Abstract

Στόχος

Ενίσχυση ανοσολογικές αποκρίσεις, συμπεριλαμβανομένης της ανθρώπινης αντιγόνο λευκοκυττάρων (HLA) κατηγορίας Ι έκφραση στα κύτταρα του όγκου και την αναγνώριση και την εξάλειψη των καρκινικών κυττάρων με ογκο-ειδικών κυτταροτοξικών Τ-λεμφοκυττάρων (CTL ), θεωρείται μία νέα έννοια της ακτινοθεραπείας. Η παρούσα μελέτη εξέτασε ασθενείς οι οποίοι υποβλήθηκαν σε προεγχειρητική hyperthermo-χημειοακτινοθεραπεία (HCRT) για τοπικά προχωρημένο καρκίνο του ορθού για να αξιολογεί τη συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και κλινική έκβαση.

Υλικά και Μέθοδοι

Εβδομήντα οκτώ ασθενών με τοπικά προχωρημένο ορθού αδενοκαρκίνωμα που έλαβαν προεγχειρητική HCRT είχαν εγγραφεί. Η διάμεση ηλικία των ασθενών ήταν 64 έτη (εύρος, 33-85 ετών) και 4, 18, και 56 ασθενείς είχαν κλινικό στάδιο Ι, η νόσος του II και III, αντιστοίχως. Φορμαλίνη σταθερών και εγκλεισμένοι σε παραφίνη ιστοί αποκόπηκαν πριν και μετά HCRT υποβλήθηκαν σε ανοσοϊστοχημική ανάλυση με αντι-ΗΙΑ τάξης Ι-Α, Β, Γ αντίσωμα. HLA έκφραση τάξης Ι βαθμολογήθηκε σύμφωνα με καρκινικών κυττάρων θετικότητα.

Αποτελέσματα

Στην προ-HCRT, ο αριθμός των δειγμάτων κατηγοριοποιούνται ως Βαθμού 0 και 1 ήταν 19 (24%) και 58 (74 %), αντίστοιχα. Μόνο 1 ασθενής (1%) έδειξε Grade 2 έκφραση. Ωστόσο, 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), και 12 (15%) δείγματα μετα-HCRT βαθμολογήθηκαν ως Grade 0, 1, 2, και 3, αντίστοιχα. Υπήρξε μια σημαντική αύξηση στην έκφραση HLA τάξης Ι σε δείγματα μετα-HCRT (ρ & lt? 0,01). Ωστόσο, ούτε πριν ούτε μετά HCRT έκφραση HLA τάξης Ι επηρεάζεται η συνολική επιβίωση και μακρινή μετάσταση επιβίωση χωρίς το κλινικό στάδιο ΙΙΙ ασθενείς. Μονοπαραγοντική ανάλυση αποκάλυψε ότι μετά HCRT έκφραση HLA τάξης Ι έδειξαν μια σημαντική αρνητική σχέση με LC (p & lt? 0,05). Παρ ‘όλα αυτά, πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και κλινική έκβαση.

Συμπέρασμα

HCRT αυξημένη HLA τάξης Ι έκφραση σε ασθενείς με καρκίνο του ορθού. Ωστόσο, πολυπαραγοντική ανάλυση δεν έδειξε καμία συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου των HLA τάξης Ι έκφρασης και πρόγνωση

Παράθεση:. Sato Η Suzuki Υ, Ide Μ, Katoh Τ, Noda S-e, Ando K, et al. (2014) HLA Τάξης I Έκφραση και Τροποποίηση του από προεγχειρητική Hyperthermo-Χημειοραδιοθεραπεία σε ασθενείς με καρκίνο του ορθού. PLoS ONE 9 (9): e108122. doi: 10.1371 /journal.pone.0108122

Επιμέλεια: Torbjörn Ramqvist, του Ινστιτούτου Καρολίνσκα, στη Σουηδία

Ελήφθη: 27 Μαρτίου 2014? Αποδεκτές: 20, Αυγούστου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 26η Σεπτεμβρίου, 2014

Copyright: © 2014 Sato et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Τα στοιχεία είναι διαθέσιμα από το Πανεπιστήμιο Γκούνμα Graduate School of Medicine Θεσμικών Access /Επιτροπή Δεοντολογίας των δεδομένων για τους ερευνητές που πληρούν τα κριτήρια για την πρόσβαση σε εμπιστευτικά δεδομένα

