Αφηρημένο

Οι μεταλλάξεις στο

KRAS

ογκογονίδιο αναγνωρίζονται βιοδείκτες που προβλέπουν την έλλειψη ανταπόκρισης σε αντι-υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) θεραπείες αντισώματος. Ωστόσο, ορισμένοι ασθενείς με

KRAS

όγκους άγριου τύπου εξακολουθούν να μην ανταποκρίνονται, έτσι ώστε οι άλλοι μεταγενέστεροι μεταλλάξεις στο

BRAF, PIK3CA

και

NRAS

θα πρέπει να διερευνηθεί. Εδώ θα χρησιμοποιηθούν για άμεση αλληλούχιση για να αναλύσει την κατάσταση μετάλλαξης για 676 ασθενείς στο

KRAS

(κωδικόνια 12, 13 και 61),

BRAF

(εξόνιο 11 και εξόνιο 15),

PIK3CA

(εξόνιο 9 και εξόνιο 20) και

NRAS

(codons12, 13 και 61). Κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά ενώσεις αναλύθηκαν μαζί με τη συνολική επιβίωση (OS) των ασθενών με μεταστατικό ορθοκολικό καρκίνο (mCRC). Βρήκαμε 35,9% (242/674) των όγκων έτρεφε μια

KRAS

μετάλλαξη, 6,96% (47/675) έτρεφε μια

BRAF

μετάλλαξη, 9,9% (62/625) έτρεφε μια

PIK3CA

μετάλλαξη και 4,19% (26/621) έτρεφε μια

NRAS

μετάλλαξη.

KRAS

μετάλλαξη συνυπήρχαν με

BRAF

,

PIK3CA

και

NRAS

μετάλλαξη,

PIK3CA

μετάλλαξη exon9 εμφανίστηκε πιο συχνά σε

KRAS

όγκους μεταλλαγμένου (P = 0,027), ενώ

NRAS

μετάλλαξη σχεδόν υπήρχε στο

KRAS

άγριου τύπων (P & lt? 0.001). Οι γυναίκες ασθενείς και ηλικιωμένους ομάδα έτρεφε ένα υψηλότερο

KRAS

μετάλλαξη (P = 0.018 και P = 0,031, αντίστοιχα)?

BRAF

(V600E) μετάλλαξη έδειξε μεγαλύτερη συχνότητα σε καρκίνο του παχέος εντέρου και των φτωχών όγκους διαφοροποίησης (P = 0.020 και P = 0,030, αντίστοιχα)? εγγύς όγκων εμφανίστηκε ένα υψηλότερο

PIK3CA

μετάλλαξη (P & lt? 0.001) και μακρινό μεταστατικούς όγκους μοιράστηκε ένα υψηλότερο

NRAS

μετάλλαξη (P = 0,010). Ωστόσο, στην παρούσα μελέτη δεν παρατηρήθηκε σημαντική αποτέλεσμα βρέθηκε μεταξύ OS και γονιδιακής μετάλλαξης στην ομάδα mCRC. Για τις γνώσεις μας, την πρώτη μεγάλης κλίμακας αναδρομική μελέτη για ολοκληρωμένη γενετικό προφίλ που συνδέονται με την επιλογή της θεραπείας αντι-EGFR MoAbs του πληθυσμού της Ανατολικής Ασίας CRC, εμφανίστηκε μια συγκεκριμένη εικόνα διανομής γονότυπο, και τα αποτελέσματα παρέχονται μια καλύτερη κατανόηση μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά και οι μεταλλάξεις του γονιδίου σε ασθενείς CRC

Παράθεση:. Shen Υ, Wang J, Han Χ, Yang H, Wang S, Lin D, et al. (2013) Οι τελεστές του υποδοχέα επιδερμικού αυξητικού παράγοντα Pathway: Η Γενετική προφίλ του

KRAS

,

BRAF

,

PIK3CA

,

NRAS

μεταλλάξεις στον καρκίνο του παχέος εντέρου χαρακτηριστικά και Εξατομικευμένη Ιατρική. PLoS ONE 8 (12): e81628. doi: 10.1371 /journal.pone.0081628

Επιμέλεια: Αντώνης WI. Lo, το Κινεζικό Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ, Χονγκ Κονγκ

Ελήφθη: 14 Αυγούστου, 2013? Αποδεκτές: 23 Οκτ 2013? Δημοσιεύθηκε: 10 Δεκεμβρίου, 2013

Copyright: © 2013 Shen et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε εν μέρει με επιχορηγήσεις από το Ειδικό Ταμείο Έρευνας για Κοινής Ωφέλειας Βιομηχανίας Υγείας (200.902.002 – 1), Εθνικό Επιστήμης και Τεχνολογίας Μεγάλου Έργου (2008ZX09312, 2012ZX09303012), Εθνικό υψηλής Τεχνολογίας Έρευνας και του Προγράμματος Ανάπτυξης της Κίνας (2011AA02A110) (http: //www.863.gov.cn/)? Πεκίνο Δημοτική Επιστήμης και Τεχνολογίας της Επιτροπής (Z121107005112005, Z121102009212055), Ειδικών Ταμείων για την Κεντρική Αρχή Υγείας (B2009B124) και μεγάλο ερευνητικό πρόγραμμα του Καρκίνου Ινστιτούτο και το Νοσοκομείο της Κινεζικής Ακαδημίας Ιατρικών Επιστημών (LC2012A18). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) εξακολουθεί να προκαλεί πλειοψηφία των θνησιμότητας στον κόσμο [1]. Σε όγκους mCRC, παρατηρήθηκε εξαιρετικά φτωχή πρόγνωση. Ευτυχώς, η ταχεία ανάπτυξη των βιολογικών παραγόντων εμφανίζεται ένα πολλά υποσχόμενο μέλλον στη θεραπεία. Cetuximab ή panitumumab, το μονοκλωνικό αντίσωμα (MoAb) στοχεύει σε υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR), έχει εφαρμοστεί στην κλινική πράξη, και αναδείχθηκε ως μια αποτελεσματική ενιαία προσέγγιση επικουρική πράκτορα ή τη χημειοθεραπεία για τη θεραπεία mCRC [2]. Αυτά τα MoAbs εμποδίζει την κατάντη ενδοκυτταρική σηματοδότηση του EGFR, η οποία περιλαμβάνει δύο κύρια μονοπάτια σηματοδότησης, άξονας RAS-RAF-ΜΑΡΚ, η οποία ασχολείται κυρίως με τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, και η φωσφατιδυλοϊνοσιτόλης 3-κινάση (PI3K) -PTEN-ΑΚΤ, βασικοί μεσολαβητές της επιβίωσης, και την κινητικότητα-εισβολή [3].

