Αφηρημένο

Ιστορικό

καρκίνο του στόματος, η οποία είναι η τέταρτη πιο κοινός καρκίνος στους άνδρες, συνδέεται με περιβαλλοντικά καρκινογόνα στην Ταϊβάν. Ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF) -C, ένας αγγειογόνος /lymphangiogenic παράγοντας με υψηλά επίπεδα έκφρασης σε ιστούς όγκων, παίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη διαφόρων κακοηθειών. Αυτή η μελέτη σχεδιάστηκε για να εξεταστούν οι συσχετίσεις των πέντε

VEGF-C

πολυμορφισμοί του γονιδίου με την ευαισθησία και κλινικοπαθολογικών χαρακτηριστικά της προφορικής πλακώδες καρκίνωμα.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Πέντε πολυμορφισμών μονού νουκλεοτιδίου (SNPs) του

VEGF-C

αναλύθηκαν με μια αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο (PCR) σε 470 άρρενες ασθενείς με καρκίνο του στόματος και 426 χωρίς καρκίνο ελέγχους. Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι το

VEGF-C

rs7664413 και πολυμορφισμοί rs2046463 συσχετίστηκαν με ευαισθησία του στόματος του καρκίνου, αλλά όχι με οποιοδήποτε κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους. Η

GGACA

ή

GACTG

απλότυπος πέντε

VEGF-C

SNPs (rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 και rs2046463), σε συνδυασμό επίσης σχετίζεται με τον κίνδυνο του στόματος Καρκίνος. Μεταξύ 611 άνδρες καπνιστές,

VEGF-C

φορείς του πολυμορφισμού που μασιέται επίσης ινδοκάρυδο λίρες βρέθηκαν να έχουν ένα 14,5 έως 24,2 φορές τον κίνδυνο να έχουν καρκίνο του στόματος σε σχέση με το

VEGF-C

άγριας μεταφορέας τύπος που δεν μασούν betel λίρες. Μεταξύ των 461 αρσενικά ινδοκάρυδο-quid chewers,

VEGF-C

φορείς του πολυμορφισμού που κάπνιζαν είχαν επίσης 2,7 έως 18,1 φορές τον κίνδυνο να έχουν καρκίνο του στόματος σε σχέση με εκείνους που έφεραν την άγριου τύπου, αλλά δεν καπνίζουν.

Συμπεράσματα

τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι οι δύο SNPs του

VEGF-C

(rs7664413 και rs2046463) και είτε των δύο απλοτύπων πέντε SNPs σε συνδυασμό έχουν τη δυνατότητα πρόβλεψης σημασία στην προφορική καρκινογένεση. Gene-περιβαλλοντικών αλληλεπιδράσεων μεταξύ των

VEGF-C

πολυμορφισμούς, το κάπνισμα, και betel-μάσημα λίρες θα μπορούσε να μεταβάλει την ευαισθησία του ατόμου με τον καρκίνο του στόματος

Παράθεση:. Chien MH, Liu YF, Hsin CH, Λιν CH , Shih CH, Yang SF, et al. (2013) Επίδραση του

VEGF-C

Gene πολυμορφισμών και περιβαλλοντικών παραγόντων στην καρκίνο του στόματος Ευαισθησία στην Ταϊβάν. PLoS ONE 8 (4): e60283. doi: 10.1371 /journal.pone.0060283

Επιμέλεια: Chih-Hsin Tang, η Κίνα Ιατρικού Πανεπιστημίου, Ταϊβάν

Ελήφθη: 11 του Ιανουαρίου του 2013? Αποδεκτές: 25 Φλεβάρη του 2013? Δημοσιεύθηκε: 4 Απριλίου του 2013

