Αφηρημένο

Σκοπός

Οι υποδοχείς για ηπατοκυττάρων και αγγειακών ενδοθηλιακών παραγόντων κυτταρικής ανάπτυξης (ΚΟΑ και VEGFR2, αντίστοιχα) είναι κρίσιμες ογκογόνο μεσολαβητές σε γαστρικό αδενοκαρκίνωμα. Ο σκοπός είναι να εξετάσει την ασφάλεια και την αποτελεσματικότητα των foretinib, έναν αναστολέα κινασών στόματος στοχεύουν ΚΟΑ, RON, AXL, ΤΙΕ-2, και των υποδοχέων VEGFR2, για τη θεραπεία του μεταστατικού αδενοκαρκινώματος στομάχου.

Ασθενείς και Μέθοδοι

ασφάλεια Foretinib και την ανοχή, και το ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης (ORR) αξιολογήθηκαν σε ασθενείς που χρησιμοποιούν διαλείπουσα (240 mg /ημέρα, για 5 ημέρες κάθε 2 εβδομάδες) ή την ημέρα (80 mg /ημέρα) δοσολογικά σχήματα. Τριάντα αξιολογήσιμους ασθενείς που απαιτείται για να επιτευχθεί α = 0,10 και β = 0.2 για να δοκιμαστεί η εναλλακτική υπόθεση ότι η μονοθεραπεία foretinib θα οδηγήσει σε ORR της ≥25%. Έως και 10 επιπλέον ασθενείς θα μπορούσαν να εγγραφούν για να εξασφαλιστεί τουλάχιστον οκτώ με

ΚΟΑ

ενίσχυσης. Διασυνδέσεων μελέτες που περιλαμβάνονται όγκου

ΚΟΑ

ενίσχυσης, σηματοδότηση ΚΟΑ, φαρμακοκινητική και βιοδείκτες πλάσμα foretinib δραστηριότητας

Αποτελέσματα

Από τον Μάρτιο του 2007 μέχρι τον Οκτώβριο του 2009, 74 ασθενείς είχαν εγγραφεί.? 74% άνδρες? διάμεση ηλικία, 61 έτη (εύρος, 25-88)? 93% είχαν λάβει προηγούμενη θεραπεία. Καλύτερη ανταπόκριση ήταν σταθερή νόσος (SD) σε 10 (23%) ασθενείς που έλαβαν διαλείπουσα δοσολογία και πέντε (20%) που έλαβαν ημερήσια δοσολογία? διάρκεια SD ήταν 1.9 έως 7.2 μήνες (διάμεση τιμή 3,2 μήνες). Από τους 67 ασθενείς με δείγματα όγκων, 3 είχαν

ΚΟΑ

ενίσχυση, ένας από τους οποίους είχε SD. Σχετιζόμενες με τη θεραπεία ανεπιθύμητες ενέργειες που εμφανίστηκαν στο 91% των ασθενών. Ποσοστά υπέρταση (35% έναντι 15%) και αυξημένες ασπαρτική αμινοτρανσφεράση (23% έναντι 8%) ήταν υψηλότερη με διαλείπουσα δοσολογία. Σε δύο ασθενείς με υψηλή αρχική τιμή του όγκου φωσφο-MET (pMET), η pMET: συνολικός δείκτης ΚΟΑ πρωτεΐνης μειώθηκε με foretinib θεραπεία

Συμπέρασμα

Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι λίγοι γαστρικά καρκινώματα οδηγούνται αποκλειστικά από. ΚΟΑ και VEGFR2, και υπογραμμίζουν την ποικιλόμορφη μοριακή ογκογένεση αυτής της ασθένειας. Παρά τα στοιχεία για αναστολή ΚΟΑ από foretinib, μονοθεραπεία foretinib έλλειψη αποτελεσματικότητας σε μη επιλεγμένους ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο του στομάχου

Δίκη ΕΓΓΡΑΦΕΣ

ClinicalTrials.gov NCT00725712

Παράθεση:. Shah MA , Wainberg ΖΑ, Catenacci DVT, Hochster ΕΣ, η Ford J, Kunz P, et al. (2013) Φάση II μελέτη αξιολόγησης 2 δοσολογικά σχήματα του Στόματος Foretinib (GSK1363089), cMet /VEGFR2 αναστολέα, σε ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο του στομάχου. PLoS ONE 8 (3): e54014. doi: 10.1371 /journal.pone.0054014

Επιμέλεια: Jose Luis Perez-Gracia, Πανεπιστημιακή Κλινική της Ναβάρα, Ισπανία

Ελήφθη: 2 Ιουλίου 2012? Αποδεκτές: 5 Δεκεμβρίου, 2012? Δημοσιεύθηκε: 14 Μαρτίου 2013

Copyright: © 2013 Shah et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Χρηματοδότηση η μελέτη αυτή προβλέπεται από την GlaxoSmithKline. Οι χρηματοδότες ήταν στενά εμπλέκονται στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή δεδομένων και την ανάλυση. Είχαν κανένα ρόλο στην απόφαση για δημοσίευση, αλλά συμμετείχαν στην προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα: Δρ. Kallender, ο Δρ Μάρτιν, ο Δρ Γ Liu, ο Δρ Gagnon Δρ L. Liu, Ο Δρ Gilmer είναι υπάλληλοι και έχουν συμφέρον των ιδίων κεφαλαίων σε GlaxoSmithKline. Ο Δρ Keer είναι υπάλληλος της FivePrime Therapeutics Inc. με ενδιαφέρον μετοχικό κεφάλαιο της Εξέλιξη. Editorial υποστήριξη με τη μορφή της ανάπτυξης του σχεδίου περίγραμμα, την ανάπτυξη του χειρογράφου πρώτο σχέδιο, συναρμολόγηση πίνακες και στοιχεία, ταξινομώντας συγγραφέας σχόλια, επιμέλεια κειμένου και αναφορά δόθηκαν από την Ann Sherwood, PhD της CONNEXION Υγείας, Newtown, PA, και από MediTech Media, Μάντσεστερ , το Ηνωμένο Βασίλειο, και χρηματοδοτήθηκε από την GlaxoSmithKline. Δεν υπάρχουν διπλώματα ευρεσιτεχνίας, τα προϊόντα για την ανάπτυξη ή την εμπορία προϊόντων που να δηλώνουν. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών, όπως περιγράφεται λεπτομερώς σε απευθείας σύνδεση στον οδηγό για τους συγγραφείς.

