Αφηρημένο

Ιστορικό

Στην περίπτωση του καρκίνου του προστάτη, η έκφραση του όγκου των κανναβινοειδών CB

1 υποδοχείς συνδέεται με μια κακή πρόγνωση. Μια εξήγηση γι ‘αυτή την ένωση προέρχεται από πειράματα με επιμολυσμένα κύτταρα αστροκύτωμα, όπου μια έκφραση του υποδοχέα υψηλής CB προσλαμβάνει το μονοπάτι σηματοδότησης επιβίωσης Akt. Στην παρούσα μελέτη, ερευνήσαμε τη σχέση μεταξύ της CB

έκφραση ενός υποδοχέα και το μονοπάτι Akt σε καλά χαρακτηρίζεται προστάτη μικροσυστοιχιών καρκινικού ιστού.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Η φωσφορυλιωμένη Akt ανοσοαντιδραστικότητα (pAkt-IR) τα αποτελέσματα ήταν διαθέσιμα στη βάση δεδομένων. CB

1 ανοσολογική αντίδραση του υποδοχέα (CB

1IR) ήταν αναβαθμολόγηση από τα προηγουμένως δημοσιευμένα δεδομένα χρησιμοποιώντας την ίδια κλίμακα όπως pAkt-IR. Υπήρξε μια πολύ σημαντική συσχέτιση μεταξύ της CB

1IR και pAkt-IR. Περαιτέρω, οι περιπτώσεις με υψηλά επίπεδα έκφρασης των δύο βιοδεικτών ήταν πολύ πιο πιθανό να έχουν μια πιο σοβαρή μορφή της νόσου κατά τη διάγνωση από αυτούς με χαμηλά επίπεδα έκφρασης. Οι δύο βιοδείκτες είχαν προσθετικά αποτελέσματα, παρά μια αλληλεπίδραση, μετά από συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωσης.

Συμπεράσματα /Σημασία

Η παρούσα μελέτη παρέχει στοιχεία που είναι σύμφωνα με την υπόθεση ότι σε ένα υψηλό CB

έκφραση του υποδοχέα 1, η οδός σηματοδότησης Akt αρχίζει να εφαρμόζεται

Παράθεση:. Cipriano Μ, Häggström J, Hammarsten P, Fowler CJ (2013) σύνδεσης μεταξύ κανναβινοειδή CB

1 υποδοχέα και Akt σηματοδότηση στον προστάτη Καρκίνος. PLoS ONE 8 (6): e65798. doi: 10.1371 /journal.pone.0065798

Επιμέλεια: Vinod Κ Yaragudri, Nathan Kline από το Ινστιτούτο Ψυχιατρικής Έρευνας και Νέας Υόρκης Ιατρική Σχολή, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 20 Μαρτίου 2013? Αποδεκτές: 2η Μαΐου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 5 Ιούνη 2013

Copyright: © 2013 Cipriano et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς ευχαριστήσω το σουηδικό Συμβούλιο Έρευνας (Grant καμία 12158, ιατρικής.)? η Σουηδική Εταιρεία Καρκίνου (. Grant δεν CAN2010 /437)? Ίδρυμα λέοντος Cancer Research, Πανεπιστήμιο της Umea και οι Κονδυλίων Έρευνας της Ιατρικής Σχολής του Πανεπιστημίου της Umea για χρηματοδοτική στήριξη. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ο ενδοκανναβινοειδούς σύστημα (ΕΚΤ), που περιλαμβάνει την Ο-πρωτεΐνη συζευγμένη CB

1 και CB

2 υποδοχείς, ενδογενή τους συνδετήρες ανανδαμιδίου και 2-αραχιδονοϋλογλυκερόλη, και συνθετικά και καταβολικά ένζυμα τους, υπήρξε αποδειχθεί ότι εμπλέκονται στον έλεγχο του πολλαπλασιασμού, της μετανάστευσης και επεμβατική συμπεριφορά μιας μεγάλης ποικιλίας καρκινικών κυττάρων [1] – [5]. Το ανθρώπινο προστάτη εκφράζει λειτουργικά ενεργό CB

1 υποδοχείς [6], και ανανδαμιδίου μειώνει το ποσοστό της επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGF) και της προλακτίνης που διεγείρεται ανάπτυξη των καρκινικών κυτταρικών σειρών ανθρώπινου προστάτη με τρόπο που περιλαμβάνει ενεργοποίηση του CB

1 υποδοχείς [7], [8]. Σε αντίθεση, τόσο μιτογόνο και, σε υψηλότερες συγκεντρώσεις, αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις των κανναβινοειδών έχουν παρατηρηθεί για τα μη διεγερμένα κύτταρα καρκίνου του προστάτη [9] – [14], καθώς και τα αποτελέσματα που δεν σχετίζονται με τις αλληλεπιδράσεις με υποδοχείς CB [2], [14] – [16]. Μια ποικιλία μηχανισμών, συμπεριλαμβανομένης της παραγωγής κηραμιδίου, προς τα κάτω ρύθμιση των υποδοχέων EGF (EGFR) και τους υποδοχείς προλακτίνης, η αναστολή της δραστικότητας RhoA και διατηρούμενη ενεργοποίηση των εξωκυτταρικών κινασών σήματος ρυθμιζόμενη (Erk) έχουν ενοχοποιηθεί στις ανασταλτικές επιδράσεις των κανναβινοειδών κατά προστάτη κυτταρική ανάπτυξη καρκίνου ή την κινητικότητα [7], [8], [12], [17].

η χειραγώγηση των επιπέδων του 2-αραχιδονοϋλογλυκερόλη και συναφείς ομόλογα (κατά αποκλεισμός ή knockdown του μονοακυλογλυκερόλη λιπάσης καταβολική ένζυμο, η οποία είναι υπεύθυνη για την υδρόλυση αυτών των λιπιδίων) μειώνει την επιβίωση, την κινητικότητα και τις επεμβατικές ιδιότητες

in vitro

καθώς και ανάπτυξη

in vivo

ανδρογόνου-αναίσθητη PC-3 καρκίνου του προστάτη κύτταρα σε ένα τρόπο διαμεσολαβείται εν μέρει από CB

1 υποδοχείς [18], [19]. Αντιστρόφως, η αναστολή της σύνθεσης του 2-αραχιδονοϋλογλυκερόλη ή επιμόλυνση των κυττάρων με αμίδιο λιπαρού οξέος υδρολάση (FAAH), το ένζυμο που είναι υπεύθυνο για την υδρόλυση του ανανδαμιδίου, αυξάνει την invasivity του PC-3 κύτταρα in vitro [18], [20]. Αυτά τα στοιχεία είναι όλα συνεπή με την έννοια ότι το σύστημα της ΕΚΤ, πέραν του ότι έχει έναν πλούτο των άλλων ρυθμιστικών ιδιοτήτων στο σώμα [21], παίζει ρόλο στην τοπική έλεγχο των καρκινικών κυττάρων εξάπλωσης.

