Αφηρημένο

Ο καρκίνος σχετίζονται και πρωτοβάθμια λεμφοίδημα (LE) συνδέονται με την παραγωγή του λιπώδους ιστού (ΑΤ). Τίποτα δεν είναι γνωστό, ωστόσο, για τα μόρια που βασίζονται σε λιπίδια που περιλαμβάνουν LE ΑΤ. Γι ‘αυτό αναλύονται τα μόρια των λιπιδίων στο lipoaspirates και ορό που λαμβάνονται από ασθενείς LE, και τα συνέκριναν με lipoaspirates από ασθενείς πλαστική χειρουργική και υγιή ορό ομάδα ελέγχου. LE ανάλυση ορού του ασθενούς έδειξε ότι τα τριγλυκερίδια, HDL-και της LDL-χοληστερόλης και των λιπιδίων μεταφορά μορίων παρέμειναν εντός των φυσιολογικών ορίων, χωρίς μεταβολές σε επιμέρους λιπαρά οξέα. Η lipidomic ανάλυση εντόπισε επίσης 275 μόρια με βάση τα λιπίδια, συμπεριλαμβανομένων τριακυλογλυκερίδια, διακυλογλυκερίδια, λιπαρά οξέα και φωσφολιπίδια σε λάδι ΑΤ και λίπος. Αν και η πλειονότητα των μορίων λιπιδίων ήταν παρόντες σε μια παρόμοια αφθονία σε LE και τα δείγματα μη-LE, υπήρξαν αρκετές μικρές αλλαγές: αυξημένη C20: 5 που περιέχει τριακυλογλυκερίδια, μειωμένη C10: 0 και C24 καπρινικό: 1 νερβονικό οξέα. LE AT έλαιο περιείχε επίσης μια υπογραφή αυξημένης λιπαρών οξέων κυκλοπροπανίου τύπου και φλεγμονωδών μεσολαβητών αραχιδονικό οξύ και ceramides. Ενδιαφέρον C20: 5 και C22: Τα 6 λιπίδια ωμέγα-3-τύπου αυξήθηκε το LE AT, συσχετίζεται με LE χρόνια. Ως εκ τούτου, LE ΑΤ έχει ένα κανονικό προφίλ λιπιδίου το οποίο περιέχει μια υπογραφή της φλεγμονής και ωμέγα-3-λιπίδια. Παραμένει ασαφές, εντούτοις, εάν οι διαφορές αυτές αντανακλούν μια μικρής κλίμακας διατάραξης της παγκόσμιας μεταβολικές ή των αποτελεσμάτων εντός τοπική φλεγμονώδη εστίες

Παράθεση:. Sedger LM, Tull DL, McConville MJ, De Souza DP, Rupasinghe TWT, Williams SJ , et al. (2016) Lipidomic προφίλ του λιπώδους ιστού αποκαλύπτει μια φλεγμονώδης Υπογραφή στη σχετιζόμενη με τον καρκίνο και την Πρωτοβάθμια λεμφοίδημα. PLoS ONE 11 (5): e0154650. doi: 10.1371 /journal.pone.0154650

Επιμέλεια: Clarissa Menezes Maya-Monteiro, Fundação Oswaldo Cruz, ΒΡΑΖΙΛΙΑ

Ελήφθη: 26 Φεβ, 2016? Αποδεκτές: 15η Απριλίου, 2016? Δημοσιεύθηκε: May 16, 2016

Copyright: © 2016 Sedger et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Όλη η δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και. Συγκεκριμένες λεπτομέρειες των ατόμων εντός της γενιάς του δότη του ασθενούς και φυσιολογικά αποθηκεύονται σύμφωνα με τις κατευθυντήριες οδηγίες της Αυστραλιανής Έρευνας Εθνικής Υγείας και Ιατρικής για την υπεύθυνη διεξαγωγή της έρευνας και τις κατευθυντήριες γραμμές Θεσμική Επιτροπή Ανθρωπίνων Έρευνας

Χρηματοδότηση:. Η έρευνα χρηματοδοτήθηκε από το Πρόγραμμα Lymphedema, Ιατρική Σχολή & amp? Επιστήμη Υγείας, του Πανεπιστημίου Macquarie. Χρηματοδότηση απονέμεται σε JB

Αντικρουόμενα συμφέροντα: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Συντομογραφίες:.. AT, λιπώδη ιστό? ΔΜΣ, δείκτης μάζας σώματος? CER, κεραμιδιού? CE, εστέρα χοληστερόλης? Δ.Σ.Ε., diacylglyceride? GC, αέρια χρωματογραφία? HexCer, εξα-κεραμιδιού? HDL, υψηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνη? LE, λεμφοίδημα? LC, υγρή χρωματογραφία? LDL, λιποπρωτεΐνη χαμηλής πυκνότητας? LPC, λυσο-φωσφατιδυλοχολίνη? LPE, λυσο-φωσφατιδυλαιθανολαμίνες? PBQC, συγκεντρώθηκαν βιολογικού ελέγχου της ποιότητας? PC, φωσφατιδυλοχολίνη? PCA, ανάλυση αρχή συστατικό? PE, φωσφατιδυλαιθανολαμίνη? MS, φασματομετρία μάζας? SM, σφιγγομυελίνη? TAG, τριακυλογλυκεριδίου? VLDL, λιποπρωτεΐνες πολύ χαμηλής πυκνότητας