Εισαγωγή

Καρκίνος στομάχου (GC) είναι η τέταρτη συχνότερος καρκίνος παγκοσμίως [1], [2], με κατ ‘εκτίμηση 990.000 νέες περιπτώσεις και 730.000 θάνατοι συμβαίνουν ετησίως [3], παρά την επικράτηση, την ανάπτυξη φαρμάκων για τη GC έχει μείνει πίσω από την πρόοδο που παρατηρείται σε άλλες κακοήθειες [4], με διάμεση επιβίωση του βλέπε Λίστα ελέγχου S1 και το πρωτόκολλο S1.

Ασθενείς

Αυτή η μελέτη διεξήχθη σύμφωνα με την ορθή κλινική πρακτική και ακολούθησε τις ισχύουσες απαιτήσεις του ασθενούς ιδιωτικής ζωής και τη Διακήρυξη του Ελσίνκι. Το πρωτόκολλο της μελέτης εγκρίθηκε από τις ιατρικές επιτροπές δεοντολογίας σε όλα τα συμμετέχοντα ιδρύματα, και οι ασθενείς παρείχαν ενυπόγραφη ενημερωμένη συγκατάθεση πριν από τη συμμετοχή. Μια λίστα με όλα τα συμμετέχοντα ιδρύματα και επιτροπές ιατρικής δεοντολογίας τους παρέχεται στο Παράρτημα S1.

Αρχικό επιλεξιμότητας των ασθενών (Μάρτιος 2007) ιστολογικά περιλαμβάνονται επιβεβαίωσε, κακώς διαφοροποιημένο, προχωρημένο ή μεταστατικό αδενοκαρκίνωμα στομάχου, συμπεριλαμβανομένου του σφραγίδα των κυττάρων δαχτυλίδι GC και μη -squamous, μη σαρκωματώδεις όγκους της γαστροοισοφαγικής συμβολής (GEJ). Τον Απρίλιο του 2008, το πρωτόκολλο της μελέτης τροποποιήθηκε για να συμπεριλάβει ασθενείς με μέτρια και καλά διαφοροποιημένοι όγκοι διασταύρωση γαστρικό /γαστροοισοφαγικής και σε ασθενείς με περιφερική οισοφάγου αδενοκαρκινώματα. Οι ασθενείς πρέπει να έχουν μετρήσιμη νόσο ανά Κριτήρια Αξιολόγησης απόκρισης σε συμπαγείς όγκους (RECIST) (Έκδοση 1.0) [28], Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) κατάσταση απόδοσης 0-2 και επαρκή νεφρική, ηπατική, αιματολογικές και του φλοιού των επινεφριδίων λειτουργία. Τα άτομα με γνωστή εγκεφαλικές μεταστάσεις, ή περισσότερο από τρεις γραμμές προηγούμενη κυτταροτοξική χημειοθεραπεία για τοπικά προχωρημένο ή μεταστατικό νόσο αποκλείστηκαν.

Μελέτη και Θεραπεία

Αυτό ήταν ένα single-βραχίονα, πολυκεντρική, φάσης μελέτη II εξετάζει διαδοχικά δύο δοσολογικά σχήματα του στόματος foretinib διφωσφορικής (εφεξής foretinib): διαλείπουσα (240 mg /ημέρα για 5 διαδοχικές ημέρες κάθε 2 εβδομάδες) και η ημερήσια δοσολογία (80 mg /ημέρα κατά τη διάρκεια κάθε κύκλου 2 εβδομάδων). Καθημερινή εγγραφή δοσολογία ομάδα άρχισε μετά την εγγραφή στο διαλείπουσα δοσολογία ομάδα ολοκληρώθηκε. Εργαστηριακές αξιολογήσεις και σωματικές εξετάσεις διεξήχθησαν πριν από κάθε κύκλο δοσολόγηση 2 εβδομάδων και για τις δύο ομάδες, και οι όγκοι εκτιμήθηκαν μετά από 8 εβδομάδες θεραπείας και περίπου κάθε 8 εβδομάδες στη συνέχεια. αξιολογήσεις ασφάλειας είχαν προγραμματιστεί 30, 90 και 180 ημέρες μετά την τελευταία δόση foretinib.

Αποτελεσματικότητα Αποτέλεσμα Μέτρα

Η κύρια έκβαση αποτελεσματικότητας ήταν το ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης (ORR) ορίζεται ως το ποσοστό των ατόμων για τους οποίους καλύτερη αντικειμενική ανταπόκριση ήταν μια επιβεβαιωμένη πλήρης ανταπόκριση ή επιβεβαιωθεί μερική ανταπόκριση από RECIST [28]. Δευτερεύοντα μέτρα αποτελεσματικότητας ήταν η επιβίωση χωρίς εξέλιξη (PFS), το ποσοστό σταθεροποίηση της νόσου, η διάρκεια των σταθερή νόσο (SD) και OS.

Αποτελέσματα Μέτρα ασφαλείας

Η τοξικότητα βαθμού των ανεπιθύμητων ενεργειών (ΑΕ) και εργαστηριακές μεταβλητές ορίστηκαν σύμφωνα με τα Κριτήρια Εθνικό Ινστιτούτο Καρκίνου Κοινής ορολογίας για ανεπιθύμητες Ενέργειες (CTCAE) έκδοση 3.0.

