Αφηρημένο

Βιοτινιδάσης εντοπίστηκε σε secretome ανάλυση των κυτταρικών σειρών καρκίνου του θυρεοειδούς με πρωτεομική. Ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να αναλυθεί η έκφραση βιοτινιδάσης στο θυρεοειδή καρκινικούς ιστούς και λεπτή βελόνα (FNA) δείγματα για να αξιολογήσει διαγνωστικές και προγνωστικές τις δυνατότητές της στον καρκίνο του θυρεοειδούς. Ανοσοϊστοχημική ανάλυση των βιοτινιδάσης διεξήχθη σε 129 θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς (PTC, 34 καλοήθεις ιστούς θυρεοειδούς και 43 δείγματα FNA και συσχετίζεται με την πρόγνωση των ασθενών. Συνολικά έκφραση βιοτινιδάσης ήταν μειωμένη σε PTC σε σύγκριση με καλοήθη οζίδια (p = 0,001). Σύγκριση των επιθετικών και μη-επιθετική PTC έδειξε μείωση στη συνολική έκφραση βιοτινιδάσης στην πρώην (p = 0,001). Απώλεια της συνολικής έκφρασης βιοτινιδάσης συσχετίστηκε με κακή επιβίωσης χωρίς νόσο (p = 0,019, δείκτης επικινδυνότητας (HR) = 3.1). Εξετάσαμε την επίδραση υποκυτταρικών διαμερισματοποίηση των πυρηνικών και κυτταροπλασματικά βιοτινιδάσης στην επιβίωση των ασθενών μειωμένη πυρηνική έκφραση του βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε PTC σε σύγκριση με καλοήθη ιστούς (ρ & lt? 0.001).. Μετά διαστρωμάτωση εντός PTC, πυρηνική έκφραση ήταν μειωμένη σε επιθετικό σε σύγκριση με μη-επιθετικούς όγκους (p & lt? 0.001). ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier έδειξε σημαντική συσχέτιση της απώλειας της έκφρασης πυρηνικών βιοτινιδάσης με μειωμένη νόσου επιβίωση χωρίς (p = 0,014, HR = 5.4). Η κυτταροπλασματική έκφραση βιοτινιδάσης μειώθηκε σε επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς σε σύγκριση με μη επιθετικούς όγκους (ρ = 0.002, λόγος πιθανοτήτων (OR) = 0.29), η οποία ήταν εμφανής με σημαντική συσχέτιση της με προχωρημένο στάδιο T (p = 0.003, OR = 0.28), κομβικό μετάσταση (p & lt? 0.001, OR = 0,16), σε προχωρημένο στάδιο ΤΝΜ (p & lt? 0.001, OR = 0,21) και εξωθυρεοειδική επέκταση (p = 0.001, OR = 0,23). Ωστόσο, στην πολυπαραγοντική ανάλυση εξωθυρεοειδική επέκταση αναδείχθηκε ως το πιο σημαντικό προγνωστικό δείκτη για επιθετικό καρκίνωμα του θυρεοειδούς (p = 0.015, HR = 12,8). Εν κατακλείδι, η απώλεια της συνολικής έκφρασης βιοτινιδάσης είναι ένα μυθιστόρημα δείκτης για την επιθετικότητα του καρκίνου του θυρεοειδούς

Παράθεση:. Έτσι, AK-C, Kaur J, Kak Ι, Ασή J, MacMillan C, Ralhan R, et al. (2012) Βιοτινιδάσης είναι ένας νέος δείκτης για θηλώδες καρκίνο του θυρεοειδούς Επιθετικότητα. PLoS ONE 7 (7): e40956. doi: 10.1371 /journal.pone.0040956

Συντάκτης: Kapil Mehta, Πανεπιστήμιο του Τέξας MD Anderson Cancer Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 26 Μαρτίου, 2012? Αποδεκτές: 15 Ιούνη, 2012? Δημοσιεύθηκε: 23 Ιούλ 2012

Copyright: © 2012 Έτσι, et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Η οικονομική υποστήριξη του έργου αυτού από το Ίδρυμα Όρους Σινά του Τορόντο, Da Vinci Gala Έρανος, ο Άλεξ και η Simona Shnaider πρόεδρος στον καρκίνο του θυρεοειδούς, The Temmy Latner /Dynacare Ίδρυμα και το Τμήμα Mount Sinai Hospital της Ιατρικής Ταμείου Έρευνας αναγνωρίζεται με ευγνωμοσύνη. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του θυρεοειδούς είναι η πιο συχνή κακοήθης ενδοκρινικού όγκου και αντιπροσωπεύει & gt? 90% των καρκίνων των ενδοκρινών αδένων, με εκτιμώμενη ετήσια επίπτωση των 122.803 περιπτώσεις σε όλο τον κόσμο [1]. Οι περισσότεροι καρκίνοι του θυρεοειδούς έχουν εξαιρετική πρόγνωση? τόσο θηλώδη και θυλακιώδη καρκίνων του θυρεοειδούς έχουν περίπου 85% έως 90% τα ποσοστά ίασης, εάν ανιχνευθεί έγκαιρα και να αντιμετωπίζονται κατάλληλα. Ωστόσο, ένα μικρό ποσοστό στην πραγματικότητα είναι επιθετική και μπορεί να αναπτύξει μακρινή μετάσταση που οδηγούν σε υψηλότερη θνησιμότητα [2]. Εν όψει των πιο ταχεία αύξηση στη συχνότητα εμφάνισης του καρκίνου του θυρεοειδούς από οποιοδήποτε άλλο στερεό όγκο (περίπου 3 ανά 100.000 άτομα ανά έτος), αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς και άλλες επιθετικές παραλλαγές αποτελέσει σημαντική πρόκληση για τους ογκολόγους [3]. Αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς λογαριασμών για λιγότερο από 2% όλων των καρκίνων του θυρεοειδούς, ακόμη, προκαλεί έως και 50% των θανάτων από αυτή την κακοήθεια ετησίως? 90% των ασθενών με αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς πεθαίνουν εντός 6 μηνών από τη διάγνωση (ο μέσος ρυθμός επιβίωσης είναι 4 μήνες) [3], [4]. Αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς και επιθετική παραλλαγές του θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς, των ωοθυλακίων και μεταστατικών καρκίνων του θυρεοειδούς έχουν υψηλό κίνδυνο υποτροπής, συντομευμένη επιβίωσης χωρίς νόσο και θάνατο μέσα σε 5 έως 10 έτη [3]. Επιπλέον, αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς είναι ιδιαίτερα ανθεκτική στη συμβατική θεραπεία του καρκίνου. Κατά συνέπεια, αναπλαστικό καρκίνο του θυρεοειδούς και επιθετική παραλλαγές είναι η πηγή σημαντικής νοσηρότητας και θνησιμότητας σε μια ασθένεια που διαφορετικά διαθέτει μια εξαιρετική πρόγνωση. Το κλειδί για την μείωση της σημαντικής απόκλισης των πρόγνωση μεταξύ επιθετικών και μη επιθετικών παραλλαγές είναι να ανιχνεύει τον παράγοντα (ες) η υποκίνηση που είναι υπεύθυνες για την επιθετική συμπεριφορά. Επί του παρόντος, υπάρχει έλλειψη μοριακών δεικτών για την πρόβλεψη της επιθετικότητας του καρκίνου του θυρεοειδούς

