Αφηρημένο

Ο καρκίνος του προστάτη (PC) είναι η πιο συχνά διαγιγνώσκεται καρκίνος στους άνδρες. Η απόκτηση του ευνουχισμού ανθεκτικά (CR) φαινότυπος συνδέεται με την ενεργοποίηση των οδών που προκαλείται από αυξητικούς παράγοντες σηματοδότησης. Η TGFβ1 και των υποδοχέων της έχουν ένα σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη του όγκου, είναι η προ-αποπτωτική λειτουργία διαμορφώνεται από την έκφραση του

TGFBR2

. Ένα μόνο νουκλεοτιδίου πολυμορφισμός -875 G & gt? Α σε

TGFBR2

γονίδιο έχει περιγραφεί, η οποία μπορεί να επηρεάσει τα επίπεδα έκφρασης του υποδοχέα. Σκοπός μας ήταν να διερευνηθεί ο πιθανός ρόλος του

TGFBR2-875G & gt? Ένα

σε κίνδυνο τον υπολογιστή και στην ανταπόκριση σε θεραπεία αποστέρησης ανδρογόνων (ADT).

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός μελετήθηκε από τις διακρίσεις αλληλομόρφων με τη χρήση αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης πραγματικού χρόνου (PCR) σε 891 ασθενείς με PC και 874 μάρτυρες. Μια μελέτη παρακολούθησης ανέλαβε να αξιολογήσει απάντηση ADT. Η

TGFBR2

και

Smad7

έκφρασης mRNA αναλύθηκαν με ποσοτική PCR πραγματικού χρόνου. Βρήκαμε ότι

TGFBR2-875GG

ομόζυγο ασθενείς παρουσιάζουν χαμηλότερα επίπεδα έκφρασης του

TGFBR2

mRNA (AA /AG: 2

-ΔΔCT = 1,5,

P

= 0.016 ). GG γονότυπο συσχετίστηκε επίσης με υψηλότερο βαθμό Gleason (OR = 1,51,

P

= 0,019) και αυξημένο κίνδυνο πρόωρης υποτροπή μετά ADT (HR = 1,47,

P

= 0.024). Η ανάλυση (γ) δείκτης συμφωνία έδειξε ότι ο ορισμός του προφίλ που περιέχει πληροφορίες σχετικά με τα χαρακτηριστικά των όγκων που σχετίζονται με γενετικές πληροφορίες παρουσιάζουν αυξημένη ικανότητα να προβλέψει τον κίνδυνο για την ανάπτυξη CR (μοντέλο C-δείκτης 1: 0.683

vs

μοντέλο 2: 0,736

vs

μοντέλο 3: 0,746

vs

μοντέλο 4: 0.759). Η

TGFBR2-875G & gt? Ένα

συνεισφορά σε μια πρώιμη υποτροπή σε ADT ασθενείς, εξαιτίας των αλλαγών στην έκφραση του mRNA, υποστηρίζει τη συμμετοχή των TGFβ1 μονοπατιού στο CRPC. Επιπλέον, σύμφωνα με τα αποτελέσματά μας, υποθέτουμε τα πιθανά οφέλη της σύνδεσης των γενετικών πληροφοριών στα μοντέλα πρόβλεψης της ανάπτυξης CR

Παράθεση:. Teixeira AL, Gomes Μ, Nogueira Α, Azevedo AS, Assis J, Dias F , et al. (2013) Βελτίωση του μοντέλου πρόβλεψης της Ευνουχισμός-Resistant Καρκίνος του προστάτη: Λειτουργική γενετικές παραλλαγές σε TGFβ1 μονοπάτι σηματοδότησης Διαμόρφωση. PLoS ONE 8 (8): e72419. doi: 10.1371 /journal.pone.0072419