Correlative Σπουδών

Correlative στόχοι ήταν να αξιολογηθεί

ΚΟΑ

ενίσχυση γονιδίου σε GC, για να καθορίσει την απάντηση foretinib των όγκων που φέρουν

ΚΟΑ

ενίσχυση, να εκτιμήσει foretinib στόχευση της ΚΟΑ και την αξιολόγηση των δυνητικών βιοδείκτες της foretinib δραστηριότητας πλάσμα. Ανάλυση του

ΚΟΑ

ενίσχυση στο 7q31 διεξήχθη σε αρχειακό ή πρόσφατα παρασκευασμένα βιοψίες όγκων παραφίνη-ενσωματωμένες με φθορίζοντα

in situ

υβριδισμός (FISH) ανάλυση (CarisDX, Phoenix, AZ). Πολυσωμία είχε διαφοροποιηθεί από την ενίσχυση του γονιδίου χρησιμοποιώντας την αναλογία της ≥2 για το μέσο αριθμό αντιγράφων του

ΚΟΑ

και CEP 7 (χρωμόσωμα 7 κεντρομερική δείκτη). δεικτών PD της κλινικής δραστηριότητας (π.χ. φωσφο-MET [pMET]) αξιολογήθηκαν σε ζεύγη φρέσκων δειγμάτων της βιοψίας του όγκου που συλλέγονται κατά την έναρξη και 5-8 ημέρες μετά την έναρξη της θεραπείας foretinib στην καθημερινή ομάδα.

επίπεδα ΡΚ πλάσματος διαλυτών ΚΟΑ (Smet), HGF, διαλυτό VEGFR2 (sVEGFR2) και VEGF-A αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας ηλεκτροχημειοφωταυγείς ανοσοπροσδιορισμούς δύο θέσεων (Scale Discovery μεσο, Gaithersburg, MD). Τα δείγματα πλάσματος αναλύθηκαν για foretinib χρησιμοποιώντας μια αναλυτική μέθοδο που βασίζεται στην εκχύλιση υγρού-υγρού, ακολουθούμενη από υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης /διαδοχική ανάλυση φασματομετρίας μάζας.

ΜΚΝ-45 ανθρώπινου γαστρικού μελέτες ξενομοσχεύματος καρκινώματος.

θηλυκά αθυμικά γυμνά ποντίκια που στεγάζεται στο Ερευνητικό Κέντρο του Πιεμόντε, σύμφωνα με τις συστάσεις του Οδηγού ΝΙΗ για τη Φροντίδα και Χρήση των ζώων Εργαστηρίου.

ξενομοσχεύματα ιδρύθηκε με υποδόρια εμφύτευση 1 × 10

7 MKN- 45 κύτταρα αιωρούνται σε 50% Matrigel στα δεξιά λαγόνες των ποντικών δοκιμής. Οι όγκοι των όγκων υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας την εξίσωση (L Χ W

2) /2, όπου L και W αναφέρονται στις μεγαλύτερες και μικρότερες διαστάσεις που λαμβάνονται από μετρήσεις δαγκάνα στις υποδεικνυόμενες ημέρες μετά την εμφύτευση. Για τις μελέτες αποτελεσματικότητας, θεραπείες ξεκίνησαν όταν η ομάδα σημαίνει όγκων του όγκου έφτασε ~ 180 mm

3. Το όχημα για foretinib είναι 1% υδροξυπροπυλομεθυλοκυτταρίνη (χαμηλού βαθμού ιξώδους, Ε3): 0,2% SLS (λαυρυλοθειικό νάτριο, βαθμός HPLC): 98.8% νερό. Ποντικοί που φέρουν ΜΚΝ-45 γαστρικών όγκων (η = 10 ανά ομάδα) υποβλήθηκαν σε αγωγή με όχημα ή foretinib μια φορά την ημέρα (qd) για 21 ημέρες σε 6 mg /kg ή 10 mg /kg, ή με 30 mg /kg κάθε δεύτερη ημέρα ( q2d) για 42 ημέρες ή αφεθεί χωρίς θεραπεία. Η Kruskal-Wallis με post-hoc στατιστική δοκιμή του Dunn έγινε

*

P

& lt?. 0.05 θεωρήθηκε σημαντική

Για τις αναλύσεις pMET /ΚΟΑ και PK, γυμνό. ποντικών με ΜΚΝ-45 όγκους μέτρησης 200 έως 300 mm

3 σε μέγεθος έλαβαν όχημα, foretinib ή pazopanib στόματος μία φορά ημερησίως επί 3 ημέρες. Foretinib ποσοτικά με HPLC-MS /MS σε δείγματα πλάσματος που συλλέγονται κατά τη διάρκεια της περιόδου δειγματοληψίας 24 ωρών μετά από τρεις διαδοχικές ημερήσιες δόσεις. Οι όγκοι συλλέχθηκαν 1, 2, 4, 8 ή 24 ώρες μετά την τελευταία δόση. Η φωσφορυλίωση του ΚΟΑ σε ΜΚΝ-45 όγκους προσδιορίστηκε με ανοσοκαταβύθιση με αντι-ΜΕΤ αντίσωμα (Cell Signaling # 3127) που ακολουθείται από ανοσοστύπωμα με αντίσωμα αντι-φωσφοτυροσίνης (Sigma # P5872) και, παράλληλα, με αντίσωμα αντι-ΜΕΤ (Invitrogen # 18 -2257). Εικόνες έγιναν ορατές και ποσοτικά τόσο σε 700 και 800 κανάλια χρησιμοποιώντας το LI-COR Odyssey Infrared System απεικόνισης. Τα δείγματα αναλύθηκαν επίσης χρησιμοποιώντας δύο θέσεων ανοσολογικές δοκιμασίες ηλεκτροχημικοφωτεινότητος για το σύνολο των ΚΟΑ και pMET. Τα δεδομένα αναλύθηκαν στατιστικά με δύο όψεων t-test, όπου

P

& lt? 0,01 θεωρήθηκε σημαντική

Plasma Δειγματοληψία Χρονοδιάγραμμα για Smet, HGF, sVEGFR2 και VEGF-A

165..