Χρηματοδότηση:.. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Συσσωρευμένα στοιχεία υποστηρίζουν την σημασία της κυτταρικής ανοσίας για τον έλεγχο της ανάπτυξης του όγκου και την εξάλειψη των απομακρυσμένων μεταστάσεων [1] . Ανθρώπινο αντιγόνο λευκοκυττάρων (HLA) μόρια τάξης Ι και του όγκου αντιγόνου-ειδικών κυτταροτοξικών Τ λεμφοκυττάρων (CTL) παίζουν σημαντικό ρόλο σε αυτές τις αποκρίσεις. μόρια HLA τάξης Ι που εκφράζονται από κύτταρα όγκου αντιγόνα που υπάρχουν προέρχονται από όγκους σε CTL, το οποίο στη συνέχεια σκοτώνουν τα κύτταρα στόχους [2]. Πολλές μελέτες αναφέρουν μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ κλινική πρόγνωση και την έκφραση του HLA τάξης Ι με οισοφάγου, μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα, κεφαλής και λαιμού πλακωδών κυττάρων, της ουροδόχου κύστης και του καρκίνου [3] – [8]. Επιπλέον, η πλειονότητα αυτών των αναφορών καταλήγουν στο συμπέρασμα ότι οι ασθενείς με καρκίνους χαμηλών HLA τάξης Ι που εκφράζουν έχουν χειρότερη πρόγνωση από εκείνους με καρκίνους υψηλής έκφρασης.

Ακτινοθεραπεία είναι μια σημαντική μορφή θεραπείας κατά του καρκίνου, και χρησιμοποιείται για τη θεραπεία πολλών τύπων καρκίνου, ανεξάρτητα από κλινικό στάδιο. Είναι γενικά αποδεκτό ότι η ακτινοβολία επάγει τον κυτταρικό θάνατο μέσω απόπτωσης ή /και νέκρωση καταστρέφοντας (είτε άμεσα είτε έμμεσα) DNA. Ωστόσο, πρόσφατες μελέτες δείχνουν ότι η προκαλούμενη από ακτινοβολία ανοσογόνο κυτταρικός θάνατος είναι μια έννοια διαφορετική από την πιο «παραδοσιακά» κυτταρικού θανάτου που προκαλείται από ακτινοβολία [9] – [11]. Η έννοια υποκείμενες προκαλούμενη από ακτινοβολία ανοσογόνο κυτταρικού θανάτου βασίζεται στην επαγωγή των αντι-καρκινικών άνοσων αποκρίσεων CTL από ακτινοθεραπεία με τροποποίηση των ανοσογόνων επιτόπων επί μορίων Ι HLA όγκου τάξη. Ακτινοθεραπεία αυξάνει την έκφραση των μορίων HLA τάξης Ι από ανθρώπινα κύτταρα μελανώματος και από τους νεφρούς και υποδόρια κύτταρα σε HLA-A2 διαγονιδιακό ποντίκι [12]. Αντίθετα, Speetjens et al. ανέφεραν ότι η ακτινοβολία έκανε δεν επίδραση HLA έκφραση τάξης Ι από του ορθού καρκινικά κύτταρα [13]. Ωστόσο, λίγες εκθέσεις έχουν εξετάσει τη συσχέτιση μεταξύ ακτινοθεραπείας και της έκφρασης HLA επί κυττάρων όγκου σε ένα κλινικό περιβάλλον [12], [14], [15]. Επιπλέον, στο καλύτερο της γνώσης μας, υπάρχουν μελέτες έχουν εξετάσει τις αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι από τα καρκινικά κύτταρα στον ίδιο ασθενή πριν και μετά την ακτινοθεραπεία. Ασθενείς

Έχουμε λάβει προηγούμενη θεραπεία ορθού με προεγχειρητική hyperthermo-χημειοακτινοθεραπεία (HCRT ) για αρκετά χρόνια και αναφέρθηκαν οι κλινικές εκβάσεις [16], [17]. Εδώ, λάβαμε δείγματα από τους ίδιους τους ασθενείς για να εξετάσει (i) HLA τάξης Ι έκφραση επί του ορθού καρκινικά κύτταρα, (ii) τις μεταβολές στην έκφραση HLA τάξης Ι που επάγεται από HCRT, και (iii) τη σχέση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την πρόγνωση.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική δήλωση

Όλοι οι ασθενείς παρέχεται γραπτή συγκατάθεση τους να συμμετάσχουν σε αυτή τη μελέτη. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας της Γκούνμα Πανεπιστημίου Graduate School of Medicine, Γκούνμα, Ιαπωνία (IRB αριθμός έγκρισης είναι 1051). Η ανωνυμία των ασθενών διατηρήθηκε.

