Αφηρημένο

Εισαγωγή

Ένας συνδυασμός καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη χρησιμοποιείται συχνά ως πρώτης γραμμής θεραπεία για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών. Ως εκ τούτου, η χρήση βιοδεικτών απεικόνισης λίγο μετά την έναρξη της θεραπείας για να προσδιοριστεί η ευαισθησία της θεραπείας θα ήταν πολύτιμη για τον εντοπισμό ανταποκρίθηκαν από μη-ανταποκρίθηκαν. Σε αυτή τη μελέτη, περιγράφουμε την μη επεμβατική PET απεικόνισης της πρόσληψης γλυκόζης και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων με τη χρήση 2-δεοξυ-2 – [

18F] φθορο-D-γλυκόζης (FDG) και 3′-δεοξυ-3 ‘- [

18F] φθοροθυμιδίνη (FLT) για την έγκαιρη αξιολόγηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία σε προ-κλινικό μοντέλο ποντικού ανθρώπινου καρκίνου των ωοθηκών που έλαβαν θεραπεία με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη.

Μέθοδοι

σε

vivo

πρόσληψη FLT και FDG σε ανθρώπινα ξενομοσχεύματα καρκίνου των ωοθηκών σε ποντίκια (Α2780) προσδιορίστηκε πριν από τη θεραπεία με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη (ΚΓΠ) και repeatedday 1, 4 και 8 μετά την έναρξη της θεραπείας. πρόσληψη ιχνηλάτη μετρήθηκε ποσοτικά με τη χρήση μικρών ζώων PET /CT. πρόσληψη ιχνηλάτη συγκρίθηκε με γονιδιακή έκφραση των Ki67, ΤΚ1, GLUT1, ΚΘ1 και ΚΘ2.

Αποτελέσματα

Οι όγκοι στην ομάδα της ΚΓΠ σημαντικά μικρότερη από ό, τι στην ομάδα ελέγχου (p = 0.03) για ημέρα 8. την ημέρα αναλογία 4 FDG SUVmax ήταν σημαντικά χαμηλότερη στην ομάδα CaP σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (105 ± 4% έναντι 138 ± 9%? p = 0,002) και την ημέρα 8 ήταν χαμηλότερη σε σύγκριση με την τάπα η αναλογία FDG SUVmax με την ομάδα ελέγχου (125 ± 13% έναντι 167 ± 13%? p = 0.05). Την ημέρα 1 η πρόσληψη του λόγου FLT SUVmax ήταν 89 ± 9% στην ομάδα της ΚΓΠ και 109 ± 6% στην ομάδα ελέγχου? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (p = 0.08).

Συμπεράσματα

Τα στοιχεία μας δείχνουν ότι τόσο η FDG και FLT ΡΕΤ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εκτίμηση των επιπτώσεων κατά του όγκου του συνδυασμού καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών. FLT παρέχει μια πρώιμη και παροδική σήματος και FDG μια νεότερη και πιο παρατεταμένη ανταπόκριση. Αυτό υπογραμμίζει τη σημασία της βέλτιστης χρονισμού μεταξύ θεραπείας και FLT ή απεικόνισης FDG από την ανταπόκριση στη θεραπεία μπορεί διαφορετικά να αγνοηθεί

Παράθεση:. Munk Jensen Μ, Erichsen KD, Björkling F, Madsen J, Jensen ΡΒ, Sehested M, et al. (2013) Imaging της θεραπείας Ανταπόκριση στο συνδυασμό καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη σε Ανθρώπινο Καρκίνο των ωοθηκών ξενομοσχεύματος όγκων σε ποντίκια Χρησιμοποιώντας FDG και FLT PET. PLoS ONE 8 (12): e85126. doi: 10.1371 /journal.pone.0085126

Επιμέλεια: Gayle Ε Woloschak, Northwestern University Feinberg School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 24 Ιούν, 2013? Αποδεκτές: 21 Νοεμ 2013? Δημοσιεύθηκε: 26, Δεκ του 2013

Copyright: © 2013 Munk Jensen et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Χρηματοδότηση ήρθε από το Εθνικό Ίδρυμα Προηγμένης Τεχνολογίας, The John και Birthe Ίδρυμα Meyer, δανική Ιατρικό Συμβούλιο Έρευνας, Ίδρυμα Rigshospitalets Ερευνών, Svend Ίδρυμα Andersen, AP Møller Ιδρύματος, Novo Nordisk Foundation, Lundbeck Ιδρύματος και της Δανίας Cancer Society. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου.

Αντικρουόμενα συμφέροντα: Οι ακόλουθες συν-συγγραφείς έχουν σύγκρουση συμφερόντων: Peter Jensen Μπουλ: Ιδιοκτησίας και Απασχόληση στην TopoTarget A /S. Maxwell Sehested: Ιδιοκτησίας και Απασχόληση στην TopoTarget A /S. Fredrik Björkling: Απασχόληση σε TopoTarget A /S. Kamille Dumong Erichsen: Απασχόληση σε TopoTarget A /S. Όλοι οι άλλοι συγγραφείς δεν έχουν καμία σύγκρουση συμφερόντων. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η δεύτερη πιο συχνή γυναικολογική κακοήθεια και η κύρια αιτία του καρκίνου γυναικολογικών σχετικών θανάτου στις γυναίκες στην Ευρώπη και τις Ηνωμένες Πολιτείες [1,2]. Ο συνδυασμός των καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη χρησιμοποιείται συνήθως ως χημειοθεραπεία πρώτης γραμμής για τη θεραπεία του καρκίνου [3] των ωοθηκών. Το συνολικό ποσοστό ανταπόκρισης των καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη θεραπείας είναι 60-80% και παρόλο που αυτό το ποσοστό απόκρισης είναι σχετικά υψηλό σε σύγκριση με την καθιερωμένη θεραπεία άλλων κακοηθειών πολλές ασθενείς δεν ανταποκρίνονται στη θεραπεία [4,5]. Στην ανταπόκριση πληθυσμό ασθενών πολλοί ασθενείς υποτροπιάζουν και, ανάλογα με το χρόνο από την πρώτη θεραπεία μέχρι υποτροπή, μπορεί να κινηθεί ένα δεύτερο καθεστώς θεραπείας με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία. Το ποσοστό ανταπόκρισης για τη θεραπεία ασθενών με υποτροπή είναι 20-30%, εάν το ελεύθερο διάστημα πλατίνας είναι 6-12 μήνες και & gt? 60% για την πλατίνα χωρίς διαστήματα 12-18 μήνες [5].

