Αφηρημένο

Εισαγωγή

Αρκετές μελέτες έχουν αναφέρει μια υψηλή συχνότητα θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς (PTC) σε ασθενείς με ακρομεγαλία. Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να προσδιοριστεί ο επιπολασμός και προγνωστικούς παράγοντες του καρκίνου του θυρεοειδούς σε ασθενείς με ακρομεγαλία και να διερευνηθεί η συχνότητα του

BRAF

μετάλλαξη V600E σε ασθενείς PTC με και χωρίς μεγαλακρία.

Υλικά και Μέθοδοι

Πραγματοποιήσαμε μια αναδρομική μελέτη 60 ασθενών με ακρομεγαλία. Θυρεοειδής υπερηχογράφημα (US) και US-καθοδηγούμενη παρακέντηση με λεπτή βελόνα πραγματοποιήθηκαν σε οζίδια με υπερηχογραφικά ευρήματα της κακοήθειας. Επιλέξαμε 16 ασθενείς με μη ακρομεγαλία PTC ως ομάδα ελέγχου. Η

BRAF

V600E μετάλλαξη αναλύθηκε σε παραφίνη-embedded χειρουργικά δείγματα του PTC με πραγματικού χρόνου αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης, και δείγματα όγκων από ασθενείς με PTC βάφτηκαν ανοσοϊστοχημικώς με ένα αντίσωμα κατά αυξητικού παράγοντα που μοιάζει με ινσουλίνη -1 β υποδοχέα (IGF-1Rβ).

Αποτελέσματα

καρκίνος του θυρεοειδούς βρέθηκε σε 15 (25,0%) ασθενείς. Δεν παρατηρήθηκαν διαφορές στην ηλικία, το φύλο, την αρχική της αυξητικής ορμόνης (GH) και του IGF-1 ποσοστιαία του ανώτερου φυσιολογικού ορίου τιμών ή τρόπους θεραπείας μεταξύ των ασθενών με και χωρίς PTC. Η ακρομεγαλία ήταν ενεργό σε 12 από 15 ασθενείς κατά τον χρόνο της διάγνωσης PTC? ανεξέλεγκτη ακρομεγαλία είχαν σημαντικά υψηλότερη συχνότητα στην ομάδα PTC (60%) από ό, τι στο μη-PTC ομάδα (28,9%) (

σ

= 0,030). Η

BRAF

V600E μετάλλαξη ήταν παρούσα σε μόλις 9,1% (1/11) των ασθενών PTC με ακρομεγαλία, αν και 62,5% (10/16) των ασθενών της ομάδας ελέγχου με PTC είχαν τη μετάλλαξη (

p

= 0,007). IGF-1Rβ ανοσοχρώση έδειξαν χρώση μέτρια έως ισχυρή σε όλα τα κακοήθη κύτταρα PTC σε ασθενείς με και χωρίς ακρομεγαλία. Σημαντικά λιγότερο χρώση για τον IGF-1Rβ παρατηρήθηκε σε κανονική παρακείμενους ιστούς του θυρεοειδούς ασθενών PTC με ακρομεγαλία σε σύγκριση με εκείνους χωρίς (

σ

= 0,014).

Συμπέρασμα

Ο επιπολασμός του PTC σε ακρομεγαλία ασθενείς ήταν υψηλό (25%). Μια ανεξέλεγκτη υπερκινητικά άξονα GH-IGF-1 μπορεί να παίζει έναν κυρίαρχο ρόλο στην ανάπτυξη της PTC και όχι το

BRAF

μετάλλαξη V600E σε ασθενείς με ακρομεγαλία

Παράθεση:. Κιμ Χονγκ Κονγκ, Lee JS, Πάρκο ΜΗ, Cho JS, Yoon JH, Kim SJ, et al. (2014) Ογκογένεση της θηλώδες θυρεοειδούς καρκίνος δεν είναι

BRAF

εξαρτώμενη σε ασθενείς με ακρομεγαλία. PLoS ONE 9 (10): e110241. doi: 10.1371 /journal.pone.0110241

Επιμέλεια: Rafael Rosell, καταλανικά Ινστιτούτο Ογκολογίας, Ισπανία

Ελήφθη: 16 Ιουλ 2014? Αποδεκτές: 12 Σεπτεμβρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 17 του Οκτώβρη του 2014

Copyright: © 2014 Kim et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:.. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία χρηματοδότηση ή υποστήριξη στην έκθεση

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Μεγαλακρία είναι μια χρόνια νόσος που προκαλείται από την υπερβολική έκκριση της αυξητικής ορμόνης (GH) και η ινσουλίνη αυξητικός παράγοντας-1 (IGF-1). IGF-1 προάγει μίτωση και καταστέλλει την απόπτωση των κυττάρων με σύνδεση προς τον IGF-1 β υποδοχέα (IGF-1Rβ), και πιστεύεται ότι είναι υπεύθυνη για τον αυξημένο κίνδυνο εμφάνισης κακοηθειών, κυρίως του παχέος εντέρου, του μαστού, του προστάτη, και αιματολογικές [1 ], [2].