Ασθενείς και δείγματα

Εβδομήντα οκτώ ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ορθού αδενοκαρκίνωμα, οι οποίοι διαδοχικά αγωγή με HCRT ακολουθείται από χειρουργική επέμβαση στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Γκούνμα μεταξύ 2003 και 2011, εντάχθηκαν στη μελέτη. Προ- και μετα-HCRT δείγματα ήταν διαθέσιμα για όλους τους ασθενείς.

Τα χαρακτηριστικά του ασθενούς και των όγκων συνοψίζονται στον Πίνακα 1. Η μέση ηλικία των ασθενών κατά την έναρξη της HCRT ήταν 64 έτη (εύρος, 33 έως 85 έτη). Η μέση και διάμεση παρακολούθηση περιόδους ήταν 45 και 40 μηνών (εύρος, 3-103 μήνες), αντίστοιχα. Για διαγνωστικό έλεγχο, όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε αξονική τομογραφία (CT), της κοιλιάς και του θώρακα να διευκολυνθεί η διεξαγωγή των περιφερειακών και απομακρυσμένων μεταστάσεων. Τ στάδιο προσδιορίστηκε με CT και η μαγνητική τομογραφία (MRI), ιδιαίτερα Τ2 σταθμισμένες εικόνες, σύμφωνα με την κατάταξη ΤΝΜ των κακοήθων όγκων (UICC, 7η έκδοση). Συνολικά, 4, 18 και 56 ασθενείς ταξινομήθηκαν με στάδιο Ι, η νόσος του II και III, αντιστοίχως. Δείγματα από τις 56 ασθενείς με νόσο σταδίου ΙΙΙ περαιτέρω εξετάζεται για να προσδιοριστεί η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την πρόγνωση.

Η

δείγματα ιστού αποκόπηκαν ενδοσκοπικά από του ορθού όγκους πριν HCRT και στη συνέχεια χειρουργικά μετά HCRT (διάμεση 10 εβδομάδες? μέσος, 12 εβδομάδες? εύρος, 1-54 εβδομάδες). Αποκομμένοι ιστοί στη συνέχεια σταθεροποιήθηκαν σε 10% φορμαλίνη για 24 ώρες και ενσωματωμένα σε παραφίνη. HLA τάξης Ι έκφραση εξετάστηκε με ανοσοϊστοχημεία.

Θεραπείες

Όλα τα 78 ασθενείς υποβλήθηκαν σε προεγχειρητική HCRT, όπως έχει ήδη αναφερθεί [16]. Εν συντομία, την εξωτερική ακτινοθεραπεία (ακτίνες Χ? 10 MV) παραδόθηκε χρησιμοποιώντας μια προσθιοπίσθια ή τριών ή τεχνική κιβώτιο τεσσάρων τομέα. Η κλινική όγκος στόχος (CTV) περιελάμβανε την πρωτοπαθή όγκο και το σύνολο mesorectal ιστού. Η συνολική δόση ακτινοβολίας ήταν 40-54 Gy (διάμεσος, 50 Gy), με ημερήσια κλάσματα 2 Gy. Εβδομήντα τέσσερις ασθενείς έλαβαν επίσης 5-φθοριοουρακίλη (5-FU) και levofolinate, τρία έλαβε UFT και λευκοβορίνη, και ένας έλαβε Capecitabine.

θεραπεία Υπερθερμία διεξήχθη σε εβδομαδιαία βάση (2-6 συνεδρίες (διάμεσος, 5 συνεδρίες) εκάστη των οποίων διαρκεί 30 λεπτά) με τη χρήση χωρητική εξοπλισμού θέρμανσης και της ραδιοσυχνότητας των 8 MHz (Thermotron-RF 8, Yamamoto Vinita Co. Ltd., Ιαπωνία).

Χειρουργική (κυρίως συνολικό mesorectal εκτομή) διεξήχθη σε 1-54 εβδομάδες (μέσος, 10 εβδομάδες) μετά την ολοκλήρωση της HCRT. Εβδομήντα-πέντε ασθενείς (96%) υποβλήθηκαν σε χειρουργική επέμβαση εντός 17 εβδομάδων. Αρκετοί ασθενείς που παρουσίασαν κλινική πλήρη απάντηση στην HCRT αρνήθηκε χειρουργική επέμβαση? Ως εκ τούτου, η χειρουργική επέμβαση πραγματοποιήθηκε σε μόνο 3 ασθενείς (4%) των ασθενών μετά από περισσότερο από 34 εβδομάδες.

