Αφηρημένο

Ο καρκίνος των βλαστικών κυττάρων (CSC), το μοντέλο απεικονίζει ότι οι όγκοι είναι ιεραρχικά οργανωμένες και συντηρείται από ΚΕΠ που βρίσκεται στην κορυφή. Οι ΚΕΠ έχουν «που προσδιορίζονται» σε μία ποικιλία όγκων μέσω της δοκιμασίας του όγκου σχηματισμού, κατά την οποία τα καρκινικά κύτταρα χαρακτηρίζονται από ένα ορισμένο δείκτη κυτταρικής επιφάνειας (γνωστή ως δείκτης CSC) ξεχωριστά μεταμοσχεύθηκαν σε ποντικούς με ανοσοανεπάρκεια. Σε αυτές τις δοκιμασίες, τα καρκινικά κύτταρα θετικά, αλλά δεν είναι αρνητικό για το δείκτη CSC (δια του παρόντος ορίζεται ως CSC

+ και CSC

– κύτταρα, αντίστοιχα) έχουν την ικανότητα των όγκων που σχηματίζουν και τη δημιουργία δύο απογόνους. Ωστόσο, εδώ θα δείξουμε ότι η CSC

+ και CSC

– κύτταρα παρουσιάζουν παρόμοια πολλαπλασιασμό των ιθαγενών κρατών. Χρησιμοποιώντας ένα κελί εντοπισμό μέθοδο, έχουμε αποδείξει ότι η CSC

– κύτταρα παρουσιάζουν παρόμοια ογκογένεση και τον πολλαπλασιασμό ως CSC + κυττάρων

όταν ήταν συν-μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια με ανοσοανεπάρκεια. Μέσω σειριακής κατασκευή μονοκύτταρους προέρχεται υποσειρά, έχουμε ακόμη αποδειχθεί ότι η CSC

+ και CSC

– κύτταρα από όγκους δείκτης εκφράζει CSC θα μπορούσε πάντα να δημιουργήσει δύο απογόνους, και τα χαρακτηριστικά τους διατηρούνται ανάμεσα σε διαφορετικές γενιές, ανεξάρτητα από την προέλευση (CSC

+ – προέρχεται ή CSC

– προέρχεται). Τα ευρήματα αυτά δείχνουν ότι ογκογόνα κύτταρα δεν μπορούν να διακριθούν από κοινούς δείκτες CSC μόνο και προτείνουμε προφυλάξεις πρέπει να λαμβάνονται κατά τη χρήση αυτών των δεικτών ανεξάρτητα για τον εντοπισμό του καρκίνου βλαστικών κυττάρων οφείλεται στην φαινοτυπική πλαστικότητα των καρκινικών κυττάρων

Παράθεση:. Huang SD, Yuan Υ, Tang Η, Liu XH, Fu CG, Cheng HZ, et al. (2013) Tumor Cells Θετική και Αρνητική για την Κοινή καρκινικά βλαστικά Μαρκαδόροι κυττάρων είναι ικανός να εκκινήσει την ανάπτυξη των όγκων και την παραγωγή τόσο απογόνων. PLoS ONE 8 (1): e54579. doi: 10.1371 /journal.pone.0054579

Επιμέλεια: Daotai Nie, Southern Illinois University School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 3 Νοεμβρίου του 2011? Αποδεκτές: 13 του Δεκέμβρη, 2012? Δημοσιεύθηκε: 21 Ιανουαρίου του 2013

Copyright: © 2013 Huang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (επιχορηγήσεις 30471718, 30801094, και 30872552) και το Ίδρυμα της Σαγκάης Δημοτική Φυσικών Επιστημών (επιχορήγηση 10140902300). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ένα θεμελιώδες ερώτημα στο πεδίο της έρευνας του όγκου είναι ποια κύτταρα μπορεί να κινήσει όγκους. Δύο μοντέλα έχουν προταθεί για να εξηγήσουν την κίνηση των όγκων [1], [2]. Η κλωνική μοντέλο εξέλιξη (επίσης γνωστό ως το στοχαστικό μοντέλο) συνεπάγεται ότι οι όγκοι περιλαμβάνουν κύτταρα με ίση ογκογόνο δυναμικό και ότι οποιαδήποτε λειτουργική ετερογένεια οφείλεται σε τυχαία ή στοχαστικών επιρροών (ενδογενούς ή εξωγενούς) που μπορεί να μεταβάλλει τη συμπεριφορά των μεμονωμένων κυττάρων του όγκου. Αντιθέτως, ο καρκίνος των βλαστικών κυττάρων (CSC) μοντέλο (επίσης γνωστό ως το μοντέλο ιεραρχία) υποστηρίζει ότι, όπως και φυσιολογικούς ιστούς, τα οποία είναι κυτταρικά ιεραρχίες συντηρείται από βλαστικά κύτταρα, οι όγκοι μπορεί να εξηγηθεί από ιεραρχική οργανισμούς, στους οποίους ΚΕΠ που βρίσκεται στην κορυφή κρατήστε την ικανότητα για την έναρξη του όγκου, αυτο-ανανέωση, και η δημιουργία φαινοτυπικά διαφορετικών κυττάρων χωρίς ή με περιορισμένη ικανότητα πολλαπλασιασμού. Υποστηρικτές του μοντέλου CSC προτείνω ΚΕΠ μπορεί να ευθύνεται για τις συμπεριφορές όγκου όπως μετάσταση [3], [4] και την αντίσταση στη χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία [5] – [9]. Ως εκ τούτου, CSC-στοχευμένη θεραπεία μπορεί να είναι η μελλοντική κατεύθυνση της θεραπείας του όγκου [10] – [13].