Αρκετές μελέτες έχουν αναφέρει μια υψηλή συχνότητα του καρκίνου του θυρεοειδούς κυρίως θηλώδους καρκίνου του θυρεοειδούς (PTC) σε ασθενείς με ακρομεγαλία. Η αναφερόμενη επιπολασμός είναι 4,7 έως 11%, που είναι πολύ υψηλότερη από ότι στο γενικό πληθυσμό [3] – [6]. Ωστόσο, η πραγματική συχνότητα εμφάνισης του καρκίνου του θυρεοειδούς σε ασθενείς με ακρομεγαλία και η επίδραση των δραστικών ακρομεγαλίας σχετικά με την ανάπτυξη του καρκίνου του θυρεοειδούς είναι άγνωστη λόγω της σχετικής σπανιότητας της πάθησης [7].

Πρόσφατες μελέτες έχουν αναφέρει ότι η σημειακή μετάλλαξη στο

BRAF

συχνά ανιχνεύονται σε ασθενείς PTC [8], και η επικράτηση του

BRAF

μετάλλαξη V600E είναι υψηλότερη στην Κορέα (50-83%) από ό, τι στη Δυτική χώρες [9] – [11]. Η

BRAF

V600E μετάλλαξη έχει δειχθεί ότι προκαλεί συνεχή και ανεξέλεγκτη ενεργοποίηση της οδού της κινάσης, και συσχετίζεται με πτωχή πρόγνωση για PTC [12]. Ωστόσο, δεν είναι γνωστό εάν η

BRAF

μετάλλαξη σχετίζεται με PTC σε ασθενείς με ακρομεγαλία.

Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να προσδιοριστεί ο επιπολασμός και προγνωστικούς παράγοντες του καρκίνου του θυρεοειδούς σε ασθενείς με ακρομεγαλία και να διερευνηθεί η συχνότητα του

BRAF

V600E μετάλλαξη σε ασθενείς PTC με και χωρίς μεγαλακρία.

ασθενείς και Μέθοδοι

ασθενείς

Τριάντα νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με ακρομεγαλία παραπέμφθηκαν Chonnam Εθνικό Πανεπιστήμιο Hwasun Νοσοκομείο μεταξύ Απριλίου 2004 και Απριλίου 2013. Εκτός από δύο ασθενείς που παρουσιάζονται με ανεγχείρητο όγκους, τους ασθενείς (n = 28) υποβλήθηκε σε χειρουργική επέμβαση υπόφυσης στο κέντρο μας. Επιπλέον, 30 ασθενείς που είχαν προηγουμένως υποβληθεί σε θεραπεία για ακρομεγαλία παραπέμφθηκαν για μετεγχειρητική παρακολούθηση κατά την ίδια χρονική περίοδο. Έτσι, 60 ασθενείς αναδρομικά, και κλινικές παραμέτρους που σχετίζονται με ακρομεγαλία, όπως η ηλικία κατά τη διάγνωση, εκκρίνουν τύπο όγκου, τροπικότητα θεραπεία, άλλες συνυπάρχουσες ασθένειες, και την κατάσταση της νόσου κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης εξετάστηκαν. Θυρεοειδής υπερηχογραφικά (ΗΠΑ) εικόνες και αναφορές επίσης αναθεωρηθεί. Η διάγνωση της ακρομεγαλίας και ορισμός της ενεργού νόσου βασίστηκαν σε κλινικά χαρακτηριστικά, η έλλειψη της καταστολής GH & lt? 1,0 ng /mL μετά από 75 g από του στόματος φορτίο γλυκόζης, και αυξημένα νηστείας επίπεδο IGF-1 (πάνω από το ηλικία και το φύλο συμφωνημένα αναφορά φάσμα) [13]. IGF-1 επίπεδα εκφράστηκαν ως ποσοστά του άνω ορίου της ηλικίας προσαρμοσμένη φυσιολογικά επίπεδα (% ULN). Έχουμε επιλέξει τυχαία 16 ασθενείς με μη-ακρομεγαλία PTC οι οποίοι υποβλήθηκαν σε χειρουργική επέμβαση θυρεοειδούς στο νοσοκομείο μας μεταξύ Μαΐου και Αυγούστου 2010 ως έλεγχος. Αυτό το πρωτόκολλο της μελέτης εξετάστηκε και εγκρίθηκε από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review του Chonnam Εθνικού Πανεπιστημίου Hwasun Νοσοκομείο, Hwasun, την Κορέα. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες.

ΗΠΑ-καθοδηγούμενη λεπτή βελόνη κυτταρολογική εξέταση (US-FNAC) Θυρεοειδούς ΗΠΑ και

θυρεοειδούς ΗΠΑ διεξήχθη χρησιμοποιώντας 10-13 MHz γραμμικό καθετήρα (Logiq9 , η GE Medical Systems, Milwaukee, WI, USA ή Acuson Antares, η Siemens Medical Solutions, Malvern, ΡΑ, ΗΠΑ) με ένα ενιαίο ενδοκρινολόγο. ΗΠΑ-FNAC διεξήχθη σε θυρεοειδούς οζίδια & gt? 1 cm σε διάμετρο ή οζίδια που παρουσιάζουν ένα από τα υπερηχογραφικά ευρήματα της κακοήθειας, συμπεριλαμβανομένων εκείνων με αισθητή υποηχογένεια, μικρό- ή μακρο-αποτιτανώσεις, ένα ψηλότερο-από ό, τι σε επίπεδο σχήμα, ή ακανθωτά περιθώρια κέρδους [14], ανεξαρτήτως μεγέθους.