Copyright: © 2013 Chien et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από επιχορήγηση της έρευνας από το Εθνικό Επιστημονικό Συμβούλιο, την Ταϊβάν (NSC 100 έως 2.632-B-040-001-my3) και επιχορήγηση από Ταϊπέι Ιατρικό Πανεπιστήμιο-Wan Fang Νοσοκομείο (δεν χορηγούν. 101swf03 με τον Δρ Chien και ο Δρ Γιανγκ) . Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Στοματική καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων (OSCC), μια κοινή κακοήθη καρκίνου στην περιοχή κεφαλής και του τραχήλου, είναι η τέταρτη πιο κοινός καρκίνος στους άνδρες και η έκτη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο στις Ταϊβάν [1]. Η ανάπτυξη της OSCC είναι μια διαδικασία πολλαπλών βημάτων που απαιτεί τη συσσώρευση πολλαπλών γενετικών αλλοιώσεων, που επηρεάζονται από τη γενετική προδιάθεση ενός ασθενούς και από περιβαλλοντικές επιδράσεις, όπως το αλκοόλ και της κατανάλωσης καπνού, betel-quid μάσημα, χρόνια φλεγμονή, και την ιογενή λοίμωξη [1] – [6 ]. Η έκφραση ενός γονιδίου μπορεί να επηρεαστεί από ένα μόνο-νουκλεοτιδίου πολυμορφισμός (SNP) που βρίσκεται εντός του υποκινητή ή άλλες ρυθμιστικές περιοχές του γονιδίου, και η παραγωγή ή δράση της μεταφρασμένης πρωτεΐνης του περαιτέρω διαμορφωμένο. SNPs, τα οποία είναι ο πιο κοινός τύπος παραλλαγής αλληλουχίας DNA, συμβαίνουν όταν ένα μόνο νουκλεοτίδιο στο κοινόχρηστο ακολουθίας ενός γονιδίου διαφέρει μεταξύ μελών ενός είδους ή ζεύγη χρωμοσωμάτων σε ένα άτομο, και πιστεύεται ότι συνδέονται με την ανάπτυξη ορισμένων ασθενειών [7]. SNPs γονοτυπικός σχετίζονται μπορούσε να είναι μια απλή και πολύτιμη μέθοδος για να προβλέψει τον κίνδυνο για και την πρόγνωση του καρκίνου. Για να διευκρινιστεί η πολύπλοκη διαδικασία της καρκινογένεσης και τη βελτίωση της επιστημονικής βάσης για προληπτικές παρεμβάσεις, εντοπίζοντας μεγάλες γονίδια που σχετίζονται με την ευαισθησία για OSCC πρέπει να αποτελεί προτεραιότητα και αποτελεσματικές μεθόδους για την εκτέλεση.

Πολλές προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι σχετίζονται με τον όγκο αγγειογένεση και λεμφαγγειογένεση παίζουν σημαντικό ρόλο στην πρόοδο του όγκου, και οι αγγειογόνες και lymphangiogenic δραστηριότητες συχνά συσχετίζεται με την ανάπτυξη του όγκου, την περιφερειακή μετάσταση λεμφαδένων, απομακρυσμένη μετάσταση, και την πρόγνωση των ασθενών με κακοήθη νεοπλάσματα [8] – [10]. Ο αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) οικογένεια πρωτεϊνών ρυθμίζει πολλές λειτουργίες των ενδοθηλιακών κυττάρων, ειδικά τη συμμετοχή αγγειογένεση [11]. VEGF-A, το πρώτο περιγραφέν μέλος της οικογένειας VEGF, επάγει την αγγειογένεση με την ενεργοποίηση των σχετικών υποδοχέων κινάσης τυροσίνης, VEGF-R1 και VEGF-R2, επί ενδοθηλιακών κυττάρων [11], [12]. Ενώ ο VEGF-Α παίζει πρωταρχικό ρόλο στην αγγειογένεση όγκου, VEGF-C που χαρακτηρίζεται ως ουσιώδες lymphangiogenic παράγοντας που προάγει τον καρκίνο της μετάστασης [13] – [15]. VEGF-C είναι ένας συνδετήρας, τόσο για τον VEGF-R3 και VEGF-R2, αλλά έχει υψηλότερη συγγένεια για VEGF-R3 [12]. VEGF-R3 εκφράζεται κυρίως από λεμφικά ενδοθηλιακά κύτταρα. VEGF-C προκαλεί φωσφορυλίωση του VEGF-R3, οδηγώντας σε ΡΙ3Κ-εξαρτώμενη Akt ενεργοποίηση και πρωτεϊνικής κινάσης C (PKC) -εξαρτώμενη ενεργοποίηση του ρ42 /ρ44 ενεργοποιείται από μιτογόνο κινάσης πρωτεΐνης (ΜΑΡΚ), προστατεύοντας έτσι λεμφικά ενδοθηλιακά κύτταρα από την απόπτωση και διέγερση πολλαπλασιασμού και μετανάστευση

in vitro

[16]. Επιπλέον, αποδείχθηκε πρόσφατα ότι ο VEGF-R3 μπορεί επίσης να οδηγήσουν την αγγειογένεση [17], [18]. Η αγγειογενετική σήμα VEGF-R3 είναι κυρίως δραστική στη ρύθμιση της αγγειογόνου εισβολή των ιστών, όπως συμβαίνει με όγκους. VEGF-R3 ενισχύει τις επιδράσεις του VEGF-R2 και μπορεί να υποστεί την αγγειογένεση, ακόμη και παρουσία των αναστολέων του VEGF-R2 [18]. Αυτές οι μελέτες έχουν καταδείξει το σημαντικό βιολογικό ρόλο του άξονα VEGF-C /VEGF-R3 σε αγγειακά ενδοθηλιακά κύτταρα