για ασθενείς που λαμβάνουν διαλείπουσα χορήγηση της δόσης, τα δείγματα πλάσματος συλλέχθηκαν πριν από τη δόση και 4 ώρες μετά τη δόση τις ημέρες 1, 5, 43 και 47, και πριν από τη δόση μόνο κατά τις ημέρες 15 και 29. για τους ασθενείς στην καθημερινή δοσομέτρησης κοόρτη, τα δείγματα πλάσματος συλλέχθηκαν πριν από τη δόση και στις 4 ώρες μετά τη δοσολόγηση στις ημέρες 1, 8 και 15, και πριν από τη δόση μόνο κατά τις ημέρες 29 και 43. Η εβδομάδων δείγμα 1 πριν από τη δόση θεωρήθηκε βασική γραμμή για τις δύο ομάδες.

FISH.

Εξήντα πυρήνες αναλύθηκαν με FISH χρησιμοποιώντας ένα BAC βακτηριακό ανιχνευτή τεχνητό χρωμόσωμα που περιέχει ολόκληρο το

ΚΟΑ

γονίδιο (επισημαίνονται με κόκκινο Cy3) και ένα κεντρομερίδιο 7-ειδική καθετήρα, CEP7 (επισημαίνονται με SpectrumGreen), από Μοριακής προφίλ Ινστιτούτο, τώρα CarisDx (Phoenix, AZ). Τα κύτταρα αναλύθηκαν από τουλάχιστον δύο διαφορετικές περιοχές της μεταστατικής δείγμα όγκου.

ΜΕΤ

ενισχύσεως ορίζεται ως εξής: αναλογία τουλάχιστον 2 για το μέσο αριθμό αντιγράφου του

MET

και CEP7 μήκος τουλάχιστον 60 κύτταρα ή οποιαδήποτε κύτταρα που περιέχουν πολλαπλά αντίγραφα του

MET

γονιδίων σε ομοιογενή χρώση περιοχές που εκτελούνται από Caris Dx (Phoenix, AZ).

Met λειτουργική προφίλ.

Προμηθέας Laboratories (San Diego, CA) λειτουργικό προφίλ της ΚΟΑ. προϊόντα λύσης πρωτεΐνης παρασκευάστηκαν σύμφωνα με την πρότυπη διαδικασία λειτουργίας Προμηθέας. Εν συντομία, κάθε δείγμα όγκου υποβλήθηκε σε επεξεργασία με 10x ο όγκος του «αργότερα Protein» ρυθμιστικό διάλυμα λύσης, που ακολουθείται από ομογενοποίηση ιστού. Τα υπερκείμενα συλλέχθηκαν μετά από φυγοκέντρηση του ομογενοποιημένου ιστού στις 16.000 rpm για 15 λεπτά στους 4 ° C. Οι πρωτεϊνικές συγκεντρώσεις προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας BCA δοκιμασία. προϊόντα λύσης πρωτεϊνών σε κλάσματα και αποθηκεύτηκε στους -70 ° C πριν από την ανάλυση COPIA. MET ενεργοποίηση και έκφρασης προφίλ χρησιμοποιώντας COPIA, ένα πολυπλεξίας, με βάση την εγγύτητα, συνεργατική πλατφόρμα ανοσολογική δοκιμή (COPIA, Προμηθέας Laboratories, San Diego, CA). αξιολόγηση ανοσοϊστολογία εκτελέστηκε χρησιμοποιώντας τομές γίνονται με βάση τα διαθέσιμα ΥΧΕ ενσωματωμένο ιστούς.

Φαρμακοδυναμικές ανιχνεύσεις βιοδεικτών.

ηλεκτροχημικοφωτεινότητος ανοσοπροσδιορισμούς δύο θέσεων για τον HGF και Smet αναπτύχθηκαν χρησιμοποιώντας εμπορικά διαθέσιμα αντιδραστήρια όπως περιγράφηκε προηγουμένως ( Athauda et al., 2006). κιτ δοκιμασίας για παρόμοια ανάλυση sVEGFR2 και VEGF επίπεδα πλάσματος ελήφθησαν από Meso Scale Discovery (Gaithersburg, MD). Η-Α VEGF σύστημα δοκιμασίας που χρησιμοποιείται αναγνωρίζει VEGF-A ισομορφές 165 και 121 με συγκρίσιμη συγγένεια? δεν αναγνωρίζει το VEGF μέλη της οικογένειας ΡΙΟΡ ή VEGF-D. Αναγνώριση του VEGF-B ή -C δεν έχει προσδιορισθεί. Πρότυπες καμπύλες γίνονται χρησιμοποιώντας καθαρισμένες ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες περιλαμβάνονται σε κάθε πλάκα 96 φρεατίων, και όλες οι δοκιμασίες είχαν συνολική συντελεστής διακύμανσης & lt? 10%. Όλα τα δείγματα και τα πρότυπα αναλύθηκαν εις τριπλούν. Ανεπεξέργαστα δεδομένα επεξεργάστηκαν και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το Microsoft Excel (2008 για Mac) και GraphPad Prism (V5.0) πακέτα λογισμικού.

Στατιστική Ανάλυση

Για κάθε δοσολογικό σχήμα, η μελέτη που κινούνται για την εναλλακτική υπόθεση ότι Orr με foretinib θα πρέπει να είναι τουλάχιστον 25% σε σχέση με την μηδενική υπόθεση ότι είναι λιγότερο από 10% (H

0: p

o≤0.10 εναντίον p

a≥0.25). Για να επιτευχθεί ένα ποσοστό σφάλματος τύπου Ι μικρότερο από 0,10 και τουλάχιστον το 80% της ισχύος, η εγγραφή των 30 αξιολογήσιμους ασθενείς είχε προγραμματιστεί σε κάθε κοόρτη. Το μέγεθος του δείγματος βασίστηκε σε μια διωνυμική υπολογισμό διανομή ακριβείς πιθανότητες για τα ποσοστά σφάλματος κάτω από τα άκυρη και εναλλακτικές υποθέσεις. Εάν λιγότερα από οκτώ από τους αξιολογήσιμους ασθενείς είχαν

ΚΟΑ

-amplified όγκους, μέχρι 10 επιπλέον αξιολογήσιμους ασθενείς θα μπορούσαν να εγγραφούν σε ένα σύνολο 40 ασθενών.

