Αφηρημένο

Ιστορικό

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών είναι μια σημαντική αιτία θνησιμότητας τόσο στις Ηνωμένες Πολιτείες και σε όλο τον κόσμο, οφείλεται σε μεγάλο βαθμό στο υψηλό ποσοστό των περιπτώσεων που παρουσιάζουν σε προχωρημένο στάδιο, όταν επιβίωση είναι εξαιρετικά φτωχή. Η έγκαιρη ανίχνευση του επιθηλιακού καρκίνου των ωοθηκών και του ορώδες υποτύπου ειδικότερα, είναι μια πολλά υποσχόμενη στρατηγική για να σωθούν ζωές. Η χαμηλή συχνότητα του καρκίνου των ωοθηκών καθιστά την ανάπτυξη ενός επαρκώς ευαίσθητη και ειδική δοκιμασία που βασίζεται στους δείκτες του αίματος πολύ δύσκολο. Αξιολογήσαμε την απόδοση ενός συνόλου δεικτών στο αίμα υποψήφιες και συνδυασμούς αυτών των δεικτών στην ανίχνευση ορώδες καρκίνο των ωοθηκών.

Μέθοδοι και Ευρήματα

Έχουμε επιλέξει 14 δείκτες υποψήφιος αίμα ορώδες καρκίνου των ωοθηκών για τις οποίες δοκιμασίες ήταν διαθέσιμα για τη μέτρηση των επιπέδων τους στον ορό ή το πλάσμα, με βάση την ανάλυσή μας των παγκόσμιων δεδομένων γονιδιακής έκφρασης και στις αναζητήσεις της λογοτεχνίας. Αξιολογήσαμε την απόδοση των υποψηφίων αυτών των δεικτών μεμονωμένα και σε συνδυασμό με τη μέτρηση τους σε επικαλυπτόμενα σύνολα ορού (ή πλάσματος) δειγμάτων από γυναίκες με κλινικά ανιχνεύσιμα καρκίνο των ωοθηκών και γυναίκες χωρίς καρκίνο των ωοθηκών. Με βάση την ευαισθησία στην υψηλή εξειδίκευση, διαπιστώσαμε ότι 4 από τα 14 υποψήφια δείκτες-MUC 16, WFDC2, MSLN και ΜΜΡ7-εντάλματος περαιτέρω αξιολόγηση σε πολύτιμα δείγματα ορού συλλέγονται μήνες έως χρόνια πριν από την κλινική διάγνωση να αξιολογηθεί η χρησιμότητά τους στην έγκαιρη ανίχνευση. Έχουμε αναφερθεί, επίσης, διαφορές στην απόδοση αυτών των δεικτών υποψήφιος του αίματος σε όλη την ιστολογική τους τύπους επιθηλιακού καρκίνου των ωοθηκών.

Συμπεράσματα

Με τη συστηματική ανάλυση της απόδοσης των δεικτών υποψηφίου του αίματος του καρκίνου των ωοθηκών σε γυναίκες διακρίνουν με κλινικά προφανή καρκίνο των ωοθηκών από τις γυναίκες χωρίς καρκίνο των ωοθηκών, ταυτοποιήσαμε ένα σύνολο δεικτών ορού με επαρκή απόδοση για να δικαιολογήσουν τις δοκιμές για την ικανότητά τους να προσδιορίσουν τον καρκίνο των ωοθηκών μήνες έως χρόνια πριν από την κλινική διάγνωση. Έχουμε υποστήριξε για τη σημασία της ευαισθησίας στην υψηλή εξειδίκευση και μεγέθους της διαφοράς στα επίπεδα δείκτη μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων, όπως μετρήσεις απόδοσης και κατέδειξε τη σημασία της διαστρωμάτωσης αναλύσεις ιστολογικού τύπου του καρκίνου των ωοθηκών. Επίσης, συζητήσαμε για τους περιορισμούς των μελετών (όπως αυτό) που χρησιμοποιούν τα δείγματα που λαμβάνονται από συμπτωματικές γυναίκες να αξιολογήσουν το δυναμικό χρησιμότητα στην ανίχνευση της νόσου μήνες έως χρόνια πριν από την κλινική ανίχνευση

Παράθεση:. Palmer C, Duan Χ, Hawley S, Scholler Ν, Thorpe JD, Sahota RA, et al. (2008) συστηματική αξιολόγηση των Δεικτών Υποψήφιος αίματος για την ανίχνευση του καρκίνου των ωοθηκών. PLoS ONE 3 (7): e2633. doi: 10.1371 /journal.pone.0002633

Επιμέλεια: Μιχαήλ Goodyear, Πανεπιστήμιο Dalhousie του Καναδά

Ελήφθη: 6 Φλεβάρη, 2008? Αποδεκτές: 4 του Ιουνίου του 2008? Δημοσιεύθηκε: 9, Ιουλίου, 2008

Copyright: © 2008 Palmer et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Είμαστε ευγνώμων για τη γενναιόδωρη χρηματοδότηση από το Ίδρυμα Κανάρια, στον Ειρηνικό ωοθηκών Cancer Research Consortium (POCRC) /SPORE σε καρκίνο των ωοθηκών (Ρ50 CA83636, NU), ΝΙΗ /NCI Grant 1 RO1 CA75494 (QUEST), και το Ίδρυμα British Columbia Cancer. Τ.Θ. είναι μια ερευνητής του Ιατρικού Ινστιτούτου Howard Hughes. CP και SJH είναι υπάλληλοι των Καναρίων Ιδρύματος και συμμετείχαν στο σχεδιασμό της μελέτης, ανάλυσης και ερμηνείας των δεδομένων, και την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα.

Εισαγωγή

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών (EOC) έχει την υψηλότερη θνησιμότητα όλων των γυναικολογικών καρκίνων και είναι η πέμπτη συχνότερη αιτία θανάτου από καρκίνο μεταξύ των γυναικών στις Ηνωμένες Πολιτείες. Το 2007, υπήρχαν 22.430 νέα κρούσματα της EOC και κατ ‘εκτίμηση 15.280 θανάτους στις Ηνωμένες Πολιτείες [1]. Το ποσοστό πενταετούς επιβίωσης για ΕΓΚ στις ΗΠΑ είναι περίπου 45%, που οφείλεται σε μεγάλο βαθμό στο υψηλό ποσοστό των EOCs που δεν ανιχνεύονται έως ότου έχουν εξαπλωθεί έξω από την ωοθήκη [2]. Υπάρχουν τέσσερις μεγάλες ιστολογικών τύπων ΕΓΚ: ορώδες, ενδομητριοειδές, σαφείς κυττάρων, και βλεννώδες. Αυτές οι τέσσερις ιστολογικών τύπων είναι πάρα πολύ διαφορετικά, σε κλινικές και μοριακά χαρακτηριστικά. Η υδαρής υπότυπος είναι η πιο συχνά διαγιγνώσκεται και είναι υπεύθυνη για το μεγαλύτερο μέρος των ωοθηκών καρκίνο θανάτων [2].