Πολυάριθμες μελέτες έδειξαν ότι ο VEGF-R3 εκφράζεται επίσης σε μια ποικιλία ανθρώπινων κακοηθειών [19] -. [22 ], και το φαινόμενο αυτό αναφέρθηκε ότι είναι ένας πιθανός προγνωστικός παράγοντας για τον προσδιορισμό της κλινικής προσέγγισης, επειδή σχετίζεται με λεμφαδένες μετάσταση ή κακή πρόγνωση σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη, ενδομήτριο καρκίνωμα, OSCC, και μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα [ ,,,0],20], [23] – [25]. Η λειτουργία και το μοριακό μηχανισμό του VEGF-C /άξονα VEGF-R3 σε καρκινικά κύτταρα, ωστόσο, δεν είναι πλήρως κατανοητή. Προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι η φωσφορυλίωση τυροσίνης του VEGF-R3 σε καρκινικά κύτταρα διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων στο σάρκωμα Kaposi, κακοήθες μεσοθηλίωμα, λευχαιμία, και γαστρικού καρκίνου [22], [26] – [28]. Άλλοι και τους εαυτούς μας έδειξαν ότι η ενεργοποίηση των VEGF-C /VEGF-R3 σηματοδότηση σε καρκινικά κύτταρα ενισχύει την κινητικότητα των κυττάρων και διεισδυτικότητα και συμβάλλει στην προαγωγή του καρκίνου των κυττάρων μετάσταση [20], [27], [29]. Τα ευρήματα αυτά, στο σύνολό τους, δείχνουν τη σημασία της σηματοδότησης VEGF-C στην πρόοδο του όγκου (ανάπτυξη, εισβολή και μετάσταση) ενεργώντας άμεσα στα κύτταρα του όγκου.

Επιπτώσεις του

VEGF-A

πολυμορφισμός σχετικά με την ευαισθησία του ανθρώπινου καρκίνου είναι καλά τεκμηριωμένες [30] – [33], αλλά οι ρόλοι των

VEGF-C

γονίδιο SNPs και περιβαλλοντικών καρκινογόνων ουσιών στην στοματική ευαισθησία του καρκίνου και κλινικά χαρακτηριστικά παραμένουν ελάχιστα ερευνηθεί. Σε αυτή την έρευνα, μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων πραγματοποιήθηκε σε πέντε SNPs, που βρίσκονται στο ιντρόνιο ή κατάντη του

VEGF-C

γονίδιο. Μερικά από αυτά τα SNPs έχουν αναφερθεί να συσχετίζεται με τον κίνδυνο της προεκλαμψίας [34], οστεονέκρωση της μηριαίας κεφαλής [35], ή το ποσοστό επιβίωσης με καρκίνο των ωοθηκών [36]. Σε αυτή τη μελέτη, αναλύσαμε τις ενώσεις μεταξύ των

VEGF-C

γονίδιο SNPs, παράγοντες κινδύνου περιβάλλον, και την ευαισθησία του καρκίνου του στόματος. Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που καταδεικνύει σαφώς σημαντική ενώσεις

VEGF-C

πολυμορφισμών με από του στόματος καρκινογένεση.

Υλικά και Μέθοδοι

Θέματα και Συλλογή δειγμάτων

στην 2007-2011, θα προσληφθούν 470 άνδρες ασθενείς (μέση ηλικία 54,0 ± 11,3 χρόνια) σε Chung Shan Medical University Hospital στο Taichung, Changhua Christian Νοσοκομείο και Εμφάνιση Chwan Memorial Hospital στο Changhua, Ταϊβάν ως μια υπόθεση ομάδα. Για την ομάδα ελέγχου, επιλέξαμε τυχαία 426 μη-καρκίνο άτομα (μέσης ηλικίας 50,5 ± 13,9 χρόνια), ο οποίος επισκέφθηκε τα ίδια τα νοσοκομεία και έτσι ήταν από την ίδια γεωγραφική περιοχή. Και για τις δύο περιπτώσεις και τους ελέγχους, χρησιμοποιήσαμε ένα ερωτηματολόγιο για τη λήψη πληροφοριών σχετικά με την έκθεση betel-quid μάσημα, η χρήση καπνού, και η κατανάλωση αλκοόλ. Ιατρικών πληροφοριών των περιπτώσεων, συμπεριλαμβανομένων TNM κλινική σταδιοποίηση, το πρωτογενές μέγεθος του όγκου, η συμμετοχή λεμφαδένων, και ιστολογική βαθμό, λήφθηκε από τα ιατρικά αρχεία τους. ασθενείς Oral-καρκίνου ήταν κλινικά ανέβηκε κατά τη στιγμή της διάγνωσης τους σύμφωνα με το σύστημα ΤΝΜ σταδιοποίηση της Αμερικανικής μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο (AJCC). διαφοροποίηση του όγκου εξετάστηκε από παθολόγο σύμφωνα με την ταξινόμηση AJCC. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review του Chung Shan Medical University Hospital και ενημέρωσε γραπτή συγκατάθεση για να συμμετάσχουν στη μελέτη ελήφθη από κάθε άτομο.

