Αφηρημένο

Ο καρκίνος του πνεύμονα είναι ένας από τους πιο κοινούς καρκίνους και είναι η κύρια αιτία θανάτου παγκοσμίως. Με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία είναι η κύρια μέθοδος θεραπείας σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα. προηγούμενες μελέτες μας έδειξαν ότι πολυμορφισμοί ενός νουκλεοτιδίου (SNPs) σε ορισμένα γονίδια μεταφορέα έπαιξε σημαντικό ρόλο στην αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα. Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να διερευνηθεί η σύνδεση των SNPs σε γονίδια μεταφορέα και με βάση την πλατίνα αποτελεσματικότητα χημειοθεραπείας. Τα κύρια πολυμορφισμοί στους μεταφορείς

OCT2, LRP, AQP2, AQP9

και

TMEM205

γονίδια γονότυπος σε 338 ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα. Η rs195854 σε γονοτυπική μοντέλο, rs896412 σε γονοτυπική και υποτελούς μοντέλα για όλα τα θέματα που παρουσίασαν στατιστικά σημαντική συσχέτιση με την απάντηση χημειοθεραπεία. Στην ανάλυση στρωματοποίησης,

TMEM205

rs896412,

OCT2

rs1869641 και rs195854,

AQP9

rs1516400 και

AQP2

rs7314734 έδειξε σημαντική σχέση με την απάντηση της χημειοθεραπείας. Εν κατακλείδι, οι γενετικών πολυμορφισμών στο

OCT2

, A

QP2

,

AQP9

και

TMEM205

μπορεί να συμβάλει στην αντιμετώπιση της χημειοθεραπείας σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα.

Παράθεση: Wang Υ, Γιν JY, Li XP, Chen J, Qian CY, Zheng Y, et al. (2014) Ο Σύνδεσμος Transporter Γονίδια πολυμορφισμών και καρκίνο του πνεύμονα Χημειοθεραπεία Response. PLoS ONE 9 (3): e91967. doi: 10.1371 /journal.pone.0091967

Επιμέλεια: Masaru Katoh, Εθνικό Κέντρο Καρκίνου, Ιαπωνία

Ελήφθη: 21 Οκτ του 2013? Αποδεκτές: 16 Φλεβάρη, 2014? Δημοσιεύθηκε: 18 Μαρτίου, 2014

Copyright: © 2014 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε εν μέρει από το Εθνικό ενισχυτή υψηλής τεχνολογίας Ε &? Α Πρόγραμμα της Κίνας 863 πρόγραμμα επιχορήγησης 2012AA02A517 (ZYC) (https://www.863.gov.cn/), Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας Επιχορηγήσεις 81173129 και 81373490 (ZYC) και 81202595 (JY) (https://scholarmate.nsfc.gov.cn/scm/), Πρόγραμμα για την Ειδική επιστημονική Ίδρυμα Ερευνών Γιατρός πειθαρχίες στο Πανεπιστήμιο του Υπουργείου Παιδείας της Κίνας Grant 20110162110034 (ZYC), Χουνάν επαρχιακού Φυσικό Ίδρυμα Επιστημών της Κίνας Grant 12JJ7006 (ZYC) (https://www.hnst.gov.cn/zxgz/zkjj/). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του πνεύμονα είναι ένας από τους πιο κοινούς καρκίνους και είναι η κύρια αιτία θανάτου παγκοσμίως [1]. Το ποσοστό των πέντε χρόνων επιβίωσης ήταν περίπου 15, η οποία είναι πολύ χαμηλότερη από ό, τι άλλες μορφές καρκίνου [2]. Ο καρκίνος του πνεύμονα αποτελείται από δύο τύπους: μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) και μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (SCLC). Η χειρουργική επέμβαση είναι ο στυλοβάτης της θεραπείας για ασθενείς με ΜΜΚΠ νωρίς, ενώ το μεταγενέστερο στάδιο NSCLC και SCLC ασθενείς υποβλήθηκαν σε θεραπεία κυρίως από πλατίνα χημειοθεραπεία με βάση [3], [4]. Η σισπλατίνη, καρβοπλατίνη ήταν οι πιο συχνά χρησιμοποιούμενη πρώτης γραμμής κλινικά θεραπευτικά φάρμακα, αλλά οι όγκοι ήταν πάντα ανθεκτικά σε αυτά και μειωμένη αποτελεσματικότητα τους [4].

Η αντίσταση χημειοθεραπεία έχει διάφορους μηχανισμούς, συμπεριλαμβανομένης της μειωμένης συσσώρευση ενώσεις λευκόχρυσου ( μειώσετε την πρόσληψη ή την αύξηση της εκροής από τους μεταφορείς), αποτοξίνωση, ή αυξημένο επίπεδο επιδιόρθωσης βλαβών του DNA και ούτω καθεξής [3], [5]. Αρκετοί μεταφορείς συμβάλλουν στην συσσώρευση λευκοχρύσου στα καρκινικά κύτταρα. Ακουαπορινών (AQPs) είναι μέλη μιας οικογένειας διαμεμβρανικών πρωτεϊνών που έχουν τη λειτουργία μεταφοράς καναλιών μοριακού νερό. Η οικογένεια AQPs περιέχει τουλάχιστον 11 διαφορετικά είδη [6]. Η έκφραση του

AQP2

και

AQP9

μειώθηκαν σε Pt ανθεκτικές γραμμές παρουσιάζουν ότι είναι οι πιθανές νέες μεταφορείς Pt ναρκωτικών [7].

