Αφηρημένο

Μια πρόσφατη γονιδίωμα ευρεία μελέτη συσχέτιση του καρκίνου του πνεύμονα μεταξύ ποτέ το κάπνισμα σε γυναίκες στην Ασία έδειξαν ότι ο πολυμορφισμός rs2736100 στο

τ-CLPTM1L

θέση στο χρωμόσωμα 5p15.33 έντονα και σημαντικά που συνδέονται με τον κίνδυνο αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα. Το γονίδιο της τελομεράσης

TERT

είναι μια αντίστροφη μεταγραφάση που είναι κρίσιμη για την αντιγραφή των τελομερών και σταθεροποίηση ελέγχοντας το μήκος των τελομερών. Έχουμε ήδη διαπιστώσει ότι μετριέται στο περιφερικό λευκών αιμοσφαιρίων DNA μεγαλύτερο μήκος των τελομερών συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε μια προοπτική μελέτη κοόρτης του καπνίσματος ανδρών στη Φινλανδία. Να δώσει συνέχεια σε αυτή τη διαπίστωση, θα διεξαχθεί μια ένθετη μελέτη ασθενών-μαρτύρων των 215 θηλυκών περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα και 215 γυναίκες μάρτυρες, 94% εκ των οποίων δεν ήταν ποτέ καπνιστές, στην προοπτική σειρά Μελέτη Υγείας των Γυναικών της Σαγκάης. Υπήρξε μια σχέση δόσης-απόκρισης μεταξύ τριτημόρια του μήκους των τελομερών και τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα (αναλογία πιθανοτήτων (OR), το 95% διάστημα εμπιστοσύνης [CI]: 1,0, 1,4 [0,8-2,5], και 2,2 [1,2 – 4,0], αντίστοιχα ? P trend = 0,003). Περαιτέρω, η ένωση ήταν αμετάβλητο από το χρονικό διάστημα από τη συλλογή του αίματος σε περίπτωση διάγνωσης. Επιπλέον, το αλληλόμορφο rs2736100 G, τα οποία προηγουμένως έχουν δείξει ότι σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε αυτήν την ομάδα, συσχετίστηκε σημαντικά με μεγαλύτερο μήκος των τελομερών σε αυτά τα ίδια άτομα μελέτης (Ρ = 0,030 τάση). Τα ευρήματά μας δείχνουν ότι τα άτομα με μεγαλύτερο μήκος των τελομερών στα περιφερικά λευκά αιμοσφαίρια μπορεί να έχουν αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα, αλλά απαιτούν την αντιγραφή σε επιπλέον υποψήφιους ομάδες και πληθυσμούς

Παράθεση:. Lan Q, Cawthon R, Gao Υ, Hu W, Hosgood HD ΙΙΙ, Barone-Adesi F, et al. (2013) Μεγαλύτερη τελομερούς Μήκος σε κύτταρα του περιφερικού αίματος Λευκό συνδέεται με κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα και του rs2736100 (

CLPTM1L-τ

) Πολυμορφισμός Σε μια προοπτική μελέτη κοόρτης των γυναικών στην Κίνα. PLoS ONE 8 (3): e59230. doi: 10.1371 /journal.pone.0059230

Επιμέλεια: Όλγα Γ Gorlova, το Πανεπιστήμιο του Τέξας Μ D. Anderson Κέντρο Καρκίνου, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 19, Σεπτεμβρίου, 2012? Αποδεκτές: 12 Φλεβάρη 2013? Δημοσιεύθηκε: 26, Μαρτίου του 2013

Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης, χωρίς όλα τα πνευματικά δικαιώματα, και δεν μπορεί να αναπαραχθεί ελεύθερα, διανεμηθεί, να μεταδοθεί, τροποποιηθεί, χτισμένο πάνω, ή ειδάλλως να χρησιμοποιηθεί από οποιονδήποτε για οποιονδήποτε νόμιμο λόγο. Το έργο γίνεται διαθέσιμα υπό την Creative Commons CC0 αφοσίωση δημόσιο τομέα

Χρηματοδότηση:. Η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από τειχών κονδύλια από το Εθνικό Ίδρυμα Καρκίνου (Bethesda, MD). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