Ο πληθυσμός ασφαλείας συμπεριλάμβανε όλους τους ασθενείς που έλαβαν ≥1 δόση του φαρμάκου. καταληκτικά σημεία αποτελεσματικότητας αναλύθηκαν σε ασθενείς οι οποίοι είχαν αρχική και μετά την έναρξη του όγκου αξιολόγησης, και έλαβε ≥75% των δόσεων πρωτόκολλο εντολή κατά τη διάρκεια των 8 πρώτων εβδομάδων της θεραπείας, ή που, πριν από την ολοκλήρωση των πρώτων 8 εβδομάδων, διακόπηκαν foretinib λόγω τοξικότητας σχετίζονται με τα ναρκωτικά ή εξελισσόμενη νόσος.

Ο αριθμός (%) των ασθενών με αντικειμενική ανταπόκριση και SD συνοψίζεται συμπεριλαμβανομένων των διαστημάτων εμπιστοσύνης 95%. Time-to-event τελικά σημεία, συμπεριλαμβανομένων των διαστημάτων εμπιστοσύνης 95%, συνοψίστηκαν χρησιμοποιώντας μεθόδους Kaplan-Meier.

Correlative αναλύσεις που περιλαμβάνονται συσχέτιση των foretinib έκθεση με τα μέτρα ασφάλειας και αποτελεσματικότητας. Foretinib έκθεση ορίστηκε ως η συγκέντρωση πριν από τη δόση την ημέρα 5 για τη διακοπτόμενη κοόρτη και την ελάχιστη συγκέντρωση κατά την ημέρα 15 για την καθημερινή κοόρτη. αναλύσεις Στιβαρή λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιώντας MM-εκτίμηση και την επακόλουθη προσομοιώσεις Monte Carlo χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση της σχέσης μεταξύ foretinib έκθεσης και ποσοστιαία μεταβολή του μεγέθους του όγκου στο ναδίρ. Επειδή ο χρόνος δειγματοληψίας PK σημεία αντιπροσωπεύουν διαφορετικά μέτρα έκθεσης για κάθε δοσολογικό σχήμα, αναλύσεις αποτελεσματικότητας έγιναν ξεχωριστά για κάθε σχήμα.

Για επίπεδα Smet, sVEGFR2, VEGFA και HGF, αρχική τιμή δείκτη και μεταβολές από την έναρξη πλάσμα αναλύθηκαν σε κάθε χρονικό σημείο χρησιμοποιώντας ανάλυση διακύμανσης, καθώς και τις σχέσεις τους με τις συγκεντρώσεις foretinib πλάσμα και της κλινικής έκβασης (άθροισμα της μεγαλύτερης διαμέτρου [SLD], PFS και την ανταπόκριση RECIST) εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας την ανάλυση Spearman. Συσχέτιση μεταξύ της PD πλάσματος, τη δοσολογία και συγκεντρώσεις foretinib πλάσμα, και PFS και απαντήσεις RECIST, αντίστοιχα, ελέγχθηκαν με τη χρήση αναλογικού κινδύνου και της λογιστικής παλινδρόμησης.

Αποτελέσματα

Ασθενείς

Από Μάρτιος 2007-Οκτώβριος 2009, 74 ασθενείς εντάχθηκαν από τις 15 συμμετέχουσες ΗΠΑ κέντρα: 48 στην διαλείπουσα δοσολογία ομάδα και 26 στην ημερήσια δοσολογία ομάδα (Σχήμα 1). Τα δημογραφικά στοιχεία και τα αρχικά χαρακτηριστικά των ασθενών παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Εξήντα-εννέα ασθενείς (44 στην διαλείπουσα ομάδα, 25 στον ημερήσιο ομάδα) αξιολογήθηκαν ως προς την αποτελεσματικότητα. Σημειώστε, την εγγραφή στην ημερήσια ομάδα σταμάτησε όταν έγινε φανερό ότι το κύριο τελικό σημείο αποτελεσματικότητας, δεν θα πρέπει να πληρούνται, και ότι η εγγραφή των 10 επιπλέον ασθενείς δεν θα δώσει ένα σημαντικό αριθμό

ΜΕΤ-

ενισχύεται ασθενείς.

* Οι ασθενείς εντάχθηκαν στο Διακοπτόμενη δοσολογικό σχήμα πρώτα, και στη συνέχεια να εγγραφεί στην ημερήσια δοσολογικό σχήμα.

Η

Η πλειοψηφία των ασθενών ήταν άνδρες, λευκό μη-ισπανόφωνοι, με ελάχιστα διαφοροποιημένο όγκοι (το ένα τρίτο της Lauren διάχυτη ιστολογία). Ενενήντα τρία τοις εκατό των ασθενών που είχαν λάβει προηγούμενη θεραπεία? Ο διάμεσος αριθμός προηγούμενων αντικαρκινικών θεραπειών ήταν 1, σειρά (1-3), συνηθέστερα συμπεριλαμβανομένου ενός φθοροπυριμιδίνη (96%), λευκόχρυσο (84%) ή docetaxel (46%). Τρεις ασθενείς είχαν

MET

ενίσχυση γονιδίου και ένα επιπλέον 22% είχαν αυξημένο αριθμό αντιγράφων λόγω πολυσωμία.

Αποτελεσματικότητα

Όπως φαίνεται στον Πίνακα 2, κανένας ασθενής είτε κοόρτη επιτευχθεί μια πλήρης ή μερική απόκριση. Δέκα (23%) αξιολογήσιμους ασθενείς στην ομάδα διαλείπουσα και πέντε (20%) αξιολογήσιμους ασθενείς στην καθημερινή ομάδα είχε ένα καλύτερο αποτέλεσμα του SD. Η διάρκεια της SD (Εικ S2A στο S1 αρχείου) κυμάνθηκε 1,91 έως 7,16 μήνες μέση διάρκεια 3,2 μηνών. Το οικόπεδο καταρράκτη για την απάντηση (Σχήμα 2) δείχνει μέτρια δραστηριότητα που παρατηρήθηκε με foretinib μονοθεραπεία σε προηγούμενη θεραπεία του προχωρημένου ή μεταστατικού GC.

