Αφηρημένο

Ιστορικό

Ηπατώματος up-ρυθμιζόμενη πρωτεΐνη (hurp) είναι ένα συστατικό του chromatin- εξαρτάται μονοπάτι για τη συναρμολόγηση ατράκτου. Εξετάσαμε την προγνωστική αξία πρόβλεψης των hurp στο ανθρώπινο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC).

Μέθοδοι

έκφραση hurp αξιολογήθηκε με ανοσοκυτταροχημεία της λεπτή βελόνα αναρρόφηση κυττάρων ηπατώματος σε 97 ασθενείς HCC με την Μπαρτσελόνα Κλινική του καρκίνου του ήπατος (BCLC) στάδιο Α Ακολούθως, οι ασθενείς αυτοί υποβλήθηκαν σε μερική ηπατεκτομή (n = 18) ή καυτηρίαση με ραδιοσυχνότητες (n = 79) και παρακολουθήθηκαν για 2 έως 35 μήνες. Οι κλινικοπαθολογοανατομικές παράμετροι υποβλήθηκαν για ανάλυση επιβίωσης.

Αποτελέσματα

έκφραση hurp στην αναρρόφηση κυττάρων HCC ανιχνεύθηκε στο 19,6% των ασθενών. ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier έδειξε ότι η θετική έκφραση hurp (

P

= 0,023), κυτταρολογική ταξινόμησης ≥3 (

P

= 0,008), AFP ≥35 ng /mL (

P

= 0,039), χολερυθρίνης ≥1.3 mg /dL (

P

= 0,010), AST ≥50 U /L (

P

= 0,003) και ALT ≥35 U /L (

P

= 0.005) ήταν όλοι συνδέονται με μια μικρότερη ελεύθερη νόσου επιβίωση. Μια σταδιακή πολυπαραγοντική Cox μοντέλο αναλογικών κινδύνων έδειξε ότι η θετική έκφραση hurp (HR, 2.334? 95% CI, 1,165 έως 4,679,

P

= 0,017), AST ≥50 U /L (HR, 3.697? 95% CI , 1,868 – 7,319,

σ

& lt? 0.001), κυτταρολογική βαθμού ≥3 (HR, 4.249? 95% CI, 2,061 έως 8,759,

P

& lt? 0.001) και ο αριθμός των όγκων & gt? 1 (HR, 2.633? 95% CI, 1,212 έως 5,722,

P

= 0.014) ήταν ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες για την επιβίωση ελεύθερη νόσου. Με το συνδυασμό των 4 ανεξάρτητους προγνωστικούς παράγοντες, οι ασθενείς με διαφορετικές βαθμολογίες κινδύνου (RS) έδειξε διακριτή ελεύθερη νόσου επιβίωση (RS≤1 εναντίον RS = 2,

P

= 0.001? RS = 2 εναντίον RS = 3, P & lt? 0.001). Αντίθετα, οι ασθενείς δεν μπορούν να διαχωριστούν σε διακριτές υποομάδες πρόγνωση με τη χρήση του συστήματος σταδιοποίησης AJCC /UICC ΤΝΜ.

Συμπέρασμα

ασθενών HCC με BCLC στάδιο Α μπορεί να χωριστεί σε τρεις ομάδες πρόγνωση, διακρίνονται από χρήση μιας βαθμολογίας κινδύνου που βασίζεται στην έκφραση hurp στην αναρρόφηση κυττάρων HCC, ALT, κυτταρολογική βαθμό και ο αριθμός των όγκων

Παράθεση:. Chang ML, Λιν SM, Yeh CT (2011) hurp έκφραση-Assisted Scores κινδύνου Προσδιορίστε πρόγνωση Διακρίνονται υποομάδες σε πρώιμα στάδια του καρκίνου του ήπατος. PLoS ONE 6 (10): e26323. doi: 10.1371 /journal.pone.0026323

Επιμέλεια: Bernard W. Futscher, Το Πανεπιστήμιο της Αριζόνα, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 22 Ιουλίου 2011? Αποδεκτές: 23 Σεπτεμβρίου, 2011? Δημοσιεύθηκε: 17, Οκτ 2011

Copyright: © 2011 Chang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από επιχορήγηση από Chang Gung Ιατρικό Ερευνητικό Πρόγραμμα (CMRP-370693). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Χρησιμοποιώντας μια προσέγγιση ενσωμάτωσης της βιοπληροφορικής για την ανάλυση ετικέτες ακολουθία εκφράζεται σε ανθρώπινο ήπαρ, ένα μυθιστόρημα του κυτταρικού κύκλου ρυθμίζονται γονίδιο που ονομάζεται ηπάτωμα up-ρυθμιζόμενη πρωτεΐνη (hurp) αναγνωρίστηκε πριν από 10 χρόνια [1]. Hurp, που εκφράζεται άφθονα σε ανθρώπινο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC, δηλαδή. Ηπάτωμα), είναι ένας μιτωτικός υπόστρωμα φωσφοπρωτεϊνη για Aurora-A [2]. Aurora-A είναι ένας κύκλος ρυθμιζόμενη κινάση σερίνης /θρεονίνης κύτταρο που εμφανίζει μέγιστα επίπεδα της έκφρασης κατά τη διάρκεια της G2 /M φάση [3], [4]. Το γεγονός ότι τα επίπεδα του hurp διακυμάνσεις κατά τη διάρκεια του κυτταρικού κύκλου και να φθάσει μια κορυφή στα G2 /M υποδηλώνει ότι παίζει ρόλο στη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου [5]. Περαιτέρω μελέτες έχουν δείξει ότι hurp είναι ένα συστατικό της χρωματίνης που εξαρτάται μονοπάτι για τη συναρμολόγηση ατράκτου. Έχει ένα κρίσιμο ρόλο στην συγκρότηση μικροσωληνίσκων χρωματίνη που προκαλείται από, σταθεροποιεί και δέσμες K-ίνες, και είναι απαραίτητη για την παραγωγή de novo μικροσωληνίσκων από χρωμοσώματα [6]. Επιπλέον, η δραστηριότητα του είναι αναγκαία για τη σωστή σύλληψη κινητοχώρου, αποτελεσματική congression χρωμόσωμα, και έγκαιρη εξέλιξη μιτωτικής. Ελαττώματα σε αυτές τις διαδικασίες μπορεί να προκαλέσει ακατάλληλη έναρξη ανάφαση και γενωμική αστάθεια [7], [8]. Εκτός από την μεταγραφική ρύθμιση, ενδοκυτταρική αφθονία hurp ρυθμίζεται επίσης από Cdk1 /κυκλίνη Β στο μετα-μεταφραστική επίπεδο [9], [10]. Ωστόσο, μπορεί να υπάρχουν κάποιες περιττές πορείες αντιστάθμιση για τη λειτουργία του hurp στον κυτταρικό κύκλο ως γονίδιο hurp (- /-) ποντικοί αναπτύσσουν κανονικά και είναι δυσδιάκριτες από νεογνά φυσικού τύπου τους. Η μόνη τεκμηριωμένη φαινότυπος για hurp (- /-) ποντικούς είναι ότι θηλυκά ποντίκια είναι σε θέση να σχηματίσουν θέσεις εμφύτευσης λόγω της ανικανότητας να υποστεί την αντίδραση φθαρτού [11]

