Αφηρημένο

Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι

c-MET

υπερεκφράζεται σε περιπτώσεις επιθετικού καρκίνου της ουροδόχου κύστης (BCA). Προσδιορισμός των λογομαχία μεταξύ

γ-ΜΕΤ

και άλλα RTKs όπως

AXL

και

ΡϋΘΡΡ

δείχνουν ότι

c-MET

γονίδια δικτύου (

γ-ΜΕΤ

–

AXL

–

PDGFR

) μπορεί να είναι κλινικά σημαντική για BCA. Εδώ, έχουμε εξετάσει κατά πόσον η έκφραση του

ο-ΜΕΤ

γονίδια δίκτυο μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό ασθενών BCA σε αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης επιθετικής νόσου.

In vitro

ανάλυση,

ο-ΜΕΤ

knockdown κατέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, εισβολή, και τη μετανάστευση, και αυξημένη ευαισθησία σε σισπλατίνη απόπτωση. Επιπλέον,

c-MET

γονίδιο δικτύου (

c-MET

,

AXL

, και

PDGFR

) έκφρασης επιτρέπεται διάκριση BCA ιστών από την κανονική ιστών ελέγχου και εμφανίστηκε να προβλέψουμε κακή εξέλιξη της νόσου σε μη-μυϊκό επεμβατική BCA ασθενείς και φτωχών συνολική επιβίωση σε μυϊκά BCA ασθενείς επεμβατική. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι

c-MET

γονιδιακής έκφρασης του δικτύου είναι ένα μυθιστόρημα προγνωστικός δείκτης για την πρόβλεψη που BCA ασθενείς έχουν αυξημένο κίνδυνο να εμφανίσουν επιθετικό νόσου. Αυτά τα γονίδια μπορεί να είναι ένας χρήσιμος δείκτης για συνεργασία με στόχο τη θεραπεία, και αναμένεται να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στη βελτίωση τόσο της ανταπόκρισης στη θεραπεία και την επιβίωση των ασθενών BCA

Παράθεση:. Kim YW, Yun SJ, Jeong P, Kim SK, Kim SY, Γιαν C, et al. (2015) Η

γ-ΜΕΤ

Δίκτυο ως Novel προγνωστικός δείκτης για την πρόβλεψη του Καρκίνου της ουροδόχου κύστης Ασθενείς με αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης επιθετικής νόσου. PLoS ONE 10 (7): e0134552. doi: 10.1371 /journal.pone.0134552

Επιμέλεια: Renato Franco, Istituto dei Tumori Fondazione Pascale, Ιταλία

Ελήφθη: 26 Μαρτίου του 2015? Αποδεκτές: 13 Ιουλίου του 2015? Δημοσιεύθηκε: 30 Ιουλίου του 2015

Copyright: © 2015 Kim et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση: το έργο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Ερευνών της Κορέας (NRF) επιχορήγηση που χρηματοδοτείται από την κυβέρνηση της Κορέας (MSIP? http:. //www.msip.go .kr /web /main /main.do) (Αρ NRF-2014R1A2A1A09006983) και από το Πρόγραμμα βασική επιστημονική έρευνα, μέσω του Εθνικού Ιδρύματος Ερευνών της Κορέας (NRF), που χρηματοδοτείται από το Υπουργείο Παιδείας, Επιστημών και Τεχνολογίας (http: //www.moe.go.kr/main.do)(2012R1A1A4A01008753). Επίσης, το έργο αυτό υποστηρίζεται μερικώς από το R01DK100974? U01 DK103260? U24 DK097154? ΝΙΗ NCATS UCLA CTSI UL1TR000124? ένα Steven Spielberg Ταμείο Discovery στο Βραβείο Ανάπτυξης του προστάτη Cancer Research Career? μια IMAGINE IC Βραβείο Πρόγραμμα ΟΧΙ Ερευνών (στο JK). JK είναι ένας Αμερικανική Ουρολογική Εταιρεία Ίδρυμα Ερευνών Μελετητής και το Harvard Medical School Eleanor και Miles Shore Μελετητή. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Η υπερέκφραση των κινασών τυροσίνης υποδοχέα (RTKs) συμβαίνει σε περιπτώσεις επιθετικού καρκίνου της ουροδόχου κύστης (BCA)? Οι θεραπείες έτσι RTK-στόχευση συνιστάται για αυτούς τους ασθενείς [1, 2]. Φαρμακολογική αναστολή της δραστηριότητας RTK (π.χ., με gefitinib) είναι ο χρυσός κανόνας θεραπεία για BCA ασθενείς, αν και έχει περιορισμένη επιτυχία [3, 4].

Το

c-MET

πρωτο -oncogene, το οποίο βρίσκεται στο χρωμόσωμα 7q21-31 [5], υπερεκφράζεται σε BCA.

ο-ΜΕΤ

ενεργοποιείται με συνδέτη, αυξητικός παράγοντας ηπατοκυττάρων (HGF), και προκαλεί αυξημένο πολλαπλασιασμό, τη μετανάστευση, την κινητικότητα και την εισβολή των κυττάρων BCA [6]. Κατά τη διέγερση και διμερισμό του

ο-ΜΕΤ

, φωσφορυλίωση τυροσίνης συμβαίνει σε ειδικές θέσεις εντός της ενδοκυτταρικής περιοχής (δηλαδή, Y1234, Y1235, Y1349, και Y1356), η οποία αυξάνει την εγγενή δραστικότητα των κινασών τυροσίνης και οδηγεί στην στρατολόγηση πολλών πρωτεϊνών σηματοδότησης, συμπεριλαμβανομένων πρωτεΐνη υποδοχέα δεσμευμένου παράγοντα ανάπτυξης 2 (GRB2), Grb2 σχετιζόμενη συνδετικό-1 (Gab1), Src ομολογίας 2 τομείς που περιέχει (SHC), φωσφολιπάση C1 (PLC1), και φωσφοϊνοσιτιδίου 3-κινάση (ΡΙ3 -Κ) [7]. Το Ras /Erk-ΜΑΡΚ, ΡΙ3-Κ /Akt /mTOR [8], μονοπάτια σηματοδότησης και STAT3 επίσης ενεργοποιούνται, προκαλώντας έτσι πολλές βιολογικές αντιδράσεις [6, 9].