* Οι ασθενείς με ενίσχυση γονιδίου ΚΟΑ (τρίτη ειδική διέκοψαν τη θεραπεία πριν από τη μέτρηση του όγκου).

Η

Δεν υπήρξαν απαντήσεις όγκου σε τρεις ασθενείς με

ΚΟΑ

ενίσχυση γονιδίου? ένας ασθενής έμπειρους SD (2,1 μήνες). Μια δεύτερη

ΚΟΑ

-amplified ασθενής δεν ήταν υπό αξιολόγηση για ανταπόκριση του όγκου, αφού διακοπεί foretinib οφείλεται σε αυξημένα επίπεδα αμινοτρανσφεράσης της αλανίνης (ALT) και ασπαρτική αμινοτρανσφεράση (AST) πριν έγινε εκτίμηση του όγκου. Το τρίτο

ΚΟΑ

-amplified ασθενής είχε προοδευτική ασθένεια. Και οι τρεις ασθενείς ήταν στην διαλείπουσα κοόρτη. Η εκτιμώμενη διάμεση PFS ήταν 1,7 μήνες (95% CI: 1.6-1.8 μήνες) συνολικά (1,6 μήνες στην ομάδα διαλείπουσα, 1,8 μήνες στην καθημερινή ομάδα). Η εκτιμώμενη διάμεση OS ήταν 7,4 μήνες, με διαλείπουσα χορήγηση της δόσης και 4,3 μήνες με ημερήσια δόση (Εικ. S2B στο αρχείο S1).

Ασφάλεια

Ο πίνακας 3 καταγράφει ανεπιθύμητες ενέργειες σχετιζόμενες με τη θεραπεία που αναφέρθηκαν σε ≥10% των ατόμων συνολικά. Η διαλείπουσα ομάδα εμφανίζεται υψηλότερη επίπτωση της υπέρτασης, διάρροια, και ALT και της AST σε σύγκριση με την καθημερινή ομάδα. Οι περισσότερες ανεπιθύμητες ενέργειες που σχετίζονται με τη θεραπεία ήταν ήπιας βαρύτητας (& lt? Βαθμού 3). Δέκα θάνατοι συνέβησαν κατά τη διάρκεια της θεραπείας ή εντός 30 ημερών από την τελευταία δόση foretinib? οκτώ ασθενείς έχασαν τη ζωή τους λόγω της εξέλιξης της νόσου, ένας ασθενής με προηγούμενη καρδιακή νόσο πέθανε από καρδιακή ανακοπή θεωρείται άσχετη με foretinib, και ένας θάνατος ασθενούς χωρίς σαφή αιτία θεωρήθηκε πιθανώς σχετίζονται με foretinib. Αυτός ο ασθενής βρέθηκε στο σπίτι και μια αιτία θανάτου δεν εξακριβώθηκε

Η

φαρμακοκινητική και φαρμακοδυναμική

μελέτες ξενομοσχεύματος ποντικού χρησιμοποιώντας την ανθρώπινη GC-προέρχεται

MET

. – ενισχυμένο κυτταρική γραμμή ΜΚΝ-45 έδειξε δοσο-εξαρτώμενο αποκλεισμό της ανάπτυξης του όγκου που συνέπεσε με σημαντική, ανθεκτική αναστολή των επιπέδων pMET όγκου (Σχήμα S1 στο S1 αρχείου). Η σχέση μεταξύ foretinib PK (δηλαδή δείγματα trough) και το μέγεθος του όγκου για κάθε ομάδα φαίνεται στο Σχ S3 σε S1 αρχείου. Ζεύγη δειγμάτων της βιοψίας του όγκου συλλέχθηκαν κατά την έναρξη και κατά 5 έως 8 ημέρες μετά την έναρξη της θεραπείας με foretinib στα τελευταία εννέα ασθενείς που συμμετείχαν στην καθημερινή ομάδα. Πέντε ασθενείς είχαν ζεύγη δειγμάτων βιοψίας ιστού επαρκής για την ανάλυση της ενεργοποίησης ΚΟΑ (pMET /συνολικό ΚΟΑ) και ΚΟΑ αναστολή οδού. Από αυτά τα πέντε, δύο είχαν υψηλά επίπεδα pMET κατά την έναρξη, η οποία ήταν σημαντικά μειωμένη μετά τη θεραπεία foretinib (& gt? 5-φορές μείωση στην pMET /συνολικός δείκτης ΚΟΑ). Παρά το γεγονός αυτό, οι δύο ασθενείς είχαν προοδευτική ασθένεια στο πρώτο on-θεραπεία σάρωση τους.

Για να αξιολογηθεί περαιτέρω foretinib δραστηριότητα, τα επίπεδα της Smet, HGF, sVEGFR2 και VEGF-A στο πλάσμα μετρήθηκαν κατά την έναρξη και κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Μέσες συγκεντρώσεις της Smet, sVEGFR2 και VEGF-A αλλάξει σημαντικά με την πάροδο του πρώτου διαστήματος χορήγησης του διαλείπουσα ομάδα (Σχήμα 3 και Πίνακας S1 στο S1 αρχείου). Μέσος Smet και τα επίπεδα VEGF-A συσχετίζεται με την αύξηση της foretinib πλάσμα (Σχ. 2Α, Β και C), ενώ διάμεση sVEGFR2 (Σχ. 2D) μειώθηκε πάνω από αυτό το διάστημα. Μέσος επίπεδα Smet και VEGF-A στη διακοπτόμενη κοόρτη μειώθηκε κατά την επακόλουθη διακοπές 9-ημερών φαρμάκου (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται), υποδεικνύοντας μια βραχυπρόθεσμη επίδραση της foretinib. Διάμεση επίπεδα HGF αυξήθηκε επίσης κατά τη διάρκεια των δόσεων περιόδους και μειώθηκε κατά τη διάρκεια της θεραπείας διακοπές, αλλά αυξήθηκε σημαντικά μόνο για την περίοδο από την έναρξη έως την ημέρα 47 (