Συντάκτης: Μινγκ Tat Λινγκ, Queensland University of Technology, Αυστραλία

Ελήφθη: 11 Απρ 2013? Αποδεκτές: 10 του Ιούλη του 2013? Δημοσιεύθηκε: 9 Αυγ, 2013

Copyright: © 2013 Teixeira et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς θα ήθελα να ευχαριστήσω την Liga Portuguesa Contra o Cancro-Centro Regional do Norte (πορτογαλικό Λιγκ κατά του καρκίνου) και Fundação para a Επιστημών e Tecnologia (FCT), το έργο αυτό ήταν εν μέρει χρηματοδοτήθηκε από μια απεριόριστη εκπαιδευτική επιχορήγηση για τη βασική έρευνα στη μοριακή ογκολογία από FCT (PTDC /SAU-FCF /71552/2006). ALT είναι ένα διδακτορικό κάτοχος επιχορήγηση βαθμό από το FCT (SFRH /BD /47381/2008). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Rui Medeiros, Ογκολογική Ομάδα Μοριακής, Πορτογαλικό Ινστιτούτο Ογκολογίας Αναπληρωτής Καθηγητής, ICBAS, Instituto Ciencias Biomédicas Abel Salazar (Πανεπιστήμιο του Πόρτο). Ως μέλος της Συντακτικής Επιτροπής PLoS ONE, αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Ο καρκίνος του προστάτη (PC) είναι ένα σημαντικό δημόσιο πρόβλημα υγείας που επηρεάζει τον ανδρικό πληθυσμό. Μετά τον καρκίνο του πνεύμονα, το PC είναι η πιο συχνά διαγιγνώσκεται ο καρκίνος στους άνδρες, η πέμπτη αιτία θανάτου από καρκίνο σε όλο τον κόσμο, και σχεδόν τα τρία τέταρτα των εγγεγραμμένων περιπτώσεις συμβαίνουν στις αναπτυγμένες χώρες [1]. Τα αίτια της PC παραμένουν ανεπαρκώς κατανοητά και πολλά προϊόντα γονιδίων δείχνουν απορυθμισμένη λειτουργίες κατά τη διάρκεια της εξέλιξης του καρκίνου. Κατά τη διάγνωση, οι ασθενείς με πρώιμα στάδια της νόσου συχνά υποβάλλονται σε προστατεκτομή, εξωτερική ακτινοβολία και /ή βραχυθεραπεία, η οποία αφαιρεί ή καταστρέφει κύτταρα όγκου που περιορίζονται εντός του προστάτη [2]. Ωστόσο, παρά τις πρόσφατες προόδους στην έγκαιρη ανίχνευση των εντοπισμένους όγκους PC, υπάρχει μικρή αποτελεσματική θεραπεία για ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ή /και μεταστατική νόσο. Οι ασθενείς που διαγιγνώσκονται σε προχωρημένα στάδια επί του παρόντος υποβάλλονται σε θεραπεία στέρησης ανδρογόνων (ADT), λόγω της ανδρογόνο εξάρτηση των κυττάρων του προστάτη για τη συνεχή ανάπτυξη και την επιβίωση. Ωστόσο, διαπιστώθηκε ότι στους περισσότερους ασθενείς τα αποτελέσματα αυτής της θεραπείας συνήθως διαρκούν 18 έως 24 μήνες, μετά την οποία οι ασθενείς αναπτύσσουν αντίσταση σε ορμονική θεραπεία και την ανάπτυξη ευνουχισμός ανθεκτικών καρκίνου του προστάτη (CRPC) [3]. Δυστυχώς, η CRPC θεραπεία είναι περιορισμένη, αναποτελεσματική και οι μοριακοί μηχανισμοί της φαινοτύπου εξέλιξης της δεν είναι καλά κατανοητοί. Το CRPC είναι πάντοτε θανατηφόρα κατάσταση, η οποία συχνά μεταστάσεις και σχετίζεται με σημαντική νοσηρότητας και θνησιμότητας [4].

προστατικά κύτταρα απαιτούν ανδρογόνων στην κυτταρική μικροπεριβάλλον να πολλαπλασιάζονται και να διαφοροποιούνται. Παρ ‘όλα αυτά, η πρόοδος PC και η απόκτηση του ευνουχισμού ανθεκτικά (CR) φαινότυποι έχουν συσχετισθεί με την ενεργοποίηση άλλων οδών σηματοδότησης που προκαλείται από αυξητικούς παράγοντες που ρυθμίζουν την ισορροπία μεταξύ του ρυθμού ανάπτυξης των κυττάρων και την απόπτωση.

Ο TGFβ1 και υποδοχείς της είναι βασικά συστατικά του μονοπατιού σηματοδότησης ΤΟΡβ, η οποία διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην καρκινογένεση και την εξέλιξη του όγκου. Η μεταγωγή σήματος εκκινεί με την ενεργοποίηση TGFβ1, τότε TGFβ1 δεσμεύεται με τον υποδοχέα τύπου II (ΤΟΡβΚΙΙ), η οποία στη συνέχεια φωσφορυλιώνει τον υποδοχέα τύπου Ι (TGFβRI), και ενεργοποιεί την κινάση της. Η φωσφορυλιωμένη TGFβRI, με τη σειρά της φωσφορυλιώνει κατάντη στοιχεία του μονοπατιού σηματοδότησης. Ωστόσο, η ανασταλτική Smad7 έχει την ικανότητα να δεσμεύεται σε TGFβRI και αποτελεσματικά εξασθενούν μονοπάτι ενεργοποίησης [5].

In vitro

μελέτες έχουν δείξει ότι στα κύτταρα PC, το μονοπάτι σηματοδότησης TGFβ1 έχει κάποια ελαττώματα και την αποκατάσταση αυτού του μονοπατιού μπορεί να καταστείλει την ανάπτυξη του όγκου μέσω της αναστολής του πολλαπλασιασμού των κυττάρων [6,7]. Μειωμένη

Οι TGFBR2

επίπεδα έκφρασης συσχετίζεται με βραχύτερη ποσοστό επιβίωσης των ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου, όπως και η μειωμένη έκφραση του συν-υποδοχέα βηταγλυκάνη σε ασθενείς του μαστού και PC [8,9]. υψηλά επίπεδα έκφρασης του

TGFBR2

μπορεί να μεσολαβήσει η προ-αποπτωτική λειτουργία του TGFβ1 μονοπατιού σηματοδότησης και της απώλειας της προωθεί την εισβολή και την κακοήθη εξαλλαγή [10,11].

Οι αλλαγές στο

TGFBR2

επίπεδα, με αποτέλεσμα στις β1 TGF οδό σηματοδότησης, μπορεί να εμπλέκεται σε PC ανάπτυξη /εξέλιξη. A G & gt? Μια μετάβαση στη θέση -875 προαγωγέα του

TGFBR2

γονίδιο αναφέρθηκε και μπορεί να ενισχύουν τη δραστηριότητα μεταγραφής σε φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα και μπορεί να αυξήσει την έκφραση του

TGFBR2

γονίδιο [12]. Γενετικές παραλλαγές, οι οποίες διαμορφώνουν

TGFBR2

έκφρασης, μπορεί να έχει επιπτώσεις στην ανάπτυξη του υπολογιστή και την πρόγνωση. Η παρούσα μελέτη είναι η πρώτη που αξιολογεί την καταλληλότητα του

TGFBR2-875G & gt?. Ένα

(rs3087465) λειτουργική πολυμορφισμού σε CRPC ασθενείς

Υλικό και Μέθοδοι

δήλωση Δεοντολογίας

Η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με τις αρχές της Διακήρυξης του Ελσίνκι. Η μελέτη εγκρίθηκε από την τοπική επιτροπή δεοντολογίας στο πορτογαλικό Ινστιτούτο Ογκολογίας του Πόρτο (Πορτογαλία). Όλα τα άτομα υπέγραψαν μια γραπτή συγκατάθεση για να συμμετάσχουν στη μελέτη.