Επιλογή του VEGF-C πολυμορφισμοί

Σε dbSNP βάση δεδομένων, πάνω από 60 SNPs έχει τεκμηριωθεί στο ιντρόνιο ή κατάντη του

VEGF-C

γονίδιο περιοχής. Για την απόκτηση επαρκούς ισχύος για την αξιολόγηση των δυνατοτήτων σύνδεσης, ερευνήσαμε rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 και rs2046463, εκείνοι με μικρές συχνότητες αλληλόμορφο ≥5%. Επιπλέον, αυτές οι SNPs του

γονίδιο VEGF-C

επιλέχθηκαν σε αυτή τη μελέτη καθώς αυτά SNP βρέθηκε στους ασθενείς με καρκίνο.

Γονιδιωματικό DNA Extraction

Γονιδιωματικό ϋΝΑ εξήχθη χρησιμοποιώντας QIAamp DNA κιτ μίνι αίμα (Qiagen, Valencia, CA, USA) ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή. Διαλύσαμε DNA σε ρυθμιστικό διάλυμα ΤΕ (10 mM Tris σε ρΗ 7.8 και 1 mM EDTA) και στη συνέχεια ποσοτικοποιούνται αυτό με μέτρηση της οπτικής πυκνότητας στα 260 nm. Το τελικό παρασκεύασμα φυλάσσεται στους -20 ° C και χρησιμοποιείται για να δημιουργήσει πρότυπα για την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR).

Real-time PCR

Η διάκριση αλληλόμορφων του rs3775194, rs11947611, rs1485766 , rs7664413 και rs2046463 πολυμορφισμούς του

γονίδιο VEGF-C

αξιολογήθηκε με την ABI StepOne ™ Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό v3.0 SDS (Applied Biosystems), με τη δοκιμασία TaqMan. Οι FAM-εκκινητές που χρησιμοποιούνται για την ανάλυση των rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 και rs2046463 γονίδια πολυμορφισμοί έχουν σχεδιαστεί ως FAM-5′-ATTTAGCACTATTAACTTCAAG? FAM-5′-TTACTTTTGAGAATGTCA? FAM-5′-CTTTTTGATTGCAGTGTTA? FAM-5′-CTTTACTATACTTTACTTGG και FAM-5′- TTTAGCACACGGTTTAGT, αντίστοιχα. Ο τελικός όγκος για κάθε αντίδραση ήταν 5 μί, που περιείχε 2,5 μι TaqMan Γονοτυποποίηση Master Mix, 0.125 μL TaqMan μείγμα ιχνηλατών, και 10 ng γενωμικού DNA. Η PCR πραγματικού χρόνου που περιλαμβάνεται ένα αρχικό στάδιο μετουσίωσης στους 95 ° C για 10 λεπτά, ακολουθούμενη από 40 κύκλους των 95 ° C για 15 s και 60 ° C για 1 λεπτό.

Στατιστικές Αναλύσεις

οι διαφορές μεταξύ των ομάδων θεωρήθηκαν σημαντικές εάν

σ

τιμές ήταν & lt? 0,05. Hardy-Weinberg ισορροπία (HWE) αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας ένα καλοσύνη-of-fit

Χ

2

-test για διαλληλικούς δείκτες. Το Mann-Whitney

U-test

και ακριβές τεστ του Fisher χρησιμοποιήθηκαν για να συγκριθούν οι διαφορές στην δημογραφικά χαρακτηριστικά κατανομές μεταξύ υγιούς ομάδας ελέγχου και ασθενών του στόματος-καρκίνο. Οι προσαρμοσμένοι λόγοι πιθανοτήτων (AORs) και 95% διαστήματα εμπιστοσύνης (ΠΙ) της σύνδεσης των συχνοτήτων γονοτύπου με τον κίνδυνο και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά εκτιμήθηκαν με τη χρήση πολλαπλών μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης μετά τον έλεγχο για άλλους συμπαράγοντες. Αναλύσαμε όλα τα δεδομένα με Αναλυτικής Σύστημα Στατιστικής (SAS Institute, Cary, NC, USA), το λογισμικό (Vers. 9.1, 2005) για τα Windows.