Α. Μετάλλαξη θετική. Β άγριου τύπου.

Η

Βιοχημικές μετρήσεις

Όλα τα δείγματα αίματος συλλέχθηκαν μετά από ολονύκτια νηστεία. Ορός GH (φυσιολογικό εύρος, 0-10 ng /ml) και IGF-1 επίπεδα μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας ανοσοραδιομετρική δοκιμασία (HGH-CTK IRMA, DiaSorin, Sallugia, Ιταλία) και μια ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας (CLIA, IGF-1 IMMULITE, DPC, Los Angeles, CA, USA), αντίστοιχα.

απομόνωση του DNA και την ανίχνευση του

BRAF

V600E μετάλλαξη

δείγματα καρκίνου του θυρεοειδούς δόθηκαν από το Εθνικό Πανεπιστήμιο Chonnam Hwasun Νοσοκομείο Εθνικό Βιοτράπεζα της Κορέας, μέλος της Εθνικής Βιοτράπεζας της Κορέας, η οποία υποστηρίζεται από το Υπουργείο Υγείας, Πρόνοιας και Οικογενειακών Υποθέσεων. Ένα τμήμα εγκλεισμένα σε παραφίνη 10 μm ελήφθη από κάθε δείγμα από ασθενείς με και χωρίς ακρομεγαλία και υποβλήθηκε σε εκχύλιση γενωμικού DNA χρησιμοποιώντας το QIAamp DNA MINIKIT (Qiagen, Chatsworth, CA, USA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Real-time PCR πραγματοποιήθηκε με τη χρήση του LightCycler 480 (Roche Diagnostics, Indianapolis, ΙΝ, USA) υπό τις ακόλουθες συνθήκες: ένας κύκλος 2 λεπτών στους 50 ° C, ακολουθούμενο από 10 min στους 95 ° C για έναν κύκλο, τότε 40 κύκλους των 15 s στους 95 ° C, και τέλος 45 s στους 60 ° C. Η Ρεάλ-Q κιτ ανίχνευσης BRAF V600E (Biosewoom, Σεούλ, Κορέα) χρησιμοποιήθηκε για την αντίδραση PCR. Η Ρεάλ-Q BRAF Detection Kit είναι ένα έτοιμο προς χρήση κιτ για την ανίχνευση του

BRAF

V600E (1799T & gt? Α) σωματική μετάλλαξη του

BRAF

ογκογονιδίου σε ένα φόντο του άγριου τύπου γονιδιωματικού DNA χρησιμοποιώντας πολλαπλή PCR δοκιμασία πραγματικού χρόνου με βάση το σύστημα ανιχνευτή TaqMan MGB. Το κιτ παρέχει δύο δοκιμασίες. Η

BRAF

δοκιμή μετάλλαξης επισημαίνεται με VIC (καθορίζουν ακρωνύμιο), και περιέχει ένα αλληλόμορφο ειδικές πρόσθιου εκκινητή για τη διάκριση της μετάλλαξης V600E. Η δοκιμασία εσωτερικός έλεγχος, επισημασμένα με 6-καρβοξυφλουορεσκεΐνη (FAM), χρησιμοποιείται για την εκτίμηση απομόνωση νουκλεϊκών οξέων και πιθανή αναστολή της PCR. Το κιτ ενισχύει μια περιοχή στο εξόνιο 8 του

BRAF

γονίδιο. Το αστάρι και ο ανιχνευτής έχουν σχεδιαστεί για να αποφευχθεί η

BRAF

πολυμορφισμούς. Για κλινικά δείγματα, η παρουσία της μετάλλαξης BRAF V600E προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας τις οδηγίες για την Ρεάλ-Q BRAF V600E Detection Kit. Το κατώφλι κύκλου (Ct) για RQ PCR ορίστηκε ως ο κύκλος στον οποίο ανιχνεύθηκε μια σημαντική αύξηση στο φθορισμό. Αν παρατηρήθηκε ταυτόχρονα το σήμα FAM (δοκιμασία ελέγχου), τότε οι τιμές ΔCt υπολογίστηκαν αφαιρώντας την τιμή Ct ελέγχου από την τιμή Ct μετάλλαξης. Δείγματα με ΔCt πάνω από 13 κύκλους θεωρήθηκαν αρνητικά για το

BRAF

V600E μετάλλαξη σύμφωνα με τις οδηγίες για την Ρεάλ-Q BRAF V600E Detection Kit.

