Αφηρημένο

Μύες διηθητικό καρκίνο της ουροδόχου κύστης (MIBC, στάδιο ≥T2) συνδέεται γενικά με κακή πρόγνωση , που αποτελεί τη δεύτερη πιο συχνή αιτία θανάτου μεταξύ των ουροποιογεννητικού όγκους. Λόγω υψηλού μοριακού ετερογένεια σημαντικές διαφορές στη φυσική ιστορία και τη νόσο του αποτελέσματος έχουν παρατηρηθεί. Αυτό καθυστέρησε επίσης την εισαγωγή των εξατομικευμένων θεραπευτικών, καθιστώντας προχωρημένο στάδιο καρκίνου της ουροδόχου κύστης σχεδόν ένα ορφανό νόσου όσον αφορά τη θεραπεία. Altered πρωτεΐνη γλυκοζυλίωσης μεταφρασμένο από την έκφραση του αντιγόνου σιαλυλ-Τη (LHR) και του προδρόμου της Tn, καθώς και την ενεργοποίηση της ΡΙ3Κ /Akt μονοπάτι /mTOR είναι καρκινο-συναφές γεγονότα που μπορεί να κατέχει το δυναμικό για τη διαστρωμάτωση των ασθενών και καθοδηγείται θεραπεία. Ως εκ τούτου, μια αναδρομική μελέτη, 96 όγκοι της ουροδόχου κύστης σε διαφορετικά στάδια (Ta, T1-T4) υποβλήθηκε σε διαλογή για STn και φωσφορυλιωμένες μορφές της Akt (pAkt), mTOR (pmTOR), S6 (PS6) και ΡΤΕΝ, που σχετίζονται με την ενεργοποίηση του PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι. Στη σειρά μας, η έκφραση του Tn ήταν υπολειμματικού και δεν συνδέεται με το στάδιο ή το αποτέλεσμα, ενώ STn ήταν στατικά υψηλότερη σε MIBC σε σύγκριση με μη-μυ επεμβατικές όγκους (ρ = 0.001) και συνδέονται μειωμένη ειδική για τον καρκίνο επιβίωση (log rank p = 0.024). Αντίθετα, PI3K /Akt /mTOR ενδιάμεσα οδός έδειξε μια ίση κατανομή μεταξύ των μη-μυϊκή διηθητικό καρκίνο της ουροδόχου κύστης (NMIBC) και MIBC και δεν συνδέουν με την επιβίωση του καρκίνου-εξειδικευμένους (CSS) σε οποιαδήποτε από αυτές τις ομάδες. Ωστόσο, η υπερέκφραση του ρΑΚΤ, pmTOR ή /και PS6 επιτρέπονται διακρίσεις το STN θετικούς όγκους σε προχωρημένο στάδιο της ουροδόχου κύστης αντιμετωπίζει τη χειρότερη CSS (p = 0,027). Επιπλέον, πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox αποκάλυψε ότι η υπερέκφραση του /Akt /mTOR πρωτεΐνες μονοπατιού PI3K στο STn + MIBC συσχετίστηκε ανεξάρτητα με περίπου 6 φορές τον κίνδυνο θανάτου από καρκίνο (p = 0,039). Ποντικοί που φέρουν προχωρημένο στάδιο χημικά επαγόμενης όγκους της ουροδόχου κύστης μιμούνται την ιστολογική και μοριακή φύση των ανθρώπινων όγκων στη συνέχεια χορηγούνται με sirolimus αναστολέα mTOR-οδού (ραπαμυκίνη). Αυτό μειώθηκε ο αριθμός των επεμβατικών αλλοιώσεων και, συνακολούθως, η έκφραση των STn και επίσης PS6, το καθοδικός τελεστής του μονοπατιού ΡΙ3Κ /Akt /mTOR. Εν κατακλείδι, STn βρέθηκε να είναι δείκτης κακής πρόγνωσης στον καρκίνο της ουροδόχου κύστης και, σε συνδυασμό με την ΡΙ3Κ /Akt /mTOR μονοπάτι αξιολόγηση, κατέχει δυνατότητες βελτίωσης της διαστρωμάτωσης του σταδίου της νόσου. Τα πειράματα σε ζώα δείχνουν ότι η mTOR αναστολή της οδού θα μπορούσε να είναι μια πιθανή θεραπευτική προσέγγιση για το συγκεκριμένο υπότυπο του MIBC

Παράθεση:. Costa C, Pereira S, Λίμα L, Peixoto Α, Fernandes Ε, Neves D, et al. (2015) παθολογική πρωτεΐνη γλυκοζυλίωση και Ενεργός PI3K /Akt /mTOR Pathway: Ρόλος σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης Πρόγνωση και Στοχευμένες Therapeutics. PLoS ONE 10 (11): e0141253. doi: 10.1371 /journal.pone.0141253

Επιμέλεια: Francisco X. Real, Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO), Ισπανία

Ελήφθη: 28 του Ιούλη του 2015? Αποδεκτές: 6 Οκτώβρη του 2015? Δημοσιεύθηκε: 16 του Νοεμβρίου, 2015

Copyright: © 2015 Costa et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από την πορτογαλική Ίδρυμα για την Επιστήμη και την Τεχνολογία (FCT) Μεταδιδακτορικός χορηγεί SFRH /BPD /66288/2009 (José Alexandre Ferreira), SFRH /BPD /101827/2014 ( Luis Lima), SFRH /BPD /85462/2012 (Rui Gil da Costa) και επιχορηγήσεις PhD SFRH /BD /103571/2014 (Elisabete Fernandes) και SFRH /BD /111242/2015 (Andreia Peixoto). FCT συγχρηματοδοτείται από το Ευρωπαϊκό Κοινωνικό Ταμείο (ΕΚΤ) στο πλαίσιο Ανθρώπινου Δυναμικού Επιχειρησιακού Προγράμματος (POPH) από το Εθνικό Στρατηγικό Πλαίσιο Αναφοράς (ΕΣΠΑ). Οι συγγραφείς αναγνωρίζουν επίσης οικονομική στήριξη από ICBAS-UP (Céu Costa και τη Σόφια Pereira) και της Πορτογαλικής Ουρολογικής /Pfizer βραβείο το 2013. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την παρασκευή του . χειρόγραφο