Η αξιολόγηση της θεραπευτικής ανταπόκρισης συχνά βάσει των Κριτηρίων Αξιολόγησης της Ανταπόκρισης σε συμπαγείς όγκους (RECIST) κατευθυντήριες γραμμές όπου η αξιολόγηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία βασίζεται σε μορφολογικά απεικόνιση με αξονική τομογραφία (CT) ή μαγνητική τομογραφία (MRI) [6] . Ανατομική απεικόνιση με αξονική και μαγνητική τομογραφία δεν παρέχει πληροφορίες σχετικά με τις αρχές βιολογικές διεργασίες που προκαλούνται από τη θεραπεία και την μείωση του μεγέθους των όγκων είναι συχνά το πρώτο ανιχνεύσιμο αργότερα κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Ωστόσο, η έγκαιρη βιολογικές αλλαγές μπορεί να είναι προγνωστική για την κλινική υποχώρηση πριν επίδραση της θεραπείας μπορεί να αξιολογηθεί με ανατομική απεικόνιση. Ως εκ τούτου, ο προσδιορισμός της ευαισθησίας του όγκου νωρίς κατά τη διάρκεια της θεραπείας και από την εν λόγω αναγνώριση των διασωστών και δεν ανταποκρίθηκαν θα μπορούσε δυνητικά να επιτρέψει την εξατομικευμένη θεραπευτική προσέγγιση ως θεραπεία θα μπορούσε να τροποποιηθεί στα μη ανταπόκριση των ασθενών.

τομογραφία εκπομπής ποζιτρονίων (PET ) απεικόνισης είναι μια μη επεμβατική, ολόκληρη η τεχνική σώματος όπου είναι δυνατόν να μετρηθεί φυσιολογικές διεργασίες

in vivo

παρακάμπτοντας έτσι την διαδικασία απόκτησης σειριακό βιοψίες. Ταυτοποίηση ενός ιχνηλάτη ΡΕΤ που λίγο μετά την έναρξη της θεραπείας κατά του καρκίνου δίνει πληροφορίες που μπορεί να προβλέψει την έκβαση της θεραπείας είναι, συνεπώς, σημαντικό ενδιαφέρον. Η σύγκριση της πρόσληψης του ιχνηθέτη στους όγκους πριν και κατά την έναρξη της θεραπείας χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση των βιολογικών διεργασιών και αποκρίσεις που προκαλούνται από την αγωγή. Το ανάλογο της γλυκόζης 2-δεοξυ-2 – [

18F] φθορο-D-γλυκόζης (FDG) και το ανάλογο της θυμιδίνης 3′-δεσοξυ-3 ‘- [

18F] φθοροθυμιδίνη (FLT) είναι δύο από τις πιο ευρέως μελετηθεί ανιχνευτές PET που χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της θεραπείας.

Απεικόνιση του μεταβολισμού με το ανάλογο της γλυκόζης FDG χρησιμοποιείται για τη διάγνωση και σταδιοποίηση του καρκίνου και έχει υψηλή διαγνωστική ακρίβεια για διάφορους τύπους όγκων. FDG διασχίζει την κυτταρική μεμβράνη με μεταφορέων γλυκόζης σύμφωνα με την οποία φωσφορυλιώνεται από ενδοκυτταρική εξοκινάσες (HK) που έχει σαν αποτέλεσμα την ενδοκυτταρική παγίδευσης παρά τη μη περαιτέρω μεταβολισμό του φωσφορυλιωμένου FDG. μεταφορέων γλυκόζης και εξοκινάσες είναι ρυθμισμένα προς τα πάνω σε διάφορες μορφές καρκίνου που οδηγούν σε υψηλή πρόσληψη FDG στον όγκο σε σύγκριση με τα φυσιολογικά κύτταρα [7,8].

Το ανάλογο θυμιδίνης FLT χρησιμοποιείται για την απεικόνιση του κυτταρικού πολλαπλασιασμού με ΡΕΤ . FLT ενσωματώνεται σε κύτταρα μέσω της οδού της πυριμιδίνης διάσωσης παραλληλίζεται με θυμιδίνη και μετά την πρόσληψη σε κύτταρα FLT φωσφορυλιώνεται από κινάση θυμιδίνης 1 (ΤΚ1). Η φωσφορυλίωση οδηγεί σε ενδοκυτταρική παγίδευση ακόμη και αν η φωσφορυλιωμένη FLT δεν ενσωματώνεται στο DNA [9]. Η δραστικότητα του ΤΚ1 είναι συνδεδεμένη με τον κυτταρικό κύκλο και αυτό εκφράζεται κυρίως κατά τη διάρκεια της φάσης S [10,11]. πρόσληψη FLT συσχετίζεται θετικά με την ανάπτυξη των κυττάρων και η δραστικότητα ΤΚ1 [11-13] και σε αρκετές μελέτες θετική συσχέτιση μεταξύ της πρόσληψης FLT και πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων μετρήθηκε με Κί67 ανοσοϊστοχημεία (IHC) βρίσκεται [14-24].

FDG και FLT PET έχουν τόσο προ-κλινικές και κλινικές μελέτες έχουν αξιολογηθεί ως βιοδείκτες απεικόνισης που μπορεί να προβλέψει και να αξιολογήσει τις απαντήσεις σε διάφορα είδη χημειοθεραπευτικών παραγόντων σε διάφορους τύπους όγκων [14,19,20,22,25 -36]. Τα αποτελέσματα είναι μεταβλητά, σε ορισμένες μελέτες πρώιμες αλλαγές στην πρόσληψη ιχνηλάτη προβλέψουμε αργότερα υποχώρηση του όγκου και σε άλλες μελέτες δεν γίνεται καμία αλλαγή στην πρόσληψη ιχνηλάτη παρατηρήθηκε παρά την θεραπεία είναι αποτελεσματική. Οι μηχανισμοί πίσω από αλλαγές στην πρόσληψη ιχνηλάτη μετά την έναρξη της θεραπείας φαίνεται να είναι περίπλοκη και εξαρτάται τόσο από τον τύπο του όγκου και ο τρόπος δράσης του φαρμάκου κατά του καρκίνου. Επιπλέον, τα καρκινικά βασικής γραμμής ιχνηθέτη επιρροές απληστία έστω FDG ή FLT μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την πρόβλεψη της ανταπόκρισης στη θεραπεία κατά του καρκίνου, π.χ. σε όγκους με χαμηλή βασική γραμμή ιχνηθέτη απληστίας, μείωση στην πρόσληψη ιχνηλάτη είναι δύσκολο να προσδιοριστεί.