Η υπερέκφραση του

C- ΚΟΑ

συσχετίζεται με BCA μετάσταση [7, 10]? Πράγματι,

ο-ΜΕΤ

υπερεκφράζεται σε περισσότερο από το 60% του τοπικά προχωρημένου και μεταστατικό BCA περιπτώσεις [5], και συνδέεται με κακή επιβίωση [11]. Λαμβάνοντας υπόψη ότι ο διμερισμός των RTK είναι σημαντική για τον έλεγχο βιολογική λειτουργία τους στο πλαίσιο του καρκίνου, στιχομυθία μεταξύ

γ-ΜΕΤ

και άλλα RTKs θα πρέπει να διερευνηθεί προσεκτικά, εάν θέλουμε να κατανοήσουμε το ρόλο του

C- MET

στην εξέλιξη του καρκίνου του ανθρώπου. Τμήματα του πρωτοπαθούς όγκου από ασθενείς με σπάνιο τύπο του BCA, που ονομάζεται νευροενδοκρινείς (ΝΕ) BCA, δείχνουν

c-MET

έκφρασης [12]. Αυτό υποδηλώνει ότι η ΝΕ BCA μπορεί να είναι ένας κατάλληλος στόχος για

ο-ΜΕΤ

αναστολέων. Μια προηγούμενη μελέτη έδειξε ότι ένα μέλος του

c-MET

οικογένεια, RECEPTEUR d’origine Nantais (RON), σχηματίζει ένα ετεροδιμερές με τον υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) [13]. Επιπλέον, η ανάλυση μικροσυστοιχιών RTK αποκάλυψε ότι RTKs όπως

AXL

και

ΡϋΘΡΡ

στιχομυθία με

c-MET

[11].

AXL

και

PDGFR

συνδέονται με την επιθετική του μαστού [14], των νεφρών [15], του πνεύμονα [16, 17], και καρκίνων του προστάτη [18, 19], υποδηλώνοντας ότι

γ-ΜΕΤ κατασκευαστής –

AXL

–

ΡϋΘΡΡ

μπορεί να είναι κλινικά σημαντική για BCA [11]

Ο σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να εξετάσει την κλινική συσχέτιση. μεταξύ της έκφρασης του

c-MET

γονίδια δικτύου (

c-MET

–

AXL

–

PDGFR

) και το αποτέλεσμα της νόσου για BCA ασθενείς, και να ερευνήσει εάν

c-MET

γονίδια δίκτυο μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εντοπισμό ασθενών BCA διατρέχουν αυξημένο κίνδυνο να αναπτύξουν επιθετική νόσο.

Υλικά και Μέθοδοι

ασθενείς και δείγματα ιστών

δείγματα Δημοτικό όγκου από ασθενείς που υποβλήθηκαν σε διουρηθρική εκτομή (TUR) ή ριζική κυστεκτομή στο Εθνικό Πανεπιστήμιο της Chungbuk Νότια Κορέα είχαν ιστολογικά επαληθευτεί ως καρκίνωμα ουροφόρων. Η κανονική βλεννογόνο ουροδόχου κύστης συλλέχθηκε από ασθενείς με καλοήθη νοσήματα όπως η καλοήθης υπερπλασία του προστάτη (ΚΥΠ), πέτρες ουρητήρα, και ακράτεια ούρων από προσπάθεια, μετά ενημερωμένη συγκατάθεση. Όλοι οι ιστοί ελέγχου ιστολογικά επιβεβαιωμένο κανονικά. Ασθενείς με ταυτόχρονη καρκίνωμα

in situ

(CIS), βλάβες CIS μόνη της, σε σύντομο χρονικό διάστημα παρακολούθησης (λιγότερο από 6 μήνες), ή για τους οποίους τα στοιχεία ήταν ελλιπή, αποκλείστηκαν για να δώσουν μια πιο ομοιογενή πληθυσμό της μελέτης. Ένα σύνολο 165 (135 άνδρες και 30 θηλυκά? Μέση ηλικία, 65 ετών) BCA ασθενείς και 34 μάρτυρες (19 άνδρες και 15 γυναίκες? Μέση ηλικία, 54 έτη) εγγράφηκαν. Όλες οι όγκοι ήταν μακρο-τεμαχίζεται (συνήθως εντός 15 λεπτών από χειρουργική εκτομή), και κάθε BCA δείγμα επιβεβαιώθηκε από παθολογική ανάλυση μιας νέας τμήμα κατεψυγμένο ιστό που προέρχεται από TUR ή δείγματα κυστεκτομή. δείγματα όγκου στη συνέχεια καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C μέχρι τη χρήση. NMIBC ασθενείς υποβλήθηκαν σε μια δεύτερη TUR 2-4 εβδομάδες μετά την αρχική εκτομή αν οι BCA δείγμα δεν περιλαμβάνουν τη σωστή στρώμα των μυών ή όταν εντοπίστηκε ένας όγκος υψηλής ποιότητας. Ασθενείς με όγκο Τ1, πολλαπλούς όγκους, μεγάλοι όγκοι (& gt? 3 εκατοστά σε διάμετρο), ή υψηλού βαθμού Ta NMIBC έλαβαν ένα κύκλο ενδοκυστικής θεραπείας [βάκιλο Calmette-Guérin (BCG) ή μιτομυκίνη-C]. Η ανταπόκριση στη θεραπεία εκτιμήθηκε με κυστεοσκόπηση και ουροποιητικού κυτταρολογία. Οι ασθενείς που ήταν ελεύθερη νόσου εντός 3 μηνών θεραπείας παρακολουθήθηκαν κάθε 3 μήνες για τα πρώτα 2 χρόνια και στη συνέχεια κάθε 6 μήνες έκτοτε. MIBC ασθενείς με κλινικά εντοπισμένο ή τοπικά προχωρημένους όγκους και καλή Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) κατάσταση (0 ή 1) υποβλήθηκαν σε ριζική κυστεκτομή και πλήρη πυελικών λεμφαδένων. Οι ασθενείς που δεν είναι επιλέξιμα για ριζική κυστεκτομή λόγω μεταστατική νόσο, η κακή προσδόκιμο ζωής, ή του καθεστώτος κακή απόδοση ECOG (≥2) υποβλήθηκαν TUR ή βιοψία για ιστοπαθολογική διάγνωση. Οι ασθενείς με ρΤ3, pT4, ή θετικούς λεμφαδένες νόσο (με βάση την ανάλυση των δειγμάτων ρίζα κυστεκτομή) και εκείνα με μεταστατική νόσο, αλλά καλό κατάσταση απόδοσης έλαβαν τουλάχιστον τεσσάρων κύκλων της σισπλατίνης χημειοθεραπείας με βάση. Οι ασθενείς που αρνήθηκαν ή δεν κατάφερε να ολοκληρώσει μια απεικόνιση δούλεμα [αξονική τομογραφία (CT) ή μαγνητική τομογραφία (MRI)], τουλάχιστον μία φορά κάθε 3 μήνες για να αξιολογήσει τις απαντήσεις αποκλείστηκαν από την περαιτέρω ανάλυση.