TMEM205

ήταν μία νέα διαμεμβρανική πρωτεΐνη, που έχει τέσσερα πεδία διαμεμβράνης, προβλέπεται να είναι μια πρωτεΐνη έκκρισης που σχετίζονται με αλληλουχίες νουκλεοτιδίων του [5]. Η αντίσταση στη σισπλατίνη αυξήθηκε με επιμόλυνση

TMEM205

γονιδίου σε σισπλατίνη ανθεκτικά κύτταρα [8], [9]. διαμεμβρανική πρωτεΐνη 205 (

TMEM205

) μπορεί να μειώσει τη συσσώρευση της ένωσης λευκόχρυσου με την αύξηση της εκροής [5]. Το οργανικό κατιόν μεταφορέας 2 (

OCT2

), που κωδικοποιείται από

SLC22A2

γονίδιο, είχε ένα πιθανό ρόλο για την αύξηση πρόσληψης πλατίνας και ευαισθησία [10] – [12]. Αντίσταση σχετίζονται πρωτεΐνη (

MVP /LRP

) μπορεί πλειορύθμιση ευαισθησία αυξάνοντας τη συσσώρευση κυτταρικής σισπλατίνη ή /και με τη μείωση σισπλατίνη εκροή από πυρήνες σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών [13]. Για να συνοψίσω, αυξάνοντας την έκφραση του

AQP2

,

AQP9

,

OCT2

και

MVP /LRP

ή μειώνοντας την έκφραση

TMEM205

μπορεί να οδηγήσει σε ευαισθησία της πλατίνας.

με το ίδιο φάρμακο και δόση οι ασθενείς θα έχουν διαφορετική ανταπόκριση στη χημειοθεραπεία λόγω των συγκρίσιμων εσωτερικές ή εξωτερικές διαφορές όπως η ηλικία του ασθενούς, το κάπνισμα, τη γενική υγεία τους και γενετικές παραλλαγές [ ,,,0],14]. Πολλές μελέτες διαπίστωσαν ότι SNPs σε μεταφορείς ναρκωτικών παίξει σημαντικό ρόλο στο μεταβολισμό και τη μεταφορά των θεραπευτικών φαρμάκων, και που επηρεάζουν την απόκριση στη θεραπεία [15]. Daniele Campa et.al [16] διερεύνησε τη σχέση του

ABCB1, ABCC2

και

ABCG2

πολυμορφισμών με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα και απέδειξε ότι ένα SNP του

ABCC2

ήταν σημαντικά συνδεδεμένη με την απάντηση χημειοθεραπεία. προηγούμενες μελέτες μας έδειξαν ότι διάφοροι μεταφορέας χαλκός protein1 SNPs μπορεί να σχετίζεται σημαντικά με την αποτελεσματικότητα με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία και την τοξικότητα σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα [17], [18]. Oliver Zolk ανέφερε et.al ότι η c.808 G & gt? T SNP στο

OCT2

σημαντικά μεταβληθεί πρόσληψη των ενδογενών ενώσεων και φάρμακα [19]. Ως εκ τούτου, υποθέσαμε ότι κάποιοι άλλοι πολυμορφισμοί του γονιδίου μεταφορέα μπορεί επίσης να σχετίζονται με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα.

Σε αυτή την εργασία, χρησιμοποιήσαμε τη μέθοδο σήμανσης στην ανάλυση της σχέσης των 26 πολυμορφισμών του

AQP2, AQP9, LRP /MVP, TMEM205

και

OCT2

γονιδίων με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία (Πίνακας 1). Αυτή η πρώτη μελέτη για τη διερεύνηση σύνδεση αυτών των πολυμορφισμών των γονιδίων με ανταπόκριση χημειοθεραπεία του καρκίνου του πνεύμονα.