Η ανοσοϊστοχημεία

θυρεοειδούς επιλεγμένα δείγματα καρκίνου του βασίστηκαν σε μια ιστολογική ανάλυση από έναν παθολόγο. Φυσιολογικούς ιστούς του θυρεοειδούς ελήφθησαν από ιστολογικά φυσιολογικό περιοχές που γειτνιάζουν με καρκίνους του θυρεοειδούς. Αυτοματοποιημένη ανοσοϊστοχημική χρώση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το σύστημα Bond-max (Leica Microsystems, Bannockburn, IL, USA), η οποία μπορεί να επεξεργαστεί μέχρι 30 διαφάνειες κάθε φορά. Τα πλακίδια που φέρουν τις τομές ιστών κόπηκαν από τεμάχια ιστού εγκλεισμένα σε παραφίνη σημάνθηκαν και ξηραίνονται για 1 ώρα στους 60 ° C. Αυτές οι πλάκες στη συνέχεια καλύπτονται από Bond Οικουμενική Covertiles (Leica Microsystems) και τοποθετείται μέσα στο Bond-max όργανο. Όλες οι επόμενες βαθμίδες διεξήχθησαν με το όργανο σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (Leica Microsystems). Το αντίσωμα που χρησιμοποιήθηκε ήταν πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού έναντι ανθρώπινου IGF-IRβ (1:1200, Cell Signaling Technology, Danvers, ΜΑ, USA). Το σύμπλοκο αντιγόνου-αντισώματος οπτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας διαμινοβενζιδίνη ως χρωμογόνο. Τα πλακίδια με αιματοξυλίνη Mayer, η πλύθηκαν σε γλυκό νερό, αφυδατωμένα, και τοποθετημένα. Χρησιμοποιήσαμε ένα ημι-ποσοτική προσέγγιση για την αξιολόγηση IGF-1Rβ, με βάση την ένταση χρώσης (SI) και το ποσοστό των θετικών κυττάρων (ΡΡ), για τη δημιουργία μιας ανοσο-αντιδραστικά βαθμολογία (IRS) ως ακολούθως: IRS = SI × PP όπως περιγράφηκε προηγουμένως [15]. Ένταση χρώσης βαθμολογήθηκε ως εξής: 0 = καμία χρώση, 1 = ασθενώς θετική, 2 = μέτρια θετική, και 3 = ισχυρά θετική. Βαθμολόγηση του πρότυπο χρώσης βασίστηκε στο ποσοστό των θετικών κυττάρων όγκου: 0 = 0-5%, 1 = 6-25%, 2 = 26-50%, 3 = 51-100%. Έτσι, η βαθμολογία IRS κυμάνθηκε 0-9 (0 ήταν Βαθμολογία 0, 1-3 ήταν Βαθμού 1, 4-6 ήταν Βαθμού 2, και 7-9 ήταν Βαθμού 3).

Η στατιστική ανάλυση

οι διαφορές σε μη κατηγορηματική και κατηγορηματική παράγοντες μεταξύ των ασθενών με και χωρίς καρκίνο του θυρεοειδούς συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας το Mann-Whitney

U-test

και χ

2 ή ακριβές τεστ του Fisher, αντίστοιχα. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση SPSS 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Μια τιμή του ρ & lt? 0,05 λήφθηκε για να δείξει τη στατιστική σημαντικότητα

Αποτελέσματα

Κλινικά στοιχεία του πληθυσμού της μελέτης

Τα κλινικά χαρακτηριστικά και συνυπάρχουν κακοήθειες των 60 ασθενών που περιγράφονται στο. Πίνακας 1. Πενήντα οκτώ ασθενείς υποβλήθηκαν σε χειρουργική επέμβαση υπόφυσης, και ένα ανάλογο σωματοστατίνης ή ακτινοθεραπεία προστέθηκε ως επικουρική θεραπεία σε 27 και 10 ασθενείς, αντίστοιχα. Κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης (μέση, 84,8 μήνες), 22 ασθενείς (36,7%) παρουσίασαν συνεχή απόδειξη της ανεξέλεγκτης ακρομεγαλία παρά την πρόσθετη ιατρική θεραπεία. Κακοήθεια βρέθηκε σε 21 ασθενείς (35,0%). PTC βρέθηκε σε 15 ασθενείς (25,0%), γαστρικού καρκίνου σε ένα (1.7%), ο καρκίνος του παχέος εντέρου σε πέντε (8,3%), ο καρκίνος του μαστού σε δύο (3,3%), ο καρκίνος των νεφρικών κυττάρων σε ένα (1.7%), καρκίνου του ενδομητρίου σε ένα (1.7%), και καρκίνο του παγκρέατος σε ένα (1.7%) (Πίνακας 1). Σε ασθενείς με PTC, πέντε ασθενείς είχαν άλλους καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου των νεφρικών κυττάρων, καρκίνο του ενδομητρίου, τον καρκίνο του παγκρέατος και δύο με καρκίνο του παχέος εντέρου.

