Αφηρημένο

Frizzled υποδοχέα ομόλογο 3 ήταν ρυθμιζόμενη σε διάφορες γαστρεντερικούς καρκίνους, όπως του οισοφάγου και του γαστρικού καρκίνου. Επιπλέον, frizzled ομόλογο 3 έχει αναφερθεί πρόσφατα ότι εκφράζεται σε ορθοκολικό αδένωμα δείγματα. Στην παρούσα μελέτη, διερευνήθηκε η κλινική σημασία της κατσαρωμένα πρωτεΐνης ομολόγου 3 σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου. Χρησιμοποιώντας ανοσοκυτταροχημική χρώση, frizzled έκφραση ομόλογο 3 εξετάστηκε σε 186 παχέος δείγματα καρκίνου, 79 παχέος δείγματα αδένωμα, 133 του παχέος δείγματα πολύποδα, 127 ορθοκολικού καρκίνου δείγματα με λεμφαδένων ή /και μακρινή μετάσταση, 310 δείγματα διαφόρων καρκίνο μη παχέος μεταστατικά καρκινώματα και 40 δείγματα με ταυτόχρονη εμφάνιση καρκίνου του παχέος εντέρου, ορθοκολικό αδένωμα και του παχέος πολύποδα. Η στατιστική ανάλυση χρησιμοποιήθηκε για να συσχετίζονται frizzled έκφρασης πρωτεΐνης ομολόγου 3 της clinicohistopathological παράγοντες, επανάληψη /μετάσταση και επιβίωση μετά παρακολούθησης για 42 μήνες σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο. Frizzled πρωτεΐνη ομόλογο 3 εκφράστηκε σε 100% του παχέος δείγματα καρκίνου, 89% ορθοκολικό αδένωμα δείγματα, 75% δείγματα ορθοκολικού πολύποδα και 69% φυσιολογικό ορθοκολικό επιθηλιακών ιστών. Επιπλέον, κατσαρωμένα ομόλογο 3 βαθμολογίες ανοσοκυτταροχημικού έχουν υψηλή συσχέτιση με ορθοκολικό εξέλιξη του καρκίνου. Επιπλέον, frizzled ομόλογο 3 εκφράστηκε σε ένα συγκριτικά χαμηλότερο ποσοστό του μεταστατικού ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα και μεταστατικό διαυγές νεφροκυτταρικό καρκίνωμα με εστιακή και πολύ ασθενή χρώση σε σχέση με άλλους τύπους όγκων μεταστατικό. Από την άλλη πλευρά, οι frizzled ομόλογο 3 βαθμολογίες ανοσοκυτταροχημική ορθοκολικού αδενώματος με σύγχρονη ορθοκολικά καρκινώματα ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα της καθαρής παχέος αδενωμάτων. Η στατιστική ανάλυση έδειξε ότι η περμανάντ ομόλογο 3 βαθμολογίες ανοσοκυτταροχημική συνδέθηκαν με το στάδιο κατά Dukes και την κατάσταση των λεμφαδένων. Τέλος, στρωματοποιημένη ομάδες των ασθενών με καρκίνο παχέος είχαν σημαντικές διαφορές στην επανάληψη /μετάσταση και την επιβίωσή τους. Συμπερασματικά, η παρούσα μελέτη μεγάλης κλίμακας έδειξε σαφώς ότι περμανάντ πρωτεΐνη ομόλογο 3 μπορεί να παράγει κλινικά σημαντικές πληροφορίες για τους ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου.

Παράθεση: Wong SCC, Ο CW, Chan ΧΜΛ, Chan AKC, Wong ΗΤ, Cheung MT, et al. (2013) Κλινική σημασία της Frizzled ομόλογο 3 Πρωτεΐνη σε καρκίνο του παχέος εντέρου ασθενείς. PLoS ONE 8 (11): e79481. doi: 10.1371 /journal.pone.0079481

Επιμέλεια: Masaru Katoh, Εθνικό Κέντρο Καρκίνου, Ιαπωνία

Ελήφθη: 5 Μαΐου, 2013? Αποδεκτές: 23, Σεπτεμβρίου, 2013? Δημοσιεύθηκε: 8 Νοεμβρίου 2013

Copyright: © 2013 Wong et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από την Άμεση επιχορήγηση από το κινεζικό Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ (Κωδικός Έργου: 2.041.412) και μια ιδιωτική δωρεά. Ωστόσο, οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου.

Αντικρουόμενα συμφέροντα: Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) είναι η τρίτη πιο συχνά διαγιγνώσκεται καρκίνος του σε όλο τον κόσμο, αντιπροσωπεύοντας πάνω από το. 1 εκατομμύρια κρούσματα και 600.000 θανάτους κάθε χρόνο [1]. Η ανάπτυξη του CRC είναι μια διαδικασία πολλαπλών σταδίων και μπορεί να αντιμετωπιστεί αυτή η ασθένεια, αν εντοπιστεί σε πρώιμο στάδιο, όταν είναι ως επί το πλείστον ασυμπτωματικά [2-4]. Παρά τις σημαντικές βελτιώσεις στην ανίχνευση, διάγνωση και θεραπεία της CRC κατά τις τελευταίες δεκαετίες, η μακροπρόθεσμη πρόγνωση του μεταστατικού ασθενείς CRC παραμένει φτωχή [5,6]. Κλινικά στοιχεία δείχνουν ότι τα τρέχοντα κριτήρια στάσης οι οποίες βασίζονται σε κλινικά και παθολογικά ευρήματα, αν και πρόσφατα αναθεωρήθηκε, δεν αντικατοπτρίζουν την διακύμανση στην πρόγνωση και επιβίωσης για μεταστατικό CRC [7]. Ως εκ τούτου, μια ακριβής προγνωστικός δείκτης που 1) καθορίζει τη βιολογική φύση και τη συμπεριφορά της CRC, και 2) αντανακλά τις διαφορές επιβίωση και την κλινική εμπειρία, θα είναι υψίστης σημασίας για τη βελτιστοποίηση της ατομικής μεταχείρισης των ασθενών CRC.