γονίδιο της τελομεράσης

TERT

είναι μια αντίστροφη μεταγραφάση που είναι κρίσιμη για την αντιγραφή των τελομερών και σταθεροποίηση ελέγχοντας το μήκος των τελομερών. Τα τελομερή είναι σύμπλοκα DNA-πρωτεϊνης που καπάκι τα άκρα των χρωμοσωμάτων και την προώθηση χρωμοσωμική σταθερότητα. Μέχρι σήμερα, οι συσχετίσεις μεταξύ του μήκους των τελομερών και τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου είναι ασαφή. Οι περισσότερες αρχικές μελέτες χρησιμοποίησαν ένα σχέδιο-μαρτύρων και ανέφερε ότι μετρούνται στο περιφερικό λευκά αιμοσφαίρια βραχύτερο μήκος των τελομερών συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου [1]. Αντίθετα, ορισμένες πρόσφατες δημοσιεύσεις χρησιμοποιώντας ένα μελλοντικό σχεδιασμό κοόρτη έχουν προτείνει ότι πλέον του μήκους των τελομερών μπορεί να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο ορισμένων όγκων, συμπεριλαμβανομένου του πνεύμονα, λέμφωμα, ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, μελάνωμα και [2] – [5]. Πρόσφατα, δύο μελέτες ελέγχου ανέφερε ότι πλέον του μήκους των τελομερών συνδέθηκε με ορθοκολικό, του καρκίνου του μαστού, και την επιβίωση του καρκίνου του μαστού [6] – [9]. Μικρότερο μήκος των τελομερών έχει συσχετιστεί με τη γήρανση και τόσο μικρότερες και μεγαλύτερες του μήκους των τελομερών έχουν συσχετιστεί με τον κίνδυνο ενός αριθμού χρόνιων παθήσεων [10], [11], αν και αυτό ετερογένεια μπορεί να εξηγηθεί εν μέρει από την περίπτωση ελέγχου vs. υποψήφιους κοόρτης σχέδια της μελέτης. Επιπλέον, το μήκος των τελομερών είναι έντονα διαμεσολαβείται από γενετικούς παράγοντες με εκτιμώμενο κληρονομικότητα που κυμαίνεται από 44% έως 80% [12], [13]. Αρκετές μελέτες έχουν εντοπίσει μια σειρά πολυμορφισμών που σχετίζονται με το μήκος των τελομερών [8], [14] – [17]., Αλλά μια ολοκληρωμένη κατανόηση της γενετικής συμβολής με το μήκος των τελομερών δεν έχει ακόμη προκύψει

Πρόσφατα πραγματοποίησαν μια μελέτη σύνδεσης γονιδίωμα-ευρεία (GWAS) του καρκίνου του πνεύμονα μεταξύ ποτέ το κάπνισμα σε γυναίκες στην Ασία και έδειξαν ότι ο πολυμορφισμός rs2736100 στο

τ-CLPTM1L

θέση στο χρωμόσωμα 5p15.33 έντονα και σημαντικά που συνδέονται με τον κίνδυνο του αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα (τάση Ρ = 10

-20) και αντιγράφεται από άλλες μελέτες GWAS [18] – [20]. Περαιτέρω, υπάρχει επιπλέον στοιχεία που δείχνουν ότι αυτό τόπος σχετίζεται με άλλες μορφές καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου της ουροδόχου κύστης, του προστάτη, του τραχήλου της μήτρας, του παγκρέατος, του μαστού, των ωοθηκών, των όρχεων, του εγκεφάλου, και του δέρματος [21] – [26]. Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν ότι η

τ-CLPTM1L

5p15.33 περιοχή θα μπορούσε να διαδραματίσει ένα ρόλο στην ανάπτυξη ενός ευρέος φάσματος καρκίνων με διαφορετικές αιτιολογίες.

αναφερθεί στο παρελθόν ότι είναι πλέον το μήκος των τελομερών συνδέθηκε με τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε α-τοκοφερόλη, β-καροτένιο πρόληψη του καρκίνου (ATBC) υποψήφιους ομάδα [4], η οποία αποτελείται από το κάπνισμα ανδρών στη Φινλανδία. Να δώσει συνέχεια σε αυτή την έκθεση σε ένα σαφώς διαφορετικό πληθυσμό και να διερευνήσει περαιτέρω γενετικές τα ευρήματά μας, πραγματοποιήσαμε μια ένθετη μελέτη ασθενών-μαρτύρων των περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα και των ελέγχων στην προοπτική σειρά Μελέτη Υγείας των Γυναικών της Σαγκάης (SWHS).