Αποτελέσματα

Η στατιστική ανάλυση των δημογραφικών χαρακτηριστικών παρουσιάζεται στον πίνακα 1. Δεν υπήρξαν σημαντικές διαφορές στις κατανομές των betel-quid μάσημα (

σ

& lt? 0.001), η κατανάλωση αλκοόλ (

σ

& lt? 0.001), και η χρήση του καπνού (

σ

& lt? 0.001) μεταξύ των θεμάτων ελέγχου και άνδρες ασθενείς OSCC. Για να μειωθεί η πιθανή παρεμβολή των περιβαλλοντικών παραγόντων, AORs με 95% ΚΠ εκτιμήθηκαν με πολλαπλά μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης μετά τον έλεγχο για άλλους συμπαράγοντες σε κάθε σύγκριση.

Η

Σε προσληφθεί ομάδα ελέγχου μας, τις συχνότητες

VEGF-C

rs3775194 (

σ

= 0,844, χ

2 τιμή: 0.039), rs11947611 (

σ

= 0,148, χ

2 τιμή: 2.090) , rs1485766 (

σ

= 0.566, χ

2 τιμή: 0,329), rs7664413 (

σ

= 0,115, χ

2 τιμή: 2.478), και rs2046463 (

σ

= 0,115, χ

2 τιμή: 2.478) ήταν σε ισορροπία Hardy-Weinberg, αντίστοιχα. Η ανακατασκευασμένη ανισορροπίας σύνδεσης (LD) πλοκή του πέντε SNPs φαίνεται στο Σχήμα 1. Θα προσδιορίζεται μία παρατηρούμενη haploblock στο οποίο rs7664413 και rs2046463 έδειξαν 100% ανισορροπία σύνδεσης στη μελέτη μας. κατανομές γονότυπου και συσχετίσεις μεταξύ του καρκίνου και του στόματος

VEGF-C

Οι πολυμορφισμοί του γονιδίου φαίνεται στον Πίνακα 2. Τα αλληλόμορφα με τη μεγαλύτερη συχνότητα διανομής για rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 και rs2046463 γονίδια του

VEGF-C

σε δύο προσληφθεί ασθενείς αρσενικού από το στόμα του καρκίνου μας και υγιή έλεγχο αντίστοιχα ήταν ομοζυγώτες για το G /G, ετερόζυγο για A /G, ετερόζυγο για το C /A, ομόζυγο για C /C, και ομόζυγο για A /A. Μετά την προσαρμογή για αρκετές μεταβλητές, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στις έχοντας τον καρκίνο του στόματος σε άτομα με rs3775194, rs11947611 και πολυμορφισμοί rs1485766 του

VEGF-C

γονιδίου σε σύγκριση με αγρίου τύπου (WT) άτομα. Ωστόσο, τα άτομα με το

VEGF-C

πολυμορφικών rs7664413 γονότυπους ΤΤ εμφάνισαν σημαντικά (

σ

& lt? 0,05) μεγαλύτερους κινδύνους 2.541- (95% CI = 1.071~6.027), έχουν OSCC σε σύγκριση με το αντίστοιχο ομοζυγώτες WT τους. Επιπλέον, ένα παρόμοιο αποτέλεσμα παρατηρήθηκε επίσης σε άτομα με το

VEGF-C

πολυμορφικών rs2046463 (Πίνακας 2).

Το ένα παρατηρηθεί haploblock, και το μέτρο κατά ζεύγη LD D ».

Η

επιπτώσεις αλληλεπίδραση μεταξύ περιβαλλοντικών παραγόντων κινδύνου και γενετικούς πολυμορφισμούς των