Το αντίστροφο του ρυθμιστικού ρόλου του συστήματος ΕΚΤ που περιγράφηκε παραπάνω είναι η δυνατότητα ότι το σύστημα είναι δυσλειτουργικό ΕΚΤ σε όγκους και ότι αυτό συμβάλλει στην παθογένεση της νόσου. Αρκετές μελέτες έχουν αναφέρει ότι οι δείκτες του συστήματος ΕΚΤ δείχνουν μια αλλαγμένη έκφραση σε τύπους καρκίνου όπως λεμφώματος κυττάρων του μανδύα και του παχέος εντέρου [22] – [24], αν και η κατεύθυνση της αλλαγής δεν είναι πάντα η ίδια. Σε μια μικρή ομάδα των περιπτώσεων με καρκίνο στο ήπαρ, για παράδειγμα, μια χαμηλή έκφραση του CB

1 υποδοχείς συνδέεται με μια φτωχότερη έκβαση εκείνων των περιπτώσεων με υψηλή έκφραση του CB

1 υποδοχείς [25], ενώ το αντίστροφο είναι αλήθεια για τον καρκίνο του παγκρέατος [26] και το στάδιο II μικροδορυφόρου σταθερό ορθοκολικού καρκίνου [24]. Στην περίπτωση του καρκίνου του προστάτη, και οι δύο CB

1 υποδοχείς και FAAH υπερεκφράζονται στον ιστό του όγκου σε σύγκριση με μη κακοήθη αυλική επιθηλιακού ιστού ή κυττάρων [20], [27] – [29] και σε ένα μεγάλο καλά χαρακτηρισμένο ομάδα ασθενών με μακρά παρακολούθηση, σημειώσαμε μια υψηλότερη συχνότητα των σοβαρών περιστατικών (Gleason σκορ 8-10) ανάμεσα σε αυτές τις περιπτώσεις, με CB υψηλό όγκο

1 υποδοχέα και /ή FAAH ανοσολογική αντίδραση [27], [29] . Περαιτέρω, για τις περιπτώσεις που ακολουθείται από το προσδόκιμο μετά τη διάγνωση, CB όγκου ανοσολογική

1 υποδοχέα (CB

1IR) παρέχει ισχυρή προγνωστική πληροφορία σε σχέση με συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωσης που είναι πρόσθετο σε αυτό που προβλέπεται από το Gleason score [27]. Έτσι, για παράδειγμα, για τις περιπτώσεις με Gleason σκορ 6-7 κατά τη διάγνωση, οι 15-year πιθανότητες της επιβίωση χωρίς συμβάντα για CB1IR βαθμολογίες & lt?

vs.

≥ τη μέση βαθμολογία, αντίστοιχα, ήταν 85 9% έναντι ± 9% [27].

Αν και η μελέτη παραπάνω σαφώς συνδέει ένα υψηλό CB

1 υποδοχέα ± 44 έκφρασης με τη σοβαρότητα της νόσου και την έκβαση του καρκίνου του προστάτη, δεν παρέχει πληροφορίες μηχανισμών ως προς το γιατί συμβαίνει αυτό. Ένας πιθανός μηχανισμός είναι ότι η ΕΚΤ συστήματος «διακόπτες» από το να είναι επιζήμια για τον καρκίνο του προστάτη κύτταρα σε χαμηλά έως μέτρια επίπεδα CB

1 η έκφραση του υποδοχέα στην προώθηση επιβίωσή τους σε υψηλά επίπεδα έκφρασης. Η θεωρητική βάση για την πρόταση αυτή προέρχεται από μια μελέτη με τη χρήση κυττάρων ποντικού αστροκύτωμα [30]. Σε αυτή τη μελέτη, τα κύτταρα επιμολύνθηκαν με πλασμίδια που περιέχουν ένα γονίδιο αναφοράς (eGFP, μια πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη) και είτε κανένας, CB

1 ή CB

2 υποδοχείς. Κλώνοι με χαμηλή έως μέτρια ή υψηλά επίπεδα του υποδοχέα στη συνέχεια επελέγησαν και κατεργάζεται με το CP55,940 αγωνιστή υποδοχέα CB. Σε χαμηλά έως μέτρια επίπεδα του υποδοχέα, ο αγωνιστής προκάλεσε απόπτωση οφείλεται εν μέρει σε μια παρατεταμένη διέγερση της οδού σηματοδότησης Erk. Ωστόσο, οι κλώνοι με επίπεδα έκφρασης υποδοχέα υψηλής έδειξε επιπροσθέτως η ενεργοποίηση του μονοπατιού σηματοδότησης Akt σε απόκριση προς τον αγωνιστή υποδοχέα CB. Αυτή η οδός είναι μια «επιβίωσης» μονοπάτι που ρυθμίζουν τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και την απόπτωση, και τα κύτταρα με επίπεδα έκφρασης υποδοχέα υψηλής CB δεν απόπτωση παρουσία του αγωνιστή υποδοχέα CB, εκτός Akt ήταν ταυτόχρονα αναστέλλεται [30].

Αν και η παραπάνω μελέτη παρέχει μια κομψή εξήγηση ως προς το γιατί η έκφραση του υποδοχέα υψηλής CB μπορεί να είναι επιβλαβής, εάν βασίζεται στην επιλεγμένη επιμολυσμένων κλώνων αστροκύτωμα και όχι από τον καρκίνο του προστάτη. Ωστόσο, η έκθεση ότι οι αγωνιστές των υποδοχέων κανναβινοειδών Δ

9-τετραϋδροκανναβινόλη και

R

– (+) – methananandamide αυξήσει την παραγωγή του φωσφορυλιωμένου Akt (pAkt) σε κύτταρα PC-3 με τρόπο αποκλειστεί από το CB

1 υποδοχέα rimonabant αντίστροφου αγωνιστή, και ότι η συγκέντρωση της Δ

9-τετραϋδροκανναβινόλη που χρησιμοποιείται (100 ηΜ) αυξάνει τον πολλαπλασιασμό των PC-3 κυττάρων [10] δείχνει μια «Akt-διακόπτης» (δηλαδή σύζευξη του CB

1 υποδοχείς στην οδό σηματοδότησης Akt) λειτουργεί σε αυτή την κυτταρική σειρά σύμφωνα με τους όρους που χρησιμοποιούνται από τις συγγραφείς.