Υλικά και μέθοδοι

Θέματα Μελέτη

Οι αναλυτικές μέθοδοι για την SWHS έχουν περιγραφεί στο παρελθόν [27]. Εν συντομία, 74.942 Κινέζοι γυναίκες μεταξύ των ηλικιών 40 και 70 ετών και διαμένουν σε επτά αστικές κοινότητες της Σαγκάης στρατολογήθηκαν στην μελέτη κοόρτης 1997-2000 με ποσοστό συμμετοχής 92,7%. Από τους συμμετέχοντες στη μελέτη, 56.831 (75,8%) παρείχε ένα δείγμα αίματος, που συλλέχθηκε κατά την εγγραφή στην ομάδα. Η μελέτη εγκρίθηκε από τα θεσμικά διοικητικά συμβούλια επανεξέταση όλων των συνεργαζόμενων ιδρυμάτων. Κάθε αντικείμενο μελέτης παρέχεται ένα έντυπο συγκατάθεσης κατά τη στιγμή της εγγραφής και συμπλήρωσαν ένα τυποποιημένο ερωτηματολόγιο συμπεριλαμβανομένων των πληροφοριών σχετικά με τα δημογραφικά χαρακτηριστικά, το ιατρικό ιστορικό, το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου, η χρήση καπνού, οικιστική ιστορία, συμπεριλαμβανομένης της χρήσης των μαγειρικών ελαίων και καυσίμων, καθώς και η έκθεση στον καπνό του περιβάλλοντος από το σύζυγό τους ή από συναδέλφους στο χώρο εργασίας. Συνέχεια για την επίπτωση του καρκίνου και της θνησιμότητας διεξήχθη με επισκέψεις κατ ‘οίκον, καθώς και η σύνδεση με τον πληθυσμό με βάση τη Σαγκάη Cancer Registry. Για τις γυναίκες που είχαν διαγνωστεί με καρκίνο, ιατρικά διαγράμματα αναθεωρήθηκαν και καταγράφηκαν τα χαρακτηριστικά του όγκου. Για τις έρευνες παρακολούθησης, τα ποσοστά παρακολούθησης για τρεις διαφορετικές συνεντεύξεις ήταν 99,8% (2000-2002), 98,7% (2002-2004), και το 96,7% (2004-2007) των μελών ομάδα ή συγγενείς τους.

Χρησιμοποιήσαμε μια ένθετη σχεδιασμός περίπτωση ελέγχου για το έργο αυτό. Οι περιπτώσεις αποτελούνται των περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα περιστατικό. Οι έλεγχοι επιλέχθηκαν από τους συμμετέχοντες στη μελέτη SWHS οι οποίοι ήταν ζωντανοί και χωρίς καρκίνο κατά το χρόνο της υπόθεσης διάγνωση και ατομικά συμφωνημένα σε περιπτώσεις σχετικά ημερομηνία γέννησης (± 2 έτη) και την ημερομηνία συλλογής δείγματος αίματος (± 3 μηνών). Συνολικά, 215 περιπτώσεις καρκίνου του πνεύμονα και 215 μάρτυρες συμπεριλήφθηκαν στην παρούσα μελέτη.

τελομερούς Δοκιμασία

Το DNA που εξάγεται από φλεγμονώδεις πλακούντες με τη μέθοδο της φαινόλης-χλωροφορμίου. Μια μονόχρωμη multiplex ποσοτική PCR δοκιμασία χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό των μετρήσεων των τελομερών [28]. Όλες οι δοκιμασίες διεξήχθησαν στο εργαστήριο του Dr. Richard Cawthon χρησιμοποιώντας την Bio-Rad CFX384 Real-Time Σύστημα Ανίχνευσης PCR. Μασκοφόροι δείγματα επαναληπτικές διάσπαρτες εντός και μεταξύ των παρτίδων δοκιμασία για την αξιολόγηση της δοκιμασίας η επαναληψιμότητα. Περιπτώσεις και μάρτυρες τους αναλύθηκαν διαδοχικά μέσα σε παρτίδες. Ο συνολικός συντελεστής μεταβλητότητας (CV) των επαναληπτικών δειγμάτων ήταν 11% και εσωτερικός συντελεστής συσχέτισης (ICC) ήταν 87%. Εν συντομία, τα αντιδραστήρια στα 10 μι PCR ήταν 10 mmol /L Tris-HCl (ρΗ 8,3), 50 mmol /L ΚΟΙ, 3 mmol /L MgCl2, 0,2 mmol /L κάθε dNTP, 1 mmol /L DTT, 1 mol /L βεταΐνη, 0,75 × SYBR Green Ι, και AmpliTaq Gold DNA πολυμεράση, 0.625 U. Οι τέσσερις εκκινητές ήταν (5 ‘προς 3’): telg (100 nmol /L), ACACTAAGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTAGTGT? Telc (στα 900 nmol /L), TGTTAGGTATCCCTATCCCTATCCCTATCCCTATCCCTAACA? albugcr2 (σε 700 nmol /L), CGGCGGCGGGCGGCGCGGGCTGGGCGGCCATGCTTTTCAGCTCTGCAAGTC? και albdgcr2 (στα 500 nmol /L), GCCCGGCCCGCCGCGCCCGTCCCGCCGAGCATTAAGCTCTTTGGCAACGTAGGTTTC.