Η

Υλικά και Μέθοδοι

Τα άτομα της μελέτης

Το πρωτόκολλο της μελέτης έχει εγκριθεί από η Επιτροπή Δεοντολογίας της Xiangya της Ιατρικής Σχολής, την Κεντρική Νότια Πανεπιστήμιο, με αριθμό μητρώου του CTXY-110008-2. Η κλινική έρευνα αποδοχή εγκρίθηκε από την κινεζική Κλινική Μητρώου Trial και ο αριθμός εγγραφής είναι ChiCTR-RO-12002873 (https://www.chictr.org/usercenter/project/edit.aspx?proj=4039). ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα είχαν προσδιοριστεί ποσοτικά και γράφτηκε μεταξύ του Σεπτεμβρίου του 2011 και Μάρτιος του 2013 σε Xiangya Νοσοκομείο της Κεντρικής Νοτίου Πανεπιστημίου και της επαρχίας Χουνάν όγκου νοσοκομείο στην Changsha Hunan. Όλοι οι ασθενείς που παρέχονται γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση σε συμμόρφωση με τον κώδικα δεοντολογίας του Παγκόσμιου Ιατρικού Συλλόγου (Διακήρυξη του Ελσίνκι) πριν αρχίσει αυτή η μελέτη. Τα βασικά κλινικά χαρακτηριστικά συλλέχθηκαν όπως η ηλικία, το κάπνισμα, ιστολογία, το φύλο και το στάδιο TNM, Κατάσταση Απόδοσης Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG PS)

Τα κριτήρια ένταξης εισήχθησαν ως ακολούθως: (1). Οι ασθενείς που ήταν διάγνωση του καρκίνου του πνεύμονα με ιστολογία ή κυτταρολογία? (2) Οι ασθενείς που δεν είχαν λάβει καμία ριζική ή βιολογική θεραπεία πριν και κατά τη διάρκεια της χημειοθεραπείας? (3) Όλοι οι ασθενείς που είχαν λάβει τουλάχιστον δύο κύκλων της πρώτης χημειοθεραπείας γραμμή? (4) Όλοι οι ασθενείς που υποβλήθηκαν σε όλη συνέχεια μεταξύ των έξι μηνών. Τα κριτήρια αποκλεισμού ήταν αναφέρονται ως ακολούθως: (1) Οι ασθενείς που βρίσκονταν σε περίοδο εγκυμοσύνης ή τη διατροφή? (2) Οι ασθενείς που είχαν διαγνωστεί με άλλες κακοήθειες? (3) Οι ασθενείς οι οποίοι είχαν μεταστάσεις στον εγκέφαλο? (4) Οι ασθενείς οι οποίοι είχαν ενεργό λοίμωξη.

Οι εγγεγραμμένοι ασθενείς στην μελέτη αυτή έλαβαν πρώτης γραμμής με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία με σισπλατίνη και καρβοπλατίνη. ανταπόκριση σε χημειοθεραπεία, αξιολογήθηκε μετά από δύο πρώτους κύκλους χημειοθεραπείας, σύμφωνα με την κατευθυντήρια γραμμή RECIST (έκδοση 1.1) για συμπαγείς όγκους [20]. Οι ασθενείς που παρουσίασαν πλήρη ανταπόκριση (CR) ή μερική ανταπόκριση (PR) θεωρήθηκαν ως ευαισθησία πλατίνα, ενώ προοδευτική ασθένεια (PD) ή σταθερή νόσο (SD) θεωρήθηκαν ως αντίσταση από λευκόχρυσο [20].

SNPs Tagging επιλογή

Μελετήσαμε όλες τις κοινές γενετικές παραλλαγές στο

TMEM205, AQP2, AQP9, LRP

και

OCT2

. Όλες οι SNPs των 5 kb ανάντη του πρώτου εξονίου και 5 kb καθοδικά του τελευταίου εξωνίου από τα πέντε γονίδια επιλέχθηκαν ως υποψήφιες SNPs. Συνολικά, επελέγησαν 26 SNPs σε αυτό το έργο (Πίνακας 1). Όλα αυτά τα 26 SNPs ικανοποιούνται τα ακόλουθα κριτήρια: (1) Τα SNPs επιλέχθηκαν από τη βάση δεδομένων Διεθνές Φάση HapMap Έργου ΙΙ του κινεζικού πληθυσμού (https://www.hapmap.org/)? (2) Όλες οι SNPs ήταν απλότυπος SNPs Tagger? (3) τη συχνότητα της Μικράς αλληλόμορφο (MAF) ήταν μεγαλύτερη από 5% στο Πεκίνο πληθυσμού Han Κίνα? (4) Η κατά ζεύγη ανισορροπία σύνδεσης ήταν τετράγωνο του συντελεστή συσχέτισης (r

2) & gt? 0,8. Το έργο αυτό έγινε με τη χρήση Haploview έκδοση 4.2 [21].

Υπήρχαν 3 Tagger SNPs για

TMEM205

, μέση r2 των 0,988, 4 Tagger SNPs για

LRP

, σημαίνει r2 1.000, 7 Tagger SNPs για

AQP2

, μέση R2 0.997, 6 Tagger SNPs για

AQP9

, μέση r2 των 0.964, 6 Tagger SNPs για

OCT2

, μέση R2 1.000.

εξαγωγή DNA και του γονότυπου διαδικασία

Περίπου 5 ml φλεβικού αίματος συλλέχθηκαν από κάθε ασθενή για γενετικές μελέτες. Γενωμικό DNA εκχυλίστηκε από πλήρες περιφερειακό αίμα χρησιμοποιώντας είτε το DNeasy Blood & amp? Tissue Kit (Qiagen, Σαγκάη Κίνα) ή γονιδιωματικό DNA Purification Kit (Promega, USA) σύμφωνα με τις πρότυπα πρωτόκολλα.