Παρά την πειραματικά δεδομένα δείχνουν μια σύνδεση μεταξύ των κυττάρων. απορύθμιση του κύκλου και hurp Εκτροπής, κανένα πειστικό στοιχείο έχει καθιερωθεί μέχρι σήμερα υποδηλώνει μια άμεση ογκογόνο ρόλο της hurp στο HCC. Ωστόσο, αποδεικτικά στοιχεία που εμπλέκουν ένα ογκογόνο δυναμικό του hurp ήταν σποραδικά αναφερθεί. Θετική έκφραση hurp συνδέθηκε με την εμφάνιση και την επανεμφάνιση του μεταβατικού κυτταρικού καρκινώματος [12], [13]? ανάλυση γονιδιακής έκφρασης αποκάλυψε ότι hurp αντιπροσώπευε ένα δείκτη πρόγνωση ικανό να διακρίνει μεταξύ καλοήθων και κακοήθων όγκων του φλοιού των επινεφριδίων [14], [15]? και σε κυτταρικές σειρές 293Τ (American Type Culture Collection (ATCC) Manassas, VA, USA), η υπερέκφραση του hurp σε διαφοροποιημένα κύτταρα αυξημένη ανάπτυξη κυττάρου και μπλοκάρει την απόπτωση που κανονικά διεγείρεται από στέρηση ορού [16]. Από την άλλη πλευρά, το γονίδιο γονίδιο hurp είναι ικανό για την ενίσχυση της χημειοευαισθησίας των αναλόγων δεοξυκυτοσίνης σε κύτταρα ΝΙΗ3Τ3 [17], και η ιική πρωτεΐνη HBx ενεργοποιεί την έκφραση του γονίδιο hurp να αποτρέψει την απόπτωση κατά τη διάρκεια της εξέλιξης του καρκίνου και την εγκατάσταση του χημειοαντίσταση σε κύτταρα Hep3B [18] .

HCC αντιπροσωπεύει το 90% των νεοπλασμάτων πρωτογενούς ήπατος, αντιπροσωπεύει το πέμπτο πιο κοινός καρκίνος στον κόσμο, και είναι η τρίτη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο σχετίζονται παγκοσμίως [19], [20]. Μια ακριβής σταδιοποίηση της νόσου μπορεί να βοηθήσει τους κλινικούς γιατρούς να κατανοήσουν την πρόγνωση και να κάνουν τη σωστή επιλογή των θεραπευτικών μεθόδων προς όφελος των ασθενών. Επί του παρόντος, υπάρχουν διάφορα προγνωστικά συστήματα βαθμολόγησης που έχουν καθιερωθεί με τη χρήση διαφορετικών κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές [21]. Ωστόσο, ακόμη και μεταξύ ασθενών με την ίδια φάση του HCC και κατηγοριοποιούνται με το ίδιο σύστημα βαθμολόγησης, η μετα-θεραπευτική πρόγνωση είναι ακόμη ποικιλόμορφη. Αυτό οφείλεται πιθανότατα στο γεγονός ότι η HCC είναι ένα πολυ-αιτιολογικός ασθένεια με σύμπλεγμα υποκείμενη παθογόνοι μηχανισμοί που προκαλείται από μια ποικιλία παραγόντων κινδύνου. Πιθανώς, η συμπερίληψη της καλής μοριακών δεικτών σε ένα προγνωστικό σύστημα πρόβλεψης μπορεί να θεραπεύσει αυτές τις ανεπάρκειες και να βελτιώσει τις τρέχουσες μεθόδους στάσης [22]. Λόγω της διαθεσιμότητας των υπερηχογραφικό έλεγχο, καθώς και άλλα εξελιγμένες μεθόδους απεικόνισης, ένας αυξανόμενος αριθμός HCCs ανιχνεύονται σε πρώιμο στάδιο. Επιπλέον, για την ελαχιστοποίηση της εισβολής των διαδικασιών, παθολογική διάγνωση σταδιακά αντικαθίστανται από κυτταρολογία μέσω αναρρόφηση με λεπτή βελόνα. Επιπλέον, η χειρουργική εκτομή έχει αντικατασταθεί σε μεγάλο βαθμό από καυτηρίαση με ραδιοσυχνότητες (RFA), λόγω του συγκρίσιμου θεραπευτικής αποτελεσματικότητας μεταξύ των δύο θεραπειών. Κυτταρολογική χαρακτηριστικά των κυττάρων HCC, συμπεριλαμβανομένων ταξινόμησης διαφοροποίηση και ανοσοχρώση ειδικών αντιγόνων, λαμβάνονται εύκολα από αναρρόφηση με λεπτή βελόνα. Αυτές οι παράμετροι είναι επί του παρόντος δεν περιλαμβάνονται σε κανένα από τα συστήματα βαθμολόγησης, αλλά μπορούν να παρέχουν σημαντικές πληροφορίες για την αποτελεσματική πρόβλεψη πρόγνωση. Αν hurp πρώτη φορά που εξορύσσεται από τη βάση δεδομένων του ανθρώπινου HCC up-ρυθμιζόμενα γονίδια, το ρόλο του στην ανθρώπινη HCC