Η ανοσοχρώση για το HLA τάξης Ι

φορμαλίνη σταθερών και δείγματα εγκλεισμένα σε παραφίνη χρησιμοποιήθηκαν για ανοσοϊστοχημική ανάλυση. Τομές ιστού αποπαραφινοποιήθηκαν και υποβλήθηκαν σε ανάκτηση αντιγόνου με διάλυμα ανάκτησης επιτόπου (Target Ανάκτηση Solution, Κιτρικό ρΗ 6? Dako, Glostrup, Denmark) στους 121 ° C για 20 λεπτά. Η ενδογενής δραστηριότητα υπεροξειδάσης εμποδίστηκε από Dako REAL (Dako). Ένα πρωτογενές αντίσωμα έναντι της HLA τάξης Ι Α, Β, Γ βαριά αλυσίδα, EMR8-5 (Hokudo, Sapporo, Ιαπωνία), η οποία δεν αναγνωρίζει Ι βαριάς αλύσου συμπλόκου-β2-μικροσφαιρίνης-πεπτιδίου το HLA τάξης, αραιώθηκε (1:70 ) σε Antibody Diluent Solution με Ιστορικό αναγωγικά συστατικά (Dako) και επωάζονται με τα τομές ιστού στους 4 ° C όλη τη νύκτα [18]. Οι τομές στη συνέχεια επωάστηκαν με ένα Histofine απλή χρώση MAX-ΡΟ kit (Nichirei, Tokyo, Japan) για 30 λεπτά. Τέλος, οι τομές υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 3, 30-διαμινοβενζιδίνη (DAB, Dako) για 1 λεπτό, και με αιματοξυλίνη. Δείγματα κανονικού λεμφαδένα χρησίμευσαν ως θετικοί έλεγχοι. Η ισότυπο άσχετο ανοσοσφαιρίνης (αρνητικός μάρτυρας IgG1 ποντίκι? Dako) χρησιμοποιήθηκε ως αρνητικός έλεγχος

Δύο συγγραφείς (ΕΣ και MI, τόσο τυφλωμένοι με τα κλινικά και παθολογικά δεδομένα) αξιολόγησε HLA τάξης Ι θετικότητα σε μια ημι. -ποσοτική τρόπο. Χρώση ταξινομούνται ως εξής: Βαθμός 0, & lt? 10% προετοιμασμένα κύτταρα? Grade 2, 10-50% χρώση των κυττάρων? Βαθμού 3, 50-90% χρώση των κυττάρων? Βαθμού 4, & gt? 90% προετοιμασμένα κύτταρα. Η σχέση μεταξύ έκφραση ΗίΑ τάξης Ι και κλινική πρόγνωση εκτιμήθηκε με διαίρεση των δειγμάτων μετά HCRT σε δύο ομάδες, όπως περιγράφηκε προηγουμένως [6], [13], [19]: κατηγορίες 0-1 και οι κατηγορίες 2-3. Η σχέση μεταξύ έκφραση ΗίΑ τάξης Ι και κλινική πρόγνωση δεν εξετάστηκε σε δείγματα προ-HCRT επειδή μόνο ένας ασθενής έδειξε έκφραση Βαθμού 2-3 πριν από την HCRT.

Στατιστική ανάλυση

Η επιβίωση μετρήθηκε σε ημέρες, ξεκινώντας από την Ημέρα 1 του HCRT προς το χρόνο θανάτου ή τελικών παρακολούθηση. Μονοπαραγοντική ανάλυση της αναλογιστικής συνολικό ποσοστό επιβίωσης (OS), το τοπικό ποσοστό ελέγχου (LC), και το μακρινό ποσοστό επιβίωσης μετάσταση ελεύθερο (ΒΔΜ) για κάθε κλινικοπαθολογοανατομικές παράγοντα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier, και οι διαφορές μεταξύ των καμπυλών επιβίωσης ήταν αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία log-rank. αναλύσεις πολλαπλών παραλλαγών χρησιμοποιώντας μοντέλο αναλογικών κινδύνων του Cox, έγιναν για να εξεταστεί η συσχέτιση μεταξύ πρόγνωση και πολλαπλές κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές. Οι διαφορές στην έκφραση HLA τάξης Ι μεταξύ προ- και μετα-HCRT δείγματα εξετάστηκαν με Wilcoxon rank test. Οι διαφορές θεωρήθηκαν σημαντικές σε Ρ & lt? 0.05. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του SPSS λογισμικού, έκδοση 21 (SPSS Inc. Ιαπωνία, Tokyo, Japan).