Προς το παρόν, αναρρόφηση με λεπτή βελόνα (FNA) είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη προεγχειρητική τεχνική για τη διάγνωση του θυρεοειδούς οζίδια & gt?. 1 cm σε μέγεθος. Ωστόσο, ακόμη και η χρήση των υπερήχων-καθοδηγούμενη FNA είναι συχνά βασανίζεται με αμφίβολα αποτελέσματα της βιοψίας (10-20% όλων των περιπτώσεων) [5]. Αυτοί οι ασθενείς υποβάλλονται σε μεταγενέστερη θυρεοειδεκτομή, μια επεμβατική διαδικασία που είναι συχνά περιττή καθώς η πλειοψηφία των ύποπτων αλλοιώσεων είναι καλοήθεις (& gt? 80%) [6]. Επιπλέον, υποτροπιάζουσες περιπτώσεις απαιτούν πρόσθετη θεραπεία με τη μορφή της χειρουργικής επέμβασης ή ραδιενεργό ιώδιο κατάλυσης που θέτει σε κίνδυνο περαιτέρω την ποιότητα της ζωής τους. Ο χρόνος είναι ώριμος για τον έγκαιρο εντοπισμό των επιθετικών περιπτώσεις μέσω βιοδεικτών (ες) ανίχνευση και κατηγοριοποίηση των ασθενών υψηλού κινδύνου. Ως εκ τούτου, υπάρχει επείγουσα ανάγκη για την ταυτοποίηση βιοδεικτών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως συμπλήρωμα σε FNA να διακρίνει καλοήθη οζίδια του θυρεοειδούς από κακοήθεις όγκους (ιδιαίτερα για πιο ακριβή διάγνωση απροσδιόριστης περιπτώσεις) και υποβοήθηση διάκριση των επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς από μη επιθετική αντίστοιχά τους μετά τη χειρουργική επέμβαση για να καθορίσει την καλύτερη διαχείριση των ασθενών.

σε αναζήτηση νέων βιοδεικτών του καρκίνου για αυτή την κακοήθεια, αναλύσαμε την secretome από καρκίνο του θυρεοειδούς κυτταρικές σειρές για τον εντοπισμό του καρκίνου σχετική εκκρίνεται πρωτεΐνες που μπορούν να χρησιμεύσουν ως πιθανούς βιοδείκτες [7] . Μία από τις υποψήφιες πρωτεΐνες που προσδιορίζονται στη μελέτη μας ήταν βιοτινιδάσης, ένα ένζυμο που καταλύει την υδρόλυση του βιοκυτίνη, το προϊόν της βιοτίνης που εξαρτώνται από αποικοδόμηση καρβοξυλάση, σε βιοτίνη και λυσίνη. ανεπάρκεια βιοτίνης μπορεί να οδηγήσει σε μειωμένη δραστηριότητα του holocarboxylase συνθετάση, ένα ένζυμο το οποίο μεσολαβεί την δέσμευση της βιοτίνης με ιστόνες [8], ένα κρίσιμο συστατικό των επιγενετικών γεγονότα που ρυθμίζουν δομές χρωματίνης και της λειτουργίας των γονιδίων. Παρατηρήθηκε Χαμηλό επίπεδο βιοτινιδάσης σε επιθετικές αναπλαστικό προέρχονται κυτταρική γραμμή (CAL-62) σε σύγκριση με το καρκίνο του θυρεοειδούς κυτταρική γραμμή μη επιθετική θηλώδες προέρχεται (TPC-1). Η κλινική σημασία προτάθηκε αποδεικνύοντας μειωμένα επίπεδα βιοτινιδάσης σε ασθενείς με επιθετικό καρκίνο του θυρεοειδούς »ορούς σε σύγκριση με τα μη-επιθετική και καλοήθεις ασθενών ορούς με κηλίδωση Western [7]. Στην παρούσα μελέτη, ο κύριος στόχος μας ήταν να προσδιοριστεί η κλινική σημασία της βιοτινιδάσης ως δείκτης για τη διάκριση καλοήθων θυρεοειδούς και κακοήθεις όγκους, καθώς και για τη διαστρωμάτωση επιθετική και μη-επιθετική PTC που θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως ένα δυναμικό εργαλείο για τη βελτίωση της διαχείρισης αυτής της κακοήθειας .