Wnt παράγοντες περιλαμβάνουν μία μεγάλη οικογένεια εκκρινόμενων γλυκοπρωτεϊνών που συμμετέχουν στην εμβρυϊκή ανάπτυξη με τη ρύθμιση σχηματοποίηση ιστό, οργανογένεση, προδιαγραφή του σχεδίου του σώματος και να προωθήσει την ομοιόσταση ιστού στον ενήλικα [8]. Στο κυτταρικό επίπεδο, Wnt παράγοντες ελέγχουν τον πολλαπλασιασμό, τη διαφοροποίηση, την επιβίωση, την κινητικότητα και την πολικότητα [9]. Ο αυστηρός έλεγχος των σηματοδότηση Wnt είναι ζωτικής σημασίας για τη σωστή ενορχήστρωση της ανάπτυξης και παρεκκλίνουσα συστατική ενεργοποίηση της οδού σηματοδότησης Wnt θα οδηγήσει σε ανεξέλεγκτη κυτταρική διάδοση, την ανάπτυξη και την επιβίωση, ως εκ τούτου την προώθηση της ανάπτυξης του καρκίνου του [9]. Περμανάντ πρωτεΐνη ομόλογο (FZD) είναι ένα επτά-pass υποδοχέα τύπου μεμβράνης και δέκα μέλη (FZD1-FZD10) έχουν εντοπιστεί σε ανθρώπους [10]. Wnt είναι ένας συνδέτης του FZDs και αποτελείται από 19 γονιδίων οικογένειας στον άνθρωπο [11]. Η σύνδεση των συνδετήρων Wnt σε υποδοχείς κυτταρικής επιφάνειας τους μετάγει ενδοκυτταρικά σήματα μέσω είτε κανονική ή μη κανονική μονοπάτι Wnt σηματοδότησης. Στην κανονική μονοπάτι σηματοδότησης Wnt, Wnts δεσμεύονται σε ένα σύμπλεγμα FZD και χαμηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνης υποδοχείς που σχετίζονται με 5 και 6 [12-14]. Τα προκύπτοντα σήματα εμποδίζουν φωσφορυλίωσης β-κατενίνης με πολυπρωτεϊνικό σύμπλεγμα που αποτελείται από αδενωματώδη πολυποδίαση coli, γλυκογόνο 3β συνθάσης κινάσης, κινάσης Casin 1 και axins, και να προωθήσει τη σταθεροποίηση του κυτοσολίου β-κατενίνης που κάποιες από αυτές θα μετατοπίζονται μέσα στον πυρήνα [12- 14]. Η πυρηνική β-κατενίνης θα συσχετίσει με Τ-κυττάρων παράγοντα /λεμφοκυττάρων παράγοντες μεταγραφής ενισχυτή για την ενεργοποίηση γονιδίων-στόχων που εμπλέκονται στην κυτταρική επιβίωση, τον πολλαπλασιασμό ή εισβολή [12-14]. Η μη κανονική Wnt σηματοδοτικό μονοπάτι αποτελείται από το Wnt /Ca

2+ μονοπάτι και Wnt /c-Jun Ν-τελική κινάση (πολικότητα των κυττάρων επίπεδη) μονοπάτι και Wnts δεσμεύονται σε ένα συγκρότημα που αποτελείται από FZD, υποδοχέα τυροσίνης κινάσης-όπως ορφανό υποδοχέα 2 /υποδοχέα που σχετίζονται με την κινάση τυροσίνης για την ενεργοποίηση των κατάντη σηματοδότησης [12-14]. Σε Wnt /Ca

2+ μονοπάτι, Wnt ενεργοποιεί ενδοκυτταρικού Ca

2+ σηματοδότηση, καθώς και Ca

2+ – εξαρτώμενων πρωτεϊνικών κινασών, όπως κινάση πρωτεΐνης C και καλμοδουλίνη κινάση πρωτεΐνης που εξαρτάται II [12- 14]. Στο μονοπάτι Wnt /JNK, διέγερση του υποδοχέα ενεργοποιεί Dishevelled, η οποία με τη σειρά της ενεργοποιεί την οικογένεια Rho του GTPases όπως RhoA και Rac [12-14]. RhoA διεγείρει την έκφραση του c-Jun μέσω φωσφορυλίωσης της c-Jun από Rho κινάση που σχετίζεται [12-14]. Εν ολίγοις, FZD διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο και στις δύο κανονικών και μη κανονικών μονοπατιών.

Ανθρώπινο

FZD3

χαρτογραφήθηκε στο χρωμόσωμα 8ρ21 [10,15].

FZD3

mRNA εκφράζεται σε διάφορους φυσιολογικούς ιστούς (σκελετικό μυ, νεφρό, πάγκρεας, παρεγκεφαλίδα και τον εγκεφαλικό φλοιό) [10] ότι είναι προς τα πάνω ρυθμισμένα σε αρκετούς καρκίνους (καρκίνωμα οισοφάγου, καρκίνωμα πνεύμονα πλακωδών κυττάρων, πρωτογενείς οξείες και λεμφοβλαστική λευχαιμία, μυέλωμα, λέμφωμα και σάρκωμα Ewing) [16-19]. Μια πρόσφατη έκθεση έδειξε ότι

FZD3

mRNA εκφράστηκε σε μια μικρή ομάδα των σποραδικές αδενώματος και οικογενή αδενωματώδη πολυποδίαση ιστούς αδένωμα [20]. Η σημασία του δεν είναι γνωστό ακόμη και ως εκ τούτου θα είναι ενδιαφέρον να εξεταστεί η έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 σε μια μεγάλη ομάδα πρωτογενών και μεταστατικών δείγματα CRC και ορθοκολικού αδενώματος (CAD) δείγματα. Οι πληροφορίες που λαμβάνονται θα είναι πολύ χρήσιμες για εμάς να εξετάσει την προγνωστική δυναμικό των FZD3 πρωτεΐνης σε ασθενείς με CRC. Επιπλέον, η έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 σε άλλους τύπους μεταστατικών καρκίνων εξετάστηκε επίσης προκειμένου να διερευνηθεί αν FZD3 πρωτεΐνη μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως συμπλήρωμα διαγνωστικός δείκτης για μεταστατική CRC.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με τις αρχές που διατυπώνονται στη Διακήρυξη του Ελσίνκι. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς ή τον πλησιέστερο συγγενή για τη χρήση αυτών των δειγμάτων στον τομέα της έρευνας. Από τη συγκατάθεση των ασθενών δεν ήταν δυνατό για αρχειακούς ιστούς καθώς μερικοί ασθενείς είχαν αποβιώσει κατά το χρόνο της μελέτης, η επιτροπή δεοντολογίας παραιτηθεί ρητά την ανάγκη για συναίνεση από τους ασθενείς. Η μελέτη εγκρίθηκε από την Κλινική Επιτροπή Ερευνητικής Δεοντολογίας του Queen Elizabeth Hospital, το Χονγκ Κονγκ, Ειδική Διοικητική Περιφέρεια (Χονγκ Κονγκ).