Η έγκαιρη ανίχνευση είναι μια πολλά υποσχόμενη προσέγγιση για τη μείωση της θνησιμότητας από καρκίνους που είναι πιο συχνά διαγιγνώσκεται σε προχωρημένα στάδια τους [3]. Επειδή οι ιστολογικές μορφές του καρκίνου των ωοθηκών είναι εγγενώς διαφορετικές ασθένειες, οι βέλτιστες στρατηγικές για την έγκαιρη ανίχνευση, και οι υπολογισμοί κόστους-οφέλους για την αξιολόγηση της απόδοσής τους, μπορεί να είναι διαφορετική για κάθε υπότυπο. Το δυνητικό όφελος της έγκαιρης ανίχνευσης είναι μεγαλύτερο για ορώδης ΕΓΚ επειδή είναι η πιο κοινή και θανατηφόρο υπότυπο του καρκίνου των ωοθηκών, και ως εκ τούτου υπήρξε ο πρωταρχικός στόχος των προσπαθειών μας.

Η κλινική χρησιμότητα ενός διαγνωστικού τεστ είναι συχνά εκφραζόμενη σε θετική προγνωστική αξία (PPV) -Η κλάσμα των θετικών τεστ που είναι αληθώς θετικά. Για να δικαιολογηθεί για κλινική χρήση, ένα διαγνωστικό τεστ πρέπει να επιτευχθεί μια PPV που εξισορροπεί τα πλεονεκτήματα της έγκαιρης ανίχνευσης έναντι του κόστους της δοκιμής και του κινδύνου που σχετίζεται με ψευδώς θετικά (π.χ. άγχος, περιττή χειρουργική επέμβαση). Μια PPV τουλάχιστον 10%, που σημαίνει ότι το 10% των γυναικών που θετικοί έχουν πραγματικά την ασθένεια, έχει συχνά χρησιμοποιηθεί ως κάπως αυθαίρετη στόχος για μια δοκιμή έγκαιρης ανίχνευσης για καρκίνο των ωοθηκών [4]. Ένας σημαντικός παράγοντας στην προκλητική φύση της έγκαιρης ανίχνευσης της ορώδες ΕΓΚ είναι η χαμηλή συχνότητα εμφάνισης της νόσου στο γενικό πληθυσμό, πράγμα που σημαίνει ότι μια δοκιμασία διαλογής πρέπει να είναι πολύ συγκεκριμένη, ώστε να αποφευχθεί η υπερβολική διάγνωση και πάνω-θεραπεία. Στο γενικό πληθυσμό, για να επιτευχθεί μια PPV 10%, οι απαιτήσεις επιδόσεων είναι εξαιρετικά υψηλή: με δεδομένη την ηλικία προσαρμοσμένο ετήσιο ρυθμό εμφάνισης όλων των ΕΓΚ σε γυναίκες άνω των 50 ετών στις ΗΠΑ από 35 ανά 100.000 [5], μια δοκιμή πρέπει επιτευχθεί 99,7% ειδικότητα στο 80% ευαισθησία. Η εξειδίκευση που απαιτείται για την επιλεκτική ανίχνευση της ορώδης υποσύνολο ΕΓΚ στο γενικό πληθυσμό (η οποία έχει μια χαμηλότερη συχνότητα εμφάνισης από το παραπάνω σχήμα) θα είναι αντίστοιχα υψηλότερο. Προκειμένου να επιτευχθεί ένα PPV 10% για την ανίχνευση ορώδες ΕΓΚ μεταξύ φορείς μετάλλαξης BRCA1, μια δοκιμή πρέπει να επιτευχθεί μια απαίτηση ιδιαιτερότητα του 78,1% σε ευαισθησία 80% δίνεται η συχνότητα εμφάνισης της ορώδες καρκίνου των ωοθηκών άνω των 50 ετών σε αυτόν τον πληθυσμό είναι περίπου 3000 περιπτώσεις ανά 100000 [6]. Κάποιος πρέπει να έχουμε κατά νου, ωστόσο, ότι η επίδοση αυτή θα μπορούσε να επιτευχθεί μέσω της συνδυασμένης απόδοσης μιας εξέτασης αίματος ως μια οθόνη πρώτης γραμμής και δοκιμών παρακολούθησης απεικόνισης. Επιπλέον, το όριο για μια αποδεκτή PPV εξαρτάται από την παρέμβαση και μπορεί να είναι ότι ένα PPV λιγότερο από το 10% θα μπορούσε να είναι αποδεκτό.

Ο καλύτερος μελετηθεί δείκτης ορού για καρκίνο των ωοθηκών, CA125 (MUC 16), έχει αξιολογήθηκαν εκτενώς για τη χρησιμότητά του ως δείκτη του καρκίνου των ωοθηκών, και έχει εγκριθεί FDA για την παρακολούθηση υποτροπή. Σε αναδρομικές μελέτες, CA125 έχει δειχθεί να σηματοδοτήσει υποτροπής της νόσου κατά προσέγγιση έξι μήνες πριν από την ανάπτυξη των συμπτωμάτων [7]. Σε γυναίκες με κλινικά ανιχνεύεται σταδίου Ι EOC (διαφόρων ιστολογίες), οι προ-εγχειρητική επίπεδα CA125 στον ορό αυξημένα (& gt? 35 U /ml) σε περίπου 66% των γυναικών [8]. Στη διαμήκη κοόρτη Janus, CA125 έχει αποδειχθεί ότι περιέχουν πιθανά σήματα στο αίμα το συντομότερο πέντε έτη πριν από την κλινική ανίχνευση [9], και να έχουν μια εκτιμώμενη ευαισθησία 45% στο 93% ειδικότητα σε 1,5 έτη πριν από τη διάγνωση μεταξύ των γυναικών άνω των 50 ετών, το οποίο είναι ενθαρρυντικό, αλλά μακριά από επαρκή για κλινική χρήση [10].