Αν και προηγούμενες κλινικές μελέτες έχουν δείξει ότι οι ασθενείς που φέρουν

KRAS

μεταλλάξεις στα κωδικόνια 12 και 13 είναι μη ανταπόκριση στη θεραπεία που στοχεύει EGFR [4] , [5], [6], [7], και η κατάσταση άγριου τύπου φαίνεται μια κατάσταση απάντηση, ορισμένοι ασθενείς άγριου τύπου εξακολουθούν να αποτυγχάνουν να ανταποκριθούν σε αντι-EGFR μονοκλωνικό θεραπεία αντισώματος [8], και ο μηχανισμός παραμένει ασαφής. Είναι πιθανό ότι μεταλλάξεις στα κατάντη δράστες του EGFR μονοπάτι σηματοδότησης, όπως

BRAF

,

PIK3CA

και

NRAS

, μπορεί να προκαλέσει μια αρνητική επίδραση στην απόκριση σε αντι-EGFR στοχευμένη θεραπεία [9], [10], [11].

Μέχρι σήμερα, η γενετική προφίλ των επιμέρους όγκων επηρεάζουν την επιλογή της θεραπείας και την ανταπόκριση στη θεραπεία έχουν αποδειχθεί στην κλινική πράξη, ωστόσο, σημαντικές δεδομένα σχετικά με τη συχνότητα των ογκογονιδίων μεταλλάξεις παρουσιάστηκαν σε δυτικούς πληθυσμούς και λίγα στοιχεία είναι διαθέσιμα για τους Κινέζους. Από την κατάσταση γονιδιακής μετάλλαξης αλλάζει με τις εθνοτικές διαφορές [12], σχεδιάζουμε αυτή τη μελέτη για τη διερεύνηση της εθνότητας-ειδικό ρόλο των μεταλλάξεων στην ανάπτυξη και την εξέλιξη της CRC.

KRAS

,

BRAF

,

PIK3CA

και

NRAS

ανιχνεύθηκαν μεταλλάξεις σε πρωτογενείς όγκους από CRC ασθενείς Κινέζοι και τις πιθανές συσχετίσεις τους με κλινικοπαθολογοανατομικές παράγοντες αναλύθηκαν . Επιπλέον, συνέλεξε τα δεδομένα επιβίωσης των ασθενών υποομάδας mCRC, προκειμένου να επιτευχθεί η κατάλληλη διορατικότητα μεταξύ μετάλλαξη γονιδίων και κατάσταση επιβίωσης. Εμείς εννοείται ότι αυτά τα δεδομένα θα μπορούσε να ωφελήσει το σχεδιασμό των μελλοντικών κλινικών δοκιμών και εξατομικευμένη θεραπεία σε ασθενείς με CRC.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς

Ερευνήσαμε 676 διαδοχικούς ασθενείς που υποβλήθηκαν σε χειρουργική επέμβαση για καρκίνο του παχέος εντέρου στο Cancer Institute /νοσοκομείο της κινεζικής Ακαδημίας Ιατρικών Επιστημών (Πεκίνο, Κίνα) μεταξύ Αυγούστου 2010 και τον Δεκέμβριο του 2011, όλοι οι ασθενείς πραγματοποιήθηκαν πρωτογενή εκτομή στο νοσοκομείο μας, και κανένας ασθενής δεν είχε υποβληθεί σε χημειοθεραπεία πριν από τη χειρουργική επέμβαση. Κάθε ασθενής ήρθε σε επαφή με την παροχή διαθέσιμων στο φορμόλη-σταθερά, ιστούς παραφίνης (FFPE) CRC. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από μεμονωμένους ασθενείς, και το πειραματικό πρωτόκολλο εγκρίθηκε από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review (IRB) στο Cancer Institute /Νοσοκομείο της Κινεζικής Ακαδημίας Ιατρικών Επιστημών και του Πεκίνου Ένωσης Ιατρικό Κολέγιο. CRC διάγνωση επιβεβαιώθηκε με χρώση αιματοξυλίνης και ηωσίνης (ΗΕ) και ιστολογική ανάλυση. Συνολική επιβίωση ορίστηκε ως το χρονικό διάστημα από την έναρξη της διαγνωσθεί CRC μέχρι θανάτου από οποιαδήποτε αιτία ή την τελευταία παρακολούθηση. Τα δημογραφικά και κλινικοπαθολογοανατομικές δεδομένων των ασθενών παρουσιάζονται στον Πίνακα 1.

Η

DNA Εξόρυξη και Μετάλλαξη Ανάλυση

Πριν από την εξαγωγή του γονιδιακού DNA, όλα τα δείγματα CRC εντοπίστηκαν από δύο παθολόγους, προκειμένου να εξασφαλίζουν την ύπαρξη οι αντιπροσωπευτικές κακοήθη κύτταρα σε κάθε δείγμα, τα τμήματα ιστού κόπηκαν σε τομές 5 μm, τότε μικροανατομή διεξήχθη για την εγγύηση κάθε δείγμα ιστού που δοκιμάστηκαν περιείχαν & gt? 80% των καρκινικών κυττάρων. DNA εκχυλίζεται από το QIAamp Blood DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή και αποθηκεύονται στους -80 ° C μέχρι τη χρήση.

Διαπιστώσαμε τα ενεργά σημεία μετάλλαξης στο

KRAS

(κωδικόνια 12 και 13),

BRAF

(exon15),

PIK3CA

(εξόνιο 9 και εξόνιο 20) και

NRAS

(κωδικόνιο 61), όπου τα πιο μεταλλάξεις συμβαίνουν σε αυτά τα γονίδια [13], [14], εκτός αυτού, σπάνια είδη μεταλλάξεων για

KRAS

(κωδικόνιο 61),

BRAF

(εξόνιο 11) και

NRAS

(κωδικόνια 12 και 13) επίσης συμπεριλαμβάνονται. Το πρόγραμμα για την ενίσχυση PCR στο

KRAS

,

BRAF

,

NRAS

και

PIK3CA

exon20 είχε ως εξής: 1 λεπτό από την αρχική μετουσίωση στους 95 ° C, 35 κύκλοι ενίσχυσης που αποτελούνται από 30 s στους 94 ° C, 40 s στους 57 ° C, και 30 s στους 72 ° C, με μία τελική επιμήκυνση επιπλέον στους 72 ° C για 7 λεπτά.