in vivo

έχει παραμείνει άπιαστο. Για να αντιμετωπιστεί αυτό, έχουμε δημιουργήσει μια μέθοδο χρώσης ανοσοϊστοχημεία για την ανίχνευση της έκφρασης hurp στην αναρρόφηση κυττάρων HCC από ασθενείς. Οι κλινικοπαθολογικοί χαρακτηριστικά, κυτταρολογική ταξινόμησης και της έκφρασης hurp στα κύτταρα HCC ήταν όλοι που λαμβάνονται υπόψη για τον υπολογισμό των προγνωστική προγνωστικούς παράγοντες σε αυτούς τους ασθενείς HCC.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς

Αυτή η ήταν ένα ενιαίο κέντρο, προοπτική προγνωστική μελέτη, που διεξήχθη μετά από έγκριση από το Διοικητικό συμβούλιο κριτική Θεσμικών σε Chang Gung Ιατρικό κέντρο. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες πριν από την ένταξη. Από το Νοέμβριο 2007 έως Δεκέμβριο του 2009, 97 διαδοχικοί ασθενείς (62 άνδρες και 35 γυναίκες), οι οποίοι διαγνώστηκαν να έχουν HCC με αναρρόφηση κυτταρολογίας και τουλάχιστον δύο δυναμικές απεικονιστικές εξετάσεις (δυναμική αξονική τομογραφία και αγγειογραφία), συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Αυτοί οι ασθενείς είτε πληρούσε τα κριτήρια για τη θεραπεία RFA [23] ή είχαν εντοπισμένο ΕΑΣ και ήταν κατάλληλα για χειρουργική αφαίρεση των όγκων. biochemistries αίματος για τις ακόλουθες παραμέτρους αναλύθηκαν: αμινοτρανσαμινάση ασπαρτικού (AST, & lt? 34 U /L), αλανίνη αμινοτρανσαμινάση (ALT, & lt? 36 U /L), ολική χολερυθρίνη (Bil, & lt? 1,3 mg /dL), αλφα- φετοπρωτεΐνη (AFP, & lt? 15 ng /mL), αλβουμίνη (03.05 έως 05.05 g /dL), χρόνος προθρομβίνης (10-13 δευτερόλεπτα), της κρεατινίνης (F: 0,44 – 1,03, M: 0,64 – 1,27 mg /dL). Επιφανειακά αντιγόνα του ιού της ηπατίτιδας Β (HBsAg) προσδιορίστηκαν με ένα εμπορικά διαθέσιμο κιτ ραδιοανοσοδοκιμασίας (AUSRIA-ΙΙ, HBsAg-RIA? Abbott Laboratories, North Chicago, IL). Αντισώματα κατά του ιού της ηπατίτιδας C (HCV Ab) προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα ένζυμο ανοσοδοκιμασία τρίτης γενιάς (Ax SYM HCV III, Abbott Laboratories, North Chicago, IL)

Επιπλέον, τα ακόλουθα δεδομένα κλινικοπαθολογοανατομικές καταγράφηκαν επίσης:. Φύλων , η ηλικία, η παρουσία της κίρρωσης του ήπατος, η χρήση αλκοόλ, η κυτταρολογική βαθμό Edmondson, τον αριθμό των όγκων, το μεγαλύτερο μέγεθος του όγκου, παρουσία ασκίτη μετά τη θεραπεία, την ημερομηνία της θεραπείας (RFA ή χειρουργική επέμβαση), την ημερομηνία της επανεμφάνισης του όγκου, και την ημερομηνία της τελευταίας παρακολούθησης ή HCC σχετίζονται με το θάνατο. Στο ιατρικό κέντρο μας, οι ασθενείς με κύρια θρόμβωση της πυλαίας φλέβας αποκλείστηκαν από χειρουργική εκτομή ή θεραπεία.

ήπατος φιλοδοξία να διαγνώσει HCC

Σύμφωνα με υπερηχογραφική καθοδήγηση, ένα 21- ή 22-gauge διαδερμική διηπατική χολαγγειόγραμμα βελόνα που χρησιμοποιείται για την αναρρόφηση κυτταρολογίας. Τα ξηραίνονται στον αέρα επιχρίσματα υποβλήθηκαν αμέσως βάφονται με τη μέθοδο Riu [24]. Η ταξινόμηση των HCC έγινε από Edmondson και Στάινερ ταξινόμησης [25]. Εάν το δείγμα ήταν ανεπαρκής ή δύσκολο για κυτταρολογική διάγνωση, μια άμεση βιοψία ήπατος για παθολογική εξέταση ανέλαβε [26].