Πληθυσμός μελέτης

Αυτή η μελέτη ασθενών-μαρτύρων πραγματοποιήθηκε σε 891 ασθενείς, με μέση ηλικία τα 66,2 (7,7), με ιστοπαθολογικά διαγνωστεί PC στο πορτογαλικό Ινστιτούτο Ογκολογίας του Πόρτο (Πορτογαλία). νόσος διανομή στάδιο των ασθενών κατά το χρόνο της διάγνωσης ήταν ως ακολούθως: 53,2% παρουσίασε εντοπισμένη ασθένεια (Τ1-T2b), 32,7% είχε τοπικά προχωρημένη νόσο (Τ3-Τ4), και 14,2% είχαν μεταστατική νόσο (N

+ και ή /M

+). Σωρευτικά, μια μελέτη παρακολούθησης (n = 428) είχε αναλάβει την υποχρέωση να αξιολογήσει απάντηση ADT. Οι τύποι των ορμονική θεραπεία ήταν ως εξής: αντι-ανδρογόνα συν θεραπεία συνδυασμού ωχρινοτρόπου hormonereleasing αγωνιστές ορμόνης (aLHRH) (64,2%), aLHRH μόνη (5,4%), και αντι-ανδρογόνα μόνο (30,4%). αντίσταση ορμόνη αξιολογήθηκε μέσω της επανάληψης PSA, η οποία ορίστηκε ως δύο διαδοχικές τιμές αυξανόμενο PSA πάνω από 1,0 ng ml

-1 και διαφέρει κατά περισσότερο από 0,2 ng ml

-1 [13]. Ο μέσος χρόνος παρακολούθησης ήταν 51 μήνες.

Οι άνδρες ηλικίας άνω των 40 ετών, χωρίς γνωστό ιστορικό καρκίνου είχαν προσληφθεί από την πορτογαλική Ινστιτούτου Ογκολογίας της Τράπεζας Πόρτο Κέντρου Αιμοδοσίας και περιλαμβάνονται στην ομάδα ελέγχου ( n = 874), με μέσο όρο ηλικίας 44,2 (13,7). Περιφερική δείγματα φλεβικού αίματος (8 mL) συλλέχθηκαν από κάθε άτομο που καταχωρήθηκε στη μελέτη

TGFBR2 -875G & gt?. Ένας πολυμορφισμός (rs3087465) γονοτυπική

Μετά την εξαγωγή του DNA χρησιμοποιώντας το κιτ QIAamp DNA Mini ( Qiagen

®) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή, η

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός (rs3087465) αναλύθηκε με διακρίσεις αλληλομόρφων χρήση 7300 πραγματικού χρόνου PCR System (Applied Biosystems

®). Η αντίδραση βασίζεται σε μια PCR δοκιμασία 5 ‘νουκλεάσης, με τη χρήση ενός προσδιορισμού TaqMan, το οποίο περιλαμβάνει δύο αλληλόμορφο-ειδική TaqMan

ανιχνευτές ®MGB (Applied Biosystems

®) που περιέχει διακριτές φθορίζουσες χρωστικές και ένα ζεύγος εκκινητών PCR για την ανίχνευση ειδικές

TGFBR2-875 G

& gt?

Μια

πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου (SNP). Real-time PCR διεξήχθη χρησιμοποιώντας ένα μίγμα αντίδρασης 6 μί, που περιείχε 1χ Master Mix (Applied Biosystems

®), με ανιχνευτές 1x (TaqMan

®assay C__27491740_10, Applied Biosystems

®) και 20 ng του το δείγμα DNA. Θερμικές συνθήκες ήταν 95

° C επί 10 λεπτά για την ενεργοποίηση του DNA πολυμεράση, ακολουθούμενη από 45 κύκλους PCR στους 92

° C για 15 δευτερόλεπτα και 60

° C για 1 λεπτό. διαδικασίες ποιοτικού ελέγχου που εφαρμόζονται για τον γονότυπο αναλύσεις που περιλαμβάνονται διπλή δειγματοληψία στο 10% των δειγμάτων για την αξιολόγηση της αξιοπιστίας και τη χρήση των αρνητικών μαρτύρων στο βήμα μακριά false positives. Δύο συντάκτες χρησιμοποίησαν τα αποτελέσματα ανεξάρτητα, και τα ασαφή αποτελέσματα αναλύονται πάλι.