Υλικά και Μέθοδοι

κλινικοπαθολογοανατομικών Χαρακτηριστικά των ασθενών και των ιστών Δείγματα

Αυτή η μελέτη εγκρίθηκε από το Διοικητικό συμβούλιο Έρευνας Ηθικής του Mount Sinai Hospital, Τορόντο, Οντάριο, Καναδάς. Αρχειοθετούνται φορμόλη-σταθερά τμήματα ιστού σε παραφίνη ενσωματωθεί από το Mount Sinai Hospital του όγκου Τράπεζας ανακτήθηκαν, επανεξετάζονται από τον παθολόγο (CM), και κόψτε την παροχή 5 μm πάχους τομές για ανοσοϊστοχημική χρώση. Διαγνώσεις προήλθαν από ιστοπαθολογικές αναλύσεις και κλινική εξέταση. Καλοήθεις περιπτώσεις περιλαμβάνονται πολυοζώδη goiters, υπερπλασίας οζίδια, και θυλακιώδη αδενώματα, ενώ όλα τα μη-επιθετική και επιθετικούς όγκους εξετάζονται εδώ ήταν καλά διαφοροποιημένο θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς η οποία περιελάμβανε τις ακόλουθες παραλλαγές: κλασικό, θυλακιώδη, oncocytic, διάχυτη σκληρυντική, και ψηλά κυττάρων. Καθοριστικά χαρακτηριστικά της επιθετικότητας του όγκου ήταν ΤΝΜ στάδιο IV ταξινόμησης, μακρινή μετάσταση, περινευρικές εισβολή, και την υποτροπή της νόσου ή επιμονή. Πρόσθετες προσοχή δόθηκε στους ακόλουθους παράγοντες κινδύνου της επιθετικότητας μεταξύ των οποίων: ΤΝΜ στάδιο ΙΙΙ, αγγειακή εισβολή, εξωθυρεοειδική επέκταση, λεμφικό μετάσταση στους λεμφαδένες, και μη κλασική θηλώδους τύπου παραλλαγή του καρκίνου του θυρεοειδούς (ειδικά η παρουσία τριών ή περισσότερων από αυτούς τους παράγοντες στην εξετάζονται περιπτώσεις)

με βάση αυτά τα κριτήρια, τα δείγματα 163 ιστών που εξετάζονται στην παρούσα μελέτη ταξινομήθηκαν ως 34 καλοήθεις (διάμεση ηλικία: 51 χρόνια? εύρος:. 16-76 ετών), 81 μη-επιθετική (μέση ηλικία : 44 χρόνια? εύρος: 23 έως 71 ετών), και 48 επιθετικά (διάμεση ηλικία: 52 χρόνια? εύρος:. 21 έως 86 ετών) οι όγκοι

φορμόλη-σταθερές κυτταρικές μπλοκ παραφίνης-embedded από αναρρόφηση με λεπτή βελόνα παρασκευάσματα από 43 ασθενείς με παρόμοιο τρόπο από το Mount Sinai Hospital Tumor Bank και κάθε διάγνωση του δείγματος επιβεβαιώθηκε με ιστολογική εξέταση των αντίστοιχων δείγματος θυρεοειδεκτομή (CM). Κατά συνέπεια, τα δείγματα FNA κατηγοριοποιήθηκαν ως 23 καλοήθεις, 13 μη-επιθετικό, και 7 επιθετικά περιπτώσεις.

Ο ασθενής παρακολουθεί τα δεδομένα ανακτήθηκαν από την κλινική βάση δεδομένων για να συσχετίσει την έκφραση της πρωτεΐνης σε όγκους με την κλινική έκβαση για την αξιολόγηση του προγνωστική σημασία της βιοτινιδάσης. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν για μέγιστο χρονικό διάστημα 19,5 ετών.

Ανοσοϊστοχημική ανάλυση των Βιοτινιδάσης Έκφραση σε Θυρεοειδούς καρκινώματα και FNA δείγματα

Τα πλακίδια ανοσοχρωματίστηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [9], με τη χρήση α-βιοτινιδάσης Κ-17 αντίσωμα πολυκλωνικό κουνελιού (Santa Cruz Biotechnology? 1:100 αραίωση) δημιουργήθηκε κατά ενός πεπτιδίου χαρτογράφηση σε μια εσωτερική περιοχή της ανθρώπινης βιοτινιδάσης. Η ανάκτηση αντιγόνου διεξήχθη με ρυθμιστικό διάλυμα Tris-EDTA (10 mM Tris βάση και 1 mM EDTA με 0,05% Tween 20, ρΗ 9,0) σε ένα φούρνο μικροκυμάτων για 20 λεπτά. Στις αρνητικές τομές ιστών ελέγχου, το πρωτογενές αντίσωμα αντικαταστάθηκε με ισότυπο ειδικού μη-άνοση IgG ποντικού. Οι τομές αξιολογήθηκαν με φως μικροσκοπική εξέταση. Οι εικόνες ελήφθησαν με τη χρήση του Visiopharm Integrator Σύστημα (Horsholm, Δανία).

Αξιολόγηση των ανοσοϊστοχημική χρώση

ανοσοθετικού χρώσης αξιολογήθηκε σε πέντε τομείς των τμημάτων ιστού, όπως περιγράφεται [9]. Οι τομές βαθμολογήθηκαν ως θετικά εάν επιθηλιακά κύτταρα έδειξαν ανοσοθετικότητα στο κυτταρόπλασμα, και /ή τον πυρήνα, όταν παρατηρείται από δύο αξιολογητές που δεν γνώριζαν την κλινική έκβαση. Αυτά τα τμήματα βαθμολογήθηκαν ως ακολούθως: 0, & lt? 10% κύτταρα? 1, 10-30% κύτταρα? 2, 30-50% των κυττάρων? 3, 50-70% των κυττάρων? και 4, & gt? 70% των κυττάρων έδειξε ανοσοαντιδραστικότητα. Οι τομές επίσης δέχεται ημι-ποσοτικά με βάση την ένταση ως ακολούθως: 0, κανένας? 1, ήπια? 2, μέτρια? και 3, έντονη. Τέλος, ένα συνολικό σκορ (που κυμαίνονται από 0 έως 7) ελήφθη με την προσθήκη των βαθμολογιών του ποσοστού θετικότητας και της έντασης για κάθε ένα από τα καλοήθη θυρεοειδούς και τομές κακοήθη ιστό του όγκου. Οι ανοσοϊστοχημικές δεδομένα υποβλήθηκαν σε στατιστική ανάλυση.

Συνέχεια Μελέτη

Από τις 129 περιπτώσεις καρκίνου του θυρεοειδούς, ήταν διαθέσιμα για 116 (90%) ασθενείς δεδομένων παρακολούθησης, ενώ 13 ασθενείς ( 10%) χάθηκαν κατά την παρακολούθηση. ασθενείς με καρκίνο του θυρεοειδούς παρακολουθήθηκαν για μέγιστο χρονικό διάστημα 19,5 έτη (εύρος 2-234 μήνες? σημαίνει 43 μήνες και η διάμεση 29 μήνες). Υποτροπή με ή χωρίς μεταστάσεις παρατηρήθηκε σε 19 από 116 (16,4%) ασθενείς να παρακολουθούνται κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης. Ενενήντα επτά ασθενείς που δεν εμφάνισαν υποτροπή ήταν ζωντανοί μέχρι το τέλος της περιόδου παρακολούθησης. Ελεύθερη νόσου επιβίωση εκφράστηκε ως ο αριθμός των μηνών από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την υποτροπή ή μέχρι την τελευταία πιθανή παρακολούθηση στην περίπτωση των ασθενών που είναι απαλλαγμένα από ασθένειες.