Μέσω του προσδιορισμού του όγκου που σχηματίζει με τον οποίο φαινοτυπικά ποικίλα κύτταρα ξεχωριστά μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια με ανοσοανεπάρκεια, CSC ήταν η πρώτη «προσδιορίζονται «στην ανθρώπινη οξεία μυελογενής λευχαιμία (AML), δεδομένου ότι μόνο CD34

+ CD38

– κύτταρα βρέθηκαν να έχουν την ικανότητα για την έναρξη του όγκου, αυτο-ανανέωση, και δημιουργώντας κύτταρα άλλων υποσυνόλων υπό τέτοιες συνθήκες [14]. Από τότε, το πειραματικό μοντέλο ξενομεταμόσχευσης έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως σε μελέτες CSC. Χρησιμοποιώντας διάφορα δείκτες κυτταρικής επιφάνειας, ένα μεγάλο σώμα της βιβλιογραφίας έχει δημοσιευθεί υποδηλώνοντας την ύπαρξη ΚΕΠ σε μία ποικιλία όγκων, όπως χρόνια μυελογενή λευχαιμία (CML) [15], [16], οξεία προμυελοκυτταρική λευχαιμία (APL) [17], [18], του καρκίνου του μαστού [19], γλοιοβλάστωμα [20] – [23], καρκίνος του παχέος εντέρου [24] – [26] και το μελάνωμα [27] – [30].

Ωστόσο, υπάρχει διαμάχη άστατος ως προς το αν η χωρητικότητα του όγκου σχηματισμού των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων ορθά σε προηγούμενες μελέτες [31], [32]. Δεδομένου ότι η αποδοτικότητα της ξενομεταμόσχευσης στην πλειοψηφία των περιπτώσεων είναι σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη για συγγενικά μοσχεύματα, Kelly et al. πρότεινε ότι η ικανότητα σχηματισμού όγκων των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων θα μπορούσε να τεθεί σε κίνδυνο σοβαρά στο περιβάλλον ποντίκι λόγω ειδική για το είδος διαφορές στην συγγένεια (ή αναγνώρισης) κυτοκίνης και αυξητικού παράγοντα υποδοχείς για συγγενή συνδέτες τους [33]. Εκτός αυτού, Quintana et al. εφήρμοσε πιο υψηλά ανοσοκατεσταλμένους στέλεχος ποντικού (NOD /SCID υποδοχέα ιντερλευκίνης-2 γάμμα αλυσίδα null [ll2rg – /-]) για δοκιμασία ξενομεταμόσχευση και διαπίστωσε ότι αυτό θα μπορούσε να αυξήσει δραματικά την ανιχνεύσιμη συχνότητα των κυττάρων με ογκογόνο δυναμικό σε ανθρώπινο μελάνωμα, υποδηλώνοντας ότι η χωρητικότητα όγκου σχηματισμού των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων θα μπορούσε να τεθεί σε κίνδυνο σημαντικά λόγω ανοσολογική επίδραση στην ξένη περιβάλλον [34]. Αυτά μας οδήγησαν στην ερώτηση αν η πολλαπλασιαστική και ογκογόνο ικανότητα των ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων, ιδιαίτερα εκείνη της «μη-ΚΕΠ» θα μπορούσε να είχε υποτιμηθεί στις προηγούμενες μελέτες.

Στην παρούσα μελέτη, αξιολογήσαμε τον πολλαπλασιασμό και απόπτωση των υποθετικών ΚΕΠ (CSC

+ κύτταρα) και μη-ΚΕΠ (CSC

– κύτταρα) σε πρωτογενείς όγκους, καθώς και κυτταρικές γραμμές όγκου με κυτταρομετρία ροής. Σε αντίθεση με τις προηγούμενες εκθέσεις από τις συμβατικές αναλύσεις ξενομεταμόσχευση (μεταμόσχευση CSC

+ και CSC

– κύτταρα ξεχωριστά), όπου CSC

– κύτταρα φαίνεται να έχει καμία ή περιορισμένη πολλαπλασιαστική ικανότητα [1], [35] , [36], βρήκαμε σημαντικές διαφορές σε πολλαπλασιασμό και την απόπτωση μεταξύ των δύο υποσύνολα στην φυσική κατάσταση. Εμείς που απασχολούνται επίσης μια τεχνική κελί εντοπισμού για να ακολουθήσει τον πολλαπλασιασμό, ογκογονικότητα της CSC

+ και CSC

– κύτταρα. Επιλέξαμε να μελετήσουμε τα κύτταρα από διάφορες κυτταρικές γραμμές όγκου αντί των πρωτοπαθών όγκων, η οποία μπορεί να περιλαμβάνει γενετικά διαφορετικό κύτταρα [27], [37]. Διαπιστώθηκε ότι η CSC

– κύτταρα παρουσίασαν παρόμοια πολλαπλασιαστικές και ογκογόνο ικανότητες ως + κύτταρα CSC

όταν συνυπάρχουν οι δύο υποσύνολα. Επιπλέον, και οι δύο υποομάδες θα μπορούσαν να προκαλέσουν CSC

+, καθώς και CSC

– απογόνων, ενώ τα χαρακτηριστικά του CSC

+ (ή CSC

-) κύτταρα διατηρήθηκαν μεταξύ των διαφόρων γενεών, ανεξάρτητα από τους προέλευση (CSC

+ – προέρχεται ή CSC

– προέρχεται). Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι οι δείκτες CSC θα πρέπει να χρησιμοποιούνται με σύνεση να διαφοροποιηθεί καρκινικά βλαστικά κύτταρα από άλλα κύτταρα του όγκου οφείλεται σε φαινοτυπική πλαστικότητα τους.

Αποτελέσματα

Έκφραση των δεικτών CSC ποικίλλει σε μεγάλο βαθμό στο ανθρώπινο πρωτοπαθείς όγκους και κυτταρικές σειρές όγκων

Προηγούμενες μελέτες πρότειναν ότι λευχαιμιογόνος /ογκογόνο κύτταρα περιορίζονται σε ένα σπάνιο πληθυσμό των καρκινικών κυττάρων που εκφράζουν ορισμένοι δείκτες CSC [35], [36]. Χρησιμοποιώντας μια θρυψίνη-free πρωτόκολλο διαχωρισμού (για να διατηρηθεί η ακεραιότητα του επιτόπου), ανιχνεύσαμε το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων (π.χ., CD34

+ CD38

– για AML, APL, και ΧΜΛ, CD44

+ CD24

– για τον καρκίνο του μαστού, CD133

+ για γλοιοβλαστώματος και του παχέος εντέρου, και CD271

+ για μελάνωμα) σε ανθρώπινους πρωτοπαθείς όγκους καθώς επίσης και κυτταρικές γραμμές όγκου με ανάλυση κυτταρομετρίας ροής. Βρήκαμε ότι ένας σημαντικός αριθμός των πρωτογενών όγκων ή κυτταρικών γραμμών όγκου δεν εκφράζουν εκείνους CSC δείκτες (Σχήμα 1Α), η οποία είναι συνεπής με κάποιες άλλες αναφορές [38], [39]. Επιπλέον, πραγματοποιήσαμε ποσοτική RT-PCR και διαπίστωσε ότι τα κύτταρα (τόσο CSC