VEGF-C

παρουσιάζονται στους πίνακες 3 και 4. μεταξύ 611 καπνιστές, άτομα με τουλάχιστον ένα αλληλόμορφο C του rs3775194, ένα G αλληλόμορφο rs11947611, ένα Α αλληλόμορφο rs1485766, ή ένα αλληλόμορφο Τ του rs7664413, και η συνήθεια betel-καρύδι-μάσημα είχαν αντίστοιχες κινδύνους 14.501 φορές (95% CI: 6.899~30.479), 19.030- (95% CI : 9.239~39.197), 15.676- (95% CI: 7.413~33.150), και 24.220- (95% CI: 11.601~50.566) έχουν καρκίνο του στόματος. Τα άτομα είτε με τουλάχιστον ένα αλληλόμορφο C του rs3775194, ένα G αλληλόμορφο rs11947611, το ένα αλληλόμορφο του rs1485766 ή ένα Τ αλληλόμορφο του rs7664413 ή που μάσημα betel καρύδι είχαν αντίστοιχες κινδύνους 11.688- (95% CI: 6.534~20.907), 2.827 – (95% CI: 1.491~5.360), 2.670- (95% CI: 1.302~5.473), και 7.241 φορές (95% CI: 3.981~13.172) να έχουν καρκίνο του στόματος σε σχέση με τα άτομα με WT ομοζυγώτες που δεν μασούν betel καρύδι (Πίνακας 3). Ομοίως, μεταξύ των 461 ινδοκάρυδο-quid καταναλωτές, άτομα με

πολυμορφικό rs3775194 VEGF-C

, rs11947611 ή rs7664413, τα γονίδια και οι οποίοι κάπνιζαν είχαν αντίστοιχους κινδύνους των 2.695- (95% CI: 1.270~10.750), 8.066- ( 95% CI: 2.250~28.913), και 18.100 φορές (95% CI: 5.427~60.369) να έχουν καρκίνο του στόματος σε σχέση με ινδοκάρυδο-quid chewers με το γονίδιο WT που δεν καπνίζουν (Πίνακας 4). Υπό το φως των παραπάνω αποτελεσμάτων, προτείνουμε ότι

VEGF-C

πολυμορφισμών του γονιδίου έχουν μια ισχυρή επίδραση στην ευαισθησία του στόματος-καρκίνου σε ινδοκάρυδο-καρύδι ή /και τους καταναλωτές το κάπνισμα.

Η

διερευνηθούν περαιτέρω οι απλότυποι για να αξιολογηθεί η συνδυασμένη επίδραση των πέντε πολυμορφισμών στην ευαισθησία του στόματος-καρκίνου. Οι συχνότητες διανομή

VEGF-C

rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 απλοτύπων, και rs2046463 στο προσλαμβάνονται άτομα μας αναλύθηκαν. Υπήρχαν πέντε απλοτύπων με συχνότητες & gt? 5% μεταξύ όλων των περιπτώσεων, η πιο κοινή απλότυπος στον έλεγχο ήταν GACCA (35,2%), και ως εκ τούτου επελέγη ως σημείο αναφοράς. Σε σύγκριση με την αναφορά, δύο

VEGF-C

απλοτύπων, GGACA και GACTG, σημαντικά (

σ

& lt? 0.001) αύξησε τους κινδύνους για OSCC από 1.568- (95% CI: 1.201~2.046 ) και 1.819 φορές (95% CI:. 1.352~2.448), αντίστοιχα (Πίνακας 5)

η

Για να αποσαφηνιστεί ο ρόλος του

VEGF-C

πολυμορφισμοί του γονιδίου στο oral- καρκίνο κλινικοπαθολογικοί κατάσταση, όπως TNM κλινική σταδιοποίηση, πρωτοβάθμια μέγεθος του όγκου, η συμμετοχή των λεμφαδένων, και ιστολογική βαθμό, τη συχνότητα διανομής της κλινικής κατάστασης και

VEGF-C

συχνότητες στους ασθενείς και από το στόμα του καρκίνου υπολογίστηκαν. Δεν παρατηρήθηκε σημαντική συσχέτιση μεταξύ των πολυμορφισμών του γονιδίου rs7664413 και την κλινικοπαθολογική κατάσταση παρατηρήθηκαν (Πίνακας 6).