Η καρβοπλατίνη ανήκει στην ομάδα της πλατίνας που βασίζεται αντικαρκινικών παραγόντων που προκαλούν ενδο-κλώνου διασταυρωμένων συνδέσεων στο DNA που επηρεάζει την επιδιόρθωση του DNA και αντιγραφή. Η καρβοπλατίνη προκαλεί διακοπή του κυτταρικού κύκλου στην φάση G2 και επάγει την απόπτωση, εάν η βλάβη του DNA δεν είναι σωστά επισκευαστεί [37]. Η πακλιταξέλη συνδέεται και σταθεροποιεί τα μικροσωληνάρια που προκαλεί διακοπή του κυτταρικού κύκλου στην G2 /M φάση και επαγωγή αποπτωτικού κυτταρικού θανάτου [38]

καρκίνος των ωοθηκών είναι συχνά θετικοί για FDG ΡΕΤ.? Ωστόσο, λίγες μελέτες έχουν μελετήσει πρόβλεψη της έκβασης του καρκίνου των ωοθηκών των ασθενών μετά την έναρξη της θεραπείας κατά του καρκίνου με FDG ΡΕΤ [39]. Σε μια μελέτη σε αλλαγές πρόσληψη FDG-PET ήταν προγνωστική της έκβασης του ασθενούς μετά τον πρώτο κύκλο της νεο-επικουρική χημειοθεραπεία που αποτελείται από τη συνδυαστική θεραπεία καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη [40]. FDG PET ήταν πιο ακριβή από ό, τι είτε κλινικά ή ιστοπαθολογική κριτήρια ανταπόκρισης ή το δείκτη όγκου του καρκίνου του αντιγόνου 125 (CA125) να προβλέψει την έκβαση της θεραπείας. Σε μια άλλη μελέτη, για την επίδραση της νεο-επικουρική θεραπεία με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών, διαπιστώθηκε ότι σε ασθενείς στους οποίους η πρόσληψη όγκου του FDG ήταν ίση με την κανονική πρόσληψη περιβάλλοντα ιστό μετά από 3 κύκλους χημειοθεραπείας αυτές ήταν πιο πιθανό να επωφεληθούν από 3 επιπλέον κύκλους χημειοθεραπείας από ασθενείς χωρίς ομαλοποίηση της πρόσληψης FDG [41].

πρόσληψη

Baseline FLT έχει αναλυθεί σε μια μικρή ομάδα ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών, όπου η πρόσληψη FLT ήταν υψηλότερη σε κακοήθη σύγκριση με φυσιολογικό ιστό των ωοθηκών [42]. Σε μια προ-κλινική μελέτη πρόσληψη FLT μειώθηκε μετά από αποτελεσματική αναστολή mTOR με το everolimus σε σισπλατίνη ανθεκτικό ωοθηκών μοντέλο ποντικού όγκου [25]. Σε cisplatin ευαίσθητα ξενομοσχεύματα καρκίνου των ωοθηκών και FLT και πρόσληψη FDG μειώνονται ημέρα 4 μετά την έναρξη της θεραπείας με σισπλατίνη [43]. Ωστόσο, απ ‘όσο γνωρίζουμε, καμία μελέτη δεν έχει ακόμη σύγκριση αλλαγές στην FLT και FDG μετά τη θεραπεία με τον συνδυασμό καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη σε ένα προ-κλινικό μοντέλο όγκου ωοθηκών. Τα αποτελέσματα από μια τέτοια μελέτη θα ήταν κλινικά σημαντικές, καθώς θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για την επιλογή των ΡΕΤ ιχνηθέτη και απεικόνισης χρονικά σημεία.

Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν επομένως να καθοριστεί και να συγκρίνουν την πρόσληψη της γλυκόζης και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων με τη χρήση του FDG και FLT ΡΕΤ μετά από θεραπεία με ένα συνδυασμό καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη σε ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος ποντικού ανθρώπινου καρκίνου των ωοθηκών. Η πρόσληψη FDG συγκρίθηκε με γονιδιακή έκφραση των GLUT1, ΚΘ1 και ΚΘ2 και FLT πρόσληψη σε σύγκριση με γονιδιακή έκφραση των Κί67 και ΤΚ1.

Υλικά και Μέθοδοι

μοντέλο όγκου

φροντίδα των ζώων και όλες οι πειραματικές διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν υπό την έγκριση του Συμβουλίου Ευημερίας των ζώων της Δανίας (2006/561 έως 1124). Οκτώ εβδομάδες θηλυκών γυμνών ποντικών ηλικίας NMRI (Taconic Ευρώπη, Lille Skensved, Denmark) χρησιμοποιήθηκαν για την παραγωγή του μοντέλου Α2780 ξενομοσχεύματος. Όλοι οι ποντικοί εγκλιματίστηκαν για μία εβδομάδα στην εγκατάσταση ζώων πριν από την ένεση των καρκινικών κυττάρων. Η ανθρώπινη Α2780 κυτταρική σειρά καρκινώματος των ωοθηκών καλλιεργήθηκε σε RPMI (Roswell Park Memorial Institute) μέσο 1640 + GlutaMAX (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) συμπληρωμένο με 10% ορό εμβρύου μόσχου (Biological Industries, Israel) και 1% πενικιλίνη-στρεπτομυκίνη ( Invitrogen) σε 5% CO

2 στους 37 ° C. Η κυτταρική γραμμή δοκιμάστηκε ελεύθερη μυκοπλάσματος. Για δημιουργία ξενομοσχευμάτων 10

7 κύτταρα αραιώθηκαν σε 100 μι μέσου και αναμίχθηκαν με 100 μι Matrixgel ™ Υπόγειο Membrane Matrix (BD Biosciences, San Jose, CA, USA) για κάθε όγκο και εγχύεται στον αριστερό και το δεξί πλευρό αντίστοιχα.