Η

παραφίνη ενσωματωμένα τμήματα των καλοήθων όζων του θυρεοειδούς και κακοήθεις όγκοι υπέστησαν χρώση χρησιμοποιώντας αντι-βιοτινιδάσης πολυκλωνικό αντίσωμα, όπως περιγράφεται στο τμήμα των Μεθόδων: α) τμήμα καλοήθη ιστό που δείχνει τα πυρηνικά και συνολική ανοσοχρώση βιοτινιδάσης? β) Papillary μη επιθετική τμήμα καρκίνο του θυρεοειδούς που απεικονίζει μείωση στην πυρηνική χρώση και αύξηση των κυτταροπλασματικών ανοσοχρώση βιοτινιδάσης στα κύτταρα όγκου? γ) Το θηλώδες τμήμα επιθετικό καρκίνο του θυρεοειδούς που δείχνουν μειωμένη συνολική (πυρηνική και κυτταροπλασματική) βιοτινιδάσης ανοσοχρώση? δ) το τμήμα του καρκίνου του θυρεοειδούς που χρησιμοποιείται ως αρνητικός μάρτυρας, που δεν δείχνει ανοσοαντιδραστικότητα σε κύτταρα (a-d, αρχική μεγέθυνση χ 400).

Η

Στατιστική Ανάλυση

Οι ανοσοϊστοχημικές δεδομένα υποβλήθηκαν σε στατιστική ανάλυση χρησιμοποιώντας το λογισμικό SPSS 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL). διαγράμματα διασποράς χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστεί η κατανομή των κυτταροπλασματικών, η πυρηνική και η συνολική έκφραση βιοτινιδάσης σε καλοήθεις, μη-επιθετική και επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς. Ευαισθησία και ειδικότητα υπολογίστηκαν και ποσοτικά με τη χρήση χαρακτηριστική ανάλυση δέκτη που λειτουργεί (ROC). Με βάση την βέλτιστη ευαισθησία και ειδικότητα, όπως αποκαλύπτεται με ανάλυση ROC, cut-off παρήχθησαν για έκφραση πρωτεΐνης βιοτινιδάσης. Για τη συνολική έκφραση βιοτινιδάσης, μια τιμή αποκοπής του ≥3.6 ορίστηκε ως θετικός ανοσοαντιδραστικότητα για στατιστική ανάλυση. Μια αποκοπής αξίας των ≥2 και ≥4 ορίστηκε ως θετικό κριτήριο για την ατομική πυρηνική και κυτταροπλασματική ανοσοθετικότητα βιοτινιδάσης αντίστοιχα για λεπτομερή στατιστικά εξέταση. Οι σχέσεις μεταξύ της έκφρασης βιοτινιδάσης και κλινικοπαθολογοανατομικές παράμετροι εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας Chi-Square και ακριβές τεστ του Fischer. Δύο όψεων τιμές ρ υπολογίστηκαν και ρ & lt? 0,05 θεωρήθηκε ότι ήταν σημαντική. Προγνωστική σημασία της συνολικής, πυρηνική και κυτταροπλασματική έκφραση βιοτινιδάσης αξιολογήθηκε με ανάλυση παλινδρόμησης επιβίωσης Kaplan-Meier και πολυπαραγοντική Cox-αναλογικού κινδύνου.

οικόπεδα διασποράς που δείχνει την κατανομή της συνολικής βαθμολογίες ανοσοχρώση καθορίζεται από IHC τμημάτων ιστού της καλοήθους (n = 34), μη επιθετική (n = 81) και επιθετικό (n = 48) σε ιστούς του καρκίνου του θυρεοειδούς. Ο κάθετος άξονας δίνει το συνολικό σκορ ανοσοϊστοχημική όπως περιγράφεται στις Μεθόδους. α) Μειωμένη πυρηνική συσσώρευση βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε επιθετική και μη-επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς αναλύθηκαν. οικόπεδο Scatter δείχνει τη μείωση στην πυρηνική βιοτινιδάσης ανοσοχρώση με αυξανόμενη επιθετικότητα του όγκου? β) Η αυξημένη κυτταροπλασματική συσσώρευση βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε στον καρκίνο του θυρεοειδούς αναλύθηκαν με μείωση στην έκφραση σε επιθετικό σε σύγκριση με μη-επιθετικές PTC? γ) Διάγραμμα διασποράς έδειξαν μειωμένη συνολική ανοσοχρώση βιοτινιδάσης με αυξανόμενη επιθετικότητα του όγκου.

Η

Ο κάθετος άξονας κάθε καμπύλη δείχνει την ευαισθησία και ο οριζόντιος άξονας δείχνει το 1-ειδικότητα. Τα ευαισθησία, ειδικότητα, και οι τιμές AUC συνοψίζονται στους πίνακες 2α και 2β.

