Αφηρημένο

Από καιρό έχει θεωρηθεί ότι ο καρκίνος του παγκρέατος (PC) είναι μια απειλητική για τη ζωή κακοήθης όγκος. Έτσι, έχει δοθεί μεγάλη προσοχή για τους παράγοντες, ειδικά σε σχέση με τα μόρια, πρόβλεψης για την πρόγνωση του PC. Ωστόσο, c-fos έκφραση σε PC ήταν λιγότερο διερευνηθεί. Επιπλέον, η σύνδεσή της με κλινικοπαθολογική μεταβλητές και πρόγνωση παραμένει άγνωστη. Στην παρούσα μελέτη, η έκφραση του c-fos ανιχνεύθηκε με ανοσοϊστοχημική χρώση του ιστού που βασίζεται σε μικροδιάταξη στον καρκίνο και των παρακείμενων ιστών από 333 ασθενείς με PC. Τα αποτελέσματα χρώσης συσχετίστηκαν με κλινικοπαθολογική παραμέτρους και συνολική επιβίωση. Επιπλέον, προγνωστική σημασία του c-fos σε υποσύνολα PC αξιολογήθηκε επίσης. Αποδείχθηκε ότι η χαμηλή έκφραση του c-fos ήταν πιο συχνά σε καρκίνο σε σχέση με γειτονικούς ιστούς του PC (

P

& lt? 0.001). Εκτός αυτού, υψηλής καρκινικά c-fos έκφραση ήταν σημαντικά σχετίζεται με το site του όγκου και το στάδιο Τ, ενώ περι-νευρική εισβολή ήταν μια οριακά σημαντική σημασία. Δοκιμασία log-rank αποκάλυψε ότι η υψηλή έκφραση του c-fos σε καρκινικούς ιστούς ήταν μια σημαντική δείκτης κακής συνολική επιβίωση, η οποία συνοδεύεται από κάποια συμβατική κλινικοπαθολογική μεταβλητές, όπως το φύλο, την ποιότητα, περι-νευρική εισβολή, Τ και Ν στάδια. Το πιο σημαντικό, τα καρκινικά c-fos έκφραση ταυτοποιήθηκε ως ανεξάρτητος μάντης σε πολυπαραγοντική ανάλυση. Τέλος, η προγνωστική επίπτωση της έκφρασης c-fos αποδείχθηκε σε τέσσερις υποομάδες ασθενών με PC. Αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν ότι το c-fos έκφραση ήταν των σχέσεων με την εξέλιξη και την θλιβερή πρόγνωση του υπολογιστή

Παράθεση:. Guo J-C, Li J, Zhao Υ-Ρ, Zhou L, Cui Q-C, Zhou W-Χ, et al. (2015) Έκφραση του c-fos συνδέθηκε με κλινικοπαθολογική Χαρακτηριστικά και πρόγνωση στον καρκίνο του παγκρέατος. PLoS ONE 10 (3): e0120332. doi: 10.1371 /journal.pone.0120332

Ακαδημαϊκό Εκδότης: William B. Coleman, του Πανεπιστημίου της Βόρειας Καρολίνας Σχολή Ιατρικής, Ηνωμένες Πολιτείες |

Ελήφθη: 17 του Οκτωβρίου του 2014? Αποδεκτές: 30 Ιανουαρίου 2015? Δημοσιεύθηκε: 19, Μαρτίου, 2015