Από 5 έως 10 ng ανθρώπινου γενωμικού DNA προστέθηκαν ανά φρέαρ αντιδράσεως. Τρεις φορές σειριακές αραιώσεις ενός δείγματος αναφοράς γενωμικού DNA χρησιμοποιήθηκαν για να δημιουργήσουν δύο τυπικές καμπύλες για κάθε πλάκα PCR (πέντε συγκεντρώσεις με υψηλό 40 ng /αντίδραση και το χαμηλό των 0,49 ng /αντίδραση). Ο θερμικός κύκλος αποτελούνταν από 1 κύκλο 15 λεπτών στους 95 ° C? 2 κύκλους 2 s στους 98 ° C, 30 s στους 49 ° C? 36 κύκλοι των 2 s στους 98 ° C, 30 s στους 59 ° C, 15 s στους 74 ° C με την απόκτηση του σήματος, 30 s στους 84 ° C, και 15 s στους 85 ° C με την απόκτηση του σήματος. Το 74 ° C διαβάζει παρέχονται από τα κατώτατα όρια του κύκλου (CTS) για τελομερή? ο 85 ° C διαβάζει προβλέπεται το CTS για το γονίδιο ενός αντιγράφου (λευκωματίνη). Μετά το τρέξιμο ήταν πλήρης, το Λογισμικό Bio-Rad CFX Διευθυντής χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστεί η T (τελομερών) και S (γονίδιο μοναδικού αντιγράφου) τιμές για κάθε πειραματικό δείγμα με τη μέθοδο πρότυπης καμπύλης.

Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν εις τριπλούν. Η αναλογία των τελομερών PCR σήματα στο γονίδιο μοναδικού αντιγράφου (στην περίπτωσή μας, β-σφαιρίνη) PCR σήμα (δηλαδή η αναλογία T /S) είναι ανάλογο με το μέσο μήκος των τελομερών όλων των κυττάρων σε ένα δείγμα. τιμές Τ /S είναι σχετική μέσο μήκος των τελομερών, που εκφράζεται σε σχέση με την τιμή /Σ Τ του πρότυπου δείγματος αναφοράς DNA, το οποίο εξ ορισμού είναι 1,00. Το πρότυπο δείγμα DNA που χρησιμοποιείται για τις μελέτες μας, έχει ένα πραγματικό μέσο μήκος των τελομερών των περίπου 3300 ζεύγη βάσεων [28]. Για ένα δεδομένο πειραματικό δείγμα, η τιμή Τ είναι ο αριθμός των νανογραμμάρια του DNA αναφοράς που ταιριάζει με την πειραματικό δείγμα για τον αριθμό αντιγράφου του εκμαγείου τελομερών, και η τιμή S είναι ο αριθμός των νανογραμμάρια του DNA αναφοράς που ταιριάζει με την πειραματική δείγματος για αριθμός αντίγραφο του προτύπου μοναδικού γονιδίου αντιγράφου. T /S, ως εκ τούτου, είναι μια σχετική και αδιάστατη τιμή. Δείγματα με T /S & gt? 1,0 έχουν ένα μέσο μήκος των τελομερών μεγαλύτερη από εκείνη του προτύπου DNA? δείγματα με T /S & lt? 1,0 έχουν ένα μέσο μήκος των τελομερών μικρότερη από εκείνη του προτύπου DNA. Multiplex ποσοτική PCR εξαλείφει μια σημαντική πηγή μεταβλητότητας που υπάρχει στο monoplex ποσοτική PCR. Σε monoplex ποσοτική PCR, μεταβολή στην ποσότητα του DNA με πιπέτα σε Τ και S φρεάτια αντίδραση οδηγεί σε διακύμανση T /S ενώ στην πολλαπλή ποσοτική PCR τόσο Τ και S μετρούνται σε κάθε φρεάτιο αντίδρασης, έτσι ώστε η διακύμανση σιφωνισμού μεταξύ πηγάδια δεν επηρεάζουν T /S.

Γονοτυπικές

Γονοτυπικές διεξήχθη χρησιμοποιώντας μία δοκιμασία βελτιστοποιημένη TaqMan (ΑΒΙ, Foster City, CA), στο Εθνικό Ινστιτούτο Καρκίνου Καρκίνος Genomics Research (CGR) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [ ,,,0],19].