Η

Αποτελέσματα

Ανοσοϊστοχημική ανάλυση των Βιοτινιδάσης Εκφραση σε Θυρεοειδούς ιστοί

Από το 34 καλοήθη ιστούς που αναλύθηκαν, 33 ιστούς (97,1%) έδειξε συνολική καθώς και πυρηνική συσσώρευση της πρωτεΐνης βιοτινιδάσης (Πίνακας 1, Σχήμα 1α). Η κυτταροπλασματική έκφραση του βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε 9 (26,5%) καλοήθεις ιστούς (Πίνακας 1). Μεταξύ των κακοηθών ιστών του θυρεοειδούς, 39/129 (30,2%) έδειξε απώλεια του συνολικού έκφρασης βιοτινιδάσης (τόσο στον πυρήνα και το κυτταρόπλασμα). Κατά τη διαστρωμάτωση σε πυρηνικά και κυτταροπλασματικά υποκυτταρικά διαμερίσματα, 84/129 περιπτώσεις (65,1%) έδειξε απώλεια πυρηνικών βιοτινιδάσης και 87/129 (67,4%) έδειξε αυξημένη κυτταροπλασματική έκφραση σε καρκινικά κύτταρα (Πίνακας 1, Σχήμα 1 b). Αξίζει να σημειωθεί ότι, η απώλεια της γενικής όσο και της πυρηνικής βιοτινιδάσης και αύξηση στο κυτταροπλασματικό έκφραση βιοτινιδάσης ήταν σημαντική σε κακοήθεις όγκους σε σύγκριση με καλοήθη οζίδια (p = 0.001, ρ & lt? 0.001, ρ & lt? 0.001 αντίστοιχα Πίνακας 1). Σε επιθετικό καρκίνο του θυρεοειδούς, υπήρχε σημαντική μείωση της συνολικής έκφρασης βιοτινιδάσης (p = 0,001) σε αμφότερα πυρηνική (ρ & lt? 0.001) (= 0,002 ρ) τα επίπεδα και κυτταροπλασματική σε σύγκριση με μη-επιθετικών όγκων του θυρεοειδούς (Πίνακας 1, Σχήματα 1γ και 2 ). Δεν παρατηρήθηκε ανοσοχρώση σε τομές ιστών που χρησιμοποιούνται ως αρνητικοί μάρτυρες όπου το πρωτογενές αντίσωμα αντικαταστάθηκε με ισότυπο IgG ειδικού (Σχήμα 1δ).

FNA δείγματα από καλοήθεις (Πλαίσιο Α), μη επιθετική θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς (πίνακας Β ), και επιθετική θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς (Πίνακας C) περιπτώσεις ανοσοχρώση με 1:100 α-βιοτινιδάσης Κ-17 πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού. FNA δείγμα χρησιμοποιήθηκε ως αρνητικός έλεγχος δεν παρουσιάζει καμία ανοσοαντιδραστικότητα σε κύτταρα (Πίνακας Δ). Μικροφωτογραφίες δείχνουν έντονη μείωση της έκφρασης των πυρηνικών βιοτινιδάσης σε πιο επιθετικές περιπτώσεις καρκίνου του θυρεοειδούς και παρουσιάζονται στα 400 × αρχική μεγέθυνση.

Η

Μειωμένη Συνολικά Βιοτινιδάσης έκφραση συσχετίζεται με Tumor Επιθετικότητα

Η μείωση της συνολική έκφραση βιοτινιδάσης συσχετίζεται σημαντικά με προχωρημένο στάδιο T (p = 0.001, OR = 4,29), κομβικό μετάσταση (p & lt? 0.001, OR = 6,96), φάση ΙΙΙ + IV όγκους (ρ = 0.001, OR = 4,65), και εξωθυρεοειδική επέκταση ( p & lt? 0.001, OR = 5,27). Επιπλέον, η απώλεια των κυτταροπλασματικών και πυρηνικών βιοτινιδάσης μεμονωμένα έδειξε επίσης στατιστικά σημαντική συσχέτιση με προχωρημένο στάδιο T (p = 0.003, ρ & lt? 0,001 αντιστοίχως), κομβικών μετάσταση (ρ & lt? 0.001, ρ & lt? 0,001 αντιστοίχως), το στάδιο III + IV όγκους (ρ & lt? 0.001 , ρ = 0,002 αντιστοίχως), και εξωθυρεοειδική επέκταση (p = 0,001, ρ = 0,003 αντίστοιχα? Πίνακας 1). Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν ότι η απώλεια της βιοτινιδάσης τόσο κυτταροπλασματική (p = 0.002, Πίνακας 1) και πυρηνικά (ρ & lt? 0.001, Πίνακας 1) επίπεδο συνδέεται με την επιθετική φαινότυπο του καρκίνου του θυρεοειδούς. Η ένωση της μείωσης πυρηνικών και κυτταροπλασματικά βιοτινιδάσης σε αυτές τις κλινικές παραμέτρους παρέχει πρόσθετη αξιοπιστία στην απώλεια της συνολικής βιοτινιδάσης συσχετισμού σημαντικά με την επιθετικότητα του όγκου (ρ = 0,001, Πίνακας 1).

Disease καμπύλες επιβίωσης χωρίς δείχνει έκφραση βιοτινιδάσης σε (α) πυρήνα [διάμεση ελεύθερη νόσου επιβίωση 116 μήνες]? (Β) κυτταρόπλασμα [διάμεση ελεύθερη νόσου επιβίωση 111 μήνες]? (Γ) και συνολικά (πυρήνα και κυτταροπλάσματος) [διάμεση ελεύθερη νόσου επιβίωση 109 μήνες]. Οι καμπύλες επιβίωσης χωρίς νόσο δείχνει (δ) εξωθυρεοειδική επέκταση [διάμεση ελεύθερη νόσου επιβίωση 36 μηνών], και (ε) κομβικό κατάσταση [διάμεση ελεύθερη νόσου επιβίωση 54 μήνες].

Η

Δυναμικό βιοτινιδάσης ως βιοδείκτη για καρκίνο του θυρεοειδούς

λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη ανάλυση καμπύλης χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό του δυναμικού της έκφρασης βιοτινιδάσης ως βιοδείκτη για τη διάκριση καλοήθη οζίδια και κακοήθων όγκων (Πίνακας 2). Απώλεια της συνολικής και της πυρηνικής καθώς και η αυξημένη κυτταροπλασματική έκφραση του βιοτινιδάσης διακρίνεται καλοήθεις ιστούς από τους κακοήθεις όγκους με τιμές AUC του 0.816, 0.972 και 0.662 αντίστοιχα (Σχήμα 3, Πίνακας 2). Κατά τη διαστρωμάτωση του καρκίνου σε επιθετική και μη επιθετικούς όγκους, μειώνεται συνολικά, πυρηνική και κυτταροπλασματική έκφραση του βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς με τιμές AUC των 0.715, 0.696 και 0.347 αντίστοιχα. (Σχήμα 3, Πίνακας 2).