Copyright: © 2015 Guo et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό υψηλής Τεχνολογίας Έρευνας και του Προγράμματος Ανάπτυξης (863 Προγράμματος, 2014AA020609, https://program.most.gov.cn/), Κίνα. Ο χρηματοδότης δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του παγκρέατος (PC) είναι ένα από τα πιο απειλητικές για τη ζωή στερεά νεοπλάσματα, επειδή αυτός ο τύπος κακοήθειας φέρει την θνησιμότητα σχεδόν ίση με τη συχνότητά του [1]. Ήταν πρόσφατα συνόψισε ότι η βελτίωση σε μακροχρόνια πρόγνωση του υπολογιστή, αν και η χειρουργική εκτομή ήταν όλο και περισσότερο εφαρμοσμένη, δεν επιτεύχθηκε μέσα σε δύο δεκαετίες [2]. Ως εκ τούτου, η εξερεύνηση των δεικτών πρόγνωσης του υπολογιστή έχει το hotspot της μελέτης. Μέχρι στιγμής, πολλές κλινικές και παθολογικές αυτές, όπως η κατάσταση των λεμφαδένων, νευρικά εισβολή, τα επίπεδα δείκτης όγκου και του περιθωρίου εκτομή, εντοπίστηκαν [3-8]. Από την άλλη πλευρά, οι επιπτώσεις των μορίων που εμπλέκονται στην παθογένεση και την πρόοδο στην πρόγνωση του PC όγκου σταδιακά αποτιμώνται και να αναθεωρούνται στο [9,10]. Φυσικά, πιο μοριακό prognosticators πρέπει να ανακαλυφθεί

Έχει καλά γνωστό ότι το c-fos (το ανθρώπινο ομόλογο του ρετροϊικού ογκογονιδίου v-Fos), ένα από τα σημαντικότερα συστατικά των πρωτεϊνών ενεργοποιητή (AP). – 1 σύμπλοκο, μεσολαβεί ανάπτυξη του καρκίνου, η αγγειογένεση, εισβολή και μετάσταση, ρυθμίζοντας τις εκφράσεις γονιδίων κατάντη [11]. Τα ευρήματα ότι το c-fos έκφραση ήταν σημαντικά σχετίζεται με υποτροπή, μετάσταση και φτωχή πρόγνωση σε πλακώδη καρκίνο του πνεύμονα, καρκίνο του μαστού και οστεοσάρκωμα παρέχονται δυναμικό του ως ένα πρωτο-ογκογονίδιο [12-14]. Ωστόσο, άλλα δεδομένα υποδηλώνουν ότι οι ασθενείς με υψηλή έκφραση του c-fos διεξάγεται ευνοϊκά επιβίωση σε ορθοκολικό, ωοθήκης και γαστρικών καρκίνων [15-18]. Έτσι, c-fos έκφραση και βιολογικές επιδράσεις της μπορεί να είναι τύπου ιστού ειδικό. Σε PC, αρκετά διαφορετική θετικούς ρυθμούς του c-fos και δυσμενείς ενώσεις του με κακοήθεις φαινοτύπους, όπως μετάσταση λεμφαδένα και αντοχής πολυφαρμάκου, είχαν αναφερθεί στο παρελθόν [19-22]. Ωστόσο, κλινικοπαθολογικοί και προγνωστική έννοιες της στο PC παραμένουν άγνωστα.

Στην παρούσα μελέτη, οι συγγραφείς με στόχο να αντιμετωπιστούν τα ζητήματα, που βασίζεται σε μια μεγάλη κινεζική ομάδα με τον υπολογιστή.

Υλικά και Μέθοδοι

ασθενείς

Η ομάδα μελέτης αποτελούνταν από 333 ασθενείς με PC, συμπεριλαμβανομένων 206 άνδρες και 127 γυναίκες. Ηλικίες κυμαίνονταν από 34 εφεξής 85 (διάμεση τιμή: 60) χρόνια. Ασθενής κριτήρια επιλογής: (1) ιστολογικά αποδεδειγμένη αδενοκαρκίνωμα? (2) διαθέσιμα χειρουργικά δείγματα? (3) διατίθενται κλινικοπαθολογική δεδομένα. Ο Πίνακας 1 συνοψίζει τα κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά των ασθενών. Χρησιμοποιήθηκαν οι ζεύγη σταθεροποιημένο με φορμαλίνη εμπεδωθεί με παραφίνη καρκίνου και μη-καρκινικούς ιστούς για τους ασθενείς. λήφθηκε η έγγραφη συγκατάθεση όλων των ασθενών. Το έργο (συμπεριλαμβανομένης της διαδικασίας συγκατάθεσή του) εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Νοσοκομείου Ένωσης Ιατρικό Κολέγιο του Πεκίνου.