Αν η σύνδεση ενός υψηλού CB

έκφραση του υποδοχέα 1 με τη σοβαρότητα της νόσου του καρκίνου του προστάτη και το αποτέλεσμα είναι το αποτέλεσμα ενός διακόπτη να μεσολαβεί η ΑΚΤ σηματοδότησης, ορισμένες προβλέψεις μπορούν να γίνουν: Πρώτον, υποθέσεις με CB υψηλό όγκο

1 υποδοχέα έκφραση αναμένεται να έχουν μεγαλύτερη δραστηριότητα στο μονοπάτι Akt και ως εκ τούτου θα πρέπει να υπάρξει μια θετική συσχέτιση μεταξύ της CB

βαθμολογίες 1IR και βαθμολογίες pAkt-IR σε ιστό του όγκου. Δεύτερον, τα ποσοστά πολλαπλασιασμού του όγκου θα πρέπει να είναι υψηλότερη σε περιπτώσεις με υψηλές CB

1IR και pAkt-IR (δηλαδή όπου ένα «διακόπτης» μπορεί να είναι λειτουργική) από ό, τι στην περίπτωση που ο ένας ή και οι δύο από αυτές τις δύο μεταβλητές είναι χαμηλή. Κατά συνέπεια, στην παρούσα μελέτη, χρησιμοποιήσαμε δεδομένα από μικροσυστοιχίες καρκίνο του προστάτη ιστό μας για να διερευνήσει την αλληλεπίδραση μεταξύ CB

1 υποδοχείς και η οδός σηματοδότησης Akt.

Μέθοδοι

υλικό Ασθενών και ανοσοχημεία

Ο όγκος pEGFR-IR και βαθμολογίες pAkt που χρησιμοποιούνται στην παρούσα μελέτη λήφθηκαν από τη βάση δεδομένων μας και έχουν δημοσιευτεί στο παρελθόν [31], [32]. Το υλικό ιστού (φορμόλη-σταθερό, έχει εμπεδωθεί με παραφίνη δείγματα) συλλέχθηκε στο Περιφερειακό Νοσοκομείο, Västerås, Σουηδία, μεταξύ 1975 και 1991, από ένα σύνολο 419 ασθενών που έχουν διαγνωστεί με καρκίνο του προστάτη σε διουρηθρική εκτομή για συμπτώματα από το κατώτερο ουροποιητικό σύστημα [33]. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν μέχρι κατασκευάστηκαν το 2003. μικροσυστοιχίες ιστών και γενικά μεταξύ 1 και 8 πυρήνες (συνήθως 5, συμπεριλαμβανομένων τόσο της πρωτοβάθμιας όσο και της δευτεροβάθμιας περιοχές βαθμό Gleason? Ιστό του όγκου) και 1-4 πυρήνες (μη κακοήθης ιστός) θα μπορούσε να σκοράρει για η εν λόγω παράμετρος. Οι πυρήνες βαθμολογήθηκαν με βάση την ένταση και την κατανομή για να δώσει ένα σύνθετο τιμή κυμαινόμενη μεταξύ 0-4 για pAkt-IR και 0-5 για pEGFR-IR 0-5 [31], [32]. Μέχρι τώρα αδημοσίευτα δεδομένα για όγκο ErbB2-IR (εύρος 0-4) ήταν επίσης διαθέσιμα στη βάση δεδομένων. Σε όλες τις περιπτώσεις, οι πυρήνες βαθμολογήθηκαν από τους ερευνητές οι οποίοι ήταν τυφλός στα δεδομένα του ασθενούς. Κλινικά δεδομένα (το σκορ Gleason, η τοπική βαθμολογία του όγκου, η παρουσία των μεταστάσεων κατά τη διάγνωση, όπως εκτιμάται από ένα σπινθηρογράφημα των οστών, και το ποσοστό του δείγματος που περιείχε όγκο (% γα)) και ο δείκτης Ki67, ένα μέτρο του πολλαπλασιασμού των κυττάρων ήταν όλα τα διαθέσιμα στη βάση δεδομένων (βλέπε [33], [34] για δημοσιευμένες αναφορές σχετικά με ορισμένες από αυτό το υλικό). Η έρευνα επιτροπή δεοντολογίας σε Umeå πανεπιστημιακό νοσοκομείο (Περιφερειακό Ηθικά Διοικητικό Συμβούλιο κριτική στη Umeå, Σουηδία) ενέκρινε τη μελέτη και παραιτήθηκε από την ανάγκη για πληροφορημένη συναίνεση.

Δεδομένου ότι η αρχική CB

βαθμολογίες 1IR επιστράφηκαν από ένα μόνο ερευνητής χρησιμοποιώντας ένα 0-3 κλίμακα [27], έχουμε εκλεγεί για να rescore τα ανοσοχρωματίστηκε πυρήνες όγκου ( «ΕθνΚΤ

