Αφηρημένο

Σκοπός

Έχουμε περιγράψει τις επιπτώσεις της σόγιας κατανάλωση ισοφλαβονών για το ειδικό προστατικό αντιγόνο (PSA), τα επίπεδα των ορμονών, της ολικής χοληστερόλης, και την απόπτωση σε άνδρες με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Πραγματοποιήσαμε μια διπλή-τυφλή, τυχαιοποιημένη, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο δοκιμή για να εξεταστεί το αποτέλεσμα των καψουλών ισοφλαβονών σόγιας (80 mg /d του συνολικού ισοφλαβονών, 51 mg /d αγλυκόνη μονάδες) για τους βιοδείκτες ορού και ιστού σε ασθενείς με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη. Ογδόντα έξι άνδρες τυχαιοποιήθηκαν σε θεραπεία με ισοφλαβόνες (n = 42) ή εικονικό φάρμακο (n = 44) για διάστημα έως έξι εβδομάδες πριν από την προγραμματισμένη προστατεκτομή. Πραγματοποιήσαμε ανάλυση μικροσυστοιχιών χρησιμοποιώντας ένα τσιπ γονιδίων στοχευμένη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης (GEArrayTM). Αλλαγές στον ορό ολικής τεστοστερόνης, ελεύθερης τεστοστερόνης, η συνολική οιστρογόνο, οιστραδιόλη, PSA, και ολικής χοληστερόλης αναλύθηκαν κατά την έναρξη, μέσο σημείο, και κατά τη στιγμή της ριζικής προστατεκτομής. Σε αυτή την προκαταρκτική ανάλυση, 12 γονίδια που εμπλέκονται στον έλεγχο του κυτταρικού κύκλου και 9 γονίδια που εμπλέκονται στην απόπτωση ήταν ρυθμισμένα προς τα κάτω στους ιστούς του όγκου θεραπεία έναντι του ελέγχου του εικονικού φαρμάκου. Αλλαγές στον ορό ολικής τεστοστερόνης, ελεύθερης τεστοστερόνης, συνολικής οιστρογόνα, οιστραδιόλη, PSA, και της ολικής χοληστερόλης στην ομάδα ισοφλαβόνες σε σύγκριση με τους άνδρες που λάμβαναν εικονικό φάρμακο δεν ήταν στατιστικά σημαντικές.

Συμπεράσματα /Σημασία

Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότι η βραχυπρόθεσμη πρόσληψη ισοφλαβονών σόγιας δεν επηρεάζει τα επίπεδα ορού της ορμόνης, της ολικής χοληστερόλης, ή PSA

Δίκη ΕΓΓΡΑΦΕΣ

ClinicalTrials.gov NCT00255125

Αιτιολογική αναφορά.: Hamilton-Reeves JM, Banerjee S, Banerjee SK, Holzbeierlein JM, Thrasher JB, Kambhampati S, et al. (2013) Short-Term σόγιας Isoflavone Παρέμβαση σε ασθενείς με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη: Μια τυχαιοποιημένη, διπλή-τυφλή, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο. PLoS ONE 8 (7): e68331. doi: 10.1371 /journal.pone.0068331

Επιμέλεια: Fazlul H. Sarkar, Wayne State University School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 5 Δεκεμβρίου 2012? Αποδεκτές: 28 Μαΐου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 12, Ιούλ, 2013

Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης, χωρίς όλα τα πνευματικά δικαιώματα, και δεν μπορεί να αναπαραχθεί ελεύθερα, διανεμηθεί, να μεταδοθεί, τροποποιηθεί, χτισμένο πάνω, ή ειδάλλως να χρησιμοποιηθεί από οποιονδήποτε για οποιονδήποτε νόμιμο λόγο. Το έργο γίνεται διαθέσιμα υπό την Creative Commons CC0 αφοσίωση δημόσιο τομέα

Χρηματοδότηση:. Η «ισοφλαβόνες σόγιας σε προστάτη Μελέτης του Καρκίνου» υποστηρίχθηκε από VA επιχορηγήσεις Merit Βαθμολογία (PV, SB, SKB) και το Πανεπιστήμιο του Κάνσας Cancer Center Πιλοτικό πρόγραμμα επιχορήγησης (JHR). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του προστάτη είναι η πιο κοινή μη-δερματικό καρκίνο στις αμερικανικές άνδρες [1]. Επιδημιολογικές μελέτες συνεργάτης κατανάλωσης τροφίμων σόγιας σε ασιατικούς πληθυσμούς με μείωση του κινδύνου καρκίνου του προστάτη [2], [3], αν και η συγκέντρωση genistein πλάσμα δεν έχει συσχετιστεί με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη σε διαιτητικές ανοίγματα τυπικό της Δυτικής πληθυσμών [2] – [4] . Οι συγκεντρώσεις στην κυκλοφορία ισοφλαβονών σόγιας στα ιαπωνικά άνδρες είναι τουλάχιστον 10 φορές υψηλότερη από το αμερικανικό [5], [6] και η ευρωπαϊκή τους άνδρες [4]. Ένα τυπικό σόγιας πλούσια ιαπωνική διατροφή αποτελείται από 25-100 mg ισοφλαβονών σόγιας /ημέρα, ενώ μια τυπική αμερικανική διατροφή περιέχει περίπου 2-3 ​​mg ισοφλαβονών σόγιας /ημέρα [7]. μελέτες της μετανάστευσης των ασιατικών ανδρών δείχνουν ότι προστάτη ποσοστά εμφάνισης καρκίνου τους αυξήσει σε άμεση σχέση με το μήκος του χρόνου που δαπανάται που κατοικούν στις Ηνωμένες Πολιτείες [8], [9]. Ομοίως, συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του προστάτη και τη θνησιμότητα έχει αυξηθεί σε ασιατικές χώρες ταυτόχρονα με τη δυτικοποίηση της διατροφής τους [10].