Η

αξιολόγηση του θυρεοειδούς

Όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν θυρεοειδούς ΗΠΑ, εκτός από τρεις που είχαν ιστορικό θυρεοειδεκτομή για PTC σε άλλα νοσοκομεία. Σαράντα δύο από τους υπόλοιπους 57 ασθενείς είχαν όζους του θυρεοειδούς (εννέα είχαν μοναχική, 33 είχαν πολλαπλές), δίνοντας μια επικράτηση σημείο του 75,0% (45/60), συμπεριλαμβανομένων των ασθενών που υποβλήθηκαν σε thyroidectomies. ΗΠΑ-FNAC πραγματοποιήθηκε σε 36 ασθενείς με όζους του θυρεοειδούς? τέσσερις είχαν ανεπαρκή δείγματα, 20 ήταν καλοήθεις κυτταρολογική εξέταση, και 12 είχαν PTC. Δεν παρατηρήθηκαν αποτελέσματα της ατυπία απροσδιόριστης σημασίας ή θυλακιώδες νεόπλασμα. Οι ανεπαρκείς ατμοσφαιρικός οζίδια ήταν ένα ομοιογενές isoechoic μοτίβο, η οποία ήταν σύμφωνη με καλοήθη φύση? ως εκ τούτου, δεν απαιτείται επιπλέον FNAC υλοποιήθηκε. Όλοι οι ασθενείς με PTC για κυτταρολογική εξέταση υποβλήθηκαν σε θυρεοειδεκτομή (11 στο νοσοκομείο μας και ένα στο εξωτερικό νοσοκομείο), και ιστολογικές εξετάσεις αποκάλυψαν PTC σε όλες τις περιπτώσεις. Μεταξύ αυτών, ένας ασθενής είχε δύο θηλώδη και θυλακιώδη καρκίνο. Οι όγκοι ήταν 0,2 έως 2,1 cm σε μέγεθος, και 58.3% (7/12) του PTC ήταν μικροθηλωματώδης καρκίνο του θυρεοειδούς. στάδια του όγκου ήταν 10 ασθενείς στο στάδιο Ι, και δύο ασθενείς στο στάδιο ΙΙΙ (Πίνακας 2).

Η

Κλινική συγκρίσεις των ασθενών με και χωρίς καρκίνο του θυρεοειδούς

συμπεριλαμβανομένων των ασθενών που υποβλήθηκαν σε thyroidectomies σε άλλα νοσοκομεία, 25,0% όλων των ασθενών (15/60) είχαν διαγνωστεί με PTC. Θυρεοειδής ΗΠΑ διεξήχθη σε 37 ασθενείς (61,7%) στην μεγαλακρία διάγνωση, και οι υπόλοιποι 23 ασθενείς υποβλήθηκαν σε 8,2 ± 6,5 έτη (εύρος, 1 έως 23,7 έτη) US μετά την μεγαλακρία διάγνωση. Δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές στην ηλικία, το φύλο, μέθοδος θεραπείας, ή GH ή IGF-1 επίπεδα στο αρχικό διάγνωση της μεγαλακρίας μεταξύ των ασθενών με PTC και εκείνων χωρίς (Πίνακας 3). Σε 23 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε καθυστερημένη ΗΠΑ, ανεξέλεγκτη ακρομεγαλία συνέβη σε 85.7% (6/7) των ασθενών στην ομάδα PTC, και 37,5% των ασθενών (6/16) στην μη-PTC ομάδα (

p

= 0,045). Κατά τη διάρκεια της τελευταίας συνέχεια, η ομάδα PTC έδειξαν σημαντικά υψηλότερη επικράτηση της ανεξέλεγκτης ακρομεγαλία από ότι στην ομάδα μη-PTC (

σ

= 0,030) (Πίνακας 3). Η ακρομεγαλία ήταν ενεργό σε 12 από τους 15 ασθενείς κατά το χρόνο της διάγνωσης PTC (Πίνακας 2). Μετά από μια μέση παρακολούθηση 83,4 ± 70,2 μήνες (εύρος, 4-246 μήνες), όλοι οι ασθενείς ήταν ζωντανοί και PTC-free. Τα χαρακτηριστικά των 15 ασθενών με PTC συνοψίζονται στον Πίνακα 2.

Η

ανάλυση RQ PCR για το

BRAF

μετάλλαξη V600E (Σχήμα 1)

μεταξύ 11 οζίδια επιβεβαιώθηκε ιστολογικά ως PTC στο νοσοκομείο μας, ένας (9,1%) ήταν θετικά για το

BRAF

μετάλλαξη V600E. Ο ασθενής με το

BRAF

μετάλλαξη V600E που αρχικά παρουσιάζονται με διαταραχή της μνήμης και ο υπερθυρεοειδισμός στη συνέχεια διαγνώστηκε (αυξημένα επίπεδα ελεύθερης Τ4 με ακατάλληλο αυξημένα επίπεδα TSH). Ο ασθενής είχε διαγνωστεί με μια αδένωμα TSH που εκκρίνουν GH και περίσσεια. Στα μη ακρομεγαλία ασθενείς με PTC ως ομάδα ελέγχου, 62,5% (10/16) των οζιδίων είχε το

BRAF

μετάλλαξη V600E, η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από ακρομεγαλία ασθενείς με PTC (

p

= 0,007) (Πίνακας 4).