P

& lt? 0,0009). Σε αντίθεση, τα κυκλοφορούντα επίπεδα της sVEGFR2 μειώθηκε σταθερά και σημαντικά κατά τη διάρκεια της περιόδου 47 ημερών (

P

& lt? 0,0001). Οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα αυτών των δεικτών δεν σχετίζεται με την ανταπόκριση RECIST? Ωστόσο, μικρή αλλά σημαντική συσχετίσεις παρατηρήθηκαν μεταξύ του φορτίου του όγκου κατά την εβδομάδα 8 (SLD) και το επίπεδο Smet (Spearman

R

= 0,5441,

P

= 0,0049), και VEGF-A επίπεδο (Spearman

R

= 0,6216,

P

= 0,0012), αντίστοιχα (Σχήμα 4).

Box και οικόπεδα μουστακιού δείχνουν μέσες τιμές ± 25% μέσα στο κουτί και 100% φάσμα όλες οι τιμές μέσα μουστάκια. Μέσες τιμές για foretinib πλάσμα και κάθε αλλαγή δείκτη παρουσιάζεται σημαντικά με την πάροδο αυτού του διαστήματος (

P

& lt? 0,0001). Άλλες σημαντικές αλλαγές δείκτη συζητούνται στο κείμενο.

Η

Spearman

R

τιμές ήταν 0,5157 (

P

= 0.0099) και 0,6216 (

P

= 0,0012) για Smet και VEGF-Α, αντίστοιχα. Οι διακεκομμένες γραμμές δείχνουν 95% διαστήματα εμπιστοσύνης.

Η

Συζήτηση

GC είναι μια επιθετική και κοινή ασθένεια για την οποία νέες θεραπείες χρειάζονται απεγνωσμένα. Εξετάσαμε την αποτελεσματικότητα της foretinib μονοθεραπεία, ένα μυθιστόρημα στόματος αναστολέα της ΚΟΑ, RON, AXL, TIE-2 και VEGF2R RTKs, σε ασθενείς που είχαν προηγουμένως λάβει θεραπεία για μεταστατικό GC. Καθώς η πρώτη κλινική αξιολόγηση της αναστολής ΚΟΑ σε GC, σημαντικά συμπεράσματα προέκυψαν από τη μελέτη αυτή. Δείχνουμε ότι η στόχευση της οδού ΚΟΑ μπορεί να είναι ασφαλής και καλά ανεκτή σε ασθενείς με προχωρημένη νόσο. Οι πιο συχνές ανεπιθύμητες ενέργειες foretinib σχετίζονται (κόπωση, υπέρταση και γαστρεντερικά προβλήματα) ήταν εύκολα αντιμετωπίσιμες. Οι πιο συχνές εργαστηριακές ανωμαλίες foretinib που σχετίζονται με (αυξημένες τιμές ALT και AST) ήταν ασυμπτωματικοί. Υπέρταση, μια περιοριστική της δόσης AE για foretinib, πιστεύεται ότι προκύπτει από τη δραστηριότητά της αντι-VEGFR. Ελάχιστη δραστικότητα κατά του όγκου παρατηρήθηκε με foretinib μονοθεραπεία, παρά τα στοιχεία για την εμπλοκή στόχων και των αποδεικτικών στοιχείων ιστού της αναστολής στόχου.

Οι δύο δόσεων ομάδες έδειξαν παρόμοια προφίλ ασφάλειας. Όπου αυτά διέφεραν, η συχνότητα των ανεπιθύμητων ενεργειών ήταν γενικά χαμηλότερη στην ημερησίως σε σύγκριση με την διαλείπουσα κοόρτη. Αν και οι δύο ομάδες κατέδειξαν απόδειξη της αναστολής της οδού, ούτε επέδειξε σημαντική δραστικότητα κατά του όγκου. OS αριθμητικά βελτιωθεί η διαλείπουσα ομάδα σε σχέση με την καθημερινή ομάδα. Ο λόγος για αυτό είναι ασαφές, αλλά οι πληθυσμοί των ασθενών διέφεραν και ο αριθμός των ασθενών στην καθημερινή ομάδα ήταν μικρό.

Θα σημειωθεί ότι λιγότεροι από το 5% των ασθενών στη μελέτη μας παρουσίασαν

ΚΟΑ

ενίσχυση. Αυτό είναι χαμηλότερο από τις εκτιμήσεις συχνότητα 5% έως 23% έχουν αναφερθεί στο παρελθόν για τα δείγματα όγκων GC [8] – [14]. Αντίθετα, αυξήθηκε

ΚΟΑ

αριθμού αντιγράφων γονιδίου λόγω πολυσωμία 7 (δηλαδή ≥3

ΚΟΑ

αντίγραφα του γονιδίου σε όλη 60 πυρήνες κυττάρων από FISH) παρατηρήθηκε στο 27% του πληθυσμού της μελέτης μας. Τα ευρήματά μας συνάδουν με μια άλλη πρόσφατη αξιολόγηση του

ΚΟΑ

ενίσχυση γονιδίου σε εντοπισμένες GC [29] και να προβλέψει ότι ένα μικρό ποσοστό των GCs οδηγούνται από

ΚΟΑ

ενίσχυση του γονιδίου.