hurp ανοσοκυτταροχημεία

Ποντίκι αντι-hurp αντισώματα ευγενώς από τον Καθ Chou CK (Yang-Ming University, Ταϊβάν). Η ειδικότητα και η ευαισθησία αυτών των αντισωμάτων έχουν χαρακτηριστεί σε προηγούμενες δημοσιεύσεις [1], [11], [16], [27]. Hurp-θετικών και αρνητικών ιστούς HCC (σύμφωνα με την ανάλυση κηλίδος Western) χρησιμοποιήθηκαν ως έλεγχοι για κάθε παρτίδα χρώση. Κανονική μακροφάγα, λεμφοκύτταρα, και κοκκιοκύτταρα στις κυτταρικές επιχρίσματα χρησιμοποιήθηκαν ως εσωτερική αρνητικοί έλεγχοι. κύτταρα ατμοσφαιρικός HCC μονιμοποιήθηκαν σε καθαρή μεθανόλη. Ηπατοκυττάρων έκφραση του γονίδιο hurp εκτιμήθηκε με τη μέθοδο ανοσοϋπεροξειδάσης αβιδίνης-βιοτίνης. Οι πλάκες επωάστηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών (PBS) που περιέχει 3% υπεροξείδιο υδρογόνου για 20 λεπτά και στη συνέχεια πλένονται δύο φορές (5 λεπτά το καθένα) σε PBS που περιείχε 0,025% Triton Χ-100 (Sigma Chemical Co., St. Louis, ΜΟ) . Οι πλάκες στη συνέχεια επωάστηκαν με 10% κανονικό ορό αλόγου για 30 λεπτά, ακολουθούμενη από επώαση με μία αραίωση 1:500 του αντι-hurp αντίσωμα ποντικού στους 37 ° C για 1 ώρα. Αφού πλύθηκε με ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο (PBS? 0.1 Μ, ρΗ 7.4), οι τομές στη συνέχεια επωάστηκαν με συζευγμένο με βιοτίνη ανοσοσφαιρινών αλόγου αντι-ποντικού (Jackson Immunoresearch Lab, West Grove, ΡΑ.) Σε αραίωση 1:400 για 40 λεπτά. Αφού ξεπλύθηκαν με PBS, οι τομές υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με αβιδίνη-βιοτίνη σύμπλοκο (Vectastain Elite ABC Kit, Vector Labs, CA) για 30 λεπτά και στη συνέχεια επωάστηκαν σε ένα διάλυμα διαμινοβενζιδίνης (DAB, Vector Labs, CA) για 1 λεπτό. Πυρηνική αντιχρωματισμός έγινε με αιματοξυλίνη.

όγκου Κατάλυση

Οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε θεραπεία με το εσωτερικό ψύχεται σύστημα αφαίρεσης RF (Valleylab ™, Boulder, Κολοράντο, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής). Όλες οι αφαιρέσεις RF πραγματοποιήθηκαν από τρεις γαστρεντερολόγοι με άφθονη εμπειρία αφαιρετική τεχνικές. Οι λεπτομέρειες της κατάλυσης του όγκου που περιγράφηκε προηγουμένως [28].

Η χειρουργική αφαίρεση του όγκου

Οι όγκοι ήταν εντελώς εκτομή, με ασφάλεια περιθώριο άνω του 1 εκ.

Συνέχεια -up μελέτες

για τους ασθενείς που έλαβαν RFA, αξονική τομογραφία ή μαγνητική τομογραφία πραγματοποιήθηκε 3 εβδομάδες αργότερα για να εκτιμηθεί κατά πόσον η εκτομή ήταν πλήρης [28], [29]. Μετά την πλήρη κατάλυση ή χειρουργική εκτομή, παρακολούθηση έγινε με υπερηχογράφημα, ακτινογραφία θώρακος, AFP, και η βιοχημεία του αίματος κάθε 1 έως 3 μήνες κατά το πρώτο έτος και κάθε 3 έως 6 μήνες μετά. Παθολογικά ευρήματα επιβεβαιώθηκαν με αξονική τομογραφία ή μαγνητική τομογραφία. Ενδοηπατική επανάληψης ιδρύθηκε από τη χρήση των κριτηρίων που περιγράφονται αλλού [30]. Ανάλογα με τη θέση των αλλοιώσεων, καθώς και την κατάσταση του ασθενούς, εξωηπατικών επανάληψη επιβεβαιώθηκε με βιοψία, εισρόφηση κυτταρολογίας, αξονική τομογραφία ή απεικόνιση μαγνητικού συντονισμού [30].

Στατιστικά

Ασθένεια -δωρεάν επιβίωση μετρήθηκε από την ημερομηνία της διάγνωσης μέχρι την ημερομηνία της υποτροπής, μετάστασης, θάνατο ή την τελευταία παρακολούθηση. Η μέθοδος Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση της πιθανότητας επιβίωσης, και η δοκιμή log-rank χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση των καμπυλών επιβίωσης μεταξύ των ομάδων. Για τον προσδιορισμό των αποκοπές ενός παράγοντα με παραμετρικά στοιχεία, πειραματική μονοπαραγοντική ανάλυση διεξήχθη για να αξιολογήσει τη σχέση μεταξύ του παράγοντα και την επιβίωση ελεύθερη νόσου χρησιμοποιώντας μια σειρά αυξανόμενων τιμών, όπως τις αποκοπές. Η μέθοδος αυτή χρησιμοποιήθηκε με επιτυχία για τον προσδιορισμό κλινικής και ιολογικής προγνωστικούς παράγοντες σε ασθενείς HCC [30]. Τα πειραματικά αποκοπές υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας τον ακόλουθο τύπο: η μικρότερη τιμή + n /15 × (τη μεγαλύτερη τιμή – η μικρότερη τιμή) (n = 1 έως 14). Ως εκ τούτου, ένας σειριακός τιμών αποκοπής παρήχθησαν για κάθε παραμετρική παράγοντας. Οι πειραματικές διχοτομική ομάδες έτσι διαχωρίζονται από ένα αποκοπής τουλάχιστον 1/15 ή το πολύ 14/15 της σειράς παράγοντας. Αυτός ο τρόπος ομαδοποίησης ήταν πιο εύκολα να χρησιμοποιηθούν για τη διατύπωση συστάσεων θεραπεία στο μέλλον. Η αποκοπής που οδηγεί στην μικρότερη τιμή P στη συνέχεια επιλέγονται για περαιτέρω ανάλυση αναλογικών κινδύνων Cox. Η αιτιολόγηση καθώς και ο περιορισμός της ελάχιστης προσέγγισης P-value σε κλινικές μελέτες είχαν επίσης συζητηθεί σε μία κριτική [31]. Σταδιακή Cox αναλογικά μοντέλα κινδύνου χρησιμοποιήθηκαν για την πρόβλεψη ανεξάρτητους προγνωστικούς παράγοντες που σχετίζονται με την επιβίωση ελεύθερη νόσου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως αναλογίες κινδύνου επιτοκίου (HR) με διάστημα εμπιστοσύνης 95% (CI). Σε αυτή τη μελέτη, η διόρθωση Bonferroni για πολλαπλές συγκρίσεις-δεν εφαρμόστηκε λόγω των δύο λόγους. Πρώτον, πολλοί από τους παράγοντες που περιλαμβάνονται ήταν γνωστά προγνωστικούς παράγοντες, αλλά δεν επιλέχθηκαν τυχαία άγνωστοι παράγοντες. Σκοπός μας ήταν να κατανοήσουμε πόσο σημαντική είναι η έκφραση HUPR ήταν σε σύγκριση με αυτούς τους γνωστούς παράγοντες. Δεύτερον, η τελική μας στόχος ήταν να δημιουργηθεί ένα σύστημα συνδυασμού βαθμολόγησης. Ως εκ τούτου, οι υποψήφιες παράγοντες που ενδεχομένως σημαντικές έπρεπε να συμπεριληφθούν.