Στατιστική Ανάλυση

Επειδή οι αναλογίες Τ /σ που προέρχονται από τα δεδομένα του μήκους των τελομερών δεν είχαν κανονική κατανομή, τα δεδομένα ήταν log μεταμορφωθεί. Η δοκιμή που υπογράφηκε-rank Wilcoxon χρησιμοποιήθηκε για να δοκιμαστεί η διαφορά του μήκους των τελομερών μεταξύ των περιπτώσεων έναντι των ελέγχων. Τα σημεία κοπής για τα τεταρτημόρια μήκους του τελομερούς προήλθαν από την διανομή στους μάρτυρες. αναλογίες πιθανοτήτων (OR) και 95% διαστήματα εμπιστοσύνης (95% ΠΙ) εκτιμήθηκαν χρησιμοποιώντας όρους μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης. το μήκος των τελομερών διαμορφώθηκε τόσο ως συνεχή και κατηγορηματική μεταβλητή. Δοκιμές για τις τάσεις υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας μετασχηματισμένο log μήκος των τελομερών ως συνεχή μεταβλητή. Ηλικία χρησιμοποιήθηκε σε όλα τα υπό όρους μοντέλα και ευθύνονται για τους πιθανούς συγχυτικούς, και το κάπνισμα είχε συμπεριληφθεί σε όλα τα μοντέλα που περιλαμβάνονται ποτέ καπνιστές. Οι μεταβλητές που οδήγησε σε 10% ή μεγαλύτερη αλλαγή στη β-συντελεστή του μεταβλητού μήκους των τελομερών στο βασικό μοντέλο θεωρήθηκαν συγχυτικούς παράγοντες και να συμπεριληφθεί στα τελικά, μοντέλα πολλαπλών μεταβλητών. Όλες οι τιμές P είναι 2 όψεων. Πραγματοποιήσαμε επίσης μια δευτερεύουσα ανάλυση χρησιμοποιώντας κλασματική πολυώνυμα να ερευνήσει μια πιθανή μη-γραμμική συσχέτιση μεταξύ του μήκους των τελομερών και τον κίνδυνο του καρκίνου του πνεύμονα. Το βέλτιστο βαθμό της εξομάλυνσης επιλέχθηκε χρησιμοποιώντας μια διαδικασία επιλογής μοντέλου που προτείνει Royston και Sauerbrei [29]. Για να προσδιορίσετε αν η ένωση θα μπορούσε να οδηγηθεί εν μέρει από αυξημένες μήκος των τελομερών μεταξύ των περιπτώσεων με αδιάγνωστο καρκίνο του πνεύμονα κατά τη στιγμή της συλλογής δειγμάτων αίματος, και να καθορίσει εάν η ένωση διήρκεσε περισσότερο από 5 χρόνια, έχουμε στρωματοποίηση των αναλύσεων από το χρόνο από τη συλλογή αίματος σε περίπτωση διάγνωσης (0- & lt? = 2, & gt? 2-5, και & gt? 5 χρόνια) ή ημερομηνία αναφοράς που επιλέχθηκε ο έλεγχος. Αναλύσαμε την επίδραση του γονότυπου rs2736100 για log-μετασχηματισμένα μήκος των τελομερών με γραμμική παλινδρόμηση, αναθέτοντας ο τακτικός τιμές 1, 2, και 3 για το ΤΤ, GT, και γονοτύπων GG, αντίστοιχα, και την προσαρμογή για την ηλικία.

Αποτελέσματα

τα αρχικά χαρακτηριστικά των συμμετεχόντων στη μελέτη παρουσιάζονται στον πίνακα 1. Η ηλικία των ασθενών και μαρτύρων ήταν συγκρίσιμη και 93% των περιπτώσεων και το 95% των ελέγχων δεν ήταν ποτέ καπνιστές. το μήκος των τελομερών ήταν αντιστρόφως ανάλογη με την ηλικία και στις δύο περιπτώσεις (Spearman συσχέτισης r = -0,39 P & lt? 0,0001) και τους ελέγχους (Spearman συσχέτισης r = -0,41 P & lt? 0,0001). Καμία σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ του μήκους των τελομερών σημαίνει και δημογραφικές παράμετροι παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Επιπλέον, η κατανομή του μήκους των τελομερών ήταν στατιστικά σημαντικά μεγαλύτερη μεταξύ των περιπτώσεων από τους ελέγχους [P = 0,032].