Η

Συζήτηση

Η κατανάλωση αλκοόλ, το κάπνισμα, και betel-μάσημα λίρες είναι η κύρια γνωστή αιτιολογικός παράγοντες για τον καρκίνο του στόματος. Σε αυτή τη μελέτη, τα υψηλότερα ποσοστά παρατηρήθηκαν από άτομα που είχαν μάσημα betel λίρες και καταναλώνεται αλκοόλ και καπνού στην ομάδα των ασθενών OSCC (78,9%, 62,8% και 87,0%, αντίστοιχα) από την ομάδα ελέγχου (21,1%, 43,4%, και 47,4%, αντίστοιχα), γεγονός που δείχνει ότι το αλκοόλ και τον καπνό κατανάλωσης και betel-μάσημα λίρες είναι ιδιαίτερα σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του στόματος. Είναι καλά τεκμηριωμένο ότι η μακροπρόθεσμη καπνός και betel-λίρες κατανάλωση συμβάλλει στον καρκίνο του στόματος [3], [4]. Betel-quid συστατικά μπορεί να αυξήσει τα επίπεδα της πρωτεΐνης του c-Fos και c-Jun πρωτο-ογκογονίδια [37]. Η κατανάλωση καπνού αυξάνει επίσης σημαντικά εκφράσεις της υποξίας-διεγέρσιμο παράγοντα (HIF) -1 [38] και VEGF-C [39] στη στοματική και καρκίνων του τραχήλου της μήτρας, αντίστοιχα. Η έκθεση σε περιβαλλοντικούς καρκινογόνος ουσία μπορεί να περιλαμβάνει μερικώς το σχηματισμό ή την παθογένεια του καρκίνου του στόματος, αλλά ολοένα και περισσότερες ενδείξεις δείχνουν ότι η γονιδιωματική αλλαγές μεταβάλλουν σταδιακά κυτταρικών φαινοτύπων και θα μπορούσε να οδηγήσει πιο σημαντικά κύτταρα να εξελιχθούν από το προνεοπλασματικής στάδιο σε καρκίνο [40]. Έχει αναφερθεί ότι το στοματικό βλεννογόνο των ατόμων με το

ποντικού διπλό λεπτό 2 (MDM2)

SNP 309 GG γονότυπο είναι πιο ευαίσθητα στην έκθεση και τα αποτελέσματα σε παλαιότερες έναρξη του σχηματισμού όγκων [41] περιβαλλοντικών καρκινογόνος ουσία. Μια μεγαλύτερη αλληλομόρφων του πολυμορφισμού του δινουκλεοτιδίου GT στο

αίμης οξυγενάσης (ΗΟ) -1

υποκινητή και ένα λειτουργικό πολυμορφισμό στο

πυρηνικού παράγοντα κάππα Β1 (NFKB1)

υποστηρικτής είναι τόσο σχετίζονται με τον κίνδυνο του betel-λίρες που σχετίζονται με OSCC [42], [43]. Πολυμορφισμοί αρκετών γονιδίων ταυτοποιήθηκαν ως συνδεόμενα με τον κίνδυνο καρκίνου του στόματος [44], [45]. Είναι σαφές ότι η γενετική συστατικά μπορεί να παίζει ένα κεντρικό ρόλο στην καρκινογένεση.

VEGF-C είναι συχνά εντοπίζονται σε ιστούς όγκων εντός κεφαλής και λαιμού καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων, και η ευρεία έκφραση του VEGF-C /VEGFR-3 άξονα σε καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων της κεφαλής και του τραχήλου υποδηλώνει συμμετοχή σε λεμφαγγειογένεση όγκου και την αγγειογένεση, την προώθηση της ανάπτυξης του όγκου, και ο πολλαπλασιασμός των καρκινικών κυττάρων [46]. Τα δεδομένα στον Πίνακα 2 δείχνουν ότι τα άτομα με το

VEGF-C

πολυμορφικών rs7664413 TT ή rs2046463 GG γονότυπο έχουν υψηλότερους κινδύνους για OSCC σε σύγκριση με το γονότυπο WT. Αν και η λειτουργική σημασία αυτών των δύο SNPs δεν έχει δοκιμαστεί πειραματικά, μια ένωση με τον κίνδυνο καρκίνου του στόματος προτείνεται βασίζεται στις θέσεις των αναλύθηκαν παραλλαγές. Ωστόσο, σε ορισμένα γονίδια, ένας SNP που προκύπτουν στην κωδικοποίηση, υποκινητή, ή ρυθμιστική περιοχή μπορεί να έχει λειτουργικές συνέπειες.