Η στατιστική ανάλυση έγινε με τη χρήση του λογισμικού SPSS (έκδοση 18.0).

Αποτελέσματα

Κλινικές παράμετροι

τα αρχικά χαρακτηριστικά των 97 ασθενών που παρατίθενται στον πίνακα 1. Όλοι τους ανήκαν στην Βαρκελώνη Κλινική του καρκίνου του ήπατος (BCLC) στάδιο Α HBV και HCV λοίμωξη αντιπροσώπευε την πλειονότητα των περιπτώσεων μας. Σχεδόν το 90% των ασθενών ήταν κίρρωση. Οι περισσότεροι από τους ασθενείς είχαν μη φυσιολογική ηπατική λειτουργία με τις μέσες AST και ALT επίπεδα υψηλότερα από το κανονικό όριο. Ωστόσο, μόνο μια μειοψηφία των ασθενών είχαν σοβαρές επιπλοκές (π.χ., ασκίτης: 11,3%), ενώ τα μέσα επίπεδα της λευκωματίνης, της χολερυθρίνης και του χρόνου προθρομβίνης ήταν εντός των φυσιολογικών ορίων. 75,3% των ασθενών είχαν μοναχικό HCC και μόνο το 5,2% των ασθενών που είχαν μικροαγγειακή εισβολή. Το μέγεθος του όγκου κυμαινόταν από 1,3 να 5,0 cm σε διάμετρο. 81,4% των ασθενών που έλαβαν RFA, ενώ οι υπόλοιποι ασθενείς είχαν όγκους αφαιρεθεί χειρουργικά. Σύμφωνα με την 6

η έκδοση του AJCC /ΤΝΜ ταξινόμηση UICC, υπήρχαν 69 και 28 ασθενείς ανήκουν στο στάδιο Ι και ΙΙ αντίστοιχα.

Η

Η έκφραση της hurp σε HCCs

Μεταξύ συμπεριλαμβάνονται οι 97 ασθενείς, θετική έκφραση της hurp βρέθηκε στα ατμοσφαιρικό κύτταρα HCC 19 ασθενείς (19,6%). Οκτώ αντιπροσωπευτικές περιπτώσεις στις οποίες οι αναρρόφηση κύτταρα θετικώς βάφτηκαν με αντι-hurp παρουσιάζεται στο σχήμα 1. έκφραση γονίδιο hurp ανιχνεύθηκε σε πάνω από 80% των κυττάρων αναρροφάται σε 15 ασθενείς και έκφραση βρισκόταν στο κυτταρόπλασμα του HCC κυττάρων (σχήμα 1, κάτω πίνακα). Ωστόσο, στις υπόλοιπες 4 ασθενείς, & lt? 50% των κυττάρων HCC θετικά χρώση (Σχήμα 1, άνω πίνακας). Σε 2 από αυτούς τους 4 ασθενείς, μόνο μερικά διάσπαρτα hurp θετικά κύτταρα HCC βρέθηκαν.

hurp βάφτηκε σε καφέ χρώμα.

Η

Για να καταλάβετε αν η έκφραση hurp συνδέθηκε με οποιοδήποτε από οι κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους, έγινε ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης. Διαπιστώθηκε ότι η έκφραση hurp δεν συσχετίστηκε σημαντικά με κάθε κλινικοπαθολογοανατομικές παράμετρο (P & gt? 0,05 για όλες τις κλινικοπαθολογικών παράγοντες).

Σύνδεσης μεταξύ των κλινικών παραμέτρων και την ελεύθερη νόσου επιβίωση

Η συσχέτιση μεταξύ των κλινικών παραμέτρων και την ελεύθερη νόσου επιβίωση παρουσιάζεται στον πίνακα 2. Μεταξύ των παραμέτρων, θετική έκφραση hurp, κυτταρολογική ταξινόμηση ≥3, AFP ≥35 ng /mL, χολερυθρίνης ≥1.3 mg /dL, AST ≥50 U /L, και ALT ≥35 U /L βρέθηκαν να συνδέονται με μια μικρότερη ελεύθερη νόσου επιβίωση (Σχήμα 2).

n, ο αριθμός των ασθενών HCC σε κίνδυνο.

Η

Ανεξάρτητα πρόβλεψης της νόσου -δωρεάν επιβίωσης στη σταδιακή πολυπαραγοντική Cox αναλογικών κινδύνων μοντέλο

Χρησιμοποιώντας την σταδιακή πολυπαραγοντική Cox αναλογικό μοντέλο κινδύνου, 4 παράγοντες παρέμειναν ως ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες για την επιβίωση ελεύθερη νόσου: θετική έκφραση hurp στα κύτταρα HCC, AST ≥50 U /L, κυτταρολογική βαθμού ≥3, και ο αριθμός των όγκων & gt? 1. ανεξαρτησία τους, επίσης επαληθεύεται από διμεταβλητή δοκιμές συσχετισμού. Αξίζει να σημειωθεί ότι μετά την προσαρμογή για άλλους συγχυτικούς παράγοντες, ο αριθμός των όγκων (η οποία δεν είναι μια σημαντική παράμετρος για την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε μονοπαραγοντική ανάλυση) έγινε ένας σημαντικός παράγοντας στο μοντέλο αναλογικών κινδύνων Cox. Η αναλογία κινδύνου (HR), 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI), και οι τιμές Ρ των 4 ανεξάρτητοι προγνωστικοί δείκτες παρατίθενται στον πίνακα 3. Τέλος, θα εκχωρηθεί μια βαθμολογία κινδύνου για την κάθε μία από τις ασθενείς με τον υπολογισμό του αριθμού των ανεξάρτητων προγνωστικών που μεταφέρονται από κάθε ασθενής. Οι βαθμολογίες κίνδυνος κυμαίνεται από 0 έως 3, με όχι ασθενής που φέρει και τις 4 παράγοντες (σχήμα 3). Επειδή καμία σημαντική διαφορά βρέθηκε στα επιβιώσεις ελεύθερη νόσου μεταξύ των ασθενών με βαθμολογία κίνδυνο = 0 και εκείνοι με κίνδυνο βαθμολογία = 1 (Σχήμα 3Α,