Η γονιδιακή έκφραση προφίλ

Το

TGFBR2

και

Smad7

επίπεδα έκφρασης του mRNA αναλύθηκαν με ποσοτική πραγματικού χρόνου PCR. Μετά

TGFBR2-875G & gt? A

γονοτυπική, 33 ασθενείς επιλέχτηκαν τυχαία μεταξύ των ασθενών που υποβλήθηκαν σε ADT, και ολικό κυτταρικό RNA απομονώθηκε. Αρχικά, το RNA απομονώθηκε με το αντιδραστήριο TriPure (Roche

®Applied Science), και μετά το διαχωρισμό του κλάσματος του RNA, τα δείγματα καθαρίστηκαν χρησιμοποιώντας το εμπορικό κιτ GeneJET ™ RNA Purification Kit (Fermentas

®). RNA δείγματα στη συνέχεια χρησιμοποιήθηκαν ως πρότυπα για σύνθεση cDNA, χρησιμοποιώντας ένα υψηλής χωρητικότητας RNA-to-cDNA Kit (Applied Biosystems

®). Τέλος, οι αντιδράσεις διεξήχθησαν σε StepOne

TMOne qPCR μηχάνημα, που περιέχει 1x Master Mix (Applied Biosystems

®), με 1x ανιχνευτές (TaqMan

αναλύσεις Έκφραση ®Gene, Hs00234253_m1 και Hs00998193_m1, Applied Biosystems

®), cDNA δείγμα, και τα ανθρώπινα GUSB (Beta γλυκουρονιδάση) ενδογενούς ελέγχου (Applied Biosystems

®) χρησιμοποιήθηκε για να ομαλοποιήσει τα αποτελέσματα, όσον αφορά τις δύο βιοδείκτες, δεδομένου ότι παρουσιάζει ένα σταθερό επίπεδο έκφρασης. Η ανάλυση των δεδομένων πραγματοποιήθηκε με τη χρήση του λογισμικού StepOne v 2.2 (Applied Biosystems

®) με την ίδια βασική γραμμή και κατώτατο όριο για κάθε πλάκα, προκειμένου να παραχθεί κύκλος κατωφλίου (

Ct

) τιμές για όλες τις γονιδίων σε κάθε δείγμα. Η ποσοτικοποίηση του mRNA διεξήχθη εις τριπλούν και τα αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν από δύο ανεξάρτητους ερευνητές.

Η στατιστική ανάλυση

Η ανάλυση των δεδομένων έγινε με το λογισμικό του υπολογιστή IBM®SPSS

®Statistics για τα Windows ( έκδοση 20.0). Η αναλογία πιθανοτήτων (OR) και το διάστημα εμπιστοσύνης 95% της (95% CI) υπολογίστηκαν ως μέτρο της σύνδεσης μεταξύ των

TGFBR2-875G & gt? Α

γονότυπους και τον κίνδυνο PC. Η ισορροπία Hardy-Weinberg υποβλήθηκε σε ανάλυση Chi-square Pearson να συγκρίνει την παρατηρούμενη έναντι των αναμενόμενων συχνοτήτων γονοτύπου. Ένα μοντέλο αναλογικών κινδύνων Cox χρησιμοποιήθηκε για να αναλύσει το χρόνο για να CT (καθορίζεται από το χρονικό διάστημα από την αρχή του ADT μέχρι CR ή η τελευταία κλινική επίσκεψη), θεωρώντας ως συμπαράγοντες, το στάδιο του όγκου (κλινικά εντοπισμένο

έναντι

τοπικά προχωρημένο

έναντι

απομακρυσμένες μεταστάσεις, της Ευρωπαϊκής Ουρολογικής Εταιρείας (EAU) Κατευθυντήριες γραμμές [14]), Gleason Score (≥8), και τα επίπεδα PSA κατά τη διάγνωση. μοντέλα παλινδρόμησης κατά Cox χρησιμοποιήθηκαν για την προσαρμογή για πιθανούς παράγοντας σύγχυσης. Η 2

-ΔΔCt μέθοδο, μαζί με t-test του Student, χρησιμοποιήθηκε προκειμένου να αξιολογήσει τα στατιστικά σημαντικές διαφορές στην κανονικοποιημένη έκφραση του

TGFBR2

και

Smad7

mRNA εδώ διερευνηθούν, μεταξύ των διαφόρων

TGFBR2-875 G

& gt?

Μια

γονότυπους. Η (γ) του δείκτη αντιστοιχίας χρησιμοποιήθηκε για να συγκριθεί η προβλεπτική ικανότητα του σωματείου των γνωστών προγνωστικών μεταβλητών με το

TGFBR2-875 GG

γονότυπο, με γ & gt? 0.5 εξετάζεται με ικανότητα καλή πρόβλεψη [15] .

Αποτελέσματα

Το

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός διανομής γονότυπο σε ασθενείς και τους ελέγχους που περιγράφονται στον πίνακα 1. Οι συχνότητες για AA /AG και γονότυπους GG ήταν, αντίστοιχα, 0,37 και 0,63 για τους ασθενείς PC και 0,38 και 0,62 στην ομάδα ελέγχου. Παρατηρείται

έναντι

αναμένεται συχνότητες γονοτύπου υπολογίστηκαν και δεν παρατηρήθηκε καμία απόκλιση από την ισορροπία Hardy-Weinberg (ομάδα PC,

P

= 0.877, ομάδα ελέγχου,

P

= 0,328 ). Δεν παρατηρήσαμε καμία στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ του

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός και PC κίνδυνο (OR = 1,05? 95% IC: 0,87 – 1,28?

P

= 0,645) (Πίνακας 1) .

Η ομάδα ελέγχου ομάδας PC

Η Ή

95% CI

P

Η

TGFBR2-875

G & gt? Ένα

AA34 (0.04) 46 (0.05) AG295 (0,33) 287 (0.33) 1.390.87-2.240.210GG562 (0,63) 541 (0.62) 1.410.89-2.340.179AA /AG329 (0.37) 333 (0.38) GG562 (0,63) 541 (0.62) 1.050.87-1.280.645Table 1.

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός που σχετίζονται με αναλογία πιθανοτήτων για PC και γονότυπο συχνότητες σε ασθενείς και μάρτυρες.

