εξόνιο 19 και 21 (p & lt? 0.0005). Η υπερέκφραση του hMLH1 και ο υπότυπος του αδενοκαρκινώματος και οι δύο ανεξάρτητοι παράγοντες που σχετίζονται με μεταλλάξεις του EGFR σε NSCLCs (p = 0,013 και p & lt? 0.0005). Η έκφραση των hMLH1, hMSH2 και PCNA αυξημένη, ενώ η έκφραση Κί67 μειώθηκε σημαντικά (ρ = 0.030) σε NSCLCs με μεταλλάξεις του EGFR. Η υπερέκφραση του hMLH1 θα μπορούσε να είναι ένα νέο μοριακό δείκτη για την πρόβλεψη της απόκρισης σε EGFR-ΤΚΙδ σε NSCLCs. Επιπλέον, EGFR μεταλλάξεις μπορεί να είναι ένα πρώιμο συμβάν του NSCLC που συμβαίνουν πριν από δυσλειτουργία MMR.

Παράθεση: Li Μ, Zhang Q, Liu L, Lu W, Wei Η, Li RW, et al. (2013) Έκφραση της επισκευής Ασυμφωνία Gene hMLH1 ενισχύεται σε μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα με EGFR μεταλλάξεις. PLoS ONE 8 (10): e78500. doi: 10.1371 /journal.pone.0078500

Επιμέλεια: Γιάννης Souglakos, Πανεπιστημιακό Γενικό Νοσοκομείο Ηρακλείου και Εργαστήριο όγκων Κυτταρικής Βιολογίας, Τμήμα Ιατρικής, Πανεπιστήμιο Κρήτης, Ελλάδα |

Ελήφθη: Ιούλιος 9, 2013? Αποδεκτές: 13, Σεπτεμβρίου, 2013? Δημοσιεύθηκε: 24 Οκτωβρίου 2013

Copyright: © 2013 Li et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από τα Εθνικά Φύση Επιστήμη ταμείων στην Κίνα (Ταμείο Νο 81.071.805? URL: https://isisn.nsfc.gov.cn/egrantweb/), και Dalian Merricon Gene Διάγνωση Technology Co., Ltd. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από τα Εθνικά Φύση Επιστήμη ταμείων στην Κίνα (Ταμείο Νο 81071805) και Dalian Merricon Gene διάγνωση Technology Co., Ltd. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

καρκίνου

του πνεύμονα είναι η πιο συχνή και θανατηφόρα κακοήθης όγκος σε όλο τον κόσμο, με μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) είναι η κυρίαρχη μορφή. Carcinogenesis του NSCLC είναι μια πολλών σταδίων διαδικασία που περιλαμβάνει αλλαγές πολλαπλών γονιδίων συμπεριλαμβανομένων ογκογονίδιο γονίδιο ενεργοποίηση και απενεργοποίηση ογκοκατασταλτικών [1]. Πρόσφατη ανάπτυξη νέων παραγόντων με συγκεκριμένους μοριακούς στόχους, ειδικά επιδερμικού αναστολείς κινάσης τυροσίνης υποδοχέα αυξητικού παράγοντα (EGFR-ΤΚΙδ), ενίσχυσε επιστημονικό ενδιαφέρον ειδικότερα μεταλλάξεις γονιδίων και αμφισβητεί ορισμένες από τις καθιερωμένες παραδειγμάτων στη θεραπευτική παρέμβαση του NSCLC [2]. Το σήμα EGFR μονοπάτι μεταγωγής είναι μία από τις κύριες οδούς που συμμετέχουν στην μεσολάβηση και τη ρύθμιση του κυτταρικού πολλαπλασιασμού [3]. Τα κύτταρα πολλαπλασιάζονται ανεξέλεγκτα με κακοήθη μετασχηματισμό [4,5]. Περίπου το 30-50% των NSCLCs έχουν μεταλλάξεις σε γονίδια-κλειδιά, όπως EGFR, KRAS, BRAF, PI3K και AKT. Οι δύο πιο συχνά μεταλλαγμένα ογκογονίδια είναι EGFR και KRAS [6,7]. Αυτές οι μεταλλάξεις του γονιδίου συχνά σχετίζονται με την ανταπόκριση του ασθενούς NSCLC με το μοριακό στοχευμένων φαρμάκων. Για παράδειγμα, οι όγκοι με μεταλλάξεις του EGFR στο εξόνιο 19 ή 21 είναι συχνά ευαίσθητα στο EGFR TKIs. Αντίθετα, οι ασθενείς με όγκους με μεταλλαγμένο KRAS αδυνατούν να επωφεληθούν από επικουρική χημειοθεραπεία και δεν ανταποκρίνονται σε αναστολείς του EGFR [8-10]. Είναι ενδιαφέρον ότι, τα μισά από τα NSCLCs με τη μετάλλαξη στο εξώνιο 19 ή EGFR εξόνιο 21 παράγει δευτερογενείς μεταλλάξεις στο εξώνιο EGFR 20 και καθίστανται ανθεκτικά σε TKIs μετά τη θεραπεία για ένα χρόνο [11,12]. Αυτό υποδεικνύει ότι τα βασικά γονίδια του μονοπατιού EGFR είναι ασταθείς σε NSCLC. Όχι μόνο υπάρχει μια υψηλότερη συχνότητα μετάλλαξης σε NSCLC, αλλά και ορισμένα γονίδια, όπως EGFR μπορεί εύκολα να παράγει δευτερογενείς μεταλλάξεις. Ωστόσο, δεν είναι σαφές εάν οι γονιδιακές μεταλλάξεις στα NSCLC που σχετίζονται με ανωμαλίες στο μηχανισμό επιδιόρθωσης του DNA.