τα αποτελέσματα αυτά παρέχουν ένα σημαντικό παράδειγμα της διαφοράς στην απόδοση δείκτη στην κλινική διάγνωση της νόσου σε σχέση με προ-συμπτωματική νόσο η αλήθεια στόχος μιας δοκιμής πρώιμης ανίχνευσης. Η μείωση στην απόδοση από την κλινική διάγνωση όγκων (ακόμα Στάδιο Ι) να προ-συμπτωματική νόσο δίνεται δεν είναι έκπληξη το γεγονός ότι κλινικά διαγνωστεί καρκίνοι είναι σχεδόν βέβαιο ότι σε γενικές γραμμές πολύ μεγαλύτερο από τις αρχές της δεκαετίας όγκους που χρειαζόμαστε για να ανιχνεύσει για να βελτιώσει την επιβίωση, και υπογραμμίζει τη σημασία της την αξιολόγηση των υποψήφιων δεικτών σε δείγματα από την προ-συμπτωματική γυναίκες. Δυστυχώς, λόγω των περιορισμών στη διαθεσιμότητα του δείγματος, οι περισσότερες μελέτες των επιδόσεων δείκτη (συμπεριλαμβανομένης αυτής) έχουν αξιολογηθεί απόδοση σε κλινικά δείγματα που συλλέχθηκαν από τις γυναίκες που έχουν ήδη σημάδια και τα συμπτώματα του καρκίνου.

Τα τελευταία χρόνια, η εφαρμογή της γονιδιωματικής και πρωτεομικής τεχνολογίες έχει τροφοδοτήσει μια έκρηξη στο δείκτη προσπάθειες ανακάλυψης σε διάφορες ασθένειες, συμπεριλαμβανομένου του ΕΓΚ. Μερικές μελέτες έχουν αξιολογήσει συνδυασμούς δύο ή περισσότερους δείκτες, προκειμένου να προσδιοριστούν τα σύνολα που λειτουργούν καλύτερα μαζί σε ένα πάνελ. Οι μελέτες αυτές είναι απαραίτητες, διότι είναι απίθανο ότι κάθε μεμονωμένος δείκτης θα έχουν επαρκή απόδοση στην ανίχνευση καρκίνων πριν από την ανάπτυξη των συμπτωμάτων. Ενώ η αξιολόγηση της συμβολής του υποψηφίου δείκτη σε ένα πάνελ σε δείγματα από γυναίκες με κλινικά εμφανή καρκίνο των ωοθηκών μπορεί να είναι ένα φτωχό μέσο πρόβλεψης των χρόνος και χρησιμότητα στην έγκαιρη ανίχνευση, παρέχει ένα χρήσιμο φίλτρο για να αποκτήσουν πρόσβαση σε πολύτιμες προ-κλινικά δείγματα.

Αναλάβαμε μια συστηματική αξιολόγηση των επιδόσεων των 14 υποψήφιων δεικτών με βάση το αίμα για ΕΓΚ επιλέγονται με βάση τα δεδομένα με τη γονιδιακή έκφραση και την δημοσιευμένη βιβλιογραφία. κατάλογο υποψήφιων δείκτη μας περιλαμβάνονται: MUC 16 (ΟΑ125), WFDC2 (HE4), MSLN, IGF2, CHI3L1 (YKL40), ΜΜΡ7, MIF, PRL, SPP1 (OPN), BMP7, LCN2, IL13RA2, TACSTD1 (EpCam), και ΑΜΗ. Σημειώστε ότι όλοι οι δείκτες παραπέμφθηκαν από τα σύμβολά τους γονίδιο HUGO. Αξιολογήσαμε αυτών των δεικτών, χρησιμοποιώντας κοινά σύνολα και σχολιασμένη περιπτώσεις EOC και τα δείγματα ορού ελέγχου, συμπεριλαμβανομένων των γυναικών με υγιή ωοθήκες καθώς και γυναίκες με καλοήθεις και κακοήθεις παθήσεις των ωοθηκών. Ο στόχος μας ήταν να χρησιμοποιήσει τις επιδόσεις σε αυτές κλινικά διαγνωσμένων κρουσμάτων ως φίλτρο για να εκτιμήσει ποιες υποψήφιες δείκτες δικαιολογείται περαιτέρω αξιολόγηση σε πολύτιμα δείγματα ορού που λαμβάνονται μήνες έως χρόνια πριν από τη διάγνωση του καρκίνου των ωοθηκών. Χρησιμοποιήσαμε επίσης αυτά τα δεδομένα για τη διεξαγωγή αναλύσεων των πινάκων δείκτη (α ονομάζεται ομάδα των δεικτών) και σύνθετων δεικτών (οι οποίες περιλαμβάνουν συγκεκριμένη ταξινόμηση ή κανόνα συνδυασμού), καθώς και να διερευνήσει την επίδραση της διαστρωμάτωσης αναλύσεις από ιστολογικό τύπο.

Αποτελέσματα

δείκτη επιλογής

Έχουμε επιλέξει υποψήφιος δείκτες χρησιμοποιώντας στοιχεία έκφρασης γονιδίου για την ταυτοποίηση γονιδίων υψηλής έκφρασης σε καρκίνο των ωοθηκών, αλλά όχι στο υπόλοιπο σώμα, όπως περιγράφεται στο Υλικά και Μέθοδοι. Χρησιμοποιώντας αυτή τη στρατηγική, επιλέχθηκαν οι ακόλουθες υποψήφιες δείκτες με εμπορικά διαθέσιμες ELISA ή άλλες δημοσιευμένες αναλύσεις για τη δοκιμή: MSLN, WFDC2, IGF2, CHI3L1, ΜΜΡ7, BMP7, LCN2, TACSTD1. Πολλοί από αυτούς τους δείκτες έχουν προηγουμένως αναφερθεί ότι είναι αυξημένα σε γυναίκες με καρκίνο των ωοθηκών [11] – [22]. Αρκετές άλλες υποψήφιες δείκτες δοκιμάστηκαν επίσης με βάση την βιβλιογραφία ή /και ευκαιρίες συνεργασίας: MUC 16, IL13RA2, PRL, MIF, SPP1 και ΑΜΗ [8], [23] – [25]

Η αξιολόγηση των επιμέρους δείκτες

για να βελτιστοποιηθεί η ανάλυση των συνδυασμών δεικτών, αξιολογήσαμε κάθε υποψήφιο δείκτη σε κοινά σύνολα και σχολιασμένη περιπτώσεις EOC και τα δείγματα ορού ελέγχου, συμπεριλαμβανομένων των γυναικών με υγιή ωοθήκες, καθώς και γυναίκες με καλοήθεις και κακοήθεις παθήσεις των ωοθηκών. Τα 14 υποψήφια δείκτες για ΕΓΚ που περιγράφονται παραπάνω αξιολογήθηκαν με σταδιακό τρόπο, χρησιμοποιώντας τρία επικαλυπτόμενα σύνολα ορού της αυξανόμενης πολυπλοκότητας: το σύνολο φιλτραρίσματος, Mini-Triage σύνολο, και Triage που (Πίνακας 1). Η σύνθεση καθενός από τα σύνολα ορού σε σχέση με το στάδιο και ιστολογία του όγκου περιγράφεται στον Πίνακα 2.