Η

Κατασκευή ιστών μικροσυστοιχιών (TMA)

κατασκευή ιστών μικροσυστοιχιών εκτελέστηκε σύμφωνα με μεθόδους και τα πρότυπα ίδια με εκείνα που έχουν αναφερθεί στο παρελθόν [23]

ανοσοϊστοχημική χρώση

Ένα αντι-ανθρώπινο πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού για c-fos (sc-52, αραίωση:. 1: 50, Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA) και ένα κιτ ανοσοχρώση δύο σταδίων (EnVision

TM + kit, Dako, Denmark) χρησιμοποιήθηκαν για χρώση. Το πεπτίδιο αποκλεισμού (Santa Cruz) εγκρίθηκε για την επικύρωση ιδιαιτερότητα του πρωτογενούς αντισώματος. Τα πλακίδια χρωματίστηκαν σύμφωνα με τη μέθοδο που εφαρμόστηκε προηγουμένως [23]. Μη-ανοσοποιητικό ορό κουνελιού στην ίδια αραίωση υιοθετήθηκε ως αρνητικός μάρτυρας.

Αξιολόγηση της χρώσης Αποτελέσματα

Δύο ανεξάρτητες παθολόγους που αγνοούσαν τα δεδομένα κλινικοπαθολογική και την επιβίωση (QCC και WXZ) αξιολογούνται χρώση αποτελέσματα. Το καστανό πυρηνικά ή /και κυτταρόπλασμα χρωματισμός ορίστηκε ως το θετικό σήμα. Σύμφωνα με την προηγούμενη πρότεινε [24], η αναλογία των θετικών κυττάρων χωρίστηκε σε τρεις βαθμούς (0-10%, βαθμός 1? & Gt? 10 ≥50%, βαθμού 2? & Gt? 50%, βαθμός 3). Από την άλλη πλευρά, η ένταση χρώσης ήταν επίσης σκόραρε σε τρεις ομάδες (λιποθυμίας, σκοράρει 1? Μέτρια, σκοράρει 2? Εντατική, βαθμολογία: 3). Ο τελικός βαθμός λαμβάνεται με πολλαπλασιασμό των θετικών βαθμού λόγου και βαθμολογία της έντασης (φαίνονται στον Πίνακα 1), και διαχωρίζεται σε χαμηλά επίπεδα (τελικός βαθμός & lt? 6). Και υψηλής εκφράσεις (τελικού βαθμού ≥6)

ακόλουθα μέχρι

Συνέχεια (διάμεση τιμή: 14 μήνες? εύρος: 2-87 μήνες) πραγματοποιήθηκε για 229 ασθενείς, κυρίως μέσω εξωτερικά ιατρεία, τηλέφωνο και το ταχυδρομείο. Κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης, 170 ασθενείς έχουν πεθάνει.

Στατιστική Ανάλυση

τεστ McNemar και ανάλυση συσχέτισης κατά Pearson χρησιμοποιήθηκαν για να συγκρίνουν c-fos έκφρασης μεταξύ του καρκίνου και των παρακείμενων ιστών μη-καρκίνο, και για να δείξει τη συσχέτιση μεταξύ τους. Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του c-fos και κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά αποκαλύφθηκε από Chi-square test. μέθοδο και log-rank test Kaplan-Meier εφαρμόστηκαν για την εκτίμηση της συνολικής επιβίωσης και τις διαφορές τους. Η πολυπαραγοντική Cox παλινδρόμησης (Αναλογικό μοντέλο κινδύνου) ανάλυση διεξήχθη για τον προσδιορισμό των ανεξάρτητων προγνωστικών παραγόντων. Όλες οι αναλύσεις είχαν τελειώσει με στατιστικό πακέτο λογισμικού SPSS11.5 (SPSS Inc, Chicago, IL). Ένα

P

τιμή μικρότερη από 0,05 ορίστηκε ως στατιστικά σημαντική.