Τα συστατικά της διατροφής σόγιας πιστεύεται ότι καταστέλλουν τον καρκίνο είναι οι ισοφλαβόνες σόγιας daidzein, genistein, και γλυκιτεΐνη. Οι ισοφλαβόνες σόγιας συνδέονται με υποδοχείς οιστρογόνων και να ασκήσει ορμονικές επιδράσεις. Οι δύο κύριες ισοφλαβόνες στη σόγια είναι genistein και daidzein. Daidzein μετατρέπεται σε Εκουόλη στο έντερο ορισμένων ατόμων. Οι ισοφλαβόνες συσσωρεύονται στον αδένα του προστάτη [10] και έχουν δειχθεί ότι ρυθμίζουν ενδογενείς ορμόνες που σχετίζονται με την καρκινογένεση προστάτη [11], [12]. Οι ισοφλαβόνες σόγιας ασκούν επίσης μη ορμονική επιπτώσεις για την καταστολή του καρκίνου μέσω οδών που στοχεύουν τον κυτταρικό κύκλο και την απόπτωση όπως G2 /M σύλληψη και έκφραση ρ21

in vitro

σε ανδρογόνο-ανεξάρτητου καρκίνου προστάτη PC3 κύτταρα [13]. ισοφλαβόνη σόγιας επαγόμενη αναστολή του κυτταρικού πολλαπλασιασμού και επαγωγή απόπτωσης εν μέρει διαμεσολαβείται μέσω της ρύθμισης του δικτύου σηματοδοσίας Akt /FOXO3a /GSK-3β /AR [14].

Βραχυπρόθεσμες παρεμβάσεις ισοφλαβονών σόγιας σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη έχουν αποφέρει μικτά αποτελέσματα. Σε μια μη τυχαιοποιημένη, μη τυφλή δοκιμή 38 ασθενείς (20 με κλινικά σημαντική καρκίνο του προστάτη και 18 έλεγχοι), την ημερήσια πρόσληψη 160 mg /d ισοφλαβονών που προέρχεται από το κόκκινο τριφύλλι για περίπου 20 ημέρες έως ότου ριζική προστατεκτομή οδήγησε σε σημαντικά υψηλότερες απόπτωσης κύτταρα όγκου [15]. Στους άνδρες με καρκίνο του προστάτη, η σόγια ή η κατανάλωση ισοφλαβόνης έχει μειωθεί σημαντικά σημαίνει συνολικό PSA ορού σε σύγκριση με τους μάρτυρες [16] – [18], αν και αρκετές μελέτες δεν έχουν δείξει στατιστικώς σημαντικές επιπτώσεις στο PSA σε αυτόν τον πληθυσμό [15], [19], [20]. Τα αποτελέσματα μείωσης της χοληστερόλης από τρόφιμα σόγιας είναι κυρίως πιστεύεται ότι προκαλείται μέσω της πρωτεΐνης σόγιας [21]? αν και πρόσφατα, μια genistein μόνο παρέμβαση σε ασθενείς με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη ελάττωσε σημαντικά την ολική χοληστερόλη και η αλλαγή αυτή ήταν στατιστικά σημαντική σε σύγκριση με το εικονικό φάρμακο [18].

Έχουμε ήδη δημοσιεύσει δεδομένα από μια πιλοτική δοκιμή πραγματοποιήθηκε από μας εργαστήριο σε μία ομάδα από 13 ασθενείς με καρκίνο του προστάτη (χωρίς προηγούμενη θεραπεία), οι οποίοι υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ένα συμπλήρωμα isoflavone σόγιας που περιέχει 112 mg ολικών ισοφλαβονών (n = 4), 168 mg σύνολο ισοφλαβονών (n = 3), ή 224 mg ολικών ισοφλαβονών ( n = 4). Αυτά τα πιλοτικά δεδομένα έδειξαν μείωση του PSA, η τεστοστερόνη και τα οιστρογόνα, και μια μεταβλητή επίδραση στην έκφραση ΕΡα με προς τα κάτω ρύθμιση της έκφρασης των υποδοχέων παρατηρήθηκε στις συνολικές ισοφλαβόνες 224 mg ανά επίπεδο δόσης την ημέρα, ενώ δεν παρατηρήθηκε καμία επίδραση στην έκφραση AR [22 ].