Η

Η ανοσοϊστοχημική χρώση για τον IGF-1Rβ

IGF-1Rβ αποτελέσματα ανοσοϊστοχημική χρώση ελήφθησαν από δείγματα 10 ακρομεγαλία PTC και 16 μη ακρομεγαλία δείγματα PTC. Ανοσοϊστοχημική χρώση του ιστού του όγκου είχαν σημαντικά υψηλότερο IRS σε σύγκριση με το φυσιολογικό γειτονικό ιστό και στις δύο ομάδες (acromgalic ομάδα,

ρ

& lt? 0.001 και μη ακρομεγαλία ομάδα,

σ

= 0,015). Το πρότυπο του IGF-1Rβ ανοσοχρώση ήταν μέτρια έως ισχυρή (IRS≥3) σε όλες τις περιπτώσεις όγκων σε τόσο η ακρομεγαλία και μη-ακρομεγαλία ομάδες (Σχήμα 2Α και C). Δεν παρατηρήθηκε διαφορά στην IRS της έκφρασης IGF-1Rβ παρατηρήθηκε μεταξύ των ασθενών με και χωρίς μεγαλακρία (Πίνακας 4). Σε αντίθεση, ανοσοϊστοχημική χρώση σε γειτονικό φυσιολογικό ιστό έδειξε μία σημαντικά χαμηλότερη IRS σε ασθενείς με ακρομεγαλία σε σύγκριση με εκείνους χωρίς (

σ

= 0,014). Παρακείμενο φυσιολογικό ιστό ήταν βαθμός 0 σε 90% (9/10) των περιπτώσεων με ακρομεγαλία (Σχήμα 2Β) και 25,0% (4/16) των περιπτώσεων χωρίς ακρομεγαλίας. Μια τάξη των 2 ή 3 σε παρακείμενο φυσιολογικό ιστό δεν παρατηρήθηκε σε περιπτώσεις με μεγαλακρία, αλλά βρέθηκε σε τέσσερις περιπτώσεις (25%) χωρίς μεγαλακρία (Σχήμα 2D).

A. παράγοντα-1 Βαθμού 2 ινσουλινόμορφου αυξητικού υποδοχέα (IGF-1Rβ) χρώση στο 100% των καρκινικών κυττάρων (IRS = 6) σε ασθενείς με ακρομεγαλία (× 400)? Β IGF-1Rβ χρώση απούσα σε παρακείμενο φυσιολογικό ιστό (IRS = 0) στους ίδιους ασθενείς με ακρομεγαλία όπως στο Α (χ 100)? Γ Βαθμού 3 χρώση IGF-1Rβ στο 100% των καρκινικών κυττάρων (IRS = 9) σε ασθενείς χωρίς ακρομεγαλία (χ 200)? Δ Βαθμού 2 IGF-1Rβ χρώση σε 100% της παρακείμενο φυσιολογικό ιστό (IRS = 6) στους ίδιους ασθενείς χωρίς ακρομεγαλία, όπως στη C (× 200).

Η

Συζήτηση

Βρήκαμε οζίδια του θυρεοειδούς και καρκίνων σε 75,0% (45/60) και 25,0% (15/60) των ασθενών με ακρομεγαλία, αντίστοιχα. Αυτή η επικράτηση του καρκίνου του θυρεοειδούς είναι υψηλότερη από ότι στο γενικό πληθυσμό (2,5% στην Κορέα) [16]. Ανεξέλεγκτη ακρομεγαλία ήταν σημαντικά συχνότερες στην ομάδα PTC σε σχέση με την ομάδα που δεν PTC. Μόνο ένας ασθενής (9,1%) με PTCs ήταν θετική για το

BRAF

μετάλλαξη V600E. IGF-1Rβ έντονα εκφράζεται σε ιστό όγκου αλλά η έκφραση ήταν χαμηλότερη σε γειτονικό φυσιολογικό ιστό. Μια ανεξέλεγκτη υπερκινητικά άξονα GH-IGF-1 και όχι το

BRAF

V600E μετάλλαξη μπορεί να διαδραματίσει κυρίαρχο ρόλο στην ανάπτυξη της PTC σε ασθενείς με ακρομεγαλία. Αυτή είναι η πρώτη έκθεση της επικράτησης του

BRAF

V600E μετάλλαξη και το πρότυπο χρώσης IGF-1Rβ σε ασθενείς με ακρομεγαλία PTC.

Ο θυρεοειδής αδένας είναι η πιο κοινή ιστοσελίδα της όλες οι πρωτογενείς ενδοκρινείς καρκίνους παγκοσμίως [17] και είναι τώρα η πιο κοινή μορφή καρκίνου στις γυναίκες της Κορέας [18]. Η

BRAF

ισομορφή του

RAF

έχει ενοχοποιηθεί για την παθογένεση της PTC, και

RAF

πρωτεΐνες είναι σερίνης-θρεονίνης που ενεργοποιούν το

RAF /MEK /ΜΑΡΚ

μονοπάτι σηματοδότησης. Η T1799A μετάλλαξη του

BRAF

γονίδιο, το οποίο αρχικά είχε βρεθεί στο & gt? 50% των κακοηθών μελανωμάτων και ένα μικρότερο ποσοστό των καρκίνων του παχέος εντέρου, εμφανίζεται στο 50 με 83% της PTC στην Κορέα, όπου η κατανάλωση ιωδίου είναι πολύ υψηλή [9] – [11]. Η