PC, ο καρκίνος του προστάτη? Ή, λόγος πιθανοτήτων? 95% CI, 95% διάστημα εμπιστοσύνης CSV Λήψη CSV

Μέσα στην ομάδα των ασθενών, η

TGFBR2-875GG

γονότυπο συσχετίστηκε με υψηλότερους βαθμούς Gleason (≥8) (OR = 1,51, 95% CI: 01/07 έως 02/16,

P

= 0,019). Επιπλέον, αν και η συσχέτιση δεν ήταν στατιστικά σημαντική, υπήρχε μια τάση να υπεραντιπροσώπευση του γονότυπου GG στην ομάδα CR σε σύγκριση με τα άτομα χωρίς CR (OR = 1,41? 95% CI: 0,95 – 2,08?

P

= 0.084) (Πίνακας 2).

Η Gleason σκορ

Ή

95% CI

P

Η

TGFBR2-875

G & gt? Ένα

Η & lt? 8

≥8

Η

Η AA /AG274 (0.39) 55 (0.30) GG431 (0,61 ) 131 (0.70) 1.511.07-2.160.019Stage

TGFBR2-875

G & gt? Ένα

Μεταφρασμένη (στάδια Τ1-Τ2) Σύνθετη (T3- Τ4, Ν και Μ +) AA /AG162 (0,39) 166 (0.35) GG252 (0,61) 310 (0.65) 1.200.91-1.580.189Hormone αντίσταση

TGFBR2-875

G & gt? A

NoYesAA /AG133 (0.40) 55 (0.32) GG196 (0.60) 114 (0.68) 1.410.95-2.080.084Table 2. Επιθετική νόσος φαινότυπο σύμφωνα

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός

. Ή, λόγος πιθανοτήτων? 95% CI, 95% διάστημα εμπιστοσύνης? μονοπαραγοντική ανάλυση CSV Λήψη CSV

Όσον αφορά το χρόνο για να CR μετά την έναρξη της ADT, παρατηρήσαμε ότι το

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός σχετίζεται με CR-ελεύθερη επιβίωση. Παρατηρήσαμε ένα σημαντικά μειωμένο χρόνο-να-CR στο

TGFBR2-875GG

ομόζυγο σε σύγκριση με AA /AG γονότυποι φορείς (86,7

έναντι

102,4 μηνών) (Log δοκιμή Rank,

P

= 0,032). Επιπλέον, πολυπαραγοντικό μοντέλο παλινδρόμησης κατά Cox, χρησιμοποιώντας το στάδιο του όγκου, Gleason≥ 8, και τα επίπεδα του PSA κατά τη διάγνωση ως συμμεταβλητές, αποδεικνύεται υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής νωρίτερα στο

TGFBR2-875GG

ασθενείς PC παρακάτω ADT (κίνδυνος ratio- HR = 1,47 , 95% CI:. 01.05 – 02.05,

P

= 0,024) (Εικόνα 1)

σιτηρέσιο κινδύνου χρησιμοποιώντας το στάδιο του όγκου (κλινικά εντοπισμένο

vs

τοπικά προχωρημένο

vs

απομακρυσμένες μεταστάσεις, EAU κατευθυντήριες γραμμές), Gleason≥ 8, και τα επίπεδα του PSA κατά τη διάγνωση ως συμμεταβλητές.

Η

Η αντιστοιχία (γ) του δείκτη χρησιμοποιήθηκε για να συγκριθεί η προβλεπτική ικανότητα των διαφόρων προγνωστικών μεταβλητών που σχετίζονται με την ανάπτυξη CR? η προγνωστική αξία εκτιμήθηκε με τους δείκτες συμφωνία Harrell, όπου η γ-δείκτης 1 δείχνει τέλεια συμφωνία [15]. το στάδιο του όγκου είναι ένα πολύ γνωστό προγνωστικός παράγοντας για την εξέλιξη του καρκίνου. Στη μελέτη μας, η προγνωστική αξία των συνδυασμένων το στάδιο του όγκου (Μεταφρασμένη

vs προηγμένη

) για την ανάπτυξη CR ήταν 0.683 (Υπόδειγμα 1). Αυτή η προγνωστική αξία αυξήθηκε σε 0.736 με την προσθήκη άλλων μεταβλητών στο μοντέλο πρόβλεψης, όπως PSA ≥ 20 ng.mL

-1 κατά τη διάγνωση και την βαθμολογία Gleason ≥8 (Υπόδειγμα 2). Τέλος, αυτή η προβλεπτική ικανότητα αυξάνεται με την προσθήκη των γενετικών πληροφοριών σχετικά με την

TGFBR2-875G & gt? A

πολυμορφισμός, με βελτίωση της πρόβλεψης κατά 6,3% και 1,0% σε σύγκριση με το υπόδειγμα 1 και Υπόδειγμα 2, αντίστοιχα (c -index 0.746) (Μοντέλο 3, Πίνακας 3). Επιπλέον, η προγνωστική αξία αυξήθηκε σε 0.759 λαμβάνοντας υπόψη το στάδιο συμμεταβλητές όγκου (μεταφρασμένη

vs

τοπικά προχωρημένο

vs

απομακρυσμένες μεταστάσεις, EAU), PSA ≥ 20 ng.mL

-1 κατά τη διάγνωση , Gleason ≥8,

TGFBR2-875GG

γονότυπο (Υπόδειγμα 4, πίνακας 3).