Εισαγωγή

Λεμφοίδημα (LE) είναι μια κατάσταση όπου λεμφικό υγρό συσσωρεύεται στο διάμεσο ιστούς προκαλώντας οίδημα. Στις ανεπτυγμένες χώρες LE πιο συχνά εμφανίζεται ως συνέπεια, ή «δευτερογενής σε» θεραπεία για τον καρκίνο. Οι ασθενείς με καρκίνο που διατρέχουν μεγαλύτερο κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου που σχετίζονται LE περιλαμβάνουν ασθενείς με καρκίνο του μαστού που απαιτούν λεμφαδένα σταδιοποίηση ή θεραπεία (βιοψία λεμφαδένα φρουρού συν /πλην ανατομή και /ή ακτινοβολία μασχαλιαία, και συχνά με χημειοθεραπεία), λόγω της μετάστασης του καρκίνου [1]. Πράγματι συντηρητικές εκτιμήσεις δείχνουν ότι έως και το 28% αυτών των ασθενών στις αναπτυγμένες χώρες θα αναπτύξουν βραχίονα LE μετά την θεραπεία του καρκίνου του μαστού τους [1]. Παρομοίως, μέχρι και το 75% των ασθενών καρκίνου κεφαλής και τραχήλου μπορεί να αναπτυχθεί στο λαιμό, του προσώπου, του λαιμού ή της εσωτερικής LE [2], και το ένα τρίτο των ασθενών με καρκίνο πυέλου θα αναπτύξει κατώτερο άκρο LE εντός 1 έτους από τη χειρουργική επέμβαση [3]. Ως εκ τούτου, σχετικά με τον καρκίνο LE είναι ευρέως αποδεκτή ως μία από τις πιο συχνές μακροχρόνιες επιπλοκές της θεραπείας του καρκίνου. Πρωτοβάθμια LE μπορεί επίσης να προκύψει αυθόρμητα, συνήθως παρουσιάζοντας την πρώτη κατά την παιδική ηλικία, και συχνά με γενετική προέλευση [4] ή προκύπτουν από τους τραυματισμούς των ιστών μη σχετίζονται με τον καρκίνο. Ως εκ τούτου, LE εμφανίζεται λόγω κίνδυνο λεμφική παροχέτευση που μπορεί να προκληθεί άμεσα από, ή συνέβαλαν, από τραυματισμό ή γενετικές μεταβολές που οδηγούν σε ελαττώματα στο λεμφικό βιογένεση σκάφος ή δυσμορφίες στο σχηματισμό της βαλβίδας λεμφικό αγγείο και μειωμένη λεμφική λειτουργία [4]. Δυστυχώς, σήμερα δεν υπάρχει θεραπεία για την κύρια ή δευτερεύουσα (καρκίνος-σχετικές) LE. Έτσι, LE είναι μια χρόνια κατάσταση που επηρεάζει την ικανότητα ενός ατόμου να ζήσει μια φυσιολογική ζωή, διότι η κατάσταση τείνει να επιδεινωθεί με την πάροδο του χρόνου και τη σωματική παραμόρφωση και λειτουργικές επιπτώσεις της αναπηρίας στην ποιότητα ζωής [5,6].

Μία από τα σημαντικότερα προβλήματα που σχετίζονται με τη χρόνια LE είναι ότι οι προσβληθέντες ιστούς γίνονται συχνά ενοποιούνται με λιπώδη ιστό (AT) [7,8]. Μόλις αυτό συμβεί η συμμόρφωση με τις συμβατικές θεραπείες που περιλαμβάνουν τη συμπίεση, την επίδεση και μασάζ μειώνεται συχνά γίνεται φανερό ότι δεν μπορεί να μειώσει το LE-συνδέονται Εκείνη τότε κυριαρχεί εντός της πληγείσας περιοχής. Ευτυχώς, υπάρχει μια χειρουργική θεραπευτική επιλογή για τους ανθρώπους που ζουν με προηγμένες AT πλούσια LE: χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης [9-12], η οποία καταργεί στην πράξη την AT που κυριαρχεί την πληγείσα περιοχή [7,8]. Αν και αυτή η θεραπεία είναι ιδιαίτερα ευεργετική για τους ασθενείς LE, αμέσως μειώνοντας το LE επηρεάζεται το μέγεθος των άκρων, οι λόγοι για την παραγωγή LE ΑΤ είναι ακόμη αναδυόμενες αγορές και η παθολογία LE είναι ελλιπώς κατανοητή [13]. Έτσι, αν και είναι σαφές ότι αδιπογένεσης κατά κανόνα συνεπάγεται κυτοκίνες, ορμόνες, παράγοντες μεταγραφής, και miRNAs που ρυθμίζουν την γονιδιακή έκφραση χρονικά για να οδηγήσει την ωρίμανση των προ-λιποκυττάρων σε ώριμα λιποκύτταρα περιέχουν λιπίδια [14,15], αλλά πολύ λίγα είναι γνωστά σήμερα σχετικά με τη λιπογένεση στο εσωτερικό της ίδιας της LE AT. Τίποτα δεν είναι γνωστό, για παράδειγμα, για τα είδη των μορίων που βασίζονται σε λιπίδια που παράγονται από λιποκύτταρα ιστό LE. Είναι ενδιαφέρον, ΑΤ είναι πραγματικά αναπόσπαστο με το ανοσοποιητικό σύστημα των θηλαστικών και, στην πραγματικότητα, τους λεμφαδένες υπάρχουν κανονικά σε στενή φυσική σύνδεση με ΑΤ, όπου λιπόλυση απελευθερώνει ελεύθερα λιπαρά οξέα και λιπίδια μεσολαβητές ότι τα κύτταρα καυσίμου ανοσοποιητικό σύστημα [16]. Επιπλέον, ενώ η χοληστερόλη κανονικά μεταφέρεται στο αίμα μέσω των λιποπρωτεϊνών, είτε ως χυλομικρά, πολύ χαμηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνες (VLDL), ενδιάμεσα, ή λιποπρωτεϊνών υψηλής πυκνότητας (HDL), μεταφορά λιπιδίων πίσω από κύτταρα και ιστούς στο ήπαρ συμβαίνει μέσω HDL και λέμφου-μια διαδικασία γνωστή ως αντίστροφη μεταφορά χοληστερόλης [16]. Εδώ, εκροή κυτταρικής χοληστερόλης απελευθερώνεται μέσα στο ενδοκυττάριο χώρο αν και οι συνδυασμένες δράσεις του ABC μεταφορέων, καθαριστή υποδοχέα Β1, Cyp27A1, caveolin, ή παθητική διάχυση (κάθε μηχανισμός ποικίλουν ανάλογα εν μέρει με τον τύπο κυττάρων) [17], όπου είναι τελικά απομακρύνονται με HDL και διακινούνται πίσω από το διάμεσο μέσω των λεμφαγγείων (για μια πρόσφατη επισκόπηση βλέπε [18]). Έτσι, μεταφορά λιπιδίων είναι απαραίτητα αναπόσπαστο LE επειδή λεμφική παροχέτευση μεταβάλλεται όταν αφαιρούνται λεμφαδένες, ή όταν τα λεμφικά αγγεία και βαλβίδες ζημιά ή δυσλειτουργία. Πράγματι, πρόσφατες μελέτες σε ζώα που βασίζεται προτείνουμε εξασθενημένη μεταφορά χοληστερόλης αντίστροφη εμφανίζεται σε πειραματικά επαγόμενη ποντικού LE [19]. Αν υπάρχουν ατέλειες σε αντίστροφη μεταφορά χοληστερόλης στο ανθρώπινο LE τότε την έκταση στην οποία έχει μεταβληθεί ή ισορροπημένη μεταβολισμό των λιπιδίων είναι ασαφείς. Έτσι, επίσης, λίγα είναι γνωστά για τις συνέπειες της χρόνιας LE πρήξιμο στο επίπεδο των λιπιδίων ορού και λιπίδια που σχετίζονται λιποπρωτεϊνών στο ανθρώπινο LE. Ως εκ τούτου, για να αρχίσουμε να καταλαβαίνουμε καλύτερα την παθολογία της παραγωγής AT σε προχωρημένο LE εξετάσαμε τα λιπίδια του ορού και πειραματικά δημιουργείται η πρώτη προφίλ των λιπιδίων του προχωρημένου καρκίνου που σχετίζονται με τους ασθενείς LE και σύγκριση τους με φυσιολογικό ορό και να ανατομικά ταιριαστό χέρι και το πόδι κανονική , μη-LE, AT.