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνου της ουροδόχου κύστης είναι η δεύτερη πιο θανατηφόρα ουροποιητικό όγκου και παρουσιάζει σημαντικά χειρότερη πρόγνωση μετά

muscularis propria

εισβολή [1]. Περίπου το 20-30% των νεοδιαγνωσθέντων περιπτώσεις είναι η μυϊκή διηθητικού καρκίνου της ουροδόχου κύστης (MIBC? Τ2-Τ4 στάδια), ενώ το 50% είναι μη-μυϊκή επεμβατικές όγκους της ουροδόχου κύστης (NMIBC) με υψηλό δυναμικό για να προχωρήσουν στην εισβολή. επεξεργασία MIBC περιλαμβάνει κυστεκτομή και (νεο) ανοσοενισχυτικό σισπλατίνη βασίζεται σε σχήματα χημειοθεραπείας [2]. Ωστόσο, σημαντικές μεταβολές στην φυσική ιστορία της νόσου και αποκρίσεων σε θεραπεία μπορεί να παρατηρηθεί μεταξύ των όγκων με ταυτόσημα ιστολογικά χαρακτηριστικά, αντανακλώντας υψηλού μοριακού ετερογένεια τους [3]. Επιπλέον, περίπου το 50% των περιπτώσεων αναπτύξει μετάσταση εντός 5 ετών, προτρέποντας την ταυτοποίηση βιοδεικτών για να βοηθήσει την πρόγνωση και την ανάπτυξη πιο αποτελεσματικών στοχευμένων θεραπευτικών [4].

Για να καλύψει αυτή την ανάγκη, έχουμε αντιμετωπίσει πρόσφατα την έκφραση του καρκινο-συναφές αντιγόνο σιαλυλ-τη (LHR) σε μία μικρή προοπτική σειρά ασθενών μη επιλεγμένων καρκίνου της ουροδόχου κύστης [5]. STn είναι μια ανώμαλη μετα-μεταφραστική τροποποίηση η οποία προκύπτει από μια πρόωρη στάση στην κυτταρική μεμβράνη πρωτεΐνες

O

-glycosylation με σιαλυλίωση του αντιγόνου Tn (Σχήμα 1Α). Σε όγκους της ουροδόχου κύστης, STn ήταν κυρίως παρούσα σε προχωρημένες περιπτώσεις στάδιο, ενώ απουσιάζει από τις περισσότερες χαμηλού βαθμού NMIBC [5]. Επιπλέον, δεν εκφράζεται από το κανονικό ουροθήλιο, υποδηλώνει ένα ειδικό καρκίνου φύση [5]. Μελέτες

in vitro

έδειξαν ότι η έκφραση STn προικισμένη καρκινικά κύτταρα της ουροδόχου κύστης με υψηλή ικανότητα εισβολής [5] και ένα immunotolerogenic φαινότυπο, πιθανώς ευνοεί τη διάδοση της νόσου [6]. Μεταβολές στη γλυκοζυλίωση πρωτεϊνών κυτταρικής επιφάνειας να εμπλέκεται στην ενεργοποίηση των ενδοκυττάριων οδών ογκογονικής σηματοδότησης [7], συμπεριλαμβανομένης της φωσφοϊνοσιτιδίου-3 κινάση (ΡΙ3Κ) /Akt μονοπάτι σηματοδότησης [8], η οποία θεωρείται ότι παίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην ανάπτυξη του καρκίνου της ουροδόχου κύστης . Αυτές οι προκαταρκτικές παρατηρήσεις υποστηρίζουν την υπόθεση ότι η έκφραση STn μπορεί να παίξει καθοριστικό ρόλο στην έκβαση της νόσου, η οποία δικαιολογεί μια βαθύτερη έρευνα. Αρκετές μελέτες δείχνουν επίσης ότι Tn αντιγόνου, η οποία είναι ένας πρόδρομος του STn, μπορεί επίσης να εμπλέκεται στην ογκογόνο γεγονότα [7]? Ωστόσο, τίποτα δεν είναι γνωστό για την έκφραση αυτής της γλυκάνης σε όγκους της ουροδόχου κύστης.

Α) Εκπροσώπηση της πρωτεΐνης μεμβράνης

O

-glycosylation με έμφαση στην έκφραση STn από τα καρκινικά κύτταρα. Αυτή είναι μια εξαιρετικά οργανωμένη διαδικασία ζωτικής σημασίας για τη σταθερότητα και λειτουργία των πρωτεϊνών. Εν συντομία, πρόσφατα συντεθεί πρωτεΐνες είναι

O

-glycosylated στη συσκευή Golgi με την προσθήκη ppGalNAcTs μεσολάβηση του ημίσεως ΟαΙΝΑο στα υπολείμματα Ser /Thr. Αυτό προέρχεται το αντιγόνο Tn (ΟαΙΝΑο-O-Ser /Thr-πρωτεΐνη ραχοκοκαλιά), η οποία είναι η απλούστερη Ο-γλυκάνη. Σε φυσιολογικά κύτταρα αυτά αλυσίδες επεκτείνεται μέσω της διαδοχικής προσθήκης άλλων σακχάρων για πρώτη φορά από CGALT-1 και, στη συνέχεια, άλλα ένζυμα. Αυτό καταλήγει σε εξαιρετικά πολύπλοκες, ετερογενή και επιμήκη γλυκάνες συχνά καταγγελθεί από ΑΒΟ ή ομάδα Lewis αίματος που σχετίζονται με αντιγόνα (αριστερά σχέδιο). Στα καρκινικά κύτταρα το αντιγόνο Tn αμέσως σιαλυλιωμένη από ST6GalNAc.I, καταγωγής το αντιγόνο STn (Neu5Ac-ΟαΙΝΑο-O-Ser /Thr ραχοκοκαλιά-πρωτεΐνη), αναστέλλοντας έτσι την περαιτέρω επιμήκυνση αλυσίδας (δεξιά εικόνα). Η έκφραση του STn στην επιφάνεια του κυττάρου επηρεάζει προσκόλλησης κυττάρου-κυττάρου και αναγνώριση καρκινικών κυττάρων, ευνοώντας την κινητικότητα, την εισβολή και το ανοσοποιητικό διαφυγής. Β) Σχηματική αναπαράσταση της ΡΙ3Κ /Akt /mTOR μονοπάτι, το οποίο είναι πανταχού παρούσες ενεργοποιείται σε όγκους της ουροδόχου κύστης. Αυτή είναι μια εξαιρετικά διατηρημένη οδός ρυθμίζεται κυρίως από μια ευρεία ποικιλία εξωκυτταρικών σημάτων, συμπεριλαμβανομένων των μιτογόνο αυξητικούς παράγοντες, ορμόνες, θρεπτικά συστατικά, κυτταρικά επίπεδα ενέργειας και τις συνθήκες στρες. Αυτά τα σήματα ενεργοποιούν κινάσες τυροσίνης υποδοχέα που στρατολογούν ΡΙ3Κ, το οποίο καταλύει τη μετατροπή του δεσμευμένου με μεμβράνη ΡΙΡ2 προς ΡΙΡ3. Στη συνέχεια, Akt και PDK-1 ενεργοποιούνται μέσω σύνδεσης προς ΡΙΡ3. PTEN αποφωσφορυλιώνει προτίμηση ΡΙΡ3, αναστέλλοντας την εξέλιξη της σηματοδότησης. Πλήρης Akt ενεργοποίησης απαιτεί διπλή φωσφορυλίωση από PDK-1 μόνη της και PDK-2 (δεν φαίνεται). Akt φωσφορυλιώνει την πρωτεΐνη mTOR άμεσα ή μπορεί επίσης να αδρανοποιήσουν συγκρότημα TSC1 /TSC2, αναστέλλοντας mTOR αδρανοποίηση. mTORC1 προκαλεί κυτταρική ανάπτυξη και τον πολλαπλασιασμό με φωσφορυλίωση ευκαρυωτικά ρυθμιστές μετάφρασης, μεταξύ αυτών p70S6 κινάσης (p70S6K ή S6K1) ότι, με τη σειρά του, φωσφορυλιώνει την ριβοσωμική πρωτεΐνη S6 (PS6), και ο παράγοντας έναρξης ευκαρυωτικό μετάφραση 4Ε-πρωτεΐνης δέσμευσης 1 (4E-BP1 ). Για το mTOR πρωτεΐνη για την ενεργοποίηση καταρράκτη σηματοδότησης του, πρέπει να αποτελεί τη ραπαμυκίνη ευαίσθητης τριαδικό σύμπλοκο mTORC1. Βασικά PI3K /Akt /mTOR πρωτεΐνες-μονοπάτι pAkt, pmTOR και PS6 διερευνηθούν σε αυτό μελετήθηκαν αναδεικνύονται από πορτοκαλί κύκλους.