PIK3CA

ενίσχυση εξώνιο 9 διεξήχθη με ένα touchdown πρόγραμμα PCR: 94 ° C (2 λεπτά)? 3 κύκλοι των 94 ° C (30 δευτερόλεπτα), 64 ° C (30 δευτερόλεπτα), 70 ° C (30 δευτερόλεπτα)? 3 κύκλοι των 94 ° C (30 δευτερόλεπτα), 61 ° C (30 δευτερόλεπτα), 70 ° C (30 δευτερόλεπτα)? 3 κύκλοι των 94 ° C (30 δευτερόλεπτα), 58 ° C (30 δευτερόλεπτα), 70 ° C (30 δευτερόλεπτα)? 32 κύκλοι των 94 ° C για (30 sec), 57 ° C (30 δευτερόλεπτα), 70 ° C (40 δευτερόλεπτα)? 1 κύκλος των 70 ° C (5 λεπτά). Κατά την εκτέλεση της PCR, ένας έλεγχος μη-πρότυπο συμπεριλήφθηκε σε κάθε παρτίδα. Μετά την αντίδραση PCR, τα προϊόντα καθαρίστηκαν και υποβλήθηκαν σε άμεση αλληλούχιση (ABI 3500 × L Genetic Analyzer? Applied Biosystems, Carlsbad, CA, USA).

Στατιστική Ανάλυση

Η στατιστική ανάλυση διεξήχθη από το στατιστικό λογισμικό SPSS 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Η Chi-square (χ

2) δοκιμή χρησιμοποιήθηκε για να συγκριθεί το ποσοστό των μεταλλάξεων του γονιδίου ανάμεσα σε ομάδες με διαφορετικά κλινικοπαθολογική παράγοντες. ανάλυση πολλαπλής λογιστικής παλινδρόμησης έγινε για να διερευνήσει τις επιπτώσεις της συμμεταβλητών σε μεταλλάξεις γονιδίων, χρησιμοποιώντας ένα προς τα πίσω κατά βήματα (αναλογία πιθανότητας) μέθοδος με αναλογία πιθανοτήτων (OR) υπολογίστηκε, και οι μεταβλητές που παρουσίασαν στατιστικά σημαντική συσχέτιση με μεταλλάξεις των γονιδίων υποβλήθηκαν σε ανάλυση τελική παλινδρόμησης. Η ανάλυση επιβίωσης έγινε με τη λειτουργία επιβίωσης Kaplan-Meier με τη μέθοδο του δοκιμασία log-rank. Το επίπεδο των δύο όψεων σημαντικότητας ορίστηκε στο

P

& lt?. 0.05

Αποτελέσματα

KRAS

Μετάλλαξη

KRAS

κατάσταση μετάλλαξης του δεν θα μπορούσε να ανατεθεί σε 2 από 676 (0,30%) δείγματα, 35,9% (242/674) έτρεφε μια

KRAS

μετάλλαξη, 25,7% (173/674) στο codon12, 6,8% (46/674) στην codon13, και 2,1% (14/672) στην codon61. Επιπλέον, ένας ασθενής έτρεφε ένα διπλό

KRAS

μετάλλαξη και στα δύο codon12 και 13 (GGT & gt? Γ.Ο.Σ., GGC & gt? AGC). Η αντίστοιχη εντολή για

KRAS

codon12 συχνότητα μετάλλαξης ήταν G12D, G12V, G12A, G12C, G12S και G12R? στο

KRAS

codon13, η πιο συχνή μετάλλαξη ήταν G13D, ακολουθούμενη από G13C και G13S. Το μείζον υποτύπου μετάλλαξη στο codon61 ήταν Q61H, και Q61L, Q61R βρέθηκαν επίσης σε αυτή τη μελέτη (Σχήμα 1).

KRAS

μετάλλαξη εμφανίστηκε πιο συχνά στις γυναίκες από τους άνδρες (41,3% έναντι 32,3%, p = 0,02), και οι ασθενείς άνω των 60 ετών έδειξε επίσης ένα υψηλότερο ποσοστό των

KRAS

μετάλλαξη (39,9% vs 32,0%, Ρ = 0,03). Δεν βρήκαμε άλλες σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ των

KRAS

μετάλλαξη και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά των ασθενών (Πίνακας 1)

Πίνακας Α: KRAS μεταλλάξεις (codons12 & amp? 13:. N = 674? Codon61: n = 672). Πίνακας Β: μεταλλάξεις BRAF (exon11: n = 676? Exon15: n = 675). Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως ποσοστά (αριθμός του συνόλου των δειγμάτων).

Η

BRAF

Μετάλλαξη

Η ιδιότητα του

BRAF

μετάλλαξη ανιχνεύτηκε σε 99,8% (675/676) των δειγμάτων, 6,96% (47/675) έτρεφε μια

BRAF

μετάλλαξη, 4,4% (30/675) στην exon15 και 2,5% (17/676) στην exon11. Η μετάλλαξη V600E σε exon15 ήταν η πιο συχνή υποτύπου (1,8%, 12/675), ως και ακολουθείται από μετάλλαξη V600M και άλλους τύπους. Σε exon11, οι μεταλλάξεις που διανέμονται ευρέως, R461K και G465E ήταν σχετικά πιο συχνά σε αυτές τις μεταλλάξεις (Εικόνα 1).

BRAF

και

KRAS

μεταλλάξεις δεν ήταν αλληλοαποκλειόμενες, 4,55% (11/242) των

KRAS

όγκους μεταλλαγμένου έτρεφε μια

BRAF

μετάλλαξη (του η οποία 7/242 [2,89%] exon15 και 4/242 [1,66%] εξόνιο 11 μεταλλάξεις). Ωστόσο,

BRAF

(V600E) υπήρχε μόνο στο

KRAS

άγρια ​​είδη (0,0% έναντι 2,78% [12/431], P = 0,005). Σε αυτή την ομάδα, V600E μετάλλαξη έδειξε μια ισχυρή συσχέτιση με την αρχική τοποθεσία του όγκου, του όγκου στο παχύ έντερο εμφανίστηκε πιο συχνά για να φιλοξενούν ένα V600E μετάλλαξη (9/285 [3.2%] στο παχύ έντερο vs 3/390 [0.8%] στο ορθό? P = 0.020 ), εκτός αυτού, με τη διαφοροποίηση του όγκου επιδεινώνεται, ένας υψηλότερος ρυθμός μετάλλαξης V600E προέκυψε (5/87 [5,7%] σε κακή διαφοροποίηση έναντι 7/555 [1.3%] σε μέτρια διαφοροποίηση? P = 0,030). Καμία άλλη σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ του

BRAF

μετάλλαξης και των χαρακτηριστικών των ασθενών (Πίνακας 1).