+ και CSC

-) από τον προσωπικό CSC όγκων που εκφράζουν, αλλά όχι τα κύτταρα από τον προσωπικό CSC μη εκφράζοντα όγκων, εκφράζουν mRNA δείκτη CSC (Εικόνες 1Β-F και Σχήμα S1), γεγονός που υποδηλώνει ότι ο δείκτης CSC εκφράζουν και μη εκφράζοντα όγκοι ενδέχεται να προέρχονται από διάφορους τύπους καρκινικών κυττάρων. Σε πρωτογενείς όγκους και κυτταρικές γραμμές όγκου που εκφράζουν οι ιχνηθέτες CSC, το ποσοστό των δείκτη CSC θετικών κυττάρων ποικίλλουν σημαντικά, που κυμαίνονται από 0,4% σε AML σε τόσο υψηλό όπως 82,7% σε καρκίνο του παχέος εντέρου (Σχήμα 1Α).

(Α) Το ποσοστό των θετικών δείκτη CSC κυττάρων από ανθρώπινα πρωτογενείς όγκους (η = 10 για κάθε τύπο) και κυτταρικές γραμμές όγκου. εναιωρήματα μονών κυττάρων παρασκευάστηκαν, που ακολουθείται από ανάλυση κυτταρομετρίας ροής. Τελείες αντιπροσωπεύουν το ποσοστό των CD34

+ CD38

– κύτταρα AML, APL, και ΧΜΛ, CD44

+ CD24

– κυττάρων στον καρκίνο του μαστού, CD133

+ κύτταρα γλοιοβλαστώματος και του παχέος εντέρου και CD271

+ κύτταρα σε δείγματα μελανώματος. (Β-ΣΤ) Το mRNA δείκτης επίπεδο έκφρασης CSC κυττάρων (CSC

+ και CSC

– κυττάρων από τον προσωπικό CSC που εκφράζουν καρκινικές κυτταρικές σειρές, και τα κύτταρα από μη έκφραση καρκινικές κυτταρικές σειρές) αναλύθηκε με qRT-PCR και ομαλοποιήθηκε ως προς

GAPDH

. Το επίπεδο των CD34 mRNA σε KG-1 CSC + κυττάρων

, CD44 mRNA σε MCF-7 CSC

+ κύτταρα, CD133 mRNA σε SHG-44 και Caco-2 CSC

+ κύτταρα, CD271 mRNA σε A375 CSC

+ κυττάρων, χαρακτηρίστηκε αυθαιρέτως ως 1,0 για λευχαιμία, καρκίνο μαστού, γλοιοβλάστωμα, καρκίνος του παχέος εντέρου, τα δείγματα μελανώματος, αντίστοιχα. Οι φωτογραφίες δείχνουν τα προϊόντα RT-PCR και τα ιστογράμματα δείχνουν το mRNA δείκτη επίπεδο έκφρασης CSC κυττάρων από λευχαιμία (Β), ο καρκίνος του μαστού (C), γλοιοβλάστωμα (D), ο καρκίνος του παχέος εντέρου (Ε), και κυτταρικές γραμμές μελανώματος (F). Σημειώστε ότι τα κύτταρα από τον προσωπικό CSC δεν εκφράζουν κυτταρικές γραμμές όγκου (U37, U81, COLO320, LoVo, LS174T) δεν εκφράζουν mRNA δείκτη CSC

Η

CSC

-. Καρκινικά κύτταρα εμφανίζουν παρόμοια πολλαπλασιασμό όπως CSC

+ καρκινικά κύτταρα στη φυσική κατάσταση

Για να διερευνήσουν τον πολλαπλασιασμό των θεωρούμενων ΚΕΠ (CSC

+ κυττάρων) και μη-ΚΕΠ (CSC

– κύτταρα) στην φυσική κατάσταση, μετρήσαμε το ποσοστό των πολλαπλασιαζόμενων και αποπτωτικών κυττάρων των δύο υποσύνολα σε CSC δείκτη που εκφράζουν πρωτογενείς όγκους (π.χ. AML, APL, CML, ο καρκίνος του μαστού, γλοιοβλάστωμα, καρκίνος του παχέος εντέρου, και μελάνωμα) με κυτταρομετρία ροής. Όπως φαίνεται στα Σχήματα 2Α και 2Β, το ποσοστό των Ki-67 θετικών κυττάρων, και το ποσοστό των αννεξίνης V

+ 7-AAD

– κύτταρα δεν διέφεραν σημαντικά μεταξύ των δύο υποσύνολα. Παρόμοια αποτελέσματα ελήφθησαν σε

in vitro

(Σχήματα 2C και 2D) και

in vivo μελέτες

δείκτη CSC που εκφράζουν ανθρώπινες κυτταρικές σειρές του όγκου (Σχήματα 2Ε 2F και). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η πολλαπλασιαστική ικανότητα των CSC

– κυττάρων είναι παρόμοια με εκείνη του CSC

+ κύτταρα σε φυσική κατάσταση

(Α, Β) επιλέχθηκαν CSC δείκτης που εκφράζει βασικό δείγμα να υποβληθεί. έκφραση Ki-67 και ανάλυση απόπτωσης. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM? n = 10 για κάθε τύπο της λευχαιμίας, η = 8 για γλοιοβλάστωμα και για τον καρκίνο του παχέος εντέρου, η = 9 για τον καρκίνο του μαστού και για το μελάνωμα. (Α) Ki-67 έκφρασης της CSC

+ και CSC

– κυττάρων από ανθρώπινα πρωτοπαθείς όγκους. Ενιαία κυτταρικά εναιωρήματα ανθρώπινων πρωτογενών όγκων βάφτηκαν με αντισώματα ειδικά για τους δείκτες CSC και Ki-67-FITC, που ακολουθείται από ανάλυση κυτταρομετρίας ροής. (Β) Η απόπτωση δοκιμασία της CSC