Αποτελέσματα

Η έκφραση του c-fos και η σύνδεσή της με κλινικοπαθολογική Χαρακτηριστικά σε PC

αποδείχθηκε ότι το θετικό σήμα που βρίσκονται κυρίως σε κυτταρικό πυρήνα, και που επίσης φαίνεται στο κυτταρόπλασμα (Εικ. 1). Μετά τη θεραπεία με το πεπτίδιο μπλοκαρίσματος, η διαπίστωση ότι θετικό σήμα εξαφανίστηκε (S1 Σχ.) Επικύρωσε την ειδικότητα του πρωτογενούς αντισώματος. Χαμηλής και υψηλής εκφράσεις βρέθηκαν σε καρκινικούς ιστούς από 167 και 166 ασθενείς με PC, και παρακείμενων ιστών μη-καρκίνου από 63 και 270 ατόμων. Χαμηλή c-fos έκφραση ήταν πιο συχνές σε καρκίνο από ό, τι σε γειτονικούς ιστούς (

P

& lt? 0.001, δοκιμασία του McNemar). Υπήρχαν σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του c-fos σε ιστούς του καρκίνου και ότι σε γειτονικούς ιστούς μη-καρκίνου (

P

& lt? 0.001, ανάλυση συσχέτισης κατά Pearson). Chi-square ανάλυση έδειξε ότι οι υψηλές καρκινικές c-fos έκφραση ήταν σημαντικά συχνότερη σε μη όγκους κεφαλής και Τ3, σε σύγκριση με το κεφάλι και αυτά T1-2, αντίστοιχα (Πίνακας 2,

P

= 0,013 και 0,017). Επιπλέον, c-fos έκφραση σε καρκινικούς ιστούς ήταν οριακά σημαντική σχέση με περινευρικό εισβολή (πίνακας 2,

P

= 0,069). Η έκφραση του c-fos σε παρακείμενους ιστούς δεν ήταν συνδεδεμένη με κλινικοπαθολογική παράμετροι περιλαμβάνονται (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

(Α) Υψηλή έκφραση σε καρκινικό ιστό (αρχική μεγέθυνση χ 200). (Β) Υψηλή έκφραση σε παρακείμενο ιστό μη-καρκίνο (αρχική μεγέθυνση χ 200).

Η

προγνωστική σημασία του c-fos σε όλη την κοόρτη των PC

Η μονοπαραγοντική ανάλυση σε όλη την κοόρτη του PC έδειξαν ότι οι υψηλές καρκινικές c-fos έκφραση προλέγεται από μειωμένη συνολική επιβίωση (

P

= 0.020? Εικ. 2 και Πίνακας 3), εκτός από το φύλο, την ιστολογική βαθμολογία, περινευρική εισβολή, Τ και Ν στάδια (

P

& lt? 0,05? Πίνακας 3). Η πολυπαραγοντική Cox παλινδρόμησης ορίζεται c-fos έκφραση ως ένα από ανεξάρτητους προγνωστικούς δείκτες για τη συνολική επιβίωση των PC (

P

= 0.022? Πίνακας 3).

Η

Επιρροές της C- fos έκφραση στη συνολική επιβίωση σε υποομάδες των PC

Επειδή η παρούσα μελέτη αξιολόγησε οκτώ κλινικοπαθολογική μεταβλητές, οι ασθενείς χωρίστηκαν σε δεκαέξι υποσύνολα. Μονοπαραγοντική ανάλυση ορίζεται καρκινικές c-fos έκφραση ως ένα σημαντικό προγνωστικό παράγοντα για τη συνολική επιβίωση σε τέσσερα αυτά, δηλαδή άνδρες ασθενείς, οι όγκοι ≤4cm, N0 όγκων και εκείνων χωρίς περινευρικό εισβολή (

P

& lt? 0,05? Εικ. 3) . ανάλυση παλινδρόμησης Cox διαπιστώθηκε ότι c-fos έκφρασης σε καρκινικούς ιστούς ήταν ανεξάρτητος προγνωστικός επιπτώσεις στους άνδρες, N0 όγκων και εκείνων που δεν περινευρικό εισβολή (

P

& lt? 0,05? Πίνακας 4).