Αποτελέσματα

έκφραση HLA τάξης Ι

Το σχήμα 1 δείχνει HLA τάξης Ι έκφραση με κύτταρα όγκου του ορθού. Ο αριθμός των δειγμάτων προ-HCRT κατηγοριοποιούνται ως Grade 0, 1, 2, και 3 ήταν 19 (24%), 58 (74%), 1 (1%), και 0 (0%), αντίστοιχα. Ο αριθμός των δειγμάτων μετά HCRT κατηγοριοποιούνται ως Grade 0, 1, 2, και 3 ήταν 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), και 12 (15%), αντίστοιχα. Είκοσι-έξι ασθενείς (33%) παρουσίασαν παθολογική πλήρη ανταπόκριση (PCR) μετά HCRT. Ο Πίνακας 2 δείχνει ότι η έκφραση HLA τάξης Ι συσχετίζεται με την ηλικία του ασθενούς (& lt?. 60

vs

≤60), αλλά όχι με άλλα οποιαδήποτε άλλα χαρακτηριστικά του όγκου ή στάδιο της νόσου

Εκπρόσωπος εικόνες που δείχνουν HLA. κατηγορίας Ι έκφραση με ορθού καρκινικά κύτταρα. Α, Βαθμός 0 έκφρασης. B, Grade 1 έκφρασης. C, Grade 2 έκφρασης. D, Βαθμού 3 έκφρασης. Μεγέθυνσης, × 200.

Η

Αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι που προκαλείται από HCRT

Συνολικά, 26 ασθενείς επέτυχαν PCR μετά τον HCRT. Αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι αξιολογήθηκαν σε δείγματα όγκων από τους υπόλοιπους 52 ασθενείς. Από αυτούς, 26 (50%) έδειξαν αυξημένη έκφραση τάξης Ι HLA, 3 (6%) έδειξαν μειωμένη έκφραση και 23 (44%) δεν έδειξε αλλαγή. Η αύξηση στην έκφραση HLA τάξης Ι μετά HCRT ήταν σημαντική (ρ & lt? 0,01) (Σχήμα 2). Από τους 26 ασθενείς που πέτυχαν PCR, 5 (19%) έδειξαν Βαθμός 0 έκφραση προ-HCRT και 21 (81%) έδειξε Grade 1 έκφρασης. Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ βαθμού του HLA τάξης Ι έκφραση προ-HCRT και PCR.

οι κατηγορίες της έκφρασης HLA τάξης Ι σε δείγματα από τον ίδιο ασθενή. Α, προ-HCRT δείγμα? Βαθμολογία 0. Β, μετά HCRT δείγμα? Grade 3. Η μεγέθυνση, × 200. C, HLA τάξης Ι έκφρασης σε προ- και μετα-HCRT δείγματα. Προγνωστική αξία δοκιμάστηκε με Wilcoxon τεστ κατάταξης.

Η

Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την πρόγνωση

Το 5 χρόνια OS, LC, και ΒΔΜ για όλους τους 78 ασθενείς με Grade 0 -1 μετα-HCRT έκφραση HLA τάξης Ι ήταν 76%, 94%, και 76%, αντίστοιχα, ενώ της 5ετούς OS, LC, και ΒΔΜ των ασθενών με βαθμού 2-3 μετα-HCRT έκφραση HLA τάξης Ι ήταν 79%, 74%, και 79%, αντίστοιχα (Πίνακας 3). Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ των τριών παραμέτρων έκβαση και τάξης Ι έκφραση του βαθμού HLA. Το ΡΟΚ που προκαλείται από HCRT έδειξε μια σημαντική σχέση με την καλή LC (p & lt? 0,05).

Η

Στη συνέχεια, θα εξεταστεί περαιτέρω δείγματα από τους 56 ασθενείς με νόσο σταδίου ΙΙΙ για να προσδιοριστεί η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την πρόγνωση. Το 5-ετή OS, LC, και ΒΔΜ για τη φάση ΙΙΙ σε ασθενείς με Βαθμού 0-1 μετα-HCRT έκφραση HLA τάξης Ι ήταν 70%, 100% και 70%, αντίστοιχα, και η 5-ετή OS, LC, και ΒΔΜ για ασθενείς με βαθμού 2-3 μετα-HCRT έκφραση HLA τάξης Ι ήταν 92%, 77%, και 85%, αντίστοιχα (Σχήμα 3). Μετα-HCRT έκφραση HLA τάξης Ι έδειξαν μια σημαντική αρνητική σχέση με LC (p & lt? 0,05). Ωστόσο, πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι καμία από τις μεταβλητές που συσχετίζονται με κλινική πρόγνωση (Πίνακας 4).

Τα κλινικά αποτελέσματα από 56 ασθενείς με νόσο σταδίου ΙΙΙ. (Α? Συνολική επιβίωση, Β? Τοπικό έλεγχο, και Γ? Μακρινή μετάσταση επιβίωση χωρίς). χαμηλή έκφραση HLA τάξης Ι: κατηγορίες 0 και 1? υψηλή έκφραση: κατηγορίες 2 και 3.