+ και CSC

– κυττάρων από ανθρώπινα πρωτοπαθείς όγκους. Ενιαία κυτταρικά εναιωρήματα ανθρώπινων πρωτογενών όγκων βάφτηκαν με αντισώματα ειδικά για τους δείκτες CSC και αννεξίνης V-FITC /7-ADD, που ακολουθείται από ανάλυση κυτταρομετρίας ροής. (C-D) Ki-67 έκφραση (C) και την απόπτωση (D) προσδιορισμός της CSC

+ και CSC

– κύτταρα από ανθρώπινες κυτταρικές γραμμές όγκου καλλιεργήθηκαν σε μέσο που περιέχει ορό. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα. (Ε-Ρ) Ki-67 έκφρασης (Ε) και την απόπτωση (F) προσδιορισμός της CSC

+ και CSC

– κύτταρα ξενομοσχευμάτων που προέρχονται από ανθρώπινες καρκινικές κυτταρικές σειρές. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα. (G) DsRed-επισημασμένο CSC

+ και EGFP-επισημασμένο CSC

– κύτταρα που προέρχονται από τις ίδιες κυτταρικές γραμμές όγκου αναμείχθηκαν σύμφωνα με την αρχική τους αναλογίες και συν-καλλιεργήθηκαν σε μέσο που περιέχει ορό επί 20 περάσματα. Κουκκίδες δείχνουν την αναλογία της CSC

+ – προέρχεται σε CSC

– προέρχονται (DsRed: EGFP) κυττάρων σε διάφορα περάσματα. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα

Η

Για να ακολουθήσει τον πολλαπλασιασμό των CSC

+ και CSC

-. Κύτταρα, χρησιμοποιήσαμε περαιτέρω εντοπισμό τεχνική κυττάρων με σκοπό να μιμηθεί το

in situ

περιβάλλον στο οποίο οι δύο υποσύνολα συνυπάρχουν. DsRed-επισημασμένο CSC

+ και EGFP-επισημασμένο CSC

– κύτταρα που προέρχονται από τις ίδιες κυτταρικές γραμμές όγκου αναμείχθηκαν σύμφωνα με την αρχική τους αναλογίες και συν-καλλιεργήθηκαν σε μέσο που περιέχει ορό επί 20 περάσματα (βλέπε Πειραματικές Διαδικασίες για λεπτομέρειες ). Κυτταρομετρία ροής ανάλυση έδειξε ότι η αναλογία της CSC

+ – προέρχεται σε CSC

– προέρχονται (DsRed: EGFP) κύτταρα παρέμειναν ουσιαστικά αμετάβλητα σε όλη τη διαδικασία (Σχήμα 2G). Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότι τόσο η CSC

+ και CSC

– κύτταρα θα μπορούσε να διαδοθεί ευρέως

CSC

-. Καρκινικά κύτταρα εμφανίζουν παρόμοια ικανότητα των όγκων που σχηματίζουν όπως CSC

+ καρκινικά κύτταρα κατόπιν συνεργασίας -transplantation

με βάση τις ανωτέρω διαπιστώσεις, ερευνήσαμε την ικανότητα του όγκου σχηματισμού της CSC

+ και CSC

– κύτταρα με συν-μεταμόσχευση καθώς και τα συμβατικά ξενομεταμόσχευση (μεταμόσχευση CSC

+ και CSC

– κύτταρα ξεχωριστά). DsRed-επισημασμένο CSC

+ και EGFP-επισημασμένο CSC

– κύτταρα προέρχονταν από τις ίδιες κυτταρικές σειρές όγκων αναμίχθηκαν σε αρχική αναλογία τους. Διαφορετικοί αριθμοί του CSC

+, CSC

– ή μικτό κύτταρα εγχύθηκαν κάτω από τη νεφρική κάψα του φονικά ακτινοβολημένων NOD-SCID, αντίστοιχα. Διαπιστώθηκε ότι τόσο

+ και CSC

CSC – κύτταρα θα μπορούσε να ξεκινήσει το σχηματισμό όγκων, όταν μεταμοσχεύονται ξεχωριστά, αν και η συχνότητα του σχηματισμού όγκων από CSC

– κυττάρων ήταν σημαντικά χαμηλότερη από ότι στην CSC

+ κύτταρα (Πίνακας S1). Όταν CSC

+ και CSC

– κύτταρα συν-μεταμοσχεύονται, τα ξενομοσχεύματα αποτελούνταν από δύο CSC

+ – προέρχεται (DsRed) και CSC

– προέρχονται κύτταρα (EGFP), όπως φαίνεται στο Τα Σχήματα 3Α και 3Β. Είναι σημαντικό, κυτταρομετρία ροής ανάλυση έδειξε ότι οι αναλογίες της CSC

+ – προέρχεται σε CSC

– προέρχονται: κύτταρα (DsRed EGFP) στα ξενομοσχεύματα δεν ήταν σημαντικά διαφορετικές από τις αναλογίες της CSC

+ για να CSC

– (DsRed: EGFP) κύτταρα στα μίγματα που είχαν ενεθεί (Σχήματα 3C και 3D, Πίνακας 1). Πραγματοποιήσαμε η ξενομεταμόσχευση μέχρι το τρίτο πέρασμα. Η ανάλυση κυτταρομετρίας ροής έδειξε ότι οι αναλογίες των CSC

+ – προέρχεται να CSC

– παράγωγα (DsRed: EGFP) κύτταρα στα ξενομοσχεύματα παρέμεινε ουσιαστικά αμετάβλητο μεταξύ των διαφόρων διόδων (Πίνακας 1). Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότι αν και CSC

+ κύτταρα μπορεί να είναι πιο ογκογόνο όταν μελετηθεί ξεχωριστά, προ-απομονωμένες CSC

– κύτταρα μπορούν να διατηρηθούν στο μοντέλο συν-transplatation. Οι μελέτες υποδηλώνουν επίσης ότι η ικανότητα του όγκου σχηματισμού του CSC

-. Κύτταρα θα μπορούσαν να υποτιμηθεί, αν μελετώνται χωριστά σε μια ξένη περιβάλλον

(Α και Β) DsRed-επισημασμένο CSC

+ και EGFP-επισημασμένο CSC

– κύτταρα που προέρχονται από τις ίδιες κυτταρικές γραμμές όγκου αναμίχθηκαν σε αρχική αναλογία τους και συν-μεταμοσχεύονται σε φονικά ακτινοβολημένων NOD-SCID. Οι φωτογραφίες αντιπροσωπεύουν φθορίζουσες εικόνες (Α) και αιματοξυλίνη και χρώση ηωσίνης (Β) διαδοχικών τομών των ξενομοσχευμάτων που προέρχονται από KG-1, MCF-7, SHG44, Caco-2 και Α375. Κλίμακα bar = 100 μm. (Γ) Flow οικόπεδα κυτταρομετρίας περίγραμμα δείχνουν το ποσοστό των DsRed και κυττάρων EGFP στα ξενομοσχεύματα. (D) ιστογράμματα δείχνουν την αναλογία της CSC

+ για να CSC

– (DsRed: EGFP) κύτταρα σε ενέσεις και ο λόγος της CSC

+ – προέρχεται σε CSC

– προέρχονται (DsRed: EGFP ) κύτταρα σε ξενομοσχεύματα. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα.