( A) Οι άνδρες ασθενείς (

P

= 0,006). (Β) Οι όγκοι ≤4cm (

P

= 0,026). (C) Οι όγκοι χωρίς περι-νευρική εισβολή (

P

= 0,039). (D) N0 όγκους (

P

= 0,008). Ν, λεμφαδένων.

Η

Συζήτηση

Ως ένα σημαντικό μέλος της fos οικογένειας των μεταγραφικών παραγόντων, c-fos αποδείχθηκε ότι είναι ένας βασικός ρυθμιστής του πολλαπλασιασμού, της διαφοροποίησης , αγγειογένεση, εισβολή και μετάσταση του καρκίνου, μέσω της ΑΡ-1 που σχετίζονται με τους μηχανισμούς [11]. Ωστόσο, είναι ενδιαφέρον ότι το c-fos παίζει διαφορετικά, ακόμη και απέναντι ρόλους σε διαφορετικές μορφές καρκίνου. Σε μαστού και της ουροδόχου κύστης καρκίνους καθώς επίσης κύτταρα γλοιώματος [25-28], c-fos φαίνεται να έχει προ-ογκογόνο ιδιότητες, σε αντίθεση με τον καρκίνο των ωοθηκών [29]. Παρά το γεγονός ότι σε ένα ίδιο είδος κακοήθειας, PC, τα αποτελέσματα όσον αφορά την έκφραση και φαινοτύπων του c-fos παραμένει να είναι ασυνεπής. Χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημεία για λίγα άτομα, Lee et al. [19] βρήκαν ότι το c-fos ήταν εντόνως εκφρασμένο σε ιστούς PC, αλλά μόνο αδύναμη έκφραση παρατηρήθηκε σε μικρό αριθμό ασθενών που συμμετείχαν σε μια άλλη μελέτη [20]. Επιπλέον, τα ευρήματα ότι το c-fos ήταν ρυθμισμένα προς τα κάτω σε PC με μετάσταση λεμφαδένα και αυξημένη c-fos έκφραση επάγεται πολυφαρμακευτική αντίσταση 1 (MDR1) σε κύτταρα PC υποδεικνύουν τις πολύπλοκες ρόλους του μορίου σε PC [21,22]. Άλλες έρευνες που έδειξαν ότι η c-fos συμβάλλει στην κυτταρική κινητικότητα [30] και λειτουργεί ως ένας από τους στόχους κάποιων ογκοκατασταλτικών γονιδίων [31,32], υποστηρίζουν ογκογόνο δυναμικό του στην PC. Στην τρέχουσα έρευνα, η έκφραση του c-fos εντοπίστηκε για πρώτη φορά για περισσότερο από 300 ασθενείς με PC. Είναι απροσδόκητο ότι η χαμηλή c-fos έκφρασης είναι πιο συχνή σε καρκίνο σε σχέση με τους γειτονικούς ιστούς μη-καρκίνου (δοκιμή του McNemar). Στη συνέχεια, οι θετικές /δυνητικά θετικές συσχετίσεις μεταξύ υψηλή έκφραση του c-fos και μεταγενέστερο στάδιο Τ, καθώς και η παρουσία του περινευρικό εισβολή είχαν δείξει. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι το c-fos μπορεί να παίζουν κρίσιμους ρόλους σε τόσο στην έναρξη και την εξέλιξη του PC. Προηγούμενη εργασία βρήκε ότι c-fos επάγεται φλεγμονή μεσολάβηση ογκογένεση [33]. Επιπλέον, η χρόνια παγκρεατίτιδα (CP) ήταν γνωστή ως ένα σημαντικό αιτιολογικός παράγοντας του PC [34]. Ως εκ τούτου, εάν το c-fos παίζει σημαντικό ρόλο στη διαδικασία από CP στον υπολογιστή μπορεί να έχει ενδιαφέρον. Προτάθηκε ότι η K-ras, ένα κρίσιμο μεταλλαγμένο γονίδιο τόσο CP και PC, ενεργοποιείται Raf /MEK /εξωκυτταρικό σήμα ρυθμιζόμενη κινάση (ΕΚΚ) μονοπατιού μέσα από ένα πολύπλοκο καταρράκτη [34], ενώ ERK, ένα είδος μιτογόνο ενεργοποιημένη πρωτεΐνη κινάσης (ΜΑΡΚ), συμμετείχε στην ενεργοποίηση του c-fos [35]. Έτσι, η υψηλή c-fos έκφραση σε γειτονικούς ιστούς μη καρκινικά στην τρέχουσα μελέτη θα μπορούσε να δώσει μια πρώτη ένδειξη των επιπτώσεων της επί μετατροπή από φλεγμονή σε κακοήθεια στο πάγκρεας. Από την άλλη πλευρά, τα καρκινικά c-fos έκφραση αποκαλύφθηκε ότι είναι σημαντικά και οριακά σημαντική συσχέτιση με το στάδιο Τ και περινευρικό εισβολή, υποδεικνύοντας ότι αυτή η μεταγραφική παράγοντας μπορεί να είναι ένας υποκινητής της εξέλιξης PC. Λαμβανόμενα μαζί, τα δεδομένα μας υποστηρίζεται ότι c-fos χρησιμεύει ως πρωτο-ογκογονίδιο στην πορεία από κακοήθη μετασχηματισμό έως την εξέλιξη σε PC, διαφορετικό με προηγούμενη που δείχνει προς τα κάτω ρύθμιση της c-fos σε υπολογιστή με λεμφαδένα μετάσταση [21]. Στο μέλλον, λεπτομερή εξερευνήσεις για φαινοτύπων και τη σχετική μηχανισμούς που αξίζει να γίνει.