Η

Η οι κίνδυνοι του καρκίνου του πνεύμονα με τριτημόρια του μήκους των τελομερών φαίνεται στον πίνακα 2. Θέματα στη μέση και ανώτατη τριτημόρια είχαν μεγαλύτερο κίνδυνο από ό, τι εκείνοι με το χαμηλότερο τριτημόριο (OR 1.4, 95% CI 0,8-2,5 για τη μεσαία τριτημόριο? 2.2, 1.2 -4,0 για το υψηλότερο τριτημόριο, P trend = 0,003, Πίνακας 2, προσαρμοσμένο για την ηλικία και ποτέ το κάπνισμα). Περαιτέρω προσαρμογή για το παθητικό κάπνισμα και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου του πνεύμονα είχε αμελητέα επίδραση στα αποτελέσματα (OR 1.4, 95% CI 0,8 – 2,4 και 2,2, 1,2 έως 4,0 για τη μεσαία και υψηλότερα τριτημόρια, αντίστοιχα, P trend = 0,004). Απομάκρυνση των συνεχώς κάπνισμα περιπτώσεις και οι έλεγχοι έδωσαν παρόμοια αποτελέσματα (OR 1,7, 95% CI 0,9 έως 2,9 για τη μεσαία τριτημόριο? 2.5, 1.3 – 4.7 για την υψηλότερη τριτημόριο, P τάση = 0,003). Μοντέλα συμπεριλαμβανομένων κλασματικά πολυώνυμα δεν ταίριαζε με τα δεδομένα καλύτερα από ό, τι το απλούστερο γραμμικό μοντέλο (δοκιμή λόγου πιθανότητας p = 0,44). Ο τελευταίος είχε έτσι διατηρούνται στο έδαφος της φειδούς. Οι παρατηρούμενες συσχετίσεις ήταν παρόμοιες σε διαφορετικές ώρες παρακολούθησης (Πίνακας 2) (δηλαδή, ο χρόνος από την ημερομηνία της φλεβοτομία με ημερομηνία διάγνωσης), και μια δοκιμή της ετερογένειας για τις ενώσεις μεταξύ στρωμάτων του χρόνου παρακολούθησης δεν ήταν σημαντική (Ρ = 0,15 ). Ωστόσο, λόγω του μικρού αριθμού των ατόμων σε ορισμένα στρώματα και τις εκτιμήσεις ανακριβής κινδύνου, αναπαραγωγή σε μελέτες με μεγαλύτερα μεγέθη των δειγμάτων είναι απαραίτητη για την αξιολόγηση των πιθανών ετερογένεια. Επιπλέον, δεν υπήρχε καμία απόδειξη ότι η σχέση ανάμεσα στο μήκος των τελομερών και του κινδύνου καρκίνου του πνεύμονα ποικίλει ανάλογα με την ηλικία της αιμοδοσίας (test για ετερογένεια: P = 0,96).

Η

Έχουμε αναφερθεί στο παρελθόν ότι rs2736100 στο χρωμόσωμα 5p15.33 συνδέθηκε έντονα με τον κίνδυνο αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα μεταξύ των μη καπνιστές σε αυτή την ομάδα. Ως εκ τούτου, μελετήθηκε η σχέση μεταξύ των γενετικών δεδομένων και το μήκος των τελομερών σε αυτόν τον πληθυσμό. Η μέση διάρκεια των τελομερών σε συνδυασμό με rs2736100 (

CLPTM1L-τριτ

) παρουσιάζεται στον Πίνακα 3. Το αλληλόμορφο rs2736100 G, το οποίο προηγουμένως αποδειχθεί ότι σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε αυτήν την ομάδα [19], ήταν συσχετίστηκε με μεγαλύτερο μήκος των τελομερών (P trend = 0,03) (Πίνακας 3).

η

Συζήτηση

σε αυτή την προοπτική μελέτη κοόρτης ως επί το πλείστον δεν το κάπνισμα οι γυναίκες στην Κίνα, βρήκαμε ότι μετράται στο περιφερικό λευκών αιμοσφαιρίων μεγαλύτερο μήκος των τελομερών ήταν σημαντικά και θετικά συσχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα και η συσχέτιση αυτή ήταν αμετάβλητη από το χρονικό διάστημα από τη συλλογή του αίματος προς την περίπτωση διάγνωση. Περαιτέρω, το αλληλόμορφο rs2736100 G, το οποίο προηγουμένως αποδειχθεί ότι σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε αυτήν την ομάδα [19], ήταν επίσης σημαντικά σχετίζεται με μεγαλύτερο μήκος των τελομερών.

Η ανακάλυψή μας ότι μεγαλύτερο μήκος των τελομερών σχετίζεται με πνεύμονα τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου είναι συνεπής με προηγούμενη έκθεση μας στην προοπτική σειρά ATBC την πρόληψη του καρκίνου [4] σε άνδρες καπνιστές. Και οι δύο από τις δύο μελέτες είναι υποψήφιο από το σχεδιασμό και είναι οι μόνες μελέτες κοόρτης του μήκους των τελομερών και του καρκίνου του πνεύμονα δημοσιευθεί μέχρι σήμερα, στο καλύτερο της γνώσης μας. Αντίθετα, ορισμένες μελέτες ελέγχου ανέφεραν συσχετίσεις μεταξύ της μικρότερου μήκους των τελομερών και του κινδύνου καρκίνου του πνεύμονα [30] – [32], όπου το μήκος των τελομερών μετρήθηκε σε λευκά κύτταρα του αίματος που συλλέγονται κατά τη στιγμή της ή μετά τη διάγνωση του καρκίνου. Είναι ενδιαφέρον το γεγονός ότι μια έκθεση από την ίδια ομάδα βρήκε ένα σχήματος U συσχέτιση μεταξύ του μήκους των τελομερών και του παχέος κίνδυνο καρκίνου, γεγονός που υποδηλώνει ότι η σχέση μεταξύ του μήκους των τελομερών μετρήθηκε σε λευκοκύτταρα περιφερικού αίματος και του κινδύνου των διαφόρων τύπων των καρκίνων μπορεί να παρουσιάζουν διαφορετικούς τύπους δόσης σχέσεων ανταπόκρισης.