Η

πλαστικότητα της CSC δείκτη με βάση την ιεραρχία στο δείκτη CSC εκφράζοντας όγκους

Απροσδόκητα, βρήκαμε ότι ένας σημαντικός αριθμός των CSC

+ κυττάρων ήταν παρόντες στην CSC

– προέρχονται πληθυσμούς τόσο

in vitro

και

in vivo

και το ποσοστό των sup> + κύτταρα CSC

+ – και CSC

– προέρχονται πληθυσμών ήταν συγκρίσιμα μετά από καλλιέργεια (ή ξενομεταμοσχευμένων) για αρκετά περάσματα (Πίνακας S2), γεγονός που υποδηλώνει ότι

CSC – κυττάρων στο δείκτη CSC εκφράζοντας όγκοι μπορεί να οδηγήσει σε CSC

+ κύτταρα . Για να επιβεβαιώσετε ότι η CSC

+ κύτταρα στο CSC

– προέρχονται πληθυσμού ήταν πράγματι απόγονοι των CSC

– κύτταρα και όχι αποτέλεσμα της μόλυνσης των κυττάρων εισήχθησαν κατά τη διάρκεια της διαλογής κυττάρων [40], μετρήσαμε (σε δείκτη CSC εκφράζει κυτταρικές σειρές όγκων, χρησιμοποιώντας κυτταρομετρία ροής) το ποσοστό των δείκτη CSC θετικών κυττάρων σε ενιαίο CSC

+ – προέρχεται ή CSC

– προέρχονται sublines. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 4 και Σχήμα S2, τόσο CSC

+ και CSC

– κύτταρα ήταν ικανά να παράγουν μονό υποσειρές κυττάρων προερχόμενων και οδηγεί σε δύο υποσύνολα. Αρχικά, το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων σε ενιαίο CSC

– προέρχονται sublines ήταν σημαντικά χαμηλότερη από ό, τι στην ενιαία CSC

+ – προέρχεται sublines. Ωστόσο, πάνω από μια παρατεταμένη χρονική καλλιέργειας (περίπου 20 περάσματα, βλέπε Πειραματικές Διαδικασίες για λεπτομέρειες), το ποσοστό των θετικών δείκτη CSC κύτταρα σε κάθε υπογραμμή έγινε στατιστικά παρόμοια με εκείνη των αρχικών κυτταρικών γραμμών όγκου. Επιπλέον, βρήκαμε ότι ο κλώνος αποδοτικότητα της CSC

σχηματισμού – κύτταρα κυμαινόταν από 36,1% το Caco-2 για να 70,3% σε ΤΗΡ-1 (Σχήμα S3). Αξίζει να σημειωθεί ότι, το ποσοστό του κλώνου σχηματίζουν CSC

– κυττάρων είναι πολύ υψηλότερο από το ποσοστό μόλυνσης από CSC

+ κύτταρα (ψευδώς αρνητικά κύτταρα, συνήθως κάτω από 0,1%) στην CSC

– πληθυσμού κατατάσσονται σύμφωνα με τη FACS. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η CSC

– κυττάρων μπορεί να οδηγήσει σε CSC

+ κυττάρων στο δείκτη CSC εκφράζουν ανθρώπινους όγκους

(Α-Ε) CSC

+ και CSC

-. Κύτταρα από τον αρχικό όγκο επιλέχθηκαν κυτταρικές γραμμές για την παραγωγή ενός κυττάρου που προέρχεται sublines (SCDSLs). Το ποσοστό των δείκτη CSC θετικών κυττάρων στις αρχικές κυτταρικές γραμμές όγκου ή SCDSLs (πέρασμα 1 και διόδου 20) από KG-1 (Α), MCF-7 (Β), SHG44 (C), ΗΤ-29 (D), και Α375 (Ε) αναλύθηκε με κυτταρομετρία ροής. οικόπεδα κουτί δείχνουν το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων σε SCDSLs, με τα μουστάκια που αντιπροσωπεύουν τις ελάχιστες και μέγιστες τιμές, οι κεντρικές γραμμές που αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή, και τα κουτιά που αντιπροσωπεύουν το 25ο και το 75ο εκατοστημόριο. Ιστογράμματα δείχνουν το ποσοστό των δείκτη CSC θετικών κυττάρων στο αρχικό καρκινικών κυτταρικών σειρών και SCDSLs. Δεδομένων των SCDSLs αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 100 δείγματα? Δεδομένα από κυτταρικές σειρές αρχικού όγκου αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα? **

P

& lt? 0,01 από ανεξάρτητους

t-test

Η

Πραγματοποιήσαμε την μονοκύτταροι προέρχεται κατασκευή υπογραμμή κάτω στην τρίτη γενιά (Εικόνα 5Α. ). Ανεξάρτητα από τις γενιές ή προέλευση (CSC

+ – προέρχεται ή CSC

– προέρχεται), κάθε υπογραμμή περιείχε ένα σημαντικό αριθμό CSC

+ κύτταρα (Σχήματα 5Β και 5Γ, Σχήματα S4A και S4B) , και το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων στην ενιαία CSC

+ – προέρχονται (ή CSC

– προέρχονται) sublines ήταν συγκρίσιμη μεταξύ όλων των γενεών (Εικόνες 5D και 5Ε, Σχήματα S4C και S4D). Συγκεκριμένα, οι δύο υποσύνολα θα μπορούσε πάντα να δημιουργήσει CSC

+ και CSC

– απογόνων σε όλες τις γενιές, και δεν sublines αποτελούνταν αποκλειστικά από CSC