Poymorphisms ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας Array Sequenom Μάζας Γονότυπος Platform (Sequenom, San Diego, California, USA) . Οι εκκινητές σχεδιάστηκαν με τη χρήση AssayDesigner 3.1 του λογισμικού. Primer αλληλουχίες φαίνονται στον Πίνακα S1. Διαδικασίες προσδιορισμού του γονότυπου είναι τα εξής πέντε βασικά βήματα: (1) Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR)? Εξαρτήματα και τα αντιδραστήρια ήταν ως εξής: 1.8 μλ νερό καθαρότητας HPLC, 0.5 μί 10 × PCR Buffer με 15 mM MgCl2, 0,4 μί 25 mM MgCl2, 0,1 μί 25 mM dNTP Mix, 0,2 μί 0,5 mM Primer Mix, 0.2 μί 5 υ /μί HotStar Taq και 1 μL 10 ng /μL DNA σε ένα τελικό όγκο 5 μλ. Η PCR έτρεξε στους 94 ° C για 15 λεπτά, Thermo ποδηλασία 45 κύκλους (94 ° C για 20 δευτερόλεπτα, 56 ° C για 30 δευτερόλεπτα και 72 ° C για 1 λεπτά), επέκταση στους 72 ° C για 3 λεπτά. (2) επεξεργασία του SAP? Εξαρτήματα και τα αντιδραστήρια ήταν ως εξής: 1,53 μι Nanopure Νερό, 0,17 μι SAP Buffer, 0.3 μι SAP ενζύμων (1,7 U /μL) σε τελικό όγκο 2 μι. Οι συνθήκες ήταν 37 ° C για 40 λεπτά, 85 ° C για 5 λεπτά. (3) αντίδραση Παράταση? Εξαρτήματα και αντιδραστήρια ήταν ως εξής: 0,619 μί Nanopure νερό, 0.2 μι Iplex Ρυθμιστικό Plus, 0.2 μι Iplex μείγμα Λύση, 0,94 μι iPlex Επεκτείνετε Primer Mix, 0,041 μί Iplex ενζύμων, αντιδραστήριο SAP 2 μL και 5 μL PCR αντιδραστήριο σε τελικό όγκο 9 μΙ. Οι συνθήκες ήταν 94 ° C για 30 δευτερόλεπτα, 94 ° C για 5 δευτερόλεπτα, 40 κύκλοι των 52 ° C για 5 δευτερόλεπτα, 5 κύκλοι των 80 ° C για 5 δευτερόλεπτα, και 72 ° C για 3 λεπτά. (4) ανταλλαγής ιόντων Clean-up? (5) Ανάλυση Θραύσμα? . Κλήσεις πολυμορφισμοί αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας Φασματοφωτομετρία Typer 4.0 του λογισμικού Sequenom του

Η στατιστική ανάλυση

Όλα τα SNPs υπάκουσε ισορροπία Hardy – Weinberg (HWE) με τη χρήση του chi – square test. Η ένωση των γονότυπων και την ανταπόκριση χημειοθεραπεία ελέγχθηκαν με λογιστική παλινδρόμηση analysis.The δυναμικό συμπαράγοντες σε απάντηση χημειοθεραπεία επιλέχθηκαν με χρήση δυαδικής λογιστικής παλινδρόμησης. Ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, PS και το είδος ιστολογία θεωρήθηκαν ως συμπαράγοντες. Όλα τα παραπάνω ανάλυση εκτελέστηκαν από plink (έκδοση 1.07, https://pngu.mgh.harvard.edu/purcell/plink/) και /ή SPSS 13.0 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA). αναλογίες πιθανοτήτων (OR) και τα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI) χρησιμοποιήθηκαν για την εκτίμηση της ανταπόκρισης στη χημειοθεραπεία. P & lt? 0,05 θεωρήθηκε ως σημαντική. Ο αριθμός πραγματοποιήθηκε με τη χρήση StataSE έκδοση 12 (StataCorp, College Station, TX, USA). Όλα τα δεδομένα μπορούν να παρέχονται σε όποιον θέλει μέσω του ηλεκτρονικού ταχυδρομείου.

Αποτελέσματα

Ένα σύνολο 338 ασθενών που είχαν μελετηθεί. Τα βασικά κλινικά χαρακτηριστικά των ασθενών αυτών φαίνονται στον Πίνακα 2. Οι ανταποκρίθηκαν (CR + PR) ήταν 154 και μη-ανταποκρινόμενοι ήταν 184 με τη μέση ηλικία 55,6 ± 8,9 έτη (εύρος 36 έως 77 ετών) και 55,3 ± 8,8 έτη ( κυμαίνονται κυμαίνεται μεταξύ 31-76 έτη), αντίστοιχα. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των διασωστών και μη ανταποκρίθηκαν στο φύλο, την ηλικία και το κάπνισμα έδειξαν ότι οι πληθυσμοί επαρκώς συμφωνημένα. Οι ασθενείς μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα ήταν πιο πιθανό να είναι μη ανταποκρινόμενοι από ανταποκριθέντες (79,9 έναντι 57,8%, Ρ & lt? 0,0001). Η αναλογία των ECOG 0-1 ήταν χαμηλότερη σε ανταποκρίθηκαν από τους μη ανταποκριθέντες (96,8 έναντι 99,5%, p = 0,047).