Υλικά και Μέθοδοι

Ανθρώπινο Έρευνας Ηθικής Έγκριση

Αυτή η μελέτη αναθεωρήθηκε και εγκρίθηκε από το Πανεπιστήμιο Macquarie Επιτροπή Ανθρωπίνων Έρευνας Ηθικής (HREC) πριν από την έναρξη του. Όλα τα στοιχεία της μελέτης στη συνέχεια διενεργήθηκε σύμφωνα με το HREC εγκεκριμένα πρωτόκολλα, έτσι ώστε όλα τα φυσιολογικούς δότες ιστών, και οι ασθενείς με LE, δώρισε το αίμα τους και AT δείγματα λιποαναρρόφηση εθελοντικά και με τεκμηριωμένη έγγραφη συγκατάθεση.

ασθενών και υγιή συμμετέχοντες έλεγχο μελετήσει τα κριτήρια ένταξης

Όλοι οι ασθενείς με LE (n = 15, Πίνακας 1) αναζητούν ιατρική αξιολόγηση και θεραπεία για προχωρημένους άκρων LE στην Κλινική αξιολόγησης Σύνθετη λεμφοίδημα στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Macquarie. Αυτοί οι ασθενείς συνήθως παρουσιάζονται με διαφορά όγκο σκέλος του τουλάχιστον & gt? 20-25% και προσφέρονται χειρουργική λιποαναρρόφηση με βάση την παρουσία των LE-σχετίζεται AT όπως προσδιορίζεται κυρίως από ένα «μη-σκασίματα» παρουσίαση LE [8,20] και επιβεβαιώθηκε με απεικόνιση μαγνητικού συντονισμού [9]. Έτσι χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης είναι μια θεραπευτική επιλογή για τους ασθενείς που έχουν υποστεί αμελητέα πρόσφατη όφελος από τις συμβατικές θεραπείες LE λόγω ενοποιημένη συσσώρευση σημαντικών ποσοτήτων AT. Για σύγκριση με το φυσιολογικό ιστό λάβαμε επίσης υγιείς χέρι και πόδι (άκρων) ΑΤ (n = 7? Πίνακας 1). Αυτός ο ιστός ελήφθη από ασθενείς καλλυντικό χειρουργική επέμβαση που είχε επιλέξει για τη χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης σε ιδιωτική Μελβούρνη πλαστική χειρουργική κλινική για αδήλωτη προσωπικούς λόγους. Ένα παράδειγμα της εικόνας του άκρου LE ασθενή και το LE και μη-LE lipoasparates δείχνεται (Σχήμα 1). Όλοι οι ασθενείς LE και υγιείς δότες που παρέχονται, επίσης, το βάρος και το ύψος των μετρήσεών τους, τα οποία χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό του δείκτη μάζας σώματος του ατόμου (ΔΜΣ) και ως εκ τούτου να καθιστά δυνατή την αναγνώριση και τον αποκλεισμό των συμμετεχόντων στην μελέτη που θα μπορούσαν ειδάλλως δεν θα ταξινομηθεί ως έχουσα «κανονικό ΔΜΣ », που σύμφωνα με το Καρδιολογικό Ίδρυμα της Αυστραλίας κλίμακα κατάταξης (https://heartfoundation.org.au/). Έτσι, όλοι οι συμμετέχοντες στη μελέτη ήταν εντός φυσιολογικών ΔΜΣ φυσιολογικού εύρους (15 & lt? 25), εκτός από δύο ασθενείς LE οι οποίοι είχαν δείκτη προ-χειρουργική επέμβαση μάζας σώματος (ΔΜΣ) & lt? 30 kg /m

2. Ωστόσο, αυτοί οι δύο ασθενείς LE δεν θεωρήθηκαν ότι είναι παχύσαρκοι, επειδή ο ΔΜΣ ενός ασθενούς επέστρεψε στο & lt? 30 kg /m

2 γρήγορα μετά από λιποαναρρόφηση άκρων, και το άλλο έχει πρωταρχική πόδι LE επηρεάζουν και τα δύο άκρα, δηλαδή, σαφώς αυτούς τους ασθενείς προ-χειρουργικές δεδομένων αντικατοπτρίζεται lymphedematous άκρα τους και όχι μια κατάσταση γενικευμένης σώμα της παχυσαρκίας. Ήταν επίσης εμφανές ότι πολλά άτομα τόσο LE και μη-LE ομάδες ήταν «υγιή αλλά υπέρβαρα» (ΒΜΙ = 25-29) σύμφωνο με πολλές από τις σημερινές δημογραφικά δυτική χώρα (ατομικά στοιχεία δεν φαίνονται). Μια στατιστική ανάλυση των δεδομένων χαρακτηριστικών ομάδα, συγκεκριμένα την ηλικία, το φύλο και το ΔΜΣ, πραγματοποιήθηκε μέσω της δοκιμής T Ένα πρότυπο του Student χωρίς παραδοχή για την ομαλότητα της διανομής δεδομένων δεδομένων των σχετικά μικρά μεγέθη δείγματος (Πίνακας 1).

(Α ) το αριστερό χέρι LE, (Β) Αριστερό πόδι LE, (C) LE AT λιποαναρρόφηση αναρρόφηση και (Δ) Κανονική μη-LE (πλαστική χειρουργική) AT λιποαναρρόφηση αναρρόφηση, δείχνει παρουσία υγρού πετρελαίου (πετρέλαιο) και στερεό λίπος (λίπος). Επίσης εμφανής είναι η υδατική στιβάδα του φυσιολογικού ορού πλύνετε εντός του αισθητική χειρουργική αναρρόφηση.