Πειραματικός σχεδιασμός

In vivo

πρόσληψη της FDG και FLT σε ανθρώπινα ξενομοσχεύματα καρκίνου των ωοθηκών σε ποντίκια προσδιορίστηκε. Τέσσερις ομάδες ποντικών χρησιμοποιήθηκαν (4 ποντικοί /ομάδα). Baseline μεγέθη του όγκου ήταν περίπου 100 mm

3 την ημέρα -2. Δύο ομάδες έλαβαν ένα συνδυασμό καρβοπλατίνη (Hospira, Illinois, USA) και paclitaxel (Actavis, Gentofte, Denmark) και δύο ομάδες δέχθηκαν όχημα (ισοτονικό αλατούχο διάλυμα). Οι ομάδες ελέγχου ήταν ταυτόσημα με τις ομάδες ελέγχου σε ένα προηγουμένως δημοσιευμένη μελέτη καθώς οι δύο μελέτες διεξήχθησαν παράλληλα [44]. Οι δόσεις ήταν 40 mg /kg ίρ για καρβοπλατίνη και 10 mg /kg iv για την πακλιταξέλη με ένεση την ημέρα 0 και 5. ομάδα Μία θεραπεία (n = 8 όγκους) και μία ομάδα ελέγχου (n = 5 όγκοι) έλαβαν FDG σαρώσεις και μία ομάδα θεραπείας (n = 6 όγκοι) και μία ομάδα ελέγχου (n = 7 όγκοι) έλαβε FLT σαρώσεις. Baseline FDG ή FLT PET σαρώσεις έγιναν πριν από την αγωγή (ημέρα 0 ή την ημέρα -2) και επαναλαμβάνεται την ημέρα 1, 4 και 8 μετά την έναρξη της θεραπείας. πρόσληψη ιχνηλάτη ήταν σε όλες τις περιπτώσεις ποσοτικοποιούνται χρησιμοποιώντας μικρό ζώο PET /CT. Κατά τη διάρκεια των πειραμάτων τα μεγέθη των όγκων μετρήθηκαν με microCT [45,46]. Την ημέρα 8 αμέσως μετά την τελευταία PET /CT σάρωση όλοι οι όγκοι αποκόπηκαν και γονιδιακή έκφραση του GLUT1, ΚΘ1, HK2, Κί67 και ΤΚ1 στη συνέχεια μετρήθηκε με qPCR.

Σύνθεση FDG και FLT

Ο ραδιοσύνθεσης και τον έλεγχο ποιότητας του FLT διεξήχθη όπως περιγράφηκε προηγουμένως [47]. FDG αποκτήθηκε από τις καθημερινές παραγωγές σε Rigshospitalet (Κοπεγχάγη, Δανία).

microPET /CT απεικόνιση

Για PET ποντίκια απεικόνιση χορηγήθηκαν περίπου 10 MBq της FDG ή FLT από ενδοφλέβια ένεση. Οι ιχνηθέτες αφέθηκαν να διανείμουν για μία ώρα, ενώ τα ζώα ήταν ξύπνιοι. Τα ποντίκια που έλαβαν FDG σαρώσεις νήστεψαν όλη τη νύχτα πριν από κάθε ένεση FDG [48]. Κατά τη διάρκεια σαρώνει τα 10 λεπτά σε διάρκεια ΡΕΤ οι ποντικοί αναισθητοποιούνται με 3% sevofluran (Abbott Scandinavia AB, Solna, Σουηδία) σε 35% O

2. σαρώσεις PET αποκτήθηκαν με MicroPET Focus 120 (Siemens Medical Solutions, Malvern, ΡΑ, USA) και κάθε ΡΕΤ scan ακολούθησε μια microCT σάρωση αποκτήθηκαν με ένα σύστημα MicroCAT® II (Siemens Medical Solutions) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [47]. Τα ποντίκια διατηρήθηκαν σε αναισθησία στην ίδια θέση κατά τη διάρκεια των σαρώσεων PET και CT επιτρέποντας μετέπειτα συγχώνευση των εικόνων στο λογισμικό Inveon (Siemens Medical Solutions). δεδομένα PET ήταν τοποθετημένα σε sinograms και στη συνέχεια ανακατασκευάστηκε με τη μέγιστη αλγόριθμο ανακατασκευής των υστέρων (MAP). Το μέγεθος pixel ήταν 0,3 x 0,3 x 0,8 mm και στο κέντρο οπτικό πεδίο το ψήφισμα ήταν 1,2 χιλιοστά πλήρες πλάτος στο μισό της μέγιστης. Οι εικόνες δεν διορθώθηκαν για την εξασθένιση ή διασποράς.

Μετά τη συγχώνευση της PET και CT εικόνες αρκετές περιοχή συμφερόντων (ROIs) καταρτίστηκαν στις εικόνες CT με το χέρι από την ποιοτική αξιολόγηση που καλύπτει το σύνολο του όγκου σε πολλά από τα αεροπλάνα τομογραφική. Στη συνέχεια όλα τα ROI αθροίστηκαν και στη συνέχεια υπολογίστηκαν οι δύο μεγέθη όγκου και της πρόσληψης του ιχνηθέτη. Το σύνολο του όγκου του όγκου που ορίζεται στις εικόνες CT ήταν ως εκ τούτου χρησιμοποιείται για τον υπολογισμό του προσλήψεως ιχνηλάτη ΡΕΤ. πρόσληψη ιχνηλάτη ποσοτικοποιήθηκε με τυποποιημένη τιμή πρόσληψης (SUV) και η πρόσληψη ιχνηθέτη μετά την έναρξη της θεραπείας υπολογίστηκε σε σχέση με την αρχική τιμή της πρόσληψης. Ο τύπος (Γ

Τ W *) /D

inj, όπου C

T είναι η συγκέντρωση ραδιενέργειας ιστός, το W είναι το βάρος του ζώου και D

inj εγχέεται δόση, χρησιμοποιήθηκε για τους υπολογισμούς SUV . SUVmean είναι ένα μέτρο της μέσης συγκέντρωσης ραδιενέργειας ιστού στον όγκο και SUVmax είναι ένα μέτρο της voxel μέσα στην ROI με την υψηλότερη συγκέντρωση του ιχνηθέτη. Τόσο για SUVmean και SUVmax η πρόσληψη μετά την έναρξη της θεραπείας υπολογίζεται σε σχέση με την πρόσληψη κατά την έναρξη πριν από την έναρξη της θεραπείας και, ως εκ τούτου το SUVmean αναλογία όρους (SUVmean, μετά την επεξεργασία /SUVmean, την αρχική τιμή) και αναλογία SUVmax (SUVmax, μετά την επεξεργασία /SUVmax, την αρχική τιμή) είχαν χρησιμοποιήθει.