Η

Στην συνέχεια διερευνήσαμε εξετάστηκε κατά πόσον η αύξηση στην έκφραση HLA τάξης Ι που προκαλείται από HCRT βελτίωσε την κλινική έκβαση για ασθενείς σταδίου ΙΙΙ στάδιο. Το 5-ετή OS και ΒΔΜ για την «αυξημένη» της ομάδας και η «σταθερή ή μειώνεται» ομάδα ήταν 77% και 78% (p = 0,97) και 71% και 78% (p = 0,66), αντίστοιχα. Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ των μεταβολών στην έκφραση HLA τάξης Ι και το λειτουργικό σύστημα και ΒΔΜ. Από την άλλη πλευρά, η 5-ετή LC για την «αυξημένη» ομάδα και η «σταθερά ή μειώνεται» ομάδα ήταν 82% και 100%, αντίστοιχα (ρ = 0,04). Η LC του «αυξημένη» ομάδα έκφραση HLA τάξης Ι ήταν σημαντικά χειρότερη από εκείνη της «σταθερή ή μειώθηκε» ομάδα έκφραση

Συζήτηση

Τα κύρια ευρήματα της παρούσας μελέτης ήταν ως ακολούθως.: (i) 19 (24%) και 58 (74%) των δειγμάτων ιστού όγκου από ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα του ορθού έδειξαν Βαθμός 0 (& lt? 10%) ή βαθμού 1 (10-50%) έκφραση των HLA τάξης Ι, αντίστοιχα? (Ii) προεγχειρητικά HCRT οδήγησε σε σημαντική αύξηση στην έκφραση HLA τάξης Ι? και (iii) πολυπαραγοντική ανάλυση δεν έδειξε σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την επιβίωση.

Speetjens et al. εξέτασαν την έκφραση των μορίων HLA τάξης Ι σε καρκίνο του ορθού [13]. Μπορούν κατηγοριοποιούνται HLA I έκφραση κατηγορία ως εξής: απών (καθόλου έκφραση), αρνητικά (0-50% θετικά κύτταρα), και θετικά (51-100% θετικά κύτταρα). Ανέφεραν ότι 9,7%, 32%, και 58% των δειγμάτων κατηγοριοποιήθηκαν ως απών, αρνητικό ή θετικό, αντίστοιχα όταν βάφτηκαν για το αντιγόνο HLA τάξης Ι με τη χρήση αντι-HLA αντισώματος, HCA2 αλλά η 2,1%, 21%, και το 77% ήταν απούσα, αρνητικό ή θετικό, αντίστοιχα, όταν βάφτηκαν για το HLA τάξης Ι αντιγόνου με τη χρήση αντι-HLA αντισώματος, ΗΟ10. Μόνο ένας ασθενής στην παρούσα μελέτη έδειξε & gt? 50% HLA τάξης Ι θετικότητα. Η διαφορά αυτή μπορεί να εξηγηθεί εν μέρει από τρεις παράγοντες. Πρώτον, το πρωτογενές μονοκλωνικό αντι-HLA αντισώματα τάξης Ι ήταν διαφορετικές. Χρησιμοποίησαν HCA2 (που αντιδρά με HLA-A (δεν HLA-A24), HLA-Β73, και HLA-C μόρια καθώς και HLA-E, HLA-F και αντιγόνα HLA-G) και ΗΟ10 (που αντιδρά με HLA -Β και HLA-C μόρια και HLA-A10, -A28, -A29, -A30, -A31, -A32 και -A33 βαριές αλυσίδες) και τα πρωτογενή αντισώματα. Ωστόσο, χρησιμοποιήσαμε EMR8-5, το οποίο αντιδρά με HLA-A * 2402, Α * 0101, Α * 1101, Α * 0201, Α * 0207, Β * 0702, Β * 0801, Β * 1501, Β * 3501, Β * 4001, Β * 4002, Β * 4006, Β * 4403, Cw * 0102, Cw * 0801, Cw * 1202, και Cw * 1502, ως το πρωτογενές αντίσωμα [18]. Δεύτερον, ημι-ποσοτική αξιολόγηση δεν είναι η πιο ακριβής τρόπος για να αξιολογήσει HLA τάξης Ι έκφραση. Τέλος, οι διαφορές μπορούν να εξηγηθούν από την «καρκίνος ανοσοδιαμόρφωση έννοια» προτείνει Dunn, το οποίο περιγράφει τη διαδικασία μεταβολής του όγκου αποτελείται από τρεις διαδοχικές φάσεις (αποβολή, την ισορροπία και να ξεφύγουν) να είναι αποδεκτή για το ανοσοποιητικό σύστημα [20]. Σε αυτήν την έννοια, η ανάπτυξη των κυττάρων του όγκου είχε εξαλειφθεί από το ανοσοποιητικό σύστημα πριν γίνουν εμφανείς κλινικές (εξάλειψη), ωστόσο, ένα σπάνιο κύτταρο όγκου δεν θανατώνονται από ανοσολογική αντίδραση, και κατά συνέπεια, αυτά τα κύτταρα όγκου αναδύονται να προκαλέσει κλινικά εμφανή νόσο (ισορροπία και να ξεφύγουν). Ως εκ τούτου, προχωρημένο καρκίνο του έχει την τάση χαμηλής αντιγονική κατάσταση. Επίσης, σε σύγκριση με τη μελέτη Speetjens της, η παρούσα μελέτη συμμετείχαν περισσότεροι ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ορθού αδενοκαρκίνωμα (72% των ασθενών είχαν νόσο σταδίου ΙΙΙ). Έτσι, μπορεί να έχουν βρει χαμηλότερα επίπεδα έκφρασης HLA τάξης Ι. Σύμφωνα με το «καρκίνο ανοσοδιαμόρφωση έννοια», HLA τάξης Ι έκφραση στα κύτταρα του όγκου μειώνεται με την πάροδο της στάδιο