Ανίχνευση Βιοτινιδάσης Εκφραση σε Fine Needle αναρροφήματα του θυρεοειδούς Καρκινοπαθών Δείγματα

Αναλύσαμε την έκφραση της βιοτινιδάσης σε 23 καλοήθεις και κακοήθεις 20 θυρεοειδούς δείγματα FNA (Σχήμα 4). Παρατηρήθηκε παρόμοιο μοτίβο έκφρασης στα τμήματα FNA όπως παρατηρήθηκε στα χειρουργικά δείγματα θυρεοειδικού ιστού. Σημαντική μείωση στη συνολική έκφραση βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε κατά τη σύγκριση των καλοήθων τμήματα FNA (23/23, 100%) σε κακοήθη τμήματα (13/20, 65%) (ρ = 0,002). Όλες οι καλοήθεις τμήματα FNA έδειξαν πυρηνική έκφραση (23/23, 100%) της πρωτεΐνης βιοτινιδάσης σε σύγκριση με τα τμήματα του καρκίνου του θυρεοειδούς (13/20, 65%? P = 0,002). Η κυτταροπλασματική έκφραση του βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε 6/23 (26,1%) καλοήθεις περιπτώσεις σε σύγκριση με 2/20 (10%) στις περιπτώσεις καρκίνου του θυρεοειδούς (ρ = 0,25, OR = 0.315, 95% C.I. = 0,056 έως 1,78). Κατά τη σύγκριση των επιθετικών και μη επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς, η συνολική βιοτινιδάσης έκφραση μειώνεται στην πρώην (5/7, 71,4%) σε σύγκριση με το τελευταίο (2/13, 15,4%, p = 0,022). Επιπλέον, μείωσε σημαντικά την πυρηνική έκφραση παρατηρήθηκε σε επιθετικό (5/7, 71,4%) των περιπτώσεων καρκίνου του θυρεοειδούς σε σύγκριση με μη-επιθετικές περιπτώσεις (2/13, 15.4%, ρ = 0.022, OR = 0.073, 95% CI = 0.008- 0.674). Ομοίως, η μειωμένη κυτταροπλασματική έκφραση του βιοτινιδάσης παρατηρήθηκε σε επιθετικό (7/7, 100%) των περιπτώσεων καρκίνου του θυρεοειδούς σε σύγκριση με τα μη-επιθετικές περιπτώσεις (11/13, 84.6%, ρ = 0,521).

Συνολικά βιοτινιδάσης Απώλεια ως προγνωστικός την εξέλιξη της νόσου και την πρόγνωση

Τα δεδομένα παρακολούθησης των ασθενών με καρκίνο του θυρεοειδούς 116 έως 19,5 χρόνια χρησιμοποιήθηκαν για να εκτιμηθεί η προγνωστική σημασία της βιοτινιδάσης για την πρόβλεψη υποτροπής σε αυτούς τους ασθενείς μετά την ολοκλήρωση της πρωτοβάθμιας θεραπεία. ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier έδειξε ότι μείωσε σημαντικά επιβίωσης ελεύθερης νόσου σε ασθενείς με μειωμένη έκφραση των βιοτινιδάσης στον πυρήνα (p = 0,014, HR = 5,4, 95% CI = 1,2 – 24,1? διάμεση επιβίωση 116 μήνες, Σχήμα 5α), κυτταρόπλασμα (p = 0.022, HR = 2,8, 95% CI = 01.01 – 07.02? διάμεση επιβίωση 111 μήνες, Σχήμα 5β) και συνολικά (p = 0,019, HR = 3,1, 95% CI = 01.02 – 07.08? διάμεση επιβίωση 109 μήνες, Σχήμα 5c). ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier έδειξε ότι μείωσε σημαντικά επιβίωσης ελεύθερης νόσου σε ασθενείς με εξωθυρεοειδική επέκταση (p & lt? 0.001, HR = 9,0, 95% Ο.Ι. = 3,1 – 26,4)? διάμεση επιβίωση 36 μηνών, Εικόνα 5d), και κομβικά κατάσταση (p & lt? 0.001, HR = 12,2, 95% Ο.Ι. = 2,8 – 53,8? διάμεση επιβίωση 54 μηνών, Εικόνα 5e). ανάλυση παλινδρόμησης Cox (πολυμεταβλητή) διεξήχθη για να προσδιοριστεί η προγνωστική δυνατοτήτων της πυρηνικής και κυτταροπλασματικής βιοτινιδάσης, μεμονωμένα και σε συνδυασμό, για ασθενείς με καρκίνο του θυρεοειδούς σε σύγκριση με την ηλικία, το φύλο, t-στάσης, κομβικών κατάσταση, συνολικά στάδιο, το είδος ιστολογία, ιστολογία βαθμού, και εξωθυρεοειδική προέκταση (Πίνακας 3). Εξωθυρεοειδική επέκταση και κομβικά κατάσταση εμφανίστηκε πιο σημαντική από ό, τι βιοτινιδάσης ως δείκτες για κακή πρόγνωση (p = 0.015, HR = 4,1, 95% CI = 01.03 με 12.08, και p = 0,035, HR = 5,6, 95% CI = 1,1 – 27,8 αντίστοιχα) .

Συζήτηση

υπάρχει μια ανικανοποίητη ανάγκη για την ταυτοποίηση νέων βιοδεικτών (ες) που μπορούν όχι μόνο να βοηθήσει στη διάκριση καλοήθων θυρεοειδούς από κακοήθεις όγκους, αλλά επίσης έχουν την ικανότητα να διακρίνουν μεταξύ επιθετικών και μη επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς. Τα ευρήματα της μελέτης μας δείχνουν ότι βιοτινιδάσης ικανοποιεί και τα δύο αυτά κριτήρια. Επιπλέον, η μελέτη μας δείχνει τα επίπεδα βιοτινιδάσης μειώθηκε στην επιθετική καρκινώματα του θυρεοειδούς και προτείνει το δυναμικό της για να χρησιμεύσει ως δείκτης για την επιθετικότητα του όγκου. Αυτή η νέα χρήση του βιοτινιδάσης υπογραμμίζει το δυναμικό της για να χρησιμεύσει ως εργαλείο για τον εντοπισμό επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς σε πρώιμα στάδια για πιο εστιασμένη θεραπεία. Πρόσφατα Kang

κ.ά.

[10] που παρατηρήθηκε μείωσε τα επίπεδα βιοτινιδάσης στο πλάσμα των ασθενών με καρκίνο του μαστού με ανάλυση πρωτεώματος και πρότεινε βιοτινιδάσης ως δυνητικό ορολογική βιοδείκτη για τη διάγνωση του καρκίνου του μαστού. Σε μια άλλη μελέτη, Huang

κ.ά.