ποσοτική πραγματικού χρόνου αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (qPCR)

Ολικό RNA απομονώθηκε με το αντιδραστήριο TRI

® ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή (Molecular Research Center Inc., ΟΗ, USA). Η συγκέντρωση του RNA προσδιορίστηκε με NanoDrop 1000 (Thermo Fisher Scientific, Wilmington, DE, USA). RNA (0,3 μg) αντεστράφη μεταγράφηκε χρησιμοποιώντας το κιτ Affinityscript ™ QPCR cDNA Synthesis (Stratagene, La Jolla, CA, USA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή.

Όλοι οι εκκινητές σχεδιάστηκαν στο Beacon Designer (PREMIER Biosoft, Palo Alto, CA, USA). Οι αλληλουχίες εκκινητών φαίνονται στον πίνακα 1. Για κάθε γονίδιο οι συγκεντρώσεις εκκινητή βελτιστοποιηθεί. Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν εις τριπλούν και σε κάθε δείγμα συμπεριλήφθηκε μια μη-ανάστροφης μεταγραφικό έλεγχο (Nort) και σε κάθε πλάκα συμπεριλήφθηκε ένας έλεγχος χωρίς πρότυπο (NTC).

Όνομα

NCBI NM_ID

Forward εκκινητή (5′-3 ‘)

ανάστροφο εκκινητή (5’-3’)

GUSBNM_000181tgagcaagactgataccagctagaatagatgaccacaaHPRT1NM_000194caaagcctaagatgagagtgccacagaactagaacatGLUT1NM_006516catcatcttcatcccggcctcctcgttgcggttgatHK1NM_000188ggtgaaatcgtccgcaaccccgggtcttcatcgtcHK2NM_000189cggccgtgctacaataggctcgggatcatgtgagggKi67NM_002417tcccgcctgttttctttctgacctctccaaggatgatgatgctttacTK1NM_003258gccgatgttctcaggaaaaagcgcgagtgtctttggcatacttgTable 1. ακολουθίες αστάρι qPCR.

CSV Λήψη CSV

Η γονιδιακή έκφραση προσδιορίστηκε ποσοτικά σε πραγματικό χρόνο σύστημα PCR Mx3000P® (Stratagene) χρησιμοποιώντας Brilliant® SYBR® Πράσινη QPCR Master Mix (Stratagene). Το θερμικό προφίλ ήταν: 10 λεπτά μετουσιώσεως στους 95 ° C που ακολουθείται από 45 κύκλους των 30 δευτερολέπτων μετουσιώσεως στους 95 ° C, 1 λεπτό ανόπτηση στους 60 ° C και επέκταση 1 λεπτού στους 72 ° C. Μια καμπύλη διαστάσεως μετέπειτα λαμβάνεται με μετουσίωση των προϊόντων για 1 λεπτό στους 95 ° C που ακολουθείται από μία σταδιακή αύξηση της θερμοκρασίας από 55 ° C έως 95 ° C με βήματα του 0.5ºC /κύκλο όπου η διάρκεια του κάθε κύκλου ήταν 18 δευτερόλεπτα.

Το πρόγραμμα qBase χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση δεδομένων QPCR. Η σχετική ποσοτικοποίηση του γονιδίου συμφερόντων (GOIs) παρουσιάστηκε ως φορές αλλαγές στην ομάδα θεραπείας σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου την ημέρα 8 ρυθμίζεται σύμφωνα με την γεωμετρική μέση τιμή των δύο γονιδίων αναφοράς [49]. Οι δύο πιο σταθερές γονίδια αναφοράς βρέθηκαν από ένα πάνελ 12 υποψήφια γονίδια στον πίνακα γονίδιο αναφοράς ανθρώπου (ΤΑΤΑΑ Biocenter ΑΒ, Göteborg, Sweden) χρησιμοποιώντας τον αλγόριθμο geNorm.

Στατιστική ανάλυση

Αζευγάρωτη Students t-test χρησιμοποιήθηκε για σύγκριση μεταξύ των ομάδων θεραπείας και ελέγχου. Χωρίς διόρθωση για πολλαπλές συγκρίσεις εφαρμόστηκε. Οι υπολογισμοί έγιναν σε SPSS 20 (IBM Corporation, Armonk, New York, USA). Τα δεδομένα αναφέρονται ως μέση τιμή ± SEM και p & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

Επίδραση των καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη θεραπεία για Α2780 ανάπτυξης όγκου

Η θεραπεία των ποντικών εμφυτευμένων με. Α2780 όγκους ξενομοσχεύματος με ένα συνδυασμό καρβοπλατίνης (40 mg /kg ίρ) και paclitaxel (10 mg /kg iv) την ημέρα 0 και 5 κατέληξε σε μείωση στο μέγεθος του όγκου την ημέρα 8 σε σύγκριση με μια ομάδα ελέγχου χορηγήθηκε φορέας. Baseline μέγεθος όγκου ήταν 118 ± 19 mm

3 στην ομάδα ελέγχου και 135 ± 16 mm

3 στην ομάδα θεραπείας. Ο όγκος του όγκου στην ομάδα ελέγχου ήταν 926 ± 192 mm

3 την ημέρα 8 και οι όγκοι στην ομάδα καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη (ΚΓΠ) ήταν 490 ± 73 mm

3 την ημέρα 8 η οποία ήταν σημαντικά μικρότερη από τους όγκους στην ομάδα ελέγχου (ρ = 0,03) (Σχήμα 1).