Λίγες εκθέσεις έχουν εξεταστεί ακτινοβολία που προκαλείται από αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι σε διαφορετικές κλινικές φάσεις.? Ωστόσο, έχει καταδειχθεί

σε

vitro

[12], [14], [15], [21]. Speetjens et al., Βρέθηκε επίσης σημαντικές διαφορές στην έκφραση HLA τάξης Ι σε δείγματα όγκων από ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με ή χωρίς ακτινοβόληση [13]. Αντιθέτως, βρήκαμε ότι η έκφραση HLA τάξης Ι σε κύτταρα καρκίνου του ορθού αυξάνεται μετά HCRT και αυτή η ασυμφωνία μπορεί να οφείλεται στη δόση ακτινοβολίας, το διάστημα μεταξύ ακτινοθεραπεία και τη χειρουργική επέμβαση, ή με τις διάφορες μεθόδους ανάλυσης που χρησιμοποιούνται. Speetjens et al., Κατεργάζεται μία ομάδα ασθενών με 25 Gy ανά πέντε κλάσματα εντός 10 ημερών από χειρουργική επέμβαση και στη συνέχεια συγκρίνονται έκφραση HLA σε καρκινικά κύτταρα από ακτινοβολημένα και μη-ακτινοβολημένα ασθενείς. Αντίθετα, υποβάλλαμε σε αγωγή ασθενείς με 50 Gy ανά 25 κλάσματα εντός 5 εβδομάδων από τη χειρουργική επέμβαση, και το μεσαίο διάστημα μεταξύ ακτινοθεραπεία και τη χειρουργική επέμβαση ήταν 10 εβδομάδες. Στη συνέχεια συγκρίνεται εκφράσεις HLA τάξης Ι επί κυττάρων όγκου από προ- και μετα-HCRT δείγματα από τους ίδιους ασθενείς. Reits et al. ανέφεραν ότι η ακτινοβολία οδήγησε σε δοσοεξαρτώμενη αύξηση στα επίπεδα ενδοκυτταρικού πεπτίδια που προέρχονται από τις υπάρχουσες πρωτεΐνες και αυξημένη πρωτεϊνική σύνθεση μέσω ενεργοποίησης mTOR. Αυτό είχε ως αποτέλεσμα την αύξηση των MHC έκφραση τάξης Ι. Ωστόσο, η βέλτιστη δόση /κλάσμα και το διάστημα μεταξύ της ακτινοβολίας και της αξιολόγησης για το υψηλότερο επίπεδο έκφρασης HLA τάξης Ι στην κλινική φάση είναι άγνωστη.

Από την άλλη πλευρά, οι αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι ίσως από επαγόμενες από άλλους παράγοντες εκτός από την ακτινοβολία, π.χ., χημειοθεραπεία ή /και υπερθερμία. Gamerio et al. ανέφεραν ότι υπερθερμία οδήγησε σε σημαντική αύξηση στις μείζονες πρωτεϊνική έκφραση τάξης Ι σύμπλεγμα ιστοσυμβατότητας (MHC) στην επιφάνεια των κυττάρων ποντικού αδενοκαρκινώματος κόλου που εξέφραζαν ανθρώπινο CEA [22]. Επιπλέον, Ohtsukasa et al. ανέφεραν ότι αντικαρκινικά φάρμακα (π.χ., 5-FU, SN-38, και CDDP) προκάλεσε μια αξιοσημείωτη αύξηση σε MHC τάξης Ι έκφραση με κόλου ανθρώπου καρκινικές κυτταρικές σειρές κυττάρων (COLO 201)