σ

= 0,421), αυτές οι δύο ομάδες συγχωνεύτηκαν (Εικόνα 3Β) . Οι επιβιώσεις ελεύθερη νόσου ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των ασθενών με βαθμολογία κίνδυνο ≤1, οι ασθενείς με βαθμολογία κίνδυνο = 2, και οι ασθενείς με βαθμολογία κίνδυνο = 3 (Εικόνα 3Β). Σε αντίθεση, καμία διαφορά (

σ

= 0,91) παρατηρήθηκε μεταξύ των ελεύθερη υποτροπής επιβίωση του σταδίου Ι 69 TNM και 28 σταδίου ασθενείς II.

(Α) Σύγκριση του ασθένειες δωρεάν επιβιώσεις ανάμεσα σε ασθενείς με διάφορες βαθμολογίες κινδύνου κυμαίνονταν από 0 έως 3. (Β) Οι ασθενείς με βαθμολογία κίνδυνο = 0 και τα άτομα με βαθμολόγηση κινδύνου = 1 συγχωνεύθηκαν.

Η

Συζήτηση

σε γενικές γραμμές, η ηπατική εκτομή ήταν ανώτερη RFA στην ΕΑΣ επιλέξιμες για χειρουργική αφαίρεση, ιδιαίτερα για όγκους & gt? 3 εκατοστών [32]. Κατά τη θεραπεία ασθενών με μοναχικά HCC ≤3 cm, RFA έχει ένα συγκρίσιμο υποτροπής επιβίωση χωρίς τη χειρουργική εκτομή, ενώ είναι λιγότερο επεμβατική [33]. Ωστόσο, ηπατική εκτομή παραμένει η θεραπεία εκλογής για HCC σε noncirrhotic ασθενείς, λόγω της καλά διατηρημένη ηπατική λειτουργία στην υπολειμματική του ήπατος. Από την άλλη πλευρά, η RFA είναι ασφαλής και αποτελεσματική στη διαχείριση ασθενών HCC με κίρρωση του ήπατος, και η υψηλή επαναληψιμότητα της καθιστά ιδιαίτερα πολύτιμη για τον έλεγχο ενδοηπατική υποτροπές [34]. Σε δύο προοπτικές τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες μελέτες που συνέκριναν RFA με χειρουργική εκτομή, δεν βρέθηκε σημαντική διαφορά στη συνολική επιβίωση ή επιβίωσης χωρίς υποτροπή. Περαιτέρω, τα χαμηλότερα ποσοστά επιπλοκών ήταν αναμενόμενο σε ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με RFA [35], [36]. Ως εκ τούτου, η επιλογή της θεραπείας σε πολύ πρώιμο στάδιο HCC πρέπει να εξαρτάται από την καταλληλότητα του ασθενούς για τη χειρουργική επέμβαση, η κατάσταση απόδοσης, τη σοβαρότητα της κίρρωσης του ήπατος, και το εφικτό της RFA δίνεται η θέση του όγκου [37]. Στη σειρά μας, οι ασθενείς ακατάλληλο για ηπατεκτομή υποβλήθηκαν σε RFA. Συνεπής με προηγούμενες εκθέσεις, η ελεύθερη νόσου επιβίωση μεταξύ αυτών των δύο μεθόδων δεν ήταν σημαντικά διαφορετική (πίνακας 2). Έτσι, η προκατάληψη των διαφόρων μεθόδων θεραπείας θα πρέπει να είναι αμελητέα.

Η ετερογένεια των HCC έχει εμποδίσει σε μεγάλο βαθμό την αναζήτηση αποτελεσματικών μοριακών προγνωστικών προγνωστικούς παράγοντες. Σε μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων των περιπτώσεων 39 ιός της ηπατίτιδας C που σχετίζονται με HCC (24 πρώιμο στάδιο) και 77 μάρτυρες, ούτε des-γ-καρβοξυ προθρομβίνης ούτε AFP ήταν σε θέση να προβλέψει τον καλύτερο τρόπο την εμφάνιση του HCC [38]. Έτσι, ακόμη και για HCC που έχει ένα ομοιογενές υποκείμενη νόσο, μια αξιόπιστη βιοδείκτη έχει ακόμη βρεθεί. Σύμφωνα με την 6

η έκδοση του AJCC /ΤΝΜ ταξινόμηση UICC, 69 και 28 ασθενείς BCLC στάδιο Α της παρούσας μελέτης ήταν σταδίου Ι και ΙΙ, αντίστοιχα. Εντούτοις, οι ασθενείς δεν μπορούν να διαχωριστούν σε πρόγνωση διακρίνονται υποομάδες χρησιμοποιώντας AJCC UICC TNM σύστημα /στάσης. Στην παρούσα μελέτη, αποδείξαμε την ανεξάρτητη πρόβλεψη της ελεύθερης νόσου επιβίωση σε HCC από την έκφραση hurp στην αναρρόφηση κυττάρων HCC. Hurp θεωρείται δείκτης βλαστικών κυττάρων και δεν ανιχνεύεται στο πλήρως διαφοροποιημένων κυττάρων [39]. Παρόμοια με αυτή την παρατήρηση, ένας άλλος δείκτης αρχέγονων κυττάρων, επιθηλιακών μόριο κυτταρικής προσκόλλησης (EpCAM), βρέθηκε να εκφράζεται κυρίως στην τύπου επίπεδα HCC και EpCAM έκφραση σε συρροή πολυοζώδη προβλεφθεί η επανάληψη HCC [40]. Επιπλέον, η υπερέκφραση του Aurora Β, μια πρωτεΐνη χρωμοσωμική επιβατών που εμπλέκονται στο χρωμόσωμα διαχωρισμού, τον άξονα-σημείο ελέγχου, και κυτοκίνησης [41], προέβλεψε ανεξάρτητα εισβολή όγκου και κακή πρόγνωση του HCC [42]. Η λειτουργική ομοιότητα μεταξύ hurp και Aurora Β υποστηρίζει περαιτέρω την προγνωστική ρόλο της hurp στην ελεύθερη νόσου επιβίωση του HCC.