Η

ανάλυσης συμμεταβλητές έδειξε ότι ιστολογία και ECOG θα μπορούσε να είναι στατιστικά σημαντικοί παράγοντες κινδύνου για την πλατίνα με έδρα την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας σε όλα πληθυσμού, των γυναικών και των ασθενών με NSCLC. Η ιστολογική εξέταση ήταν στατιστικά σημαντικός παράγοντας για τους άνδρες, μη καπνιστές και οι ασθενείς το κάπνισμα. Ιστολογία, το φύλο και το κάπνισμα ή να μην είναι στατιστικά σημαντικοί παράγοντες για τα διπλώματα ευρεσιτεχνίας πάνω από 55 χρόνια. Όλες οι πιθανές συμμεταβλητές προσαρμόστηκαν πριν από την ανάλυση των δεδομένων. Όλα τα 26 πολυμορφισμοί που πιθανόν να ήταν συνδεδεμένες με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα εντοπίστηκαν και αναλύθηκαν. Οι βασικές πληροφορίες από τους 26 SNPs φαίνονται στον πίνακα 1. Ωστόσο, για να κάνει ο πίνακας δεν είναι πολύ περίπλοκη, μόνο τα δεδομένα των πιο σημαντικών 5 SNPs ‘αυτά που αναφέρονται στο δημοσιευμένο κείμενο. Τα αποτελέσματα άλλοι παρατίθενται στον Πίνακα S2. Αναλύσαμε τη σύνδεση σε γονοτυπική, κυρίαρχο και υποτελούς μοντέλα, αντίστοιχα. Η rs195854 (OR = 0.60, 95% CI, 0,36 έως 1,00, P = 0,049) του

OCT2

μπορεί να σχετίζεται με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας σε γονοτυπική μοντέλο, rs896412 του

TMEM205

παρουσιάζονται σημασία σε γονοτυπική (OR = 0,29, 95% CI, 0,10 έως 0,81, P = 0,019) και υπολειπόμενη (OR = 0.082, 95% CI, 0,010 έως 0,66, P = 0,019) μοντέλα. Μπορεί να υπάρχουν πολυμορφισμοί σημαντικά που συνδέονται με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας σε κυρίαρχο μοντέλο.

Μη μικροκυτταρικός μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα και ήταν πολύ διαφορετικά βιολογικά. Οι καπνιστές και μη καπνιστές, νεότεροι και γέροντες, άνδρες και γυναίκες, επίσης, μπορεί να είναι διαφορετική σε απάντηση χημειοθεραπεία. Για να διερευνήσουν περαιτέρω τη σχέση αυτών των SNPs με την απάντηση της χημειοθεραπείας σε αυτές τις διαφορετικές κατηγορίες, πραγματοποιήσαμε την ανάλυση διαστρωμάτωσης. Τα αποτελέσματα των πέντε SNPs δείχθηκαν στο Σχήμα 1. Οι άλλοι παρατίθενται στον Πίνακα S3. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το

OCT2

rs1869641 σε γονοτυπική και κυρίαρχα μοντέλα για θέματα καπνού και στο κυρίαρχο μοντέλο για την ηλικία ≤ 55 πληθυσμών ήταν πιθανόν σχετίζεται σημαντικά με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας.

OCT2

rs195854 σε γονοτυπική μοντέλο για το κάπνισμα και το αρσενικό υποομάδα, καθώς και στο υπολειπόμενο πρότυπο για την υποομάδα του καπνίσματος μπορεί να σχετίζεται με την απάντηση χημειοθεραπεία. Η rs7314734 του

AQP2

έδειξε μόνο σημαντική συσχέτιση με την απάντηση χημειοθεραπεία για μη καπνιστές στο κυρίαρχο μοντέλο. Η rs1516400 του

AQP9

μπορεί να σχετίζεται σημαντικά με τη χημειοθεραπεία για ασθενείς με ΜΜΚΠ σε γονοτυπική και υποτελούς μοντέλα. Η rs896412 του

TMEM205

έδειξε σημαντική συσχέτιση για την υποομάδα ηλικίας & gt?. 55 σε γονοτυπική μοντέλο, αρσενικό υποομάδα σε γονοτυπική και υποτελούς μοντέλα

Κάθε κουτί και οριζόντια γραμμή αντιπροσωπεύει το OR και 95% CI . NSCLC: μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα, SCLC: μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα. * P & lt?. 0.05

Η

Σε αυτή τη μελέτη, ο αριθμός των ανεξάρτητων μεταβλητών για

OCT2, LRP, AQP2, AQP9

και

TMEM205

είναι 6, 4, 7, 6 και 3, αντίστοιχα. Κάθε SNP αναλύθηκε σε τρία γενετικά μοντέλα. Για να ληφθεί υπόψη το πρόβλημα των πολλαπλών δοκιμών, το όριο σημασία είναι επομένως 0,05 /3 (6 + 4 + 7 + 6 + 3) = 0,0006. Χρησιμοποιώντας αυτό το όριο, κανείς ένωση παρέμεινε σημαντική.

Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, διερεύνηση της συσχέτισης των 5 γονίδια μεταφορέα (

OCT2, AQP2, AQP9, MVP

και

TMEM205

) SNPs με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι SNPs rs195854 (

OCT2

) και rs186941 (

OCT2

), rs7314734 (

AQP2

), rs1516400 (

AQP9

), και rs896412 (

TMEM205

) μπορεί να σχετίζεται με την απάντηση χημειοθεραπεία σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα.

OCT2

εκφράστηκε κυρίως στη βασεοπλευρική μεμβράνη που ήταν η κύρια περιοχή του σισπλατίνη που προκαλείται νεφρική τοξικότητα [7], [22], [23]. Μελέτες πρότειναν ότι σταθερώς επιμολυσμένα

OCT2

σε κυτταρικές σειρές, η ενδοκυτταρική συσσώρευση του λευκόχρυσου και ο σχηματισμός προϊόντων προσθήκης Pt-DNA ήταν σημαντικά αυξημένα [24]. Αυτές οι μελέτες πρότειναν ότι

OCT2

θα μπορούσε να είναι ένα βασικό μεταφορέα για την σισπλατίνη και ρυθμιστή σε νεφρική απέκκριση της σισπλατίνης. Με βάση την παρούσα μελέτη, οι rs195854 SNPs και rs186941 του

OCT2

είναι και οι δύο έδειξαν συσχέτιση με χημειοθεραπεία σε υποομάδα κάπνισμα ή /και σε αρσενικούς πληθυσμούς. Αυτό το αποτέλεσμα πρότεινε ότι η

OCT2

πολυμορφισμών του γονιδίου μπορεί να παίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην βάση την πλατίνα αποτελεσματικότητα χημειοθεραπείας. Ωστόσο, η σημαντική συσχέτιση παρατηρήθηκε μόνο σε rs195854 σε γονοτυπική μοντέλο σε όλους τους ασθενείς. Γονοτυπικός μοντέλο συγκρίνοντας τα άγριου τύπου ομόζυγη, ετερόζυγων και ομόζυγων μεταλλαγμένο θέματα. Ωστόσο, τα άλλα δύο μοντέλα σύγκριση δύο γονότυπους και τα υπόλοιπα γονότυπο. Εμείς υποθέτει η πιθανή αιτία είναι ότι η διαφορά μπορεί να είναι μεγαλύτερο σε γονοτυπικό πρότυπο εάν ο αριθμός των ατόμων ενός γονότυπου είναι σημαντική διαφορετική σε δύο ομάδες. Ωστόσο, ο πραγματικός λόγος θα πρέπει να διερευνηθεί σε μελλοντικές μελέτες. Σε κάπνισμα υποομάδα, rs195854 και rs1869641 δύο έδειξαν μεγαλύτερη αντίσταση χημειοθεραπεία σε δύο από τα τρία μοντέλα (Εικόνα 1). Υπάρχει πιθανότητα ότι το κάπνισμα είναι επιτακτικό τη δυνητική επίδραση της γενετικής ποικιλότητας στο

OCT2

στη ρύθμιση της μεταφοράς της πλατίνας. Το κάπνισμα μπορεί να οδηγήσει σε κακή ανταπόκριση χημειοθεραπεία σε πολλούς λόγους. Όπως, ο καπνός του τσιγάρου μπορεί να σχετίζονται με μεταβάλλουν τον μεταβολισμό του πνεύμονα πολλών ενδογενών ενώσεων, οι δραστηριότητες πολλών biotransforming ενζύμων σε ιστούς του πνεύμονα και επηρεάζουν τα ποσοστά του μεταβολισμού για αρκετά φάρμακα [25]. Και αυτοί οι ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα φως ή ποτέ το κάπνισμα είχε μια υψηλότερη αναλογία

EGFR

μεταλλάξεις που είχαν συνδεθεί με

EGFR-ΤΚΙ

θεραπείας απάντηση [26], [27]. Σε μελλοντική θεραπεία του καρκίνου του πνεύμονα, θα μπορούσαμε να διακρίνουμε τα θέματα σύμφωνα με τις καπνιστικές συνήθειες τους και να εφαρμόζουν διαφορετικούς χημειοθεραπευτικούς παράγοντες.