Η

Η φωσφατιδυλοϊνοσιτόλης-3-κινάση (PI3K) /Akt και ο στόχος της ραπαμυκίνης στα θηλαστικά οι (mTOR) μονοπάτια συνδέονται μεταξύ τους καταρράκτες απαραίτητη για την ανάπτυξη των κυττάρων της ουροδόχου κύστης και την επιβίωση (Σχήμα 1Β) σηματοδότησης. Η ΡΙ3Κ /Akt /mTOR ή mTOR μονοπάτι ενσωματώνει ένα πλήθος εξωκυτταρικών σημάτων να ρυθμίζουν τη σύνθεση κατάντη σηματοδότησης και της πρωτεΐνης, η οποία τελικά οδηγεί σε ανταγωνιστικό πλεονέκτημα ανάπτυξης, η μεταστατική ικανότητα, την αγγειογένεση, και την αντίσταση θεραπεία [9]. Ο καταρράκτης σηματοδότησης αρχίζει με την ενεργοποίηση της ΡΙ3Κ στην κυτταρική μεμβράνη που ακολουθείται από κινάσης σερίνης /θρεονίνης Akt μετατόπιση της κυτταρικής μεμβράνης και την ενεργοποίηση. Το καλύτερα μελετημένο κατάντη υπόστρωμα του Akt είναι η σερίνη /θρεονίνη κινάση mTOR, των οποίων καθοδικός τελεστής είναι S6 κινάση-1 (S6K1). Συγκεκριμένα, ένα υποσύνολο του mTOR μονοπάτι μεταβολές έχουν δειχθεί να συμβεί σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης, όπως μεταλλάξεις σε

PIK3CA

γονίδιο, το οποίο κορυφώνεται με κύτταρα αυξημένη σηματοδότηση mTOR και καρκίνου της ουροδόχου κύστης αντίσταση στην απόπτωση [10]. Επιπλέον, η φαρμακολογική ή βιοχημική αναστολή της οδού ΡΙ3Κ μείωσε δραστικά την επεμβατική ικανότητα των κυτταρικών σειρών καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Επιπλέον, πάνω από το ήμισυ των πρωτογενών όγκων ανθρώπινης κύστης παρουσιάζουν υψηλή Akt φωσφορυλίωση και η παρεκκλίνουσα ενεργοποίηση αυτού του μονοπατιού έχει προταθεί να συμβάλει στην εισβολή [11]. Ένα άλλο γεγονός που επηρεάζει την ενεργοποίηση του mTOR μονοπάτι στους όγκους της ουροδόχου κύστης περιλαμβάνει την απώλεια των ογκοκατασταλτικών ΡΤΕΝ (φωσφατάση και tensin ομόλογο διαγράφονται στο χρωμόσωμα δέκα) λειτουργία [12]. PTEN κανονικά καταστέλλει την ενεργοποίηση της PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι ανταγωνισμό PI3K και εμποδίζει την ενεργοποίηση της Akt και PDK-1. ΡΤΕΝ λειτουργεί επίσης για τη ρύθμιση χημειοταξία και κυτταρική κινητικότητα, προωθώντας έτσι την εισβολή του όγκου [13]. Εν ολίγοις, υπάρχουν ενδείξεις ότι μια συνολική αξιολόγηση των συνδεδεμένων πρωτεϊνών PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι μπορεί να κατέχει σημαντικές δυνατότητες για την αξία για τη διαστρωμάτωση των ασθενών. Επιπλέον, πολλές προκλινικές και κλινικές μελέτες υποστηρίζουν ότι οι αναστολείς mTOR, όπως sirolimus (ραπαμυκίνη) και τα παράγωγά τους μπορούν να βελτιώσουν τη θεραπεία του καρκίνου [13,14].