Η HR

95% CI

P

Η

γ

δείκτη

Μοντέλο 10.683Combined όγκου στάδιο (Μεταφρασμένη

vs

προχωρημένους) 3.892.67-5.65 & lt? 0.001Model 20,736 στάδιο συνδυασμό όγκων (Μεταφρασμένη

vs

για προχωρημένους) 2.611.72-3.95 & lt? 0.001 PSA ≥ 20 ng.mL

-1 στους diagnosis1.471.06-2.030.020 Gleason ≥81.901.40-2.62 & lt? 0.001Model 30.746 Συνδυασμένη στάδιο του όγκου (Μεταφρασμένη

vs

για προχωρημένους) 2.701.77-4.12 & lt? 0.001 PSA ≥ 20 ng.mL

-1 στους diagnosis1.531.10-2.120.012 Gleason ≥81.831.32-2.54 & lt? 0.001

TGFBR2-875GG

genotype1 .390.99-1.940.058Model 40.759 το στάδιο του όγκου (μεταφρασμένη

vs

τοπικά προχωρημένο

vs

απομακρυσμένες μεταστάσεις, EAU) 2.281.78-2.91 & lt? 0.001 PSA ≥ 20 ng.mL

– 1 σε diagnosis1.230.87-1.750.246 Gleason ≥81.641.18-2.290.004

TGFBR2-875GG

genotype1.441.03-2.020.033Table 3. μοντέλα πρόβλεψης της ανάπτυξης ευνουχισμού αντοχής μετά από θεραπεία στέρησης ανδρογόνων.

HR, αναλογία κινδύνου? 95% CI, 95% διάστημα εμπιστοσύνης CSV Λήψη CSV

Όσον αφορά το

TGFBR2

έκφραση του mRNA σύμφωνα με το

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός, παρατηρήσαμε διαφορές στην έκφραση του mRNA στο ΦΕΚ ομόζυγη φορείς σε σύγκριση με AA /AG γονότυποι φορείς. Η AA /AG φορείς γονότυπο παρουσιάσει μια 1.5-φορές αύξηση στα επίπεδα έκφρασης του

TGFBR2

mRNA από GG ομόζυγη (2

-ΔΔCT = 1,5,

P

= 0,016) (Εικόνα 2α ). Σχετικά με

Smad7

έκφραση του mRNA, παρατηρήσαμε καμία διαφορά στα επίπεδα έκφρασης του mRNA μεταξύ του

TGFBR2-875GG

ομόζυγη και

TGFBR2-875AA /AG

φορείς του γονότυπου (

P

= 0,906) (Σχήμα 2β).

οι στατιστικές διαφορές στο

TGFBR2

και

Smad7

επίπεδα mRNA εκτιμήθηκαν με t-test του Student.

Συζήτηση

σε παγκόσμιο επίπεδο, το PC είναι η πιο διαδεδομένη κακοήθεια στους άνδρες. Ο καρκίνος του προστάτη είναι μια σύνθετη, πολυπαραγοντική νόσος και ετερογενείς. Μια καλύτερη κατανόηση των μηχανισμών που εμπλέκονται σε αυτή τη νόσο μπορεί να συμβάλει στην έγκαιρη διάγνωση και στη δημιουργία νέων θεραπευτικών στόχων για την αύξηση της επιβίωσης και τη βελτίωση της ποιότητας ζωής των ασθενών. Η εξέλιξη PC σε CR έχει συσχετισθεί με την κυτταρική έλλειψη ευαισθησίας σε σήματα αντι-πολλαπλασιαστική και επακόλουθη διαταραχή της ισορροπίας μεταξύ ρυθμού κυτταρικής ανάπτυξης και απόπτωσης. Η CRPC είναι πάντοτε θανατηφόρα κατάσταση, με χημειοθεραπεία είναι η μόνη θεραπευτική επιλογή μόνο με ανακουφιστική οφέλη [16,17]. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να κατανοήσουμε τους μηχανισμούς που εμπλέκονται στην εξέλιξη της ΚΟ.

Στην παρούσα μελέτη, περιγράφουν ότι η λειτουργική

TGFBR2

πολυμορφισμός επηρεάζει την ανάπτυξη των CRPC. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι οι μικρές αλλαγές στο

TGFBR2

επίπεδα έκφρασης, εξαιτίας της παρουσίας λειτουργικών SNPs, μπορεί να συμβάλει σε μια ανισορροπία στην TGFβ1 σηματοδότησης ενεργοποίηση μονοπατιού και έτσι σε υψηλότερο κίνδυνο για προγενέστερη ανάπτυξη της αντίστασης στην ADT.

TGFβ1 μονοπατιού σηματοδότησης μεσολαβεί ανάπτυξης, κυρίως αναστέλλοντας την εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου μέσω της G1-σύλληψη, την καταστολή

c-myc

, και την τόνωση της κινάσες αναστολείς κυκλίνη-εξαρτώμενη συμπεριλαμβανομένων p21

WAF1 και Ρ15

Ink4b, αλλά επίσης και με διέγερση απόπτωσης, μέσω της επαγωγής κινάσης DAP και άλλοι [18]. Αρκετές μελέτες έδειξαν ότι τα συστατικά TGFβ1 σηματοδότησης, συμπεριλαμβανομένου ΤΟΡβΚΙΙ, συχνά χάνονται σε ανθρώπινο καρκίνο [5]. Σε PC, ο TGFβ1 είναι συχνά επάνω ρυθμισμένη και η απώλεια της TGFβRI και RII έχει ανιχνευθεί. Is έχει υποτεθεί, ότι