[11] εντόπισε ένα προφίλ γονιδιακής έκφρασης που αποτελείται από 11 γονίδια που θα μπορούσε να προβλέψει πυελική μετάσταση λεμφαδένα σε καρκίνωμα του τραχήλου χρησιμοποιώντας ολιγονουκλεοτιδικούς μικροσυστοιχιών. Περιέργως, ένα από τα γονίδια στο πάνελ τους ήταν βιοτινιδάσης, κάτω ρυθμίζονται πυελική μετάσταση λεμφαδένα, παρόμοια με τα ευρήματά μας στον καρκίνο του θυρεοειδούς. Αυτές οι μελέτες υποστηρίζουν τα ευρήματα μας ότι βιοτινιδάσης μειώνεται σημαντικά σε επιθετικό καρκίνο του θυρεοειδούς. Η επιβεβαιωτικά στοιχεία από την επιθετική φαινότυπους των καρκίνων του θυρεοειδούς, εκτός από διαφεύγει περαιτέρω σε έναν πιθανό ρόλο που μπορεί να διαδραματίσει βιοτινιδάσης στο γενικό μηχανισμό της επιθετικότητας του καρκίνου.

FNA είναι ένα απαραίτητο εργαλείο για τη διαχείριση των όζων του θυρεοειδούς και FNA όλων θυρεοειδούς οζίδια & gt? 1 εκατοστό έχει προταθεί [12], [13]. FNA παρέχει μια ασφαλέστερη εναλλακτική λύση σε θυρεοειδεκτομή ως διαγνωστικό εργαλείο, καθώς μόνο το 5% των όζων του θυρεοειδούς είναι κακοήθη [14]. Έκφραση της συνολικής και της πυρηνικής βιοτινιδάσης σε καλοήθεις δείγματα FNA και την απώλεια της σε κακοήθεις περιπτώσεις, ειδικά σε επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς, αντιστοιχεί στο μοτίβο που παρατηρείται σε ιστούς καρκίνου του θυρεοειδούς. Έτσι βιοτινιδάσης μπορεί να έχει εφαρμογή ως πιθανή διαγνωστικό δείκτη για δείγματα FNA με ασαφή διάγνωση και μπορεί ενδεχομένως να μειώσει τις περιττές εκτομές του θυρεοειδούς. Αυτό θα μπορούσε να μειώσει σημαντικά τη νοσηρότητα που συνδέεται με την αδικαιολόγητη επέμβαση και να προσφέρει μια πιο συστηματική προσέγγιση για την αναγνώριση και αντιμετώπιση των ασθενών υψηλού κινδύνου. Ωστόσο, τα ευρήματα αυτά απαιτούν επικύρωση σε μια μεγαλύτερη ομάδα ασθενών να σκιαγραφήσει τις δυνατότητές της ως συμπλήρωμα σε κυτταρολογική ή ιστολογική ευρήματα. Η λειτουργική σημασία της βιοτινιδάσης σε ανάπτυξη ή /και την πρόοδο του καρκίνου παραμένουν άγνωστες. Παρ ‘όλα αυτά, τα ευρήματα της μελέτης μας δείχνουν μείωση στα επίπεδα βιοτινιδάσης στο επιθετικό καρκίνωμα του θυρεοειδούς.

Κλασικά ηλικία, το φύλο, το στάδιο του όγκου, εξωθυρεοειδική επέκταση (spread έξω από την κάψουλα του θυρεοειδούς), κομβική θέση, τον τύπο ιστολογία, βαθμός ιστολογίας όλα έχουν προγνωστική σημασία και παρατηρήθηκαν να συνδέονται με βιοτινιδάσης έκφραση στη μελέτη μας. Για τον προσδιορισμό ανεξάρτητη προγνωστική σημασία για βιοτινιδάσης, όλα αυτά τα συμβατικά δείκτες κακής πρόγνωσης για τον καρκίνο του θυρεοειδούς ενσωματώθηκαν σε ένα μοντέλο πολλών μεταβλητών και εκτιμήθηκε η πρόσθετη σημασία του βιοτινιδάσης. Ωστόσο, στην πολυπαραγοντική ανάλυση επέκταση εξωθυρεοειδική και κομβικά κατάσταση εμφανίστηκε πιο σημαντική από ό, τι βιοτινιδάσης ως δείκτες για κακή πρόγνωση (p = 0.015, HR = 4,1, 95% CI = 01.03 έως 12.08, και p = 0,035, HR = 5,6, 95% CI = 1,1 έως 27,8 αντίστοιχα). Με δεδομένη τη σύνδεση των βιοτινιδάσης με συμβατικούς δείκτες της κακής πρόγνωσης, βιοτινιδάσης δεν έχουν ανεξάρτητη προγνωστική σημασία σε αυτή την ομάδα μελέτης. Παρ ‘όλα αυτά, τα ευρήματά μας έχουν σημασία εν όψει των περιορισμένων μελετών για βιοτινιδάσης σε καρκίνους του ανθρώπου? σημαντικό αυτές τις λίγες εκθέσεις επιβεβαιώνουν και υποστηρίζουν τις παρατηρήσεις μας.

Η βιοτινιδάσης ρόλο παίζει στην επιθετικότητα του καρκίνου μένει να διευκρινιστεί. Μια πιθανή υπόθεση θα επικεντρωθεί στο ρόλο της βιοτίνης ως συν-παράγοντας για μια πληθώρα ενζύμων που είναι υπεύθυνα για τη δομή της χρωματίνης και της σταθερότητας. διασπά βιοτινιδάσης βιοκυτίνη καθιστώντας ελεύθερη βιοτίνη άμεσα διαθέσιμα. Η απώλεια αυτού του ενζύμου θα προκαλέσει στη συνέχεια μια βιοτίνη ανεπαρκές κράτος το οποίο με τη σειρά του επηρεάζει ιστονών βιοτινυλίωση στην αναδιάταξη της χρωματίνης. Είναι γνωστό ότι η βιοτινυλίωση του Κ12 σε ιστόνης Η4 είναι σημαντική για την επισκευή των κατασκευών του DNA και ετεροχρωματίνη, καθώς και την καταστολή των γονιδίων και των τρανσποζονίων να διατηρήσει γονιδιωματική σταθερότητα και να μειώσουν τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου στα ανθρώπινα κύτταρα και

