Ερώτηση

Η ————————-

Παρακολούθηση Προς

Ερώτηση –

ποιες είναι οι μέθοδοι προσδιορισμού SGOT, SGPT και αλκαλική φωσφατάση

Απάντηση –

τι εννοείτε από τις αρχές ως ένδειξη, τις μεθόδους, τη σύνθεση ή κάτι άλλο διευκρινίστε να απαντήσει σωστά στην ερώτησή σας

χάρη

Απάντηση

η υπάρχουν δύο κοινές μέθοδοι προσδιορισμού της δραστηριότητας ενός ενζύμου. Ένας χρόνος διακοπής

Η δοκιμασία και μια δοκιμασία σε πραγματικό χρόνο. Μια δοκιμασία του χρόνου στάση είναι ακριβώς αυτό, να ξεκινήσει η αντίδραση και να σταματήσει ή να διαβάσετε το

Η αποτελεσμάτων σε μια δεδομένη στιγμή. Αυτός είναι ο ευκολότερος τρόπος για να το κάνετε πολλές δοκιμασίες σε ένα χρόνο, αλλά υπάρχουν δύο

Η πράγματα που πρέπει να εξεταστούν πριν κάνει αυτή τη μορφή της ανάλυσης. Πρώτη είναι η γραμμική δοκιμασίας. Σε

Άλλα λόγια, στο διάστημα που είμαι τρέχει την δοκιμασία, είναι το προϊόν που παράγεται (ή υπόστρωμα

μετατρέπεται) σε ένα γραμμικό ρυθμό. Εάν οι συνθήκες το δοκιμαστικό σωλήνα είναι τέτοια ώστε τα αντιδρώντα

(υπόστρωμα) έχουν εξαντληθεί ή τα προϊόντα που αναστέλλουν το ένζυμο, τότε δεν μπορείτε να χρησιμοποιήσετε αυτή τη δοκιμασία.

Η Δεύτερον, είναι η ένωση που μετρούν αρκετά σταθερό για να περιμένω για να διαβάσετε και να είναι οι συνθήκες που χρησιμοποιούνται

η για να σταματήσει το ένζυμο, δηλαδή οξύ ή βάση πάρα πολύ σκληρή για να διατηρηθεί η δομή της ανάγνωσης; Θα

κάνει πραγματικά δοκιμασίες του χρόνου. Που σημαίνει ότι η μεταβολή στην απορρόφηση (επίσης γνωστή και ως οπτική πυκνότητα; OD) έναντι του χρόνου.

Η Από αυτό το γράφημα (γίνεται με φασματοφωτόμετρο), θα επιλέξετε μια περιοχή που είναι αρκετά γραμμική και

καθορίσει η DOD /min και στη συνέχεια να το μετατρέψει σε Μονάδες της δραστικότητας του ενζύμου ανά ml.

η

η αλκαλικές φωσφατάσες είναι μια ομάδα των ισοενζύμων με μια κοινή ικανότητα να υδρολύουν οργανικών δεσμών φωσφατάση εστέρα σε αλκαλικό περιβάλλον, δημιουργώντας μια οργανική ρίζα και μία ανόργανο φωσφορικό. βιολογική λειτουργία τους είναι άγνωστη. Αλκαλική φωσφατάση σε ορό προέρχεται κανονικά από το ήπαρ και τα οστά και, κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, από τον πλακούντα. Είναι επίσης παρούσα σε μερικούς όγκους (π.χ., βρογχογενές καρκίνωμα). ανάπτυξη των οστών στα παιδιά προκαλεί εξαρτώμενη από την ηλικία αύξηση της κανονικές τιμές, ιδιαίτερα σε βρέφη & lt? 2 yr. Στη συνέχεια, η δραστηριότητα της αλκαλικής φωσφατάσης μειώνεται, φτάνοντας τα κανονικά επίπεδα των ενηλίκων μετά από μια έξαρση κατά τη διάρκεια της εφηβικής ανάπτυξης. Είναι ελαφρώς αυξημένη σε άτομα μεγαλύτερης ηλικίας. Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, τα επίπεδα στον ορό αυξηθεί δύο έως τετραπλασιαστεί από το 9ο mo και στη συνέχεια επιστρέφουν στο φυσιολογικό από 21 ημέρες μετά τον τοκετό.