Η

συλλογή δειγμάτων και την επεξεργασία των ιστών

Λιποαναρρόφηση χειρουργική επέμβαση για καρκίνο σχετίζονται LE πραγματοποιήθηκε υπό γενική αναισθησία στο Macquarie University Hospital από το συντάκτη TL ο οποίος είχε εκπαιδευθεί ειδικά από τον καθηγητή Brörson και ο καθηγητής Munnoch, οι οποίοι έχουν αναπτύξει αυτό που είναι τώρα μια καθιερωμένη διαδικασία για την προηγμένη LE [10-12,21]. Η χειρουργική επέμβαση πραγματοποιήθηκε σε LE-επηρεάζονται χέρια και πόδια (Σχήμα 1Α και 1Β) μετά την εφαρμογή ενός αιμοστατική ταινία. Εν συντομία, η υποδόρια ΑΤ απομακρύνθηκε μέσω πολλαπλών μικρών τομών που βρίσκονται κατά μήκος του μήκους του προσβεβλημένου άκρου, μέσω κάνουλας Helixed Tri Port III (συνήθως 22-30 cm και πλάτους 4-5 mm) που συνδέεται με μία αντλία κενού [9]? η ίδια διαδικασία έχει πλέον χρησιμοποιηθεί με επιτυχία σε διεθνές επίπεδο για περισσότερο από μία δεκαετία [10-12]. Το εξάγεται το χέρι ή το πόδι LE AT lipoaspirate (Σχήμα 1 C) αμέσως μεταφέρονται στην Ιατρική Σχολή και την Υγεία Research Laboratories, επεξεργασία όπως περιγράφεται παρακάτω και αποθηκεύονται στους -80 ° C σε μια τράπεζα σε δείγμα που παράγεται από LMS. Υγιούς ανθρώπου άκρων (χέρι ή πόδι) κατά συλλέχθηκε με ενημερωμένη συγκατάθεση του δωρητή, σε μια ιδιωτική αισθητική χειρουργική κλινική, ο Δρ Lanzer Κλινική, Μελβούρνη, από τους πελάτες που επιλέγουν να υποβληθούν σε χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης. Εν συντομία, ένα υγιές λιπο-αναρρόφησης ιστού (Σχήμα 1D) ελήφθη με τυπικές διαδικασίες πλαστικής χειρουργικής υπό γενική αναισθησία. Μετά έγιναν μικρές τομές, η γύρω περιοχή ήταν γεμάτη με Klein πρησμένος υγρού χρησιμοποιώντας βελόνα 20 gauge, προτού εφαρμοσθεί κενό και την επακόλουθη εξαγωγή του ΑΤ μέσω μιας 14 gauge Klein μικροσωληνίσκου της ποικιλίας capastrano [22]. Καλλυντικά ασθενείς χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης, στη συνέχεια φορέστε ένα συνδετικό συμπίεσης συνεχώς για περίπου 2 εβδομάδες, στη συνέχεια, κατά διαστήματα για 2 εβδομάδες μετεγχειρητικά, προκειμένου να ελαχιστοποιηθεί η πιθανότητα ανεπιθύμητων ενεργειών ή μετεγχειρητικές επιπλοκές [23].

Η LE και φυσιολογικά (καλλυντικά) χειρουργική λιποαναρρόφηση AT lipoaspirates (Σχ 1C και 1D) χύθηκαν σε αρκετές σωλήνες 50 ml Falcon και φυγοκεντρήθηκε στα περίπου 350 g για 5 λεπτά για να διαχωρισθεί το υγρό «λίπος λάδι» από τα στερεά άθικτα AT δηλαδή ανέπαφη λιποκύτταρα αναφέρεται διαφορετικά εδώ ως AT «λίπος». Τα υπόλοιπα υποκείμενο υδατικά συστατικά ιστού συλλέχθηκαν επίσης, και ο σβώλος των ερυθροκυττάρων του αίματος απορρίφθηκε. Μετά τη φυγοκέντρηση, το έλαιο απομακρύνθηκε και αποθηκεύθηκε κατεψυγμένο στους -80 ° C. Στη συνέχεια, τα άθικτα λιποκύτταρα, και υδατικές στιβάδες, απομακρύνονται προσεκτικά, χωριστά, και ομοίως τοποθετούνται σε ξεχωριστούς σωλήνες και καταψύχθηκαν αμέσως επίσης στους -80 ° C. Έτσι, τα συστατικά του ιστού φυλάχτηκαν κατά τη στιγμή της χειρουργικής συλλογή τους σε μια περίοδο 12-18 μηνών μέσω της μέχρι ενός ενιαίου απόψυξη για μετέπειτα εργαστηριακή ανάλυση.

δείγματα περιφερικού αίματος συλλέχθηκαν από ασθενείς LE χρησιμοποιώντας τόσο SST-II και σωλήνες Κ

2EDTA συλλογή vacutainer αμέσως πριν από την αναισθησία για χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης. Περιφερικό αίμα λήφθηκε επίσης από μη σχετίζονται υγιή σύμπτωση ηλικίας και φύλου δοτών (η = 13? Πίνακας 1) με πρότυπες φλεβοπαρακέντηση των περιφερικών φλεβών, που εκτελούνται από εκπαιδευμένους phlebotomists. Όλοι οι ασθενείς LE και υγιείς δότες ήταν «νηστεία» και «ανάπαυσης»? κατανάλωναν κανένα τρόφιμο και δεν ασκήσει για τουλάχιστον 8-10 ώρες πριν από την αιμοληψία ή AT συλλογή από χειρουργική επέμβαση λιποαναρρόφησης. Δείγματα περιφερικού αίματος υποβλήθηκαν σε φυγοκέντρηση για 10 λεπτά και ο ορός (και πλάσμα) απομακρύνθηκε στρώματα, κλασματοποιήθηκε, τότε αποθηκεύεται κατεψυγμένο μέχρι ένα ενιαίο απόψυξη για εργαστηριακή ανάλυση.

Automated βιοχημική ανάλυση για το σύνολο των λιπιδίων του ορού

Συνολικά τα λιπίδια του ορού μετρήθηκαν ως εξής: χοληστερόλη μετρήθηκε με χοληστερίνη ενζυματική δοκιμασία (Abbott), τριγλυκερίδια με μία δοκιμασία οξειδάσης γλυκερίνης φωσφατάση που βασίζεται (Abbott), και της HDL-χοληστερόλη με τη δοκιμασία επιλεκτικής απορρυπαντικό Ultra HDL γκαζιού (Abbot) και αναλύθηκαν σε ένα μέσο Αρχιτέκτονας c16000 Abbott σε Douglas Hanly Moir Παθολογίας, Macquarie Park, Sydney. Τα επίπεδα της LDL-χοληστερόλης υπολογίζονται ως εξής: LDL-χοληστερόλη = χοληστερόλη HDL-(0,45 χ τριγλυκερίδια), το οποίο είναι ουσιαστικά όμοιο με αμφότερες τις formuli Friedewald και Amhadi [24,25]. Η απολιποπρωτεΐνη-Α1 -B επίπεδα ορού και προσδιορίστηκαν με αναλύσεις ανοσοθολοσιμετρική Tina-Quant απολιποπρωτεΐνη Α-1 Ver 2 και Apolipoproteins Β Ver 2 (Roche), χρησιμοποιώντας το Roche Integra 800 αναλυτή στο Sullivan και Νικολαΐδης Εργαστήριο στο Brisbane της Αυστραλίας. Η γενικά αποδεκτή φυσιολογικό εύρος αυτών των μορίων στον ανθρώπινο ορό Σημειώνεται μαζί με τα δεδομένα.