Με βάση αυτές τις παρατηρήσεις υποθέτουμε ότι Tn ή /και της STN μπορεί δρουν συνεργικά με την οδό mTOR να οδηγεί εξέλιξης του καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Ως εκ τούτου, έχουμε αφιερωμένο στην αξιολόγηση της έκφρασης του STn και πρωτεϊνών που σχετίζονται με την ενεργοποίηση της ΡΙ3Κ //ενεργοποίησης μονοπάτι mTOR Akt σε όγκους της ουροδόχου κύστης σε διαφορετικά στάδια. Αναμένουμε ότι ο συνδυασμός των εξωκυτταρικών και ενδοκυτταρικών ογκογόνο γεγονότα μπορεί να βελτιώσει τη διαστρωμάτωση των ασθενών και παρέχει γνώσεις για νέα θεραπευτικά. Επιπλέον, έχουμε εκτιμήσει την επίδραση του sirolimus σε χημικά που προκαλείται urothelial όγκων σε ποντίκια, με όραμα τη δημιουργία μιας λογικής για την πιο αποτελεσματική θεραπευτική του καρκίνου της ουροδόχου κύστης.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

το έργο περιλαμβάνει την εμπειρία σε δείγματα όγκων των ασθενών που έχουν διαγνωστεί με καρκίνο της ουροδόχου κύστης στην πορτογαλική Ινστιτούτο Ογκολογίας του Πόρτο. Όλες οι διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν μετά από γραπτή συγκατάθεση του ασθενούς και εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της πορτογαλικής Ινστιτούτο Ογκολογίας-Πόρτο. Όλα κλινικοπαθολογοανατομικές πληροφορίες που ελήφθησαν από τα κλινικά αρχεία των ασθενών.

Επίσης περιλαμβάνει πειράματα σε ζώα. Όλες οι διαδικασίες που αφορούν τα ζώα εκτελέστηκαν σύμφωνα με την Ευρωπαϊκή Οδηγία 2010/63 /ΕΕ. Κατά τη διάρκεια αυτής της μελέτης, τα ζώα τρέφονται

κατά βούληση

με τυποποιημένα τρόφιμα (Tecklad Παγκόσμια Διατροφή, Harlan, Ισπανία). Το ακόλουθο πρωτόκολλο εγκρίθηκε από την Επιτροπή πορτογαλική Δεοντολογίας για τα πειράματα σε ζώα (Direção Geral de Veterinaria, έγκριση. 520/000/000/2003). Όλοι οι ποντικοί που χρησιμοποιήθηκαν στο πείραμα εγκλιματίστηκαν για μία εβδομάδα κάτω από συνήθεις εργαστηριακές συνθήκες πριν από την έναρξη των πειραμάτων. Αυτοί στεγάστηκαν τυχαία σε ομάδες των 4-5 σε πλαστικά κλουβιά, με σκληρό ροκανίδια για κρεβάτι. Τα ζώα διατηρήθηκαν σε ένα δωμάτιο με ελεγχόμενη θερμοκρασία 23 ± 2 ° C, a /σκότους 12 ωρών φωτός και 55 ± 5% υγρασία. λύσεις πόσιμο των ζώων έχουν αλλάξει μία φορά την εβδομάδα ή και νωρίτερα εάν είναι απαραίτητο, και ο μεθυσμένος όγκου καταγράφηκε. Εβδομαδιαία πρόσληψη τροφής παρατηρήθηκε επίσης. Όλοι οι ποντικοί παρακολουθήθηκαν σε όλο το πείραμα για σημάδια δυσφορίας και απώλεια σωματικού βάρους. Τα ζώα θανατώθηκαν με 0,4% πεντοβαρβιτάλη νατρίου (1 ml /Kg, ενδοπεριτοναϊκή).

Πληθυσμός

Αυτή η μελέτη διεξήχθη σε μια αναδρομική σειρά 96 όγκων της ουροδόχου κύστης εγκλεισμένα σε παραφίνη σταθεροποιημένα με φορμαλίνη λαμβάνεται από αρχειοθετημένα μπλοκ παραφίνης στο πορτογαλικό Ινστιτούτο Ογκολογίας-Πόρτο (ipop), Πορτογαλία. όγκοι της ουροδόχου κύστης που προέρχονται από 82 άνδρες και 14 γυναίκες, ηλικίας 38 έως 92 ετών (διάμεση τιμή των 69,5 χρόνια), παραδέχθηκε και αντιμετωπίζονται στο ipop μεταξύ του 2005 και του 2007. Σαράντα επτά από τους εξετάστηκαν οι όγκοι ιστολογικά ταξινομούνται ως NMBIC (Ta και Τ1) και 49 ως επεμβατική βλάβες (Τ2-Τ4). Δεκαέξι ήταν χαμηλής ποιότητας και 80 ήταν υψηλές όγκους βαθμού, σύμφωνα με τα κριτήρια ταξινόμησης WHO 2004. Επιπλέον, καρκίνωμα

in situ

(CIS) βρέθηκε ταυτόχρονα σε 20,8% των ασθενών. Η περίοδος μέσο χρόνο παρακολούθησης ήταν 45 μήνες (1-134 μήνες). Κυστεκτομή πραγματοποιήθηκε σε 64 ασθενείς (66,7%), ενώ το άλλο 32 (33,3%) υποβλήθηκαν σε διουρηθρική εκτομή. Λεμφαδενεκτομή διεξήχθη σε περίπου 47% των ασθενών και από εκείνα τα 37% παρουσίασε μετάσταση. Πενήντα τέσσερις (56,3%) όγκοι ήταν πρωτοβάθμιας και 42 (43,7%) ήταν επαναλαμβανόμενες όγκους. Από τις επαναλαμβανόμενες όγκους, 38% δεν είχε καμία προηγούμενη θεραπεία, το 27% έλαβαν θεραπεία με μιτομικίνη C, 11% με BCG και 19% υποβλήθηκαν σε δύο αγωγές. Επιπλέον 5% αυτών των ασθενών υποβλήθηκαν σε θεραπεία με εισαγωγική χημειοθεραπεία πριν από την κυστεκτομή. Ο Πίνακας 1 συνοψίζει την κλινικοπαθολογικών πληροφορίες.

Η

Καρκίνος-ειδική επιβίωση (CSS) ορίστηκε ως το διάστημα μεταξύ της αφαίρεσης του όγκου με χειρουργική επέμβαση και είτε τον θάνατο του ασθενούς από τον καρκίνο ή την τελευταία στοιχεία για τα επακόλουθα. Όλες οι διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν μετά από ενημερωμένη συγκατάθεση του ασθενούς και εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της IPO-Πόρτο. Όλα κλινικοπαθολογοανατομικές πληροφορίες που ελήφθησαν από τα κλινικά αρχεία των ασθενών.