Η

Το πρώτο βήμα της αξιολόγησης υποψήφιων δείκτη ήταν η σειρά Φιλτράρισμα ορών, μία σειρά μειγμάτων σε διάφορες αναλογίες των συγκεντρωμένων ΕΓΚ ορών από ασθενείς EOC και δεξαμενές ορού ελέγχου από εθελοντές που δεν είχαν ΕΓΚ. Η δοκιμή αυτή χρησίμευσε ως πρώτη κοπή για την εξάλειψη των δοκιμασιών που δεν δείχνουν μια σταθερή διαφορά μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων με την ελάχιστη χρήση των δειγμάτων περιπτώσεων και ελέγχου. Αυτό το φίλτρο ήταν ουσιαστικά ένας ενδογενής πρότυπη καμπύλη? αποτυχία να δείξει μια γραμμική σχέση μεταξύ υπόθεση για τον έλεγχο λόγου και σήματος ELISA ανέφεραν είτε ότι τα επίπεδα δείκτη ήταν περίπου το ίδιο στις περισσότερες περιπτώσεις όπως σε ελέγχους ή ότι η δοκιμασία δεν ήταν αρκετά ευαίσθητη για να ανιχνεύσει μια μικρή αύξηση (ή μείωση) των επιπέδων δείκτης στο περιπτώσεις. Οκτώ από τα 11 υποψήφια δείκτες που εξετάστηκαν στο σύνολο φιλτραρίσματος έδειξαν μία γραμμική σχέση μεταξύ του λόγου του ΕΓΚ ορού ασθενούς για τον έλεγχο του ορού στα δείγματα και το σήμα που μετράται στον αντίστοιχο προσδιορισμό ELISA, ενώ τρία από τα υποψήφια δεικτών (TACSTD1, ΑΜΗ, IL13RA2 ) δεν έδειξε καμία σταθερή σχέση ανάμεσα σε αυτές τις τιμές και δεν αξιολογήθηκαν περαιτέρω.

Οι οκτώ δείκτες που πέρασαν ανάλυση στο σύνολο φιλτραρίσματος, καθώς και δύο προηγουμένως επικυρωθεί δείκτες EOC (MUC 16 και MSLN [17], [26] ), ελέγχθηκαν περαιτέρω στο σύνολο ορό Mini-Triage (n = 71). Τέσσερις δείκτες (PRL, SPP1, BMP7, LCN2) έδειξε κακή απόδοση (ευαισθησία & lt? 10% σε 98% ειδικότητα και την περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC) & lt? 0,70) στο Mini-Triage σετ και δεν επιδιωχθεί περαιτέρω. Οι υπόλοιπες έξι υποψήφιες δείκτες, καθώς προηγουμένως επικυρωθεί δείκτη EOC WFDC2 [12], [27], δοκιμάστηκαν στο μεγαλύτερο σύνολο Triage ορού (n = 214). Δείκτες που εξετάσαμε σε αυτό επεκτάθηκε σύνολο δεδομένων αξιολογήθηκαν από μια σειρά κριτηρίων, μεταξύ των οποίων η ευαισθησία σε% ειδικότητα 98, AUC, και η μέση κανονικοποιημένη επίπεδα δείκτη ορού σε συγκεκριμένα υποσύνολα των περιπτώσεων και των ελέγχων (Πίνακας 3). Οι γνωστές δείκτες MUC 16, WFDC2, και MSLN έδειξε την καλύτερη απόδοση, σύμφωνα με% ειδικότητα 98 για όλες τις περιπτώσεις έναντι όλων των ελέγχων, με ευαισθησίες 70%, 61%, και 30%, αντίστοιχα. Αυτές οι τρεις δείκτες έδειξαν επίσης την καλύτερη απόδοση όταν μόνο περιπτώσεις ορώδους ιστολογία θεωρήθηκαν (ευαισθησίες στο 98% ειδικότητα 86%, 75% και 45%, αντίστοιχα). Για κάθε δείκτη, θα υπολογίζεται επίσης την απόσταση μεταξύ ΕΓΚ ασθενών και υγιών μαρτύρων (οι γυναίκες που εγγράφονται στο προοπτικές μελέτες διαλογής που παρέμειναν χωρίς καρκίνο των ωοθηκών για δύο τουλάχιστον έτη μετά τη συλλογή του ορού.) Από την ομαλοποίηση όλες τις μετρήσεις με τα μέσα επίπεδα σε αυτά τα υγιή δείγματα (βλ Στατιστικές Μέθοδοι). Με αυτή την κανονικοποίηση, το μέσο επίπεδο μεταξύ της ομάδας υπόθεση αντιπροσώπευε μια «διακριτική απόσταση» μέτρο που αντικατοπτρίζεται σε ποιο βαθμό η μέση περίπτωση ήταν από το μέσο όρο υγιή ελέγχου. MUC 16 και WFDC2 ήταν σαφώς ανώτερη, σύμφωνα με αυτή τη μέτρηση, με μέση κανονικοποιημένη συγκεντρώσεις δείκτη στον ορό σε περιπτώσεις (σε σχέση με τους υγιείς μάρτυρες) 6,7 και 10,0, αντίστοιχα. Συγκριτικά, οι άλλοι δείκτες όλα δέχεται μικρότερη από 2,5 (Σχήμα 1 και Πίνακας 3).

ύψη Bar δείχνουν το μέσο όρο των κανονικοποιημένων τιμών ενός συγκεκριμένου δείκτη στην καθορισμένη υποσύνολο των περιπτώσεων ή ελέγχων. Οι μπάρες σφάλματος αντιπροσωπεύουν το διάστημα εμπιστοσύνης 95% συνδέεται με την μέση τιμή. Ο λογάριθμος των συγκεντρώσεων στον ορό δείκτη κανονικοποιήθηκαν σε τυπικές αποκλίσεις από το μέσο όρο των αντίστοιχων μετρήσεων σε υγιείς μάρτυρες.