Οι rs195854 SNP μπορεί να σχετίζεται σημαντικά με ανταπόκριση χημειοθεραπεία για άνδρες ασθενείς σε γονοτυπική μοντέλο και είχε την τάση στο υπολειπόμενο μοντέλο παρόλο που δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση. Αυτό το αποτέλεσμα ήταν συνεπές με αποβολή επιβραδυντή φάρμακο στις γυναίκες και ότι η έκφραση του

OCT2

ήταν σημαντικά χαμηλότερη στις γυναίκες σε κουνέλια, ποντίκια, και αρουραίους [28] – [30]. Είναι ως εκ τούτου δελεαστικό να κάνουμε εικασίες εξαρτώμενη από το φύλο ρόλο για

OCT2

σε απάντηση χημειοθεραπεία συμβάλλει στην διαφορετική εξάλειψη της σισπλατίνης. Μια σημαντική συσχέτιση εμφανίστηκε επίσης στην υποομάδα της ηλικίας ≤ 55 για rs1869641. Kelly K. Filip σκι πρότεινε et.al ότι rs316019 του

OCT2

ενδέχεται να μην σχετίζονται με μελετηθεί φαρμακοκινητικές μεταβλητές τους [24]. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι το

OCT2

μπορεί να σχετίζεται με την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα, αλλά οι ειδικοί μηχανισμοί πρέπει να μελετηθούν για την περαιτέρω εργασία.

AQP9

δεν ήταν μόνο σημαντικό να αρσενικού αντίσταση σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα με την ενίσχυση της πρόσληψης αρσενικού [31], αλλά επίσης παίζουν ένα κρίσιμο ρόλο στην ανάπτυξη της με βάση την πλατίνα απόκριση χημειοθεραπεία.

AQP9

rs1516400 μπορεί να σχετίζεται σημαντικά με ανταπόκριση χημειοθεραπεία για ασθενείς με ΜΜΚΠ σε γονοτυπική και υπολειπόμενο μοντέλα, αλλά όχι για SCLC ασθενείς. Τα αποτελέσματα αυτά μπορεί να οφείλονται στην NSCLC και SCLC απόκλιση διάφορα σημεία, για παράδειγμα είχαν διαφορετικές μοριακές γενετικές ανωμαλίες: η μετάλλαξη ρ53 είναι υψηλότερη σε SCLC [32] και NSCLC είναι συχνά υπερ-έκφραση σε COX-2 [33]. Επιπλέον, υπάρχουν διαφορετικά σε απώλεια του ελέγχου του κυτταρικού κύκλου για τους δύο τύπους ιστολογίας [34], [35]. Η διαφορετική επίδραση για

AQP9

rs1516400 στο NSCLC και SCLC μπορεί να ενισχύσει το γεγονός ότι έχουν διαφορετικό γενετικό προγνωστικοί δείκτες. Αυτό μελέτες που εντοπίστηκαν που

AQP9

θα μπορούσε να είναι μια πιθανή προγνωστική βιοδείκτες για βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπείας σε ασθενείς με NSCLC. Ωστόσο, ο μηχανισμός πώς

AQP9

παίζουν ρόλο στην αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας με βάση την πλατίνα για τους ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα απαιτεί να μελετηθεί στο επόμενο έργο.

AQP2

είναι η πιο σημαντικό κανάλι νερού στην κορυφαία μεμβράνη του πλάσματος [6]. Διαπιστώθηκε ότι σχετίζονται με την αντίσταση της σισπλατίνης και θα μπορούσε να είναι ένας μεταφορέας μεμβράνης /πρωτεΐνη δέσμευσης /φορέα για αυτό [36]. Οι rs7314734 SNP του

AQP

2 έδειξε περισσότερο σχέση με την ανταπόκριση χημειοθεραπεία σε μη-καπνιστές υποομάδα και ο λόγος που θα μπορούσε να εξηγηθεί παρόμοια με

OCT2

.

Ding-Γου Shen et .al έδειξε ότι η έκφραση του

TMEM205

αυξήθηκε σε σισπλατίνη ανθεκτικά κύτταρα [8]. Ωστόσο, όταν το γονίδιο υπερεκφράζεται κύτταρα πήρε περισσότερο ανθεκτικά σε σισπλατίνη [9]. Αυτή η μελέτη έδειξε ότι

TMEM205

rs896412 μπορεί να σχετίζεται σημαντικά με ανταπόκριση χημειοθεραπεία σε όλους τους ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα (γονοτυπική και υπολειπόμενο μοντέλα) (Πίνακας 3), αρσενικό υποομάδα (γονοτυπική και υπολειπόμενη μοντέλα) και υποομάδας της ηλικίας & gt? 55 (μοντέλο γονοτυπικής) (Σχήμα 1). Τα διαφορετικά αποτελέσματα στα αρσενικά και θηλυκά υποομάδες μπορεί να συνδέεται με διαφέρουν εξάλειψη της πλατίνας παρόμοια με

OCT2

. Μελέτες πρότειναν ότι ηλικιωμένων ασθενών (& gt? 70 ετών) ειδικά αυτοί που δεν είχαν ασθένειες συνυπάρχουσα να πάρετε παρόμοια αποτελέσματα από τη θεραπεία ως τους νεότερους ασθενείς (& lt? 70 ετών) [37] – [39]. Βρήκαμε μια στατιστικά σημαντική διαφορετική μεταξύ rs1869641 του