Οι όγκοι ήταν οργάνωσαν και κλιμακώνονται ανάλογα με τη ΤΝΜ ταξινόμηση 2002 και το

της Ευρωπαϊκής Ουρολογικής Εταιρείας (EAU)

κατευθυντήριες γραμμές με βάση το 1973

Ποιος είναι το σύστημα βαθμολόγησης [20, 21]. Υποτροπή ορίστηκε ως επανάληψης του πρωτογενούς NMIBC με χαμηλότερη ή την ίδια παθολογική στάδιο, και την εξέλιξη ορίστηκε ως η αναγνώριση του Τ2 ή υψηλότερο στάδιο της νόσου κατά την υποτροπή. Στην περίπτωση των MIBC, εξέλιξης ορίστηκε ως τοποπεριοχική υποτροπή ή ένα νέο μακρινό μεταστάσεων σε ασθενείς cystectomized και αύξηση ≥20% της μάζας του πρωτογενούς όγκου ή ένα νέο μακρινό μετάσταση σε μη-cystectomized ασθενείς.

εκχύλιση RNA και αντίστροφη μεταγραφή σε cDNA

Το RNA απομονώθηκε από τους ιστούς με ομογενοποίηση με 1 ml αντιδραστηρίου ΤΚΙζοΙ (Invitrogen, Carlsbad, CA) σε ένα γυάλινο σωλήνα των 5 ml. Το ομογενοποίημα στη συνέχεια μεταφέρθηκε σε ένα σωλήνα 1.5 ml και αναμίχθηκε με 200 ml χλωροφορμίου. Μετά από επώαση για 5 λεπτά στους 4 ° C, το ομογενοποίημα φυγοκεντρήθηκε για 13 λεπτά στα 13.000 g στους 4 ° C. Η ανώτερη υδατική φάση μεταφέρθηκε σε έναν καθαρό σωλήνα που περιέχει 500 ml ισοπροπανόλης. Το μίγμα επωάστηκε για 60 λεπτά στους 4 ° C και στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκε για 8 λεπτά στα 13000 g στους 4 ° C. Η ανώτερη υδατική φάση απορρίφθηκε και αναμίχθηκε με 500 ml 75% αιθανόλης και φυγοκεντρείται για 5 λεπτά στα 13.000 g στους 4 ° C. Η ανώτερη υδατική στιβάδα απορρίφθηκε, και ο σβώλος ξηράθηκε σε θερμοκρασία δωματίου, διαλύθηκε σε νερό επεξεργασμένο με DEPC, και στη συνέχεια αποθηκεύεται στους -80 ° C. Η ποιότητα και η ακεραιότητα του RNA επιβεβαιώθηκαν χρησιμοποιώντας μια συσκευή Nanodrop. cDNA παρασκευάστηκε από 1 mg ολικού RNA χρησιμοποιώντας ένα First-Strand cDNA Synthesis Kit (Amersham Biosciences Europe GmbH, Freiburg, Γερμανία) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή.

Κυτταρική καλλιέργεια και επιμόλυνση

T24 BCA κύτταρα ελήφθησαν και καλλιεργήθηκαν σύμφωνα με τις οδηγίες που παρέχουν με την ATCC. Μέσα συμπληρώθηκαν με 10% ορό εμβρύου μόσχου, 2% γλουταμίνη και 1% αντιβιοτικά (Invitrogen, Carlsbad, CA), και τα κύτταρα διατηρήθηκαν υπό υγροποιημένη ατμόσφαιρα 5% CO2 στους 37 ° C. Για τα νοκ ντάουν πειράματα, τα κύτταρα παροδικά επιμολυσμένα με 200 pmol siRNA πισίνα για να φιμώσουν ΚΟΑ (ΚΟΑ siRNAs, Life Technologies, αριθμός καταλόγου 103545, 103551, 103557, 103767 και 103769) ή αρνητικό siRNAs ελέγχου, χρησιμοποιώντας Lipofectamine 2000 (Invitrogen).

δοκιμασία πολλαπλασιασμού

κύτταρα siRNA επιμολυσμένα εμβολιάστηκαν σε πλάκες 24 φρεατίων σε πυκνότητα 1 × 10

4 /φρεάτιο. Τα κύτταρα στη συνέχεια χρωματίστηκαν με κρυσταλλικό ιώδες και μετρήθηκαν 7 ημέρες αργότερα [22].

Anchorage-ανεξάρτητη δοκιμασία μαλακού άγαρ ανάπτυξη

siRNA-επιμολυσμένα κύτταρα (1 χ 10

4) σπάρθηκαν σε 3 ml% άγαρ 0,35 σε FBS που περιέχει μέσο καλλιέργειας και επικαλύπτονται επάνω σε 2 ml 0.7% άγαρ σε FBS που περιέχει μέσο καλλιέργειας σε τρυβλία 6 φρεατίων. Εικόνες από 3- (4, 5-dimethylthiaz-113 olyl-2) -2, βρωμιούχο 5-διφαινυλτετραζόλιο (ΜΤΤ) -stained αποικίες συλλαμβάνονται κάτω από ένα μικροσκόπιο Zeiss όπως περιγράφηκε προηγουμένως [22]

δοκιμασίας εισβολή.