ιστών Δείγματα

Επτά ομάδες της φορμόλης σταθερό, παραφίνη-ενσωματωμένες (FFPE ) δείγματα είχαν προσληφθεί: 1) CRC με Dukes σύστημα ταξινόμησης στάδιο Α (43), το στάδιο Β (48), το στάδιο Γ (63), το στάδιο D (32), σύνολο: 186, 2) CAD με ήπια δυσπλασία (25), μέτρια δυσπλασία (28), σοβαρή δυσπλασία (26), σύνολο: 79, 3), ορθοκολικό πολύποδας ο οποίος είναι ειδικά ορίζεται ως μη αδενωματώδεις ή μη νεοπλασματικά πολύποδες που αποτελούνται από νεαρά (35), υπερπλαστικό (40), Peutz-Jeghers ( 28) και φλεγμονώδεις πολύποδες (30), σύνολο: 133, 4) μπλοκ ένα FFPE με λεμφαδένα μετάσταση από κάθε δείγμα Dukes C, σύνολο: 63, 5) ένα τετράγωνο FFPE καθένα με λεμφαδένες και απομακρυσμένες μετάσταση από κάθε δείγμα Dukes D, σύνολο: 64, 6) τριακόσιοι και με δέκα μη-CRC μεταστατικά καρκινώματα τα οποία ο πρωτογενής όγκος ήταν αντίστοιχα ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC) (23), νεφρικό καρκίνωμα σαφής κυττάρων (RCCC) (25), πλακώδες καρκίνωμα (SCC1) (30) , αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα (LAC) (25), πνεύμονα μη-μικροκυτταρικό καρκίνωμα (LNSCC) (27), θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς (PTC) (24), καρκίνωμα μαστού (BC) (28), των ωοθηκών καρκίνωμα σαφής κυττάρων (OCCC) ( 30), τραχηλικό καρκίνωμα μη-μικρών κυττάρων (CNSCC) (20), ορώδες αδενοκαρκίνωμα σάλπιγγα (FTSAC) (22), καρκίνωμα μεταβατικών κυττάρων (TCC) (23), καρκίνωμα μικρών κυττάρων (SCC2) (15) και καρκίνωμα με νευροενδοκρινή διαφοροποίηση (CND) (18), 7) δείγματα από σαράντα ασθενείς CRC (10 Dukes Α, 10 Dukes Β, 12 Dukes C, 8 Dukes D) με ταυτόχρονη εμφάνιση CRC, αδενώματος και πολύποδας (120), ανασύρθηκαν από τα αρχεία (2005-2008) της ανατομικής Παθολογίας και Κυτταρολογίας Εργαστήριο, Τμήμα Παθολογίας, Queen Elizabeth Hospital, Χονγκ Κονγκ, για FZD3 ανοσοκυτταροχημική χρώση (ΔΠΔ).

Οι περισσότερες περιπτώσεις τα αδενοκαρκινώματα του παχέος εντέρου στην πρώτη ομάδα είχαν μετρίως διαφοροποιημένων (78%), ενώ οι υπόλοιποι είτε καλά διαφοροποιημένα (5%) ή κακώς διαφοροποιημένα (17%). Η κατανομή του φύλου των ασθενών αδενοκαρκίνωμα ήταν 58% άνδρες και 42% γυναίκες. Η ηλικία κυμαινόταν 42-89 ετών. Από τα 79 δείγματα που εξετάστηκαν αδενώματος σε ομάδα 2, 59% ήταν σωληνοειδές, 35% ήταν tubulovillous, και 6% ήταν λαχνών αδενώματα. Τα ποσοστά του ήπια, μέτρια και σοβαρή δυσπλασία στα αδενώματα ήταν 32, 35 και 33, αντίστοιχα. Η κατανομή του φύλου των ασθενών αδενώματος ήταν 53% άνδρες και 47% γυναίκες. Η ηλικία κυμαινόταν 28-85 ετών. Οι πολύποδες αξιολογούνται ομάδα 3 ήταν νεαρά (26%), υπερπλαστικό (30%), Peutz-Jeghers (21%), και φλεγμονώδεις πολύποδες (23%). Από τους 133 πολύποδες, η κατανομή του φύλου ήταν 51% άνδρες, 49% γυναίκες και η ηλικία κυμαινόταν 23-76 ετών. Η κλινική πληροφορίες των ασθενών με ταυτόχρονη εμφάνιση CRC, αδενώματα και πολύποδες στην έβδομη ομάδα είχαν μετρίως διαφοροποιημένα (75%), καλά διαφοροποιημένα (7%) ή κακώς διαφοροποιημένα (18%). Η κατανομή του φύλου των ασθενών αδενοκαρκίνωμα ήταν 60% αρσενικά και 40% θηλυκά. Η ηλικία ήταν από 45 μέχρι 87 ετών

Antibody

FZD3 μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντι-ανθρώπου (αραίωση 1: 100, κλώνος 169310, MAB1001, R &? D Systems, Inc., Minneapolis. , USA) χρησιμοποιήθηκε.

χρώση ΔΠΔ και

αξιολόγηση

Serial τμήματα ιστού (πάχους 4 μm) κόπηκαν και ανάκτηση αντιγόνου διεξήχθη χρησιμοποιώντας Bond Επιτόπου ανάκτηση Λύση 2 για το Bond-max αυτοματοποιημένη ανοσοκηλιδωτή (Vision BioSystems, Mount Waverley, Αυστραλία) στους 100 ° C για 25 λεπτά. Η χρώση πραγματοποιήθηκε σύμφωνα με ένα πρότυπο πρωτόκολλο στο ανοσοκηλιδωτή. επιλεγμένο σύστημα ανίχνευσης Polymer ήταν να αποφευχθεί το πρόβλημα της μη ειδικής χρώσης ενδογενούς βιοτίνη. Οισοφαγικό καρκίνωμα χρησιμοποιήθηκε ως θετικός έλεγχος [16], η οποία τοποθετείται σε κάθε διαφάνεια δοκιμής και αρνητικοί έλεγχοι διεξήχθησαν με αντικατάσταση του αντισώματος με tris αλατούχο ρυθμιστικό διάλυμα. Προκειμένου να μετρηθεί η έκφραση FZD3 σε κάθε δείγμα ασθενούς με ακρίβεια, το μέγιστο αριθμό των κυττάρων-στόχων με την ένταση χρώσης που αντανακλά την γενική πρότυπο έκφρασης είναι τα βασικά κριτήρια για τη βαθμολόγηση. Τα χρωματισμένα πλακίδια αξιολογήθηκαν σε τουλάχιστον 5 τομείς με το μεγαλύτερο αριθμό των κυττάρων-στόχων υπό το φως του μικροσκοπίου σε Χ400 μεγέθυνση από 2 ανεξάρτητους παρατηρητές, χωρίς γνώσεις των κλινικών αποτελεσμάτων και σε περίπτωση διαφωνίας, επιτεύχθηκε συμφωνία μετά από διεξοδική συζήτηση και εξέταση διαφάνειες χρησιμοποιώντας πολυ-με επικεφαλής μικροσκόπιο. Περίπου 250 κύτταρα θα πρέπει να συνυπολογίζονται σε κάθε τομέα και ως εκ τούτου τουλάχιστον 1.250 κύτταρα θα πρέπει να υπολογίζονται για κάθε δείγμα ασθενούς. Όλα τα πλακίδια βαθμολογήθηκαν ημι-ποσοτικά και εκφράζεται ως όρος ICC πολλαπλασιάζοντας το «ποσοστό των θετικών κυττάρων» και την «ένταση χρώσης», όπως περιγράφηκε προηγουμένως [21]. Ένταση χρώσης βαθμολογήθηκε ως εξής: 0 = αρνητική? 1 = αδύναμη? 2 = μέτρια? 3 = ισχυρή? και 4 = πολύ ισχυρή. Το σκορ ICC κυμαίνεται από 0 έως 400. Η βαθμολόγηση των ποσοστό και ένταση χρώσης ήταν στοχοθετημένη προς 1) κύτταρα CRC, 2) κύτταρα CAD και 3) που πρόσκειται φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα. Μεμβρανώδη χρώση πρέπει να είναι το αναμενόμενο αποτέλεσμα. Ωστόσο, η εμπειρία μας έδειξε ότι η κηλίδωση ICC χρησιμοποιώντας διαμινοβενζιδίνη ως χρωμογόνο θα παρήγαγε ένα παχύτερο μεμβρανώδη χρώσης η οποία ήταν παρόμοια με κυτταροπλασματική χρώση. Εκτός αυτού, το αντίσωμα που χρησιμοποιείται σε αυτή τη μελέτη είχε την καλύτερη απόδοση μεταξύ των αντισωμάτων τα οποία έχουν ελεγχθεί.

Η στατιστική ανάλυση

Η διαφορά στις βαθμολογίες ΔΠΔ της FZD3 πρωτεΐνης μεταξύ CRC, CAD και δίπλα φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα του παχέος εντέρου μελετήθηκε χρησιμοποιώντας μη-παραμετρικό τεστ Kruskal-Wallis. Επιπλέον, μη-παραμετρικό τεστ συσχέτισης τάξης Spearman χρησιμοποιήθηκε για να εξετάσει κατά πόσον τα αποτελέσματα ICC FZD3 συσχετίστηκαν με CRC εξέλιξη και τα στάδια ταξινόμησης Dukes. Mann Whitney U test χρησιμοποιήθηκε για να εξετάσει κατά πόσον οι βαθμολογίες ΔΠΔ της CAD με σύγχρονη ορθοκολικό καρκίνωμα είχαν σημαντική διαφορά από εκείνες του καθαρού CAD. Για συσχέτιση με κλινικές παραμέτρους, πολυμεταβλητή παλινδρόμηση χρησιμοποιήθηκε για να αναλυθεί το κατά πόσον τα αποτελέσματα ICC FZD3 συσχετίστηκαν με τα κλινικο-ιστοπαθολογικών παράγοντες των ασθενών και chi-square test χρησιμοποιήθηκε για να εξετάσει τη σχέση μεταξύ των βαθμολογιών του ΔΠΔ FZD3 και υποτροπιάζοντα ή μεταστατικό CRC. Η συνολική επιβίωση ορίστηκε ως ότι από την ημερομηνία της προς την ημερομηνία του θανάτου λόγω καρκίνου. Η μέθοδος Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστεί η πιθανότητα επιβίωσης και δοκιμασία log-rank χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση της επιβίωσης μεταξύ των ομάδων και Cox μοντέλο αναλογικών κινδύνων εφαρμόστηκε για τον προσδιορισμό των ανεξάρτητων προγνωστικοί παράγοντες της επιβίωσης. (Στατιστικό πακέτο για το 16,0 λογισμικό Κοινωνικών Επιστημών έκδοση για Windows, στατιστικά IBM SPSS, Chicago, IL., ΗΠΑ). Ένα

P

αξία & lt? 0.05 θεωρήθηκε ότι είναι στατιστικώς σημαντική σε όλες τις αναλύσεις. Όλα

P τιμές

δύο-ουρά.

Αποτελέσματα

ΔΠΔ χρώση

Όπως αναφέρεται στην ενότητα χρώση ΔΠΔ και την αξιολόγηση, ένα παχύτερο μεμβρανώδη χρώσης που έμοιαζε με κυτταροπλασματική χρώση εντοπίστηκε

. Μεταξύ των 955 διαφάνειες που έχουμε εξετάσει, μεταξύ των ατόμων παραλλαγή βρέθηκε μόνο σε 16 διαφάνειες (1,7%) και τη συναίνεση επιτεύχθηκε μετά από συζήτηση χρησιμοποιώντας ένα πολυ-με επικεφαλής μικροσκόπιο.

χρώση ICC έδειξε ότι FZD3 πρωτεΐνη εκφράστηκε σε 100% (186/186) των δειγμάτων CRC, 89% (70/79) των δειγμάτων CAD, το 75% (100/133) των δειγμάτων ορθοκολικού πολύποδα και 69 % (129/186) των φυσιολογικών επιθηλιακών ιστών παχέος πλησίον ιστούς CRC. Μια αντιπροσωπευτική μικροφωτογραφία από κάθε τύπο δείγματος στην πρώτη ομάδα δείχθηκε στο Σχήμα 1. Θετικός έλεγχος του καρκινώματος του οισοφάγου έδειξε έντονη θετική κυτταροπλασματική χρώση ενώ αρνητικό έλεγχο δεν είχε καμία χρώση ICC (Σχήματα 1Ε και 1Ρ). Λεπτομερής ανάλυση έδειξε ότι η ανοσοαντιδραστικότητα του FZD3 πρωτεΐνης, όπως φαίνεται από τα αποτελέσματα ICC, είχαν σημαντική διαφορά μεταξύ CRC, CAD, ορθοκολικού πολύποδα και φυσιολογικό ορθοκολικό επιθηλιακών ιστών (Εικόνα 2,

P

& lt? 0,0001, Kruskal-Wallis δοκιμής) και το εύρος και η διάμεση τιμή των βαθμολογιών ICC σε διάφορους υπόδειγμα τύπους φαίνονται στον πίνακα 1. FZD3 βαθμολογίες ICC συσχετίζονταν ισχυρά με τα στάδια της εξέλιξης του CRC (

P

& lt? 0,0001, δοκιμή Spearman rank συσχέτιση ). Επιπλέον, οι βαθμολογίες ΔΠΔ της FZD3 πρωτεΐνης σε δείγματα CRC συσχετίστηκε σημαντικά με το στάδιο Dukes (Σχήμα 3,

P

& lt? 0,0001, Spearman test συσχέτισης βαθμού). Επιπλέον, τα ευρήματά μας έδειξαν ότι FZD3 πρωτεΐνη εκφράστηκε σε 100% μεταστατικά κύτταρα CRC σε λεμφαδένες ή /και απομακρυσμένα όργανα από Dukes 3 και 4 δείγματα, αντιστοίχως (Σχήμα 4). Σύμφωνα με τα αποτελέσματα αυτά, συνεχίσαμε να εξετάσει κατά πόσον FZD3 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως συμπλήρωμα διαγνωστικό δείκτη για το μεταστατικό CRC πραγματοποιώντας χρώση ΔΠΔ FZD3 σε 310 δείγματα μεταστατικό καρκίνωμα μη-CRC. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι FZD3 πρωτεΐνη εκφράστηκε σε 17% (4/23) του HCC, το 12% (3/25) των RCCC, 80% (24/30) των SCC1, 84% (21/25) των ΛΑΚ, 82% (22/27) των LNSCC, 88% (21/24) των PTC, 86% (24/28) των BC, 80% (24/30) των OCCC, 85% (17/20) των CNSCC, 82% (18/22) του FTSAC, 74% (17/23) των TCC, 100% (15/15) των SCC2 και 100% (18/18) των CND (Σχήματα 5Α και 5Β). Σε περιπτώσεις με θετικά αποτελέσματα, η λεπτομερής εξέταση έδειξε ότι η χρώση ήταν εστιακό και πολύ αδύναμη HCC, RCCC σε σύγκριση με εκείνες σε άλλους τύπους όγκων (Εικόνες 5Β και 6).

Απλή αναζήτηση καρκίνος του παχέος εντέρου

ορθοκολικού αδενώματος

παχέος πολύποδα

παρακείμενο φυσιολογικό επιθηλιακό ιστό

Αριθμός specimens18679133186Range του ΔΠΔ scores243 4000 σε 3470 – 3600 για τα αποτελέσματα του ΔΠΔ 279Median 32724119297.5Table 1. Το εύρος και η διάμεση τιμή των βαθμολογιών ΔΠΔ σε διάφορους τύπους δείγματος.

CSV CSV Κατεβάστε

Η

(Α) Ποσοστό των διαφόρων μη-CRC μεταστατικά καρκινώματα με FZD3 χρώση ICC και (Β ) τα αποτελέσματα ICC του FZD3 σε διάφορα μη-CRC μεταστατικά καρκινώματα. (HCC = ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, RCCC = νεφροκυτταρικό σαφής κυττάρου, SCC1 = καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων, LAC = αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα, LNSCC = πνεύμονα καρκίνωμα μη-μικρών κυττάρων, PTC = θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς, καρκίνωμα BC = μαστού, OCCC = ωοθήκη σαφής καρκίνωμα , CNSCC = τραχηλικό καρκίνωμα μη-μικροκυτταρικού καρκίνου, FTSAC = σάλπιγγα ορώδες αδενοκαρκίνωμα, TCC = καρκίνωμα μεταβατικού κυττάρου, SCC2 = μικροκυτταρικό καρκίνωμα και CND = καρκίνωμα με νευροενδοκρινή διαφοροποίηση).

Η

Παρόμοια παρατηρήσεις αποτελέσματα για δείγματα με ταυτόχρονη εμφάνιση του ορθοκολικού καρκινώματος, CAD και του παχέος πολύποδα. χρώση ICC για FZD3 παρατηρήθηκε στο 100% (40/40) των CRC, 93% (37/40) των CAD, 70% (28/40) των ορθοκολικού πολύποδα. Επιπλέον, τα αποτελέσματα ICC FZD3 έχουν υψηλή συσχέτιση με τα στάδια εξέλιξης της CRC (

P

& lt? 0,0001, Spearman test συσχέτισης βαθμού). Ενδιαφέροντος, οι βαθμολογίες ICC του CAD με σύγχρονη ορθοκολικό καρκίνωμα ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα της καθαρής CAD (

P

& lt? 0,001, Mann Whitney U test, Σχήμα 7).

Η

Η πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης

ανάλυση παλινδρόμησης πολυπαραγοντική εφαρμόστηκε για να εξετάσει κατά πόσον τα αποτελέσματα ICC FZD3 συσχετίστηκαν με τις clinicohistopathological παράγοντες του 186 Dukes Ένας στους ασθενείς D CRC. Σημαντικές συσχετίσεις βρέθηκαν με το στάδιο Dukes (

P

& lt? 0.001) και την κατάσταση των λεμφαδένων (

P

& lt? 0.05), αλλά όχι για την ηλικία (

P

= 0,547) , το φύλο (

P

= 0,813), το στάδιο του όγκου (

P

= 0,284) και του βαθμού διαφοροποίησης (

P

= 0,462).

υποτροπιάζοντα ή μεταστατικό CRC

Ο διάμεσος αριθμός των βαθμολογιών ΔΠΔ FZD3 από το 154 Dukes A σε ασθενείς C CRC ήταν 321,5. Χρησιμοποιώντας αυτό το μέσο αριθμό ως το σημείο αποκοπής, 27 ασθενείς με FZD3 βαθμολογία ΔΠΔ & gt? 321,5 και 8 ασθενείς με βαθμολογία ΔΠΔ FZD3 ≤ 321,5 είχε υποτροπιάζοντα ή μεταστατικό CRC μετά την παρακολούθηση επί 42 μήνες και η συσχέτιση μεταξύ των βαθμολογιών FZD3 ICC και υποτροπιάζοντα ή μεταστατικό CRC ήταν ιδιαίτερα σημαντική (Chi-square test: χ

2 = 13,34 ?

P

& lt? 0.001).

Η συνολική επιβίωση των ασθενών με CRC

Συνολικά καμπύλες επιβίωσης χαράχθηκαν για τους ασθενείς CRC με FZD3 βαθμολογίες ΔΠΔ & gt? 327 και εκείνων με τα αποτελέσματα ICC FZD3 ≤ 327, όπου 327 είναι ο μέσος αριθμός των βαθμολογιών ΔΠΔ FZD3 από την 1

ου ομάδα των 186 Dukes A σε ασθενείς D CRC. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι η επιβίωση για αυτές τις 2 ομάδες ασθενών ήταν σημαντικά διαφορετική (

P

& lt? 0,0001, δοκιμασία log-rank, Εικόνα 8Α). Για την ανάλυση των δεδομένων με πιο συγκεκριμένο τρόπο, οι βαθμολογίες FZD3 ΔΠΔ χωρίστηκαν σε 4 ομάδες μετά την ευθυγράμμισή του με φθίνουσα σειρά: 1) έκφραση υψηλής FZD3: υψηλότερο του 25% (76% έως 100%) αποτελέσματα ICC, 2) μέτρια υψηλή έκφραση FZD3: δεύτερο υψηλότερο 25% (51% έως 75%) βαθμολογίες ΔΠΔ, 3) μέτρια χαμηλή έκφραση FZD3: δεύτερο χαμηλότερο 25% (26% έως 50%) βαθμολογίες ICC και 4) χαμηλή έκφραση FZD3: χαμηλότερο 25% (0 % έως 25 βαθμολογίες%) ICC. Όπως φαίνεται στα Σχήματα 8Β και 8C, η επιβίωση μεταξύ των ομάδων 1 και 4 και των ομάδων 2 και 3 ήταν σημαντικές (

P

& lt? 0,0001 για το Α vs D και

P

& lt? 0,05 για το Β vs C, δοκιμασία log-rank). Τέλος, οι ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες της συνολικής επιβίωσης που προσδιορίζονται από το μοντέλο παλινδρόμησης αναλογικού κινδύνου του Cox βρέθηκαν να είναι αποτέλεσμα ΔΠΔ FZD3 (

P

= 0,016) και την κατάσταση των λεμφαδένων (

P

= 0.037) .

Η

Συζήτηση

FZD3 είναι ένας υποδοχέας για την πορεία Wnt σηματοδότησης και FZD3 πρωτεΐνη είναι απαραίτητη για την ανάπτυξη των μεγάλων εκτάσεων ινών στην έκφυσης κεντρικό νευρικό σύστημα [22], νευρική ακρολοφία [23] και την ανάπτυξη του θύλακα της τρίχας [24]. Επιπλέον, FZD3 πρωτεΐνη έχει ένα κυρίαρχο ρόλο στην Wnt-προκαλούμενη έκφυση νευρίτη σε Ewing κύτταρα όγκου σαρκώματος [25] και εκφράζεται έντονα σε πτωχά διαφοροποιημένους ιστούς πλακώδες καρκίνωμα του οισοφάγου [16]. Για το καλύτερο της γνώσης μας, αυτή η μελέτη είναι η πρώτη που εξετάζει την κλινική σημασία της έκφρασης της πρωτεΐνης FZD3 σε μια μεγάλη ομάδα της CRC και προ-κακοήθη δείγματα CAD και του παχέος πολύποδα του. Παρά το γεγονός ότι FZD3 πρωτεΐνη εκφράστηκε σε ποσοστό 100% των δειγμάτων CRC, το 89% των δειγμάτων CAD, το 75% των ορθοκολικού δειγμάτων πολύποδα και 69% παρακείμενο φυσιολογικό ορθοκολικό επιθηλιακών ιστών, η ανοσοαντιδραστικότητα του FZD3 είχαν σημαντική διαφορά μεταξύ αυτών των 4 ομάδων των δειγμάτων. Επιπλέον, η έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 σε CAD, όπως φαίνεται από εμάς ταιριάζει με εκείνα μιας προηγούμενης μελέτης ότι FZD3 mRNA εκφράζεται στο 79% (11/14) δείγματα CAD με διάμεση φορές μεταβολής 6,5 [26]. Ωστόσο, FZD3 mRNA ήταν μόνο βρέθηκε να έχει σημαντική ρύθμιση προς τα πάνω σε 39% (9/23) CRC δείγματα στην ίδια μελέτη [26]. Οι λόγοι αντιπροσωπεύουν αυτό το αντικρουόμενων αποτέλεσμα μπορεί να εξηγηθεί από τους εξής λόγους: 1) ένας μικρός αριθμός (23) των δειγμάτων CRC προσλήφθηκαν σε σύγκριση με τη δική μας, 2) mRNA ανιχνεύθηκε ενώ πρωτεΐνη ανιχνεύθηκε στη μελέτη μας, 3) παρακείμενο φυσιολογικό ιστοί αναμίχθηκαν με τους ιστούς CRC καθώς κανένας μικροδιατομής διεξήχθη στη μελέτη τους. Το τελευταίο σημείο είναι ιδιαίτερα σημαντικό λόγω μεταβλητή βαθμούς παρακείμενων φυσιολογικών ιστών συνήθως θα βρεθεί σε χειρουργικά δείγματα και τα ευρήματά μας έδειξαν ότι FZD3 πρωτεΐνη δεν εκφράζεται μόνο στο 69% των παρακείμενων κανονικής παχέος επιθηλιακών ιστών, αλλά και σε ινοβλάστες, ενδοθηλιακά κύτταρα, λεμφοκύτταρα και ιστιοκύτταρα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). ICC χρώση ενός τμήματος ιστού μας επιτρέπει να εξετάσει την ατομική κύτταρο υπό μικροσκόπιο και επομένως την έκφραση πρωτεΐνης FZD3 σε καρκινικά και φυσιολογικά κύτταρα μπορεί να ποσοτικοποιηθεί ξεχωριστά. Στην πραγματικότητα, η κηλίδωση ICC του FZD3 πρωτεΐνη δεν ήταν μόνο ισχυρότερη στην επεμβατική εμπρός σε σχέση με το κέντρο του όγκου, αλλά και πολύ έντονη σε όλους τους μεταστατικούς λεμφαδένες και απομακρυσμένα όργανα. Αυτό το αξιοσημείωτο εύρημα μπορεί να αποδείξει ότι FZD3 πρωτεΐνη έχει ένα σημαντικό ρόλο όχι μόνο στις αρχές καρκινογένεση CRC, αλλά και σε CRC μεταστατικής οδού στους λεμφαδένες και απομακρυσμένα όργανα. Ωστόσο, εστιακή πολωμένο διανομή FZD3 όπως φαίνεται από Pourreyron et al. δεν βρέθηκε σε ομάδα μας δειγμάτων [27]. Συνεχίσαμε να διερευνήσει τις δυνατότητες της FZD3 πρωτεΐνης ως συμπλήρωμα διαγνωστικό δείκτη στο μεταστατικό CRC εκτελώντας χρώση ΔΠΔ σε διάφορα είδη μη-CRC μεταστατικά καρκινώματα. Τα αποτελέσματά μας είναι πολύ ενδιαφέρουσα, διότι χρώση ICC για FZD3 ήταν θετική σε διάφορους βαθμούς σε όλα τα μεταστατικά καρκινώματα. Ωστόσο, η θετική χρώση σε μόνο το 17% του HCC και 12% των RCCC δείχνει ότι FZD3 πρωτεΐνη μπορεί να μην είναι τόσο απαραίτητη στη μεταστατική διαδικασία αυτών των 2 καρκινωμάτων (Σχήματα 5Α και 5Β). Εν ολίγοις, χρώση ICC FZD3 μπορεί να είναι χρήσιμη για να αποκλείσει αυτές τις 2 καρκινωμάτων κατά την παθολογική διάγνωση, επειδή η χρώση ήταν εστιακό και πολύ αδύναμοι σε αυτά τα FZD3 χρώση θετική HCC και RCCC περιπτώσεις σε σύγκριση με εκείνες σε άλλους τύπους όγκων. Από την άλλη πλευρά, FZD3 πρωτεΐνη που εκφράζεται σε μεταστατικά καρκινώματα τα οποία περιλαμβάνουν SCC1, ΛΑΚ, LNSCC, PTC, BC, OCCC, CNSCC, FTSAC, TCC, SCC2 και CND. Αυτά τα νέα αποτελέσματα που μπορούν να αποδείξουν ότι FZD3 πρωτεΐνη μπορεί να εμπλέκεται στην μεταστατική διαδικασία αυτών των καρκινωμάτων. Στην πραγματικότητα, η ισχυρή χρώση FZD3 πρωτεΐνη σε όλες τις περιπτώσεις CND και SCC2 δεν αποτελεί έκπληξη, διότι FZD3 πρωτεΐνη είναι καλά γνωστό ότι εμπλέκεται στην ανάπτυξη του κεντρικού νευρικού συστήματος [22,23,28]. Σύμφωνα με αυτά τα αποτελέσματα, έχουμε εξετάσει σήμερα την έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 στις αντίστοιχες πρωτογενείς όγκους τους για αυτά τα 11 είδη του μεταστατικού μη-CRC καρκινώματα που έχουν υψηλό επίπεδο έκφρασης της πρωτεΐνης FZD3, προκειμένου να έχουν μια μεγαλύτερη κατανόηση για το ρόλο της FZD3 πρωτεΐνης σε διάφορα μονοπάτια καρκινογένεση.

ένα άλλο ενδιαφέρον εύρημα αυτής της μελέτης είναι ότι η μέση βαθμολογία ICC του CAD που σχετίζεται με σύγχρονη ορθοκολικά καρκινώματα είναι πολύ υψηλότερη από εκείνη της ομάδας που αποτελείται από καθαρό CAD, γεγονός που υποδηλώνει ότι ένα υψηλό πρωτεΐνη FZD3 έκφραση σε CAD μπορεί να σημαίνει ένα υψηλότερο δυναμικό κακοήθειας.

Ο τελικός στόχος αυτής της μελέτης είναι να διερευνήσει την κλινική σημασία των FZD3 πρωτεΐνης σε ασθενείς με CRC. Ως σήμερα δεν υπάρχει λιγοστά παθολογικά χρησιμοποιείται προγνωστικός δείκτης για CRC και, ως εκ τούτου, είναι πολύτιμη για τη διερεύνηση της προγνωστικής δυναμικό της FZD3 πρωτεΐνη η οποία αποδεικνύεται στην παρούσα μελέτη από τη σημαντική συσχέτιση των βαθμολογιών ΔΠΔ FZD3 σε στάδιο Dukes, την κατάσταση των λεμφαδένων, υποτροπή ή μετάσταση. Επιπλέον, μια μακροπρόθεσμη παρακολούθηση των εν λόγω CRC ασθενείς έδειξαν ότι ο ασθενής με υψηλή βαθμολογία ΔΠΔ FZD3 μπορεί να έχουν λιγότερες πιθανότητες επιβίωσης. Στην πραγματικότητα, τα δείγματα με τα αποτελέσματα FZD3 ΔΠΔ & gt? 327 ήταν κυρίως τα στάδια ΙΙΙ και IV ασθενείς, ενώ εκείνοι με τα αποτελέσματα ICC FZD3 ≤ 327 ήταν ως επί το πλείστον από τα στάδια Ι και ΙΙ οι ασθενείς. Αυτό μπορεί να είναι μια εξήγηση γιατί τα στάδια III και IV ασθενείς έχουν μεγαλύτερο κίνδυνο υποτροπής, μετάστασης και μικρότερη επιβίωση από τα στάδια Ι και ΙΙ οι ασθενείς. Μια πιο λεπτομερής ανάλυση των δεδομένων από την κατάταξη του σε 4 ομάδες με βάση το επίπεδο της έκφρασης μπορεί να μας δώσει περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την προγνωστική σημασία της FZD3 πρωτεΐνης σε ασθενείς με CRC. Η σημαντική διαφορά στην επιβίωση μεταξύ των ομάδων υψηλής και χαμηλής έκφρασης αναμένεται ότι η οριακή σημαντική διαφορά (

P

& lt? 0,05) στην επιβίωση μεταξύ των ομάδων μετρίως υψηλή και μέτρια χαμηλή έκφραση παρέχει μια σταθερή απόδειξη ότι FZD3 πρωτεΐνη έχει σημαντική προγνωστική δύναμη. Λαμβάνονται όλα αυτά τα ευρήματα μαζί, χρώση ICC FZD3 μπορεί δυνητικά να αποτελέσει πολύτιμο εργαλείο για την πρόγνωση της CRC. Για να επικυρώσετε τις διαπιστώσεις αυτές, μια μεγάλη πολυκεντρική μελέτη με μακροχρόνια παρακολούθηση για την εξέταση προγνωστική σημασία του είναι τώρα στο στάδιο της προετοιμασίας. Ανθρώπινα Wnt5A, Wnt5B και Wnt11 είναι αντιπροσωπευτικά μη κανονικών Wnts μεταγωγή σημάτων κυττάρων πολικότητα Wnt /επίπεδη μέσω των υποδοχέων FZD3 [10,29-31]. Μια πρόσφατη μελέτη έδειξε ότι οι οδοί απάντηση Wnt αναδιοργανώθηκαν στις αρχές του παχέος καρκινογένεση ως αρνητικός ρυθμιστής του μονοπατιού σηματοδότησης Wnt, γυμνή επιδερμίδα επαγωγή ομόλογο 1 συνοδεύεται από τη ρύθμιση της β-κατενίνης ανεξάρτητη υποδοχέα FZD3 σε CAD και CRC [26]. Επιπλέον, FZD3 δεν ανταποκρίνονται στη σταθεροποίηση της β-κατενίνης

in vitro

και απαιτείται ένα Wnt σήμα συνδέτη [26]. Ως εκ τούτου, FZD3 μπορεί να παρέχει μία ένδειξη του βαθμού της σηματοδότησης Wnt συνδέτη στον ορθοκολικό όγκο. Στην πραγματικότητα, μια μικρή ομάδα των δειγμάτων (20) με την ισχυρή και ασθενή θετικό FZD3 είχαν προσληφθεί και άμεση σύγκριση των FZD3 ανοσοχρώση με εκείνα της β-κατενίνης πραγματοποιήθηκαν και διαπιστώθηκε ότι δεν υπήρχε συσχετισμός μεταξύ FZD3 και βήτα-κατενίνης ανοσοχρώση (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Το εύρημα αυτό μπορεί να ενισχύσει το ρόλο της FZD3 σε μη κανονική Wnt σηματοδοτικό μονοπάτι. Μαζί με τα αποτελέσματα από τη μελέτη αυτή, η έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 σε διάφορα κλινικά στάδια του CRC μπορεί να αποδείξει περαιτέρω την κλινική σημασία των FZD3 σε ασθενείς με CRC. Το επόμενο βήμα μας είναι να εξετάσει τις υποκείμενες μοριακών μηχανισμών που ρυθμίζουν την έκφραση FZD3 και τις άμεσες μεταγραφική γονιδίων στόχων του FZD3 τη χρήση συγκεκριμένων νοκ ντάουν της FZD3 από μικρό παρεμβαλλόμενο RNA σε κυτταρικές σειρές CRC επειδή στοχευμένη θεραπεία με τη χρήση μοριακών δεικτών είναι ένας σημαντικός στόχος για τη βελτίωση των αποτελεσμάτων της ασθενείς με CRC. Επιπλέον, η ανίχνευση της πρωτεΐνης FZD3 στον ορό του ασθενούς χρησιμοποιώντας ενζυμο-συνδεδεμένη ανοσορροφητική δοκιμασία θα πρέπει επίσης να διερευνηθούν ώστε να εκτιμηθεί κατά πόσον πρωτεΐνη FZD3 ορού μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως μη επεμβατική δείκτη. Ωστόσο, ένας σημαντικός περιορισμός αυτής της μελέτης είναι ότι δεν έχουμε την κλινική πληροφορίες για την αξιολόγηση της απόδοσης των FZD3 πρωτεΐνης συγκρίνοντας την έκφρασή της με τα συμβατικά δείκτη CRC όπως καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο ορού.

Εν περιλήψει, η έκφραση της πρωτεΐνης FZD3 όπως φαίνεται από χρώση ICC συσχετίζεται στενά με ορθοκολικό καρκινογένεση και της εξέλιξης, και μπορεί να χρησιμεύσει ως ένα νέο προγνωστικό δείκτη. Επιπλέον, χρώση ICC FZD3 μπορεί να είναι χρήσιμη για να αποκλείσει HCC και RCCC σε μεταστατικές θέσεις.

Ευχαριστίες

Είμαστε ευγνώμονες στον καθηγητή Benjamin Υ.Μ. Yung και ο κ Chiu Ka Yue για την εξαιρετική υποστήριξή τους.