TGFBR2

καταστολή είναι υπεύθυνη για το μεγαλύτερο μέρος του όγκου που σχετίζεται αντίσταση TGFβ1 παρατηρείται

in vivo

[19]. Μελέτες που πραγματοποιήθηκαν από Rojas και τους συνεργάτες έδειξε ότι

TGFBR2

επίπεδα έκφρασης μπορεί να ρυθμίσει την ένταση της ενεργοποίησης των Smad και μονοπάτια μη-Smad σηματοδότησης [10]. Η αδρανοποίηση του

TGFBR2

γονιδίου σε ινοβλάστες ποντικού έχει συσχετισθεί με ενδοεπιθηλιακή νεοπλασία του προστάτη και διηθητικό καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων της ανάπτυξης προστομάχου, και η αλλοίωση αυτή μπορεί επίσης να προάγει την ανάπτυξη και την εισβολή του συν-μεταμοσχευμένων κυττάρων καρκίνου του μαστού [20,21 ]. Επιπλέον, οι ασθενείς με ελαττωματική ΤΟΡβΚΙΙ ενέχουν σημαντικά περισσότερο πολυπόδων του παχέος εντέρου και προνεοπλασματικές αλλοιώσεις από ασθενείς με φυσιολογική ΤΟΡβΚΙΙ [22]. Lu και οι συνεργάτες του, αναφέρουν ότι η έκφραση της ΤΟΡβΚΙΙ μειώθηκε σημαντικά όταν παρατηρείται φυσιολογικό ιστό, ιστό δίπλα σε καρκίνο και γαστρικού καρκίνου [23].

Οι πρώτες πληροφορίες αναφέρουν ότι οι περισσότεροι PC γίνουν ανθεκτικά στην αντι-πολλαπλασιαστική επιδράσεις των TGFβ1 χωρίς καθορισμένες μεταλλάξεις ή διαγραφές σε μέλη της Smad οδού [24] σηματοδότησης. Πιο πρόσφατα, Rojas και συνεργάτες έδειξαν ότι το

TGFBR2

επίπεδα έκφρασης μπορεί να επηρεάσει την ικανότητα του να επάγει TGFβ1 ρ21 και απόπτωση στην ορθοκολικό καρκίνο κυτταρική γραμμή V-400 [10]. Επιπλέον, οι καρκίνοι που δεν αποδεικνύουν μεταλλάξεις σε καμία σηματοδότηση μέλη καταρράκτη TGFβ1, δείχνουν κάτω-ρυθμίζονται τα επίπεδα του

TGFBR2

, αποδεικνύοντας την ογκογόνο δυναμικό του TGFβ1 μονοπατιού [25].

Στο κελί PC3 γραμμή, η οποία είναι CR, η έκφραση AR μειώνει TGFβ1 /SMAD μεταγραφική δραστηριότητα και τις επιπτώσεις της ανάπτυξης των TGFβ1 (απουσία DHT), αποτρέποντας έτσι την αναστολή της ανάπτυξης και την απόπτωση. Σύμφωνα με Bruckheimer και συναδέλφους, τη θεραπεία των LNCaP κυττάρων, που υπερεκφράζουν ΤΟΡβΚΙΙ, με TGFβ1 παρουσία DHT, μπορεί να ενισχύσει την διακοπή του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης, μέσω της κασπάσης-1 ενεργοποίηση και τη στόχευση του BCL-2 [26] .

είναι προφανές ότι TGFβ1 σηματοδότηση απαιτεί μια λεπτή ισορροπία των αλληλεπιδράσεων εντός της κυτταρικής και καρκινικών μικροπεριβάλλον. Απορρύθμιση των

TGFBR2

επίπεδα έκφρασης και του ανασταλτικού

Smad7

θα μπορούσε να επηρεάσει τη φυσιολογική κυτταρική ομοιόσταση και επίσης να επηρεάσουν την εξέλιξη του καρκίνου. Έχουμε στο παρελθόν έδειξαν ότι οι αλλαγές στην καρκινική μικροπεριβάλλον μπορούν να διαμορφώσουν την εξέλιξη PC με αντίκτυπο σε απάντηση ADT [13,27].

Seijo και τους συναδέλφους που παρατηρείται, σε φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα, ότι η A-to-G μετάβαση στη θέση -875 ενισχύει τη δραστηριότητα του ΤΟΡβΚΙΙ, με υψηλότερη ενεργότητα λουσιφεράσης με την παρουσία του αλληλόμορφου Α [12]. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν επίσης ότι το

TGFBR2-875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός θα μπορούσε να επηρεάσει τα κυκλοφορούντα επίπεδα έκφρασης του

TGFBR2

σε ασθενείς PC. Παρατηρήσαμε ότι η T

GFBR2-875 & gt? AG /AA

ασθενείς φορείς παρουσιάζουν υψηλότερο επίπεδα έκφρασης των

TGFBR2

mRNA από GG ομόζυγη (2

-ΔΔCT = 1,5,

P

= 0,016) και ότι πάνω ρύθμιση μπορεί να είναι υπεύθυνη για το TGFβ1 μονοπάτι σηματοδότησης πάνω ρύθμιση, προκαλώντας τη διακοπή του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης, και, κατά συνέπεια, προκαλούν αυτούς τους ασθενείς να παρουσιάζουν υψηλότερο ελεύθερη εξέλιξης διαστήματος μετά την έναρξη της ADT ( AA /AG: 102.4

vs

GG:. 86,7 μήνες)

Στην πραγματικότητα, μπορούμε επίσης να παρατηρηθεί ότι

TGFBR2-875GG

ομόζυγο, που παρουσιάζουν χαμηλότερα κυκλοφορούντα επίπεδα του

TGFBR2

mRNA, παρουσιάζουν υψηλότερο κίνδυνο για την ανάπτυξη των όγκων με υψηλότερα σκορ Gleason (≥8) (

P

= 0,019). Στο ΦΕΚ ομόζυγο φορείς, τα χαμηλότερα επίπεδα έκφρασης του

TGFBR2

μπορεί να σχετίζεται με την κυτταρική διαταραχές στην οδό σηματοδότησης TGFβ1 και επάγει την απόκτηση των επιθετικών φαινοτύπων του καρκίνου

TGFBR2-875 & gt.? G /A

αποτέλεσε το αντικείμενο έρευνας σε πολλές μελέτες ασθενών-μαρτύρων που αφορούν διαφορετικούς τύπους καρκίνου, με αμφιλεγόμενα αποτελέσματα [28-32].