Τα τελευταία χρόνια, καρκινικών κυττάρων σπορά κατά μήκος της βελόνας οδού έχει βρεθεί να είναι ένας κίνδυνος που σχετίζεται με ηπατική βιοψία [43]. Πρόστιμο κυτταρολογία βελόνης έχει αποδειχθεί ότι είναι μια ασφαλής και ακριβής εναλλακτική λύση για βιοψία ήπατος για τον εντοπισμό τη συντριπτική πλειονότητα των HCC [44]. Ως εκ τούτου, hurp χρώση με αναρρόφηση κυττάρων HCC μπορεί ενδεχομένως να εξελιχθεί σε μια βολική μέθοδος για την πρόβλεψη της ελεύθερης νόσου επιβίωση του HCC. Ωστόσο, υπάρχουν ορισμένοι περιορισμοί που σχετίζονται με αυτήν την τεχνική. Ενώ hurp ονομάζεται για το γονίδιο της είναι ρυθμισμένα προς τα πάνω σε ανθρώπινα HCC, μόνο το 19,5% (19/97) των HCC μας ατμοσφαιρικός δείγματα έδειξαν θετική έκφραση hurp. Είναι πιθανό ότι τα υπόλοιπα δείγματα, τα επίπεδα έκφρασης του hurp ήταν πολύ χαμηλά για ανίχνευση ανοσοϊστοχημεία. Πιθανώς στα δείγματα αυτά, η πλειοψηφία των κυττάρων HCC ήταν σε μη πολλαπλασιαζόμενα μελών out-of-cycle ». Αυτό προκαλείται οι όγκοι να αναπτύσσονται αργά, πράγμα που οδήγησε σε μια πιο ελεύθερη νόσου επιβίωση. Εναλλακτικά, δεδομένης της υπόθεση ότι hurp θα μπορούσε να είναι ένας δείκτης βλαστικών κυττάρων, η χαμηλή επικράτηση του hurp-θετικών κυττάρων σε αυτή τη μελέτη μπορεί να αντανακλά το γεγονός ότι οι περισσότεροι από HCCs μας προέκυψαν από μετάλλαξη που σχετίζονται με φλεγμονή που προκαλείται από ιική προσβολές προς ηπατοκύτταρα (HBV ή λοίμωξη HCV σε σειρά μας ήταν πάνω από 90%), ενώ ΕΑΣ που αναπτύσσονται από το

de novo

μετάλλαξη των αφελείς ηπατικών βλαστικά κύτταρα αντιπροσώπευαν μόνο μια μειοψηφία των περιπτώσεων. Στην παρούσα μελέτη, δείξαμε ότι η υψηλή AST, ALT, και τα επίπεδα της χολερυθρίνης συσχετίζονται με μια μικρότερη ελεύθερη νόσου επιβίωση. Αυτό υποδηλώνει ότι σχετίζονται με τον ιό ηπατική νεκρωτική φλεγμονή παίζει σημαντικό ρόλο στην HCC υποτροπής. Προς το παρόν, δεν είναι σαφές αν υπάρχει ένα μονοπάτι για τα κύτταρα HCC που αναπτύσσονται από τον ιό που σχετίζονται βλάβη ηπατοκυττάρων να εξελιχθεί σε HCCs με την υπογραφή του καρκίνου βλαστικών κυττάρων. Τέλος, όπως αναφέρθηκε στην εισαγωγή, έχουν προταθεί περιττή οδούς που μπορεί να αντισταθμίσει την λειτουργία hurp. Ως εκ τούτου, για HCCs που στερούνται την έκφραση γονίδιο hurp, εναλλακτικές οδοί ογκογόνο γονίδιο hurp άσχετη με υπερ-έκφραση είναι εξαιρετικά πιθανή.

Μια άλλη αινιγματική πτυχή της παρούσας δεδομένων είναι ότι σχεδόν όλοι έκφραση γονίδιο hurp εντοπίζεται στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων HCC . Importin-α1 φάνηκε να είναι ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της πρώιμης υποτροπής μετά HCC εκτομή [45]. Hurp είναι ένας από τους παράγοντες συναρμολόγηση ατράκτου των οποίων η δραστηριότητα ρυθμίζεται από importins, και η κατανομή σε σταθερή κατάσταση hurp καθορίζεται από τη συνεχή μετακίνηση των hurp μεταξύ του κυτταροπλάσματος και του πυρήνα μέσω importin [46]. Οι περισσότερες μελέτες έχουν εστιάσει hurp σχετικά με το ρόλο συναρμολόγηση ατράκτου του στον πυρήνα κατά τη διάρκεια της μίτωσης, ενώ λίγα είναι γνωστά σχετικά με τη λειτουργία του στο κυτταρόπλασμα κατά τη διάρκεια της ενδιάμεσης φάσης. Τόσο hurp και Importin-α1 είναι υπερ-εκφράζεται σε HCCs με κακή πρόγνωση, το οποίο προτείνει σημαντικούς ρόλους για αυτά τα μόρια στην ογκογένεση. Η παρεκκλίνουσα κυτταροπλασματική υπερ-έκφραση της hurp στο HCC θα μπορούσε να εμπλέξει μια ανεξερεύνητη λειτουργία στη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου που απαιτεί περαιτέρω διευκρίνιση.