Η παρούσα διπλά τυφλή, τυχαιοποιημένη, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο μελέτη σχεδιάστηκε για να διερευνήσει πληρέστερα την αποτελεσματικότητα της συνολικής κατανάλωσης ισοφλαβονών σόγιας σε μια μεγαλύτερη ομάδα των ανδρών με την παρακολούθηση των επιπέδων των ορμονών του ορού, ολική χοληστερόλη, και PSA . Επιπλέον, αξιολογήσαμε τις επιδράσεις επί του όγκου και παρακείμενο φυσιολογικό ιστό του προστάτη με συστοιχίες γονίδιο για τη ρύθμιση του ελέγχου του κυτταρικού κύκλου και την απόπτωση σε άνδρες με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη.

Αποτελέσματα

Στοιχεία Μελέτης

Ογδόντα επτά άτομα ελέγχθηκαν για τη μελέτη? 1 επέλεξε να μη συμμετάσχει (Εικόνα 1). Είκοσι-τρία θέματα δεν ολοκλήρωσε την τρίτη επίσκεψη, επειδή χειρουργική επέμβαση ή ακτινοθεραπεία ημερομηνία θεραπεία τους συνέβησαν πριν από την προγραμματισμένη η τελευταία επίσκεψη. Πενήντα έξι από τους ασθενείς υποβλήθηκαν σε προστατεκτομή [εικονικό φάρμακο (n = 27), ισοφλαβόνη σόγιας (n = 29)]. Είκοσι οκτώ άτομα εκλέγονται ακτινοθεραπεία στο τέλος της μελέτης [εικονικό φάρμακο (n = 16), ισοφλαβόνες σόγιας (n = 12)] και 2 άτομα επέλεξαν την ενεργή παρακολούθηση της [εικονικό φάρμακο (n = 1), ισοφλαβόνες σόγιας (n = 1)]. Όλα τα 86 άτομα ολοκλήρωσαν δύο εβδομάδες της μελέτης με καλή συμμόρφωση, και 63 άτομα ολοκλήρωσαν την πλήρη μελέτη. Από τους 86 συμμετέχοντες, 74 δείγματα ούρων από το χρονικό σημείο 2 εβδομάδων ήταν να αναλυθούν για μεταβολίτες στα ούρα φυτοοιστρογόνα (daidzein, genistein, glyctein, O-δεσμεθυλαγκολενσίνη, dihydrodaidzein και equol). Οι συμμετέχοντες συμφώνησαν να αποφύγουν διαιτητική πρόσληψη σόγιας και να μην προβεί σε νέα συμπληρώματα. Ωστόσο, δύο συμμετέχοντες στην ομάδα του εικονικού φαρμάκου έδειξαν υψηλές συγκεντρώσεις των ουρικών μεταβολιτών φυτοοιστρογόνα, γεγονός που υποδηλώνει ότι κατανάλωναν σόγια από άλλες πηγές. Όλοι οι συμμετέχοντες που αναλύθηκαν στην ομάδα παρέμβασης φάνηκε να είναι σε συμμόρφωση, και 29% (10/35) είχαν χαρακτηριστεί ως παραγωγοί equol καθορίζοντας αν τους log 10 (equol: daidzein). Αναλογία ήταν μεγαλύτερη από -1.75 [23]

ανεπιθύμητες ενέργειες

Όλες οι ανεπιθύμητες ενέργειες ήταν βαθμού 1 (ήπια). Στο σκέλος ισοφλαβόνες, 4 γεγονότα καταγράφηκαν: 2 γαστρεντερικό και 2 γενικά. Στο σκέλος placebo, 9 συμβάντα καταγράφηκαν: 6 γαστρεντερικό και 3 γενικά. Κανένας ασθενής δεν διέκοψε τη θεραπεία λόγω ανεπιθύμητων ενεργειών.

Baseline Χαρακτηριστικά

Baseline ανθρωπομετρικά, δημογραφικά στοιχεία, κλινικό στάδιο, και η σωματική δραστηριότητα δεν διέφεραν μεταξύ των ομάδων (Πίνακας 1). Δεν υπήρχαν διαφορές στη βασική ορμόνη ορού, οι συγκεντρώσεις χοληστερόλης, και η PSA μεταξύ των ομάδων (Πίνακας 2).

Η

Ορός Μαρκαδόροι

Δεν υπάρχουν σημαντικές διακυμάνσεις της ολικής τεστοστερόνης ορού, ελεύθερης τεστοστερόνης, η συνολική οιστρογόνο, οιστραδιόλη, ειδικό προστατικό αντιγόνο, ή ολικής χοληστερόλης παρατηρήθηκαν στην ομάδα που ισοφλαβόνης σε σύγκριση με το εικονικό φάρμακο άνδρες, που λαμβάνουν (Πίνακας 2).

Markers Tissue

γονίδιο κυτταρικού κύκλου έκφραση.