Η

Αξιολόγηση των δεικτών συνδυασμού

Για τους επτά δείκτες αξιολογούνται το σύνολο Triage, ελέγξαμε όλους τους δείκτες σε συνδυασμούς των δύο ή τρεις, και συγκρίνεται άτομα χωρίς καρκίνο σε όλους τους ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών ή ορώδης περιπτώσεις μόνο. Η καλύτερη απόδοση συνδυασμός δύο-δείκτη σε κάθε ανάλυση ήταν MUC 16 και WFDC2 (Πίνακας 4). Αυτός ο συνδυασμός των δύο δεικτών απέδωσε ευαισθησίες σε 98% ειδικότητα του 72% για όλες τις περιπτώσεις και το 86% μόνο για ορώδης περιπτώσεις, σε σύγκριση με ευαισθησίες σε 98% ειδικότητα για MUC 16 και μόνο το 70% (σε όλες τις περιπτώσεις) και 86% (ορώδες περιπτώσεις). Ωστόσο, η απόδοση του καλύτερου συνδυασμού δύο δείκτη (MUC 16 και WFDC2) δεν ήταν σημαντικά διαφορετικό από τον καλύτερο μονό δείκτη (MUC 16) όπως μετράται με pAUC (από ειδικότητα = 100% για ειδικότητα = 90%) μεταξύ τον καλύτερο μονό δείκτη και η καλύτερο συνδυασμό των δύο δεικτών. Αξιολόγηση όλων των δυνητικών συνδυασμών τριών δείκτη (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται) απέτυχε επίσης να δείξει οποιαδήποτε βελτίωση στην απόδοση, είτε την ευαισθησία σε 98% ειδικότητας ή AUC.

Η

Η αξιολόγηση των επιδόσεων στο πλαίσιο του ιστολογικού τύπου και το στάδιο

για να διερευνήσουν πώς απόδοση δείκτη μεταβάλλεται με το ιστολογικό τύπο και το στάδιο, υπολογίσαμε τον αριθμό και το ποσοστό των υποθέσεων που έχουν ταξινομηθεί σωστά από τον δείκτη συνδυασμού MUC 16 /WFDC2 από την ιστολογία και το στάδιο, για όλες τις περιπτώσεις σε σχέση με όλους τους ελέγχους (υγιείς μάρτυρες, χειρουργική Benigns, και χειρουργικές Normals-βλέπε κλινικά δείγματα αίματος) στο Triage που έχει, χρησιμοποιώντας 98% ειδικότητα για αυτό το δείκτη συνδυασμού. Η απόδοση του δείκτη συνδυασμού MUC 16 /WFDC2 σαφώς μεταβάλλεται με ιστολογία του καρκίνου των ωοθηκών: το ποσοστό των περιπτώσεων που ταξινομούνται σωστά ήταν 86% (38/44) για ορώδης περιπτώσεις, το 83% (5/6) για ενδομητριοειδές περιπτώσεις, το 17% (1 /6) για βλεννώδες περιπτώσεις και 0% (0/5) για σαφείς περιπτώσεις κυττάρων (Πίνακας 5). Άλλοι δείκτες που χρησιμοποιείται είτε μόνο, σε ζεύγη, ή συνδυασμούς των τριών, έδειξε παρομοίως κακές επιδόσεις σε σαφή κυττάρων και βλεννώδες περιπτώσεις (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα).

Η

απόδοση δείκτης εμφανίστηκε επίσης να ποικίλουν ανάλογα με το στάδιο-το MUC 16 /WFDC2 συνδυασμό δείκτη αναγνωριστεί σωστά το 39% (9/23) του σταδίου Ι περιπτώσεις, το 75% (3/4) των περιπτώσεων Στάδιο ΙΙ, 87% (34/39) των περιπτώσεων σταδίου ΙΙΙ και 100% (5/5) της στάδιο IV. Ωστόσο, τα αποτελέσματα αυτά συγχέονται με διαφορετικό συνδυασμό ιστολογίες απέναντι στάδια. Στο σύνολο Triage, η πλειοψηφία του σταδίου ΙΙΙ και IV περιπτώσεις ήταν ορώδες καρκίνους (35/44), ενώ η πλειοψηφία των περιπτώσεων σταδίου Ι και ΙΙ ήταν μη-ορώδες καρκίνους (ενδομητριοειδές, βλεννώδες, σαφείς κυττάρων και άλλων) (18/27 ). Αυτή η σύνθεση του δείγματος οφείλεται στο γεγονός ότι ορώδες καρκίνοι είναι πιο πιθανό να εντοπιστούν σε μεταγενέστερο στάδιο, ενώ το αντίθετο ισχύει για ενδομητριοειδές, σαφείς κυττάρων και βλεννώδες καρκίνων.

Συζήτηση

Εμείς αξιολογήθηκαν 14 δεικτών έγκαιρης ανίχνευσης υποψήφιος για ΕΓΚ χρησιμοποιώντας τρία επικαλυπτόμενα σύνολα δειγμάτων ορού που συλλέγονται από γυναίκες με κλινικά διαγνωσμένη EOC και του καρκίνου χωρίς γυναίκες με και χωρίς γυναικολογικές παθήσεις. Δείκτες αξιολογήθηκαν σε διαδοχικά μεγαλύτερα σύνολα ορού ανάλογα με την απόδοσή τους στο προηγούμενο βήμα. Για τους δείκτες που αποφοίτησε με το μεγαλύτερο σύνολο του δείγματος, αξιολογήσαμε την απόδοση του κάθε δείκτη ξεχωριστά και σε συνδυασμούς δύο ή τριών για την ικανότητά τους να ανιχνεύουν κλινικά διαγνωσμένο καρκίνο των ωοθηκών.

Τρεις δοκιμασίες (TACSTD1, ΑΜΗ, IL13RA2) απέτυχε να ανιχνεύσει το αντίστοιχο δείκτη στην συγκεντρωμένων ορών από ΕΓΚ περιπτώσεις ή συγκεντρωμένων ορών ελέγχου. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι αν υπάρχει μια διαφορά μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων για αυτών των δεικτών θα πρέπει να είναι πολύ μικρό και θα χρειαστεί μια περισσότερο ευαίσθητη δοκιμασία για την ανίχνευση της διαφοράς. Τέσσερις δείκτες: PRL, SPP1, BMP7 και LCN2, πέρασε το σύνολο φιλτραρίσματος (πισίνες των περιπτώσεων και ελέγχων), αλλά είχαν κακή ευαισθησία και ειδικότητα όταν αξιολογούνται σε ατομική δείγματα υπόθεση και ελέγχου. Μια περαιτέρω αξιολόγηση της PRL σε ένα σύνολο που περιέχει ορό περισσότερες χειρουργικές έλεγχοι αποκάλυψαν ότι τα αυξημένα επίπεδα PRL στον ορό σχετίζονται με τις συνθήκες συλλογής αίματος αντί να νοσηρή κατάσταση [28]. Αυτές οι παρατηρήσεις υπογραμμίζουν τη σημασία της καλά ελεγχόμενη και καλά τεκμηριωμένες διαδικασίες συλλογής και προσεκτική επιλογή των ελέγχων, καθώς ορισμένες ομάδες εξακολουθούν να αναφέρουν ότι η προλακτίνη είναι ένας χρήσιμος δείκτης του καρκίνου των ωοθηκών χωρίς επαρκή προσοχή στο ταίριασμα των ελέγχων [29].