1IR»), αλλά αυτή τη φορά χρησιμοποιώντας ψηφιοποιημένων εικόνων, δύο ανεξάρτητους ερευνητές (MC, CJF) και το ίδιο εύρος έντασης όπως χρησιμοποιούνται για pAkt-IR [32]. Οι κατανομές σε κάθε ένταση βαθμολογήθηκαν ως 0, 25, 50, 75 ή 100%. Έτσι, για παράδειγμα, ένας πυρήνας δέχεται κατά 25% ένταση 1, 25% ένταση 2 και 50% της έντασης 3 για το βιοδείκτη εν λόγω γραμμή θα στείλει 0,25 × 1 + 0,25 × + 0,5 Χ 3 = 2.25. Ένας ερευνητής (MC) σημείωσε επίσης τις μη-κακοήθεις πυρήνες. Για τους 2594 πυρήνες σκόραρε από τα δύο ερευνητές (συμπεριλαμβανομένων μερικών μη-κακοήθεις πυρήνες ακούσια Ο CJF), η ανάλυση συσχέτισης ενδο-class χρησιμοποιώντας ένα μεικτό μοντέλο και δοκιμών για τη συνοχή έδωσε άλφα ενός Chronbach του 0,94, και 1837 (71%) της οι πυρήνες βαθμολογήθηκαν ≤0.5 μονάδες του άλλου. Δεδομένου ότι οι πυρήνες με χρώση κάπου μεταξύ των μονάδων έντασης (0, 1, 2, 3 και 4) και τα τμήματα διανομής (0, 25, 50, 75 και 100%) που χρησιμοποιείται δεν είναι ασυνήθιστες, μια διαφορά στις βαθμολογίες έως 1 μπορεί να γίνει δεκτή. Ένα σύνολο των 95 (3,7%) των πυρήνων είχαν διαφορές στις βαθμολογίες μεγαλύτερη από 1. Οι διαφορές σε αυτές τις περιπτώσεις μπορεί να οφείλεται, για παράδειγμα, λόγω τυπογραφικά λάθη ή πρότυπα ανοσολογική αντίδραση που ήταν δύσκολο να σκοράρει. Κατά συνέπεια αυτά αναβαθμολόγηση, πάλι ανεξάρτητα και χωρίς την πρόσβαση στις προηγούμενες βαθμολογίες. Μετά την αναβαθμολόγησης, 6 πυρήνες απορρίφθηκαν λόγω της κακής ποιότητας (δηλαδή δεν θεωρούνται σκορ-θέση από τους δύο ερευνητές), 88 πυρήνες τώρα είχε σκοράρει κατά 1 μονάδα κάθε άλλου, και μόνο 1 πυρήνα με μια διαφορά βαθμολογίας μεγαλύτερη από 1 παρέμεινε. Ως εκ τούτου, αυτός ο πυρήνας αποκλείστηκε. Ο μεγάλος αριθμός των πυρήνων που αναλύθηκαν αντανακλούσε το γεγονός ότι αρκετές διαφάνειες κηλιδώθηκαν πάνω από μία φορά, αφού τεχνικό λάθος (έλλειψη χρώσης) ήταν ύποπτος κατά τα πρώτα τρία σε τέσσερες σειρές εκ της πρώτης σειράς των πυρήνων σε κάθε διαφάνεια. Αυτό επιβεβαιώθηκε όταν αναλύθηκαν τα επιμέρους βαθμολογιών: η κατανομή των βαθμολογιών για τις θέσεις 1-4 για την πρώτη σειρά των πυρήνων ήταν σημαντικά αριστερά μετατοπισμένο (δηλαδή πολλές δεκάδες 0-1 επιστρέφονται) στο πρώτο τρέξιμο σε σύγκριση με τις επόμενες εκτελέσεις, λαμβάνοντας υπόψη ότι οι κατανομές των βαθμολογιών για τις θέσεις 5-άκρο (είτε 7 ή 8, ανάλογα με την διαφάνεια) ήταν πολύ παρόμοια για τα πρώτα και τα επόμενα τρεξίματα. Κατά συνέπεια, οι βαθμολογίες για όλες τις θέσεις για την πρώτη εκτέλεση και πρώτης σειράς των βαθμολογιών απορρίφθηκαν. Διάμεση τιμές στη συνέχεια προσδιορίστηκαν για τις βαθμολογίες για κάθε ερευνητή (πυρήνες μόνο που δέχεται από τους δύο ερευνητές θεωρήθηκαν), και οι βαθμολογίες στη συνέχεια ο μέσος όρος πριν προστεθούν στη βάση δεδομένων. Η συσχέτιση μεταξύ της αρχικής CB

βαθμολογίες 1IR όγκου (κλίμακα 0-3) και η ΕθνΚΤ

βαθμολογίες 1IR όγκου (κλίμακα 0-4) ήταν πολύ υψηλό (rho του Spearman = 0,81, P & lt? 0,0001, n = 364) και η βέλτιστη (Youden) πριν προσδιοριστεί από έναν δημοσιογράφο Operated Χαρακτηριστική (ROC) καμπύλη των ΕθνΚΤ

δεδομένα 1IR για τους ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με το προσδόκιμο μετά τη διάγνωση με 15 χρόνια cut-off ήταν σε μια διάσπαση σε δεκάδες ≤2.75 και & gt?. 2.75

Στατιστικά

χρησιμοποιήθηκαν τρία στατιστικά προγράμματα λογισμικού. Ο εντός των συντελεστών συσχέτισης, Cox αναλογικών κινδύνων παλινδρόμησης και δύο-βήμα αναλύσεις συμπλέγματος διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας IBM SPSS εκδόσεις λογισμικού 20 και 21. Το τακτικό αναλύσεις παλινδρόμησης πραγματοποιείται με τη χρήση του λογισμικού που αναπτύχθηκε στα πλαίσια του έργου R για στατιστικούς υπολογισμούς (έκδοση 2.15.2) [ ,,,0],35]. Όλα τα άλλα στατιστικοί υπολογισμοί έγιναν χρησιμοποιώντας το στατιστικό πακέτο ενσωματωμένη στο GraphPad Prism 5 και 6 προγράμματα ηλεκτρονικών υπολογιστών για Macintosh (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Για τις αναλύσεις επιβίωσης, ένα γεγονός ορίστηκε ως ο θάνατος οφείλεται σε καρκίνο του προστάτη και καταχωρηθεί στη βάση δεδομένων ως «συμβάν = 1», επιτρέποντας έτσι τον προσδιορισμό της νόσου ειδικά επιβίωσης. Θάνατος από άλλες αιτίες λογοκρίθηκε, όπως και οι περιπτώσεις όπου ο ασθενής να ήταν ζωντανός κατά την ημερομηνία της τελευταίας παρακολούθησης. Τρεις περιπτώσεις όπου η έκβαση της νόσου ήταν άγνωστη αποκλείστηκαν από τις αναλύσεις για την επιβίωση.