σε

vitro

[23]. Επιπλέον, ανέφεραν επίσης ότι αντικαρκινικά φάρμακα επαγόμενη έκφραση MHC τάξης Ι σε κύτταρα ποντικού όγκου κόλου

σε

vivo

. Νόμιζαν ότι αυτή η αλλαγή θα μπορούσε να προκληθεί από την προκαλούμενη από χημειοθεραπεία παραγωγή ενδογενών πρωτεϊνών ή /και σε αυξημένη μεταφορά της συσσωρευμένης υλικού στην κυτταρική μεμβράνη.

Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι η αυξημένη έκφραση HLA τάξης Ι που παρατηρείται στην παρούσα μελέτη αυξηθεί με ένα συνδυασμό ακτινοθεραπείας, χημειοθεραπεία, και υπερθερμία. Περαιτέρω μελέτες απαιτούνται για την κατανόηση των μηχανισμών που διέπουν τις αυξήσεις στην έκφραση HLA τάξης Ι που προκαλείται από διάφορες θεραπείες? Ωστόσο, αυτή είναι η πρώτη έκθεση για να δείξει ότι οι προ-HCRT αυξάνει την έκφραση HLA τάξης Ι σε ένα κλινικό περιβάλλον. Αυτό το αποτέλεσμα υποδηλώνει ότι η συνδυαστική ακτινοθεραπεία με HLA τάξης Ι μεσολάβηση ανοσοθεραπεία μπορεί να ενισχύει αδύναμα αντικαρκινικές ανοσοαποκρίσεις που προκαλούνται από απώλεια της έκφρασης HLA τάξης Ι, η οποία είναι ένας κύριος μηχανισμός με τον οποίο τα καρκινικά κύτταρα να ξεφύγουν ανοσοεπιτήρηση.

Αναμέναμε ότι οι ασθενείς που φέρουν όγκους με υψηλή έκφραση HLA τάξης Ι θα έχουν ευνοϊκή κλινική πρόγνωση? Ωστόσο, όταν θα πραγματοποιηθεί μονοπαραγοντική ανάλυση, βρήκαμε καμία σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης I και OS ή ΒΔΜ σε ασθενείς σταδίου ΙΙΙ στάδιο. Επιπλέον, LC έδειξε σημαντική αρνητική συσχέτιση με την έκφραση μετά HCRT HLA τάξης Ι σε ασθενείς σταδίου ΙΙΙ στάδιο. Σε αντίθεση με τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται στο παρόν, οι περισσότερες προηγούμενες μελέτες αναφέρουν ότι οι ασθενείς με όγκους που δείχνουν υψηλή έκφραση HLA τάξης Ι είχαν μια καλύτερη πρόγνωση [3] – [8]. Επιπλέον, όταν μελετήθηκε η συσχέτιση μεταξύ HCRT επαγόμενη αλλαγές στην έκφραση HLA τάξης Ι και OS, LC, και ΒΔΜ, βρήκαμε ότι LC έδειξε μία σημαντική αρνητική συσχέτιση με έκφραση αυξημένη HLA τάξης Ι. Υπάρχουν αρκετοί λόγοι για τις διαφορές αυτές, ως εξής: (i) τη χειρουργική παράγοντες μπορεί να έχουν ισχυρότερη επίδραση στην κλινική πρόγνωση από προ-HCRT επαγόμενη έκφραση HLA τάξης Ι και ανοσολογική επίδραση του? (Ii) οι ανοσολογικές παράγοντες που επηρεάζουν την κλινική πρόγνωση είναι αρκετά περίπλοκη (η επίδραση του HLA τάξης Ι έκφραση δεν ήταν αρκετά ισχυρή για να επηρεάσει την κλινική πρόγνωση)? και (iii) ο αριθμός των ασθενών σταδίου III (56) ήταν ανεπαρκής για να καταστεί δυνατή η ουσιαστική αξιολόγηση της κλινικής πρόγνωση. . Ως εκ τούτου, απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να καθοριστεί η σχέση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης I και πρόγνωση σε ασθενείς με καρκίνο του ορθού

Εν κατακλείδι, η παρούσα μελέτη δείχνει ότι HCRT μπορεί να αυξήσει την έκφραση HLA τάξης Ι από του ορθού καρκινικά κύτταρα? Ωστόσο, πολυπαραγοντική ανάλυση δεν έδειξε κάποια συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης HLA τάξης Ι και την πρόγνωση.