αέρια χρωματογραφία-φασματομετρία μάζας (GC-MS) ανάλυση των λιπαρών οξέων

AT δείγματα περίπου 50 mg ήταν εκχυλίζεται εντός 1 mL χλωροφόρμιο: μεθανόλη (2: 1 ν /ν) με επώαση σε ένα θερμο-αναδευτήρα (Eppendorf) για 10 λεπτά στους 30 ° C, κατόπιν φυγοκεντρήθηκε στα 18000g για 5 λεπτά στους 4 ° C. Ένα κλάσμα 50 μΐ του υπερκειμένου από κάθε δείγμα επίσης συνδυάζονται για να δημιουργήσουν ένα ομαδοποιήθηκαν βιολογικό έλεγχο ποιότητας (PBQC). Μεμονωμένα δείγματα και PBQC (5 μΐ) μεταφέρθηκαν σε ένα γυάλινο ένθεμα στο οποίο προστέθηκαν 40 υΐ εσωτερικών προτύπων: χλωροφόρμιο: μεθανόλη (2: 1 ν /ν) που περιείχε 62,5 μΜ καθένα από

13C

18-στεατικό και

13C

2-μυριστικό. πρότυπα Straight αλυσίδα λιπαρού οξέος (Sigma) (25 μΜ) και τα πρότυπα λιπαρό οξύ μονομεθυλ διακλαδισμένης αλυσίδας και κυκλοπροπανο-τύπου (25 μΜ) συντέθηκαν in-house όπως περιγράφηκε προηγουμένως [26,27] και παρασκευάστηκε σε χλωροφόρμιο: μεθανόλη (2: 1). Ενθέματα που περιέχει τα δείγματα και το PBQC σφραγίστηκαν σε φιαλίδια GC και διεστεροποιείται να δημιουργήσουν μεθυλεστέρες λιπαρών οξέων. Για αυτό το δείγματα αναμίχθηκαν με 5 uL Methprep-II (Alltech) χρησιμοποιώντας ένα ρομπότ αυτόματο δειγματολήπτη Gerstel MPS2, επωάστηκαν για 30 λεπτά στους 37 ° C με αργή ανατάραξη για ανάμιξη. ανάλυση λιπαρών οξέων πραγματοποιήθηκε σε ένα χρωματογράφο αερίου Agilent 7890 συζευγμένο με ένα επιλεκτικό ανιχνευτή 5975 μάζα. Δείγματα (2 μΐ) εγχύθηκαν σε λειτουργία split (10: 1) σε μία είσοδο σε θερμοκρασία 250 ° C και χρωματογραφικός διαχωρισμός επιτεύχθηκε σε μία στήλη SGE BPX70 (60 m χ 0,25 mm i.d. χ 0,25 um πάχος φιλμ). Οι συνθήκες του φούρνου ήταν 70 ° C για 1 λεπτό, στη συνέχεια 40 ° C /λεπτό έως 150 ° C, 4 ° C /λεπτό έως 200 ° C, 3 ° C /λεπτό έως 220 ° C, 4 ° C /min έως τους 250 ° C έπειτα διατηρήθηκε στους 250 ° C για 4 λεπτά. ροή του φέροντος αερίου ηλίου ήταν σταθερή στα 1,5 ml /min και η γραμμή μεταφοράς MS ρυθμίστηκε στους 280 ° C. Οι ενώσεις ιονισμένο χρησιμοποιώντας τον κατακερματισμό των επιπτώσεων ηλεκτρονίων (-70eV) και φάσματα μάζας που συλλέγονται σε όλο το εύρος /z 50 έως 450 m σε 3,6 σαρώσεις /δευτερόλεπτο.

Υγρά χρωματογραφία-φασματομετρία μάζας (LC-MS) ανάλυση λιπιδίων

ανάλυση λιπιδίων LC-MS διεξήχθη ουσιαστικά σύμφωνα με πρότυπες μεθόδους που περιγράφονται προηγουμένως για τα λιπίδια του αίματος [28]. Εν συντομία, το λίπος-έλαιο (~ 50 mg «δεξαμενής») και στερεό λίπος (~ 50 mg «λίπος») δείγματα εκχυλίστηκαν χρησιμοποιώντας 1 mL χλωροφορμίου: μεθανόλης (2: 1, ν /ν) που περιέχει το εσωτερικό πρότυπο 5 υΜ C17 : 0 LPC για 1 ώρα σε RT. Τα εκχυλίσματα φυγοκεντρήθηκαν στα 18.000 g για 10 λεπτά στους 4 ° C (σε ψυγείο μικροφυγόκεντρο) και τα υπερκείμενα μεταφέρονται σε ένα νέο σωλήνα. Το σφαιρίδιο επανα-εκχυλίζεται με 500 ul χλωροφόρμιο: μεθανόλη (2: 1, ν /ν), φυγοκέντρηση όπως περιγράφηκε παραπάνω και τα υπερκείμενα συνδυάστηκαν. Τα λιπαρά έλαιο και στερεά λιπαρά εκχυλίσματα ξηραίνονται υπό αέριο άζωτο μετά επαναιωρήθηκε σε 100 μΐ βουτανόλη: μεθανόλη (1: 1) που περιέχει μυρμηκικό αμμώνιο 5 mM (Sigma). Τα λιπίδια αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μια υγρή χρωματογραφία Agilent 1200 σύστημα (LC) και φασματόμετρο τριπλό τετραπολικό 6460 μάζας (MS). Εν συντομία, τα λιπίδια διαχωρίστηκαν με έγχυση 5 μΐ του δείγματος επάνω σε ένα 50 mm × 2,1 mm × 2,7 μm Ascentis Express στήλη RP-Amide (Supelco) που ακολουθείται από έκλουση σε ταχύτητα ροής 0,2 ml /min επί 5 min βαθμίδας νερού /μεθανόλης /τετραϋδροφουρανίου (50:20:30, ν /ν /ν) σε νερό /μεθανόλη /τετραϋδροφουράνιο (5:20:75, ν /ν /ν) με τον τελικό ρυθμιστικό που πραγματοποιήθηκε για 3 λεπτά. Τα λιπίδια ταυτοποιήθηκαν με ηλεκτροψεκασμού ιονισμού φασματομετρία μάζας χρησιμοποιώντας μια μέθοδο που βελτιστοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα πάνελ από αυθεντικά πρότυπα λιπιδίων. προσδιορισμός των λιπιδίων διεξήχθη με τη χρήση δύο λειτουργιών σάρωσης διαθέσιμα σε τριπλό τετραπλό φασματόμετρο μάζας, πρόδρομος σάρωση και σάρωση απώλεια ουδέτερο. Και οι δύο σαρώσεις προφίλ αναγνώρισης των πρόδρομων μάζες των ειδών λιπιδίου με βάση το m /z του θραύσματος της ομάδας κεφαλής. Φωσφατιδυλοχολίνες (PC) και σφιγγομυελίνες (SM) προσδιορίστηκαν με σάρωση για τις πρόδρομες ουσίες σε 184,1 m /z, ενώ ceramides (CER), εστέρες χοληστερόλης (CE) και φωσφατιδυλογλυκερόλες (PG) προσδιορίστηκαν με σάρωση για τις πρόδρομες ουσίες σε 264,6, 369,4 και 189 m /z, αντίστοιχα, όλα σε θετική λειτουργία MS. Φωσφατιδυλαιθανολαμίνες (ΡΕ) προσδιορίστηκαν με σάρωση για την ουδέτερη απώλεια 141 m /z σε θετική λειτουργία MS. Διακυλογλυκερόλη (DAG) και τριακυλογλυκερόλης (TAG) ταυτοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας ουδέτερη σαρώσεις απώλεια πιθανών λιπαρού ακυλο τμήματα. Έτσι, οι ταυτοποιήσεις των λιπιδίων είναι υποθετικό και οι περισσότεροι δεν έχουν επικυρωθεί με άλλα μέσα. Τα λιπίδια ποσοτικά με τη χρήση πολλαπλών παρακολούθηση της αντίδρασης με τριχοειδή τάση 4000V, τάση κατατεμαχιστή 140-380 V, ενέργεια σύγκρουσης 15-60 V και αέριο σύγκρουσης (άζωτο) σε 7 L /min. Η ποσοτικοποίηση βασίστηκε σε σχετικές μεταβολές στην κορυφή περιοχές