BRAF

μετάλλαξη V600E ξεκινά θυρεοειδούς μετασχηματισμό θυλακιώδη κύτταρα, προκαλώντας ογκογένεση σε PTC με συχνές τοπικές εισβολή και ως εκ τούτου θεωρείται ως ένα κακό προγνωστικό παράγοντα και ενός διαγνωστικού δείκτη για PTC [12]. Στη μελέτη μας, η επικράτηση του

BRAF

V600E μετάλλαξη σε ασθενείς με μη-ακρομεγαλία PTC ήταν 62,5%, το οποίο ήταν παρόμοιο με άλλα Κορέας εκθέσεις. Ωστόσο, μόνο ένας ασθενής (9,1%) με ακρομεγαλία PTC είχε το

BRAF

μετάλλαξη, η οποία ήταν σημαντικά χαμηλότερη συχνότητα από ότι σε ασθενείς PTC χωρίς ακρομεγαλία. Ως εκ τούτου, η

BRAF

μετάλλαξη V600E μπορεί να μην είναι ο κύριος μηχανισμός της PTC καρκινογένεσης σε ασθενείς με ακρομεγαλία.

Παρά το γεγονός ότι εξακολουθεί να υπάρχει αντιπαράθεση σχετικά με το γενικό κίνδυνο καρκίνου [19], τα υψηλότερα ποσοστά καρκίνου του παχέος εντέρου καρκίνου σε ασθενείς με ακρομεγαλία σε σύγκριση με τον γενικό πληθυσμό έχουν αναφερθεί [20], [21]. IGF-1 ασκεί αντι-αποπτωτικά αποτελέσματα και προωθεί επιθηλιακού πολλαπλασιασμού, το οποίο είναι ένα σημαντικό πρώτο βήμα στην πορεία προς σχηματισμό αδενώματος. Ο αυξημένος κίνδυνος των προκαρκινικών πολυπόδων του κόλου σε ένα ποσοστό 24-38% έχει αναφερθεί και υπάρχει ισχυρή απόδειξη για αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου σε ασθενείς με ακρομεγαλία? Ως εκ τούτου, η διαλογή με κολονοσκόπηση συνιστάται [20] – [22]. Στη μελέτη μας, καρκίνου του παχέος εντέρου βρέθηκε σε πέντε ασθενείς (10,6%) και ήταν η δεύτερη πιο συχνή καρκίνου.

IGF-1 είναι ένας σημαντικός παράγοντας για την αντιγραφή των φυσιολογικών κυττάρων του θυρεοειδούς θυλακιώδη και μειώνοντας την απόπτωση [23]. Αυξημένη IGF-1 διέγερση μπορεί να αυξήσει την καρκινογένεση και να ενεργούν με άλλους έναρξη παράγοντες για την προώθηση της εξέλιξης του καρκίνου του θυρεοειδούς από μια απόκρυφη σε κλινικά σημαντικό στάδιο [7], [24]. Σε μια πρόσφατη μετα-ανάλυση από Wolinski et al., Καρκίνο του θυρεοειδούς συμβαίνουν πολύ πιο συχνά σε ακρομεγαλία ασθενείς από ό, τι στο γενικό πληθυσμό (OD = 7,5, RR7.2) [6], και μια πρόσφατη μελέτη ασθενών-μαρτύρων έδειξαν ότι ο καρκίνος του θυρεοειδούς έχει α 10.21 αυξημένο κίνδυνο σε ασθενείς με ακρομεγαλία σε σύγκριση με εκείνη στην ομάδα ελέγχου [25]. Στη μελέτη μας, η επικράτηση της PTC ήταν 25% σε ασθενείς με ακρομεγαλία, και την ανεξέλεγκτη μεγαλακρία ήταν σημαντικά υψηλότερη σε συχνότητα στην ομάδα PTC. Πρόσφατες μελέτες έχουν αναφέρει ότι συχνότητα εμφάνισης καρκίνου και θνησιμότητας του καρκίνου που σχετίζονται είναι αυξημένα σε ασθενείς με επίμονη ενεργή νόσο [19], [26]. Αυτά τα αποτελέσματα προτείνουν ότι η μακροχρόνια διέγερση από την GH και IGF-1 από θυρεοειδή θυλακιώδη κύτταρα μπορεί να είναι υπεύθυνα για θυρεοειδή καρκινογένεση σε ασθενείς με μεγαλακρία.