Αποτελέσματα

Συσχέτιση του CB

1IR και pAkt-IR στα δείγματα των μικροσυστοιχιών του καρκίνου του προστάτη ιστό

στον πίνακα 1, οι τιμές rho Spearman που παρέχεται για τη συσχέτιση μεταξύ των ΕθνΚΤ

1IR και βαθμολογίες pAkt-IR στα δείγματα των όγκων. Εάν

1IR και pAkt-IR θα πρέπει να αναμένεται ένα CB υψηλής όγκου αποτελέσματα έκφραση

1 υποδοχέα σε ένα διακόπτη σε ένα Akt μονοπατιού [30], μια θετική συσχέτιση μεταξύ της ΕθνΚΤ. Αυτό πράγματι βρέθηκε (rho του Spearman = 0,29, P & lt? 0,0001, n = 274) για τους όγκους. Μια πολύ παρόμοια τιμή θεωρήθηκε (rho του Spearman = 0,27), όταν η αρχική CB

σκορ 1IR [27] χρησιμοποιήθηκαν στη θέση των ΕθνΚΤ

1IR. Θεωρητικά, αυτός ο συσχετισμός, αν και σημαντική, θα μπορούσε να προκληθεί μεταξύ δύο ανεξάρτητων μεταβλητών από ένα τρίτο παράγοντα: αν η παράμετρος Α, για παράδειγμα, που προκαλείται τόσο pAkt (με τη χρήση του ως κατάντη μόριο σηματοδότησης) και ταυτόχρονα αύξησε την σύνθεση του CB

1 υποδοχείς, ένας συσχετισμός μεταξύ pAkt-IR και ΕθνΚΤ

1IR θα δει. Μια προφανής υποψήφιος με το θέμα αυτό θα ήταν EGF υποδοχείς και οι στενά συνδεόμενες υποδοχείς ErbB2, δεδομένου ότι ζευγάρι να Akt σηματοδότησης στα κύτταρα του καρκίνου του προστάτη [36], [37]. Πράγματι, στην μικροσυστοιχία ιστού, τα pEGFR-IR και ErbB2-IR σκορ συσχετίστηκαν με pAkt-IR στον ιστό του όγκου (Πίνακας 1 και [32]). Ωστόσο, οι πρώτης και συσχέτιση δεύτερης τάξης συντελεστές για pAkt-IR και CB

1IR, που υπολογίζεται όπως περιγράφεται στο [38], παρέμειναν σε υψηλά επίπεδα όταν ελέγχεται για pEGFR-IR και ErbB2-IR (Πίνακας 1). Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της μη-κακοήθεις pAkt-IR και ΕθνΚΤ

βαθμολογίες 1IR (rho του Spearman = 0,066, n = 232, Ρ = 0,32).

Η

Οι επιμέρους βαθμολογίες που χρησιμοποιούνται σε αυτό το συσχέτιση ελήφθησαν από 1-8 πυρήνες όγκου ανά περίπτωση (βλέπε Μέθοδοι). Ωστόσο, δεδομένου ότι οι πυρήνες που περιλαμβάνει μία θήκη όγκου αποτελούνται από δύο πρωτογενών και δευτερογενών περιοχές βαθμό Gleason [33], είναι πιθανό ότι ένας συσχετισμός θα μπορούσε να δει στο επίπεδο του πυρήνα, δηλαδή ότι ένας πυρήνας από μια δεδομένη περίπτωση με χαμηλό CB

1IR θα έχουν χαμηλότερη pAkt-IR από έναν άλλο πυρήνα από την ίδια περίπτωση με υψηλό CB

1IR (βλέπε Εικ. 1Α για παραδείγματα δύο πυρήνες από το ίδιο συμβαίνει και με δραματικά διαφορετική CB

1IR) . Κατά συνέπεια, διερευνήσαμε τη συσχέτιση μεταξύ των ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR σε επιμέρους πυρήνες. Λόγω του μεγάλου αριθμού των πυρήνων άνοιξε και για τις δύο παραμέτρους (n = 892), θα μπορούσαμε να διαιρεί τα δεδομένα τυχαία σε ένα σύνολο ελέγχου (n = 594) και σετ επικύρωσης (n = 298) των πυρήνων. Και στις δύο ομάδες, μια σημαντική συσχέτιση παρατηρήθηκε, με πυρήνες στην κορυφή τεταρτημόριο του CB

1IR έχει μια σημαντικά μεγαλύτερη pAkt-IR από εκείνα στα δύο κάτω τεταρτημόρια (Εικ. 1Β, C).

πίνακας Α δείχνει δύο πυρήνες όγκου από την ίδια υπόθεση (Gleason score 7) δείχνει μια μεγάλη διακύμανση της CB

ένταση 1IR. Είχαν τις θέσεις 1 και 5 της σειράς όγκου με βέλη. Ο αριστερός πυρήνας σκόραρε 0.75 (50% σκοράρει 0, 25% σκοράρει 1, 25% βαθμολογία 2) από έναν ερευνητή, και 1 (25% σκοράρει 0, 50% σκοράρει 1, όρος 25% 2) από την άλλη. Το δικαίωμα πυρήνας σκόραρε 2.75 και από τις δύο ερευνητές (50% σκοράρει 2, 25% βαθμολογία: 3, 25% βαθμολογία 4 από έναν ερευνητή? 25% σκοράρει 2, 75% βαθμολογία: 3 από την άλλη ερευνητή). Πάνελ Β και Γ δείχνουν τις pAkt βαθμολογίες για μεμονωμένους πυρήνες κατά τη δοκιμή (n = 595, Πίνακας Β) και επικύρωσης (n = 297, Πίνακας C) σύνολα δεδομένων, διαιρούμενο σε κατά προσέγγιση ΕθνΚΤ

1IR τεταρτημόρια. Ο αριθμός των περιπτώσεων σε κάθε τεταρτημόριο παρουσιάζεται στο γράφημα, μαζί με το μέσο και διατεταρτημοριακά εύρη. * Ρ & lt? 0,05, ** Ρ & lt? 0,01, *** Ρ & lt? 0,001 για τις συγκρίσεις που παρουσιάζεται, αλλιώς δεν σημαντική (δοκιμή πολλαπλής σύγκρισης του Dunn ακόλουθα σημαντικά (Ρ & lt?. Δοκιμής 0,0001) Kruskal-Wallis rho του Spearman για συσχετισμούς μεταξύ του πυρήνα ΕθνΚΤ

1IR και ο πυρήνας pAkt-IR ήταν 0,29 και 0,28 (και τα δύο P & lt? 0,0001). για τη δοκιμή και την επικύρωση συνόλων, αντίστοιχα

η μελέτες

Σύλλογος δεν δείχνουν την αιτιότητα, αλλά οι πληροφορίες σχετικά με αυτό μπορεί να φανεί από τα δεδομένα με τη χρήση τεχνικών μη παραμετρική παλινδρόμηση. ένα δείγμα (80%) του συνόλου δεδομένων επιλέχθηκε τυχαία και ένα μη-γραμμικό πολλαπλής παλινδρόμησης (npreg στο στατιστικό πακέτο R) στη συνέχεια τρέχει για να δείτε ποιες μεταβλητές ήταν συναφή και δεν έγιναν. Αυτή η διαδικασία επαναλήφθηκε 1000 φορές, για τον εντοπισμό δυναμικά συναφείς μεταβλητές. Όταν pAkt-IR ήταν η εξαρτημένη μεταβλητή σε απόκριση σε ΕθνΚΤ