Η ανοσοϊστοχημεία

Οι εκφράσεις του αντιγόνου STn, πρόδρομος της Tn, και φωσφορυλιωμένες μορφές της Akt (pAkt), mTOR (pmTOR), S6 ( PS6) και ΡΤΕΝ στους όγκους της ουροδόχου κύστης προσπελαστεί με ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιώντας τη μέθοδο υπεροξειδάσης αβιδίνης /στρεπταβιδίνης, όπως περιγράφεται από τους Ferreira et al. [5]. Οι πληροφορίες σχετικά με τα πρωτεύοντα αντισώματα και οι αραιώσεις που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη συνοψίζονται στον Πίνακα 2. Η ανοσοαντιδραστικότητα αποκαλύφθηκε χρησιμοποιώντας διαμινοβενζιδίνη (DAB, Thermo Scientific LabVision) ως χρωμογόνο και τομές με αιματοξυλίνη του Harris. Οι αρνητικοί έλεγχοι διεξήχθησαν με αντικατάσταση του πρωτογενούς αντισώματος με λευκωματίνη 5% βόειου ορού (BSA). Οι θετικοί μάρτυρες ήταν γνωστά θετικά ιστούς για τα αντιγόνα υπό μελέτη.

Η

Η ανοσοϊστοχημεία βαθμολόγησης των ανθρώπινων όγκων

Οι ανοσοχρωματισμένες τμήματα αξιολογήθηκαν διπλά τυφλά με οπτικό μικροσκόπιο από δύο ανεξάρτητους παρατηρητές (CC και SP) και επικυρωθεί από έναν έμπειρο παθολογοανατόμο (TA). Δεν συνάδουν αναγνώσεις εκ νέου αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας ένα δικέφαλο μικροσκόπιο (Olympus BX46? Ολύμπου Corporation), και επιτεύχθηκε συναίνεση. Μια ημι-ποσοτική προσέγγιση ιδρύθηκε για να σκοράρει το ανοσοϊστοχημική σήμανση με βάση την έκταση και την ένταση της χρώσης.

Με δεδομένη την απουσία Tn και της STN σε υγιή ουροδόχου κύστης [5], οι όγκοι ταξινομούνται ως θετικά για αυτά αντιγόνων όταν μεμβράνη και /ή κυτταροπλασματικές ανοσοαντιδραστικότητα παρατηρήθηκαν σε περισσότερο από το 5% του όγκου, όπως περιγράφεται από τον Ferreira et al. [5,15]. pAkt, pmTOR, PS6 και PTEN εκφράσεις βαθμολογήθηκαν ανάλογα με την ένταση χρώσης (αδύναμο-1 σημείο? μέτρια-2 σημεία? ισχυρά-3 βαθμοί) πολλαπλασιάζεται με το ποσοστό των θετικών κυττάρων (0-5% -0 σημεία? & gt? 5 -25% -1 σημείο? & gt? 25-50% -2 βαθμούς? & gt? 50-75% -3 βαθμούς? & gt? 75-100% -4 μονάδες). Με βάση την ταξινόμηση που προτείνει Nishikawa et al. [16], όγκους με σκορ & lt? 6 θεωρήθηκαν αρνητικά, ενώ εκείνα με score≥6 ταξινομήθηκαν ως θετικά (υπερέκφραση). pAkt αξιολογήθηκε με βάση την πυρηνική ανοσοδραστικότητα, pmTOR και PS6 βασίζεται στην κυτταροπλασματική έκφραση και ΡΤΕΝ τόσο κυτταροπλασματική και πυρηνική χρώση, όπως προτείνεται από άλλες δημοσιεύσεις [17,18].

Πειράματα σε ζώα με sirolimus και ανοσοϊστοχημεία βαθμολόγησης

Οι ιστολογικές τομές της Περιφέρειας Ελέγχου Αποτύπωση (ICR) ποντικών που φέρουν Ν-βουτυλο-Ν- (4-υδροξυβουτυλ) νιτροζαμίνη (BBN) επαγόμενη αλλοιώσεις της ουροδόχου κύστης, που προκύπτουν από την προηγούμενη εργασία μας σχετικά με τον αντίκτυπο του σιρόλιμους για τον καρκίνο της ουροδόχου κύστης [19 ], εξελέγησαν για αυτή τη μελέτη. Εν συντομία, τέσσερις εβδομάδων αρσενικούς ποντικούς ICR (25g? Harlan, Βαρκελώνη, Ισπανία) κατανεμήθηκαν τυχαία σε τέσσερις ομάδες, όπως περιγράφεται λεπτομερώς σε προηγούμενο δημοσίευμα [18]. Ομάδα 1 (η = 6) περιελάμβανε ποντίκια που εκτέθηκαν σε 0,05% ΒΒΝ για 12 εβδομάδες ακολουθούμενη από νερό βρύσης για 8 εβδομάδες (σύνολο 20 εβδομάδες). Ομάδα 2 (n = 7) που περιλαμβάνεται ποντικών που υπέστησαν αγωγή με 0.05% διάλυμα BBN επί δώδεκα εβδομάδες, διατηρείται με κανονικό νερό της βρύσης για μια άλλη εβδομάδα, διαχειριζόμενη ενδοπεριτοναϊκώς με sirolimus mTOR αναστολέα (1,5 mg /kg? Wyeth) για πέντε ημέρες την εβδομάδα για έξι διαδοχικά εβδομάδες, δηλαδή μέχρι την 19

ου εβδομάδα, που ακολουθείται από μια άλλη εβδομάδα του νερού της βρύσης (συνολικά 20 εβδομάδες). Ομάδα 3 (η = 6) περιελάμβανε ποντίκια που εκτέθηκαν σε 0,05% ΒΒΝ για 12 εβδομάδες ακολουθούμενη από νερό βρύσης για 11 εβδομάδες (σύνολο 23 εβδομάδες). Ομάδα 4 (n = 7) που περιλαμβάνεται ποντικών που υπέστησαν αγωγή με 0.05% ΒΒΝ και sirolimus, όπως περιγράφεται για την Ομάδα 2, αλλά με την έκθεση σε νερό της βρύσης μετά από 3 εβδομάδες (σύνολο 23 εβδομάδες). Ομάδα 3 και 4 δημιουργήθηκαν για να εκτιμηθεί η πιθανότητα υποτροπής αργά ή /και μοριακές αλλαγές που προκύπτουν από την παρατεταμένη επιβίωση. Όλες οι διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν σύμφωνα με την Ευρωπαϊκή Οδηγία 2010/63 /ΕΕ. Κατά τη διάρκεια αυτής της μελέτης, τα ζώα τρέφονται

κατά βούληση

με τυποποιημένα τρόφιμα (Tecklad Παγκόσμια Διατροφή, Harlan, Ισπανία). Οι ιστολογικές μεταβολές που προκαλούνται από αυτά τα πειράματα περιελάμβανε τόσο προνεοπλαστικών και νεοπλασματικών βλαβών με επεμβατικές δυνατότητες και επεμβατικές όγκους, όπως περιγράφεται λεπτομερώς από τον Oliveira et al. [18]. Εδώ, οι βλάβες του υψηλού δυναμικού επεμβατική και μυϊκή επιθετικοί όγκοι υποβλήθηκαν σε διαλογή για STn και PS6 με ανοσοϊστοχημεία, όπως περιγράφεται λεπτομερώς για ανθρώπινους όγκους, δεδομένου ότι τα αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν είναι αντιδραστικά έναντι αμφοτέρων των ανθρώπων και των ποντικών. Τόσο η ένταση και η επέκταση του ανοσοχρώση λήφθηκαν υπόψη και να στείλει την έκφραση των αντιγόνων, όπως περιγράφονται στην προηγούμενη ενότητα. Οι αλλοιώσεις της ουροδόχου κύστης και ανοσοχρώση αξιολογήθηκαν διπλά τυφλά από δύο ανεξάρτητους παρατηρητές (CC και SP) και επικυρωθεί από έναν έμπειρο κτηνιατρικό παθολόγο (RMGC).