Δώδεκα γονίδια στον εμπλέκονται στον κυτταρικό κύκλο ήταν ρυθμισμένα προς τα κάτω σε σόγια-κατεργασμένου ιστού κακοήθους προστάτη όταν συγκρίνεται με κακοήθη ιστό που έλαβαν εικονικό φάρμακο, αντίστοιχα (Σχήμα 2). Η συστοιχία γονίδιο κυτταρικού κύκλου απέδειξαν τα κάτω ρύθμιση του κύκλου κυτταρικής διαίρεσης 27 (Cdc27), εμπλέκονται σε αλληλεπιδράσεις πρωτεΐνης-πρωτεΐνης και το χρονοδιάγραμμα της μίτωσης? αποπτωτικό παράγοντα πεπτιδάσης ενεργοποίησης 1 (APAF1), που εμπλέκονται στην έναρξη της απόπτωσης? κυκλίνη Β2 (CCNB2), που εμπλέκονται στην μετατροπή έλεγχο βήτα-μεσολάβηση του κυτταρικού κύκλου αυξητικού παράγοντα? κυκλίνης G1 (CCNG1) και κυκλίνης G2 (CCNG2), ενεργοποιείται από πρωτεΐνη p53 όγκου? κυκλίνη C (CCNC), που εμπλέκονται στην φωσφορυλίωση της RNA πολυμεράσης II? ουβικιτίνης-σαν τροποποιητής ένζυμο ενεργοποίησης 1 (UBE1), που εμπλέκονται στην σήμανση κυτταρικές πρωτεΐνες για την υποβάθμιση? cullin 2 (CUL2) και cullin 3 (CUL3)? E2F παράγοντας μεταγραφής 4 (E2F4)? σημείο ελέγχου κινάσης 2 (CHEK2) γονιδιακής έκφρασης? και αταξία τηλαγγειεκτασία μεταλλαγμένα (ΑΤΜ), ένα σημαντικό σημείο ελέγχου του κυτταρικού κύκλου.

Το σχήμα δείχνει την αναλογία του γονιδίου για GAPDH.

Η

απόπτωση γονιδιακής έκφρασης.

Εννέα γονιδίων σε εμπλέκονται στην απόπτωση ρυθμίζεται προς τα κάτω σε σόγια-κατεργασμένου ιστού κακοήθους προστάτη όταν συγκρίνεται με κακοήθη ιστό που έλαβαν εικονικό φάρμακο, αντίστοιχα (Σχήμα 3). Η συστοιχία γονίδιο απόπτωση καταδεικνύεται κάτω ρύθμιση του CD40, που εμπλέκονται σε μια ποικιλία ανοσολογικών και φλεγμονωδών αποκρίσεων? Β-κυττάρων μη-Hodgkin λέμφωμα-2 (Bcl-2)? ραβδοϊού IAP επανάληψης που περιέχουν 1, 2, και 6 (BIRC1 /ΝΑΙΡ, BIRC2, BIRC6), που εμπλέκονται στον αποκλεισμό της απόπτωσης? BCL2-πρωτεΐνη που συνδέεται με το Χ (BAX)? TRAF-μέλη που συνδέονται οικογένειας ενεργοποιητή NFKB (ΔΕΞΑΜΕΝΗ)? HUS1 και κασπάσης 7 (CASP7) της γονιδιακής έκφρασης.

Το σχήμα δείχνει την αναλογία του γονιδίου για GAPDH.

Η

Συζήτηση

Παρά τα στοιχεία από πιλοτική έρευνα μας [22], δεν παρατηρήσαμε σημαντικές αλλαγές στις συγκεντρώσεις του PSA ή ορμονών σε αυτό το μεγαλύτερο κλινική δοκιμή φάσης ΙΙ. προηγούμενη μελέτη μας ανέφεραν μείωση του PSA, η τεστοστερόνη, τα οιστρογόνα και σε 13 ασθενείς που καταναλώνουν την ίδια συμπλήρωμα ισοφλαβόνης σε διάφορες δοσολογίες. Παρά το γεγονός ότι το σκεύασμα συμπληρώματος ήταν ταυτόσημη σε αμφότερες τις μελέτες, οι διαφορές στην έκβαση μπορεί να οφείλεται στο μεγαλύτερο μέγεθος δείγματος και τη μεγάλη μεταβλητότητα του PSA ορού και ορμόνες στην παρούσα μελέτη. διερευνητική ανάλυση μας στην παρούσα μελέτη δείχνει ότι η πρόσληψη ισοφλαβονών σόγιας μπορεί να μεταβάλλει την έκφραση γονιδίων σε ιστό προστάτη.

Τα αποτελέσματα μας για τις ορμόνες του ορού είναι συνεπής με προηγούμενες μελέτες. Μια μετα-ανάλυση 32 μελετών που δημοσιεύθηκε το 2010 από τον Hamilton-Reeves et al. ανέφεραν ότι η κατανάλωση τροφών σόγιας δεν συνδέεται με σημαντικές επιπτώσεις στην κυκλοφορούσα τεστοστερόνη ή ελεύθερης τεστοστερόνης σε άνδρες [24]. Πρόσφατες δημοσιεύσεις από την μετα-ανάλυση δεν έδειξαν σημαντικές επιδράσεις της διατροφικής πρόσληψης των ισοφλαβονών σε τεστοστερόνης [18], [25], [26]. Δεδομένων για τις συγκεντρώσεις στο αίμα των οιστρογόνων είναι διαθέσιμα για δεκατέσσερις μελέτες, που αποτελείται από πέντε τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες μελέτες [11], [27] – [30]. Μόνο μία μελέτη ανέφεραν σημαντική αύξηση στις συγκεντρώσεις οιστραδιόλης στο αίμα από την αρχική τιμή με 40 mg /d ισοφλαβονών, αλλά όχι 60 ή 80 mg /d των συμπληρωμάτων ισοφλαβόνης, και στατιστική σύγκριση με την ομάδα του εικονικού φαρμάκου δεν δημοσιεύθηκε [29]. Εν ολίγοις, η συνολική πρόσληψη ισοφλαβονών δεν φαίνεται να επηρεάζει κυκλοφορούν ορμονών του φύλου σε προσλήψεις συγκρίσιμη με διαιτητική πρόσληψη σε ασιατικές χώρες όπως η δόση που χορηγήθηκε στην παρούσα μελέτη.