+ ή CSC

– κύτταρα. Επιπλέον, μελετήσαμε τον πολλαπλασιασμό και την ογκογένεση του CSC

+ (ή CSC

-) κύτταρα από διαφορετικές γενιές (Σχήμα 6Α). Όπως φαίνεται στα Σχήματα 6Β, 6C και Σχήμα S5, το ποσοστό των Ki-67 θετικών κυττάρων, το ποσοστό των αννεξίνης V

+ 7-AAD

– κύτταρα, και η συχνότητα των ογκογόνων κυττάρων ήταν στατιστικώς παρόμοια σε όλες τις γενεές παρά την προέλευση. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η CSC

-. Κύτταρα είναι ικανά να παράγουν CSC

+ κύτταρα και δείχνουν ότι υπάρχει σημαντική πλαστικότητα αυτών των κοινών δεικτών CSC σε αυτούς τους όγκους

(Α) Σχηματικό διάγραμμα δείχνει την κατασκευή της σειριακής μονοκύτταρους προέρχεται sublines (SCDSLs). CSC

+ και CSC

– κυττάρων από τις αρχικές κυτταρικές σειρές όγκων επιλέχθηκαν για να δημιουργήσει SCDSLs και αυθαίρετα έχουν ταξινομηθεί ως γενιά 1 SCDSLs (συμπεριλαμβανομένων των G

1

+ και G

1

-). CSC

+ και

CSC – κύτταρα από το G επιλέχθηκαν για να δημιουργήσει G

2 SCDSLs (συμπεριλαμβανομένων των G

1 SCDSLs 1

+ G

2

+, G

1

-G

2

+, G

1

+ G

2

– και G

1

-G

2

-). Επαναλάβαμε τη διαδικασία μέχρις ότου ελήφθησαν G

3 SCDSLs. (Β-Ε) Το ποσοστό των δείκτη CSC θετικών κυττάρων στο SCDSLs από KG-1, MCF-7, SHG44, Caco-2 και Α375 αναλύθηκε με κυτταρομετρία ροής όταν η ποσότητα των κυττάρων έφθασε περίπου 1 × 10

6. οικόπεδα κουτί δείχνουν το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων σε ενιαίο CSC

+ – προέρχεται (Β) και CSC

– προέρχονται (C) sublines από διαφορετικές γενιές, με τα μουστάκια που αντιπροσωπεύουν τις ελάχιστες και μέγιστες τιμές, η κεντρική γραμμές που αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή, και τα κουτιά που αντιπροσωπεύουν το 25ο και το 75ο εκατοστημόριο. Ιστογράμματα δείχνουν το ποσοστό του δείκτη CSC θετικών κυττάρων σε ενιαίο CSC

+ – προέρχεται (D) και CSC

– προέρχονται (Ε) sublines από διαφορετικές γενιές. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέση τιμή ± SEM από 100 δείγματα, το καθένα από ένα ανεξάρτητο σειράς κατασκευής SCDSL.

Η

(Α) Σχηματικό διάγραμμα δείχνει την κατάταξη των κυττάρων με βάση την παραγωγή και την έκφραση δείκτη CSC. Κύτταρα από τις αρχικές κυτταρικές σειρές όγκων αυθαιρέτως χαρακτηρισθεί ως γενεά 1 (G

1) κύτταρα και ταξινομούνται σε CSC δείκτη θετικό (G

1

+) και αρνητικό (G

1

– ) κύτταρα. G

1

+ και G

1

– κύτταρα στη συνέχεια πολλαπλασιάζονται (από 1 × 10

2 έως περίπου 1 × 10

8) για να δημιουργήσει G

2 ( συμπεριλαμβανομένων των G

1

+ G

2

+, G

1

+ G

2

-, G

1

-G

2

+ και G

1

-G

2

– κύτταρα). Επαναλάβαμε τη διαδικασία μέχρις ότου ελήφθησαν G

3 κύτταρα. (Β και Γ) CSC

+ και CSC

– κύτταρα από διαφορετικές γενιές χρησιμοποιήθηκαν για την πολλαπλασιαστική και ογκογόνο δοκιμασίες. Ιστογράμματα δείχνουν το ποσοστό των Ki-67 θετικών κυττάρων, το ποσοστό της αννεξίνης V

+ 7-AAD

– κυττάρων, και τη συχνότητα των ογκογόνων κυττάρων της CSC

+ κύτταρα (Β) και CSC

– κύτταρα (C) από διαφορετικές γενιές σε KG-1, MCF7, SHG44, Caco-2 και A375. Συχνότητα ογκογονικά κύτταρα υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας Extreme Περιορισμός λογισμικό ανάλυσης αραίωσης. Τα άλλα δεδομένα εκφράζονται ως μέση τιμή ± SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα.

Η

Συζήτηση

Το θέμα των οποίων τα καρκινικά κύτταρα να συμβάλει στην πρόοδο του όγκου έχει θεμελιώδεις συνέπειες για θεραπεία. Βασίζεται κυρίως στα συμπεράσματα ότι μόνο καρκινικά κύτταρα που εκφράζουν ορισμένοι δείκτες κυτταρικής επιφάνειας θα μπορούσε να ξεκινήσει την ανάπτυξη του όγκου όταν μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια με ανοσοανεπάρκεια, υποστηρικτές του μοντέλου CSC προτείνουν ότι οι όγκοι είναι ιεραρχικά οργανωμένες και ως εκ τούτου η θεραπεία των όγκων θα πρέπει να κατευθύνεται στην εξάλειψη των ογκογόνων κυττάρων (δηλαδή, ΚΕΠ) [2], [41], [42]. Ωστόσο, εδώ δείχνουμε ότι στο παρελθόν εντοπιστεί δείκτες CSC (π.χ., CD34

+ CD38

– για AML, APL, και ΧΜΛ, CD44

+ CD24

– για τον καρκίνο του μαστού, CD133

+ για γλοιοβλάστωμα και καρκίνος του παχέος εντέρου, CD271

+ για μελάνωμα) δεν πρέπει απαραίτητα να φιλτράρει τα ογκογόνα κύτταρα σε αυτούς τους όγκους, διότι τόσο CSC

+ και CSC

– κυττάρων μπορεί να ξεκινήσει την ανάπτυξη του όγκου και να οδηγήσουν σε δύο απογόνους ( δηλαδή, CSC

+ και CSC

– κύτταρα). Τα δεδομένα μας εγείρει ενδιαφέροντα ερωτήματα σχετικά με την πλαστικότητα της ιεραρχίας των όγκων.