Η ελάχιστη αποτελεσματικότητα που παρατηρείται με foretinib παρά ΡΚ και PD απόδειξη της αναστολής στόχο την περαιτέρω δείχνει ότι ΚΟΑ σηματοδότησης μπορεί να μην είναι κρίσιμη στην πλειονότητα των περιπτώσεων GC χωρίς να

ΚΟΑ

ενίσχυσης. Δοσολογία χρονοδιαγράμματα και τα επίπεδα foretinib ορού σε αυτή τη μελέτη ήταν παρόμοιες με αυτές που παρατηρούνται σε ένα ΙΙ δοκιμή Φάσης του foretinib για τη θεραπεία του θηλώδους καρκινώματος νεφρικών κυττάρων, όπου η αποτελεσματικότητα του foretinib μονοθεραπείας αναφέρθηκε [30] (και D. Bottaro, προσωπική επικοινωνία ), γεγονός που υποδηλώνει ότι οι συγκεντρώσεις στον ορό που απαιτείται για να αναστείλει ικανοποιητικά επιτεύχθηκαν foretinib στόχους RTK. PD στοιχεία δείχνουν ότι foretinib έκανε την αναστολή της φωσφορυλίωσης ΚΟΑ και κατάντη σηματοδότησης σε ασθενείς με υψηλή αρχική τιμή MET φωσφορυλίωση. Η έλλειψη ανταπόκρισης του όγκου σε αυτούς τους ασθενείς και στο μικρό αριθμό ασθενών με

ΜΕΤ-

ενισχυμένο όγκων προτείνει ότι γαστρικών όγκων εξαρτάται από ογκογόνους μονοπάτια σηματοδότησης εκτός από, ή επιπλέον προς, ΜΕΤ.

Ενίσχυση αυτό το συμπέρασμα, ταχεία και σημαντική αύξηση των συγκεντρώσεων στο πλάσμα VEGF-A παρατηρήθηκαν κατά τη διάρκεια δοσολόγησης περιόδους στην διαλείπουσα ομάδα δοσολογίας, συνεπής με την αναφερόμενη «φαινόμενο κατηγορία» των αναστολέων VEGFR μικρού μορίου [31], [32]. Αυτές οι αλλαγές VEGF στο πλάσμα υποδεικνύουν μια συστηματική αντίδραση σε φάρμακο και να προκύψει το μέγιστο σε δόσεις που παρέχουν την καλύτερη δυνατή κάλυψη της κινάσης στόχου [32], [33]. Το γεγονός ότι foretinib αναστέλλει ΚΟΑ και VEGFR με παρόμοια δραστικότητα, και ότι παρατηρήσαμε μια παρόμοια αλλαγή PD σε Smet, περαιτέρω δείχνει ότι επιτεύχθηκαν επαρκή ανασταλτική επίπεδα ΚΟΑ του foretinib. Επιπλέον, η αύξηση των VEGF-Α και Smet συσχετίζεται σημαντικά με φορτίο όγκου (Εικ. 3), γεγονός που υποδηλώνει ότι οι αλλαγές σε αυτούς τους δείκτες PD αντικατοπτρίζουν όγκων που σχετίζονται με foretinib αναστολής. Η σημαντική αρνητική διαμόρφωση των επιπέδων sVEGFR2 πλάσματος είναι επίσης συνεπής με προηγούμενη κλινική δοκιμή με έναν αναστολέα VEGFR που έδειξαν δραστικότητα κατά του όγκου [33]. Έτσι, οι σημαντικές αλλαγές στο πλάσμα VEGF-A, Smet και sVEGFR2 παρατηρείται εδώ είναι σύμφωνες με την αποτελεσματική εμπλοκή κινάσης στόχου και αναστολής. Επειδή διάμεσος όγκου SLD δεν αλλάζουν κατά τη διάρκεια της μελέτης, παραμένει ασαφές εάν οι μακροπρόθεσμες αλλαγές δείκτη παρατηρείται για Smet, VEGF-A και sVEGFR2 σχετίζονταν, εν μέρει, στην επιβάρυνση του όγκου. Η σημαντική συσχέτιση μεταξύ της εβδομάδας 8 SLD όγκου και Smet ή τα επίπεδα του VEGF-A μπορεί να προτείνει μια τέτοια σχέση και εγγυάται περαιτέρω διερεύνηση.

Είναι επίσης πιθανό ότι ογκογόνο ΚΟΑ σηματοδότησης σε GC είναι δυναμική και ότι η αναστολή ΚΟΑ μπορούν να ξεπεραστούν με ενεργοποίηση άλλων οδών σηματοδότησης. Για παράδειγμα, η ενεργοποίηση της κινάσης της έχει αποδειχθεί για να ξεπεραστούν ΚΟΑ αναστολή της κινάσης της τυροσίνης σε

ΚΟΑ

ογκογονίδιο-εθισμένος GC προκλινικά μοντέλα [34]. Αντιστρόφως, η αναστολή του EGFR μπορεί να ξεπεραστεί με την ενεργοποίηση της οδού ΚΟΑ μέσω

ΚΟΑ

ενίσχυσης [35], γεγονός που υποδηλώνει ότι αυτές οι πορείες μπορούν να πλεονασμό ενεργοποιήσετε ΑΚΤ και να προωθήσει την επιβίωση των κυττάρων. HER2 υπερεκφράζεται ή ενισχύεται στο 20% των γαστρικών όγκων και είναι προβλεπτική της αποτελεσματικότητας trastuzumab [6], προτείνοντας ότι αυτό μπορεί να παρέχει μία οδό για την επιβίωση των κυττάρων του όγκου που παρακάμπτει την αναστολή ΜΕΤ σε ένα σημαντικό ποσοστό ασθενών με GC. Για την αξιολόγηση των πιθανών μηχανισμών αντίστασης, Cepero et al. εκτίθενται τα ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα που είχαν «MET-εθισμένος» σε αυξανόμενες συγκεντρώσεις των δύο διαφορετικών αναστολέων της ΚΟΑ [36]. Κύτταρα τα οποία ανέπτυξαν ανθεκτικότητα σε αυτά τα φάρμακα που αποκτήθηκαν

MET

ενίσχυση και μετέπειτα υπερέκφραση του άγριου τύπου

KRAS

, υποδηλώνοντας ότι αυτές οι αλλαγές μπορεί να αντιπροσωπεύει έναν γενικό μηχανισμό ανθεκτικότητας [36]. Εικόνα S1. Εικόνα S3.