Η rs7664413 SNP βρισκόταν στη πλευρική περιοχή ιντρονίου 5 (-33 nt ανοδικά) του

VEGF-C

γονίδιο. Πολλά εναλλακτικό μάτισμα στοιχεία cis-ρυθμίζονται βρίσκεται σε αυτήν την περιοχή [47]. Βρήκαμε επίσης ότι η rs7664413 SNP βρισκόταν σε μια ακολουθία ενός υποθετικού εξονικό σιγαστήρα μάτισμα (PESS, [TAAGGTATA]). PESSs είναι cis-ρυθμιστικά στοιχεία που αναστέλλουν την χρήση των γειτονικών θέσεων ματίσματος ενεργώντας μέσω αλληλεπιδράσεων με τα μέλη του ετερογενούς πυρηνικής ριβονουκλεοπρωτεΐνης οικογένεια (hnRNP) και συχνά συμβάλλουν στην εναλλακτική συρραφή (AS). PESSs ρυθμίζουν AS με την πρόσληψη παράγοντες που επηρεάζουν άμεσα το μηχανισμό ματίσματος [48]. Για παράδειγμα, hnRNP I /PTB δεσμεύει πολλά σιγαστήρες εξονικό μάτισμα και φαίνεται να μπλοκάρει την πρόσβαση στο μηχανισμό ματίσματος μέσω πρωτεΐνη πολυμερισμό [49]. Άλλα στοιχεία υποστηρίζουν την παρατήρηση περίπου δύο παραλλαγές ματίσματος (ENST00000280193 και ENST00000507638), αυτό αναφέρεται στη βάση δεδομένων Ensemble (Vers. GRCh37). Ένα κωδικοποιεί την λειτουργική πρωτεΐνη VEGF-C (NM_005429, 420 αμινοξέα), αλλά το άλλο επεξεργάζεται μόνο μεταγραφές (CF128431, χωρίς παραγωγή πρωτεΐνης, EST που προέρχονται από μετάσταση κυτταρικές γραμμές χονδροσαρκώματος πνεύμονα). Τα στοιχεία αυτά δείχνουν ότι η rs7664413 SNP μπορεί να επηρεάσει

VEGF-C

mRNA ματίσματος. Ωστόσο, απαιτούνται περαιτέρω ειδικά σχεδιασμένες μελέτες που απαιτούνται για την επαλήθευση των αποτελεσμάτων και υποκείμενο μηχανισμό της πολυμορφικής rs7664413 σε προ-αγγελιοφόρου RNA splicing.

Η rs2046463 SNP βρισκόταν κατάντη του

VEGF-C

γονίδιο αλλά σε κοντινή απόσταση rs7664413 (κατάντη 5008 nt). Όπως Σχήμα 1 δείχνει, προσδιορίσαμε ένα LD haploblock αποτελείται από rs7664413 και rs2046463, η οποία πιθανόν αντιπροσωπεύουν εξαρτώμενη γενετικά σήματα που επηρεάζουν τον κίνδυνο για OSCC, ενώ άλλες SNPs είναι έξω από το haploblock. Ωστόσο, η λεπτομερής υποκείμενος μηχανισμός πρέπει να ελέγχεται από ένα άλλο καλά σχεδιασμένο πείραμα.

Οι ερμηνείες αυτής της μελέτης είναι περιορισμένες λόγω πληροφορίες σχετικά με ορισμένους παράγοντες κινδύνου στόματος του καρκίνου, όπως η μαριχουάνα (κάνναβη) το κάπνισμα, η ιατρική χρήση της νικοτίνης , και η κληρονομικότητα και οικογενειακή τους κινδύνους, δεν ήταν διαθέσιμα για τις προσλαμβάνονται δείγματα, και αυτός ο περιορισμός μπορεί να περιορίσει την προσαρμογή αυτών των ενδεχομένως συγχυτικούς παράγοντες. Σε αυτή τη μελέτη, ωστόσο, οι κύριοι παράγοντες κινδύνου για καρκίνο του στόματος, του αλκοόλ και του καπνού κατανάλωσης και betel-μάσημα λίρες, προσαρμόστηκαν για προκειμένου να εκτιμήσει τα αποτελέσματα των πολυμορφισμών του γονιδίου για την κλινικοπαθολογοανατομικών ανάπτυξη OSCC. Σε μια μελλοντική μελέτη, αυξάνοντας τον αριθμό δείγματος και τη λήψη περισσότερους παράγοντες κινδύνου OSCC υπόψη στην ανάλυση θα μπορούσε να επικυρώνει ακριβώς αυτά τα ευρήματα.

Εν ολίγοις, τα

VEGF-C

πολυμορφικών rs7664413 TT ή rs2046463 GG γονότυπο μπορεί να αυξήσει τον κίνδυνο για OSCC. Η

GGACA

ή

GACTG

απλότυπος από τα πέντε

VEGF-C

SNPs (rs3775194, rs11947611, rs1485766, rs7664413 και rs2046463) συνδυάζονται επίσης έδειξε μια συσχέτιση υψηλού κινδύνου με OSCC. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η

VEGF-C

rs7664413 και rs2046463 πολυμορφικών γονότυπους και απλότυπος

GGACA

ή

GACTG

των πέντε

VEGF-C

SNPs που περιγράφονται παραπάνω θα μπορούσαν να συμβάλουν στην πρόβλεψη της ευαισθησίας σε OSCC.