Η Αλκαλική φωσφατάση αυξάνει σημαντικά σε ασθένειες που μειώνουν το σχηματισμό της χολής (χολόσταση) και σε μικρότερο βαθμό σε ηπατοκυτταρικό νόσο. Οι τιμές σε χολόσταση, είτε από ενδοηπατική αιτίες (πρωτοπαθής χολική κίρρωση, προκαλούμενη από φάρμακο ηπατική νόσο, μεταμόσχευση ήπατος απόρριψη) ή μοσχεύματος έναντι του ξενιστή (GVH) ασθένεια, θα παρομοίως αυξημένα και λιγότερο διακριτές από εξωηπατικούς αιτίες (απόφραξη αεραγωγών από στένωση , πέτρα, ή όγκου), όλα αυξάνονται κάποια τετραπλή. Σε ηπατοκυτταρικό νόσου (π.χ., διάφορες μορφές ηπατίτιδας, κίρρωσης, διηθητική διαταραχές), τα επίπεδα τείνουν να είναι χαμηλότερες με κάποια επικάλυψη. Μεμονωμένες αυξήσεις (άλλες εξετάσεις ήπατος είναι κανονική) συμβαίνουν σε κοκκιωματώδη ή εστιακή ηπατική νόσο (π.χ., απόστημα, νεοπλασματική διήθηση ή μερική απόφραξη του χοληδόχου πόρου). Σε ορισμένες εξωηπατικές κακοήθειες, χωρίς μετάσταση στο ήπαρ, η αιτία είναι ασαφής: βρογχογενές καρκίνωμα μπορεί να παράγει τα δικά της αλκαλικής φωσφατάσης του? υπερνέφρωμα στο 15% των περιπτώσεων προκαλεί μια μη ειδική ηπατίτιδα ως υποτιθέμενη προέλευση του ενζύμου ανύψωση. Για το λέμφωμα Hodgkin, η αιτία του απομονωμένου ανύψωση αλκαλική φωσφατάση είναι άγνωστη. Σε γενικές γραμμές ένα απομονωμένο ύψωμα αλκαλική φωσφατάση βρίσκεται σε μια κατά τα άλλα ασυμπτωματικών ενηλίκων, ιδιαίτερα εάν οι ηλικιωμένοι, δεν αξίζει να διερευνηθεί.

Η

Τεχνικές χρησιμοποιώντας αδρανοποίηση θερμότητας ή ηλεκτροφόρηση μπορεί να διακρίνει οστό εναντίον του ήπατος προέλευσης για την αλκαλική φωσφατάση, αλλά χρησιμοποιώντας ένα άλλο ένζυμο του ορού παρέχει μια απλούστερη διάκριση: 5′-νουκλεοτιδάση είναι μια ομάδα φωσφατασών που διαφέρουν βιοχημικά από αλκαλικό φωσφατάση? καταλύουν την υδρόλυση των νουκλεοτιδίων (π.χ., η αδενοσίνη 5′-φωσφορικής) για την απελευθέρωση του ανόργανου φωσφορικού από την θέση 5 ‘και περιορίζονται στις μεμβράνες του κυττάρου πλάσματος ήπατος. Αυτό το ένζυμο αυξάνει σε ηπατοχολική, αλλά όχι των οστών, νόσους. Στην πράξη, είναι χρήσιμο για την αξιολόγηση της anicteric ασθενή. Οι τιμές είναι χαμηλές στην παιδική ηλικία, αυξάνεται σταδιακά κατά τη διάρκεια της εφηβείας, και το οροπέδιο μετά την ηλικία των 50 yr. 5′-νουκλεοτιδάσης κανονικά αυξημένα σε ορισμένες γυναίκες κατά τη διάρκεια του τελευταίου τριμήνου της κύησης. Λόγω της ειδικότητας του για ηπατική νόσο, 5’-νουκλεοτιδάση προσφέρει κάποιο πλεονέκτημα πάνω από αλκαλική φωσφατάση, αλλά ούτε μπορεί να διαφοροποιήσει αποφρακτική από ηπατοκυτταρική νόσο. Μπορούν να είναι ή να μην αυξηθεί και η πτώση παράλληλα.