Το μοντέλο CSC προϋποθέτει ότι η έναρξη του σχηματισμού του όγκου καθοδηγείται από ΚΕΠ, ενώ η μη-ΚΕΠ, τα οποία συνθέτουν το μεγαλύτερο μέρος των κυττάρων σε καρκινικά, δεν έχουν ή περιορισμένη ικανότητα για την έναρξη του σχηματισμού όγκων [1], [35], [36]. Από την άλλη πλευρά, ΚΕΠ αναφέρθηκαν να είναι πιο ήρεμα από τους μη-ΚΕΠ [41], [43]. Αν θεμελιώδεις διαφορές στην πολλαπλασιαστικού δυναμικού δεν υπάρχει μεταξύ ΚΕΠ και μη-ΚΕΠ, οι διαφορές αυτές θα πρέπει να ανιχνεύονται εύκολα με ανοσοϊστοχημική ή ροή ανάλυση κυτταρομετρίας του πολλαπλασιασμού των κυττάρων. Ωστόσο, εδώ δείξαμε ότι η διάδοση και την απόπτωση των υποθετικών ΚΕΠ (CSC

+ κύτταρα) και μη-ΚΕΠ (CSC

– κύτταρα) ήταν αξιοσημείωτα παρόμοια σε πρωτογενείς όγκους και κυτταρικές γραμμές όγκου, γεγονός που υποδηλώνει ότι η πολλαπλασιαστική ικανότητα της CSC

– κύτταρα θα μπορούσαν να έχουν σοβαρά υποτιμηθεί σε προηγούμενες μελέτες στις οποίες CSC

+ και CSC

– κύτταρα ξεχωριστά μεταμοσχεύθηκαν σε ζώα. Ως εκ τούτου, έχουμε δημιουργήσει μια ανίχνευση μέθοδος κυτταρικής σχεδιαστεί για την προσομοίωση της

in situ

περιβάλλον όπου CSC

+ και CSC

– κύτταρα συνυπάρχουν. Σε αντίθεση με τις προηγούμενες αναφορές ότι η CSC

– κύτταρα είχαν καμία ή περιορισμένη ικανότητα πολλαπλασιασμού και, επομένως, δεν κίνησε την ανάπτυξη του όγκου [35], [36], δείξαμε ότι η CSC

– κύτταρα παρουσίασαν παρόμοια πολλαπλασιασμό ή τη βιωσιμότητα όπως CSC + κυττάρων

όταν και τα δύο υποσύνολα συν-καλλιεργήθηκαν

in vitro

ή συν-μεταμοσχεύθηκαν σε ζώα σύμφωνα με τις αρχικές αναλογίες τους. Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν έντονα ότι, εκτός από την CSC

+ κύτταρα, CSC

-. Κύτταρα επίσης είναι ικανά πολλαπλασιασμού και ογκογένεσης

Το μοντέλο CSC απεικονίζει έναν όγκο ως ένα κυτταρικό ιεραρχία στην οποία μόνο τα ΚΕΠ που βρίσκεται στην κορυφή έχουν την ικανότητα της αυτο-ανανέωσης και παράγοντας κύτταρα από τα υπόλοιπα. Τα διαθέσιμα στοιχεία που υποστηρίζουν το μοντέλο CSC ως επί το πλείστον προέρχονται από μελέτες όγκων που σχηματίζουν. Όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, ο προσδιορισμός του όγκου σχηματισμού μπορεί να μην είναι επαρκής για να επιδείξουν ιεραρχική οργάνωση, δεδομένου ότι η χωρητικότητα του όγκου σχηματισμού των καρκινικών κυττάρων θα μπορούσε να επηρεαστεί δραματικά από τις εγγενών και εξωγενών παραγόντων [33], [34], ειδικά όταν διαφορετικά υποσύνολα τα καρκινικά κύτταρα που μελετήθηκαν ξεχωριστά σε μια ξένη περιβάλλον. Από την άλλη πλευρά, αν και ορισμένες μελέτες έδειξαν ότι η CSC

– (CD133

-) κύτταρα γλοιοβλαστώματος [38] και ο καρκίνος του παχέος εντέρου [39] θα μπορούσε να ξεκινήσει την ανάπτυξη του όγκου, το αν υπάρχει ή όχι μια CSC δείκτη με βάση την ιεραρχία στην αυτοί οι όγκοι δεν ερευνήθηκαν εκτεταμένα. Στην παρούσα μελέτη, διερευνήθηκε η μοίρα των κυττάρων που προέρχονται από τον υποτιθέμενο ΚΕΠ (CSC

+ κυττάρων) και μη-ΚΕΠ (CSC

– κύτταρα) από το κελί εντοπισμό κάτω από συνθήκες όπου οι δύο υποσύνολα συνυπήρχαν. Βρήκαμε δύο CSC

+ και CSC

– κύτταρα θα μπορούσαν να ανιχνευθούν σε απογόνων που προέρχονται από CSC

+ (ή CSC

-) κύτταρα και

in vitro

και

στο vivo

. Μέσω σειριακής μονοκύτταροι προέρχονται κατασκευή υπογραμμή με κύτταρα από κυτταρικές γραμμές όγκου, αποδείξαμε επίσης ότι η CSC

– καθώς επίσης και CSC

+ κύτταρα από τον προσωπικό CSC όγκων που εκφράζουν μπορούσε πάντοτε να οδηγήσει σε δύο απογόνους, και η πολλαπλασιαστική ή ογκογόνο ικανότητα της CSC

+ (ή CSC

-) κυττάρων διατηρήθηκε μεταξύ διαφορετικών γενεών, ανεξάρτητα από την προέλευση (CSC

+ – προέρχεται ή CSC

– προέρχεται). Αυτά τα δεδομένα παρέχουν ισχυρές αποδείξεις ότι δεν υπάρχει κοινή CSC δείκτη με βάση την ιεραρχία σε αυτούς τους όγκους.