Βρήκαμε ότι τα επίπεδα δείκτη ποικίλλει σημαντικά μεταξύ των ιστολογικών τύπων και κλινικά στάδια του καρκίνου των ωοθηκών. Όλα των δεικτών και των συνδυασμών σε αυτή την ανάλυση είχαν υψηλότερη ευαισθησία στο% ειδικότητα 98 όταν ελήφθησαν υπόψη μόνο οι ορώδες EOC περιπτώσεις, σε σύγκριση με όλες τις περιπτώσεις EOC. Η διαφορά αυτή φαίνεται να οφείλεται στην κακή απόδοση των υποψηφίων δεικτών μας, με σαφή κυττάρων και βλεννώδες περιπτώσεις. Από την άποψη της ευαισθησίας στο 98% ειδικότητα, τα καλύτερα δείκτες απόδοσης για την ανίχνευση κλινικά εμφανής ορώδες EOC ήταν MUC 16, WFDC2 και MSLN, με ευαισθησίες στο 98% ειδικότητα 86%, 75% και 45%, αντίστοιχα, στην Triage σετ δειγμάτων ορού. Κανένας συνδυασμός δεικτών παρέχεται μια σημαντικά καλύτερη ευαισθησία στο% ειδικότητα 98 από την καλύτερη ατομική δείκτη, MUC 16, όσον αφορά τη διάκριση όλων των καρκίνων των ωοθηκών ή ορώδες καρκίνους των ωοθηκών από τους ελέγχους. Η υψηλή θετική συσχέτιση (εύρος: 0,54 – 0,75) ανάμεσα στις τρεις καλύτερες επιδόσεις ενιαίο δείκτες συνέβαλαν στην έλλειψη σημαντική βελτίωση στην ευαισθησία όταν συνδυάζει δείκτες στη μελέτη αυτή

προσέγγιση ανάλυση των δεδομένων μας διέφεραν από εκείνες στις περισσότερες προηγούμενες. μελέτες σε διάφορους σημαντικούς τρόπους. Πρώτον, στρωματοποιημένη τα αποτελέσματά μας με ιστολογικό τύπο, με έμφαση στην ορώδες ΕΓΚ. Ωοθηκών καρκίνους διαφορετικών ιστολογικών τύπων είναι καλά γνωστό ότι έχουν πολύ διαφορετικές κλινικές και μοριακά χαρακτηριστικά, ωστόσο είναι συχνά λανθασμένα ομαδοποιούνται σε αναλύσεις των επιδόσεων δείκτη, προφανώς για λόγους μεγαλύτερης μεγέθους του δείγματος. Εστιάσαμε αναλύσεις μας για το ορώδες υπότυπο του ΕΓΚ, διότι η έγκαιρη ανίχνευση του υψηλής ποιότητας ορώδες καρκίνους έχει το μεγαλύτερο δυναμικό για να σώσει ζωές. Η απόφαση για τη διαστρωμάτωση υποστηρίχθηκε από το εύρημα μας ότι οι δείκτες που εξετάζονται εδώ εκτελούνται με συνέπεια καλύτερα στο ορώδες και ενδομητριοειδές περιπτώσεις από ό, τι σε σαφή κυττάρων και βλεννώδες περιπτώσεις (ακόμη και στο στάδιο Ι μόνο περιπτώσεις), και, κατά συνέπεια, ότι η απόδοση δείκτης ήταν κάτω σε ένα ενοποιημένο περίπτωση που σε σχέση με το ορώδες περιπτώσεις μόνο. Δεύτερον, έχουμε επιλέξει να μην διαστρωμάτωση την ανάλυσή μας από το στάδιο της νόσου, καθώς δεν είμαστε σίγουροι ότι η κλινική φάσης Ι /ΙΙ υψηλής ποιότητας ορώδες καρκίνος είναι ένα χρήσιμο μοντέλο για τα κλινικά απόκρυφες πρόδρομες ουσίες για θανατηφόρο καρκίνους των ωοθηκών, που είναι οι πραγματικοί στόχοι της έγκαιρης ανίχνευσης . Επιπλέον, η κατανομή των ιστολογίες μεταβάλλεται με το στάδιο, διαψεύδοντας ερμηνεία του σταδίου-συγκεκριμένα αποτελέσματα. Τρίτον, επέλεξε να χρησιμοποιήσει μη συμβατικά μέτρα της απόδοσης δείκτη. Η χαμηλή επικράτηση του ΕΓΚ απαιτεί μια εξαιρετικά ειδικό δείκτη για να μειωθεί ο κίνδυνος των ψευδών θετικών σε υγιείς γυναίκες, έτσι ώστε να αποφευχθεί η άσκοπη αγωνία, διαγνωστική παρακολούθηση και τη χειρουργική επέμβαση. Αντίθετα, η συμβατική ανάλυση AUC συνοψίζει αδιακρίτως την απόδοση ενός δείκτη σε όλα τα επίπεδα της ειδικότητας. Παρά το γεγονός ότι έχουμε συμπεριλάβει τιμές AUC σε αυτήν την έκθεση, θεωρούμε την ευαισθησία της δοκιμασίας σε 98% ειδικότητα για να είναι πιο εξέχον μέτρο της απόδοσής της. Αναγνωρίζουμε, ωστόσο, ότι ακόμη και με εξαιρετική ευαισθησία, ειδικότητα 98% εξακολουθεί να μην είναι επαρκής για ένα τεστ πρώιμης ανίχνευσης σε ένα πληθυσμό κανονικό κινδύνου.

Τέλος, συμπεριλάβαμε ένα μέτρο του μεγέθους της διαφοράς στο σήμα μεταξύ του ΕΓΚ ασθενείς και προφανώς υγιείς εθελοντές. Πιστεύουμε ότι αυτή η μέτρηση είναι χρήσιμη για να βοηθήσει να προβλέψουμε την αξία ενός δείκτη για την έγκαιρη ανίχνευση κατά τη χρήση κλινικώς ανιχνεύεται περιπτώσεις επειδή υψηλό σήμα κατά τη στιγμή της συμπτώματα μπορεί να είναι συνεπής με διακριτό σήμα νωρίτερα στην πορεία της νόσου, όταν το φορτίο του όγκου είναι χαμηλότερη και σήμα είναι πιθανώς χαμηλότερη. MUC 16 και WFDC2 ήταν τα μόνα δείκτες που έδειξαν μεγάλες αυξήσεις στις περιπτώσεις σε σχέση με τους υγιείς μάρτυρες (6,7 και 10,0 μονάδες διακρίσεις απόσταση, αντίστοιχα). Δείκτες έχουν την ίδια ευαισθησία και ειδικότητα μπορεί να έχουν πολύ διαφορετικές μέτρα που εισάγουν διακρίσεις απόσταση, και εκείνοι με μεγαλύτερη απόσταση μπορεί να είναι καλύτεροι υποψήφιοι για εφαρμογές έγκαιρη ανίχνευση, διότι μπορεί να διατηρήσει τις επιδόσεις τους καλύτερα με μικρότερα βάρη όγκου όπως τα επίπεδα δείκτης εξασθενεί προς τα επίπεδα ελέγχου.