Ποντίκια εμφυτεύθηκαν με Α2780 όγκους ξενομοσχεύματος υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ένα συνδυασμό καρβοπλατίνης (40 mg /kg ίρ) και paclitaxel (10 mg /kg iv) την ημέρα 0 και 5. Τα μεγέθη των όγκων στην ομάδα καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη ( n = 14 όγκοι) ήταν σημαντικά διαφορετικές από ό, τι στην ομάδα ελέγχου (n = 12 όγκους) την ημέρα 8 (ρ = 0,034). Τα μεγέθη των όγκων μετρήθηκαν με microCT και παρουσιάζονται ως μέση τιμή ± SEM.

Η

πρόσληψη FDG στην καρβοπλατίνη και ξενομοσχεύματα Α2780 έλαβαν πακλιταξέλη

Την 4η ημέρα μετά την έναρξη της θεραπείας με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη FDG αναλογία SUVmax ήταν σημαντικά χαμηλότερη στην ομάδα CaP σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (105 ± 4% έναντι 138 ± 9%? p = 0,002) και την ημέρα 8 η αναλογία FDG SUVmax ήταν χαμηλότερη στο πώμα σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (125 ± 13% έναντι 167 ± 13%? p = 0.05) (Εικόνα 2). Η πρόσληψη FDG SUVmax δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ της θεραπείας και της ομάδας ελέγχου κατά την έναρξη και την ημέρα 1 μετά την έναρξη της θεραπείας. Την ημέρα 4 αναλογία FDG SUVmean ήταν σημαντικά χαμηλότερη στην ομάδα CaP σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (103 ± 4% έναντι 130 ± 5%? P = 0,001). Η πρόσληψη FDG SUVmean δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ της ομάδας θεραπείας και ελέγχου κατά την έναρξη και κατά την ημέρα 1 και 8 μετά την έναρξη της θεραπείας.

πρόσληψη FDG αναλύθηκε μία ώρα μετά την ένεση σε θεραπεία καρβοπλατίνη /πακλιταξέλη (n = 8 όγκους) και μια ομάδα ελέγχου (n = 5 όγκοι). Οι ποντικοί ήταν PET /CT σαρωθεί κατά την έναρξη πριν από την έναρξη της θεραπείας και την ημέρα 1, 4 και 8 μετά την ένεση της πρώτης δόσης. Α) πρόσληψη όγκου του FDG κατά τη διάρκεια της θεραπείας του Α2780 όγκους ξενομοσχεύματος με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη. πρόσληψη ποσοτική όγκου παρουσιάζεται ως SUVmean και SUVmax (μέση τιμή ± SEM). Β) Αντιπροσωπευτικά PET /CT εικόνες ενός ποντικιού από την ομάδα καρβοπλατίνη και αγωγή με πακλιταξέλη (άνω εικόνες) και ένα ποντικός από την ομάδα που υπέστη αγωγή με φορέα ελέγχου (κατώτερο εικόνες). Διακεκομμένη κύκλοι υποδεικνύουν τους όγκους.

Η

πρόσληψη FLT στην καρβοπλατίνη και ξενομοσχεύματα Α2780 έλαβαν πακλιταξέλη

Την ημέρα 1 η πρόσληψη του λόγου FLT SUVmax ήταν 89 ± 9% στην ομάδα CaP σε σύγκριση με 109 ± 6% στην ομάδα ελέγχου? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (ρ = 0,08) (Σχήμα 3). Σε όλα τα άλλα χρονικά σημεία η πρόσληψη FLT SUVmax στην ομάδα CaP ήταν συγκρίσιμη με την ομάδα ελέγχου. Την ημέρα 1 η πρόσληψη του λόγου FLT SUVmean ήταν χαμηλότερη στο κάλυμμα σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (96 ± 6% έναντι 113 ± 5%? P = 0.05). Σε όλα τα άλλα χρονικά σημεία δεν παρατηρήθηκε καμία διαφορά μεταξύ της ομάδας θεραπείας και ελέγχου.

πρόσληψη FLT αναλύθηκε μία ώρα μετά την ένεση σε ένα καρβοπλατίνη θεραπεία /paclitaxel (n = 6 όγκοι) και μια ομάδα ελέγχου (n = 7 όγκους). Οι ποντικοί ήταν PET /CT σαρωθεί κατά την έναρξη πριν από την έναρξη της θεραπείας και την ημέρα 1, 4 και 8 μετά την ένεση της πρώτης δόσης. Α) πρόσληψη όγκου του FLT κατά τη διάρκεια της θεραπείας του Α2780 όγκους ξενομοσχεύματος με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη. πρόσληψη ποσοτική όγκου παρουσιάζεται ως SUVmean και SUVmax (μέση τιμή ± SEM). Β) Αντιπροσωπευτικά PET /CT εικόνες ενός ποντικιού από την ομάδα καρβοπλατίνη και αγωγή με πακλιταξέλη (άνω εικόνες) και ένα ποντικός από την ομάδα που υπέστη αγωγή με φορέα ελέγχου (κατώτερο εικόνες). Σχετικά με τις εικόνες του ποντικιού από την ομάδα θεραπείας δύο όγκοι είναι ορατά, ενώ στις εικόνες του ποντικιού έλεγχο μόνο μία όγκος είναι ορατή. Διακεκομμένη κύκλοι υποδεικνύουν τους όγκους.

Η

Η γονιδιακή έκφραση GLUT1, ΚΘ1, HK2, Ki67 και ΤΚ1

Οι δύο πιο σταθερά εκφραζόμενα γονίδια αναφοράς ήταν βήτα-γλυκουρονιδάση (GUSB) και φωσφοριβοσυλτρανσφεράση της υποξανθίνης 1 (HPRT). Τα επίπεδα των GOIs ήταν επομένως κανονικοποιήθηκαν προς το γεωμετρικό μέσο όρο των GUSB και HPRT. Στην ομάδα θεραπείας έκφραση GLUT1 ήταν 67 ± 10% σε σύγκριση με 100 ± 16% στην ομάδα ελέγχου την ημέρα 8? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (p = 0.08). Στην έκφραση ΚΘ1 ομάδα θεραπείας ήταν 79 ± 4% σε σύγκριση με 100 ± 8% στην ομάδα ελέγχου την ημέρα 8 η οποία ήταν στατιστικά σημαντική (ρ = 0,03) (Σχήμα 4). Δεν παρατηρήθηκαν διαφορές στην έκφραση των HK2, Κί67 και ΤΚ1 μεταξύ των ομάδων θεραπείας και ελέγχου κατά την ημέρα 8.