Εκτός από hurp θετικότητα, AST ≥50 U /L, κυτταρολογική βαθμού ≥3, και ο αριθμός των όγκων & gt? 1 βρέθηκαν επίσης να είναι ανεξάρτητοι προγνωστικοί δείκτες για την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε ασθενείς μας HCC. Κυτταρολογική ταξινόμησης αντιπροσωπεύει τη διαφοροποίηση των κυττάρων HCC και ο αριθμός των όγκων μπορεί να υποδεικνύει μια ομοιόμορφη ή πολυ-εστιακή προέλευση του όγκου ή εναλλακτικά, τη σταδιοποίηση του ΗΚΚ. Αυτοί οι παράγοντες είναι όλοι υποδηλώνουν κακή πρόγνωση και έχουν τεκμηριωθεί από πολλές μελέτες [47], [48]. AST, ALT, χολερυθρίνη και επίπεδα AFP, που εντοπίστηκαν να είναι σημαντικοί προγνωστικοί πρόγνωση σε μονοπαραγοντική ανάλυση, η οποία αντικατοπτρίζεται είτε το βαθμό της φλεγμονής (AST, ALT και χολερυθρίνης) ή το βάρος του όγκου (AFP). AFP αντικατοπτρίζεται επίσης το βαθμό της ηπατικής φλεγμονής σε ορισμένες περιπτώσεις [49]. Στη βιβλιογραφία, αρκετές γραμμές των στοιχείων δείχνουν ότι η ηπατική φλεγμονή είναι ένας προγνωστικός παράγοντας πρόβλεψης για HCC. Η προεγχειρητική επίπεδο CRP δείχθηκε να συνδέεται με την επιθετικότητα της πρώιμης υποτροπιάζουσας HCC σε μια μελέτη 124 ασθενών που υποβλήθηκαν σε ηπατεκτομή [50]. Επιπλέον, μελέτες σχετικά με HCV που σχετίζονται με HCC έχουν δείξει ότι HCC αναπτύσσεται σχεδόν πάντα σε ιστολογικά μη φυσιολογική ηπατική και ότι η απλή ύπαρξη της χρόνιας ηπατικής νόσου αποτελεί δυνητικό κίνδυνο για την ανάπτυξη ηπατοκυτταρικού καρκινώματος [51]. Πράγματι, χρόνια ηπατική νεκρωτική φλεγμονή με επακόλουθη γενιά των αντιδραστικών ειδών οξυγόνου μπορεί να επάγει χρωμοσωμικές μεταλλάξεις και τελικά κακοήθη μετασχηματισμό των πολλαπλασιαζόμενων ηπατοκυττάρων. Ομοίως, η κακή λειτουργία του ήπατος αποθεματικό, που προτείνεται από υπερχολερυθριναιμία, διαπιστώθηκε να σχετίζεται σημαντικά με HCC εμφάνιση σε άλλες μελέτες [52]. Μια μελέτη που περιελάμβανε 150 ασθενείς με ένα και μόνο HCC μικρότερα από 5 εκατοστά σε διάμετρο αντιμετωπίζονται με ακτινοθεραπεία σωματιδίων διαπίστωσε ότι ταξινόμηση κατά Child-Pugh ήταν ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου για τοπική υποτροπή [53]. Τέλος, σε μια αναδρομική μελέτη αποτελείται από 413 ασθενείς με κίρρωση HCC λαμβάνουν RFA και 648 ασθενείς με κίρρωση HCC λαμβάνουν χειρουργική εκτομή, AFP στον ορό βρέθηκε να είναι η μόνη σημαντική προγνωστικός παράγοντας για όλες τις αναλύσεις επιβίωσης [54]. Με το κτένισμα των 4 ανεξάρτητοι προγνωστικοί, το οποίο είχε άμεσα ή έμμεσα σχετίζονται με την πρόγνωση του HCC στη βιβλιογραφία, οι βαθμολογίες κίνδυνος των ασθενών με HCC διαχωρίστηκαν οι ασθενείς σε τρεις διακριτές ομάδες με σημαντικά διαφορετικές προγνώσεις μετά τη θεραπεία. Ως εκ τούτου, σε ασθενείς με ΒΛΚΣ στάδιο Α, σκορ κινδύνου που ενσωματώνουν χρώση hurp είναι σε θέση να παρέχουν περαιτέρω διακρίσεις μεταξύ των διαφόρων μετα-θεραπευτικές ομάδες πρόγνωση. Το μικρό μέγεθος του δείγματος της παρούσας μελέτης, ωστόσο, περιορισμένη κλινική αξία της. Για να επικυρώσετε την προγνωστική σημασία της έκφρασης hurp σε μια μεγαλύτερη ομάδα HCC, μια πολυκεντρική μελέτη θα ήταν εξαιρετικά κατατοπιστική και θα πρέπει να διεξαχθούν στο μέλλον.

Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη σχετικά με την κλινική εφαρμογή της έκφρασης hurp στην πρόβλεψη της ελεύθερης νόσου επιβίωσης των ασθενών HCC. Μια νέα βαθμολόγηση κινδύνου, αποτελείται από 4 ανεξάρτητους προγνωστικούς παράγοντες, συμπεριλαμβανομένων hurp θετικότητα σε κύτταρα HCC, AST ≥50 U /L, κυτταρολογική βαθμού ≥3, και ο αριθμός των όγκων & gt? 1, χωρίζονται ασθενείς HCC με BCLC στάδιο Α σε τρεις ομάδες πρόγνωση-διακριτές. Τα ευρήματα αυτά μπορεί να είναι πολύτιμη για την εκτίμηση των επιπτώσεων των θεραπευτικών παρεμβάσεων για ασθενείς HCC με BCLC στάδιο Α, η οποία είναι η πιο κοινή σκηνή ανακάλυψε λόγω της έγκαιρης ανίχνευσης του HCC μέσω ομαλή έρευνα όγκου. Τέλος, εξατομικευμένη θεραπεία και παρακολούθηση για ασθενείς με πρώιμο στάδιο HCC μπορεί να συνεχιστεί στο εγγύς μέλλον.