Αφηρημένο

Αυτή η μελέτη είχε ως στόχο να προσδιοριστεί η συσχέτιση μεταξύ της HIF-1α και η έκφραση του miR-27a και να αξιολογηθεί η επίδραση της αναστολής της έκφρασης του HIF-1α στην έκφραση του miR-27a και της αντίστασης φαρμάκου σε γαστρικό καρκίνο ( GC). Στην παρούσα μελέτη, σε πραγματικό χρόνο-PCR και κηλίδος Western διεξήχθησαν για την ανίχνευση της έκφρασης του HIF-1α σε ιστούς GC και κυτταρικές σειρές. Στη συνέχεια, τα κύτταρα OCUM-2MD3 /L-ΟΗΡ επιμολύνθηκαν με HIF-1α-siRNA, ένα μιμητικό miR-27a ή ροϋΝΑ-HIF-1α, και η επιβίωση των κυττάρων προσδιορίστηκε μέσω της δοκιμασίας ΜΤΤ. Η έκφραση του HIF-1α, miR-27a, και MDR-σχετικών γονιδίων μετρήθηκε μέσω πραγματικό χρόνο-PCR και Western blot. Chip και διπλή δοκιμασίες λουσιφεράσης δραστικότητα διεξήχθησαν για να αξιολογηθεί η μεταγραφική ρύθμιση του HIF-1α και miR-27a. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν ότι η επιμόλυνση με HIF-1α-siRNA μείωσε σημαντικά τα επίπεδα του miR-27α, με αποτέλεσμα δραματικά αυξημένη αναστολή του ρυθμού πολλαπλασιασμού των κυττάρων OCUM-2MD3 /L-ΟΗΡ. Σε σύγκριση με μη-επιμολυσμένα κύτταρα, το ποσοστό επιβίωσης ήταν σημαντικά μειωμένη στα κύτταρα επιμολυσμένα με HIF-1α-siRNA μετά τη θεραπεία με L-ΟΗΡ. Το ποσοστό επιβίωσης των κυττάρων ήταν σημαντικά αυξημένη σε κύτταρα επιμολυσμένα με το μιμητικό miR-27a OCUM-2MD3 /L-ΟΗΡ, ενώ HIF-1α υπερέκφραση δεν οδηγεί σε καμία σαφή μεταβολή στην επιβίωση των κυττάρων. Τα αποτελέσματα της δοκιμασίας διπλής δραστικότητας λουσιφεράσης έδειξαν ότι HIF-1α ενισχύει την μεταγραφική δραστικότητα του προαγωγού miR27a σε κύτταρα επιμολυσμένα με ένα πλασμίδιο ανταποκριτή που περιέχει την ανοδική περιοχή προαγωγέα του miR27a μαζί με pcDNA-HIF-1α. ανάλυση ChIP πρότεινε ότι HIF-1α συνδέεται άμεσα με την περιοχή του υποκινητή του miR27a. Αναστολή της HIF-1α ή έκφραση miR27a μειώθηκε MDR1 /P-gp, LRP, και η έκφραση Bcl-2 σε κύτταρα L-ΟΗΡ OCUM-2MD3 /. Έτσι, βρήκαμε ότι HIF-1α συνδέεται στενά με MDR σε GC και ότι HIF-1α μπορεί να καταστείλει MDR1 /P-gp, LRP και την έκφραση Bcl-2 αναστέλλοντας την έκφραση του miR-27a

Παράθεση:. Zhao Q, Li Υ, Tan Bb, Fan Lq, Yang Pg, Tian Υ (2015) HIF-1α Προκαλεί πολυφαρμακευτική αντίσταση σε καρκινικά κύτταρα του γαστρικού επάγοντας MiR-27α. PLoS ONE 10 (8): e0132746. doi: 10.1371 /journal.pone.0132746

Επιμέλεια: Jin Ερ Cheng, H.Lee Moffitt Cancer Center & amp? Research Institute, Ηνωμένες Πολιτείες