Την ημέρα 8, αμέσως μετά το τελευταίο PET /CT scan όλοι οι όγκοι αποκόπηκαν και το συνολικό RNA απομονώθηκε και αργότερα ρεβέρ μεταγραφή σε cDNA. Με qPCR σχετική έκφραση GLUT1, ΚΘ1, HK2, Ki67 και TK1 μετρήθηκαν. Τα επίπεδα του γονιδίου των συμφερόντων ομαλοποιήθηκαν με τις γεωμετρικές μέσες τιμές των δύο γονιδίων αναφοράς GUSB και HPRT. Α) Για μειώθηκε η έκφραση μελέτη GLUT1 FDG, η διαφορά δεν είναι στατιστικά σημαντική (ρ = 0,08), η έκφραση ΚΘ1 ήταν χαμηλότερη στην θεραπεία σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (ρ = 0,03). Β) Για τη μελέτη FLT καμία διαφορά στην Ki67 και ΤΚ1 μεταξύ της ομάδας θεραπείας και ελέγχου παρατηρήθηκε την ημέρα 8. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέση τιμή ± SEM.

Η

Συζήτηση

η μελέτη αυτή περιγράφουμε την μη επεμβατική απεικόνιση της πρόσληψης γλυκόζης και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων για την έγκαιρη εκτίμηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία σε προ-κλινικό μοντέλο ποντικού ανθρώπινου καρκίνου των ωοθηκών σε επεξεργασία με ένα συνδυασμό καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη. Η πρόσληψη γλυκόζης και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων έγιναν ορατές με FDG και FLT PET αντίστοιχα. Το Α2780 κυτταρική γραμμή χρησιμοποιήθηκε για την παραγωγή των όγκων ξενομοσχεύματος σε ποντίκια. Αυτό το μοντέλο όγκου ανταποκρίθηκε καλά στη θεραπεία συνδυασμού με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη μετρήθηκε ως μια μείωση στο μέγεθος του όγκου σε σύγκριση με μια ομάδα ελέγχου την ημέρα 8 μετά την έναρξη της θεραπείας.

Την ημέρα 4 μετά την έναρξη της θεραπείας με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη, η πρόσληψη των FDG ήταν σημαντικά χαμηλότερη στην θεραπεία σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου και την πρόσληψη παρέμεινε σε χαμηλά επίπεδα την ημέρα 8. Η μείωση στην πρόσληψη FDG έγινε παράλληλα με μειώσεις GLUT1 και ΚΘ1 έκφραση, ενώ καμία αλλαγή στην έκφραση HK2 παρατηρήθηκε υποδεικνύοντας ότι GLUT1 και ΚΘ1 εμπλέκονται στην πρόσληψη FDG σε αυτό το μοντέλο όγκου.

Παρατηρήσαμε ένα πρώιμο αλλά παροδική μείωση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων μετράται με FLT ΡΕΤ μετά την έναρξη της θεραπείας του να ανταποκρίνεται όγκων Α2780 με τον συνδυασμό καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη. Μια διαφορά στην πρόσληψη FLT μεταξύ της ομάδας θεραπείας και ελέγχου είχε ήδη παρατηρηθεί κατά την ημέρα 1 μετά από την έναρξη της αγωγής. Αντίθετα, η πρόσληψη FLT δεν ήταν διαφορετική μεταξύ των ποντικών αγωγής και μάρτυρα την ημέρα 4 και 8 μετά την έναρξη της θεραπείας. Το ταυτόσημο τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων στην ομάδα θεραπείας και ελέγχου μετρήθηκαν με FLT ΡΕΤ την ημέρα 8 υποστηρίχθηκε από μετρήσεις γονιδιακή έκφραση του Κί67 και ΤΚ1 οποία έδειξε καμία διαφορά στην Κί67 και έκφραση ΤΚ1 μεταξύ της ομάδας θεραπείας και ελέγχου την ημέρα 8. Σε άλλες μελέτες, καμία αλλαγή στην πρόσληψη FLT, παρά τη θεραπεία με μια αποτελεσματική αντικαρκινική θεραπεία, έχει επίσης παρατηρηθεί [29,31]. Η αμετάβλητη πρόσληψη FLT αργά στην πορεία της θεραπείας μπορεί να οφείλεται σε διάφορους παράγοντες. Η αντικαρκινική θεραπεία μπορεί να οδηγήσει σε ενεργοποίηση ανάδρασης του

de novo

οδό σύνθεσης του DNA με αποτέλεσμα αμετάβλητες ή ακόμη και αυξημένη πρόσληψη FLT παρά μειωμένο πολλαπλασιασμό των κυττάρων. Αυτό το φαινόμενο έχει για παράδειγμα κατά τη διάρκεια θεραπείας με 5-FU [35]. Η σχέση μεταξύ της οδού πυριμιδίνης διάσωσης και το

de novo

οδό σύνθεσης του DNA σε όγκους έχει μεγάλη επίδραση στην πρόσληψη των FLT και διαφορετικών όγκων έχουν μεταβλητές εισφορές των δύο οδών [50,51]. Ορισμένοι όγκοι βασίζονται κυρίως σε

de novo σύνθεση

των προδρόμων του DNA η οποία θα έχει ως αποτέλεσμα χαμηλή απορρόφηση βασικής γραμμής FLT παρά ρυθμό πολλαπλασιασμού υψηλής κυτταρικής [9]. Ως εκ τούτου, είναι πιθανό ότι η θεραπεία των όγκων βασίζεται κυρίως σε