1IR και pEGFR-IR, οι δύο ανεξάρτητες μεταβλητές ποτέ αποκλείονται. η ίδιο συνέβη όταν pAkt-IR ήταν η εξαρτημένη μεταβλητή ως απάντηση στην ΕθνΚΤ

1IR και ErbB2-IR, και όταν ΕθνΚΤ

1IR ήταν η εξαρτημένη μεταβλητή και pAkt-IR και είτε pEGFR-IR ή ErbB2-IR ήταν η ανεξάρτητες μεταβλητές. Τα στοιχεία αυτά δεν προσθέσετε πληροφορίες σχετικά με την αιτιώδη συνάφεια. Ωστόσο, όταν ΕθνΚΤ

1IR ήταν η εξαρτημένη μεταβλητή και pAkt-IR, pEGFR-IR και ErbB2-IR ήταν ανεξάρτητες μεταβλητές, pAkt-IR αποκλείστηκε σε 100% των περιπτώσεων (οι άλλες δύο μεταβλητές ποτέ εξαιρούνται). Στην αντίστροφη ανάλυση (όταν pAkt-IR ήταν η εξαρτημένη μεταβλητή και των ΕθνΚΤ

1IR, pEGFR-IR και ErbB2-IR οι ανεξάρτητες μεταβλητές), ΕθνΚΤ

1IR αποκλείστηκε στο 80% των περιπτώσεων, ενώ τα άλλα δύο μεταβλητές δεν εξαιρέθηκαν. Δεδομένου ότι το ποσοστό αποκλεισμού ήταν υψηλότερο για pAkt-IR με ΕθνΚΤ

1IR ως εξαρτημένη μεταβλητή από ό, τι για τις ΕθνΚΤ

1IR με pAkt-IR ως εξαρτημένη μεταβλητή, τα στοιχεία δείχνουν ότι το σενάριο σύμφωνα με την οποία η ενεργοποίηση της Akt είναι κατάντη του CB

1 υποδοχείς είναι πιο πιθανό από την αντίθετη κατεύθυνση.

Σύλλογος όγκου ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR με τη βαρύτητα της νόσου κατά τη διάγνωση

Έχουμε αναφερθεί στο παρελθόν ότι τόσο όγκου CB

οι 1IR και pAkt-IR βαθμολογίες σε αυτό το υλικό ασθενή που σχετίζεται με τη σοβαρότητα της νόσου κατά τη διάγνωση [27], [32]. Ο συνδυασμός των δύο παραμέτρων, ωστόσο, δεν έχει μελετηθεί. Στο Σχ. 2, οι μεμονωμένες τιμές για τις περιπτώσεις σκόραρε τόσο για CB

1IR και pAkt-IR είναι χρωματικό κώδικα, βάσει των κλινικών /ιστοπαθολογικά δεδομένα τους (Gleason σκορ συχνότητα των μεταστάσεων κατά τη διάγνωση, το στάδιο του όγκου και του δείκτη Ki67 [ένα μέτρο του πολλαπλασιασμού των κυττάρων)]. Τα γραφήματα χωρίζονται σε τεταρτημόρια με βάση τις μέσες βαθμολογίες για τις δύο παραμέτρους. Τα διαγράμματα διασποράς εξυπηρετούν τον πρόσθετο σκοπό να αποδείξει ότι, αν και ο συντελεστής συσχέτισης μεταξύ της CB

1IR και pAkt-IR είναι ιδιαίτερα σημαντική (βλέπε παραπάνω), είναι μια πολύ μάλιστα από εξηγώντας τη βιολογική διακύμανση του συνόλου δεδομένων. Για τις περιπτώσεις που ομαδοποιούνται ως Gleason σκορ 4-5, 6 ή 7, δεν υπήρχε προφανής σχέση μεταξύ της βαθμολογίας Gleason και τη θέση στο γράφημα. Ωστόσο, οι περιπτώσεις με Gleason σκορ 8-10 συγκεντρωθεί στο πάνω δεξιά τεταρτημόριο του διαγράμματος (Σχ. 3Α). Ομοίως, περιπτώσεις όπου μεταστάσεις βρέθηκαν στην διάγνωση επίσης έτειναν να συγκεντρώνονται στο πάνω δεξί μέρος του γραφήματος (Εικ. 2Β), όπως έκανε και περιπτώσεις με ένα υψηλότερο ποσοστό του πολλαπλασιασμού των κυττάρων (Σχ. 2C) και το βαθμό του όγκου (Σχ . 2D).

Ο δείκτης Ki67 είναι μια συνεχής μεταβλητή που κυμαίνονται 0-48% στο σύνολο δεδομένων [34]. Οι δόσεις επιλέχθηκαν εδώ για επεξηγηματικούς σκοπούς, αλλά αντιπροσωπεύουν το κάτω του 50% ( «Ki67 Low»), το 50-75% ( «Ki67 ενδιάμεσο») και το κορυφαίο 25% ( «Ki67 υψηλή»). Οι διακεκομμένες γραμμές στα σχήματα δείχνουν τις μέσες βαθμολογίες για τις ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR για το σύνολο δεδομένων.

Η

Πίνακας Α δείχνει ένα διάγραμμα διασποράς των μεμονωμένων περιπτώσεων, έτσι ώστε τα ονόματα ομάδων στην οι άλλες ομάδες είναι ευκολότερο να ακολουθήσετε. Στα οικόπεδα Kaplan-Meier παρουσιάζεται στο Πάνελ Β έως Δ,

† Pca αναφέρεται στον αριθμό των ασθενών που πέθαναν εξαιτίας του καρκίνου του προστάτη κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης. Οι

2 τιμές είναι για τις δοκιμές log-rank (Mantel-Cox), με τις τιμές P εμφανίζονται. Το πάνελ Β, όλες οι περιπτώσεις? Πίνακας C, Gleason σκορ 4-6 περιπτώσεις? Πίνακας Α, Gleason σκορ 7-10 περιπτώσεις.