Drosophila melanogaster

[8] . Θα μπορούσε να σκεφτεί ότι η βιοτίνη ανεπάρκεια μπορεί να οδηγήσει σε κρίσιμες επιγενετικές μεταβολές στον καρκίνο αποδίδοντας μια επιθετική φαινότυπο σε αυτό κατά τη διαδικασία. Αν η απώλεια της βιοτινιδάσης παίζει ένα λειτουργικό ρόλο ή σχετίζεται με την επιθετικότητα του καρκίνου εξακολουθεί να αντιμετωπιστεί σε μελλοντικές μελέτες. Παρ ‘όλα αυτά, τα ευρήματά μας είναι χρήσιμες και θα εφαρμόζεται για κλινική χρήση μόνο του ή σε συνδυασμό με άλλα βιοδεικτών (ες) σε διάγνωση ή /και πρόγνωση των επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς.

BRAF (V600E) θεωρείται ένας αρνητικός προγνωστικός δείκτης σε PTC και θα μπορούσε να ήταν μια σύγχυση προγνωστικός παράγοντας στην ανάλυσή μας. Ένας από τους περιορισμούς της μελέτης μας είναι η μη διαθεσιμότητα των δεδομένων μετάλλαξη BRAF (V600E) στην ομάδα μας των ασθενών με καρκίνο του θυρεοειδούς. Η πλειοψηφία των PTCs κινούνται με γενετική γεγονότα που αφορούν μετάλλαξη BRAF ή RAS και οι μετατοπίσεις που παράγουν RET /PTC ογκογονίδια [15]. BRAFV600E μετάλλαξη βρίσκεται στο 40% περίπου των PTC και σε περισσότερο από το 50% πτωχά διαφοροποιημένο καρκίνων του θυρεοειδούς [16], [17]. Η συστατική ενεργοποίηση του BRAF που προκαλείται από BRAF (V600E) μετάλλαξη οδηγεί στην ενεργοποίηση του RET /RAS /BRAF /ΜΑΡΚ μονοπάτι μεταγωγής σήματος και παίζει σημαντικό ρόλο στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων με τη ρύθμιση της κυκλίνης D και ρ27 [18]. Αυτή η μετάλλαξη συνδέεται επίσης με μειωμένη έκφραση του mRNA για συμμεταφορέα ιωδιούχου νατρίου και τον υποδοχέα TSH, δείκτες διαφοροποίησης θυρεοειδούς [19]. μετάλλαξη BRAF σχετίζεται με την εξέλιξη της PTC να πτωχά διαφοροποιημένο καρκίνωμα του θυρεοειδούς, λόγω της αυξημένης ευαισθησίας προς ΤGFβ-επαγόμενη επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβαση (ΕΜΤ) [20], και με αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα (VEGF) υπερέκφραση και συνδέεται υψηλότερο κίνδυνο μετάστασης, επανάληψη και μικρότερη επιβίωση χωρίς νόσο [21], [22]. Ένα υψηλό ποσοστό των BRAF (V600E) αλληλόμορφα ορίζει ένα μοριακό υπότυπο PTC και προβλέπει ένα αποτέλεσμα φτωχότερη νόσου [23], [24] και η ανάλυση των μεταλλάξεων BRAF από Pyrosequencing πρόσφατα έχει αποδειχθεί ότι είναι χρήσιμο για να βελτιώσετε την διαστρωμάτωση του κινδύνου των ασθενών PTC [ ,,,0],25]. Ωστόσο, ανεξήγητη αντικρουόμενα αποτελέσματα έχουν επίσης αναφερθεί στην βιβλιογραφία. Μια πρόσφατη μελέτη έδειξε BRAF (V600E) είναι κοινή σε φινλανδική ασθενείς με χαμηλού κινδύνου PTC, αλλά δεν προβλέπουν υποτροπή μετά από μακροχρόνια παρακολούθηση αρχική θεραπεία με ολική θυρεοειδεκτομή και ραδιενεργό ιώδιο απομεινάρι εκτομή [26]. Σε μια άλλη πρόσφατη μελέτη στην οποία συμμετείχαν 4585 συνεχόμενους ασθενείς οι οποίοι βρέθηκαν να έχουν κακοήθεις ή απροσδιόριστο όζους του θυρεοειδούς με υπερηχογράφημα, ανάλυση BRAF (V600E) μετάλλαξης με τη χρήση τριών ανεξάρτητων μοριακών αναλύσεις σε δείγματα κυτταρολογίας FNA δεν έδειξε κάποια σημαντική συσχέτιση με πολυεστιακότητα, εξωθυρεοειδική επέκταση, και των λεμφαδένων κόμβος μετάσταση [27]. Η εξερεύνηση της σχέσης μεταξύ της μείωσης του βιοτινιδάσης, BRAF (V600E) μετάλλαξη και επιθετικών καρκίνων του θυρεοειδούς, καθώς και με την πρόγνωση της νόσου σε μεγαλύτερες ανεξάρτητες ομάδες αυτής της κακοήθειας θα αποτελέσουν το αντικείμενο των μελλοντικών μελετών. Ωστόσο, αυτό δεν αναιρεί τη σημασία της μελέτης μας, η οποία είναι η πρώτη που αναδεικνύουν τη σχέση μεταξύ βιοτινιδάσης και του καρκίνου του θυρεοειδούς και από τις λίγες που απεικονίζουν και να ενισχύσει την έκρηξη αποδεικτικά στοιχεία που εμπλέκουν βιοτινιδάσης ως παράγοντας στην επιθετικότητα του καρκίνου. Συμπληρωματικές εργασίες στον τομέα αυτό θα μπορούσε να ρίξει φως κρίσιμο σχετικά με το μηχανισμό της επιθετικότητας στον καρκίνο του θυρεοειδούς, καθώς και να βοηθήσει την ανακάλυψη του νέου μηχανισμού (ες) που μπορεί να ευθύνεται για τις δυνατότητες της βιοτινιδάσης να καθορίσει την επιθετικότητα του καρκίνου του θυρεοειδούς. Αυτή η πολύτιμη γνώση μπορεί να δώσει σημαντική ώθηση στην τρέχουσα έρευνα στον τομέα με την παροχή νέων οδών για τις μελλοντικές εργασίες.