PIK3CA

Μετάλλαξη

PIK3CA

κατάσταση μετάλλαξης του δεν θα μπορούσε να ανατεθεί σε 7,54% (51/676) των δειγμάτων, 9,9% (62/625) έτρεφε μια

PIK3CA

μετάλλαξη, 7,0% (45/643) στην exon9 και 2,67% (17 /636) σε exon20. Η E545K σε exon9 εμφανίστηκε πιο συχνά από ό, τι οποιοδήποτε άλλο υπότυπο μετάλλαξης, που ακολουθείται από E542K, E545G, Q546E και άλλα. Αντιθέτως, σχεδόν όλα μεταλλάξεις σε exon20 ήταν H1047R, μόνο ένα δείγμα ήταν H1047Y μετάλλαξη, το φάσμα αυτών των μεταλλάξεων ήταν έδειξε στην Εικόνα 2. Διαπιστώσαμε επίσης ένα δείγμα στέγαζε ένα διπλό μετάλλαξη στο exon9 (L540V και Q546E), εκτός αυτού, αυτό το δείγμα είχε επίσης ένα

KRAS

μετάλλαξη (G13D). Υπήρξε μια ισχυρή σημαντική συσχέτιση μεταξύ

PIK3CA

exon9 και

KRAS

μεταλλάξεις (23/230 [10,0%] στο

KRAS

μεταλλαγμένο vs 22/412 [5,3%] στην

KRAS

άγρια ​​είδη, P = 0,027), ενώ η συσχέτιση αυτή δεν βρέθηκε στο

PIK3CA

exon20 με

KRAS

μετάλλαξη (P = 0,673).

BRAF

και

PIK3CA

μεταλλάξεις δεν ήταν αλληλοαποκλειόμενες, 10% (4/40) του

BRAF

μετάλλαξη συνυπάρχει με το

PIK3CA

μετάλλαξη (εκ των οποίων 3/40 [7,5%] εξόνιο 9 και 1/40 [2,5%] exon20). Για την κλινικοπαθολογοανατομικές ανάλυση χαρακτηριστικών, οι ασθενείς με όγκους που βρίσκονται στον πρωκτό είχαν σημαντικά χαμηλότερη

PIK3CA

ρυθμός μετάλλαξης από άλλους δικτυακούς τόπους στο παχύ έντερο και ορθοσιγμοειδικής ζώνη μετάβασης (6,1% έναντι 15,1%, P & lt? 0.001) και εγγύς όγκων εμφανίστηκε ένα υψηλότερη

PIK3CA

ρυθμός μετάλλαξης (19,8% έναντι 7,4%, P & lt? 0.001). Καμία άλλη σημαντική συσχέτιση βρέθηκε σε αυτή την ανάλυση (Πίνακας 1)

Πίνακας Α: μεταλλάξεις PIK3CA (exon9: n = 643? Exon20: n = 636).. Πίνακας Β: NRAS μεταλλάξεις (codons12 & amp? 13: n = 630? Codon61: n = 643). Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως ποσοστά (αριθμός του συνόλου των δειγμάτων).

Η

NRAS

Μετάλλαξη

Διαπιστώσαμε

NRAS

μετάλλαξη στο 92,0% ( 621/676) δείγματα, και 4,19% (26/621) έτρεφε μια

NRAS

μετάλλαξη. Παρά το γεγονός ότι

NRAS

είναι στενά για να

KRAS

οποία περιλαμβάνονται επίσης στο Ras γονίδιο [13], σε αντίθεση με

KRAS

, πιο

NRAS

μετάλλαξη συνέβη σε codon61 ( 2,02%, 13/643), και όχι σε codon12 ή 13 (1,75%, 11/630). Η πιο συχνά μετάλλαξη υποτύπου σε codon61 ήταν Q61R, και G12D σε codon12 /13 (Σχήμα 2). Εκτός αυτού, ένα G15W και μία μετάλλαξη G60E επίσης ανιχνεύθηκαν στα δείγματα αυτά. Επιπλέον, έχουμε ακόμα διαπίστωσε ότι

NRAS

μετάλλαξη εμφανίστηκε μια ισχυρή στατιστικά σημαντική συσχέτιση με το

KRAS

άγρια ​​είδη (1/227 [0,44%] στο

KRAS

μεταλλαγμένο vs 25/394 [6,3%] στο

KRAS

άγρια ​​είδη, η P & lt? 0.001). Είναι ενδιαφέρον,

NRAS

codon61 μετάλλαξη έτρεφε μόνο στο

KRAS

άγρια ​​είδη (0,0% έναντι 3,2% [13/410], P = 0,006), ενώ

NRAS

codon12 και 13 δεν συμμερίζεται αυτή τη συσχέτιση (P = 0,063). Μόνο ένα δείγμα έτρεφε μια

BRAF

μετάλλαξη (V600E) με

NRAS

μετάλλαξη (G15W) και 6,78% (4/59)

PIK3CA

μετάλλαξη έτρεφε μια

NRAS

μετάλλαξη (εκ των οποίων 2/59 [3,39%] στα κωδικόνια 12 και 13, 2/61 [3,28%] στην codon61). Επιπλέον,

NRAS

μετάλλαξη εμφανίσθηκαν συχνότερα σε μακρινούς όγκους μετάσταση (12,2% έναντι 3,3%, P = 0,010), και το στάδιο διαφορετικές όγκου έδειξε ένα διαφορετικό

NRAS

ρυθμός μετάλλαξης (P = 0,030) . (Πίνακας 1).

Στην πολυπαραγοντική ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης, έχουμε επιλέξει το φύλο, την ηλικία, το κύριο σημείο του όγκου, η διαφοροποίηση του όγκου, το στάδιο του όγκου και μακρινή μετάσταση ως συμπαράγοντες, και

KRAS

μεταλλάξεις εμφανίστηκαν περισσότερα συχνά σε ασθενείς ηλικίας άνω των 60 (Ρ = 0,023), καθώς και σε γυναίκες ασθενείς (Ρ = 0,016).