Η

Τα τεταρτημόρια στα στοιχεία βασίζονται σε μέση διασπάσεις των δύο παραμέτρων, και έκτακτης αναλύσεις των δεδομένων έδειξε ότι η κατανομή των κλινικών παραμέτρων ήταν σημαντικά διαφορετικά στις τεταρτημόρια (Πίνακας 2). Έτσι, για παράδειγμα, το% των περιπτώσεων με Gleason σκορ 8-10 κυμαίνονταν από 19% (κάτω αριστερό τεταρτημόριο) έως 59% (άνω δεξιά τεταρτημόριο) και παρόμοια πρότυπα παρατηρήθηκαν για τη συχνότητα εμφάνισης μεταστάσεων κατά τη διάγνωση, το στάδιο του όγκου, το ποσοστό των δειγμάτων που περιείχαν όγκου (% CA) και η Κί67 δείκτη (Πίνακας 2).

η

Αν και δραματική, τα στοιχεία που εμφανίζονται στο Σχ. 2 και στον πίνακα 2 δεν αναφέρει αν οι συσχετίσεις μεταξύ των δύο βιοχημικούς δείκτες και τα κλινικά δεδομένα είναι απλά προσθετικό ή αν υπάρχει μια αλληλεπίδραση του παρόντος. Αυτό ερευνήθηκε για τρεις από τις παραμέτρους (σκορ Gleason,% Ca και ο Ki67-index) χρησιμοποιώντας τακτικό παλινδρόμησης (σωρευτικά μοντέλο logit). Για παλινδρομήσεις χωρίς παράμετρο αλληλεπίδρασης, τις εισφορές των pAkt-IR και ΕθνΚΤ

1IR ήταν σημαντικές, όπως αναμενόταν (Πίνακας 3). Ωστόσο, σημαντικές συνεισφορές του όρου αλληλεπίδρασης pAkt-IR × ΕθνΚΤ

1IR παρατηρήθηκαν επίσης για Gleason σκοράρει και% περίπου όταν συμπεριλήφθηκαν στην ανάλυση (Πίνακας 3).

Η

Σύλλογος ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR με συγκεκριμένες νόσους επιβίωσης

Περίπου τα δύο τρίτα των περιπτώσεων στη βάση δεδομένων είχαν ακολουθηθεί από το προσδόκιμο μετά τη διάγνωση, αυτό είναι το τυπικό πρωτόκολλο θεραπείας κατά τη στιγμή της Σουηδίας. Αυτές οι περιπτώσεις μπορούν να παρέχουν χρήσιμες πληροφορίες σε σχέση με τη σύνδεση μιας δεδομένης βιοδεικτών με συγκεκριμένες νόσους επιβίωση. Αυτό έχει αναφερθεί προηγουμένως για τα δύο pAkt-IR και το αρχικό CB

βαθμολογίες 1IR [27], [32]. Η αλληλεπίδραση μεταξύ των δύο μεταβλητών, ωστόσο, δεν έχουν διερευνηθεί. Για να το κάνουμε αυτό, έχουμε χρησιμοποιήσει τα βέλτιστα cut-offs για τις δύο παραμέτρους (& lt? 2.75 και ≥2.75 για pAkt-IR [32] και η τιμή αποκοπής Youdin για ΕθνΚΤ

1IR (≤2.75 και & gt ?.. 2.75) για όλους τους 196 ασθενείς που ακολουθείται από το προσδόκιμο και σκόραρε τόσο για ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR (Σχήμα 3Α δείχνει την κατανομή των τιμών), υπήρχε ένα σαφές σχέδιο σύμφωνα με την οποία οι περιπτώσεις με τα αποτελέσματα και των δύο παραμέτρων παραπάνω η cut-off τιμές είχαν χειρότερη πρόγνωση από τις άλλες τρεις ομάδες (Εικ. 3Β). μια διμεταβλητή Cox αναλογικών κινδύνων ανάλυση παλινδρόμησης έδειξε ότι η προγνωστικές πληροφορίες που παρέχονται από ΕθνΚΤ

1IR ήταν πρόσθετο σε αυτό που προβλέπεται από pAkt-IR (Πίνακας 4). Ωστόσο, αυτό δεν αποτελεί έκπληξη δεδομένου ότι οι ομάδες έχουν διαφορετικές αναλογίες των περιπτώσεων με διαφορετικές βαθμολογίες Gleason (βλέπε Σχ. 2Α). Ωστόσο, με Gleason σκορ (ως διάμεση split) ελήφθησαν υπόψη, οι δύο παράμετροι που διατηρούνται τους προσθετικότητα (Trivariate κύρια αποτελέσματα της ανάλυσης, Πίνακας 4), και αυτό αντικατοπτρίζεται στα οικόπεδα Kaplan-Meier του Gleason σκορ 7-10 περιπτώσεις (Εικ. 3D). Ο όρος αλληλεπίδρασης pAkt-IR × ΕθνΚΤ

1IR, ωστόσο, δεν ήταν σημαντική είτε στην διμεταβλητή ή trivariate αναλύσεις (Πίνακας 4).

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη έχουμε διερευνηθεί η σχέση μεταξύ pAkt και CB

1 σε προστάτη καρκινικούς όγκους και κυτταρικές γραμμές ώστε να διερευνηθεί η πιθανότητα ότι υπάρχει μια «Akt διακόπτης» σε καρκίνο του προστάτη. Κατ ‘αρχάς, είναι ίσως αξίζει σχολιάζοντας το γεγονός ότι η ενεργοποίηση του CB

1 υποδοχείς θεωρείται εδώ από την άποψη της επιβίωσης των καρκινικών κυττάρων, ενώ πολλοί (αλλά όχι όλες) μελέτες σε κυτταρικές σειρές δείχνουν επιβλαβείς επιδράσεις των κανναβινοειδών κατά του καρκίνου κυττάρων [1] – [5], [39]. Ωστόσο, τα αποτελέσματα των κανναβινοειδών κατά κυττάρων όγκου μπορεί να είναι πιο περίπλοκη. Αυτό έχει καταδειχθεί κομψά σε ΝΟΙ-Η292 κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα σε παντελή στέρηση ορού: 300 ηΜ Δ