τα κύτταρα (3 χ 10

5 κύτταρα /ml) μετρήθηκαν και σπάρθηκαν πάνω επικαλυμμένες με κολλαγόνο παρεμβολές (Millipore Corp., Billerica, ΜΑ). Μετά από 16 ώρες, τα κύτταρα που μετανάστευσαν στην κάτω επιφάνεια των ενθεμάτων βάφτηκαν με κρυσταλλικό ιώδες διάλυμα. Η χρωστική εκχυλίστηκε από τα κύτταρα με τη χρήση διαλύματος οξικού οξέος 10%, και η απορρόφηση αναγνώστηκε σε μία συσκευή ανάγνωσης μικροπλάκας Fluostar Omega (BMG Labtech, Cary, NC) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [22].

Δοκιμασία

κυτταρικής απόπτωσης

κύτταρα Τ24 παροδικά επιμολυσμένα με siRNA επωάστηκαν σε μέσο με ή χωρίς 10 μΜ σισπλατίνης για 8 ώρες. Η βιωσιμότητα των κυττάρων μετρήθηκε σε μία δοκιμασία ΜΤΤ όπως περιγράφηκε προηγουμένως [23]. Κυτταρικής απόπτωσης ποσοτικοποιήθηκε με μέτρηση της μεταβολικά ενεργός μάζα των κατεργασμένων κυττάρων μετά από κανονικοποίηση έναντι μη επεξεργασμένα κύτταρα.

επούλωση πληγών (in vitro μηδέν) δοκιμασία

κύτταρα Τ24 καλλιεργούνται σε πολυ-L-λυσίνη συν-επιμολύνθηκαν με το πλασμίδιο που κωδικοποιεί GFP. Αυτά στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε

in vitro

μηδέν δοκιμασία με εικόνες που έχουν ληφθεί σε 0 και 16 ώρες μετά την επώαση με χρήση μικροσκοπίου φθορισμού. Κύτταρα μετακινηθεί από την άκρη του μηδέν προς το κέντρο του μηδέν (σημειώνονται με κίτρινες διακεκομμένες γραμμές).

Western ανάλυση κηλίδος

Τα επιμολυσμένα κύτταρα Τ24 ήταν γρήγορα συλλέχθηκαν, καταψύχθηκαν σε υγρό άζωτο, και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C. Η συνολική πρωτεΐνη εκχυλίζεται σε ρυθμιστικό διάλυμα λύσης [1% Nonidet Ρ-40, 50 mM Tris (ρΗ 7.4), 10 mM NaCl, 1 mM NaF, 5 mM MgCl2, 0,1 mM EDTA, 1 mM φθοριούχο φαινυλμεθυλσουλφονύλιο και Complete αναστολέα πρωτεάσης δισκίο κοκτέιλ (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany)] στις υποδεικνυόμενες συνθήκες και φυγοκεντρήθηκε στα 12.500

g

για 15 λεπτά. πρωτεΐνες 25μg ανά κάθε συνθήκες υποβλήθηκαν σε τρέξιμο γέλη SDS-PAGE, τα οποία μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες νιτροκυτταρίνης για ανάλυση κηλίδος Western. Μετά από αποκλεισμό με 10% BSA /PBST για 1 ώρα, οι μεμβράνες επωάστηκαν με ειδικά αντισώματα έναντι

ο-ΜΕΤ

, ΜΜΡ2, ΜΜΡ9 ή β-ακτίνης. Οι κηλίδες ορατές με ενισχυμένη χημειοφωταύγεια.

Υπολογιστική ανάλυση

Για να μελετηθεί η συσχέτιση μεταξύ

c-MET

γονίδια δικτύου και κλινικές παραμέτρους σε BCA ασθενείς, εξετάσαμε τα προφίλ έκφρασης αυτών των γονιδίων σε ασθενείς που χρησιμοποιούν BCA δεδομένων που συγκεντρώθηκαν προηγουμένως μικροσυστοιχιών (αριθμός πρόσβασης GSE13507). δεδομένων των μικροσυστοιχιών ήταν διαθέσιμα για 165 ασθενείς. Κλινικά αποτελέσματα, συμπεριλαμβανομένων επιβίωση χωρίς εξέλιξη (PFS), η συνολική επιβίωση (OS), και ειδική για τον καρκίνο επιβίωση (CSS) ελήφθησαν από τα ιατρικά αρχεία. Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των γονιδίων και την έκβαση της νόσου εξετάστηκε χρησιμοποιώντας Cox ανάλυση παλινδρόμησης αναλογικών κινδύνων. Kaplan-Meier (KM) ανάλυση καμπύλης επιβίωσης χρησιμοποιώντας ένα υποσύνολο των προφίλ γονιδιακής έκφρασης από ασθενείς με «χαμηλή» και «υψηλή» έκφραση του κάθε γονιδίου χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστούν οι επιδράσεις των

ο-ΜΕΤ

γονιδιακή έκφραση δικτύου BCA. Το 50

εκατοστημόριο (διάμεση τιμή) του γονιδίου έκφρασης χρησιμοποιήθηκε ως τιμή μανσέτα-off. Η δοκιμασία log-rank διεξήχθη για να αξιολογήσει τη σημασία των διαφορών μεταξύ των δύο καμπυλών επιβίωσης.

Ηθικοί κανόνες

Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Εθνικού Πανεπιστημίου Chungbuk. Όλα τα θέματα που προβλέπονται γραπτή συγκατάθεση. συλλογή και ανάλυση των δειγμάτων εγκρίθηκαν από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review του Εθνικού Πανεπιστημίου Chungbuk.

Αποτελέσματα

κλινικά και παθολογικά χαρακτηριστικά του BCA ασθενείς

Η μέση ηλικία των 165 ασθενών στην η ομάδα μελέτης ήταν 65,2 ± 12,0 χρόνια και η μέση περίοδος παρακολούθησης ήταν 48,4 μήνες. Από τους 165 ασθενείς, 62,4% (103/165) είχε NMIBC και 37,6% (62/165) είχαν MIBC. Η μέση ηλικία των 34 ασθενείς στην κανονική ομάδα ελέγχου ήταν 54,0 ± 10,4 έτη. Τα χαρακτηριστικά βασικής γραμμής των ασθενών και ελέγχων παρουσιάζονται στον Πίνακα 1.