BRAF

μεταλλάξεις δεν παρουσίασαν καμία στατιστικά σημαντική συσχέτιση με τα χαρακτηριστικά (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται), ενώ

BRAF

(V600E) μεταλλάξεις μοιράζονται σημαντική συσχέτιση με τη διαφοροποίηση του όγκου (P = 0,016). Όσο για

PIK3CA

μεταλλάξεις, καρκίνο του παχέος εντέρου εμφανίστηκε ένα υψηλότερο ρυθμό μετάλλαξης από τον καρκίνο του ορθού (Ρ & lt? 0.001), ωστόσο,

NRAS

μεταλλάξεις εμφάνισαν πιο συχνά στον καρκίνο του ορθού (Ρ = 0,031), αν και καμία σημαντική συσχέτιση βρέθηκε στην μονοπαραγοντική ανάλυση (P = 0,09). Επιπλέον, μια ισχυρή στατιστικά σημαντική συσχέτιση εξακολουθεί να υφίσταται μεταξύ

NRAS

μεταλλάξεις και μακρινή μετάσταση στην πολυπαραγοντική ανάλυση (Πίνακας 2).

Η

Ανάλυση της γονιδιακής μετάλλαξης στα mCRC ασθενείς

Πενήντα πέντε από 676 ασθενείς επιβεβαιώθηκαν ως mCRC, και όλα αυτά τα 55 δείγματα που συλλέχθηκαν πριν από τη χημειοθεραπεία. Ερευνήσαμε περαιτέρω την κατανομή μεταλλάξεις και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά σύνδεσης σε αυτή την ομάδα. 27,3% (15/55) έτρεφε μια

KRAS

μετάλλαξη, εκ των οποίων 93,3% (14/15) σε codon12 και 6,7% (1/15) στην codon13, αντίστοιχα. Η

BRAF

ρυθμός μετάλλαξης ήταν 10,9% (6/55), 66,7% (4/6) σε exon15 και 33,3% (2/6) σε exon11.

PIK3CA

μετάλλαξη ανιχνεύθηκε στο 18.0% (9/50) όγκους, 66,7% (6/9) ανιχνεύθηκε σε exon9 και 33,3% (3/9) σε exon20. 12,24% (6/49) οι όγκοι εντοπίστηκαν ως

NRAS

μεταλλάξεις, εκ των οποίων το 50% (3/6) σε codons12 και 13, 33,3% (2/6) σε codon61, εκτός αυτού, ένα δείγμα έτρεφε μια G15W μετάλλαξη. Η στατιστική ανάλυση έδειξε ότι

KRAS

μετάλλαξη ήταν σημαντικά υψηλότερο στο στάδιο βαθύτερη εισβολή (5/7 [71,4%] σε Τ4 vs 10/48 [20,8%] σε Τ3? Ή 9.500, 95% CI 1,599 έως 56,426 ? P = 0,013), και του όγκου με χαμηλή διαφοροποίηση παρουσίασαν υψηλότερο

NRAS

ρυθμός μετάλλαξης από μέτρια διαφοροποίηση (5/19 [26,3%] έναντι 1/30 [3,3%]? Ή 10.357, 95% CI 1.103 -97.266? P = 0,027). Δεν βρήκαμε καμία άλλη σημαντική συσχέτιση μεταξύ γονιδιακή μετάλλαξη (περιλαμβάνεται ανάλυση υποομάδων) και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συνολικά ανάλυση επιβίωσης σε ασθενείς mCRC

Η συνολική επιβίωση των ασθενών σε αυτή την υποομάδα αναλύθηκε με την μέθοδο Kaplan-Meier, σε αυτήν την σχετικά μικρή υποομάδα (n = 55), πληροφορίες επιβίωση συλλέχθηκε με επιτυχία μόνο σε 45 ασθενείς, εκ των οποίων 37 είχαν λάβει χημειοθεραπεία μετά τη χειρουργική επέμβαση, είτε με συνεχή έγχυση φθοροουρακίλη, λευκοβορίνη και ιρινοτεκάνη (FOLFIRI) ή συνεχή έγχυση φθοριοουρακίλη, λευκοβορίνης και οξαλιπλατίνη (FOLFOX4). Ωστόσο, το μικρό σχετικά μέγεθος του δείγματος δεν παρουσιάζει κανένα σημαντικό αποτέλεσμα μεταξύ μετάλλαξη γονιδίων και λειτουργικό σύστημα, συμπεριλαμβανομένης της ανάλυσης υποσύνολα γονίδιο (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συζήτηση

Κατά τη διάρκεια των τελευταίων δεκαετιών, μεγάλες ποσότητες ερευνητικά δεδομένα προέκυψαν από τη μοριακή βάση [15], η έρευνα φαρμάκων και τη χρήση [3], γενετικές επιπτώσεις προφίλ [16] μελέτες έχουν οδηγήσει στην ακμάζουσα έρευνα για την ταυτοποίηση των πολλαπλών μοριακών υποσύνολα και στοχευμένη θεραπεία σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Μετά την ανακάλυψη ότι μεταλλαγμένο

KRAS

όγκοι ήταν ανθεκτικά σε αντι-EGFR αντισώματα, οι ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου είναι πλέον συνιστάται να ανιχνεύσει το

KRAS

codons12 και 13 κατάσταση μετάλλαξης πριν από τη θεραπεία MoAbs [8] [17], [18]. Ωστόσο, ακόμη και σε

KRAS

όγκους φυσικού τύπου, έως και 65% των ασθενών ήταν ακόμη ανθεκτικά σε αντι-EGFR μονοκλωνικά αντισώματα [8]. Εκτός αυτού, αν και η ανίχνευση του

KRAS

κατάσταση μετάλλαξης πριν από τη θεραπεία MoAbs είναι ευρέως αποδεκτό, υπάρχει μικρή συμφωνία για την προβλεπόμενη και προγνωστική ρόλο της, για τις δημοσιευμένες μελέτες προβλέπεται διαφορετικά αποτελέσματα στις σχέσεις μεταξύ των

KRAS

μετάλλαξη και τα κλινικά αποτελέσματα στην CRC, και οι κύριοι δράστες σε κατάντη σηματοδοτικό μονοπάτι του

KRAS

, όπως

BRAF

,

PIK3CA

και

NRAS

ήταν έχουν ήδη μελετηθεί σε πολλές κλινικές μελέτες, οι οποίες έδειξαν την ικανότητα να παρουσιάσει ως πιθανές προληπτικής ή προγνωστικούς βιοδείκτες [14], [19].