9-τετραϋδροκανναβινόλη (THC) παράγει μια ισχυρή αύξηση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων, όπως αξιολογείται με μία δοκιμασία ενσωμάτωσης θυμιδίνης, ενώ υψηλότερες συγκεντρώσεις THC ( 4-10 μΜ) παράγει μια σημαντική απόπτωση [40]. Μιτογονικό αποτέλεσμα του υπομικρογραμμομοριακές συγκεντρώσεις 50 και 100 ηΜ THC κατά την ενσωμάτωση θυμιδίνης παρατηρήθηκε σε καρκινικά κύτταρα PC-3 προστατικού ενώ 500 ηΜ THC ήταν χωρίς αποτέλεσμα [10]. Υψηλότερες συγκεντρώσεις του THC παράγουν απόπτωση σε αυτά τα κύτταρα, αν και αυτό φαίνεται να διαμεσολαβείται από έναν υποδοχέα-ανεξάρτητος μηχανισμός CB [15]. Είναι αξιοσημείωτο ότι μελέτες που διερευνούν τις αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις των κανναβινοειδών χρησιμοποιούν συχνά μικρο- αντί νανο-μοριακές συγκεντρώσεις των προσδεμάτων (για συζήτηση, βλέπε [2], [39]). Τέλος, αντιπολλαπλασιαστικές επιδράσεις του CB

1 ανταγωνιστές υποδοχέα /αντίστροφοι αγωνιστές όπως rimonabant έχουν επίσης αναφερθεί για καρκινικές κυτταρικές γραμμές [41], [42], αν και δεν είναι σαφές κατά πόσον τα αποτελέσματα οφείλονται στον αποκλεισμό των CB

1 υποδοχείς ή εκτός στόχου δράσεις των ενώσεων

υπάρχουν δύο βασικά ευρήματα της μελέτης, τα οποία συζητούνται με τη σειρά του:.

CB

έκφρασης και pAkt έκφρασης 1 υποδοχέα είναι συσχετίζεται θετικά με τον καρκίνο του προστάτη

Μία από τις προβλέψεις του μοντέλου διακόπτη pAkt είναι ότι η έκφραση της ΚΤ

1 υποδοχέων θα πρέπει να συσχετίζεται θετικά με pAkt στα καρκινικά κύτταρα. pAkt είναι μεταγενέστερος μόριο τελεστή για ένα ευρύ φάσμα των μονοπατιών σηματοδότησης. Αυτό αυξάνει τον κίνδυνο ψευδώς αρνητικά, όπου μια ένωση μεταξύ CB

1 υποδοχείς και pAkt χάνεται στο θόρυβο. Ωστόσο, μια ιδιαίτερα σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ της CB

1IR και pAktIR είχε δει και ο συσχετισμός διατηρήθηκε στο επίπεδο των ατομικών πυρήνων. Περαιτέρω, η συσχέτιση παρέμεινε σημαντική ακόμα και όταν ελέγχεται για δύο άλλους υποδοχείς γνωστό ζευγάρι να Akt, δηλαδή pEGFR και ErbB2 [36], [37].

CB

1IR και pAkt-IR συνεργάτης με τη βαρύτητα της νόσου κατά τη διάγνωση

Αρκετές μελέτες έχουν διερευνήσει τη σύνδεση των pAkt-IR με τη βαρύτητα της νόσου όπως εκτιμάται από το σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου και του δείκτη Ki67 [32], [43] – [46]. Σε γενικές γραμμές, μια υψηλή pAkt-IR συνδέεται με μια πιο σοβαρή μορφή της νόσου κατά τη διάγνωση, αν και υπάρχουν διαφορές μεταξύ των κοορτών (για συζήτηση, βλέπε [32]). Όσον αφορά την CB

1IR, οι δύο ομάδες έχουν διερευνηθεί. Στη μελέτη μας, χρησιμοποιώντας την παρούσα μεγάλη ομάδα των δειγμάτων που λαμβάνονται κατά τη διάγνωση μετά από διουρηθρική εκτομή για συμπτώματα από το κατώτερο ουροποιητικό σύστημα, μια σαφής σύνδεση με την Gleason σκορ και τα άλλα ιστοπαθολογικές μέτρων βρέθηκε [27]. Αντίθετα, σε ένα πολύ μικρότερο (n = 35) κοόρτη των δειγμάτων που λαμβάνονται κατά προστατεκτομή, δεν υπάρχει σαφής συσχέτιση μεταξύ

έκφραση του υποδοχέα 1 CB (αξιολογήθηκε σε πειράματα στυπώματος Western και με QT-PCR) και ο βαθμός Gleason παρατηρήθηκε, μολονότι τα επίπεδα έκφρασης ήταν υψηλότερα από ό, τι φαίνεται για τον ιστό ελέγχου [28] εάν ή όχι οι ασθενείς έλαβαν άλλες θεραπείες πριν από την προστατεκτομή δεν ενδείκνυται.

Δεδομένου ότι τόσο CB

1IR και pAkt-IR συνδέονται με τη νόσο βαρύτητα στην ομάδα μας, θα πρέπει να αναμένεται ότι οι περιπτώσεις με υψηλή βαθμολογία και των δύο δεικτών θα έχει υπερ-εκπροσώπηση των Gleason σκορ 8-10 και των άλλων ιστοπαθολογικών παραμέτρων της σοβαρότητας της νόσου. Αυτό πράγματι βρέθηκε. Ωστόσο, σε σχέση με το σκορ Gleason και το ποσοστό του δείγματος που σχετίζονται με όγκο, μια αλληλεπίδραση μεταξύ ΕθνΚΤ

1IR και pAkt-IR παρατηρήθηκε. Η ενεργοποίηση του Akt παράγει μια ποικιλία κυτταρικών επιδράσεων, συμπεριλαμβανομένης απενεργοποίηση του προ-αποπτωτική πρωτεΐνη BAD και αυξημένη ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του προστάτη σε ένα μοντέλο ξενομοσχεύματος [47], [48]. Τα ευρήματά μας συμφωνούν με ένα μοντέλο όπου ένα υψηλό CB έκφραση

1 υποδοχέα τροφοδοτεί να αυξηθεί Akt σηματοδότηση [30] πέραν αυτών που οφείλονται σε άλλες οδούς σηματοδότησης, αυξάνοντας έτσι την παθολογική φύση των καρκινικών κυττάρων και ως εκ τούτου τη σοβαρότητα της νόσου . Το πώς ακριβώς CB ενεργοποίηση 1 υποδοχέα

feeds για να επηρεάσει Akt της σηματοδότησης θα καλύτερα να διερευνηθεί σε καρκινικές κυτταρικές σειρές. Ωστόσο, σε κύτταρα ωοθήκης κινέζικου χάμστερ επιμολυσμένου με CB

1 υποδοχείς, αγωνιστές υποδοχέα CB όπως THC (1 μΜ), CP55,940 (25 ηΜ) και HU-210 (25 ηΜ) παράγουν μια ισχυρή ενεργοποίηση της Akt.