Η γ-γλουταμυλτρανσφεράση (ή γ-γλουταμυλ τρανσφεράση –GGT) είναι ένα ένζυμο (που υπάρχουν στο ήπαρ, το πάγκρεας, και τους νεφρούς) που μεταφέρει την ομάδα γάμμα-γλουταμυλ από ένα πεπτίδιο με ένα άλλο πεπτίδιο ή σε ένα L-αμινοξύ. Τα επίπεδα της GGT είναι αυξημένα σε ηπατοχολικών και παγκρεατικών ασθενειών που εμποδίζουν την κοινή αγωγού, αλλά είναι φυσιολογικό στην εγκυμοσύνη και η νόσος των οστών. επίπεδα GGT ανάλογες με αυτές των αλκαλικής φωσφατάσης και 5′-νουκλεοτιδάσης σε χολοστατική συνθήκες. Επειδή δεν είναι φυσιολογικά αυξημένα κατά την εγκυμοσύνη ή την παιδική ηλικία, GGT έχει ένα ρόλο εδώ στην ανίχνευση ηπατοχολική νόσο. Ναρκωτικά και κατάποση αλκοόλ, τα οποία επάγουν ένζυμα μικροσωμικά, επίσης ανυψώσει GGT? μόνο, είναι μια φτωχή δείκτης για αλκοολική ηπατοπάθεια. Σε συνδυασμό με τρανσαμινάσες, η ανίχνευση της κατάχρησης οινοπνεύματος γίνεται πιο ασφαλής. Η εξαιρετική ευαισθησία (μεγαλύτερη από αλκαλική φωσφατάση) του ενζύμου αυτού περιορίζει τη χρησιμότητά του, αλλά η δοκιμή αντικαθιστά 5′-νουκλεοτιδάσης για την ανίχνευση της νόσου του ήπατος και των ως η αιτία ενός απομονωμένου αύξηση της αλκαλικής φωσφατάσης.

Η τρανσαμινάσες: ασπαρτική τρανσαμινάση (AST –formerly SGOT) υπάρχει στην καρδιά, στους σκελετικούς μύες, τον εγκέφαλο και τους νεφρούς καθώς και το ήπαρ. επίπεδα AST αυξάνουν επίσης σε ΜΙ, καρδιακή ανεπάρκεια, τραυματισμό των μυών, τη νόσο του ΚΝΣ, και άλλες nonhepatic διαταραχών. Παρά την κάποια μη ειδικότητα, τα υψηλά επίπεδα υποδεικνύουν ηπατική βλάβη των κυττάρων. Οι τιμές των & gt? 500 IU /L (& gt? 400 U./mL) υποδηλώνουν οξεία ιογενή ή τοξική ηπατίτιδα. Τέτοιες υψηλές τιμές εμφανίζονται επίσης σε σημαντική καρδιακή ανεπάρκεια (ισχαιμικό ηπατίτιδα) και ακόμη και με κοινές πέτρες αγωγού. Το μέγεθος της ανύψωσης δεν έχει προγνωστική αξία και δεν συσχετίζεται με το βαθμό της βλάβης του ήπατος. AST είναι αξιόπιστη και μέρος της ρουτίνας για ηπατική νόσο. Σειριακή δοκιμή παρέχει καλή παρακολούθηση: Μια πτώση στην κανονική δείχνει ανάκαμψη, εκτός αν συνδέονται με τα τελικά στάδια της μαζικής ηπατική νέκρωση.