για τις γνώσεις μας, η μελέτη αυτή διερευνήθηκε η πρώτη φορά διανομής τύπου μετάλλαξης γονιδίων σε κινεζικά CRC του πληθυσμού, και να συμμετέχουν όχι μόνο

KRAS

, αλλά και

BRAF

,

PIK3CA

,

NRAS

μαζί για την εμπεριστατωμένη ανάλυση μεταξύ μετάλλαξη γονιδίων και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά, Επιπλέον, η συνολική επιβίωση του μεταστατικού ορθοκολικού καρκίνου. Προηγούμενες μελέτες συνήθως επικεντρώνονται σε

KRAS

,

BRAF

,

PIK3CA

[20], [21], [22], αλλά δεν περιλαμβάνουν

NRAS

μετάλλαξη, ή το μέγεθος του δείγματος της μελέτης ήταν πολύ μικρή για να επιστήσει επιβεβαίωσε τα συμπεράσματα [20]. Πολλές μελέτες δεν θα μπορούσε να συλλέξει αρκετά κατάλληλα δείγματα για να περιγράψει μια σχετική πλήρες περίγραμμα για τους Κινέζους ασθενείς CRC στο γενετικό προφίλ, και η έρευνά μας με στόχο να παρουσιάσει την μεσολάβηση κλειδί γονιδιακή μετάλλαξη του CRC, σε κάποιο βαθμό, που αντιπροσωπεύει τον πληθυσμό της Ανατολικής Ασίας.

KRAS

γονίδιο κωδικοποιεί μία μικρή πρωτεΐνη G η οποία δρα ως ένα βασικό αισθητήριο σε μονοπάτι EGFR, μεταλλάξεις σε

KRAS

γονίδιο οδηγούν σε συστατική σηματοδότηση μέσω του μονοπατιού EGFR και ενεργό κατάντη ΜΑΡΚ και

εξαρτάται PIK3CA

οδών [18], [23]. Προηγούμενες μελέτες έχουν αναλύσει

KRAS

διανομής μετάλλαξη από τη δυτική του πληθυσμού, η οποία έδειξε ότι G12D ήταν η πιο συχνή υποτύπου μετάλλαξη στο codon12, ακολουθούμενη από G12V, G12C, G12S, G12A και G12R [24]. Ωστόσο, στην παρούσα μελέτη, η αντίστοιχη σειρά για

KRAS

codon12 συχνότητα μετάλλαξης ήταν G12D, G12V, G12A, G12C, G12S και G12R. Όσο για codon13, η διαφορά παρέμεινε στην διανομή υπότυπο (G13 /D /C /R στο δυτικό πληθυσμό vs G13 /D /C /S σε αυτή τη μελέτη). Εκτός από την απόκτηση περισσότερες πληροφορίες και επεκτείνοντας την αναγνώριση του

KRAS

μετάλλαξη, το μέγεθος του δείγματος της σειράς μας, μας επέτρεψε να διερευνηθεί το σπάνιο μετάλλαξη codon61, αφού όγκους μεταλλαγμένου με

KRAS

codon61 οδήγησε σε σημαντικά χαμηλότερο ποσοστό ανταπόκρισης από άγρια ​​είδη (0,0% έναντι 35,7%, p = 0,0055) [14], ενώ η συχνότητα εμφάνισης μετάλλαξης (2,1%) ήταν ακόμη υψηλότερο από ό, τι κάποιες codon12 και 13 μεταλλάξεις, μπορούμε στη συνέχεια πρότεινε ότι πρέπει να ληφθούν ανίχνευσης codon61 σε εξέταση κατά τη διάρκεια της κλινικής πρακτικής. Αυτή η μελέτη έδειξε 35,9%

KRAS

ρυθμός μετάλλαξης, η οποία ήταν παρόμοια με προηγούμενες μελέτες [4], [9], [14], [22], και οι ασθενείς ηλικίας άνω των 60 εμφανίστηκε πιο συχνά στο λιμάνι ένα

KRAS

μετάλλαξη. Εν τω μεταξύ, σε ασθενείς με mCRC,

KRAS

μετάλλαξη ήταν σημαντικά υψηλότερο στο βαθύτερο στάδιο εισβολής (OR 9.500, 95% CI 1,599 έως 56,426? P = 0,013), η οποία ήταν σύμφωνη με Li ΗΤ και οι συνεργάτες του [25] ανέφεραν ότι

KRAS

μετάλλαξη είχε μια ισχυρή συσχέτιση με Dukes ‘στάσης, με το υψηλότερο ποσοστό μετάλλαξη στο Dukes’ όγκους Δ στάσης. μοριακά δεδομένα μας έδωσε την αξιολόγηση της δυνατότητας για την εξέλιξη της νόσου. Στη συνέχεια, οι ασθενείς με ταχεία μακρινό μετάσταση φάνηκε πιο πιθανό να είναι ανθεκτικά στην αρχική αντι-EGFR MoAbs, επειδή

KRAS

μετάλλαξη διατηρήθηκε καθ ‘όλη την CRC ανάπτυξη, την εξέλιξη και τη μετάσταση, με ένα υψηλό (95%) συμφωνία παρουσιάζοντας κατά τη πρωτογενή και συναφή μεταστατικές θέσεις [26] – [27]

BRAF

γονίδιο είναι ένα μέλος της οικογένειας γονιδίων RAF, το οποίο κωδικοποιεί μια πρωτεϊνική κινάση σερίνης-θρεονίνης, δρα ως καθοδικός τελεστής. ενεργοποιημένων KRAS. Προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι

KRAS

και

BRAF

μεταλλάξεις αλληλοαποκλείονται στην mCRC, και

BRAF

μετάλλαξη που συμβαίνουν σε περίπου 5% -10% των όγκων [14], [28 ], [29]. Ωστόσο, στην παρούσα μελέτη, διαπιστώσαμε ότι

KRAS

και

BRAF

μεταλλάξεις δεν ήταν αλληλοαποκλειόμενες, 4,55% (11/242) των

KRAS

όγκους μεταλλαγμένου έτρεφε μια

BRAF

μετάλλαξη, τα δεδομένα μας υποστηρίχθηκαν από Μάο C και οι συνεργάτες του [20], παρά το γεγονός ότι κέρδισε ένα εξαιρετικά υψηλό