Η ανακολουθία μεταξύ των ευρημάτων σε μελέτες ασθενών-μαρτύρων και ομάδα μπορεί να οφείλεται σε διάφορους λόγους. Πρώτον, το μήκος των τελομερών σε περιφερικό λευκά αιμοσφαίρια θα μπορούσε να τροποποιηθεί από την παρουσία του κακοήθους νόσου. Ως εκ τούτου, η παρατηρούμενη συσχέτιση μεταξύ συντομεύεται το μήκος των τελομερών και της νόσου σε μελέτες ελέγχου θα μπορούσε να είναι αποτέλεσμα της αντίστροφης πόλωσης με την αιτιώδη συνάφεια [16], [33]. Δεύτερον, χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία πριν από τη συλλογή του αίματος μπορεί να προκαλέσει βλάβη του DNA και θα μπορούσαν να επηρεάσουν τελομερών μήκος [34], [35]. Αρκετές από τις μελέτες περιπτώσεων ελέγχου του καρκίνου δεν ανέφεραν την κατάσταση της επεξεργασίας των περιπτώσεων. Pooley et al. σε σύγκριση με τα αποτελέσματα του μήκους των τελομερών από δείγματα και των δύο αναδρομικές μελέτες ασθενών-μαρτύρων και προοπτικές μελέτες κοόρτης ασθενών του μαστού και του καρκίνου του παχέος εντέρου και διαπίστωσε ότι βραχύτερο μήκος των τελομερών συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο στις μελέτες ασθενών-μαρτύρων, αλλά όχι στις προοπτικές μελέτες κοόρτης [16 ], [33]. δείγματα αίματος από άτομα στη μελέτη μας συλλέχθηκαν ένα έως 10 χρόνια πριν από τη διάγνωση, καθώς και τις επιπτώσεις που αναφέρουν παρέμεινε για το μεγαλύτερο χρονικό διάστημα της παρακολούθησης (δηλαδή, περισσότερο από 5 έως 10 έτη). Τρίτον, η ακρίβεια και η ακρίβεια στη μέτρηση του μήκους των τελομερών είναι κρίσιμη για τον υπολογισμό του κινδύνου καρκίνου [36] και μεταβολή αυτών μπορεί να συμβάλει στην αντιφατικά ευρήματα. Για παράδειγμα, η πλάκα και την τοποθεσία του δείγματος σε μια πλάκα είχαν σημαντική επίδραση στις μετρήσεις του μήκους των τελομερών, μολονότι έχουν υψηλή συσχέτιση μεταξύ των πλακών μέσα σε ένα δεδομένο άτομο [36]. Η μονόχρωμη multiplex ποσοτική μέθοδο PCR χρησιμοποιούνται στην παρούσα έκθεση, η οποία αναπτύχθηκε από τον Δρ Ρίτσαρντ Cawthon [28], παρέχει βελτιωμένη συνεκτικότητα σε σύγκριση με άλλες μεθόδους [8]. Στη μελέτη μας, εργαστήριο του Dr. Cawthon διεξήγαγαν τις αναλύσεις με συντελεστή μεταβλητότητας (CV) του 11%. Επίσης, έχουμε αυξημένη ακρίβεια στη μέτρηση του μήκους των τελομερών με την τοποθέτηση του DNA από τις περιπτώσεις και μάρτυρες τους το ένα δίπλα στο άλλο σε μια συγκεκριμένη πλάκα.

Κατ ‘αρχήν, είτε βραχυπρόθεσμα ή μακροπρόθεσμα τελομερή μπορεί να αυξήσει τους κινδύνους καρκίνου, ανάλογα με ιστορία του κυττάρου σωματικών μεταλλάξεων και μικροπεριβάλλον του κυττάρου. Όταν το σημείο ελέγχου του κυτταρικού κύκλου, κυτταρική γήρανση, και την απόπτωση των δικτύων γονίδιο είναι ανέπαφες, σύντομη τελομερή σε διαιρούμενα κύτταρα αναμένεται να είναι προστατευτικό έναντι του καρκίνου, δεδομένου ότι περαιτέρω βράχυνση των τελομερών που προκαλούνται από κυτταρική διαίρεση ενεργοποιεί σύντομα είτε κυτταρική γήρανση ή απόπτωση, εμποδίζοντας το κύτταρο από τις αναπτυσσόμενες σε ένα καρκινικό κύτταρο. Αντιστρόφως, μακριά τελομερή μπορούν να αυξήσουν τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου, επειδή οι επιπλέον γύρους της κυτταρικής διαίρεσης που παρέχεται από τις μεγάλες τελομερή παρέχουν το κύτταρο (και θυγατρικά κύτταρα της) η ευκαιρία να συσσωρεύουν γενετική χτυπήματα (σωματικές μεταλλάξεις) που μπλοκάρουν οι οδοί προς γήρανση και την απόπτωση και την προώθηση ογκογένεση. Εναλλακτικά, μεταξύ των κυττάρων στα οποία οι οδοί προς κυτταρική γήρανση και την απόπτωση είναι ήδη μπλοκαριστεί, εκείνοι με μικρότερη τελομερή είναι επιρρεπείς σε άκρο σε άκρο συντήξεις χρωμόσωμα και επακόλουθη χρωμοσωμική αστάθεια, ένας παράγοντας που συμβάλλει στην καρκινογένεση [37], [38]. Μια προηγούμενη μελέτη έδειξε ότι η ισορροπία μεταξύ της επιμήκυνσης από τελομεράσης και βράχυνσης των τελομερών είναι σημαντικό για την παραγωγή ενός σταθεροποιημένου «βέλτιστη» μήκους που είναι κρίσιμης σημασίας για τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, γήρανση και ελέγχου [39].