Η

Απώλεια

ο-ΜΕΤ

καταστέλλει BCA πολλαπλασιασμού των κυττάρων και εισβολή και αυξάνει την ευαισθησία στη σισπλατίνη απόπτωση

Προηγούμενες μελέτες υποδεικνύουν ότι τα στρωματικά HGF σηματοδότηση μέσω του

ο-ΜΕΤ

μονοπάτι αυξάνει εισβολή και τη μετάσταση των κυττάρων του BCA [6, 11, 13]? Ως εκ τούτου, επιδιώξαμε να προσδιοριστούν τα αποτελέσματα του

ο-ΜΕΤ

φίμωση επί του πολλαπλασιασμού και της εισβολής, και σχετικά με την αποπτωτική απόκριση προς την σισπλατίνη (μείζον χημειοθεραπευτικό παράγοντα χρησιμοποιείται για τη θεραπεία BCA ασθενείς). Βρήκαμε ότι τα BCA κύτταρα στα οποία

ο-ΜΕΤ

χτυπήθηκε κάτω σχηματίστηκε λιγότερα (και μικρότερα) αποικίες από τα κύτταρα αρνητικού ελέγχου, γεγονός που υποδηλώνει μια μείωση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων σε μαλακό άγαρ (Εικόνα 1Α). Η δοκιμασία των κυττάρων εισβολής έδειξε ότι τα κύτταρα BCA φέρουν ακέραια

c-MET

ήταν πιο επεμβατική από εκείνες στις οποίες

γ-ΜΕΤ

χτυπήθηκε κάτω.

ο-ΜΕΤ

-silenced κύτταρα Τ24 ήταν πολύ λιγότερο επεμβατική από μάρτυρες κύτταρα (μη-επιμολυσμένα κύτταρα και κύτταρα επιμολυσμένα με τον έλεγχο siRNA) (Σχήμα 1Β). Στη συνέχεια εξετάσαμε το αποτέλεσμα της

c-MET

ζημία στην κυτταρική απόπτωση σε μια δοκιμασία ΜΤΤ.

ο-ΜΕΤ

knockdown κυττάρων έδειξε αυξημένη ευαισθησία στη σισπλατίνη που προκαλείται από απόπτωση (Σχήμα 1 C).

Όλα τα πειράματα διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας τρεις

ο-ΜΕΤ

knockdown κυτταρικές γραμμές (si

c-MET

-1, si

c-MET

-2, και si

c-MET

-3) επιμολυσμένα με διαφορετικές

ΚΟΑ

siRNAs και κυτταρικές σειρές δύο ελέγχους (Ctrl και NT). Ctrl, τον έλεγχο? NT, μη επιμολυσμένα * p & lt?.. 0.05

Η

Απώλεια

c-MET

αναστέλλει την κυτταρική μετανάστευση των κυττάρων BCA με ρύθμιση προς τα κάτω ΜΜΡ2 και ΜΜΡ9

εξετάστηκαν μετανάστευση των κυττάρων και έκφραση ΜΜΡ2 και ΜΜΡ9 σε BCA κύτταρα. Επούλωση της πληγής δοκιμασία (που ονομάζεται επίσης ως in vitro δοκιμασία μηδέν) έδειξε ότι

c-MET

-knockdown κύτταρα μετανάστευσαν λιγότερο αποτελεσματικά από τα κύτταρα ελέγχου (Εικόνα 2Α). Βρήκαμε επίσης ότι η κατάρριψη

c-MET

μειωτικά την έκφραση της ΜΜΡ2 και ΜΜΡ9 στο BCA κύτταρα (Σχήμα 2Β).

(Α) την επούλωση των πληγών δοκιμασία που δείχνουν ότι η εξουδετέρωση της γ-ΜΕΤ inhibitsthe μετανάστευση των κυττάρων Τ24. (Β) Απώλεια

ο-ΜΕΤ

μειωτικά την έκφραση των μεταλλοπρωτεϊνασών μήτρας (ΜΜΡ) -2 και ΜΜΡ-9. Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση δύο

c-MET

νοκ ντάουν κυτταρικές σειρές (si

c-MET

-1 και si

c-MET

-2) επιμολυσμένα με διαφορετικές ΚΟΑ siRNAs και δύο κυτταρικές σειρές ελέγχου (Ctrl και NT). Ctrl, τον έλεγχο? NT, μη επιμολυσμένα.

Η

Η έκφραση του

c-MET

συσχετίζεται με το OS σε MIBC ασθενείς

Για να απαντηθεί το ερώτημα εάν

γ-ΜΕΤ οι

γονίδια δίκτυο συμμετέχουν εις την πρόοδον BCA και επιθετικότητα, αναλύσαμε την έκφραση του mRNA για αυτά τα γονίδια σε ένα DNA μικροσυστοιχία και συνέκριναν τα αποτελέσματα με τα χαρακτηριστικά της νόσου όπως είναι ο βαθμός του όγκου (G), το στάδιο του όγκου (Τ, Ν και Μ ), το μέγεθος του όγκου, υποτροπής, εξέλιξης και CSS. Περαιτέρω συγκρίσεις έγιναν στη συνέχεια πραγματοποιείται μετά ασθενείς κατηγοριοποιήθηκαν σε NMIBC και MIBC ομάδες. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι

ο-ΜΕΤ

έκφραση του mRNA σε ασθενείς MIBC συσχετίστηκε σημαντικά με OS (ρ = 0,023? HR, 2.107? 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI), 1,110 – 3,998) (Πίνακας 2). Αυτά τα δεδομένα επιβεβαιώθηκαν με ανάλυση KM καμπύλη επιβίωσης (Σχήμα 3). BCA ασθενείς με υψηλά επίπεδα

c-MET

έκφρασης έδειξε φτωχότερα επιβίωσης από εκείνες με χαμηλή έκφραση (δοκιμασία log-rank, p = 0,020).

Η

Η έκφραση της

AXL

μπορούν να διακρίνουν μεταξύ NMIBC και MIBC ασθενείς και υγιείς μάρτυρες

Στη συνέχεια εξετάσαμε την κλινική συσχέτιση μεταξύ γνωστών

c-MET

εταίρους,

AXL

και

PDGFR

, και BCA εξέλιξη. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι το

AXL

έκφραση σαφώς συσχετίζεται τόσο με NMIBC και MIBC. όγκοι της ουροδόχου κύστης (NMIBC και MIBC) έδειξε 0.471 φορές υψηλότερη έκφραση του

AXL

mRNA από τους ιστούς ελέγχου.