BRAF

συχνότητα μετάλλαξης (25,4%, 15/59), για την αναφερόμενη μελέτες

BRAF

μεταλλάξεις παρουσιάζονται συνήθως υψηλότερη συχνότητα μετάλλαξης στο δυτικό πληθυσμό (8,5% -13,9%) [29] – [30] από τους Κινέζους (1,1% -7,0%) [25], [31]. Στη μελέτη μας, BRAF μετάλλαξη (6,96%) ήταν σύμφωνη με προηγούμενα αποτελέσματα, και το κάτω BRAF συχνότητα μετάλλαξης μπορεί να αποδώσει στον πληθυσμό των ασθενών που μελετήθηκαν. Ωστόσο, η διαφορά στη συχνότητα μετάλλαξης δείχνει επίσης ότι η γεωγραφική και εθνοτικές διαφοροποιήσεις παίζουν ρόλο στην κατανομή γονιδιακής μετάλλαξης. Στις δημοσιευμένες μελέτες, τα περισσότερα από τα στοιχεία που συλλέχθηκαν από μόνο

BRAF

τύπο μετάλλαξης V600E, δεν είχαν συμπεριληφθεί άλλα είδη, όπως η V600M [14], [29], ενώ επιβεβαίωσε επίσης αυτό το σημείο για

BRAF

(V600E) υπήρχε μόνο στο

KRAS

άγρια ​​είδη (0,0% έναντι 2,78% [12/431], P = 0,005). Ωστόσο,

BRAF

μετάλλαξη που σχετίζεται με την κακή κλινικά αποτελέσματα ήταν αποδειχθεί σε πολλές μελέτες [10], [14], [29], εδώ έχουμε αναφερθεί ένα

BRAF

ρυθμό μετάλλαξης για το 4,4% (30 /675) σε exon15 και 2,5% (17/676) στην exon11, η οποία ήταν και οι δύο υψηλότερη από ό, τι

KRAS

codon61 (2,1%) μετάλλαξη. Όπως συνιστάται De Roock W και οι συνεργάτες του [14]

BRAF

θα πρέπει να δοκιμαστεί στη συνέχεια μετά από

KRAS

, εμείς υποτίθεται ότι δύο

BRAF

exon15and 11 πρέπει να ληφθούν υπόψη, για να επιλέξετε την καλύτερη κατάλληλο ασθενείς της υποομάδας. Επιπλέον, V600E μετάλλαξη ήταν σημαντικά υψηλότερη σε καρκίνο του παχέος εντέρου και από τον καρκίνο του ορθού (OR 4.035, 95% CI 1,062 έως 15,330? Ρ = 0,041) και των φτωχών όγκου διαφοροποίηση harbored υψηλότερη μετάλλαξη V600E (Ρ = 0,030). Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι παχέος θεραπεία του καρκίνου θα πρέπει να θεωρηθεί από μια βαθύτερη βαθμό, για παχέος εντέρου και του ορθού καρκίνου απαιτείται διαφορετική θεραπεία σε διαφορετικό στάδιο.

Εμείς επιβεβαίωσε τη σχέση μεταξύ

KRAS

και

PIK3CA

μεταλλάξεις στο CRC, η οποία ήταν συγκρίσιμη με προηγούμενες μελέτες [14], [20], [25], [32], και μόνο exon9 (δεν περιλαμβάνεται exon20) μοιράζονται μια ισχυρή συσχέτιση με το

KRAS

μετάλλαξη [14]. Αυτό ήταν συνεπές με τα ευρήματα ότι το κέρδος της λειτουργίας από exon9 μεταλλάξεις (η ελικοειδής τομέα) εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από RAS-GTP δεσμευτική, ιδίως σε E542K και E545K, ενώ exon20 μεταλλάξεις (η περιοχή της κινάσης) που δραστηριοποιούνται ήταν πιθανό να συμβεί σε περίπτωση απουσίας του RAS -GTP δεσμευτική [33]. Η

PIK3CA

συχνότητα μετάλλαξης κυμαίνεται μεταξύ 13,6% -18,0% στη Δυτική πληθυσμού [34] – [35], ενώ ανέφερε σχετικά χαμηλή συχνότητα μετάλλαξης (9,9%). Σπούδασε πληθυσμού μπορεί να οδηγήσει σε αυτή τη διαφορά, κυρίως, για τις άλλες μελέτες που βασίζονται σε κινεζικού πληθυσμού έδειξε επίσης χαμηλότερη συχνότητα μετάλλαξης (4,9% -8,2%) [20], [36]. Στην ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης,

PIK3CA

μετάλλαξη εμφανίστηκε πιο συχνά σε καρκίνο του παχέος εντέρου από το ορθό, ταυτόχρονα, η οποία υποστηρίζεται από μια πρόσφατη μελέτη [37]. Προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι

PIK3CA

ύπαρξη μετάλλαξης σιωπηρή αρνητική πρόγνωση, είτε μικρότερη διάμεση επιβίωση χωρίς εξέλιξη της νόσου (PFS) [38], ή μια μικρότερη διάμεση OS [39] – [40]. Ωστόσο, δεδομένου ότι το

PIK3CA

αποτέλεσμα μετάλλαξης φάνηκε να εξεταστούν από κοινού, η ξεχωριστή επίδραση κάθε υπότυπο εμφανίστηκε ασαφής, για αρκετές μελέτες είχαν έδειξαν ότι exon9 και μετάλλαξης exon20 οδήγησαν σε διαφορετικά αποτελέσματα [14], [41]. Η μεγάλη ευρωπαϊκή μελέτη της κοινοπραξίας που αναφέρεται από μόνο exon20 μετάλλαξη σχετίζεται με χειρότερη κλινική έκβαση [14], και υποστηρίχθηκε από άλλα στοιχεία της έρευνας [16], [42]. Αλλά επειδή η μετάλλαξη exon20 ήταν σχετικά χαμηλό σε σύγκριση με exon9 (2,96% έναντι 9,96%) [14], και στη μελέτη μας (2,67% έναντι 7,0%). Τα υποβαλλόμενα στοιχεία πρέπει να θεωρείται ως κλινικά σχετική υπόθεση και απαιτείται επιβεβαίωση, με βάση την περαιτέρω γενετικό προφίλ και κλινικές δοκιμές έρευνας.