η τρανσαμινάση της αλανίνης (ALT –formerly SGPT) βρίσκεται κυρίως στα κύτταρα του ήπατος και ως εκ τούτου έχει μεγαλύτερη εξειδίκευση για ηπατική νόσο, αλλά προσφέρει ελάχιστα άλλο πλεονέκτημα. Στις περισσότερες ασθένειες του ήπατος, η αύξηση AST είναι μικρότερη από εκείνη των ALT (AST λόγος /ALT & lt? 1), εκτός από το οινόπνευμα ηπατικής βλάβης όπου η αναλογία είναι συχνά & gt? 2. (Η βάση για αυτό είναι η μεγαλύτερη ανάγκη του 5′-φωσφορικής πυριδοξάλης ως συμπαράγοντας για ALT? Αυτό συμπαράγοντας είναι ανεπαρκές στον αλκοολικό, περιορίζοντας την άνοδο της ALT.) Πολλά εξαιρέσεις περιορίζουν την πρακτικότητα της αναλογίας. Ωστόσο, ένας λόγος & gt? 3 με μια υπέρμετρη αύξηση της GGT (& gt? 2 φορές η αλκαλική φωσφατάση) είναι ιδιαίτερα υποβλητική.

Η γαλακτική αφυδρογονάση: LDH, συνήθως περιλαμβάνονται στην αυτοματοποιημένη ανάλυση, είναι ευαίσθητος ως δείκτης της ηπατοκυτταρικής βλάβης, αλλά είναι καλύτερα ως δείκτης για αιμόλυση ή ΜΙ. Θα μπορούσε να είναι αρκετά υψηλή με κακοήθειες που περιλαμβάνουν το ήπαρ.

η μέτρηση της δραστηριότητας φωσφατάσης βασίζεται στο έργο του Brandenberger και Hanson (1953) και Hofstee (1954). Η καταλυτική επίδραση του ενζύμου επί του αρχικού ρυθμού υδρόλυσης του φωσφορικού ο-καρβοξυφαινυλ προσδιορίζεται. Το σαλικυλικό οξύ, σε αντίθεση με το φωσφορικό εστέρα, απορροφά το φως μέγιστο περίπου στα 300 nm? ως εκ τούτου, ο ρυθμός υδρόλυσης μπορεί να προσδιοριστεί από την αύξηση της απορρόφησης. Μία μονάδα υδρολύει ένα μικρογραμμομόριο φωσφορικού ο-καρβοξυ ανά λεπτό σε 25 癈 και ρΗ 8.8 υπό τις συγκεκριμένες συνθήκες.

Η Αντιδραστήρια

Η 0,1 Μ Tris⋅HCl, ρΗ 8,5

0.2 Μ γλυκίνη , ρΗ 8.8

0.05 Μ χλωριούχο μαγνήσιο

3.65 mM ο-καρβοξυφαινυλ φωσφορικού (OCPP)

Enzyme

Η Διαλύονται στο ένα mg /ml σε 0,1 Μ Tris-HCI, ρΗ 8.5 (διάλυμα στοκ ). Μια περαιτέρω αραίωση μπορεί να απαιτηθεί μετά την ενεργοποίηση.

Η Διαδικασία

Η ενεργοποίηση του ενζύμου με επώαση του διαλύματος mg /ml για 20-30 λεπτά σε λουτρό 25 癈 νερό.

Η Ρυθμίστε φασματοφωτόμετρο στα 300 nm και 25 癈

η σιφώνιο κάθε κυψελίδα ως εξής:.

η 0.2 Μ γλυκίνη, ρΗ 8,8 2,0 ml

3,65 mM OCPP 1,0 ml

0,05 Μ MgCl2 0,5 ml

Η Επωάστε στο φασματοφωτόμετρο σε 25 癈 για 3-4 λεπτά για να φτάσετε εξισορρόπηση της θερμοκρασίας και να δημιουργήσουν κενό ρυθμό, αν υπάρχουν. Προσθέστε 0,1 ml διαλύματος μετοχών και αύξηση ρεκόρ A300 /λεπτό από το αρχικό γραμμικό τμήμα της καμπύλης.

Η Υπολογισμός

Η

Η

Η

Δανιήλ Hammoudi.MD

https://sinoemedicalassociation.com

ιατρικών πληροφοριών για όλους

Αυτό είναι για εκπαιδευτικούς σκοπούς μόνο. Δεν προορίζεται να αντικαταστήσει τη διαβούλευση και εξέταση από

γιατρό σας ή άλλο φορέα παροχής υγειονομικής περίθαλψης