χειρισμό των δεδομένων και στατιστική ανάλυση

Straight-αλυσίδα ειδών λιπιδίων είναι ομοιόμορφα refered στο μέσω του Cx:. Y ονοματολογία, η οποία αναφέρεται στο συνολικό αριθμό των ανθράκων (x) και τον αριθμό των διπλών δεσμών (y) στο λιπίδιο. Για παράδειγμα, η χοληστερόλη εστέρα CE (14: 1) έχει 14 άνθρακες και 1 διπλό δεσμό-σημείωση ότι η θέση του διπλού δεσμού δεν ορίζεται. Διακλαδισμένης αλυσίδας μελέτες λιπαρά οξέα περιλαμβάνουν ισο-λιπαρά acidsm περιέχει μία ομάδα μεθυλίου στο προτελευταίο άνθρακα. Έτσι, ισο-C15: 0 αναφέρεται σε 13-μεθυλμυριστικό οξύ. Κυκλοπροπάνιο λιπαρά οξέα που μελετήθηκαν περιλαμβάνουν cis-9,10-methylenehexadecanoic οξύ (MHA), dihyrosterculic οξύ (DHS) και lactobacillic οξύ (LBA). Η ονοματολογία των λιπιδίων και την ταξινόμηση συμμορφώνεται με αυτή LIPD MAPS https://www.lipids.org. Και τα δύο δεδομένα GC- και LC-MS υποβλήθηκε σε επεξεργασία χρησιμοποιώντας Agilent Μαζικής Hunter Ποσοτική Λογισμικού (B.06.00). Ανεπεξέργαστα δεδομένα δείχνουν σχετική αφθονία (περιοχή κάτω από την καμπύλη) αναλύθηκε στο Microsoft Excel (έκδοση 14.5.9 για Mac OS), τον υπολογισμό μέση, τυπική απόκλιση (SD) και διάμεση τιμή για το LE ή κανονική δεδομένων ομάδα. Ανεπεξέργαστα δεδομένα για πρώτη φορά καταγραφής μετατραπεί, προσαρμόστηκε στη συνέχεια με μέση τιμή κανονικοποίησης (χ /διάμεση τιμή) [29], όπου η μέση τιμή όπως έχουν καθοριστεί ξεχωριστά για κάθε κατηγορία των λιπιδίων που περιλαμβάνονται στη μελέτη (π.χ. λιπαρά οξέα, Δ.Σ.Ε., TAG, CE, PE /LPE , SM, Cer, κλπ), προκειμένου να ληφθεί υπόψη η ετεροσκεδαστική φύση των δεδομένων μεταβολισμική. Όταν ένα λιπίδιο απαρατήρητα μια μηδενική τιμή αντικαταστάθηκε από «0» ή «1» για να επιτραπεί κατάντη ανάλυση (ανεπεξέργαστα δεδομένα, εγκλωβιστούμε κύτταρα σε συμπληρωματικά στοιχεία). Μέσα και SD υπολογίστηκαν πάλι αυτή τη φορά από το αρχείο καταγραφής μετασχηματισμένο διάμεσο-κανονικοποιημένα δεδομένα, και σημαντικές διαφορές μεταξύ LE έναντι κανονικών AT δείγματα, αξιολογήθηκε το καθένα για τα είδη λιπιδίων, που προσδιορίζονται με τη χρήση t-test ενός δύο ουρών unpaired Student του? στατιστικής σημαντικότητας p & lt? 0,05, χωρίς παραδοχές για την κατανομή των δεδομένων (ομαλότητα). Global-διάμεση κανονικοποιημένα δεδομένα επίσης ανεξάρτητα αναλύονται ώστε να επιτρέπει μια ανάλυση βασικής συνιστώσας (PCA), η οποία αξιολόγησε τις παγκόσμιες διαφορές μεταξύ όλων των μεταβολιτών σε καθένα από τα δείγματα ομάδες ταυτόχρονα? ΠΑΠ διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας λογισμικό R και τα αποτελέσματα μπορούν να βρεθούν στο S1 Σχ. Τα δεδομένα επιπλέον εξετάστηκαν για τον εντοπισμό δυνητικών ψευδή ευρήματα με τη μέθοδο της διόρθωσης Benjamini-Hochberg [30]. Τέλος, τα δεδομένα αναλύθηκαν για τη συσχέτιση με LE χρόνια με τη μέθοδο συσχέτισης Pearson χρησιμοποιώντας Graphpad PRISM (έκδοση 60Ρ για Mac OS X), με το αντίστοιχο R

2 τιμές στον πίνακα μαζί με το

σ

& lt? 0.05 ως δείκτης της σημασία. Τα δεδομένα απεικονίστηκαν γραφικά με τα στοιχεία PRISM και πολυσύνθετα δεδομένα κατασκευάστηκαν σε καμβά ισοπαλία 2 (έκδοση 1.01) για Mac OS.