Τα ευρήματά μας σχετικά με την ολική χοληστερόλη είναι σε αντίθεση με μια μετα ανάλυση παρουσιάζοντας μείωση της ολικής χοληστερόλης με ισοφλαβόνες σόγιας, όταν καταναλώνεται σε τρόφιμα σόγιας [21]. Η θεωρία ότι τα κατασκευαστικά στοιχεία από την ίδια την πρωτεΐνη σόγιας στη μείωση της χοληστερόλης θα μπορούσε να εξηγήσει γιατί οι ισοφλαβόνες μόνο δεν θα προκαλέσει το ίδιο αποτέλεσμα. Ωστόσο, μια πρόσφατη αναφορά έδειξε μία μείωση 4% στην ολική χοληστερόλη σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη που κατανάλωναν 30 mg του συνθετικού genistein σύγκριση με το placebo [18]. Η πιθανή εξήγηση για αυτά τα αντιφατικά αποτελέσματα σε σύγκριση με τη μελέτη μας είναι λόγω της σύνθεσης συμπληρώματος δίδονται σε αυτή τη δοκιμασία. Το συμπλήρωμα ισοφλαβονών σόγιας προέρχεται από φύτρο σόγιας η οποία παρέχει ένα μίγμα από ισοφλαβόνες σόγιας που είναι υψηλότερη σε δαϊδζεΐνη από genistein. Επιπλέον, δεν διαστρωμάτωση τυχαιοποίηση μας με βάση τις τιμές προ-επεξεργασία της ολικής χοληστερόλης, αν και κάναμε περιλαμβάνουν βασική αξία ως συμμεταβλητή στο στατιστικό μοντέλο.

Isoflavone συμπληρώσεις σε δόσεις παρόμοιες με αυτή τη μελέτη έχουν δείξει γενικά καμία επίδραση στη μείωση των συγκεντρώσεων του PSA σε άνδρες με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη. Τα αποτελέσματα για το PSA ορού είναι συνεπής με κάποια [19], [20], [28], [31], αλλά δεν είναι όλες οι αναφορές [16], [17], [32] – [34]. Σύνολο PSA μειώθηκαν κατά 4%, όταν ένα ισοφλαβόνες πλούσιο συμπλήρωμα δόθηκε ως μέρος μιας εντατικής δίαιτας και παρέμβασης στον τρόπο ζωής στους ασθενείς με καρκίνο του προστάτη που υποδηλώνει πιο δραματικές αλλαγές στη διατροφική πρόσληψη από την προσθήκη ισοφλαβονών μπορεί να χρειαστεί να αλλάξει PSA σε άνδρες με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη [16]. Είναι πιθανό ότι μια μεγαλύτερη παρέμβαση ή παρακολούθηση μπορεί να έχουν δώσει σημαντική ανασταλτική δράση των ισοφλαβονών για PSA, μόνο 2 περιπτώσεις από την εβδομάδα 5 και 4 περιπτώσεις από την εβδομάδα 6 (από 42 περιπτώσεις από την ομάδα θεραπείας ισοφλαβόνη) ήταν διαθέσιμα για PSA δοκιμών.

για τις γνώσεις μας, αυτή η μελέτη ήταν ένα από τα πρώτα να συγκριθούν τα αποτελέσματα της συνολικής κατανάλωσης ισοφλαβόνες σόγιας επί της γονιδιακής έκφρασης σε ιστό προστάτη που λαμβάνεται από μια μελέτη ανθρώπινη παρέμβαση. Ωστόσο, υπάρχουν αρκετοί περιορισμοί της μελέτης μας συμπεριλαμβανομένης της έλλειψης διαστρωμάτωση των αποτελεσμάτων με βάση την βαθμολογία Gleason, παθολογικές στάδιο, ή PSA. Αυτό μπορεί να επηρεάσει το αποτέλεσμα της σόγιας ιδιαίτερα στα αποπτωτικά μονοπάτια. Επιπλέον, μόνο ένας πολύ μικρός αριθμός δειγμάτων ιστών αναλύθηκαν, έτσι τα αποτελέσματα πρέπει να επικυρώνονται με ένα μεγαλύτερο δείγμα. Επιπλέον, δεδομένης της πολλαπλές εστίες του καρκίνου, οι διαφορές συστοιχίας γονιδίων από τα δείγματα μεταξύ των ομάδων μπορεί να μην αντιπροσωπεύει την γονιδιακή έκφραση στον ιστό ως σύνολο. Και πάλι, το μικρό μέγεθος του δείγματος μπορεί να οδηγήσει σε προκατάληψη δειγματοληψία? Ωστόσο, θα αξιολογούνται τόσο του όγκου και φυσιολογικό ιστό και θα προβλέπουν ότι η επίδραση της ισοφλαβόνες σόγιας αποτέλεσμα θα είναι ισοδύναμο σε όλο τον ιστό.