Η διαπίστωση της ένωσης μεταξύ τ

SNP rs2736100 και των τελομερών μήκος είναι ενδιαφέρουσα. Rafnar et al. διαπίστωσε ότι δύο SNPs στις

TERT

γονίδιο, rs401681C και rs2736098A αλληλόμορφα, ήταν τόσο σημαντικά που συνδέονται με μικρότερο μήκος τελομερών σε γυναίκες ποτέ δεν το κάπνισμα μεταξύ 85 και 95 ετών σε Καυκάσιους. Ωστόσο, αυτές οι ενώσεις πήγε στην αντίθετη κατεύθυνση, όταν περιορίζονται σε νεότερες γυναίκες ποτέ δεν το κάπνισμα, αν και οι ενώσεις δεν ήταν σημαντικές [23]. Mirabello et al. δεν βρήκε καμία συσχέτιση μεταξύ rs2736100 και το μήκος των τελομερών σε Καυκάσιους [40]. Σημειώνουμε ότι ο rs2736100 και τον καρκίνο του πνεύμονα σχέση ήταν ισχυρότερη μεταξύ ποτέ το κάπνισμα σε γυναίκες στην Ανατολή Ασιάτες από ό, τι στους Καυκάσιους [19], [41]. Επιπλέον, ο κίνδυνος ήταν επίσης υψηλότερη σε σύγκριση με ένα GWAS του καρκίνου του πνεύμονα σε Ιάπωνες και Κορεάτες, οι οποίοι ήταν κυρίως καπνιστές και αρσενικό [42]. Ως εκ τούτου, είναι πιθανό ότι η σχέση μεταξύ rs2736100 και το ίδιο το μήκος των τελομερών μπορεί να ποικίλει ανάλογα με την εθνικότητα, το φύλο, και /ή τη συμπεριφορά του καπνίσματος. Είναι ενδιαφέρον ότι, σε μια προκαταρκτική ανάλυση που περιορίζεται από μικρούς αριθμούς, βρήκαμε κάποια στοιχεία ότι η επίδραση του μεγαλύτερου μήκους των τελομερών και μεγαλύτερο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα περιορίστηκε σε εκείνα τα άτομα που φέρουν το γονότυπο σε κίνδυνο (GT /GG) του rs2736100 (δεδομένα που δεν απεικονίζεται). Ταυτόχρονα, η μελέτη μας είναι σχετικά μικρή και τα ευρήματα θα πρέπει να αξιολογηθούν σε επιπλέον πληθυσμούς, χρησιμοποιώντας μετράται με την ίδια μέθοδο που χρησιμοποιήθηκε εδώ το μήκος των τελομερών. Περαιτέρω, λειτουργικές εργασίες που απαιτούνται για την αναγνώριση του παραλλαγή που αντιπροσωπεύει άμεσα για την υποκείμενη ένωση, καθώς και να μελετήσει το μηχανισμό με τον οποίο αυτή η γενετική παραλλαγή διαμεσολαβεί το μήκος των τελομερών.

Εν ολίγοις, προοπτική μελέτη κοόρτης μας διαπίστωσε ότι πλέον των τελομερών μήκος που μετράται στο περιφερικό λευκών αιμοσφαιρίων DNA συνδέθηκε έντονα με τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα στην κινεζική γυναίκες, και είναι η δεύτερη μελέτη κοόρτης να αναφέρουν τη σύνδεση μεταξύ μεγαλύτερο μήκος των τελομερών και υψηλότερο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα. Ωστόσο, αυτά τα ευρήματα βασίζονται σε σχετικά μικρό μέγεθος των δειγμάτων και απαιτούν αναπαραγωγή σε επιπλέον ομάδες και πληθυσμούς.