Πολλοί συγγραφείς, έχουν συνδέσει το

TGFBR2- 875 g & gt? α.

πολυμορφισμός με μειωμένο κίνδυνο για καρκίνο του στομάχου, οισοφαγικό καρκίνωμα πλακώδους κυττάρου, καρκίνο του μαστού, και μετάσταση λεμφαδένα, ειδικά στην ασιατική πληθυσμού του [28-33]

Ωστόσο, παρόμοια με άλλες μελέτες σε ευρωπαϊκούς πληθυσμούς, καμία συσχέτιση παρατηρήθηκε μεταξύ του

TGFBR2-875 /A

πολυμορφισμός και τον κίνδυνο PC. Επιπλέον, φαίνεται ότι αυτός ο πολυμορφισμός μπορεί να έχει καμία επίδραση στην εμφάνιση του PC, αλλά αντ ‘αυτού μπορούν να διαμορφώσουν την εξέλιξη της σε μια επιθετική φαινότυπο [34].

συγκριτικό πληθυσμό μας τη συχνότητα του

TGFBR2 -875G & gt? Ένα

πολυμορφισμός έτειναν να είναι παρόμοιες με εκείνες που παρατηρήθηκαν σε άλλες Καυκάσου υγιείς πληθυσμούς, όπως στη Φινλανδία και την Πολωνία. Ωστόσο, οι συχνότητες είναι επίσης παρόμοιες με εκείνες που παρατηρήθηκαν σε μελέτες που πραγματοποιήθηκαν σε Δημοκρατία της Κορέας και της Βόρειας της Κίνας [30,33,34]. Επιπλέον, παρατηρήσαμε ότι η συχνότητα του

TGFBR2-875GG

γονότυπο ήταν χαμηλότερο από εκείνο της ομάδας ελέγχου που χρησιμοποιήθηκε στη μελέτη πραγματοποιήθηκε από Seijo και τους συναδέλφους σε ένα αμερικανικό πληθυσμό και υψηλότερο από τα αποτελέσματα της αναφερόμενης η ομάδα ελέγχου που περιλαμβάνονται καντονέζικα υγιή άτομα από τον πληθυσμό στη νότια Κίνα [12,32].

η επιβίωση των ασθενών PC και ανάπτυξη CR σχετίζονται με διάφορες μεταβλητές που περιλαμβάνουν την επέκταση της αρχικής όγκου, τα επίπεδα PSA, ηλικία των ασθενών, τα οποία είναι χρήσιμα εργαλεία για θεραπευτικές αποφάσεις [14]. Ωστόσο, λόγω ορισμένων πρόβλεψης περιορισμούς, δεν αντανακλούν ακριβώς τη βιολογική συμπεριφορά του υπολογιστή, και πολλοί άνδρες να πεθάνουν από την επιθετική ασθένεια. Πρόσθετα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο ορισμός των προφίλ που περιέχει πληροφορίες σχετικές με τα χαρακτηριστικά του όγκου που σχετίζεται με γενετικές πληροφορίες έχουν μεγαλύτερη χωρητικότητα για να προβλέψει τον κίνδυνο για ανάπτυξη CR (c-ευρετηρίου από 0,683 έως 0,746). Ως εκ τούτου, υποθέτουμε ότι ο ορισμός της πρόβλεψης προφίλ που περιέχει το

TGFBR2-875G & gt? A

πληροφορίες πολυμορφισμός μπορεί να είναι χρήσιμη ως μοριακού δείκτη για την πρόβλεψη της κλινικής απόκρισης προς ADT σε ασθενείς με PC. Ωστόσο, οι μελλοντικές μελέτες θα πρέπει να αναπαράγουν αυτό το μοντέλο πρόβλεψης σε μια άλλη μελέτη πληθυσμού PC που υποβάλλονται σε ADT

Εν κατακλείδι, η παρούσα μελέτη δείχνει ότι η λειτουργική πολυμορφισμός

TGFBR2-875G & gt?. Ένα

δεν τροποποιεί το προδιάθεση για PC του πληθυσμού μας. Ωστόσο, αυτό το SNP έχει τη δυνατότητα να αλλάξει το

TGFBR2

επίπεδα έκφρασης του mRNA σε ασθενείς PC υποβληθεί στην ADT και επηρεάζουν την CRFI, με χαμηλότερο χρονικό διάστημα για να CR στο

TGFBR2-875GG

ομόζυγη σύγκριση με

TGFBR2-875AG /AA

ασθενείς φορείς. Στο μέλλον, η αναγνώριση αυτών των γενετικών προφίλ μπορεί να βοηθήσει να καθορίσει νέες αποτελεσματικές προγνωστικά μοντέλα για την παρακολούθηση των ασθενών που υποβάλλονται σε ADT και τον εντοπισμό υψηλότερο ομάδες κινδύνου για μια εξατομικευμένη στρατηγική χημειοπροφύλαξη και θεραπεία στόχο.