Η στατιστική ανάλυση

στατιστική ανάλυση των δεδομένων έγινε με IBM Στατιστική Package for Social Sciences-SPSS for Windows (έκδοση 20.0). Chi-square ανάλυση χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνετε κατηγορικές μεταβλητές. καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης STn και ειδική για τον καρκίνο επιβίωση (CSS) και συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ log-rank. Επιπλέον, πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox εκτελέστηκε για να εκτιμήσει τη μεμονωμένη επίδραση των αξιολογούμενων δεικτών για την επιβίωση του ασθενούς και την προσαρμογή σε πιθανούς συγχυτικούς παράγοντες (μεταβλητές που θα μπορούσαν να επηρεάσουν CSS της NMIBC και MIBC ασθενείς). Η συσχέτιση μεταξύ των μορίων μονοπάτι PI3K /Akt /mTOR πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας δοκιμασία Spearman rho.

Αποτελέσματα

Αλλαγμένη γλυκοζυλίωση πρωτεϊνών, μεταφρασμένο από την έκφραση του αντιγόνου του STN και τον πρόδρομο της Tn, PI3K /Akt /mTOR μόρια οδού (pAkt, pmTOR, PS6), και PTEN αδρανοποίηση, είναι βασικά χαρακτηριστικά των όγκων της ουροδόχου κύστης. Εδώ έχουμε αφιερώσει σε μια συνολική ανάλυση αυτών των μοριακών αλλαγών σε μια σειρά ασθενών με καρκίνο της ουροδόχου κύστης σε διαφορετικά στάδια της νόσου, προβλέποντας βιοδείκτες των φτωχών ειδική για τον καρκίνο επιβίωση.

σύνολο δεδομένων μας αποτελείται από 47 NMIBC και 49 ασθενείς MIBC, όπως έδειξε στον πίνακα 1. Σύμφωνα με το Σχήμα 2, NMIBC παρουσίασε υψηλότερη ειδική για τον καρκίνο επιβίωση (CSS? σημαίνει CSS: 119 μήνες) από ό, τι οι ασθενείς MIBC (μέση CSS: 43 μήνες? log rank, p & lt? 0.001). Αυτά τα αποτελέσματα κατέδειξαν ότι σειρά μας αντανακλά τη φυσική πορεία της νόσου και υπογράμμισε τη σημαντικά χαμηλότερη CSS του MIBC σύγκριση με NMIBC περιπτώσεις. Ως εκ τούτου, ιδιαίτερο ενδιαφέρον είχε τεθεί στον εντοπισμό των βιοδεικτών για τη νόσο προχωρημένο στάδιο βασίζεται στη σύγκριση μεταξύ NMIBC και MIBC.

Η ανάλυση Kaplan-Meier που δείχνουν το CSS του NMIBC (Ta και Τ1) και s του MIBC (Τ2 , Τ3 και Τ4). Σύγκριση εκτελούνται από δοκιμασία log-rank (p & lt? 0.001)? + Λογοκρίνονται οι ασθενείς NMIBC? ⧫ λογοκριμένη ασθενείς MIBC.

Η

Tn και της STN εκφράσεις αντιγόνο σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης

Το αντιγόνο Tn παρατηρήθηκε σε περίπου 10% των NMBC και MIBC (Πίνακας 2) και η έκφραση της ήταν υπολειμματική , έκανε δεν υπερβαίνει το 5% της περιοχής του όγκου και χωρίς καθορισμένο πρότυπο. Από την άλλη πλευρά, το αντιγόνο STn ανιχνεύθηκε στο 60% περίπου των υπό μελέτη όγκων της ουροδόχου κύστης, η οποία είναι σύμφωνη με προηγούμενα ευρήματα μας [5]. Το αντιγόνο εκφράζεται κυρίως στην κυτταρική μεμβράνη, αν και θα μπορούσε επίσης να παρατηρηθεί κυτταροπλασματική χρώση. Το αντιγόνο STn παρουσίασε μια εστιακή έκφραση που δεν υπερβαίνει το 30% της έκτασης του όγκου για την πλειονότητα των θετικών περιπτώσεων, ανεξαρτήτως του ιστολογικού καταγωγή τους. STn εκφράστηκε κυρίως από αποδιαφοροποιημένα κύτταρα σε όγκους που δείχνουν

υμένα

(Τ1? 60%) και

muscularis propria

(≥ Τ2? Περίπου 60-90%) την εισβολή? Αντιστρόφως, το ποσοστό των θετικών Ta ήταν μικρότερη από 30% (

ρ

& lt? 0,001? Σχήμα 3Α). Αν και χωρίς στατιστική σημαντικότητα, στο Ta όγκους STn θετικά κύτταρα ήταν κυρίως στα επιφανειακά στρώματα του όγκου μακριά από τα πλοία. Αντιστρόφως, STn θετικά κύτταρα στους όγκους Τ1 (σχήμα 3Β) παρατηρήθηκαν συνοδευτικά ή /και εισβάλλουν στην βασική στιβάδα (σχήμα 3Β), ενώ το MIBC αυτά τα κύτταρα ως επί το πλείστον βρέθηκαν στα μέτωπα εισβολής (Σχήμα 3Β) και εισβολή ή /και στο εσωτερικό του σκάφη, η οποία προτείνει ένα ρόλο στην εισβολή και την ασθένεια διάδοσης. Ενίσχυση αυτές τις παρατηρήσεις, η παρουσία του αντιγόνου STn ήταν στατιστικά υψηλότερη στην MIBC σε σύγκριση με NMIBC (

σ

= 0,001, Πίνακας 3).