Ένας σημαντικός παράγοντας για να εξετάσει στην ερμηνεία των αποτελεσμάτων μας και άλλα παρομοίως σχεδιασμένες μελέτες είναι ότι αυτοί οι δείκτες αξιολογήθηκαν με βάση την ικανότητά τους να διακρίνουν μεταξύ δειγμάτων ορού από γυναίκες με και χωρίς κλινικά εμφανή καρκίνο των ωοθηκών. Είναι εξαιρετικά σημαντικό να έχουμε κατά νου ότι η αξία ενός δείκτη για την έγκαιρη ανίχνευση καθορίζεται από την ικανότητά της να ανιχνεύει τον καρκίνο των ωοθηκών πριν από την ανάπτυξη της κλινικά σημεία ή συμπτώματα (και, επιπλέον, πριν από την εξέλιξη σε προχωρημένο στάδιο). Έτσι, μέχρι την απόδοση ενός υποψηφίου δείκτη αξιολογείται με δείγματα από τις γυναίκες με ασυμπτωματική, πρώιμο στάδιο καρκίνου, την αξία της ως δείκτης έγκαιρης ανίχνευσης παραμένει υποθετική, και οι ερευνητές πρέπει να είναι προσεκτικοί να μην υπερεκτιμούν τις απαιτήσεις τους όταν δοκιμασίες έχουν δοκιμαστεί μόνο σε δείγματα από γυναίκες με κλινικά ανιχνεύσιμης νόσου [29]. Επιπλέον, η σχέση μεταξύ της απόδοσης δείκτη σε δείγματα που συλλέχθηκαν κατά τη στιγμή της διάγνωσης με την απόδοση κατά τη διάρκεια της παράθυρο ευκαιρίας για την έγκαιρη ανίχνευση δεν είναι καλά κατανοητή, και μπορεί να διαφέρουν σημαντικά μεταξύ των δεικτών.

Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται εδώ είναι ενθαρρυντικά, αλλά πολύ περισσότερη δουλειά που πρέπει να γίνει πριν θα ξέρουμε αν είμαστε στο φάσμα ενός αποτελεσματικού τεστ έγκαιρης ανίχνευσης για ΕΓΚ. Συγκεκριμένα, θα είναι απαραίτητο να αξιολογηθεί δείκτες σε δείγματα ορού που λαμβάνονται πριν από την ανίχνευση της νόσου, σε δείγματα από γυναίκες με κλινικά απόκρυφο, εντοπισμένο ορώδες καρκίνους. Δείγματα που συλλέχθηκαν πριν από τη διάγνωση της νόσου είναι περιορισμένος και πολύτιμος πόρος, και τα δείγματα από γυναίκες με ανυποψίαστο, απόκρυφη, εντοπισμένη καρκίνων (π.χ., ανακαλύφθηκε σε κίνδυνο μείωσης σαλπιγγοωοθηκεκτομή) είναι ακόμη πιο πολύτιμο, τόσο προσεκτική επιλογή των δεικτών αντάξια της αξιολόγησης Αυτά τα δείγματα είναι κρίσιμη. Δεδομένης της αβεβαιότητας σχέση μεταξύ της απόδοσης δείκτη πριν από τη διάγνωση και την απόδοση κατά ή μετά τη διάγνωση του καρκίνου των ωοθηκών, πιστεύουμε ότι οι δείκτες που αποδεικνύουν επαρκή απόδοση μεμονωμένα, αλλά δεν συμπληρώνουν MUC 16 στην κλινική (at-διάγνωση) τα δείγματα δεν πρέπει να αποκλείονται από την περαιτέρω αξιολόγηση. Ως εκ τούτου, προτίθεται να προχωρήσει σε αξιολόγηση των MUC 16, WFDC2, MSLN και ΜΜΡ7, τα οποία έχουν ευαισθησία & gt? 30% σε 98% ειδικότητα στην ανίχνευση κλινικά εμφανής ορώδες καρκίνους, ξεκινώντας με την ανάλυση των δειγμάτων ορού που συλλέγονται μήνες έως χρόνια πριν από τη διάγνωση ορώδους καρκίνων των ωοθηκών.

Η μελλοντική εργασία προς την έγκαιρη διάγνωση του καρκίνου των ωοθηκών ορώδες μπορούν επίσης να επωφεληθούν από διογκωμένη προσπάθειες ανακάλυψης. Πρόσφατες μελέτες της πρώιμης φυσικής ιστορίας του ΕΓΚ δείχνουν ότι ορισμένες περιπτώσεις ορώδες ΕΓΚ μπορεί να προέρχονται από τις σάλπιγγες (FT). Σε γυναίκες με βλαστικής γραμμής μετάλλαξη στο BRCA 1 ή BRCA2, απόκρυφη κακοήθεια ορώδους ιστολογία, ενδοεπιθηλιακή καρκίνωμα ή δυσπλασία απαντάται συχνά στο κροσσωτό άκρο του FT κατά το χρόνο της χειρουργικής επέμβασης προφυλακτική [30], [31]. Στην πραγματικότητα, προφυλακτική αφαίρεση των σαλπίγγων και των ωοθηκών στις γυναίκες σε γενετικά υψηλό κίνδυνο ΕΓΚ είναι μια δοκιμασμένη στρατηγική για τη μείωση της θνησιμότητας από καρκίνο των ωοθηκών. Υπό το φως των ευρημάτων αυτών, μπορεί να είναι χρήσιμο να εξετάσουμε τα γονίδια υψηλής και συγκεκριμένα εκφράζεται σε πρώιμο στάδιο ορώδες σάλπιγγα καρκίνων σωλήνα ως πιθανοί δείκτες της ορώδες «ωοθηκών» του καρκίνου (ενώ οι προηγούμενες προσπάθειες εστιάζονται σε προχωρημένο στάδιο όγκους των ωοθηκών). Επιπλέον, οι εξελίξεις στην πρωτεομική τεχνολογίες έχουν καταστήσει δυνατό να γίνει σε βάθος προφίλ των πρωτεϊνών του ορού, η οποία, αν εφαρμοστεί σε προ-διαγνωστικά δείγματα θα μπορούσε να αποδειχθεί ένα αποτελεσματικό μέσο για τον εντοπισμό σχετικών δεικτών. Οι συνεχιζόμενες προσπάθειες με τη χρήση στοχευμένων ανακάλυψη, στοχαστικός συνδυασμός των δεικτών, και διαστρωμάτωση των διαλογής πληθυσμού από τον κίνδυνο του καρκίνου μπορεί ακόμη να οδηγήσει σε μια αποτελεσματική τεστ έγκαιρης ανίχνευσης για τον καρκίνο των ωοθηκών.

Υλικά και Μέθοδοι

επιλογή δείκτης

Ο στόχος της επιλογής δείκτη μας ήταν να προσδιοριστούν τα γονίδια των οποίων τα προϊόντα πρωτεΐνης βρίσκονται σταθερά σε υψηλότερα επίπεδα στο αίμα των ασθενών με πρώιμο στάδιο ορώδες καρκίνου των ωοθηκών σε σχέση με υγιή άτομα. γενική στρατηγική μας για την επίτευξη αυτού του στόχου ήταν να προσδιοριστούν τα γονίδια που εκφράζονται σε υψηλά ορώδες καρκίνους των ωοθηκών, αλλά ελάχιστα εκφράζονται στους περισσότερους φυσιολογικούς ιστούς. Εμείς ευνοείται επιπλέον γονίδια που είναι γνωστό ότι κωδικοποιούν εκκρινόμενες πρωτεΐνες. Τα δεδομένα γονιδιακής έκφρασης χρησιμοποιούνται για την εκτίμηση της γονιδιακής έκφρασης σε όγκους των ωοθηκών περιλαμβάνεται προφίλ μικροσυστοιχιών cDNA των 72 όγκους των ωοθηκών, εκ των οποίων οι περισσότεροι ήταν αργά όγκοι στάδιο της ορώδες ιστολογία (χειρόγραφο σε προετοιμασία). Τα στοιχεία για την έκφραση του γονιδίου (όπως αντικατοπτρίζεται από τα επίπεδα mRNA) σε φυσιολογικούς ιστούς ελήφθησαν από μια δημοσιευμένη μελέτη 115 δειγμάτων ανθρώπινου ιστού που αντιπροσωπεύουν 35 διαφορετικούς τύπους ιστών, χρησιμοποιώντας μικροσυστοιχίες cDNA που αντιπροσωπεύει περίπου 26.000 διαφορετικά ανθρώπινα γονίδια [32]. Με βάση αυτά τα κριτήρια, επιλέχθηκαν οι ακόλουθες υποψήφιες δείκτες με τις διαθέσιμες δοκιμασίες ορού για τη δοκιμή: WFDC2, MSLN, IGF2, CHI3L1, ΜΜΡ7, BMP7, LCN2, TACSTD1. Αρκετοί άλλοι δείκτες δοκιμάστηκαν επίσης με βάση την βιβλιογραφία ή /και ευκαιρίες συνεργασίας:. MUC 16, IL13RA2, PRL, MIF, SPP1 και ΑΜΗ [8], [23] – [25]

Κλινικά δείγματα αίματος

οι συμμετέχοντες στη μελέτη είχαν προσληφθεί από την 1η Ιουνίου 1998 και 1ης Ιουλίου 2002 έως την υποστήριξη των πρωτοκόλλων του Ειρηνικού ωοθηκών Cancer Research Consortium (POCRC) από γιατρούς στο Pacific Γυναικολογία Specialists, σουηδική Ιατρικό Κέντρο, Providence Ιατρικό Κέντρο, το Πανεπιστήμιο της Ουάσιγκτον /Σιάτλ Καρκίνου φροντίδα της Συμμαχίας, και Virginia Mason Ιατρικό Κέντρο. Περιπτώσεις ορίστηκαν ως έχουσες διηθητικό καρκίνωμα επιθηλιακών επιβεβαιώνεται από τυποποιημένες ανασκόπηση των ιατρικών φακέλων και την εξέταση παθολόγος παραφίνης-ενσωματωμένο ιστού για ιστολογική εξέταση του όγκου. στάδιο ΦΥΓΩ και ιστολογία των περιπτώσεων συνοψίζονται στον Πίνακα 2. Αίμα επίσης ελήφθη από τρεις κατηγορίες ελέγχων: i) «Υγιείς έλεγχοι» -apparently υγιείς γυναίκες που εγγράφονται στο προοπτικές μελέτες διαλογής που παρέμειναν χωρίς καρκίνο των ωοθηκών για τουλάχιστον δύο χρόνια μετά συλλογή ορού? ii) «Χειρουργικές Benigns» αθλητριών με χειρουργικά επιβεβαίωσε καλοήθη παθολογία των ωοθηκών ii) «Χειρουργικές Normals» αθλητριών που υποβλήθηκε σε χειρουργική επέμβαση, αλλά δεν παθολογία των ωοθηκών εντοπίστηκε (Πίνακας 1). Κάθε ασθενής που παρέχονται γραπτή συγκατάθεση και ιατρικά αρχεία μορφή απελευθέρωσης που εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας FHCRC (αριθμός αρχείο IR # 4771). Χειρουργικά δείγματα λήφθηκαν πριν από οποιαδήποτε θεραπεία ή εγχείρηση (αλλά μετά τη χορήγηση της αναισθησίας). Όλα τα δείγματα ήταν ανώνυμα για το απόρρητο του ασθενούς.

Το αίμα συντάχθηκε σε τρία ή τέσσερα 10.0 ml SST (διαχωριστή ορού) σωληνάρια συλλογής αίματος Vacutainer (Fisher Scientific Cat. # 02-683-98, Mfg. Αρ .: 367985 ) καθώς και μία λεβάντα-top EDTA Vacutainer σωλήνα συλλογής αίματος (Fisher Scientific Cat. # 02-657-32). Αίμα υπέστη επεξεργασία και τοποθετήθηκε στον καταψύκτη εντός 4 ωρών του χρόνου συλλογής. Όλοι οι σωλήνες περιδινήθηκαν σε ένα ισορροπημένο σε φυγοκέντρηση σε 1200 χ g για 10 λεπτά προς διαχωρισμό του ορού από τα κυτταρικά συστατικά των κυττάρων από το υγρό. Ορός από τους σωλήνες SST και πλάσματος από το σωλήνα EDTA μοιράστηκαν σε σωλήνες μικροφυγοκέντρησης σε 1 ml ανά κλάσμα και αποθηκεύθηκε στους -80 ° C. Όλες οι δείκτες αξιολογήθηκαν με ορό με την εξαίρεση της SPP1 (οστεοποντίνης), η οποία αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας EDTA πλάσμα σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (βλέπε πίνακα 6).

Η

Δείκτες αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας τρεις επικαλυπτόμενες σειρές δειγμάτων αίματος,