Αποτελέσματα

Σύνολο των λιπιδίων του ορού σε προχωρημένο LE

Για να προσδιοριστεί εάν υπήρχε οποιαδήποτε συστηματική βάση λιπίδιο μεταβολική ανισορροπία που σχετίζονται με άκρων AT εναπόθεση σε χρόνιες προχωρημένο καρκίνο σχετίζονται LE, 15 LE ορούς των ασθενών (Πίνακας 1) αναλύθηκαν για ολική κυκλοφορούντων επιπέδων χοληστερόλης και τριγλυκεριδίων, και συγκρίνονται 13 φυσιολογικούς υγιείς sex- συμφωνημένα ορό από υγιείς δότες. Τα επίπεδα αυτών των μορίων στον ορό ήταν πολύ παρόμοια σε ασθενείς LE όπως ήταν παρούσα σε υγιείς, μη-LE, αιμοδότες, και οι δύο ομάδες περιέχονται αρκετές υπερχοληστερολαιμία, δηλαδή τα άτομα με υψηλά επίπεδα χοληστερόλης πάνω από τα συνιστώμενα επίπεδα για υγιή άτομα, δηλαδή πάνω από το «κανονικό φάσμα «(Σχήμα 2Α). Παρά τις ομοιότητες, τα επίπεδα της HDL-χοληστερόλης στον ορό βρέθηκαν να είναι χαμηλότερη (στατιστικά σημαντική, ρ = 0,0340) σε ασθενείς LE σε σύγκριση με τα υγιή δείγματα κοόρτη δότη, αν και αυτά τα δείγματα ήταν ακόμη εντός του φυσιολογικού εύρους (Σχήμα 2Α). Τα υπολογιζόμενα επίπεδα LDL-χοληστερόλης ήταν επίσης παρόμοιες μεταξύ του LE και φυσιολογικά δείγματα κοόρτη (Σχήμα 2Α), όπως ήταν τα μόρια μεταφοράς των λιπιδίων του ορού, της απολιποπρωτεΐνης Α1 και απολιποπρωτεΐνης Β (Σχήμα 2Β). Έτσι, η αφθονία των ολικών λιπιδίων ορού και τα μόρια λιπιδίων-μεταφοράς είναι σε μεγάλο βαθμό αμετάβλητες σε προχωρημένο καρκίνο σχετίζονται LE σε σύγκριση με υγιείς δότες, και εντός του φυσιολογικού εύρους για υγιείς ενήλικες.

(Α) Box και μουστακιού οικόπεδα ολική χοληστερόλη ορού, τριγλυκερίδια, HDL-χοληστερόλη και υπολογίζεται η LDL-χοληστερόλη, και (Β) συνολική λιποπρωτεΐνης ορού αποπρωτεΐνη Α1 και απολιποπρωτεΐνης Β, από LE ασθενών (n = 15) και την κανονική ομάδα (n = 11) δείγματα περιφερικού αίματος. Η γραμμή μέσα σε κάθε κουτί υποδεικνύει την παγκόσμια μέση τιμή που υπολογίζεται από την ομάδα. Η γενικά αποδεκτή πληθυσμό φυσιολογικών ορίων (NR) παρουσιάζεται μέσα σε κάθε γράφημα (κάθετη γραμμή, δεξιά). Η στατιστική σημαντικότητα (

σ αξία

) μεταξύ LE και Κανονική (μη-LE) παρουσιάζονται επίσης, όπως καθορίζεται από δύο-tailed t-test, δεν υποθέτοντας ίσες διακύμανσης.

Η

Ορός lipidomic ανάλυση LE ασθενείς

Επειδή αυτές οι ταχείες διαγνωστικές συνήθεις εργαστηριακές αναλύσεις δεν παρέχουν πληροφορίες σχετικά με το είδος ή την αφθονία των μεμονωμένων ειδών λιπιδίων, 7 τυχαία επιλεγμένα δείγματα ασθενών LE και «κανονική» (υγιή) δείγματα ορού 3 δότη αναλύθηκαν περαιτέρω με χρωματογραφία αερίου φασματομετρίας μάζας (GC-MS). Αυτό επέτρεψε την ειδική μοριακή ταυτοποίηση 31 περίπου λιπαρών οξέων σε ανθρώπινο ορό, συμπεριλαμβανομένων των 4 λιπαρά οξέα διακλαδισμένης αλυσίδας, το τελευταίο δεν αναλύονται συχνά σε άλλες δημοσιεύσεις διερεύνηση των λιπιδίων του ορού. Παρ ‘όλα αυτά, και σύμφωνα με τις συνολικά επίπεδα των λιπιδίων του ορού, υπάρχουν λιπαρά οξέα μεμονωμένα ορού βρέθηκαν να είναι παρούσα σε LE ορό του ασθενούς με μια αλλαγμένη αφθονία ό, τι ήταν παρούσα σε υγιείς «ελέγχου» (μη-LE) κοόρτη ορού (τα δεδομένα φαίνονται τώρα? S1 αρχείο δεδομένων? Φύλλο «Ορός»). Μια ανάλυση των κύριων συστατικών (PCA) διεξήχθη επίσης, αλλά, όπως αναμένεται, δεν υπάρχουν σημαντικές παγκόσμιες διαφορές ήταν εμφανείς μεταξύ της LE και φυσιολογικά δείγματα ορού, καθώς όλα τα σημεία των δεδομένων κοόρτη LE και φυσιολογικό ήταν γενικά μεταξύ διασπείρονται (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα). Σε συνδυασμό με τη συνολική ανάλυση των λιπιδίων του ορού που περιγράφονται παραπάνω, αυτά τα δεδομένα δείχνουν ότι η παρουσία μεγάλων ποσοτήτων ΑΤ εντός των LE-επηρεάζονται άκρα του προχωρημένου καρκίνου που σχετίζονται με άκρων ασθενείς LE δεν οδηγεί σε ανιχνεύσιμες διαφορές στα προφίλ ή επίπεδα του κυκλοφορούντος αίματος -Γεννήθηκε λιπίδια, όπως αξιολογείται με τις μεθόδους αυτές. Επιπλέον, το αποτέλεσμα αυτό ευθυγραμμίζεται στενά με τη συνήθη αφθονία των πρωτεϊνών μεταφοράς ορού απολιποπρωτεΐνης Α1 και Β στο LE ορού (που αναφέρεται παραπάνω, Σχήμα 2).