(Α) Κατανομή των STn αρνητικών και θετικών όγκων κατά μήκος τα διάφορα στάδια του καρκίνου της ουροδόχου κύστης? (Β) Εκπρόσωπος εικόνες της χρώσης της STN σε NMIBC και MIBC. Αριστερά-NMIBC δείχνει μια υπεροχή των STn θετικών κυττάρων στις επιφανειακές στιβάδες, μακριά από την fibrovascular υποστήριξη? Σημειώστε πλοία χωρίς θετικά κύτταρα. Δεξιά-MIBC δείχνει το μπροστινό εισβολή με το STN θετικά χρωματισμένα κύτταρα? Σημειώστε θετικά ουροφόρων κύτταρα της STN σε αιμοφόρα (βέλος), γεγονός που υποδηλώνει πιθανή εμπλοκή σε μετάσταση.

Η

PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι στον καρκίνο της ουροδόχου κύστης

Η αξιολόγηση της PI3K /μονοπατιού Akt /mTOR /S6 έγινε χρησιμοποιώντας αντισώματα για την ενεργό φωσφορυλιωμένες μορφές της Akt (pAkt), mTOR (pmTOR), και S6 (PS6). ΡΤΕΝ, που ρυθμίζει αρνητικά τη σηματοδότηση Akt, αξιολογήθηκε επίσης.

pAkt ανιχνεύθηκε τόσο στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα. Σε NMIBC περιπτώσεις παρατηρήθηκαν αρκετές περιοχές με διαφορετική ένταση της έκφρασης (Σχήμα 4Α), που δηλώνει ένα ετερογενές πρότυπο που δεν ήταν εμφανής σε MIBC (Σχήμα 4Β). Επιπλέον, τα στρωματικά κύτταρα του MIBC θετικών περιπτώσεων έδειξαν αυξημένη ένταση χρώσης κυρίως στις περιοχές κοντά στον όγκο. pmTOR ανοσολογική αντίδραση ήταν κυτταροπλασματική και, σε ορισμένες περιπτώσεις, να πυρηνικά. Σε ουροδόχου κύστης με εμφανή φυσιολογική έκφραση ιστολογία pmTOR περιορίστηκε σε επιφανειακά στρώματα κυττάρων. Σε NMIBC έκφραση pmTOR ήταν ομοιόμορφα κατανεμημένα σε όλη την διάφορα στρώματα του ουροθηλιακά κύτταρα, αν και υπήρξε μια πιο έντονη χρώση στις επιφανειακές στιβάδες (Σχήμα 4C). Επιπλέον, παρατηρήθηκαν αρκετές περιοχές με μεταβλητή ένταση χρώσης, που υποδηλώνει μια ετερογενή έκφραση. Σε MIBC Θετικά περιπτώσεις, η έκφραση pmTOR ήταν εστιακό και ετερογενείς (Σχήμα 4D). PS6 ανοσολογική αντίδραση ήταν κυρίως κυτταροπλασματική. Σε NMIBC έκφραση PS6 σημειώθηκε σε όλα τα επιφανειακά στρώματα, τόσο στην ομπρέλα και διαφοροποιημένα κύτταρα (Σχήμα 4Ε). Η ανοσοαντιδραστικότητα PS6 ποίκιλαν μεταξύ των κυττάρων του όγκου. Σε MIBC PS6 παρουσίασε μια διάχυτη έκφραση σε όλο τον όγκο, είναι πιο παρούσα σε βασική και μιτωτικά κύτταρα (Σχήμα 4F). Αρκετές θετικές περιπτώσεις που παρουσιάζονται αυξημένες PS6 ένταση χρώσης στο μπροστινό εισβολή, καθώς και την έκφραση PS6 σε λεμφοκύτταρα που διηθούν όγκο και ενδοθηλιακά κύτταρα.

Α και Β) ρΑΚΤ πυρηνικών και κυτταροπλασματικών έκφραση σε NMIBC (Α) και MIBC (Β) . Σε NMIBC περιπτώσεις pAkt παρουσίασε μια ετερογενή μοτίβο με περιοχές διαφορετικής έντασης της έκφρασης. Σε MIBC, στρωματικά κύτταρα κυρίως στις περιοχές κοντά στον όγκο έδειξε υψηλότερη έκφραση. Γ και Δ) pmTOR κυτταροπλασματική έκφραση σε NMIBC (C) και MIBC (D). Σε NMIBC pmTOR εκφράστηκε σε διάφορες στρώσεις, αν και υπήρξε μια πιο έντονη χρώση στις επιφανειακές αυτές. Σε MIBC έκφραση θετικών κρουσμάτων pmTOR ήταν εστίασης. Ε και F) PS6 κυτταροπλασματική έκφραση σε NMIBC (Ε) και MIBC (F). Σε NMIBC παρατηρήθηκε έκφραση PS6 σε όλες τις επιφανειακές στιβάδες τόσο στην ομπρέλα και διαφοροποιημένα κύτταρα. Σε MIBC η ανοσολογική αντίδραση ήταν διάχυτη, ωστόσο, περισσότερο παρούσα σε βασική και μιτωτικά κύτταρα. έκφραση PS6 ήταν υψηλότερη στο μπροστινό εισβολή και στα λεμφοκύτταρα που διηθούν όγκο και ενδοθηλιακά κύτταρα. Ζ και Η) ΡΤΕΝ κυτταροπλασματικό και πυρηνικό εκφράσεις σε NMIBC (G) και MIBC (H). έκφρασης ΡΤΕΝ ήταν υψηλότερη σε σύγκριση με NMIBC MIBC.

Η

Λαμβάνοντας υπόψη την επέκταση της χρώσης και την ένταση της, 62/94 (66%), 33/96 (34%) και 45/95 ( 47%) των όγκων της ουροδόχου κύστης θεωρήθηκαν θετικά για pAkt, pmTOR και PS6, αντίστοιχα. Μια δοκιμή rho Spearman έδειξε ότι pAkt, pmTOR, PS6 εκφράσεις συσχετίζονταν σημαντικά (P & lt? 0,05) ανεξάρτητα από το στάδιο του όγκου, ως εκ τούτου, σύμφωνα με ένα πλήρως ενεργό μονοπάτι. Επιπλέον, παρά ιστολογικές διαφορές, αυτοί οι δείκτες παρουσιάζονται ίση κατανομή μεταξύ των NMIBC και MIBC και δεν θα μπορούσε να συνδέεται με μυϊκό εισβολή (πίνακας 3).