OCT2

στην υποομάδα της ηλικίας ≤ 55 και rs896412 του

TMEM205

στην υποομάδα της ηλικίας & gt? 55. Αυτό ήταν διαφορετική σε σύγκριση με τις προηγούμενες μελέτες. Ο πιθανός λόγος μπορεί να είναι η διαφορετική οριακά (55, 70, αντίστοιχα), αλλά θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω. Νομίζαμε ότι

TMEM205

μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στον καρκίνο του πνεύμονα με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία και θα ήταν επίσης μια πιθανή βιοδείκτη για τη χημειοθεραπεία του καρκίνου του πνεύμονα.

Η

Η rs195854 και rs1869641 του

OCT2

, rs896412 του

TMEM205

, rs7314734 του

AQP

2, που βρίσκεται σε 5 kb ανάντη των περιοχών γονιδίου, ο πιθανός μηχανισμός για τη ρύθμιση της έκφρασης δεν είναι γνωστό προς το παρόν . Υποθέτουμε ότι εντοπίζουν στην περιοχή ενισχυτή και η παραλλαγή μπορεί να ρυθμίσει την έκφραση. Η rs1516400 βρίσκεται στο neargene-5

AQP9

. Μπορεί να είναι στην περιοχή υποκινητή και μετάλλαξη του μπορούν να ρυθμίζουν τη δραστηριότητα του υποκινητή του

AQP9

, και στη συνέχεια την έκφραση του

AQP9

άλλαξε. Ωστόσο, οι πιθανοί μηχανισμοί θα πρέπει να μελετηθεί σε περαιτέρω μελέτες.

Αυτή η μελέτη έχει κάποιους περιορισμούς. Από τη μία πλευρά, να πάρει πιο αξιόπιστο συμπέρασμα, θα πρέπει να κάνουμε μια ανεξάρτητη επικύρωση για αυτά τα SNPs. Προσπαθούμε έτσι να ενισχύσει το μέγεθος του δείγματος και θα επικυρώσει αυτά τα SNPs στο μέλλον μελέτη. Ωστόσο, τα δείγματα είναι πολύ δύσκολο να συλλεχθούν και δεν είναι αρκετό για μια άλλη ανεξάρτητη επικύρωση του πληθυσμού σήμερα. Από την άλλη πλευρά, την αξιολόγηση της απόκρισης σε χημειοθεραπεία μετά από κάθε δύο κύκλους χημειοθεραπείας είναι πιθανό να πάρει περισσότερο αξιόπιστα αποτελέσματα. Ωστόσο, μπορούμε να ενοποιήσουμε μόνο τους δύο κύκλους χημειοθεραπείας για αυτούς τους ασθενείς. Πολλοί ασθενείς δεν λαμβάνουν περισσότερες από τέσσερις κύκλους χημειοθεραπείας, λόγω των πολλούς λόγους, όπως η οικονομική κατάσταση και ούτω καθεξής.

Δεν υπήρχε καμία μελέτη έδειξε πόσο πολυμορφισμοί αυτών των πέντε γονίδια που σχετίζονται με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία απόκριση σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα πριν. Αυτή η μελέτη ήταν η πρώτη για να διερευνήσει τις ενώσεις τους με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία. Τα αποτελέσματα του

TMEM205

rs896412,

OCT2

rs1869641 και rs195854,

AQP9

rs1516400 και

AQP2

rs7314734 πρότεινε ότι αυτά τα SNPs μπορεί να σχετίζεται με πλατίνη με βάση ανταπόκριση χημειοθεραπεία. Περαιτέρω μελέτες πώς αυτά τα SNPs επηρεάσουν το με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία για καρκίνο του πνεύμονα πρέπει να αιτιολογείται.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πίνακα S1.

Αστάρια όλων των επιλεγμένων SNPs

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091967.s001

(DOCX)

Πίνακας S2.

σύνδεσης των άλλων πολυμορφισμών μονού νουκλεοτιδίου και με βάση την πλατίνα απάντηση χημειοθεραπεία σε όλους τους ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091967.s002

(DOCX)

Πίνακα S3.

Διαστρωμάτωση αναλύσεις των ενώσεων των άλλων πολυμορφισμών και την αποτελεσματικότητα της χημειοθεραπείας σε γονοτυπική, κυρίαρχη, υπολειπόμενο μοντέλα

doi:. 10.1371 /journal.pone.0091967.s003

(DOCX)

Ευχαριστίες

ευχαριστούμε όλους τους πόρους που στήριξαν τη μελέτη, και όλοι οι ασθενείς που συμμετείχαν στη μελέτη, και Bio Miao Βιολογική Technology Co, Ltd Πεκίνο, Κίνα για την τεχνική βοήθεια τους, Καμήλα Śmieszkol διορθωθεί το χειρόγραφο.