AXL

έκφραση του mRNA από NMIBC (p & lt? 0,0001, ποσοστό εσφαλμένης ανακάλυψη (FDR) & lt? 0.0001) και MIBC (p = 0,0001, FDR = 0,0006) ήταν σημαντικά υψηλότερη από ότι σε φυσιολογικούς μάρτυρες (Πίνακας 3) .

AXL

έκφραση mRNA σε NMIBC ιστό ήταν περίπου 1.532 φορές υψηλότερη από ότι σε MIBC ιστού (Πίνακας 3).

Η

Η έκφραση του

ΡϋΘΡΡ

ισομορφών είναι σημαντικά μεταβληθεί το BCA, και υψηλή έκφραση του

PDGFRL

προβλέπει κακή επιβίωση

Για να ελέγξετε αν

PDGFR

είναι χρήσιμο ως διαγνωστικό ταξινομητής, εξετάσαμε την έκφραση των τριών διαφορετικών ισομορφών (π.χ. ,

PDGFRA

,

PDGFRB

, και

PDGFRL

). Βρήκαμε ότι η έκφραση του

PDGFR

ισομορφές θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν για τη διάκριση δειγμάτων NMIBC και MIBC από φυσιολογικούς ελέγχους. Η έκφραση του

PDGFRA

mRNA σαφώς διακρίσεις όγκους της ουροδόχου κύστης (NMIBC και MIBC) από φυσιολογικούς ιστούς ελέγχου (p & lt? 0,0001, FDR & lt? 0,0001), με το

PDGFRA

έκφραση σε NMIBC και MIBC είναι περίπου 0.274 φορές υψηλότερη από ότι στους ελέγχους. Η έκφραση του

PDGFRB

ήταν σαφώς διαφορετική μεταξύ των όγκων και των φυσιολογικών ιστών (p = 0,0001, FDR & lt? 0,0001).

PDGFRB

έκφραση σε NMIBC ήταν σημαντικά μεγαλύτερη από ότι σε φυσιολογικούς ελέγχους (ρ & lt? 0,0001), αλλά καμία σημαντική διαφορά δείχθηκε μεταξύ MIBC και υγιών μαρτύρων (ρ = 0,0698). Παρομοίως,

PDGFRL

είχε εκφράζονται διαφορικά σε NMIBC και φυσιολογικούς ελέγχους, με μια μικρή αύξηση (0.804 φορές) (ρ & lt? 0,0001) στην πρώτη. Έτσι, είναι πιθανό ότι

PDGFR

έκφραση είναι αυξημένη σε όλους τους τύπους των BCA. Είναι αξιοσημείωτο ότι η έκφραση του

PDGFR

ισομορφές σε ιστούς από ασθενείς NMIBC ήταν γενικά υψηλότερη από εκείνη σε ιστούς από ασθενείς MIBC (Πίνακας 4).

Η

Στη συνέχεια, για να κατανοήσουν την κλινική συνάφεια της αυξημένης

PDGFR

έκφραση στο BCA, εξετάσαμε την κλινική συσχέτιση μεταξύ

ΡϋΘΡΡ

έκφραση ισομορφή και εξέλιξη της νόσου. Βρήκαμε ότι

PDGFRL

έκφραση συσχετίστηκε σημαντικά με NMIBC εξέλιξη (p = 0,046? ΥΕ, 3.675? 95% CI, 1,024 έως 13,188) (Πίνακας 5). Ανάλυση KM επιβίωσης έδειξε ότι οι ασθενείς NMIBC με υψηλή έκφραση του

PDGFRL

έδειξε φτωχότερα PFS από εκείνους με χαμηλή έκφραση του

PDGFRL

(δοκιμασία log-rank, p = 0,032) (Σχήμα 4).

η

Τα επίπεδα έκφρασης του

c-MET

γονίδια δίκτυο συσχετίστηκε σημαντικά με την εξέλιξη της νόσου σε ασθενείς NMIBC και με λειτουργικό σύστημα σε MIBC ασθενείς

Για να εντοπίσετε την κλινική σημασία του

c-MET

γονίδια δίκτυο, εξετάσαμε τη συσχέτιση μεταξύ

c-MET

γονιδιακή έκφραση δικτύου (

c-MET

,

AXL

, και

PDGFR

) και BCA πρόγνωση. Έκφραση του

c-MET

γονίδια του δικτύου βασίστηκε στην αξιολόγηση της βαθμολογίας του κινδύνου για κάθε ασθενή υπολογίζεται συνδυάζοντας τα επίπεδα έκφρασης και των τριών γονιδίων. Βρήκαμε ότι η έκφραση

c-MET

γονίδια του δικτύου συσχετίζεται σημαντικά με την εξέλιξη της νόσου σε ασθενείς NMIBC (p = 0,023? ΥΕ, 4.386? 95% CI, 1,221 έως 15,757) και με το OS σε ασθενείς MIBC (p = 0.038? ΥΕ, 1.976? 95% CI, 1,039 – 3,759) (Πίνακας 6). ανάλυση επιβίωσης KM έδειξε ότι οι ασθενείς NMIBC με υψηλή έκφραση του

c-MET

γονίδια δίκτυο έδειξε φτωχότερες PFS (log-rank test, p = 0,013) από εκείνες με χαμηλή έκφραση. Ομοίως, οι ασθενείς MIBC (δοκιμασία log-rank, p = 0,034) με υψηλή έκφραση των γονιδίων του δικτύου γ-ΜΕΤ έδειξε φτωχότερα OS από εκείνους με χαμηλή έκφραση (Σχήμα 5).

Η

Συζήτηση

Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης δείχνουν ότι η απώλεια του

c-MET

κάνει BCA κύτταρα λιγότερο επεμβατική και πιο επιρρεπή σε σισπλατίνη. Επίσης, το πρότυπο έκφρασης του

c-MET

γονίδια δίκτυο επιτρέπει τη διάκριση των BCA ιστούς από φυσιολογικούς ιστούς ελέγχου και φαίνεται να προβλέψουμε κακή κλινικές εκβάσεις σε μια κορεατική πληθυσμό ασθενών.