Ασυμφωνία επισκευής (MMR) είναι ένα σημαντικό είδος της επιδιόρθωσης του DNA, που παίζει καθοριστικό ρόλο στη διατήρηση της σταθερότητας του γονιδιώματος [13 ]. Τα γονίδια hMSH2 και hMLH1, τα οποία είναι τα βασικά συστατικά του συστήματος MMR, αναγνωρίζουν και τους ειδικούς φόρους κατανάλωσης αναντιστοιχίες μίας βάσης και βρόχους εισαγωγής /διαγραφής που συμβαίνουν κατά τη διάρκεια της αντιγραφής του DNA ή βλάβη του DNA [14]. MMR δυσλειτουργία συχνά οδηγεί σε γενωμική αστάθεια, συμπεριλαμβανομένης αστάθεια μικροδορυφόρου (MSI) και τη συσσώρευση των γονιδιακών μεταλλάξεων, οι οποίες πιστεύεται ότι σχετίζονται με την καρκινογένεση των διαφόρων κακοήθων όγκων [15,16]. Η απορύθμιση της έκφρασης hMLH1 ή hMSH2, συνήθως από μια απώλεια της ετεροζυγωτίας (ΑΕ) σε τόπους DNA MMR, με μετάλλαξη ή μεθυλίωση προαγωγού, είναι ο κύριος λόγος για τη στυτική MMR [17,18]. Η απώλεια της έκφρασης hMLH1 ή hMSH2 σχετίζεται με ένα φαινότυπο υπερμεταλλάξεως, συμπεριλαμβανομένων KRAS, BRAF, APC, Ρ53, και οι μεταλλάξεις του ΤΟΡ-β σε καρκίνο του παχέος εντέρου [19-22]. Δεν είναι σαφές, ωστόσο, ότι το εμβόλιο MMR επηρεάζει γονιδιακές μεταλλάξεις στα NSCLC. Προκειμένου να μελετηθεί η συσχέτιση μεταξύ MMR και NSCLC μεταλλάξεις, ανιχνεύσαμε EGFR και KRAS μεταλλάξεις και μετριέται hMLH1, hMSH2, PCNA και της έκφρασης Κί67 σε όγκους NSCLC

Υλικά και Μέθοδοι

2.1:. Ηθική δήλωση

Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του δευτέρου Νοσοκομείο Dalian Medical University. Όλα τα δείγματα στην έρευνα ήταν από ιστό αφαιρεθεί χειρουργικά χωρίς να επηρεάζει την διάγνωση και θεραπεία. Συλλέχθηκαν με τη γραπτή συγκατάθεση των ασθενών ή των οικογενειών πριν από τη χειρουργική επέμβαση. Τα δεδομένα αναλύθηκαν ανώνυμα. Όλες οι διαδικασίες ήταν, σύμφωνα με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι

2.2:. Ασθενείς και δείγματα όγκων

Ένα σύνολο από 181 δείγματα όγκων συλλέχθηκαν από ασθενείς με NSCLC που υποβλήθηκαν σε χειρουργικές επεμβάσεις στα συμβεβλημένα νοσοκομεία της Νταλιάν Ιατρικό Πανεπιστήμιο από το 2007 έως το 2009. από αυτά, υπήρχαν 112 αδενοκαρκινώματα, 58 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα, 4 αδενο-καρκινώματα πλακωδών κυττάρων, 5 μεγάλα καρκινώματα και 2 sarcomatoid καρκινώματα. Δύο πιστοποιηθεί παθολόγους ανεξάρτητα διαγνωστεί και να ταξινομηθεί το σύνολο των ασθενών σύμφωνα με την ταξινόμηση του ΠΟΥ (2004). Από τους 181 ασθενείς που μελετήθηκαν, 109 ήταν άνδρες και 72 ήταν γυναίκες, με μέση τιμή ± SD ηλικίας 62,0 ± 9,3 χρόνια (36 έως 80 ετών). Κανένας από τους ασθενείς έλαβαν ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία πριν από τη λειτουργία τους. πληροφορίες των ασθενών και ιστοπαθολογικά χαρακτηριστικά των όγκων στην ομάδα αυτή παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Κάθε δείγμα όγκου διαιρέθηκε σε δύο μέρη. Ένα μέρος καταψύχθηκε γρήγορα για την κοπή και την εκχύλιση του DNA, το άλλο τμήμα ήταν σταθεροποιημένο με φορμαλίνη και εγκλεισμένα σε παραφίνη για ανοσοϊστοχημεία.

μεταβλητές

Νο

hMSH θετικά (%)

hMLH1 θετικά (%)

PCNA θετικών (%)

Ki67 θετικά (%)

EGFR εξόνιο 19 Μετάλλαξη (% )

εξόνιο EGFR 21 Μετάλλαξη (%)

KRAS εξόνιο 2 Μετάλλαξη (%)

Ηλικία ≤607959.568.488.657.012.725.35.1 & gt? 6010254.973.588.265.713.721.65.9Gender Female7254.279.290.355.620.8a37 .5c0.0b Male10958.766.187.266.18.313.89.2Pathology Adc11256.377.7a

* 90.256.321.4c32.1c5.4 SCC5856.962.187.970.70.05.26.9Smoking μη smoking11556.578.3b

* 88.760. 017.4a30.4c3.5 Smoking