Συμπεράσματα

Η πρόσληψη ισοφλαβονών σόγιας φαίνονται να είναι ασφαλείς μόνο με ήπιες ανεπιθύμητες ενέργειες αναφερθεί και καμία επίδραση στις ορμόνες του ορού. Περαιτέρω αξιολόγηση του ρόλου των ισοφλαβόνες σόγιας στην επαγωγή της απόπτωσης και του κυτταρικού κύκλου ελέγχου είναι δικαιολογημένη στη ρύθμιση προληπτική και θεραπευτική.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Η KUH Θεσμικών Review Board: Ανθρώπινα Θέματα Επιτροπή και το Διοικητικό συμβούλιο του Κάνσας Σίτι VAMC Institutional Review ενέκρινε το πρωτόκολλο της μελέτης. Όλοι οι ασθενείς υπέγραψαν μια ενημερωμένη συγκατάθεση πριν από την εγγραφή στη μελέτη. Το πρωτόκολλο για αυτή τη δοκιμή και την υποστήριξη κατάλογος CONSORT είναι διαθέσιμα ως υποστηρικτικές πληροφορίες? βλέπε Λίστα ελέγχου S1 και το πρωτόκολλο S1.

Ασθενείς

Από τον Απρίλιο 2006 μέχρι τον Μάιο του 2009, 86 άνδρες με εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη είχαν προσληφθεί από το Πανεπιστήμιο του Νοσοκομείου Κάνσας (KUH) Ουρολογική Κλινική και το Κάνσας Σίτι βετεράνοι Ιατρικό Κέντρο Υποθέσεων (VAMC). Οι ασθενείς με κλινικό στάδιο Τ1 ή Τ2 καρκίνο του προστάτη (χρησιμοποιώντας αμερικανική μεικτής επιτροπής σχετικά με τα κριτήρια του Καρκίνου) και κρίθηκαν υποψήφιοι για χειρουργική επέμβαση ήταν επιλέξιμοι για τη μελέτη. Οι ασθενείς που λαμβάνουν ταυτόχρονη χημειοθεραπεία, ακτινοθεραπεία ή θεραπεία εισαγωγική ορμονών αποκλείστηκαν από τη μελέτη. Οι ασθενείς που κατανάλωναν τρόφιμα σόγιας εντός 90 ημερών πριν από την εγγραφή τους επίσης εξαιρούνται, και η πρόσληψη πριν σόγιας προσδιορίστηκε κατά την έναρξη χρησιμοποιώντας την επικυρωμένη τρόφιμα σόγιας ερωτηματολογίου [35]. Επίσης αποκλείονται οι ασθενείς με γνωστό ιστορικό αλλεργίας σόγιας ή δυσανεξία. Κατά τη διάρκεια της μελέτης, οι ασθενείς συμφώνησαν να αποφύγουν διαιτητική πρόσληψη σόγιας και να μην προβεί σε νέες συμπληρώσεις βιταμίνης ή βότανα.