Η ανώμαλη

ο-ΜΕΤ

έκφραση λαμβάνει χώρα σε διάφορους καρκίνους και σχετίζεται με κακή πρόγνωση [24]. Η υπερέκφραση του

c-MET

στο BCA συνδέεται με κακή OS και μετάσταση επιβίωση χωρίς [5, 7, 10]. Yeh et al. ανέφερε ότι η υπερέκφραση του

c-MET

συνδέεται θετικά με μυϊκή εισβολή και την κακή μακροπρόθεσμη επιβίωση (p & lt? 0.001) [11]. Προηγούμενες εκθέσεις δείχνουν ότι

γ-ΜΕΤ

έκφραση συνδέεται στενά τόσο με την επιθετικότητα του όγκου και της επιβίωσης των ασθενών [5, 7, 10, 11, 18]. Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται στο παρόν είναι σε συμφωνία με αυτά σε προηγούμενες μελέτες. Βρήκαμε ότι η υπερέκφραση του

γ-ΜΕΤ

συσχετίστηκε με κακή επιβίωση, ιδιαίτερα OS σε ασθενείς MIBC. Αυτό υποδηλώνει ότι η αναστολή

c-MET

έκφραση μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην πρόληψη BCA εξέλιξη και βελτίωση της επιβίωσης των ασθενών.

In vitro

ανάλυση έδειξε ότι

C- ΚΟΑ

νοκ ντάουν κατέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, την εισβολή και τη μετανάστευση, και μείωσε την έκφραση της ΜΜΡ2 και ΜΜΡ9. Αυτό συνοδεύτηκε από αυξημένη ευαισθησία στη σισπλατίνη απόπτωση. ΜΜΡ2 και ΜΜΡ9 αποικοδομούν πρωτεΐνες εξωκυτταρικής μήτρας, διευκολύνοντας έτσι κύτταρο εισβολή και μετάσταση [25, 26]. Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι το

ο-ΜΕΤ

αναστολή είναι πιθανό να μειώσει εισβολή καρκίνου και μετάσταση και να βελτιωθεί η επιβίωση των ασθενών με καρκίνο. Έτσι, μια πιο εστιασμένη κατανόηση της σημασίας του

γ-ΜΕΤ

αναστολή είναι αναγκαία, αν θέλουμε να αναπτύξει αναστολείς που στοχεύουν

c-MET

σε διάφορους όγκους. Πρόσφατα, αρκετές

c-MET

-targeting ναρκωτικά ελέγχθηκαν σε κλινικές δοκιμές, και όλα δείχνουν ελπιδοφόρα κλινική δραστηριότητα με αποδεκτές παρενέργειες [27]. Για παράδειγμα, tivantinib (ονομάζεται επίσης ARQ197) και ένας διπλός αναστολέας της

c-MET

/VEGFR2 (foretinib) μελετήθηκαν σε φάση Ι ΙΙ των κλινικών δοκιμών σε ασθενείς με θηλώδες καρκίνωμα νεφρικών κυττάρων και προχωρημένο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, αντίστοιχα [24]. Ένα μυθιστόρημα αναστολέας πολλαπλών κινασών του

ΚΟΑ

,

VERFR1

,

AXL

,

ΤΙΕ2

,

KIT

,

FLT3

και

RET

, που ονομάζεται cabozantinib (επίσης γνωστή ως XL184), αναστέλλει την ανάπτυξη, μετάσταση, και την αγγειογένεση σε καρκίνο του παγκρέατος και γλοιοβλαστώματος, και μειώνει την αντίσταση στην gemcitabine. Ειδικότερα, οι κλινικές δοκιμές σε μεταστατικό ευνουχισμό ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη (mCRPC) ασθενείς ανέφεραν μια πολλά υποσχόμενη επίδραση στην PFS, μετάσταση στα οστά, και τον πόνο [28]. Ωστόσο, οι όγκοι που δείχνουν αρχικά μια καλή απάντηση σε αναστολείς ΚΟΑ μπορεί αργότερα να αναπτύξουν αντίσταση [24]. Επίκτητη αντοχή σε αναστολείς ΚΟΑ αναπτύσσεται μέσω πολλαπλών μηχανισμών συμπεριλαμβανομένων των γενετικών αλλαγών (π.χ., δευτερογενή

EGFR

μετάλλαξη Τ790Μ), την ενίσχυση ΚΟΑ, και ενεργοποιούνται μονοπάτια σηματοδότησης [29]. Έτσι, πολλαπλές θεραπεία συνδυασμού στόχο ή συν-στόχευση της θεραπείας μπορεί να είναι αναγκαία για την πρόληψη της ανθεκτικότητας στα φάρμακα και να επιτύχουν ευεργετικά αποτελέσματα [24].

Είναι σημαντικό να εξεταστεί η στιχομυθία μεταξύ του

γ-ΜΕΤ

και άλλες RTKs επειδή οι εταίροι στιχομυθία του

c-MET

μπορεί να είναι σημαντικό βιοδείκτες για τη συνεργασία με στόχο τη θεραπεία και να βοηθήσει στην πρόληψη της αντίστασης σε μεμονωμένα MET αναστολείς.

RON

,

AXL

και

ΡϋΘΡΡ

έχουν μια στιχομυθία με

c-MET

. Η υπερέκφραση του

AXL

και

ΡϋΘΡΡ

συνδέεται με την επιθετικότητα και την πρόγνωση μιας σειράς όγκου [14-19]. Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται εδώ είναι συνεπής με προηγούμενες μελέτες στο θέμα αυτό? Ωστόσο, υπήρχαν ορισμένες διαφορές. Σε αντίθεση με τη μελέτη Ωστόσο et al, η οποία αξιολόγησε τη σχέση μεταξύ

PDGFRA

και την εξέλιξη της BCA, εξετάσαμε τα τρία

ΡϋΘΡΡ

ισομορφές:.