Έχει αποδειχθεί ότι οι c-fos συνδέεται με κακή ή καλή πρόγνωση σε πολλούς τύπους καρκίνων [12-18]. Ωστόσο, ο αντίκτυπός της στην έκβαση της PC δεν έχει διευκρινιστεί. Εδώ, αναφέρουμε ότι η υψηλή c-fos έκφρασης σε ιστούς του καρκίνου συσχετίστηκε με μη ικανοποιητική συνολική επιβίωση και στις δύο μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση, παρουσιάζοντας την εξουσία της ως ισχυρό προγνωστικό παράγοντα ζοφερή πρόγνωση PC. Τα αποτελέσματα που c-fos ήταν ανεξάρτητων προγνωστική σημασία σε ορισμένες υποκατηγορίες του PC ενισχύσει προγνωστικό ρόλο της. Τα ευρήματα αυτά, που υποστηρίζεται από την θετική σχέση ανάμεσα στην έκφραση του c-fos και κακοήθεις φαινότυποι των PC εγκατεστημένος στην παρούσα μελέτη, είναι συνεπείς με αυτές που προέρχονται από οστεοσάρκωμα, του πνεύμονα και του μαστού [12-14]. Δεν υπάρχει αμφιβολία ότι αυτά τα αποτελέσματα ανάλυσης επιβίωσης δείχνουν επίσης τη λειτουργία του c-fos ως πρωτο-ογκογονίδιο.

Εν κατακλείδι, τα δεδομένα μας έδειξαν ότι c-fos έκφραση σχετίζεται με την εξέλιξη και την θλιβερή πρόγνωση του υπολογιστή. Έτσι, αυτή η πρωτεΐνη θα μπορούσε να είναι μια νέα μοριακή εταιρεία κατασκευής PC.

Υποστήριξη Πληροφορίες

S1 Εικ. επικύρωση Ιδιαιτερότητα του πρωτογενούς αντισώματος έναντι c-fos σε καρκίνο του παγκρέατος.

(Α) με το κλείδωμα πεπτίδιο (αρχική μεγέθυνση χ 200). (Β) Χωρίς κλείδωμα πεπτίδιο (αρχική μεγέθυνση χ 200)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0120332.s001

(ΔΕΘ)