Λεμφοίδημα λιπώδη ιστό (AT) lipidomic ανάλυση

Παρά την έλλειψη διαφοράς των συνολικών λιπιδίων ορού, παρέμεινε άγνωστο αν το ίδιο το LE ΑΤ αποτελούνταν από ασυνήθιστες λιπιδικό προφίλ μόριο, ή μία τροποποιημένη σχετική αφθονία σε σύγκριση με το φυσιολογικό ανθρώπινο σκέλος ΑΤ. Ως εκ τούτου, μοριακά ανέλυσε τόσο το στερεό AT ( «λίπος») που περιλαμβάνει ανέπαφα λιποκυττάρων πλούσια ιστού, καθώς και την ήδη κυκλοφορήσει πετρελαίου λιποκυττάρων (πετρέλαιο, δηλαδή το λίπος? Αναφέρεται στο εξής ως «λάδι») που υπάρχουν στο lipoaspirates που λαμβάνονται από ασθενείς LE που υποβάλλονται σε λιποαναρρόφηση χειρουργική επέμβαση, και σε σύγκριση αυτό στο έλαιο λίπος και το λίπος που υπάρχει στα lipoaspirates ελήφθησαν από υγιή άτομα που υποβάλλονται σε liposurgery για αισθητικούς λόγους. Αξίζει να σημειωθεί ότι όλα τα δείγματα lipoaspirate ήταν ανατομικά-συμφωνημένα, δηλαδή όλα ήταν χέρι ή το πόδι AT και τόσο το στερεό σε λίπος και λάδι λίπος, αναλύθηκαν ξεχωριστά με GC-MS και LC-MS. Αυτό επέτρεψε την ταυτόχρονη ταυτοποίηση και σχετική ποσοτικοποίηση (log μετασχηματισμένα διάμεση κανονικοποιημένη σχετική αφθονία) ορισμένων 275 μόρια με βάση τα λιπίδια, μεταξύ των οποίων: 25 διακυλογλυκερίδια, 66 τριακυλογλυκερίδια, 34 λιπαρά οξέα, και 150 φωσφολιπίδια των διάφορων κατηγοριών, σε λίπος και το λίπος λάδι σε δείγματα ανθρώπινου lipoaspirate ιστού.

Πρώτον, χρησιμοποιήσαμε LC-MS για τον εντοπισμό διακυλογλυκερίδια (DAG) και τριακυλογλυκεριδίου (TAG) λιπίδια τόσο LE και φυσιολογικό άκρο AT. Παρά το γεγονός ότι το μεγαλύτερο μέρος του ΚΑΓ και ετικέτες που εντοπίστηκαν σε λάδι και το λίπος του ανθρώπινου LE AT ήταν παρόντες σε παρόμοιες αφθονία που ανιχνεύεται σε κανονικό σκέλος ΑΤ (δηλαδή μεταξύ -0,1 έως 0,1 μειωθεί ή να αυξηθεί σύγκριση LE σε κανονική), υπήρξαν διάφορες είδη λιπιδίου που ατομικά στατιστικά σημαντικά αυξηθεί ή να μειωθεί σε LE σύγκριση με τους υγιείς ιστούς (Σχήμα 3Α και 3Β, και File S2 Data). Ενώ αυτές οι αλλαγές ήταν κάθε αρκετά μικρό, φαίνεται ότι οι περισσότερες από τις αυξήσεις ήταν σε ετικέτες με πολυακόρεστα λιπαρά οξέα, και ιδίως εκείνες που περιέχουν 3 ή περισσότερους ακόρεστους άνθρακες (λευκές ράβδοι), ιδιαίτερα το εικοσιπεντανοϊκό οξύ C20: 5 (γκρίζες ράβδοι), τόσο σε LE AT λίπος και λάδι (Σχήμα 3Α και 3Β). Επιπλέον, όταν τα δεδομένα αυτά συνδυάστηκαν μαζί φάνηκε ότι μπορεί να υπάρχει μια συνολική αύξηση σε ετικέτες που περιέχουν λιπαρό οξύ πολυ-ακόρεστα και η συνακόλουθη μείωση των λιγότερο κορεσμένα λίπη, όπως δι-, μονο-, ή πλήρως ακόρεστα λίπη, LE AT (Σχήμα 3C). Ωστόσο, σε θηλαστικά, C20 πολυ-ακόρεστα λιπαρά οξέα γενικά συντίθενται από διαιτητικές εφοδιασμός λινολεϊκό οξύ (C18: 2) και άλφα-linenic οξύ (C18: 3) μέσω της δράσης των δεσατουρασών λιπαρών οξέων και ελονγκασών, και το εγγύς ένζυμο που παράγει τόσο C20 αραχιδονικό οξύ: 4 και C20 εικοσιπεντανοϊκό οξύ: 5, από τους αντίστοιχους προδρόμους τους C18: 2 και C18: 3, αντίστοιχα, είναι η δέλτα-5-δεσατουράσης. Αντίθετα, μονο-κορεσμένα λιπαρά οξέα εξαρτώνται από την δεσατουράσες στεαροϋλ-CoA. Έτσι, παραμένει ασαφές αν αυτές τις μικρές μεμονωμένες αλλαγές σε συγκεκριμένες Δ.Σ.Ε. και οι ετικέτες είναι βιολογικά σημαντικό δηλαδή αν (i) να αντανακλούν πραγματικές αλλαγές στο μεταβολισμό των λιπιδίων, όπως η αύξηση της δέλτα-5-αποκορεστάσες και /ή μειωμένη στεαροϋλ-CoA δεσατουράσης, ότι, στη συνέχεια ή ταυτόχρονα να οδηγήσει σε αυξημένη παραγωγή του αντι-φλεγμονώδη C20 εικοσιπεντανοϊκό οξύ ωμέγα-3 που βασίζεται σε: 5, ή εναλλακτικά (ii) κατά πόσον αυτές οι μικρές επιδράσεις είναι όλα απλά μέσα σφαίρες της διακύμανσης-ειδικά φόντο λόγω του μικρού μεγέθους τους και της γενικής έλλειψης στατιστικής σημαντικότητας μετά από ανάλυση διόρθωση BH. Παρ ‘όλα αυτά, μια λογική αρχική συμπέρασμα είναι ότι το LE ΑΤ εμφανίζεται να έχει ένα εντυπωσιακά παρόμοια lipidomic προφίλ σε μη-LE ΑΤ (εκτός από την υψηλότερη περιεκτικότητα σε C20: 5 που περιέχει TAG), και ότι το λάδι LE που απελευθερώνεται από ρήξη λιποκύτταρα μοιάζει το λάδι που υπάρχει μέσα σε άθικτο AT λιποκύτταρα (λίπος) -τουλάχιστον σε σχέση με το DAG και το περιεχόμενο TAG. Αυτό το συμπέρασμα υποστηρίζεται περαιτέρω από παγκοσμίως κανονικοποιημένα δεδομένα ανάλυση βασικής συνιστώσας (PCA) λαμβάνοντας υπόψη όλες τις 66 DAG και ετικέτες, δεδομένου ότι τα σημεία δεδομένων LE λίπος και το λάδι ήταν ελαφρώς χωρίζονται μακριά από τα δείγματα μη-LE (S1 Σχήμα).