Μελέτη

Μια διπλή-τυφλή, τυχαιοποιημένη, ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο παράλληλη δοκιμή διεξήχθη στην οποία 86 άνδρες με ιστολογική διάγνωση του καρκίνου του προστάτη που είχαν προγραμματιστεί να υποστούν προστατεκτομή έλαβαν είτε κάψουλες ισοφλαβονών σόγιας (Flav-ein, 3’S Β Ltd, Lenexa, KS) ή ταιριάζουν κάψουλες placebo. Οι ασθενείς τυχαιοποιήθηκαν διαδοχικά σε ένα από τα δύο σκέλη. Τυχαία Μετατεθειμένο τυχαιοποίηση μπλοκ χρησιμοποιήθηκε για να κρατήσει τις κατανομές εξισορροπείται σε διάφορα σημεία κατά τη διάρκεια της εγγραφής ασθενών. Ο στατιστικολόγος που δημιουργούνται κώδικες και παρέχεται ένα αντίγραφο αυτών των φαρμακοποιών. Το φαρμακείο διένειμε τα συμπληρώματα στους ασθενείς. Ο τυφλός διατηρήθηκε από το φαρμακοποιό και ο στατιστικός μέχρι το τέλος της μελέτης. Οι 42 ασθενείς που τυχαιοποιήθηκαν σε ισοφλαβόνες σόγιας έλαβε κάψουλες συμβάλλοντας 51 mg συνολικά ισοδύναμα ισοφλαβόνης αγλυκόνη /δ με μέση κατανομή των ισοφλαβονών από 55% daidzein, 30% γλυκιτεΐνη, και το 15% γενιστεΐνη όπως αναλύθηκε με ΝΡ Analytical Laboratories στο St Louis, ΜΟ. Οι 44 ασθενείς που έλαβαν εικονικό φάρμακο συμπληρωμάτων που καταναλώνονται & lt? 0,06 mg συνολικά ισοδύναμα ισοφλαβόνες άγλυκο /d. Αμφότερες οι ομάδες κατανάλωναν τις κάψουλες σε διαιρεμένες δόσεις δύο φορές την ημέρα. Οι ασθενείς έλαβαν την τελευταία τους δόση του συμπληρώματος τη νύχτα πριν από την εισαγωγή για τη χειρουργική επέμβαση. Οι κάψουλες είχαν αγοραστεί χύμα, προκειμένου να ελαχιστοποιηθεί μεταβολής της περιεκτικότητας ισοφλαβόνης που μπορεί να προκύψει από παρτίδα σε παρτίδα. Υποκείμενα δόθηκαν οδηγίες να καταναλώνουν τη συνήθη διατροφή τους, και να εξαιρεθούν τα προϊόντα σόγιας, ώστε να ελαχιστοποιηθεί η κατανάλωση ισοφλαβονών από άλλες πηγές. Για την αξιολόγηση της συμμόρφωσης στο χρονικό σημείο 2 εβδομάδων, η ουρική συγκέντρωση των έξι ισοφλαβονοειδή [genistein, daidzein, γλυκιτεΐνη, εκουόλη, DHD και ODMA] μετρήθηκαν στο Πανεπιστήμιο της Μινεσότα, χρησιμοποιώντας υψηλής πίεσης υγρή χρωματογραφία-διαδοχική φασματομετρία μάζας (LC- /MS μέθοδο MS) τροποποιημένο από δημοσιευθεί μεθοδολογία [36]. Τα δεδομένα ομαλοποιήθηκαν ρυθμίζοντας με κρεατινίνης απέκκριση και των ουροφόρων κρεατινίνης αναλύθηκε από το Kansas City VA Medical Center χρησιμοποιώντας μια μέθοδο πικρικός κινητική αλκαλικό (Abbott 8200, Abbot Laboratories., Abbott Park, IL).

Ορός συλλογή και ανάλυση

η νηστεία συλλέχθηκε αίμα το πρωί στο 0, 2 εβδομάδες, και η ημέρα πριν από την προγραμματισμένη χειρουργική επέμβαση ή θεραπευτική αγωγή. Το τελευταίο χρονικό σημείο ποικίλει ανά θέμα με βάση την προγραμματισμένη ημερομηνία για τη χειρουργική επέμβαση. Η θεραπεία δεν καθυστέρησε να ανταποκριθεί στις απαιτήσεις της μελέτης. Ο ορός διαχωρίστηκε και αποστέλλεται στην Quest Diagnostics (Lenexa, KS) για ανάλυση. Τα δείγματα ορού αναλύθηκαν για την ολική τεστοστερόνη με υγρή χρωματογραφία με διαδοχική φασματομετρία μαζών, η ελεύθερη τεστοστερόνη με διαπίδυση ισορροπίας, σύνολο οιστρογόνων με ραδιοανοσοανάλυση, οιστραδιόλη και ειδικό προστατικό αντιγόνο (PSA) με ανοσοπροσδιορισμό χημειοφωταύγεια, και ολικής χοληστερόλης με δοκιμασία ενζυματικής.

Συλλογή ιστών και Ανάλυση

Κατά τη στιγμή της χειρουργικής επέμβασης και ενώ ακόμα στη σουίτα λειτουργίας, ο χειρουργός ουρολογικά λαμβάνεται δείγματα πυρήνα τόσο της γειτονικό φυσιολογικό προστάτη και καρκινικού ιστού από κάθε δείγμα προστάτη. Εν συντομία, ο προστάτης ήταν χωρισμένο και ο όγκος προσδιορίζεται με βάση την ψηλάφηση, οπτικοποίηση και γνωστή θέση του καρκίνου. Αυτές οι πυρήνες στη συνέχεια τοποθετήθηκαν αμέσως σε υγρό άζωτο και μεταφέρονται στο εργαστήριο για επεξεργασία. Στο εργαστήριο ελήφθη ένα λεπτό (5 μm) κατεψυγμένο τμήμα του πυρήνα και Η &? Ε χρωματίζονται. Αυτό το τμήμα στη συνέχεια εξετάστηκε από παθολόγο ο οποίος επιβεβαίωσε την παρουσία του καρκίνου ή φυσιολογικού ιστού σε κάθε πυρήνα δείγμα. Ο πυρήνας δείγμα στη συνέχεια επισημάνθηκε, τοποθετούνται σε μέσα αποθήκευσης, και διατηρήθηκε μέχρι την ανάλυση. Αυτή η διαδικασία συλλογής πυρήνα δεν παρεμβαίνει με την επακόλουθη παθολογική εκτίμηση της μεταποίησης και των όγκων.

κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης Gene Πίνακες

Για να προσδιοριστεί η σόγια εξαρτάται από τον κυτταρικό κύκλο και το προφίλ της γονιδιακής έκφρασης που σχετίζονται με την απόπτωση σε δείγματα όγκων, χρησιμοποιήθηκαν ανθρώπινα κιτ ανάλυση της έκφρασης απόπτωση SuperArray γονιδίου (σειρά GEArray-Q 01001, Σούπερ Array Co, MD) του κυτταρικού κύκλου και. Ολικό RNA εκχυλίστηκε χρησιμοποιώντας αντιδραστήριο ΤπζοΙ όπως περιγράφηκε προηγουμένως [37] από δύο τυχαία επιλεγμένα δείγματα ασθενών, ένας που κατανάλωναν ισοφλαβόνες και αυτός που πήρε το εικονικό φάρμακο. Στη συνέχεια, βιοτίνη επισημασμένη σύνθεση cDNA, και υβριδοποίηση με τη μεμβράνη έγινε σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή με τη συστοιχία γονίδιο ενδιαφέροντος μας. Σήματα ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας τις βελτιστοποιημένες ρυθμιστικά και πειραματικές συνθήκες. Τα δεδομένα διορθώθηκαν για υπόβαθρο και κανονικοποιούνται σε ένα γονίδιο καθαριότητας.

Στατιστική Ανάλυση

Το μέγεθος του δείγματος προσδιορίστηκε από μια προηγούμενη πιλοτική μελέτη με την ίδια σύνθεση συμπληρώματος [22]. Τα στοιχεία από την πιλοτική μελέτη έδειξε ότι η συνολική μείωση των οιστρογόνων στον ορό θα είναι 0 και 47 στην ομάδα ελέγχου και θεραπείας, αντίστοιχα, με κοινή τυπική απόκλιση των 36. Από την ίδια πιλοτική μελέτη είχαμε προβλέψει ότι η μείωση της τεστοστερόνης του ορού θα είναι 0 και 1,36 για το ελέγχου και του βραχίονα θεραπείας, αντίστοιχα, με κοινή τυπική απόκλιση 2. Το μέγεθος του δείγματος υπολογίστηκε με δύο κύρια τελικά σημεία, συνολικής οιστρογόνων στον ορό και της τεστοστερόνης, σε δύο όψεων επίπεδο σημαντικότητας 0,025. Χρησιμοποιώντας ένα δύο-δείγμα t-test, 43 άτομα ανά ομάδα μας έδωσε πάνω από 95% ισχύ για την ανίχνευση της αναμενόμενη διαφορά των οιστρογόνων και 80% ισχύ για την ανίχνευση της αναμενόμενη διαφορά της τεστοστερόνης.

Τα αρχικά χαρακτηριστικά συγκρίθηκαν με t -ΜΕΛΕΤΕΣ για τις συνεχείς μεταβλητές, μετά από έλεγχο υποθέσεις ομαλότητας και ακριβής δοκιμασία του Fisher για τις κατηγορικές μεταβλητές. Αυτό το πείραμα χρησιμοποιείται μια επαναλαμβανόμενη σχεδίαση μέτρα και οι αναλύσεις για τα αποτελέσματα του ορού διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας Proc Mixed που επιτρέπει τη μοντελοποίηση των δύο μέσων έκβαση του ορού και της δομής συνδιακύμανση, η οποία είναι απαραίτητη για αυτά τα σχέδια. Δύο ξεχωριστά μοντέλα θεωρήθηκαν, μια ανάλυση μοντέλου συνδιασποράς χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνουμε τις ομάδες προσαρμοσμένο για την αρχική τιμή του αποτελέσματος χρησιμοποιώντας μια πρόσθετη μεταβλητή για τη γραμμή βάσης παρατήρησης και ένα μεταβλητό χρόνο της κατηγορίας για τα υπόλοιπα δύο χρονικά σημεία, και ένα δεύτερο μοντέλο που έκανε δεν χωρίζεται από τη γραμμή βάσης παρατήρηση ως ξεχωριστή μεταβλητή. Για όλα τα αποτελέσματα και τα μοντέλα του ορού, θεωρήθηκε θεραπεία με αλληλεπίδραση εβδομάδα. Και τα δύο μοντέλα χρησιμοποίησαν μια δομή συνδιασποράς αυτοπαλίνδρομο AR (1), ο οποίος επιλέχθηκε με βάση το μοντέλο ταιριάζει στατιστικά στοιχεία από Proc Μικτή και την αναμενόμενη δομή συσχέτισης για το πείραμα. Το επίπεδο σημαντικότητας

σ

& lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση SAS έκδοση 9.3 TS Επίπεδο T1M0 (SAS Institute, Inc., Cary, NC).

Υποστήριξη Πληροφορίες

Λίστα ελέγχου S1.

CONSORT Λίστα ελέγχου

doi:. 10.1371 /journal.pone.0068331.s001

(DOC)

πρωτόκολλο S1.

Δίκη Πρωτόκολλο

doi:. 10.1371 /journal.pone.0068331.s002

(DOC)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς θα ήθελαν να ευχαριστήσω Sara Spencer, Christopher Bairl και Neela Saxena για βοήθεια σχετικά με τις επισκέψεις στο γιατρό, η εισαγωγή δεδομένων και αναλύσεις συστοιχίας γονιδίων.