Από την άλλη πλευρά, 37/92 (40%) του όγκοι θεωρήθηκαν θετικά για ΡΤΕΝ. ΡΤΕΝ εκφράστηκε στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα των ίδιων κυττάρων, ωστόσο με χαμηλότερη παράταση της έκφρασης σε MIBC (33%, Σχήμα 4G) σε σύγκριση με NMIBC (83%? Σχήμα 4Η). Επιπλέον, η ΡΤΕΝ-αρνητικό φαινότυπο συσχετίστηκε σημαντικά με μυϊκή εισβολή (Ta και Τ1? Ρ & lt? 0.001, Πίνακας 3)., Η οποία μπορεί να συνεισφέρει στην διατήρηση μιας δραστικής ΡΙ3Κ /Akt /mTOR /S6 μονοπάτι σε αυτές τις περιπτώσεις

τη, STn, PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι και ειδική για τον καρκίνο επιβίωση

Μια ανάλυση Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει τις ενώσεις μεταξύ των απευθύνεται βιοδείκτες και την ειδική για τον καρκίνο επιβίωση των ασθενών. Παρατηρήσαμε ότι οι ασθενείς που φέρουν STn εκφράζουν οι όγκοι είχαν χαμηλότερο CSS, ανεξάρτητα από το στάδιο (p = 0,024? Σχήμα 5Α). Αυτό παρατηρήθηκε επίσης κατά την αξιολόγηση των NMIBC μόνο (ρ = 0.020? Σχήμα 5Β). Το πιο σημαντικό, μεταξύ NMIBC, STn εκφράζοντας όγκους Τ1 παρουσιάζονται χαμηλότερα CSS από αρνητικούς όγκους (ρ & lt? 0,05). Επιπλέον, πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox ρυθμίζεται σε πιθανούς συγχυτικούς παράγοντες, δηλαδή την ηλικία, το φύλο, το στάδιο, το βαθμό, την επανάληψη κατάσταση, η παρουσία της ταυτόχρονης ΚΑΚ έγινε. Βρήκαμε ότι του STN ένας ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της χειρότερης CSS (HR = 11.836? 95% CI: [1,063 έως 131,7]? P = 0,044). Αντίθετες με το STN, θετική Tn, pAkt, pmTOR και PS6 όγκους δεν παρουσίασαν διαφορές σε CSS σε σύγκριση με αρνητικό βλάβες, ανεξάρτητα από το στάδιο. Έχουμε επίσης παρατηρήσει ότι οι ασθενείς που φιλοξενούν ΡΤΕΝ-αρνητικά όγκοι είχαν χαμηλότερα CSS (p = 0,015, Σχήμα 6). Περισσότερες μελέτες είναι απαραίτητες για να προσδιοριστεί εάν η έλλειψη κατασταλτική επίδραση του PTEN πάνω PI3K /Akt /mTOR μπορεί να ευθύνεται γι ‘αυτές τις διαπιστώσεις

Η ανάλυση Kaplan-Meier που δείχνουν τη σχέση μεταξύ του STN και τον CSS σε:. (Α) Όλες οι μελετημένη ασθενείς με καρκίνο της ουροδόχου κύστης? ασθενών (Β) NMIBC. Σύγκριση εκτελούνται από δοκιμασία log-rank (Α: p = 0,024? Β: p = 0,020)? + Λογοκρίνεται αρνητικούς όγκους STn? ⧫ λογοκρίνεται STn θετικών όγκων.

Η

Η ανάλυση Kaplan-Meier που δείχνουν την επίδραση στο CSS έκφρασης ΡΤΕΝ σε όλους τους ασθενείς που μελετήθηκαν καρκίνο της ουροδόχου κύστης. Σύγκριση εκτελούνται από δοκιμασία log-rank (p = 0,013)? + Λογοκρίνεται αρνητικών όγκων ΡΤΕΝ? ⧫ λογοκρίνεται PTEN θετικών όγκων.

Η

Με βάση αυτές τις παρατηρήσεις και με στόχο να βελτιωθεί η προγνωστική αξία της STn στο πλαίσιο του σταδίου της νόσου αργά (MIBC), έχουμε ενσωματώσει πλήρως τις πληροφορίες από STn και PI3K /βιοδείκτες AKT /mTOR μονοπάτι. Σύμφωνα με το Σχ 7, η εισαγωγή των μορίων ΡΙ3Κ /Akt /mTOR μονοπάτι επιτρέπεται διάκριση STn θετικών όγκων MIBC με χειρότερη CSS (p = 0.027). Επιπλέον, πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox (προσαρμοσμένο για την ηλικία, το στάδιο, την κατάσταση επανάληψης, παρουσία ταυτόχρονης CIS και μετάσταση) αποκάλυψε ότι η παρουσία των μορίων PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι στο STn + MIBC ανεξάρτητα συνδέεται με περίπου 6 φορές τον κίνδυνο θανάτου από καρκίνο (HR = 5,662? 95% CI: [1,093 έως 29,323]? p = 0,039). Αυτές οι παρατηρήσεις υποδεικνύουν, για πρώτη φορά, ότι ο συνδυασμός των STn και mTOR μονοπάτι βιοδείκτες μπορούν να κατέχουν το δυναμικό για τη βελτίωση της διαστρωμάτωσης των προχωρημένων όγκων σταδίου της ουροδόχου κύστης? ωστόσο επιβεβαίωση σε μεγαλύτερες σειρές είναι υποχρεωτική

Η ανάλυση Kaplan-Meier που δείχνουν τη σχέση μεταξύ ρΑΚΤ, pmTOR και PS6 εκφράσεις στο CSS του STn θετικών όγκων MIBC:. Σύγκριση εκτελούνται από δοκιμασία log-rank (p = 0,027)? + Λογοκρίνεται ρΑΚΤ και pmTOR και PS6 αρνητικά τους όγκους? ⧫ λογοκρίνονται ρΑΚΤ ή /και pmTOR και /ή PS6 θετικών όγκων.

Η

Η αναστολή της PI3K /Akt /mTOR μονοπάτι σε ζωικά μοντέλα

BBN που προκαλείται από ποντίκια όγκους της ουροδόχου κύστης που μιμείται την ιστολογία και μοριακή φύση των ανθρώπινων καρκίνων [20,21], υποβλήθηκαν σε διαλογή για STn και PS6, το καθοδικός τελεστής του mTOR μονοπάτι. Δεν παρατηρήσαμε καμία έκφραση της STN σε υγιή ποντίκια ουροθηλίου, σύμφωνα με προηγούμενη παρατήρηση για την υγιή ανθρώπινη κύστη [5].