Το γονίδιο RAS (KRAS, ΕΡΑ, HRAS) κωδικοποιεί μια σειρά από GTP /ΑΕΠ που σχετίζονται με διακόπτες που μεταφέρουν εξωκυτταρικά σήματα, με αποτέλεσμα την ρύθμιση της ανάπτυξης και επιβίωσης των κυττάρων [43]. Ως ένας από την οικογένεια RAS,

NRAS

μοιράζονται στενές σχέσεις με το

KRAS

[13], ενώ σε αντίθεση με

KRAS

μετάλλαξη καταλαμβάνει ένα τόσο μεγάλο ποσοστό σε καρκίνο του παχέος εντέρου,

NRAS

μεταλλάξεις ήταν σπάνιες. Irahara Ν και οι συνεργάτες του [44] ανέφεραν μια συχνότητα 2,2% (5/225) μετάλλαξη, και 2,64% (17/644) ρυθμός μετάλλαξης σε μια άλλη μελέτη [14], ενώ εντοπίστηκε 4,19% (26/621) των όγκων έτρεφε μια

NRAS

μετάλλαξη. Η υψηλότερη συχνότητα εμφάνισης NRAS μετάλλαξη παρουσίασε ένα ειδικό χαρακτηριστικό για το κινεζικό πληθυσμό. Όπως σπάνια δεδομένα αναφέρθηκε σε Κινέζους ασθενείς για την κατάσταση της μετάλλαξης ΕΡΑ μελέτη μας μπορεί να παρέχει κάποια πρωτότυπη συνεισφορά. Ωστόσο, οι μελλοντικές έρευνες που απαιτούνται για να σχεδιάσετε μια καλύτερη εικόνα σε αυτόν τον τομέα.

NRAS

μεταλλάξεις δεν ήταν αμοιβαία αποκλειόμενα με το

BRAF

και

PIK3CA

μετάλλαξη, αν και μια άλλη μελέτη δεν συμμερίζεται αυτή [44].

NRAS

μετάλλαξη συνυπήρχαν με

KRAS

άγριου τύπου (Ρ & lt? 0.001), της σημείωσης, η μετάλλαξη codon61 εμφανίστηκε μόνο στο

KRAS

όγκους φυσικού τύπου (Ρ = 0,006) και codon12 και 13 είχαν σημαντικά υψηλότερο ρυθμό μετάλλαξης σε απομακρυσμένες μεταστατικούς όγκους (P = 0,016). Τα δεδομένα αυτά μπορούν να βοηθήσουν εν μέρει να εξηγήσει την αντίσταση αντι-EGFR MoAbs στο

KRAS

ασθενείς άγριου τύπου, όπως

NRAS

μεταλλάξεις σχετίζονταν σημαντικά με ποσοστό ελέγχου της νόσου του κατώτερου και ποσοστό ανταπόκρισης σε MoAbs [14] , [45], και συνιστάται

θα πρέπει να ληφθούν NRAS

ανίχνευση μετάλλαξης υπόψη πριν από τη θεραπεία MoAbs, ειδικά σε

KRAS

όγκους άγριου τύπου. Ωστόσο, λαμβάνοντας υπόψη τη χαμηλή συχνότητα μετάλλαξης, το μέγεθος του

NRAS

αποτέλεσμα μετάλλαξη εξακολουθούν να έχουν συγκεχυμένη, μεγαλύτερο μέγεθος δείγματος ή προεπιλεγμένα έρευνα ασθενείς φαινόταν απαραίτητη στο μελλοντικό σχεδιασμό.

Υπήρχαν διάφοροι περιορισμοί σε αυτήν την αναδρομική μελέτης, συμπεριλαμβανομένης της σχετικά μικρό αριθμό (n = 45) των ασθενών στην ανάλυση επιβίωσης, τότε η περιορισμένη πληροφορία δεν θα μπορούσε να υποστηρίξει επιβεβαίωσε συμπεράσματα στην παρούσα μελέτη. Επιπλέον, θα πρέπει να συμμετέχουν και άλλα δυνητικά αρνητικοί παράγοντες όπως η απώλεια της έκφρασης της φωσφατάση και tensin ομόλογο (PTEN), επομένως, ουσιαστικές επιπτώσεις αυτών των βιοδεικτών στην κλινική πράξη έμεινε περαιτέρω επικύρωση. Επιπλέον, όπως επιγενετικές κατάσταση ή αστάθεια μικροδορυφόρου (MSI) παίζει ένα σημαντικό ρόλο σε όγκους CRC, τα χαρακτηριστικά αυτά θα πρέπει να συμμετέχουν στην ανάλυση. Εκτός αυτού, η γονιδιακή έκφραση στους βασικούς τελεστές, διαφορετικές θέσεις όγκου μπορεί να παρέχει πληροφορίες για την καλύτερη κατανόηση στο CRC, είτε στην καρκινογένεση ή την εξέλιξη του όγκου και αυτά θα πρέπει να ληφθούν υπόψη σε μελλοντικές μελέτες. Όπως υψηλής απόδοσης μέθοδο ανίχνευσης έχει εφαρμοστεί σε διαλογή παραλλαγές του γονιδίου ή αλληλουχίας, διαφορετικούς τύπους γονιδίων εναλλαγές έχουν διερευνηθεί διεξοδικά σε καρκίνο του παχέος εντέρου [46], αυτές οι μελέτες έχουν παράσχει πιθανά γονίδια που χρειάζονται περαιτέρω έρευνες.

Σε μια πρόσφατη τυχαιοποιημένη μελέτη [47], οι ασθενείς είχαν προεπιλεγεί μόνο για

KRAS

codon12, 13 και 61 όγκους άγριου τύπου, ωστόσο, η θεραπεία με panitumumab με ιρινοτεκάνη δεν βελτιώνουν τη συνολική επιβίωση σε σύγκριση με ιρινοτεκάνη και μόνο, τότε η βελτίωση της μοριακή επιλογή ήταν υποχρεωμένη θεωρώντας την ευημερία των ασθενών. Μια άλλη πολυκεντρική τυχαιοποιημένη ελεγχόμενη με εικονικό φάρμακο μονοπάτι δοκιμαστεί ένας αναστολέας πολλαπλών κινασών μυθιστόρημα (Regorafenib) [48], αν και η μελέτη έλαβε σημαντικό αποτέλεσμα στην παράταση διάμεση OS (6.4 vs 5,0 μήνες, αναλογία κινδύνου 0 · 77? 95% CI 0 · 64-0