Αφηρημένο

μικροπεριβάλλον αναγνωρίζεται όλο και περισσότερο ως κρίσιμο ρυθμιστή της εξέλιξης του καρκίνου. Σε αυτή τη μελέτη, αναγνωρίσαμε πρώιμες αλλαγές στο μικροπεριβάλλον που συμβάλλουν στην κακοήθη πρόοδο. Η έκθεση ανθρώπινων βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων (BEAS-2Β) προς μεθυλνιτροζουρία (MNU) προκάλεσε μία μείωση στην τοξικότητα των κυττάρων και την αύξηση της ικανότητας κλωνογονική όταν η θερμοκρασία κατέρχεται από 37 ° C έως 28 ° C. Υποθερμία-επωάστηκαν media λιποκυττάρων προωθούνται πολλαπλασιασμό σε Α549 κύτταρα. Αν και ένα υποθερμική περιβάλλον θα μπορούσε να αυξήσει μετρήσεις όγκου ουρεθάνη που προκαλείται και Lewis καρκίνου του πνεύμονα (LLC) μετάσταση σε πνεύμονες από τρείς φυλές των ποντικών, η αύξηση του μεγέθους του όγκου θα μπορούσε να διακριθεί μόνο σε παχύσαρκα ποντίκια στεγάζονται σε υποθερμία. Ομοίως, coinjections χρησιμοποιώντας διαφοροποιημένα λιποκύτταρα και κύτταρα Α549 προωθούνται ανάπτυξη όγκου σε αθυμικούς γυμνούς ποντικούς όταν λιποκύτταρα καλλιεργήθηκαν στους 28 ° C. Αντιστρόφως, η απομάκρυνση του λίπους κατέστειλε την ανάπτυξη του όγκου σε παχύσαρκα ποντίκια C57BL /6 εμβολιάστηκαν με κύτταρα LLC. Περαιτέρω μελέτες δείχνουν υποθερμία προωθεί ένα MNU επαγόμενη επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβασης (ΕΜΤ) και προστατεύει το κύτταρο όγκου έναντι του ανοσοποιητικού ελέγχου από τον TGF-β1 αυξητική ρύθμιση. Βρήκαμε επίσης ότι η ενεργοποιημένη λιποκύτταρα πυροδοτήσουν τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του όγκου με την αύξηση είτε ΤΝΡ-α ή των επιπέδων VEGF. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η υποθερμία ενεργοποιεί τα λιποκύτταρα να τονώσει ώθηση του όγκου και παίζουν κρίσιμο ρόλο καθοριστικό στην εξέλιξη της κακοήθειας

Παράθεση:. Du G, Zhao Β, Zhang Υ, Sun Τ, Liu W, Li J, et al. (2013) Υποθερμία Ενεργοποιεί λιπώδη ιστό για να προωθήσει την κακοήθη καρκίνο του πνεύμονα Εξέλιξη. PLoS ONE 8 (8): e72044. doi: 10.1371 /journal.pone.0072044

Συντάκτης: Vladimir V. Kalinichenko, Ιατρικό Κέντρο Νοσοκομείο Σινσινάτι των παιδιών, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 24 Απρίλη, 2013? Αποδεκτές: 3 Ιουλ 2013? Δημοσιεύθηκε: 27 Αυγούστου 2013

Copyright: © 2013 Du et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου. Η μελέτη αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Νο 81173094), το κοινό ταμείο κατασκευής του Πανεπιστημίου Χενάν από την επαρχία Henan και το Υπουργείο Παιδείας της Κίνας (Αρ SBGJ090704) και του εκπαιδευτή Νέοι πυρήνα της επαρχίας Henan , Κίνα (Αρ 2010GGJS-025)

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

από την υπογραφή του νόμου περί εθνικής Καρκίνου το 1971, ο καρκίνος έχει παραμείνει μια σημαντική αιτία θανάτου παρά τη σημαντική πρόοδο στην κατανόηση της βιολογίας και της θεραπείας [1] της. Κατά τη διάρκεια των τελευταίων δεκαετιών, η πρόοδος στον εντοπισμό aberrances σε ογκογονίδια και ογκοκατασταλτικά γονίδια εντός επιθηλιακών κυττάρων του όγκου που προκαλείται το ρόλο του μικροπεριβάλλοντος στην ογκογένεση να παραβλέπεται [2]. Η φαινοτυπική και γονοτυπική ανωμαλίες στα κύτταρα του καρκίνου των επιθηλιακών δεν μπορεί οριοθετηθούν πλήρως φαινοτύπους του όγκου και την κλινική συμπεριφορά [3], και στην πραγματικότητα, υπάρχουν αυξανόμενα στοιχεία ότι το μικροπεριβάλλον συμμετέχει ενεργά σε όλη την έναρξη του καρκίνου, την εξέλιξη και τη μετάσταση [4]. Πολυάριθμες μελέτες έχουν δείξει ότι τα καρκινικά κύτταρα που φέρουν ήδη κρίσιμη γενετικές μεταβολές μπορούν να παραμείνουν αδρανείς ή να ενεργοποιηθεί για να πολλαπλασιαστούν από τις αλλαγές που συμβαίνουν σε μικροπεριβάλλον τους [5]. Υπάρχουν επίσης ισχυρές ενδείξεις ότι η μικροσκοπική όγκοι είναι συνήθως παρόντες σε ενήλικες, με τη μορφή των αδρανών βλαβών [6]. Μια μετέπειτα μετάβαση από το λήθαργο της επιθετικής του πολλαπλασιασμού μπορεί να διαρκέσει αρκετά χρόνια για δεκαετίες. Έτσι, οι βλάβες όγκου μπορεί να διατηρηθεί σε αρχικά μη επιτρεπτές μικροπεριβάλλον αλλά μετάβαση σε μια πολλαπλασιαστική κατάσταση λόγω εξωγενών αλλαγές μέσα στο μικροπεριβάλλον [7]. Μια καλύτερη κατανόηση των μηχανισμών που ρυθμίζουν τον διακόπτη δεν θα επέτρεπε την ακριβέστερη ταυτοποίηση ασθενών που μπορούν να ωφεληθούν από συστημική θεραπεία, αλλά μπορεί επίσης να οδηγήσει στην ανάπτυξη περισσότερο στοχευμένων θεραπειών για την αναστολή των σημάτων που προάγουν την εξέλιξη της νόσου και μόνο. ​​

Πρόσφατες μελέτες έχουν διατυπωθεί ότι οι όγκοι μπορούν να τεθούν υπό έλεγχο για μεγάλες χρονικές περιόδους μέσα από μια δυναμική ισορροπία που έχει ως αποτέλεσμα την προοδευτική απώλεια της ανοσογονικότητας με κύτταρα όγκου [8]. την έναρξη του όγκου πρέπει πρώτα να διαφύγουν εξαφάνισης σε μια στοχαστική διαδικασία πολλαπλασιασμού γέννησης-θανάτου. Στη συνέχεια, τα μετασχηματισμένα κύτταρα να υπάρχουν σε μία κατάσταση ηρεμίας για πολλά χρόνια ή, εναλλακτικά, ως αδρανοποιημένα κύτταρα όγκου του οποίου κυτταρικό πολλαπλασιασμό εξισορροπείται από την απόπτωση. Τέλος, η αφανής όγκος μπορεί να προχωρήσει σε κλινική νόσο άπαξ μικροπεριβάλλον αυξητικού παράγοντα-ευνοϊκές ενεργοποιείται για να ενισχύσει την ανάπτυξη του όγκου [9]. Οι κρίσιμες ωθήσεις που ρυθμίζουν αυτή τη μετάβαση από αδρανείς καρκινικά κύτταρα σε πολλαπλασιαστική αυτά που οδηγούν στην εξέλιξη της νόσου παραμένουν άγνωστες.

Υποθέσαμε ότι η υποθερμία ευνοεί τη μετάβαση των κυττάρων του επιθηλίου-μεσεγχυματικών και τονίζει αποπτωτικών διαφυγής. Υποθερμία συνδέεται συχνά με μειωμένη άμυνα του ξενιστή και παρέχει μια προσαρμοστική μηχανισμός για την ανεκτικότητα σε πίεση, επιτρέποντας στα κύτταρα να επιβιώσουν μη φυσιολογικές συνθήκες [10]. Ωστόσο, είναι επίσης πιθανό ότι το ίδιο προσαρμοστικός μηχανισμός μπορεί τελικά να ευνοήσει τον κακοήθη μετασχηματισμό παρεμβαίνοντας με μονοπάτια που ρυθμίζουν την ανάπτυξη των κυττάρων και την απόπτωση. Η διπλή χαρακτήρας αυτής της απάντησης υποστηρίζεται από την αύξηση στο σχηματισμό του μικροπυρήνες πολυχρωματικών ερυθροκυττάρων στο μυελό των οστών ποντικού υπό μακρόχρονη υποθερμία [11], ενώ οι χαμηλές θερμοκρασίες έχουν επίσης αποδειχθεί ότι προστατεύει τα κύτταρα των θηλαστικών από την απόπτωση που ξεκίνησε από διάφορα ερεθίσματα [12 ].

Σας εξέτασε επίσης άλλους παράγοντες που μπορεί να παίζουν σημαντικό ρόλο στη μετάβαση από το καρκινικό κύτταρο λήθαργο στον πολλαπλασιασμό. Επειδή η παχυσαρκία σχετίζεται με τον αυξημένο κίνδυνο και κακή πρόγνωση για πολλούς τύπους καρκίνου και επειδή κρύο έκθεση θεωρείται ένας κρίσιμος παράγοντας για την ενεργοποίηση λιπώδη ιστό [13] – [15], προτείναμε ότι ο συνδυασμός ενός υποθερμική περιβάλλοντος και ενεργοποίηση λιπώδη ιστό προωθεί την κακοήθη εξέλιξη. Για να ελέγξει την υπόθεση αυτή, παρατηρήσαμε τις σχετικές συνεισφορές της υποθερμίας και ενεργοποίηση του λιπώδους ιστού στην καρκινογένεση με στόχο (α) τον προσδιορισμό των πρώιμες αλλαγές στο μικροπεριβάλλον που συμβάλλουν στην εξέλιξη της κακοήθειας και (β) την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στρατηγικών που αντιμετωπίζουν το μικροπεριβάλλον για την εξάλειψη όγκους ή, τουλάχιστον, να διατηρήσει το λήθαργο του όγκου και να μετατρέψει τον καρκίνο σε μια χρόνια νόσο.

Αποτελέσματα

Η υποθερμία κατέστειλε MNU-μεσολάβηση κυτταροτοξικότητας και προωθείται κλωνογονικού ικανότητα των κυττάρων in vitro

Η BEAS-2Β κυτταρική γραμμή είναι ένα λογικό μοντέλο κύτταρο για τοξικολογικές μελέτες, διότι εκφράζει χαρακτηριστικά διαφοροποίηση ανθρώπινων μοσχευμάτων πνεύμονα [20]. MNU είναι ένας άμεσος δράσης αλκυλιωτικό μέσο που αλληλεπιδρά με το DNA. Σε φυσιολογικό ρΗ, MNU αποσυντίθεται αυθόρμητα για να σχηματίσει ένα ιόν καρβονίου το οποίο είναι ικανό αλκυλίωση των ατόμων αζώτου και οξυγόνα των βάσεων του DNA με μία αντίδραση SNL [21]. Αυτή η χημική αρχικά διαλύθηκε σε 100 φορές την επιθυμητή συγκέντρωση σε κιτρικό ρυθμιστικό (ρΗ 4.5) και κατόπιν αραιώνονται καταλλήλως σε μέσο άνευ ορού. Όσον αφορά την ιδιοκτησία του θερμοευκίνητο MNU, η αλκυλίωση συνεχίστηκε καθ ‘όλη τη διαστήματος έκθεσης 2-h, η οποία έχει αποδειχθεί ότι κάτω από τις συνθήκες, ο αριθμός των κενών ανιχνεύονται σε εκκολαπτόμενες DNA αλκυλιωμένου κύτταρα δεν επηρεάστηκαν [22]. Τα κύτταρα θηλαστικών καλλιεργούνται in vitro είναι σε θέση να ανακτήσει από το κρύο το άγχος. Οι κυτταρικές δομές που εξετάστηκαν ήταν, σε γενικές γραμμές, καλά διατηρημένο κατά τη διάρκεια της ήπιας υποθερμίας (27-32 ° C), αλλά έγινε όλο και περισσότερο διαταράσσεται σε χαμηλές θερμοκρασίες (4-10 ° C) [23]. Με βάση την μέγιστη ανοχή σε χαμηλή θερμοκρασία η οποία εξακολουθεί να επιτρέπεται η πλειοψηφία των κυττάρων να επιβιώνουν και να πολλαπλασιάζονται αν και η ανάπτυξη των κυττάρων μειώθηκε, εξετάσαμε τις επιδράσεις ενός υποθερμική περιβάλλοντος (28 ° C) σε ανθρώπινα βρογχικά επιθηλιακά κύτταρα (BEAS-2Β) που εκτίθεται in vitro στην άμεση μεθυλνιτροζουρία καρκινογόνο παράγοντα (MNU). Η μείωση της θερμοκρασίας της καλλιέργειας από 37 ° C έως 28 ° C κατέστειλε σημαντικά MNU κυτταροτοξικότητα σε καλλιεργημένα κύτταρα BEAS-2Β σε περίοδο 48-h (Σχ. 1Α). Αυτή η παρατήρηση υποστηρίζεται από ΡΙ και αννεξίνης V-FITC χρώση (Εικ. 1 Β και C). Απροσδόκητα, σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β, η μείωση της θερμοκρασίας από 37 ° C έως 28 ° C αυξήθηκε κλωνογόνο ικανότητα (Εικ. 1ϋ).

A. Υποθερμία κατέστειλε MNU που προκαλείται BEAS-2Β κυτταροτοξικότητα εξετάστηκε από ΜΤΤ. Β και C. Η υποθερμία μειώθηκε MNU επαγόμενη απόπτωση BEAS-2Β κυττάρων εξετάστηκε με PI και χρώση αννεξίνης V-FITC, πρώιμη απόπτωση και αργά απόπτωση προσδιορίστηκαν ως το ποσοστό των αννεξίνης V + /ΡΙ- κύτταρα και αννεξίνης V + /ΡΙ + κύτταρα, αντίστοιχα. Δ Υποθερμία προωθείται MNU που προκαλείται BEAS-2Β κλωνογονικού ικανότητα των κυττάρων εξετάζεται από μαλακό δοκιμασία άγαρ. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt? 0.001, σε σύγκριση με 37 ° C κατάσταση (n = 5)

Η

Η βλάβη του DNA που προκαλείται από MNU θεωρείται ότι είναι χαρακτηριστικό των αλλοιώσεων που παράγονται σε DNA με αλκυλιωτικούς παράγοντες.. Φλεγμονώδεις αντιδράσεις διαδραματίζουν ζωτικό ρόλο σε διάφορα στάδια της χημικής καρκινογένεσης, συμπεριλαμβανομένης της έναρξης, της εξέλιξης και της επανάληψης. TNF-α έχει δειχθεί πρόσφατα να προωθήσει την ανάπτυξη του όγκου σε πειραματικά καρκινογένεση, και ΤΟΡ-β έχει αποδειχθεί ότι ελαττώνει την κατά του όγκου ανοσοαπόκριση μέσω της επαγωγής των ρυθμιστικών Τ κυττάρων σε αυθόρμητη και της φλεγμονής που σχετίζεται καρκίνο [24]. Ωστόσο, η υπερβολική φλεγμονή μπορεί να παίξει έναν ευεργετικό ρόλο σε απόκριση σε βλάβη του όγκου αν και οι επιδράσεις της χρόνιας φλεγμονής είναι επαρκείς για να κινήσει τον μετασχηματισμό του καρκίνου και την ανάπτυξη [25]. Προφανώς, η κρίσιμη ισορροπία μεταξύ του ΤΟΡ-β και ΤΝΡ-α θα μπορούσε να έχει ρόλο κλειδί στην μεταμόρφωση του όγκου. Για την καλύτερη κατανόηση της σχέσης μεταξύ ενός υποθερμία περιβάλλον και κυτταροτοξικότητα, θα πραγματοποιηθεί ένας κομήτης δοκιμές ELISA δοκιμασία και TNF-α και ΤΟΡ-β1. Μια σημαντική μείωση της συνολικής βλάβης του DNA, παρατηρήθηκε σε κύτταρα BEAS-2Β που εκτίθενται σε 50 μΜ MNU στους 28 ° C σε σύγκριση με 37 ° C (Σχ. 2Α και Β). Είναι ενδιαφέρον ότι, η μείωση της θερμοκρασίας από 37 ° C έως 28 ° C μειώνεται ΤΝΡ-α επίπεδα και τα αυξημένα επίπεδα του ΤΟΡ-β1 σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β (Σχήμα 2C και D). Εξουδετέρωση του ΤΝΡ-α από ένα ανασταλτικό αντίσωμα μειωμένη MNU επαγόμενη κλωνογόνο ικανότητα και ακύρωσε MNU επαγόμενη κυτταροτοξικότητα (Σχ. 3Α και Β). Αντιστρόφως, η εξουδετέρωση του ΤΟΡ-β1 οδήγησε σε λίγες αποικίες κυττάρων και προωθείται MNU επαγόμενη κυτταροτοξικότητα (Σχ. 3Α και Β). Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι η ισορροπία μεταξύ των TGF-β1 και TNF-α προσδιορισμό υπόλοιπο των κυττάρων (κλίση προς TGF-β1), θάνατο (κλίση προς τον TNF-α), ή πολλαπλασιασμό (ισορροπία).

Α και Β υποθερμία μειώθηκε MNU που προκαλείται BEAS-2Β demage DNA των κυττάρων εξετάζεται από κομήτη δοκιμασία. Γ Υποθερμία αυξημένο επίπεδο ΤΟΡ-β1 εξετάστηκαν με ELISA σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β. Δ Υποθερμία μειωμένο επίπεδο ΤΝΡ-α εξετάστηκε με ELISA σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt? 0.001, σε σύγκριση με 37 ° C κατάσταση (n = 5)

Η

Α.. Εξουδετέρωση του ΤΝΡ-α ή ΤΟΡ-β1 από το κλείδωμα αντίσωμα μείωσε MNU επαγόμενη κλωνογόνο ικανότητα κάτω από 37 ° C και 28 ° C κατάσταση. B. Εξουδετέρωση του ΤΝΡ-α καταργηθεί MNU επαγόμενη κυτταροτοξικότητα αλλά εξουδετέρωση του ΤΟΡ-β1 προωθείται MNU επαγόμενη κυτταροτοξικότητα κάτω από 37 ° C και 28 ° C κατάσταση. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt? 0.001, σε σύγκριση με τον έλεγχο MNU κάτω από τις ίδιες συνθήκες (n = 5)

Η

Η υποθερμία-επωάζονται μέσα ενημέρωσης λιποκυττάρων προωθεί κλωνογονικού ικανότητα MNU επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2B και τον πολλαπλασιασμό. στο Α549 και κύτταρα LLC

όγκων που σχετίζονται με στρώμα χαρακτηρίζεται από επίμονη, μη επίλυση φλεγμονώδη αντίδραση που ενισχύει την αγγειογένεση των όγκων, την ανάπτυξη και μετάσταση. Οι φλεγμονή καύσιμα που σχετίζονται με όγκους λιπώδη ιστό η ανάπτυξη των κακοήθων κυττάρων δρώντας ως πλησίον πηγή για αγγειακό ενδοθήλιο και ενεργοποιημένα προ-φλεγμονώδη κύτταρα [26]. Η υπερπλασία λιπώδης ιστός είναι ένας θεμελιώδης απόκριση σε χαμηλή θερμοκρασία περιβάλλοντος, την ίδια στιγμή, το μείζον φλεγμονώδης αντιποκινών, TNF-α και VEGF, αυξημένη στο λιπώδη ιστό [27], [28]. Με βάση αυτές τις παρατηρήσεις, δοκιμάσαμε την υπόθεση ότι ο συνδυασμός ενός υποθερμική ενεργοποίησης περιβάλλον και λιποκυττάρων καθορίζει κακοήθη πρόοδο. Παρατηρήσαμε πρώτα τη συμβολή των λιποκυττάρων να εξέλιξης του καρκίνου. Τα υπερκείμενα (μέσα) από διαφοροποιημένα λιποκύτταρα καλλιεργήθηκαν στους 37 ° C και 28 ° C χρησιμοποιήθηκαν για την κατεργασία των κυττάρων (τελική συγκέντρωση αραιώθηκε δέκα φορές). Όπως φαίνεται στο σχήμα 4, υποθερμία-επωάστηκαν media λιποκυττάρων προωθούνται κλωνογονικού ικανοτήτων MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β και πολλαπλασιασμό σε Α549 και κύτταρα LLC (Εικ. 4Α και Β). Σε αυτή τη μελέτη, επιλεγμένα Α549 και LLC κύτταρα επειδή Α549 κυτταρική γραμμή προέρχεται από κυψελιδικά επιθηλιακά κύτταρα τύπου II και LLC κυτταρική σειρά προήλθε αυθόρμητα ως καρκίνωμα του πνεύμονα ενός ποντικού C57BL, τα οποία εκφράζουν τα περισσότερα από τα κύρια συστατικά στα πνευμονικά επιθηλιακά κύτταρα [20], [29]. Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογηθεί εάν υποθερμία ενεργοποιούμενη λιποκύτταρα προωθείται μεταμόρφωση του όγκου των φυσιολογικών κυττάρων (BEAS-2Β) και επιτάχυνε την παρουσία του όγκου.

A. Υποθερμία-επωάστηκαν media λιποκυττάρων προωθείται κλωνογόνο ικανότητες με δοκιμασία μαλακού άγαρ κάτω από την ίδια συνθήκη θερμοκρασίας σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β. Β Υποθερμία-επωάστηκαν λιποκυττάρων μέσων προωθείται πολλαπλασιασμός εξετάστηκε με ΜΤΤ σε Α549 και LLC κύτταρα στους 37 ° C. C. Τα επίπεδα του ΤΝΡ-α και VEGF ήταν αυξημένα σε υποθερμία-επωάστηκαν media λιποκυττάρων. Δ προσθήκη του TNF-α ή VEGF σε μέσα μαζικής ενημέρωσης των λιποκυττάρων που προωθούνται κλωνογονικού ικανότητες και TNF-α και τον αποκλεισμό του VEGF αντισώματα απέτρεψε τα κλωνογονικού ικανότητες σε σχέση με τον έλεγχο κάτω από την ίδια κατάσταση του μέσου. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt?. 0.001, σε σύγκριση με νορμοθερμία-επωάζονται μέσα μαζικής ενημέρωσης των λιποκυττάρων (n = 5)

Η

Στη συνέχεια, θα εξεταστεί η πιθανή συμμετοχή των adipokines, τα οποία είναι γνωστό ότι ρυθμίζουν φυσιολογικά ενεργειακό ισοζύγιο. Βρήκαμε ότι τα επίπεδα του ΤΝΡ-α και VEGF ήταν σημαντικά αυξημένα σε υποθερμία-επωάστηκαν media λιποκυττάρων σε σύγκριση με νορμοθερμία-επωάστηκαν μέσων λιποκυττάρων (Εικ. 4C). Για να εξακριβωθεί αν ο ΤΝΡ-α και VEGF παίξει λειτουργικούς ρόλους σε υποθερμία ενεργοποιούμενη λιποκύτταρα, εξετάσαμε την επίδραση της προσθήκης ή εξουδετέρωση αυτών των παραγόντων στην κλωνογονική ικανοτήτων MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β. TNF-α και τον αποκλεισμό του VEGF αντισώματα εμπόδισε τους κλωνογόνο ικανότητες (Εικ. 4D). Αντιστρόφως, η προσθήκη του ΤΝΡ-α ή VEGF σε μέσα λιποκυττάρων προωθείται κλωνογόνο ικανότητες (Εικ. 4D). Επιπλέον, οι επιδράσεις του TNF και αποκλεισμός του VEGF φαίνεται να είναι αναλογική σε όλες τις ομάδες, συμπεριλαμβανομένων των ελέγχων, αυτό implys ότι ο TNF-α και αποκλεισμός του VEGF δρουν ανεξάρτητα από το εμπλουτισμένο μέσο. Ωστόσο, η κλωνογονική προώθηση της υποθερμίας-επωάστηκαν media λιποκυττάρων επίσης συσχετίστηκε σημαντικά με την έκφραση του ΤΝΡ-α και VEGF, ως εκ τούτου, συμπεραίνουμε ότι η υποθερμία μπορεί να ενεργοποιήσει λιποκύτταρα για την προώθηση της εξέλιξης του καρκίνου εν μέρει από την αύξηση των επιπέδων του TNF-α και VEGF.

Μια υποθερμία περιβάλλον ενεργοποιηθεί λιποκύτταρα και προώθησε τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών

η συσσώρευση μεταλλάξεων μπορεί να ενισχύσει τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου στα όργανα-στόχους ή προκαλούν κυτταρικό θάνατο σε ευαίσθητα ιστούς ή τα κύτταρα, όταν η υπερβολική βλάβη του DNA δεν έχει επισκευαστεί. Αν και MNU επαγόμενη καρκινογένεση μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως οργάνου-ειδική ζωικά μοντέλα για ανθρώπινο καρκίνο [30], δεν θα μπορούσαμε να χρησιμοποιούν αυτό το καρκινογόνο παράγοντα για την πρόκληση καρκίνου του πνεύμονα σε ποντικού. Σε αντίθεση με MNU, παρά τη χαμηλή κυτταροτοξικότητα in vitro, ουρεθάνη έχει μελετηθεί πολύ εκτεταμένα χρησιμοποιηθεί για την επαγωγή του καρκίνου του πνεύμονα σε ποντικούς [31]. Επιπλέον, η κυτταρική γραμμή LLC είναι επίσης ένα καλά καθιερωμένο μοντέλο καρκίνου του ποντικού που χρησιμοποιείται συνήθως ως ένα μεταμοσχεύσιμο μοντέλο κακοήθεια σε συγγενικά C57BL /6 ποντικούς και φαίνεται ιδιαίτερα χρήσιμο για κλινικές ρυθμίσεις [32]. Για την υποστήριξη αυτών in vitro δεδομένα, οι ποντικοί στεγάσθηκαν σε φυσιολογική θερμοκρασία περιβάλλοντος (24 ° C) ή σε υποθερμική περιβάλλον (10 ° C), μετά την είτε εγχύθηκαν ενδοπεριτοναϊκώς με ουρεθάνη στα 800 mg /kg μία φορά την εβδομάδα για 8 εβδομάδες ή εμβολιάσθηκαν υποδορίως με κύτταρα καρκίνου του πνεύμονα Lewis (LLC). Όπως φαίνεται στο Σχ. 5Α και Β, η υποθερμία αυξημένους αριθμούς των πρωτογενών όγκων και μεταστάσεων σε φυσιολογικά και παχύσαρκα ποντίκια. Αν και περιβαλλοντικές υποθερμία προωθείται μετρήσεις όγκου πνεύμονα ουρεθάνη που προκαλείται σε όλες τις φυλές των ποντικών (όλα τα 20 ποντίκια σε κάθε ομάδα ανέπτυξαν όγκους του πνεύμονα), η αύξηση του μεγέθους του όγκου θα μπορούσε να διακριθεί μόνο σε παχύσαρκα ποντίκια που στεγάζεται σε ένα υποθερμική περιβάλλον (Σχ. 5Α). Ομοίως, αν και περιβαλλοντικές υποθερμία προωθείται μεταστατικό κόμβους του πνεύμονα σε όλες τις φυλές των ποντικών εμβολιάστηκαν υποδορίως με κύτταρα LLC (όλα τα 10 ποντίκια σε κάθε ομάδα ανέπτυξε μεταστατικό κόμβους του πνεύμονα), επιταχυνόμενη ανάπτυξη του in situ όγκου θα μπορούσε και πάλι να παρατηρηθεί μόνο σε παχύσαρκα ποντίκια στεγάζονται σε ένα υποθερμία περιβάλλον (Εικ. 5Β). Σε χωριστό σημείωμα, genetic- και παχυσαρκία λόγω δίαιτας ούτε επηρεάζεται απόδοση όγκου ουρεθάνη που προκαλείται ούτε επηρεάζεται εμβολιάστηκαν εξέλιξης του όγκου σε ποντίκια που στεγάζεται σε ένα ορθοθερμικής περιβάλλον (Σχ. 5Α και Β). Για να επαληθεύσετε την περαιτέρω αυτή την παρατήρηση, παχύσαρκα ποντίκια με βουβωνική αφαίρεση λίπους εμβολιάστηκαν με κύτταρα LLC. Λίπος απομάκρυνση μείωσε σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου υποθερμία προκαλούμενη και μετάσταση (Εικ. 5C). Ορός ELISA για ΤΝΡ-α ή VEGF αποκάλυψε ότι ένα υποθερμική περιβάλλον αύξησε σημαντικά τα επίπεδα του TNF-α και VEGF σε παχύσαρκα ποντίκια (Σχ. 5D).

A και B. Η υποθερμία και μόνο αύξηση του αριθμού των πρωτογενών όγκων και μεταστάσεων αλλά δεν είχε καμία επίδραση επί διαμέτρου του όγκου σε φυσιολογικά ποντίκια, ενώ η παχύσαρκα ποντίκια σε σχέση με την κανονική C57BL /6J ποντικοί έδειξαν περισσότερο μετράει όγκου και μεγαλύτερο μέγεθος του όγκου στους 10 ° C αλλά όχι στους 24 ° C στην καρκινογένεση ουρεθάνης και LLC αλλομοσχεύματος, αντίστοιχα. C. Οι λιπαρές ποντίκια απομάκρυνση σε σχέση με παχύσαρκα ποντίκια έδειξαν λιγότερο μεταστατικά κόμβους του πνεύμονα και μικρότερα όγκου situ στους 10 ° C αλλά όχι στους 24 ° C σε LLC αλλομοσχεύματος. D. Το παχύσαρκα ποντίκια σε σχέση με το φυσιολογικό C57BL /6J ποντικοί έδειξαν περισσότερο ορού ΤΝΡ-α και VEGF στους 10 ° C αλλά όχι στους 24 ° C. Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt? 0.001, σε σύγκριση με τα φυσιολογικά ποντίκια στεγάζονται στους 10 ° C και ένα φρεάτιο (#) & lt? 0.001, σε σύγκριση με τα φυσιολογικά ποντίκια στεγάζονται στους 24 ° C (n = 10)

Η

Η έκθεση των ανθρώπων και των τρωκτικών στο κρύο ενεργοποιεί θερμογόνο δράση στο λιπώδη ιστό που θα μπορούσε να αντισταθμίσει την υποθερμία. Η ικανότητα για την παραγωγή θερμότητας μέσω UCP1 μεσολάβηση προσαρμοστική θερμογένεση nonshivering θεωρείται ότι είναι μια κρίσιμη εξελικτική ανάπτυξη που προώθησε την ακτινοβολία των eutherian θηλαστικών σε ψυχρά περιβάλλοντα [33]. Σε αυτή τη μελέτη, υποθερμία περιβάλλοντος (10 ° C), επιλέχθηκε επειδή αυτή ήταν η θερμοκρασία όριο του περιβάλλοντος στην οποία κανένα από τα ζώα που υπέφεραν από κρυοπαγήματα ή οποιεσδήποτε άλλες ανεπιθύμητες παρενέργειες που προκύπτουν από την έκθεση στο κρύο, αν είναι λιγότερο από 7 ° C, αυτό οδήγησε σε πρόωρους θανάτους σε ποντικούς. Κατά τη διάρκεια του πειράματος, η θερμοκρασία του περιβάλλοντος περιορίστηκε σε 8-12 ° C για να εξασφαλίζεται η ομαλή εσωτερική θερμοκρασία του σώματος (& gt? 36 °) από ένα ειδικά μετατραπεί ερμάριο ψυγείο εφοδιασμένο με μια πόρτα perspex και κατάλληλα ράφια. Τα ποντίκια κάτω από υποθερμία όρο έτρωγαν συστηματικά περισσότερο φαγητό διάρκεια του πειράματος και να διατηρείται φυσιολογική σωματική δραστηριότητα.

Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι αν και το δυναμικό Τροπικού του υποθερμία είναι περιορισμένος, αρκεί να προωθήσει καρκινογόνες περιστατικό και ότι τα λιποκύτταρα και μόνο ούτε επιρροές απόδοση όγκου ούτε επηρεάζει την εξέλιξη του όγκου μέχρι να ενεργοποιηθεί από υποθερμία.

υποθερμία προωθεί την επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση που προκαλείται από MNU και προστατεύει το κύτταρο όγκου έναντι του ανοσοποιητικού ελέγχου in vitro

επιθηλιακά μεσεγχυματικά μετάβασης ( EMT) είναι ένας σημαντικός μηχανισμός στην καρκινογένεση [34]. Για την ανάπτυξη όγκων σε πρώιμο στάδιο, η διαφυγή από τις πρώτες γραμμές άμυνας του ανοσοποιητικού επιτήρησης είναι επίσης ένα κρίσιμο βήμα που καθορίζει την επιβίωση ή την καταστροφή [35]. Για να αποδειχθεί περαιτέρω η σχέση μεταξύ ενός υποθερμική περιβάλλον και chemicalcarcinogenesis, παρατηρήσαμε επιδράσεις της υποθερμίας επί MNU- επαγόμενη EMT σε κύτταρα BEAS-2B και CD8 + κύτταρα κυτταροτοξικότητα σε κύτταρα Α549. Οι καλλιέργειες στους 28 ° C, σε σχέση με εκείνους στους 37 ° C, ρυθμίζεται προς τα κάτω επιθηλιακή δείκτη Ε-καδερίνης και ρυθμίζεται προς τα πάνω δείκτες μεσεγχυματικών, όπως βιμεντίνη και ινονεκτίνη, σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β (Σχ. 6Α). Παρομοίως, οι καλλιέργειες στους 28 ° C μείωσε σημαντικά τη μεσολάβηση κυττάρων κυτταροτοξικότητα ποντικού CD8 + σε Α549 κύτταρα (Σχ. 6Β). Από TGF-β1 είναι ένα πολυδύναμο κυτοκίνη που ασκούν τόσο EMT και το ανοσοποιητικό φοροδιαφυγής στα διάφορα στάδια της καρκινογένεσης [36], θέλουμε να γνωρίζουμε αν TGF-β1 παίζει επίσης λειτουργικό ρόλο στην MNU επαγόμενη EMT και στο ανοσοποιητικό μεσολάβηση κυττάρων κυτταροτοξικότητα, εμείς μετρούμενη ΕΜΤ και το ανοσοποιητικό μεσολάβηση κυττάρων κυτταροτοξικότητα σε κύτταρα κατεργασμένα με ένα μπλοκάρισμα ΤΟΡ-β1 αντίσωμα. ΤΟΡ-β1 εξουδετέρωση προωθείται CD8 + Τ κύτταρα κυτταροτοξικότητα σε 37 ° C, αλλά δεν είχε καμία επίδραση που στους 28 ° C (Σχ. 6Α και Β). Αντιστρόφως, η προσθήκη ΤΟΡ-β1 σε κύτταρα προωθούνται ΕΜΤ σε κύτταρα BEAS-2Β και κατέστειλε CD8 + Τ σε κύτταρα κυτταροτοξικότητα σε κύτταρα Α549 (Εικ. 6Α και Β). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η υποθερμία που προκαλείται από EMT, αλλά όχι του όγκου του ανοσοποιητικού φοροδιαφυγής, εξαρτάται από TGF-β1.

Α. ΤΟΡ-β1 εξουδετέρωση σε σχέση και μόνο να MNU κάτω ρυθμισμένα Ε-καδερίνης και ρυθμίζεται αυξητικά μεσεγχυματικών δείκτες επιθηλιακά δείκτη, όπως βιμεντίνη και ινονεκτίνη, και την προσθήκη ΤΟΡ-β1 σε κύτταρα είχαν αντίθετη δράση σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β (η = 5). Β ΤΟΡ-β1 εξουδετέρωση σχέση με τον έλεγχο που προωθούνται με τη μεσολάβηση κυττάρων κυτταροτοξικότητα CD8 + Τ στους 37 ° C και προσθήκη ΤΟΡ-β1 σε κύτταρα CD8 + κατέστειλε προκαλούμενη από κύτταρο κυτταροτοξικότητα σε κύτταρα Α549 (n = 5). Γ ξενομοσχευμάτων συνέγχυση χρησιμοποιώντας κύτταρα Α549 και 28 ° C-καλλιεργημένα λιποκύτταρα αυξήθηκε γρήγορα σε σχέση με Α549 εφάπαξ ένεση (η = 10). D. Ένα συνέγχυση χρησιμοποιώντας είτε ΤΝΡ-α ή VEGF και Α549 κύτταρα προωθούνται ανάπτυξη ξενομοσχεύματος, ενώ προ-καλλιεργημένα λιποκύτταρα από ΤΝΡ-α ή VEGF ανασταλτικό αντίσωμα εμπόδισε την ανάπτυξη ξενομοσχευμάτων Α549 σε σχέση με την απλή ένεση (η = 10). Τα δεδομένα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD. Ένας αστερίσκος (*) & lt?. 0.001

Η

Ενεργός λιποκύτταρα την προώθηση της ανάπτυξης του όγκου

ξενομοσχεύματα Σήμερα ανθρώπινου όγκου είναι το πιο ευρέως χρησιμοποιούμενο μοντέλο για να βοηθήσει στην πρόβλεψη της αποτελεσματικότητας κατά του όγκου σε προκλινικές περιβάλλον και μπορεί να πάντα να παρέχει καλύτερη κατανόηση των πολύπλοκων μηχανισμών που διέπουν την ανάπτυξη και την παθογένεση [37]. Χρησιμοποιώντας το μοντέλο ξενομοσχεύματος Α549, διερευνήσαμε την επίδραση των λιποκυττάρων στην εξέλιξη του όγκου. Όταν διαφοροποιημένα λιποκύτταρα 3T3-L1 καλλιεργήθηκαν στους 37 ° C, ένα συνέγχυση χρησιμοποιώντας λιποκύτταρα και κύτταρα Α549 δεν αποκάλυψε μια προφανής αλληλεπίδραση ξενιστή-όγκου σε πρωτογενείς όγκους σε αθυμικά γυμνά ποντίκια στεγάζονται σε θερμοκρασία δωματίου (24 ° C) (λιποκύτταρα μόνος οδήγησε σε δεν συχνότητα εμφάνισης όγκου). Ωστόσο, ξενομοσχεύματα από συνέγχυση χρησιμοποιώντας λιποκυττάρων και κυττάρων Α549 μεγάλωσε γρήγορα όταν διαφοροποιημένα λιποκύτταρα 3T3-L1 καλλιεργήθηκαν στους 28 ° C για 24 ώρες (Εικ. 6C). Για να αξιολογηθεί περαιτέρω τους ρόλους των TNF-α και VEGF για την ενεργοποίηση των λιποκυττάρων, ελέγξαμε επίσης την επίδραση της προσθήκης αυτών των παραγόντων σε καρκινικά κύτταρα ή εξουδετέρωση αυτών των παραγόντων σε λιποκύτταρα επί ξενομοσχεύματα Α549. Μια ταυτόχρονη έγχυση χρησιμοποιώντας είτε ΤΝΡ-α ή VEGF και Α549 κύτταρα προωθούνται ανάπτυξη ξενομοσχεύματος. Αντιστρόφως, προ-καλλιεργημένα λιποκύτταρα από ΤΝΡ-α ή αντίσωμα αποκλεισμού VEGF εμπόδισε την ανάπτυξη ξενομοσχεύματος (Σχ. 6D). Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι τα ενεργοποιημένα λιποκύτταρα την προώθηση της ανάπτυξης του όγκου.

Συζήτηση

Οι κλινικές και πειραματικές αποδείξεις δείχνουν ότι ανθρώπινους όγκους μπορεί να παραμείνουν για μεγάλο χρονικό διάστημα, όπως μικροσκοπικές αλλοιώσεις σε λανθάνουσα κατάσταση [12]. Μελέτες Επιδημιολογία έχουν δείξει ότι η παχυσαρκία αυξάνει τον κίνδυνο για πολλούς τύπους καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του πνεύμονα [13], [14], [38]. Ωστόσο, παραμένει άγνωστο τι ρόλο παίζουν τα λιποκύτταρα στην μετάβαση από το καρκινικό κύτταρο λήθαργο στον πολλαπλασιασμό και πώς λιποκύτταρα τόνωση κακοήθη εξέλιξη. Εδώ, ερευνήσαμε τους πολλαπλούς τρόπους λιποκύτταρα μπορεί μοναδικά να επηρεάσουν τα χαρακτηριστικά και φαινοτυπική συμπεριφορά των κακοήθων αλλοιώσεων και καρκίνου του πνεύμονα κυττάρων. Η μελέτη μας δείχνει ότι η υποθερμία προωθεί EMT και του όγκου του ανοσοποιητικού φοροδιαφυγής από τον TGF-β1 εξαρτώμενη και ανεξάρτητη τρόπους, αντίστοιχα, και ότι λιποκύτταρα ενεργοποιείται από υποθερμία περιβάλλον οδήγησης κακοήθη εξέλιξη με την αύξηση του TNF-α και τα επίπεδα VEGF.

Η πρόσφατη ανάδυση της μικροπεριβάλλον του όγκου ως ένας κρίσιμος προσδιοριστής στην βιολογία του καρκίνου παραλληλίζεται από το πολλά υποσχόμενο θεραπευτικό δυναμικό που μεταφέρει με το άνοιγμα εναλλακτικές διαδρομές για την καταπολέμηση του καρκίνου [3]. Η πρόοδος του όγκου είναι ένα αργά βήμα στην καρκινογένεση. Η κατανόηση του ρυθμιστικού μηχανήματα αυτού εξέλιξης είναι απαραίτητη για τον έγκαιρο εντοπισμό αλλαγών σε μικροπεριβάλλον που συμβάλλουν στην κακοήθη εξέλιξη και θα μπορούσε να προσφέρει ένα σκεπτικό για την ανάπτυξη νέων παραγόντων για τη στόχευση αδρανοποιημένων κυττάρων όγκου.

κακοήθεις αλλοιώσεις χρειάζονται ανοσολογική διαφυγή και ένα πηγή ενέργειας για την επέκταση. Συμβατικά, η πηγή ενέργειας κινητήρια καρκινικού κυττάρου πολλαπλασιασμού αποτελέσματα από αερόβια γλυκόλυση [39]. Είναι πλέον ολοένα και πιο σαφές ότι προκύπτει καρκίνου ως συνέπεια της απορρύθμισης του μεταβολισμού σε απάντηση σε μια αλλαγμένη κατάσταση της ενέργειας και των ενδοκρινικών παραγόντων [40]. Δεδομένου ότι η ενέργεια αποθηκεύεται κυρίως ως λιπίδια σε λιπώδη ιστό σε διακριτές ανατομικές θέσεις και έκθεση σε ψύχος είναι ένας σημαντικός ρυθμιστικός παράγοντας για την ενεργοποίηση λιπώδη [15], [41], προτείναμε ότι ο συνδυασμός ενός υποθερμική περιβάλλοντος και την ενεργοποίηση των λιποκυττάρων θα παράγει κατάλληλα κόγχες στρωματικά για την εξέλιξη του καρκίνου. Σύμφωνα με την υπόθεσή μας, μια υποθερμική περιβάλλον προωθείται ΤΟΡ-β1 αλλά μειωμένη TNF-α? αυτό μεταφράζεται σε μετάβασης από οξεία φλεγμονή σε χρόνια φλεγμονή και συμβάλλει επίσης στην κακοήθεις αλλοιώσεις. Ενεργός λιποκύτταρα, ωστόσο, που παράγεται TNF-α και VEGF, και τα δύο εκ των οποίων διεγείρουν τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και παρέχει μια πηγή ενέργειας για τον όγκο. Κατά συνέπεια, ο συνδυασμός ενός υποθερμική ενεργοποίησης περιβάλλον και λιποκυττάρων προωθείται κακοήθη πρόοδο. Αυτά τα αποτελέσματα οδήγησαν στην πρόταση ενός νέου καρκινογόνων μοντέλο, που ονομάζεται «κρύο καρκινογένεσης.» Σε αυτό το μοντέλο, η υποθερμική περιβάλλον που δημιουργείται από βλάβη που προκαλείται από ισχαιμία και υποξία παράγει ένα κατάλληλο θέση για καρκινικές βλάβες και, στη συνέχεια, ενεργοποιεί γειτονικά λιποκύτταρα για να παρέχει το πολλαπλασιαστική παράγοντες (όπως ΤΝΡ-α και VEGF) και πλούσια σε ενέργεια θρεπτικές ουσίες (προϊόντα λιπώδη μεταβολικό) για κακοήθη πρόοδο.

Αν και δεν μπορούμε να μετρήσουμε τη θερμοκρασία και το λιπώδη ενεργοποίηση των περιφερειακών ιστών καταστραφεί από έναν καρκινογόνο παράγοντα in vivo, προηγούμενες μελέτες αποκάλυψαν ότι η υποθερμία διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων στο λεπτό έντερο καθώς και στο εγγύς κόλον, όπου έχει μία αντίστοιχα ήπιο συν-καρκινογόνο δράση [42]. Αντιστρόφως, τοπική υπερθερμία για διάφορους τύπους κακοήθων όγκων έχει δείξει ελπιδοφόρα αποτελέσματα κατά του όγκου [43]. Πρόσφατες μελέτες έχουν επίσης δείξει ότι η παχυσαρκία αυξάνει τον κίνδυνο καρκίνου του ενδομητρίου και συνδέεται με υψηλότερα ποσοστά θνησιμότητας στο γενικό πληθυσμό [44], ενώ χειρουργική αφαίρεση των parametrial τακάκια λίπος διεγείρει απόπτωση και αναστέλλει την UVB επαγόμενη καρκινογένεση [45]. Σε συμφωνία με τα ευρήματα αυτά, ένας υποθερμική περιβάλλον σε αυτή τη μελέτη αυξάνει τη χωρητικότητα κλωνογονικού σε MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β, και ενεργοποιημένα λιποκύτταρα προωθούνται κλωνογονικού ικανοτήτων MNU-επεξεργασμένα κύτταρα BEAS-2Β και πολλαπλασιασμό σε Α549 και κύτταρα LLC. Ωστόσο, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι genetic- και παχυσαρκία λόγω δίαιτας μόνος ούτε επηρεάζεται απόδοση ουρεθάνη επαγόμενη όγκου ούτε επηρεάζεται εμβολιάσθηκαν εξέλιξης του όγκου σε ποντίκια που στεγάζεται σε ένα φυσιολογικής θερμοκρασίας περιβάλλοντος, υποδηλώνοντας ότι η παχυσαρκία εξαρτώμενη καρκινογόνο δράση βασίζεται στην υποθερμική ενεργοποίηση.

Οι πρωτεΐνες θερμικού σοκ (Hsps) παίζουν κρίσιμο ρόλο στην ανοχή περιβαλλοντολογικού στρες και σε θερμική προσαρμογής. Αυξημένα επίπεδα ορισμένων HSPs σε καρκινικά κύτταρα θα μπορούσε να έχει μια ανασταλτική δράση επί της απόπτωσης και ως εκ τούτου προστατεύουν τα καρκινικά κύτταρα από το θάνατο. Ταυτόχρονα, τα αυξημένα επίπεδα των HSPs σε καρκινικά κύτταρα θα μπορούσε να αυξήσει την ανοσογονικότητα και ενισχύουν την καταστροφή των καρκινικών κυττάρων από το ανοσοποιητικό σύστημα [46]. Παρά το γεγονός ότι Hsps έχουν επίσης εμπλακεί σε κρύο επιβίωσης, υπάρχει μικρή άμεση απόδειξη στη βιβλιογραφία για την επιβεβαίωση αυτής της σύνδεσης [47]. Ανακάλυψη του ψυχρού επαγόμενο RNA-πρωτεΐνης συνδέσεως (CIRP) σε ινοβλάστες ποντικού υποδηλώνει ότι η καταστολή της ανάπτυξης σε υποθερμικές συνθήκες οφείλεται σε μια ενεργή απόκριση από το κύτταρο και όχι λόγω του παθητικού θερμικές επιδράσεις [48]. Οι αλλαγές γονιδιακή έκφραση που παράγεται από υποθερμία δεν είναι πλήρως γνωστή, αλλά φαίνεται να διαφέρουν με σημαντικούς τρόπους από αυτά που παράγονται από θερμικό σοκ [49]. Σε αυτή τη μελέτη, κάναμε εξετάσει την έκφραση των HSPs ή CIRP, ως εκ τούτου, δεν γνωρίζουμε πώς η υποθερμία επηρεάζει την έκφραση των HSPs ή CIRP in vitro και σε in vivo πειράματα και αν EMT και του όγκου του ανοσοποιητικού φοροδιαφυγής είναι συσχετίστηκε σημαντικά με την έκφραση των HSPs ή CIRP. Είναι πιθανό ότι η αύξηση της ανοσίας κατά του όγκου που προκαλείται από HSPs ή CIRP ανέστρεψε την ανοσοκατασταλτική μικροπεριβάλλον σε υποθερμική ποντίκια, αλλά αυτό παραμένει υποθετικός.

Παρά τις σημαντικές προόδους στην θεραπεία εντοπισμένων κακοηθειών, επανεμφάνιση του όγκου και της μετάστασης παραμείνει η κύρια αιτία θνησιμότητας από καρκίνο [50]. Προκειμένου να βελτιωθεί η επιβίωση των ασθενών με καρκίνο, διάχυτη αδρανείς καρκινικά κύτταρα πρέπει να εξαλειφθεί αποτελεσματικά για την πρόληψη της υποτροπής του όγκου και της μετάστασης. Ωστόσο, με στόχο τα σήματα που ρυθμίζουν τη μετάβαση από το λήθαργο στον πολλαπλασιασμό έχει παρεμποδιστεί από την έλλειψη αναγνώρισης της πρώιμης καρκινογόνες μικροπεριβάλλον [51]. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η υποθερμία και η ενεργοποίηση των λιποκυττάρων παρέχουν ένα ευνοϊκό μικροπεριβάλλον για κακοήθη εξέλιξη, και με στόχο αυτά τα πρώιμα γεγονότα στην υποθερμία και ενεργοποίηση λιπώδη θα μπορούσε να ανοίξει νέες θεραπευτικές στρατηγικές για την αντικαρκινική θεραπεία. Αν και οι ακριβείς μοριακοί μηχανισμοί που υποθερμία ενεργοποιεί στον λιπώδη ιστό παραμένουν άγνωστοι, προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι τα συμπτώματα των ασθενών όγκου μπορεί να ανακουφιστούν σημαντικά και ότι ο όγκος μπορεί ακόμη και υποχωρούν εντελώς μετά από επίμονο υψηλό πυρετό για αρκετές ημέρες [52]. Αυτό επιβεβαιώνει ότι η στόχευση μικροπεριβάλλον για θεραπεία όγκων είναι εξίσου σημαντική με στόχο την παρουσία του όγκου. θεραπείες όγκου θα πρέπει να αποσκοπεί να σταματήσει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων και επίσης να διεγείρει μια ειδική ανοσολογική απόκριση έναντι υπολειμματικής καρκινικών κυττάρων. Η πρόοδος στην κατανόηση τον κεντρικό ρόλο της υποθερμίας στο λιπώδη ενεργοποίηση κάνει υποθερμία και στο λιπώδη ιστό πιθανοί στόχοι για μελέτες υποτροπής και μετάσταση των όγκων στο μέλλον.

Υλικά και Μέθοδοι

Ζώα