Οι δείκτες κυτταρικής επιφάνειας έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως για τη διάκριση ΚΕΠ από μη-ΚΕΠ και οι περισσότερες από τις προηγούμενες μελέτες πρότειναν ότι τα ΚΕΠ περιορίζονταν στην ένα σπάνιο πληθυσμό των κυττάρων του όγκου [35], [36]. Ωστόσο, τα στοιχεία μας δείχνουν ότι η έκφραση δεικτών κυτταρικής επιφάνειας είναι πιο περίπλοκη από ό, τι προηγουμένως αναγνωριστεί. Συνεπής με κάποιες άλλες αναφορές [38], [39], δείξαμε με ανάλυση κυτταρομετρίας ροής ότι το ποσοστό των CSC δείκτη θετικών κυττάρων ποικίλλουν σημαντικά (που κυμαίνονται από 0,4% σε AML σε τόσο υψηλό όπως 82,7% σε καρκίνο του παχέος εντέρου) σε CSC δείκτης που εκφράζει όγκους και ότι ένας σημαντικός αριθμός των πρωτοπαθών όγκων ή κυτταρικών γραμμών όγκου δεν εκφράζουν αυτές τις σημάνσεις CSC. Μέσω ποσοτικής RT-PCR, αποκαλύψαμε περαιτέρω ότι τα κύτταρα (τόσο CSC

+ και CSC

-) από τον προσωπικό CSC εκφράζουν όγκοι, αλλά όχι τα κύτταρα από CSC δείκτη μη εκφράζοντα όγκων εκφράζεται mRNA δείκτη CSC, γεγονός που υποδηλώνει ότι ο δείκτης CSC εκφράζουν και μη εκφράζοντα όγκοι ενδέχεται να προέρχονται από διάφορους τύπους καρκινικών κυττάρων. Αξίζει να σημειωθεί ότι, σε αντίθεση με τα δύο του μοντέλου CSC και κλωνική μοντέλο εξέλιξης, κατά την οποία η φαινοτυπική ετερογένεια οφείλεται σε επιγενετικές και γενετικές αλλαγές, αντίστοιχα, δείχνουμε ότι η έκφραση των δεικτών CSC σε κύτταρα από τον προσωπικό CSC κυτταρικές σειρές που εκφράζουν όγκου μπορεί να είναι δυναμική. Ένα τέτοιο φαινόμενο παρατηρήθηκε επίσης από άλλους σε μερικούς ανθρώπινους πρωτοπαθείς όγκους [44] – [46] και του όγκου κυτταρικές γραμμές [45], [46]. . Αν μια τέτοια φαινόμενο που υπάρχει σε άλλες πρωτογενείς όγκους εγγυάται περαιτέρω διερεύνηση

Τα παρόντα δεδομένα δείχνουν ότι τόσο η CSC

+ και CSC

– κύτταρα έχουν την ικανότητα της ογκογένεσης και ότι η έκφραση των δεικτών CSC είναι αναστρέψιμη . Ωστόσο, δεν αποκλείει λειτουργική ετερογένεια μεταξύ των δύο υποσύνολα, όπως CSC

+ κύτταρα παρουσίασαν υψηλότερες ογκογενετικότητας από CSC

– κύτταρα όταν μεταμοσχεύθηκαν σε ποντίκια ξεχωριστά. Προηγουμένως, + κύτταρα CSC

αναφέρθηκαν ότι εμφανίζουν μεγαλύτερη ανοσολογική ανοχή (π.χ., CD271

+ ανθρώπινα κύτταρα μελανώματος [29]) και υψηλότερη έκκριση των αυξητικών παραγόντων (π.χ., CD133

+ ανθρώπινα κύτταρα γλοιοβλαστώματος [47] ) από ό, τι CSC

– κύτταρα. Ως εκ τούτου, η υψηλότερη ογκογονικότητα + κυττάρων CSC

στην ξενομεταμόσχευση μπορεί να οφείλεται είτε στην καλύτερη προσαρμογή τους στο ξένο περιβάλλον ή /και την ικανότητά τους να εκκρίνουν αυξητικούς παράγοντες που είναι κρίσιμοι για την επιβίωση των κυττάρων και τον πολλαπλασιασμό. Είτε το CSC

+ και CSC

– κύτταρα μπορούν να παρουσιάζουν εμφανείς διαφορές στην έναρξη του όγκου, μετάσταση, και την αντίσταση στη χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία στο ανθρώπινο περιβάλλον μένει να διερευνηθεί περαιτέρω. Η καλύτερη κατανόηση των υποκείμενων μηχανισμών της λειτουργικής ετερογένειας μπορεί να παρέχει σημαντικές ενδείξεις για την ανάπτυξη και την αξιολόγηση νέων αντικαρκινικών θεραπειών.

Συμπεράσματα

Η παρούσα έρευνα δείχνει τον περιορισμό της χρήσης κοινών δεικτών CSC να ταυτοποίηση ενός κυτταρικού πληθυσμού (δηλαδή, ΚΕΠ), που είναι

αποκλειστικά ικανά να πολλαπλασιάζονται και την έναρξη της ανάπτυξης του όγκου σε κυτταρικές γραμμές όγκου μελετήσαμε. Τα στοιχεία μας είναι πιο ευνοϊκή για την κλωνική μοντέλο εξέλιξης στο οποίο τα περισσότερα από τα καρκινικά κύτταρα είναι ικανά πολλαπλασιασμού και ογκογένεση και τη λειτουργική ετερογένεια των καρκινικών κυττάρων οφείλεται σε τυχαία ή στοχαστικών επιρροών (ενδογενές ή εξωγενές). Το συμπέρασμα αυτό βασίζεται στα ευρήματα ότι συνυπάρχουν υποθετικό ΚΕΠ (CSC

+ κυττάρων) και μη-ΚΕΠ (CSC

– κύτταρα) εμφάνισαν παρόμοια ικανότητα για πολλαπλασιασμό και την καρκινογένεση και ότι και οι δύο υποσύνολα θα μπορούσε να οδηγήσει σε CSC

+ και CSC

– απογόνων. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν τους περιορισμούς της χρήσης αυτών των δεικτών ανεξάρτητα για να διαφοροποιηθούν καρκινικά βλαστικά κύτταρα από μη ογκογόνα κύτταρα λόγω της φαινοτυπικής πλαστικότητα των καρκινικών κυττάρων.

Υλικά και Μέθοδοι

δήλωση Ηθική

<