PDGFRA

,

PDGFRB

, και

PDGFRL

. Ωστόσο, μόνο το

PDGFRL

συνδέθηκε με την εξέλιξη NMIBC. Οι περισσότερες μελέτες που ως στόχο να προσδιορίσει μια συσχέτιση μεταξύ της εξέλιξης BCA και

ΡϋΘΡΡ

εξέτασε το

PDGFRA

και

PDGFRB

ισομορφές. Ως εκ τούτου, η παρούσα μελέτη είναι η πρώτη που προσδιορίζουν μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ

PDGFRL

έκφρασης και BCA πρόγνωση. Επιπλέον, όμως, et al. εξέτασε μόνο τους ρόλους του

AXL

και

PDGFR

σε προχωρημένες περιπτώσεις [11]. Εδώ, δείξαμε ότι η έκφραση του

AXL

και

ΡϋΘΡΡ

διακρίνονται NMIBC και MIBC από υγιείς μάρτυρες. Ειδικότερα, η έκφραση και των δύο από αυτά τα γονίδια ήταν υψηλότερη σε ασθενείς NMIBC ό, τι σε ασθενείς MIBC. Έτσι,

AXL

και

PDGFRL

μπορεί να είναι πιο ειδικά για NMIBC από MIBC. Ένα μεγάλο επικύρωση είναι απαραίτητη για να αποσαφηνιστούν οι ρόλοι και τα αποτελέσματα των

ΡϋΘΡΡ

ισομορφών στο BCA (NMIBC και MIBC) πρόγνωση.

Βρήκαμε επίσης ότι

c-MET

γονίδιο δικτύου (

c-MET

,

AXL

, και

PDGFR

) έκφραση στενά συνδεδεμένη με την εξέλιξη της νόσου σε ασθενείς NMIBC και με κακή επιβίωση (OS ειδικά) σε ασθενείς MIBC. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η αναστολή του

c-MET

μονοπάτι μπορεί να αποτρέψει την εξέλιξη της νόσου σε ασθενείς NMIBC και να βελτιώσει την επιβίωση των ασθενών MIBC. Επίσης, ενδέχεται να απαιτηθεί πολυ-συνδυασμός ή συν-στόχευση θεραπειών για την πρόληψη της επίκτητης αντοχής φαρμάκου. Yeh et al. έδειξαν ότι το 21,5% (14/65) των ασθενών συν-έκφραση

c-MET

/

AXL

/

ΡϋΘΡΡ

έδειξε κακή μακροπρόθεσμη επιβίωση (p = 0,015) [11]. Ωστόσο, εντόπισαν μόνο κλινική συσχέτιση μεταξύ

c-MET

γονίδια του δικτύου σε ασθενείς με τοπικά προχωρημένο και μεταστατικό BCA. Εδώ, έχουμε εντοπίσει μια κλινική συσχέτιση σε ασθενείς με NMIBC ή MIBC. Έτσι, η παρούσα μελέτη δείχνει ότι η

γ-ΜΕΤ

δικτύου είναι μια πολλά υποσχόμενη βιοδεικτών και στόχος για συν-στόχευση φαρμάκων? αυτό θα πρέπει να δοκιμάζεται σε κλινικές δοκιμές στις οποίες συμμετείχαν τόσο NMIBC και MIBC ασθενείς.

Στο σύνολό τους, τα στοιχεία αυτά δείχνουν ότι (1)

c-MET

/

AXL

/

επίπεδα PDGFR

μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη διάκριση ασθενών με καρκίνο από κανονικούς ελέγχους και να διακρίνει NMIBC από MIBC? και (2) η έκφραση του

c-MET

γονίδια δίκτυο συνδέεται σημαντικά με τις φτωχότερες ποσοστά επιβίωσης για BCA ασθενείς.

Ο εντοπισμός των δικτύων σηματοδότησης που εμπλέκονται μπορεί να παράσχει πληροφορίες που θα προωθήσουν την κατανόησή μας για το μηχανισμών που διέπουν τη βιολογία του όγκου και βοήθεια για την πρόβλεψη πιθανών αντίστασης στα φάρμακα [30]. Πιστεύουμε ότι

c-MET

γονιδιακής έκφρασης του δικτύου είναι ένα μυθιστόρημα προγνωστικός δείκτης για την πρόβλεψη που BCA ασθενείς έχουν αυξημένο κίνδυνο να εμφανίσουν επιθετικό νόσου. Αυτά τα γονίδια μπορεί να είναι ένας χρήσιμος δείκτης για συνεργασία με στόχο τη θεραπεία, και αναμένεται να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στη βελτίωση τόσο της ανταπόκρισης στη θεραπεία και την επιβίωση του BCA ασθενών.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πίνακα S1. Σύνολο δεδομένων με υποτροπή, την εξέλιξη, και 5 γονιδίων σε ασθενείς NMIBC

doi:. 10.1371 /journal.pone.0134552.s001

(PDF)

S2 πίνακα. Σύνολο δεδομένων με την εξέλιξη, η συνολική επιβίωση, καρκίνο συγκεκριμένες επιβίωση, και 5 γονιδίων σε ασθενείς MIBC

doi:. 10.1371 /journal.pone.0134552.s002

(PDF)

S3 πίνακα. Σύνολο δεδομένων με υποτροπή, την εξέλιξη, και

C-MET

γονίδια του δικτύου σε ασθενείς NMIBC

doi:. 10.1371 /journal.pone.0134552.s003

(PDF)

S4 πίνακα. Σύνολο δεδομένων με την εξέλιξη, η συνολική επιβίωση, καρκίνο συγκεκριμένες επιβίωση, και

C-MET

γονίδια του δικτύου σε ασθενείς MIBC

doi:. 10.1371 /journal.pone.0134552.s004

(PDF)

Ευχαριστίες

η εργασία αυτή υποστηρίζεται από ένα Εθνικό Ίδρυμα Ερευνών της Κορέας (NRF) επιχορήγηση που χρηματοδοτείται από την κυβέρνηση της Κορέας (MSIP) (Αρ NRF-2014R1A2A1A09006983) και από το Πρόγραμμα Έρευνας Βασικές Επιστήμες μέσω του Εθνικού Ίδρυμα Ερευνών και Μελετών της Κορέας (NRF), που χρηματοδοτείται από το Υπουργείο Παιδείας, Επιστημών και Τεχνολογίας (2012R1A1A4A01008753). Επίσης, το έργο αυτό υποστηρίζεται μερικώς από το R01DK100974? U01 DK103260? U24 DK097154? ΝΙΗ NCATS UCLA CTSI UL1TR000124? ένα Steven Spielberg Ταμείο Discovery στο Βραβείο Ανάπτυξης του προστάτη Cancer Research Career? μια IMAGINE IC Βραβείο Πρόγραμμα ΟΧΙ Ερευνών (στο JK). Ι.Κ. είναι μια Αμερικανική Ουρολογική Εταιρεία Ίδρυμα Ερευνών Μελετητής και το Harvard Medical School Eleanor και Miles Shore Μελετητή.