de novo σύνθεση

όχι αναγκαστικά θα οδηγήσει σε μειώσεις στην πρόσληψη FLT παρά τη θεραπεία με αποτελεσματική χημειοθεραπεία που μειώνει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων [31]. Προηγουμένως, έχουμε αναφέρει ότι η αποτελεσματική θεραπεία κατά του καρκίνου μειωμένη πρόσληψη FLT στο Α2780 ανθρώπινου ωοθηκικού μοντέλο ποντικού ξενομοσχεύματος καρκίνου που δείχνει ότι η οδός διάσωσης συμβάλλει στην απαίτηση θυμιδίνης σε αυτό το μοντέλο όγκου [46,47,52]. Δεν παρατηρήθηκε μείωση στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων που σχετίζεται γονίδια Κί67 και ΤΚ1 παρατηρήθηκαν κατά την ημέρα 8 παρά αποτελεσματική θεραπεία. Έτσι, φαίνεται πιθανό ότι η συνδυασμένη θεραπεία με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη δεν αλλάζει το κυτταρικό πολλαπλασιασμό αργά στην πορεία της θεραπείας, ακόμη και αν η θεραπεία μειώνει την ανάπτυξη του όγκου. Καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη χορηγήθηκαν με ένεση την ημέρα 0 και 5. απεικόνιση ΡΕΤ εκτελέστηκε την ημέρα 4 και 8 και έτσι πρόσληψη ιχνηλάτη μετρήθηκε την 4η ημέρα μετά την 1

st και την 3η ημέρα μετά την 2

nd χορήγηση της χημειοθεραπείας. Αυτό μπορεί να υποδεικνύει ότι η θεραπεία δεν πολλαπλασιασμός μείωση των κυττάρων για λιγότερο από 3 ημέρες και αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο δεν παρατηρήθηκε διαφορά στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων κατά την ημέρα 4 και 8, επειδή τα καρκινικά κύτταρα έχει αρχίσει εκ νέου πολλαπλασιάζονται. Περαιτέρω έρευνες απαιτούνται για να καθορίσουν για πόσο καιρό ο πολλαπλασιασμός επηρεάζεται μετά από μία μόνο ένεση καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη.

Τόσο η καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη προκαλεί διακοπή του κυτταρικού κύκλου στη φάση G2 /M. Η φωσφορυλίωση του FLT από ΤΚ1 υποτίθεται ότι είναι ο περιοριστικός παράγοντας για την πρόσληψη και τη δραστηριότητα των ΤΚ1 FLT συσχετίζεται με την πρόσληψη FLT [13]. ΤΚ1 εκφράζεται κυρίως στην φάση S του κυτταρικού κύκλου, επομένως διακοπή του κυτταρικού κύκλου αργότερα στον κυτταρικό κύκλο δεν θα μπορούσαν να επηρεάσουν την πρόσληψη του FLT.

Οι διαφορές μεταξύ κυτταρικού πολλαπλασιασμού και η πρόσληψη γλυκόζης μετά την έναρξη της θεραπείας με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη απεικονίζει την σημασία του συνδυασμού απεικόνισης διαφόρων φυσιολογικών διεργασιών με σκοπό να αναλυθεί η βιολογική επίδραση της θεραπείας του καρκίνου. Καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη θεραπεία προκάλεσε σημαντικές μειώσεις στην πρόσληψη FDG μετά από την ημέρα 4 και μετά, αλλά ήταν λιγότερο αποτελεσματική στη μείωση των πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων όπως μετράται με FLT. Ωστόσο FLT ήταν μια παλαιότερη δείκτη από FDG, αν και παροδική. Επίσης, αυτό υπογραμμίζει τη σημασία της βέλτιστης χρονισμού μεταξύ θεραπείας και FLT ή απεικόνισης FDG από την ανταπόκριση στη θεραπεία μπορεί διαφορετικά να αγνοηθεί. Έτσι, για να βρει ένα βιοδείκτη απεικόνισης που δυνητικά θα μπορούσε να είναι προγνωστική για την έκβαση της θεραπείας σε μελλοντικές κλινικές μελέτες διαφορετικά βιοδείκτες απεικόνισης, δίνοντας πληροφορίες από διαφορετικές φυσιολογικές διαδικασίες, πρέπει να αξιολογηθούν.

Ένα από τα βασικά μειονεκτήματα της παρούσα μελέτη ήταν ότι ένας περιορισμένος αριθμός ζώων που περιλαμβάνονται σε κάθε ομάδα. Αυτό θα μπορούσε να είναι ο λόγος που αρκετές από τις μετρήσεις δεν ήταν στατιστικά σημαντική λόγω σφάλματος τύπου ΙΙ. Επιπλέον έχει η παρούσα μελέτη περιγράφουν την παρακολούθηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία σε ανθρώπινους όγκους ξενομοσχεύματος σε γυμνά ποντίκια. Παρά το γεγονός ότι οι όγκοι είναι ανθρώπινης προέλευσης, το περιβάλλον μη-ανθρώπινο ξενιστή μπορεί να προκαλέσει ότι τα αποτελέσματα που αποκτήθηκαν σε αυτήν την προ-κλινικό μοντέλο δεν είναι απαραίτητα μπορούν να μεταφραστούν σε κλινικές μελέτες. Ένας άλλος περιορισμός της μελέτης ήταν ότι οι μοριακοί δείκτες μετρήθηκαν για το επίπεδο γονιδιακής έκφρασης και επομένως είναι άγνωστο αν ή όχι τα επίπεδα γονιδιακής έκφρασης είναι μια αντανάκλαση της έκφρασης πρωτεΐνης.

Μια μελλοντική εφαρμογή της παρακολούθησης της ανταπόκρισης στη θεραπεία με FDG και FLT για τον καρκίνο των ωοθηκών θα μπορούσε δυνητικά να είναι αξιολόγηση της επίδρασης της θεραπείας σε πρωτόκολλα αξιολόγησης της επίδρασης της προσθήκης π.χ. στοχευμένη αντικαρκινικοί παράγοντες στην καθιερωμένη θεραπεία καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη. Οι μελλοντικές μελέτες για να καθοριστεί εάν FDG και FLT PET ισχύουν για την πρόβλεψη και την παρακολούθηση της έκβασης της συμπληρωματικής συνδυασμό σε σύγκριση με την καθιερωμένη θεραπεία.

Εν κατακλείδι, διαπιστώσαμε ότι η αλλαγή της FDG και η πρόσληψη FLT μετά την έναρξη της θεραπείας με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη ήταν διαφορετικές αλλά συμπληρωματικές. FLT παρέχει μια πρώιμη και παροδική σήματος και FDG μια νεότερη και πιο παρατεταμένη ανταπόκριση. Έτσι, τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι τόσο FDG και FLT ΡΕΤ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση των επιδράσεων κατά του όγκου του συνδυασμού καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών.