Abstract

Στόχος

Αυξημένα επίπεδα στερολών ρυθμιστικού στοιχείου δέσμευσης πρωτεΐνης-1 (SREBP-1) έχουν βρεθεί στον καρκίνο του ενδομητρίου (ΕΚ), γεγονός που υποδηλώνει ότι είναι απαραίτητο να το ανάπτυξη της ΕΚ. Η παχυσαρκία και ο διαβήτης έχουν καθιερωθεί ως γνωστούς παράγοντες κινδύνου του ΕΚ, ενώ πολυμορφισμοί SREBF-1 γονίδιο έχει επίσης βρεθεί ότι σχετίζονται με την παχυσαρκία και το διαβήτη τύπου II. Ως εκ τούτου, υποθέτουμε ότι πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου (SNP) σε SREBF-1 γονίδιο μπορεί να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο ΕΚ.

Μέθοδος

Αναλύσαμε την αλληλουχία της SREBF-1 σε δείγματα ιστού από 30 περιπτώσεις ΕΚ και 6 καλοήθεις ελέγχους χρησιμοποιώντας μέθοδο υψηλής απόδοσης. Με βάση τα αρχικά αποτελέσματα, επιλέξαμε ένα SNP (rs2297508) ως γενετικός δείκτης για να διεξάγει μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο με βάση με 139 περιπτώσεις ΕΚ και 129 καλοήθεις ελέγχους. Τα δείγματα εξετάστηκαν κάτω από το μικροσκόπιο για να καθοριστεί ιστοπαθολογία τους πριν από την ανάλυση SNP χρησιμοποιώντας RT-PCR.

Αποτελέσματα

Μέσω ανάλυσης αλληλουχίας βρήκαμε 10 SNP της SREBF-1 που συνδέεται με ΕΚ, συμπεριλαμβανομένων των 3 νέων SNPs. Δεκατέσσερα τοις εκατό των ΕΚ έδειξε το SNP rs2297508 με C αλληλόμορφο, ενώ μόνο το 7% είχαν το αλληλόμορφο C ήταν παρούσα σε καλοήθη ελέγχου (p = 0.027, OR = 1.983). Επιπλέον, το αλληλόμορφο C συσχετίστηκε με τη διαφοροποίηση του καρκίνου (p & lt? 0,05) και το βάθος της μυομήτριο εισβολής (p & lt? 0,05).

Συμπέρασμα

Η μελέτη μας δείχνει ότι SNP (rs2297508) του SREBF -1 μπορεί να χρησιμεύσει ως ένα γενετικό παράγοντα προδιάθεσης για την ανάπτυξη της ΕΚ και της διαλογής των εν λόγω γενετικό δείκτη μπορεί να είναι χρήσιμη για την έγκαιρη ανίχνευση της

Παράθεση:. Qiu CP, Lv QT, Dongol S, Wang C, Jiang J (2014) πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου της SREBF-1 γονίδιο που σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του ενδομητρίου στην κινεζική γυναίκες. PLoS ONE 9 (3): e90491. doi: 10.1371 /journal.pone.0090491

Επιμέλεια: Kwang-Hyun Baek, Πανεπιστήμιο CHA, Δημοκρατία της Κορέας

Ελήφθη: 24, Αύγ 2013? Αποδεκτές: 31η Ιανουαρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 10 Μάρτη 2014

Copyright: © 2014 Qiu et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη επιτεύχθηκε στο καρδιαγγειακό εργαστήριο του Qi Lu Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου της Shandong και χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (81072121, 81372808 [JJ] και 81173614 [QTL]), καθώς και το σχεδιασμό Επιστήμης και Τεχνολογίας Ανάπτυξης της Shandong (2011GSF12122 [XZ] και 2012G0021823 [JJ]). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του ενδομητρίου (ΕΚ) είναι η πιο κοινή κακοήθεια γυναικολογική στον δυτικό κόσμο και η τέταρτη πιο κοινή μορφή καρκίνου στις γυναίκες. Η συχνότητα εμφάνισης της ΕΚ έχει αυξηθεί κατά 21% από το 2008, και το ποσοστό θνησιμότητας έχει αυξηθεί σημαντικά κατά τα δύο τελευταία [1] δεκαετίες. Η Αμερικανική Αντικαρκινική Εταιρεία εκτιμάται 49.500 νέα κρούσματα και 8.200 θνησιμότητα το 2013 [2]. Η αιτιολογία της ΕΚ είναι πολυπαραγοντική και περιλαμβάνει αυξημένη έκθεση σε οιστρογόνα [3] και γενετικούς παράγοντες κινδύνου. Μέχρι στιγμής, έχει αποδειχθεί ότι οι διάφοροι SNPs που συνδέεται με αυξημένο κίνδυνο ΕΚ, όπως διφωσφορική κινάση νουκλεοσιδίου 1 (nm23-H1? Rs16949649 και rs2302254), αναστολέα σερπίνης πεπτιδάσης, clade E (ΡΑΙ-1? Rs1799889) και προγεστερόνης υποδοχέα (PGR? rs11224561) [4] – [6]. Για να κατανοήσουμε τους παράγοντες γενετικού κινδύνου πλήρως και να βρούμε αποτελεσματικούς στόχους, είναι απαραίτητο να προσδιοριστούν οι σχετικές SNPs.

Ρυθμιστικές πρωτεΐνες στοιχείο δέσμευσης

στερόλες (SREBPs) είναι μεταγραφικοί παράγοντες της έλικας-βρόχου-έλικας-φερμουάρ λευκίνης ( HLH-LZ) οικογένεια. Τρεις ισομορφές του SREBP έχουν ταυτοποιηθεί σε κύτταρα θηλαστικών: SREBP-1a, SREBP-1c και SREBP-2 [7]. Δύο γονίδια (SREBF-1 και SREBF-2) είναι υπεύθυνοι για την έκφραση αυτών των πρωτεϊνών από τις οποίες SREBF-1 γονίδιο βρίσκεται στο χρωμόσωμα 17 p11.2. υπάρχει επικάλυψη στα μονοπάτια και τις λειτουργίες μεταξύ των μεμονωμένων SREBPs, αλλά οι περισσότερες μελέτες δείχνουν ότι η SREBP-1 ρυθμίζει κυρίως το μεταβολισμό των λιπαρών οξέων και SREBP-2 είναι ο κύριος ρυθμιστής του μεταβολισμού της χοληστερόλης [8]. SREBP-1 ρυθμίζει την ομοιόσταση των λιπιδίων με τον έλεγχο της έκφρασης των βασικών ενζύμων περιορισμού του ρυθμού απαιτούνται για τη σύνθεση της χοληστερόλης και των λιπαρών οξέων [9]. Η ανώμαλη λιπογένεση είναι ένα σημαντικό μεταβολικό χαρακτηριστικό που εμπλέκονται στην ταχύ πολλαπλασιασμό των κακοήθων κυττάρων του όγκου. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι τα καρκινικά κύτταρα είναι ικανά να επανενεργοποίησης de novo σύνθεση των λιπιδίων και εκφράζοντας αυξημένα επίπεδα συνθάσης λιπαρού οξέος (FASN) [10], η οποία ρυθμίζεται από SREBP-1 [11]. Σε συμφωνία με αυτά τα ευρήματα, SREBP-1 έχει αποδειχθεί ότι έχει σχέση με πολλούς άλλους κακοήθεις όγκους όπως ο καρκίνος του μαστού, ο καρκίνος του προστάτη και του παχέος εντέρου, καθώς και [12] – [15]

Μέσω του μηχανισμού. βιοσύνθεσης λιπιδίων, SREBP-1 έχει προταθεί να είναι ένας αιτιολογικός παράγοντας της παχυσαρκίας [16]. Η παχυσαρκία από την άλλη πλευρά, θεωρείται υπεύθυνη για διάφορες μηχανισμούς που καθιζάνουν σε καρκινογένεση [7]. Μέσω του μηχανισμού της αντίστασης στην ινσουλίνη, η παχυσαρκία προκαλεί την έκκριση της ινσουλίνης από τα παγκρεατικά κύτταρα. Η ινσουλίνη με τη σειρά του έχει μια διεγερτική επίδραση στην SREBP1 [17]. Πρόσφατα, υψηλότερο επίπεδο SREBP-1 έχει ανιχνευθεί σε κύτταρα ΕΚ σύγκριση με την κανονική ενδομητρίου, και η οποία ήταν πιο εμφανή σε ανώτερης ποιότητας ΕΚ. Επιπλέον, knockdown του SREBP1 βρέθηκε να καταστείλει αποτελεσματικά την ικανότητα πολλαπλασιασμού των κυττάρων ΕΚ και την ανάπτυξη του όγκου in vitro, υποδεικνύοντας περαιτέρω ότι SREBP-1 παίζει σημαντικό ρόλο στην εξέλιξη της ΕΚ [18].

Για τις γνώσεις μας , καμία μελέτη μέχρι σήμερα δεν έχει αναφερθεί η πιθανή συσχέτιση της SREBF-1 γενετικό πολυμορφισμό με τον κίνδυνο της ΕΚ. Υποθέτουμε ότι SNPs σε SREBF-1 μπορεί να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο ΕΚ, μαζί με αρκετούς κλινικά κριτήρια, όπως παθολογικός βαθμός, κλινικό στάδιο, την παθολογική τύπος κ.λπ. Η SNP της SREBF-1 μπορεί να χρησιμεύσει ως παράγοντες γενετική προδιάθεση για την ανάπτυξη της ΕΚ και τον έλεγχο των εν λόγω γενετικών δεικτών θα μπορούσε να έχει μεγάλη αξία για την έγκαιρη ανίχνευση της ασθένειας αυτής.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική δήλωση

Οι ενέκρινε γραπτή πληροφορημένες συγκαταθέσεις αποκτήθηκαν από όλοι οι συμμετέχοντες και τα δείγματα συλλέχθηκαν με την έγκριση της Επιτροπής Δεοντολογίας στην Qilu Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου της Shandong.

στη μελέτη μας, πραγματοποιήσαμε μια ανάλυση ασθενών-μαρτύρων με συνολικά 139 περιπτώσεις και 129 μάρτυρες. Εμείς πρώτον προβληθεί ολόκληρο το γονίδιο της SREBF-1 σε 30 άσχετα ασθενείς ΕΚ και 6 ελέγχους για να εντοπίσει το σχετικό SNPs. Με βάση τα αποτελέσματα που λαμβάνονται, επιλέξαμε ένα SNP (rs2297508), το οποίο βρέθηκε σε οκτώ από τις τριάντα ασθενείς και κανένας από τους έξι μάρτυρες και πραγματοποίησε μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων, προκειμένου να εξακριβώσει τη σχέση της με την ΕΚ.

Μελέτη

Ένα σύνολο 268 αμερόληπτη υποψήφιοι είχαν προσληφθεί στοχαστικά. Τα δείγματα των 139 δείγματος ΕΚ και 129 καλοήθεις έλεγχοι συλλέχθηκαν με βάση την παθολογική εκθέσεις τους. Τα ενδομήτριο δείγματα από 139 ασθενείς με καρκίνο λήφθηκαν με χειρουργική εκτομή μετά από υστερεκτομή εκτελείται σε Qilu νοσοκομείο Τμήμα γυναικολογίας. Τα δείγματα ιστού για τους ελέγχους συλλέχθηκαν από τους ασθενείς χωρίς προβλήματα γονιμότητας και με καλοήθη παθολογίες όπως leiyomyomas, αδενομύωση κλπ Τα μεμονωμένα δείγματα εξετάστηκαν κάτω από το μικροσκόπιο για παθολογικές διάγνωση για τις δύο ομάδες. Οι ασθενείς ΕΚ χωρίστηκαν σε δύο ομάδες, 91 χωρίς σακχαρώδη διαβήτη και την παχυσαρκία και 48 με διαβήτη ή /και της παχυσαρκίας και οι πληροφορίες αυτές πήρε από τα αρχεία του νοσοκομείου. Οι συνήθεις ελέγχους με διαβήτη ή παχυσαρκία (ΔΜΣ ≧ 28 Kg /m

2) αποκλείστηκαν λόγω της πιθανής σύνδεσης του SNP (rs2297508) με δύο από τις μεταβολικές διαταραχές, όπως περιγράφεται στη μελέτη των Liu JXet al. [20 ]. Επίσης, οι έλεγχοι δεν είχαν γνωστό ιστορικό διαβήτη, παχυσαρκία ή οποιεσδήποτε άλλες κακοήθειες στην οικογένειά τους. Η μέση ηλικία των 48 ασθενών με παχυσαρκία ή /και διαβήτη ήταν 53,09 ± 6,7 και ότι από τα 91 ασθενείς χωρίς διαβήτη ή της παχυσαρκίας ήταν 54,36 ± 9,7 (Ρ = 0,196). Η μέση ηλικία των κανονικών ελέγχων (52,46 ± 7,7) ήταν συγκρίσιμη με εκείνη των 91 ασθενών (Ρ = 0,215). Οι ασθενείς ΕΚ αντιμετωπίστηκαν χειρουργικά στην Qilu Νοσοκομείο από το 2008 έως το 2012. Είχαν κατηγοριοποιούνται σε ενδομητριοειδές (τύπου Ι) και μη-ενδομητριοειδές (τύπου II) ΕΚ και οι όγκοι οργανώθηκαν σύμφωνα με τη Διεθνή Ομοσπονδία Γυναικολογίας και Μαιευτικής 2009 (ΦΥΓΩ ) ταξινόμηση.

προετοιμασία του DNA

Τα φρέσκα δείγμα ιστού που συλλέγονται αποθηκεύτηκε στους -80 ° C ψύξης. Γενωμικό DNA εκχυλίστηκε από τους ιστούς χρησιμοποιώντας κιτ QIAamp DNA Mini (Qiagen, USA) ακολουθώντας το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Το εκχυλισμένο DNA διαλύθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα ΤΕ [10 mMTris (ρΗ 7,8), 1 mM EDTA] και στη συνέχεια η συγκέντρωση μετρήθηκε με αναφορά στην τιμή OD 260 nm (Bio-Rad SmartSpec Plus). Το τελικό παρασκεύασμα φυλάσσεται στους -20 ° C για την ενίσχυση PCR. Ενισχύσεις διεξήχθη χρησιμοποιώντας ένα 5 λεπτά αρχική μετουσίωση στους 94 ° C, ακολουθούμενη από 30 κύκλους έκαστος διάρκειας 30 sec στους 94 ° C, 30 sec στους 60 ° C, 30 sec στους 72 ° C και 10 min τελική επέκταση στους 72 ° ΝΤΟ. Τα εμπρός και αντίστροφοι εκκινητές 5 ‘GACCTGAGGCTCCTGTGCTAC 3’ και 5 ‘AAGTCAGTCCATCCTCCCGT 3’, αντίστοιχα.

Επιλογή SREBF-1 σημεία πολυμορφισμού

Για να αποκτήσετε πρόσβαση σε επαρκείς πληροφορίες σχετικά με την πιθανή συσχέτιση των SNPs σε SREBF-1 με καρκίνο του ενδομητρίου, εμείς διαλογή πρώτα ολόκληρο το γονίδιο της SREBF-1 σε 30 άσχετα ασθενείς και 6 ελέγχους από την τεχνική προσδιορισμού αλληλουχίας με τη χρήση υψηλής απόδοσης PSTAR-ΙΙ συν (IDN01-M-P2). Τα 36 υποκείμενα τυχαία επιλεγμένα και αντιστοιχίζονται με βάση την ηλικία τους. Ήμασταν σε θέση να προσδιορίσει 10 SNPs, μεταξύ των οποίων τρεις νέες ανιχνεύονται αυτά. Όλα τα ευρήματα αναλύθηκαν από Pstar-II 6.0.4 λογισμικού build3. Για τη μελέτη σύνδεσης, έχουμε επιλέξει μόνο ένα SNP (rs2297508) με βάση την αλληλική συχνότητα της που παρουσίασαν εμφανής και σημαντική σχέση με την ΕΚ.

SREBF-1 του γονότυπου

Σε πραγματικό χρόνο αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης ανάλυση χρησιμοποιήθηκε για να γονότυπο τον SNP (rs2297508) σε SREBF-1. Οι αλληλουχίες εκκινητή για τον SNP ήταν ως ακολούθως: GF 5 ‘CTCCCCCAGCACCTACGG 3’, cF 5 ‘CTCCCCCAGCACCTACGC 3’ ως προς τα εμπρός αρχικό τεμάχιο και R5 ‘CTCCCCACTCCTCCCACTAAC 3’ ως τον ανάστροφο εκκινητή. Το σύστημα αντίδρασης (20 μΐ) για RT-PCR περιλάμβανε 10 ul Όλα σε Ένα qPCR Mix, 0.4 υΙ εμπρός Primer F (2 μΜ), 0.4 μΙ αντίστροφου εκκινητή R (2 μΜ), 2 ul γενωμικού DNA και 7.2 ul ddH2O . Η διαδικασία αντίδραση διεξήχθη σε ένα πραγματικό χρόνο PCR όργανο (Στάδιο One Plus (ΑΒΙ)) διαιρώντας σε τρία στάδια: κρατώντας το στάδιο στους 95 ° C για 20 s, στάδιο του κύκλου των 40 κύκλων η κάθε μία των οποίων 3 s στους 95 ° C και στη συνέχεια 30 s στους 60 ° C, που τήκεται στάδιο καμπύλη στους 60 ° C για 60 s που ακολουθείται από 95 ° C για 15 s.

Στατιστική Ανάλυση

Hardy-Weinberg ισορροπία αναλύσεις διεξήχθησαν για να συγκρίνουν τις συχνότητες γονοτύπου χρησιμοποιώντας χ

2 τεστ μεταξύ των ελέγχων (χ

2 = 1,24, p = 0,26). Σύγκριση των συχνοτήτων γονοτύπου μεταξύ ασθενών ΕΚ και οι έλεγχοι πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας Pearson χ

2 τεστ. Αξιολογήσαμε επίσης τη σχέση μεταξύ της διανομής του γονότυπου SREBF 1-SNPs και τα κλινικά κριτήρια του ΕΚ (διαιρεμένη βάσει της παρουσίας ή απουσίας του διαβήτη και της παχυσαρκίας, την ηλικία, ιστολογικό τύπο, παθολογική ταξινόμησης και κλινικά στάδια). Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του SPSS λογισμικού ηλεκτρονικών υπολογιστών (έκδοση 17.0). P & lt? 0,05 θεωρήθηκε το επίπεδο στατιστικής σημαντικότητας

Αποτελέσματα

ταυτοποίηση SNP και του γονότυπου

έλεγχο μας προέκυψαν 10 πολυμορφισμούς (SNP1 να SNP10), συμπεριλαμβανομένων 3 πρόσφατα ανιχνεύθηκε sites (. Εικ. 1). Το αλληλόμορφο C σε SNP9 (rs2297508) ανιχνεύθηκε σε οκτώ από τριάντα ασθενείς (26,7%), αλλά σε κανένα από τους μάρτυρες. Άλλες ανιχνεύεται SNPs έδειξαν μικρή διαφορά μεταξύ ασθενών και μαρτύρων. (Πίνακας 1), τότε, επιλέξαμε SNP9 (rs2297508) για περαιτέρω μελέτη και αναλύθηκαν όλα τα πειραματικά δείγματα και τους ελέγχους χρησιμοποιώντας πραγματικό χρόνο αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Τα αποτελέσματα (ΦΕΚ, GC ή CC) αναλύθηκαν από Βήμα πρώτο V2.1 λογισμικού. Γονοτυπική διεξήχθη με βάση τις καμπύλες διαφορετικές ενίσχυσης που παρατηρείται για διαφορετικούς γονότυπους (Εικ. 2)

Α:. SNPs σε SREBF-1 γονιδίου. Το σύνολο SREBF-1gene περιλαμβάνει 22 εξώνια. Δέκα SNPs (SNP1 να SNP10) εντοπίστηκαν στο πλαίσιο της SREBF-1 στη μελέτη μας. ΣΎΚΟ. 1 Β: SNP ID. SNP1 να SNP10 παρατίθενται από 5′-3 ‘του SREBF-1. «ΧΡ-ID» δείχνει χρωμόσωμα ID δέκα SNPs σε SREBF-1. Παρατίθενται «Νούμερο ID» έχει αναφερθεί σε UCSC ή την ιστοσελίδα NCBI, «-» εκφράζει πρόσφατα ανιχνεύθηκε SNP. στήλη «Λειτουργία» αναφέρονται τροποποιηθεί γενετικά κωδικοποιημένη λειτουργία του SNPs. «Ref SNP» παρουσιάζει μορφή SNP στην αρχική ακολουθία αναφοράς. Σε «θέση mRNA», οι αντίστοιχες θέσεις mRNA έδειξε συνεπής με κάθε SNP. (Για περισσότερες λεπτομέρειες: αναγνωριστικά Ακολουθία περιλαμβάνονται στο CCDS 32.583,1). NCBI db είναι διαθέσιμη από https://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP.

Η

Εικ. 2 Α, Β και Γ δείχνουν GG, CC και γονότυπο GC αντίστοιχα, όπως φαίνεται από τα αποτελέσματα που λαμβάνονται με RT-PCR.

Η

Σύνδεσης μεταξύ rs2297508 SNP και τον κίνδυνο της ΕΚ

Η κατανομή αλληλόμορφο SNP (rs2297508) για SREBF 1-γονότυπους στις ομάδες ελέγχου είναι σύμφωνη με την ισορροπία Hardy-Weinberg όπως δοκιμάστηκε από χ

2 τεστ (χ

2 = 2,27, P = 0,13). Η διακύμανση στην κατανομή των C αλληλόμορφου μεταξύ ασθενών ΕΚ και υγιών μαρτύρων δείχθηκε σαφώς (Ρ = 0,027). Το χ

2 τεστ αποκάλυψαν ότι οι γονότυποι GC /CC ή C φορείς αλληλόμορφο είχαν αυξημένο κίνδυνο ΕΚ (OR = 1.966 και OR = 1.983 αντίστοιχα) σε σύγκριση με το GG ή G φορείς αντίστοιχα. διαστήματα εμπιστοσύνης του λόγου πιθανοτήτων (OR) χρησιμοποιήθηκε για να περιγράψει τους περιορισμούς εντός του οποίου οι εκτιμώμενες υπολογισμοί θα πρέπει να είναι έγκυρη. Η σύγκριση των γονιδίων και αλληλομόρφων συχνότητες του SNP μεταξύ των ασθενών ΕΚ και υγιών μαρτύρων φαίνονται στον Πίνακα 2. Τα αποτελέσματα ήταν σύμφωνα με προκαταρκτικό πείραμα υψηλή απόδοση μας.

Η

Σύνδεσης μεταξύ rs2297508 SNP και παθολογικών βαθμού και το βάθος της μυομήτριο εισβολή του ΕΚ

Έχουμε προσπαθήσει να εξηγήσει το ρόλο του πολυμορφικού rs2297508 τόπου σε συν-υπάρχουσες συνθήκες, όπως ο διαβήτης, η παχυσαρκία, καθώς και σε διαφορετικές ηλικιακές ομάδες, παθολογικές τύπους και παθολογικές βαθμούς του καρκίνου , κλινικά στάδια και μυομήτριο εισβολή σε ασθενείς ΕΚ (Πίνακας 3). Επειδή ο διαβήτης και η παχυσαρκία είναι δύο μεγάλοι κίνδυνοι που είναι γνωστό ότι συνδέεται στενά με το ΕΚ και το SNP είναι ένα κρίσιμο δείκτη της γενετικής προδιάθεσης του ΕΚ, θα μπορούσε να υποτεθεί ότι υπήρξε μια πιθανή επίδραση του συγκεκριμένου πολυμορφισμού με την κατάσταση. Χωρίσαμε τους ασθενείς ΕΚ σε δύο ομάδες (με διαβήτη ή παχυσαρκία και χωρίς). Ωστόσο, δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στη συχνότητα αλληλίου ήταν εμφανής μεταξύ των δύο. Άλλα κριτήρια για τη διαίρεση των θεμάτων σε διάφορες ομάδες καθορίστηκαν σύμφωνα με τις προηγούμενες εκθέσεις, καθώς και κλινική σημασία [4], [5]. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι φορείς παραλλαγή του SNP C είχαν υψηλότερα παθολογικές βαθμό και βαθύτερα μυομητρίου εισβολή (OR = 2.042 και OR = 2.233 αντίστοιχα) σε σύγκριση με G φορείς. Επιπλέον, η GC /γονότυπο CC και το αλληλόμορφο C συσχετίστηκε σημαντικά με τον παθολογικό βαθμό (χ

2 = 4.095, P = 0,043 και χ

2 = 3.893, P = 0.048 αντίστοιχα) και μυομήτριο εισβολή (χ

2 = 4,018, P = 0,045 και χ

2 = 4.170, P = 0,041 αντίστοιχα). Άλλα κριτήρια, όπως η ηλικία, παθολογικές τύπο και το κλινικό στάδιο δεν παρουσίασαν καμία στατιστικά σημαντική συσχέτιση με το SNP.

Η

Συζήτηση

λιπιδίων βιοσύνθεση είναι απαραίτητη για τη διατήρηση της κυτταρικής ομοιόστασης, ενώ αυξήθηκε de τη σύνθεση λιπιδίων ηονο είναι ένα κοινό χαρακτηριστικό μεταβολική της καρκινογένεσης [19]. Η αυξημένη έκφραση των FASN και LDLR (λιποπρωτεϊνών χαμηλής πυκνότητας υποδοχέα) στα καρκινικά κύτταρα πιστοποιούν αυτή τη δήλωση [20]. SREBPs μπορεί να ρυθμίσει διάφορα ένζυμα που εμπλέκονται στην λιπαρών οξέων και τη βιοσύνθεση της χοληστερόλης. Εκτός από επηρεάζοντας διάφορα ένζυμα που εμπλέκονται στην λιπογένεση, SREBP συμμετέχει επίσης στη μετατροπή των ανδρογόνων σε οιστρογόνα μέσω της αντίδρασης αρωματισμού αυξάνοντας έτσι το επίπεδο των οιστρογόνων στην κυκλοφορία. Η παχυσαρκία έχει επίσης βρεθεί υπεύθυνος για μείωση των επιπέδων της προγεστερόνης που έχει μια ισχυρή επίδραση ανταγωνιστική στην καρκινογόνο λειτουργία των οιστρογόνων [21]. Επιπλέον, SREBP1 συνδέεται επίσης με τη ρύθμιση της μεταγραφής του ενζύμου 17β-υδροξυστεροειδών αφυδρογονάσης τύπου 12 (17 β -HSD12) η οποία είναι υπεύθυνη για τη μετατροπή της οιστρόνης (Ε1) σε μια πιο ισχυρή μορφή, οιστραδιόλη (Ε2) [22], [23]. Έτσι, μπορούμε να συμπεράνουμε ότι η δραστηριότητα SREBP απαιτείται για την ανάπτυξη του όγκου, γεγονός που υποδηλώνει ότι SREBP παίζει ένα σημαντικό ρόλο στην ογκογένεση. Επιπλέον, η αυξημένη έκφραση παρεκκλίνοντα του SREBP-1 έχει βρεθεί σε αρκετούς καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου ΕΚ [18].

Σε αυτή την έρευνα θα υποτεθεί ότι SNPs σε SREBF-1gene έχουν δυνητικό ρόλο στην γενετική προδιάθεση του ΕΚ. Μια προηγούμενη μελέτη ανιχνεύθηκε 19 πολυμορφισμών στο SREBF-1 και κατέδειξε τη σχέση μεταξύ SREBF 1-πολυμορφισμών και της παχυσαρκίας καθώς και ο διαβήτης τύπου II [19]. Επιπλέον, επιδημιολογικές μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι η παχυσαρκία είναι ένας από τους σημαντικότερους παράγοντες κινδύνου της ΕΚ, ενώ πολυμορφισμών SREBF-1 γονιδίου έχουν συσχετίσεις με μεταβολικές ασθένειες (διαβήτης type2 και της παχυσαρκίας) [24]. Μια άλλη μελέτη κατέληξε στο συμπέρασμα ότι οι rs2297508 SNPs και rs11868035 στο γονίδιο SREBP-1c έχουν σχέσεις με αυξημένο κίνδυνο T2DM και δυσλιπιδαιμία στην κινεζική πληθυσμό. Η ίδια μελέτη έδειξε επίσης ότι το SNP (rs11868035) συνδέεται σημαντικά με την αντίσταση στην ινσουλίνη (IR) σε διαβητικούς ασθενείς [25]. Ωστόσο, οι μελέτες, αποδεικνύοντας τη σχέση μεταξύ SREBF-1 γενετικών πολυμορφισμών και των καρκίνων, είναι σπάνιες. Μέχρι σήμερα, μόνο Daniele Campa και οι συνεργάτες του έχουν ερευνήσει τη σχέση μεταξύ των SNPs σε SREBF-1 και την ογκογένεση του καρκίνου του μαστού, αλλά όχι στατιστικά σημαντικές συσχετίσεις βρέθηκαν μεταξύ των SNPs εντοπιστεί και ο κίνδυνος καρκίνου του μαστού [26]. Έτσι έχουμε, επίσης, να αξιολογούνται περαιτέρω την υπόθεσή μας ότι οι γενετικών πολυμορφισμών που συνδέονται με τον διαβήτη και την παχυσαρκία, μαζί με μερικά άλλα κλινικά κριτήρια που συνδέονται με την ΕΚ.

Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη έκθεση που θα εξετάζει το ρόλο της SREBF-1 πολυμορφισμών γονιδίων στην ΕΚ. Στη μελέτη μας, βρήκαμε ότι η κατανομή του SNP (rs2297508) είχαν μια ξεχωριστή οριοθέτηση μεταξύ των ασθενών ΕΚ και καλοήθεις ελέγχους. Το αλληλόμορφο C στο SNP συσχετίστηκε με υψηλότερη ευαισθησία στην ΕΚ. Ως εκ τούτου, προβλέπουμε την υψηλή πιθανότητα C αλληλόμορφο στο SNP έχει ένα κρίσιμο σχέση με τον κίνδυνο της ΕΚ και πιστεύουμε ότι η περαιτέρω διερεύνηση θα οδηγήσει τους ερευνητές για την ανάπτυξη νέων θεραπευτικών στόχων για την αντιμετώπιση της ΕΚ.

αναλύεται περαιτέρω με τη σύνδεση των διαφορετικών κλινικών χαρακτηριστικών σε ασθενείς ΕΚ με το SNP. Κατ ‘αρχάς, θα αξιολογηθούν σχέση μεταξύ διαβήτη ή /και της παχυσαρκίας και γονοτυπική ή τη συχνότητα αλληλομόρφων σε ασθενείς ΕΚ. Αλλά καμία στατιστική σημαντικότητα διαπιστώθηκε μεταξύ των δύο ομάδων. Δηλαδή, ο SNP έχει την ίδια κατανομή σε ασθενείς ΕΚ, ανεξαρτήτως της παρουσίας ή της απουσίας των παραγόντων κινδύνου όπως ο διαβήτης και η παχυσαρκία. Πρότεινε ότι υπήρχε ανώμαλο μεταβολισμό των λιπιδίων που σχετίζονται με το SNP στο ΕΚ, η οποία είναι ανεξάρτητη του διαβήτη και της παχυσαρκίας. Στη συνέχεια, σε σύγκριση με κριτήρια την ηλικία, τις παθολογικές μορφές και κλινικά στάδια, αλλά δεν ελήφθησαν σημαντικές ενώσεις, παρέχοντας έτσι αποδείξεις ότι δεν υπάρχει καμία συσχέτιση μεταξύ του SNP και αυτά τα κλινικά χαρακτηριστικά. Συνοχή με την έκθεση που παρουσίασε ο Li W. et al. [21], το αλληλόμορφο C στο SNP εμφάνισαν σημαντική συσχέτιση με υψηλότερα ποιότητας όγκου. Επιπλέον, οι ασθενείς με αλληλόμορφο C παρουσίασαν υψηλότερο κίνδυνο ανάπτυξης μιας βαθύτερης μυομήτριο εισβολή σε σύγκριση με εκείνους με G αλληλόμορφο στον τόπο SNP. Το εύρημα αυτό θα μπορούσε να προκύψει από τα τέλη ανίχνευση της νόσου, ωστόσο δεν μπορούμε να αποκλείσουμε την πιθανότητα της επιρροής των SNP. Μπορεί να υπάρχει μια πιθανή σχέση μεταξύ της παθολογικής βαθμό του όγκου, καθώς και το βάθος του μυομητρίου εισβολής. Ωστόσο, απαιτείται περαιτέρω έρευνα για να διευκρινιστεί η έννοια αυτή. Συνοπτικά, το αλληλόμορφο C φαίνεται να είναι ένας δείκτης για ένα υψηλότερο όγκο βαθμό και βαθύτερα μυομητρίου εισβολή το ΕΚ, και ως εκ τούτου θα μπορούσε να δράσει ως ένα απαραίτητο προσωπικό που πρέπει να λαμβάνονται υπόψη στην κλινική αξιολόγηση και θεραπεία της ΕΚ στο εγγύς μέλλον.

Εν κατακλείδι, η μελέτη μας διερευνώνται κυρίως τη σύνδεση μεταξύ του SNP (rs2297508) σε SREBF-1 και τον κίνδυνο της ΕΚ και διαπίστωσε ότι η C αλληλόμορφο του SNP είναι δυνητικά ένας παράγοντας κινδύνου για την ΕΚ. Ταυτόχρονα, αναλύσαμε τη σύνδεση της SNP με διαφορετικά κλινικά κριτήρια της ΕΚ και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι οι ασθενείς με υψηλότερη συχνότητα C αλληλικές ήταν περισσότερο επιρρεπή στην ανάπτυξη υψηλής ποιότητας όγκου και βαθιά μυομητρίου εισβολή. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η SREBF-1 πολυμορφισμός μπορεί να διαδραματίσει ουσιαστικό ρόλο στην αύξηση της γενετικής προδιάθεσης για την ΕΚ. Ως εκ τούτου, θεωρούμε ότι αυτό θα μπορούσε να βοηθήσει τον ιατρό στην κλινική διάγνωση της πάθησης και θα καθοδηγήσουν επίσης προς μια στοχευμένη κλινική θεραπεία.

Στη μελέτη μας, χρησιμοποιήσαμε αλληλουχίας υψηλής απόδοσης, μια αξιόπιστη τεχνική με μεγάλη ακρίβεια και ακρίβεια, για τον εντοπισμό 10 SNPs που σχετίζονται με την κοινοτική συμπεριλαμβανομένων τριών νέων που θα μπορούσαν να έχουν σημασία για άλλες μελέτες στο μέλλον. Επιπλέον, επιβεβαίωσε ότι το SNP (rs2297508) σε SREBF-1 έχει σημαντική επίδραση στην ΕΚ ευαισθησία και κλινικά κριτήρια. Ωστόσο, η μελέτη μας έχει ορισμένους περιορισμούς. Σε επίπεδο αντικείμενο, δεν έχουμε δεδομένα στον τρόπο ζωής, όπως η διατροφική πρόσληψη, τη σωματική δραστηριότητα, η χρήση ορμονικών αντισυλληπτικών κ.λπ. που είναι πιθανό να επηρεάσουν την ευαισθησία των SNPs στο ΕΚ κινδύνου. Περαιτέρω, είναι άγνωστο αν η SNP εργάζεται σε συντονισμό με άλλους SNPs σε αύξηση του κινδύνου ΕΚ. Μελλοντικές μελέτες του μεγαλύτερου μεγέθους του δείγματος θα πρέπει να μελετηθεί η επίδραση αυτών των παραγόντων για τη σύνδεση μεταξύ του SNP και τον κίνδυνο της ΕΚ.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πληροφορίες S1.

doi: 10.1371 /journal.pone.0090491.s001

(DOC)

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε τον Δρ Judith A. Strong, Τμήμα Αναισθησιολογίας, Univerisity του Cincinnati College of Medicine για τις παρατηρήσεις /υπόδειξη της στην προετοιμασία του χειρογράφου.