IGF-1 R είναι ένα ετερο-τετραμερής πρωτεΐνη, αποτελούμενη από δύο εξωκυτταρικό α υπομονάδες που δεσμεύουν τον IGF και δύο διαμεμβρανικά β-υπομονάδες που φέρουν εγγενή δραστικότητα κινάσης τυροσίνης [27]. IGF-1 δεσμεύει τον IGF-1 R και ενεργοποιεί την φωσφατιδυλινοσιτόλη-3 κινάση και μονοπάτια ΑΚΤ /πρωτεϊνική κινάση Β και φωσφορυλίωση τους, τα οποία είναι αντι-αποπτωτικών μηχανισμών που ενεργοποιούν επίσης την /ΜΑΡΚ μονοπάτι RAS /ΜΕΚ ως κυτταρική διαφοροποίηση, τον πολλαπλασιασμό, τη γήρανση και μηχανισμός επιβίωσης [23], [28], [29]. IGF-1 R υπερεκφράζεται σε όγκους από διάφορες ανατομικές θέσεις, συμπεριλαμβανομένων των φυσιολογικών και κακοηθών κυττάρων του θυρεοειδούς θυλακιώδη [24], [30]. Αρκετές κλινικές και πειραματικές μελέτες έχουν αναφέρει ότι αυξημένη κυκλοφορούντος IGF-1 επίπεδα και αυξημένη έκφραση του IGF-1 και IGF-1 R σε ιστούς όγκων εμπλέκονται στην ανάπτυξη αυτών των κακοήθων όγκων [31]. Στη μελέτη μας, IGF-1Rβ εκφράστηκε από το 100% του καρκίνου του θυρεοειδούς κυττάρων και χρωματίστηκε πιο έντονα σε καρκινικό ιστό από ότι σε γειτονικό φυσιολογικό ιστό, η οποία είναι παρόμοια με μια προηγούμενη αναφορά [32]. IGF-1Rβ IHC χρώση σε φυσιολογικό ιστό του θυρεοειδούς δίπλα στο καρκινικό ιστό ήταν σημαντικά λιγότερο έντονη σε ακρομεγαλία PTC σε σύγκριση με εκείνη στα μη ακρομεγαλία PTC. Αυξημένη ορού IGF-1 επίπεδα σε ασθενείς με ακρομεγαλία μπορεί ρυθμίζουν προς τα κάτω IGF-1Rβ? Ωστόσο, οι αυτοκρινείς και παρακρινείς επιδράσεις του IGF-1 μπορεί να προκληθεί με την τοπική έκφραση του IGF-1Rβ στον ιστό του όγκου. Αυτό μπορεί εν μέρει να συμβάλει στην ανώμαλη ανάπτυξη των όγκων, και αναγνωρίζεται ως ένας ελκυστικός στόχος για τη θεραπεία του καρκίνου.

PTCs συχνά (έως και 83% των PTCs στην Κορέα) φιλοξενούν μια μετάλλαξη ενεργοποίησης του

BRAF

V600E [8]. Η

BRAF

V600E μετάλλαξη υποδηλώνει ότι ERK, ένας καθοδικός τελεστής του

BRAF

, μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην καρκινογένεση του PTC [33], και συνδέεται με extrathyroid εισβολή, λεμφαδενικές μεταστάσεις, προχωρημένο στάδιο του όγκου, και συχνή υποτροπή [34]. Multi-αναστολείς κινάσης όπως sorafenib, που στοχεύουν αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα των υποδοχέων 2 και 3, κοινή

RET /PTC

υποτύπους, και

BRAF

, έχουν δείξει μεγάλη υπόσχεση για τη θεραπεία κακοηθειών που φιλοξενούν ένα

BRAF

V600E μετάλλαξη [35]. Ωστόσο, οι

BRAF

μετάλλαξη V600E είναι σπάνια σε ασθενείς με ακρομεγαλία PTC, και αυτοί οι ασθενείς θα πρέπει να αντιμετωπίζονται με ένα αντι-IGF-1R θεραπευτική προσέγγιση [36].

Πολλά περιορισμούς με τη μελέτη μας, θα πρέπει να αναφερθεί. Καμία ομάδα ελέγχου για σύγκριση του επιπολασμού του καρκίνου του θυρεοειδούς σε ασθενείς με ακρομεγαλία είχε συμπεριληφθεί. Ο συνολικός επιπολασμός του καρκίνου του θυρεοειδούς είναι 76,9 και 427,5 ανά 100.000 σε άνδρες και γυναίκες, αντίστοιχα σε μια μελέτη του 2011 στην Κορέα [18]. Ένας δεύτερος περιορισμός αφορά μια πιθανή προκατάληψη, διότι οι περισσότεροι από τους καρκίνους του θυρεοειδούς ήταν μικροκαρκίνωμα (58,3%). Πραγματοποιήσαμε FNAC για όζους του θυρεοειδούς ύποπτες για κακοήθεια, ανεξάρτητα από το μέγεθος, ενώ οζίδια ≥1 cm και με ύποπτες χαρακτηριστικά ΗΠΑ αξιολογήθηκαν από FNAC σε άλλες μελέτες [3], [25]. Ο επιπολασμός της απόκρυφης PTC κατά την αυτοψία θα μπορούσε να είναι τόσο υψηλό όπως 35% [37], και μικρές απόκρυφες PTCs (& lt? Διαμέτρου 5 mm) θεωρείται ότι δεν απαιτεί θεραπεία [38]. Ως εκ τούτου, ο υψηλός επιπολασμός του καρκίνου του θυρεοειδούς στη μελέτη μας μπορεί να έχει προκληθεί από την ενεργό έλεγχο του θυρεοειδούς. Τέλος, τα ευρήματά μας περιορίζεται από το μικρό μέγεθος του δείγματος και το σύντομο χρονικό διάστημα παρακολούθησης για την εξέταση της θνησιμότητας ή υποτροπή του καρκίνου που σχετίζονται με. Σε γενικές γραμμές, PTC συνδέεται με μια καλή πρόγνωση. Μερικές εκθέσεις δείχνουν ότι η έκφραση όγκου του IGF-1 R είναι μια επιθετική κλινικό χαρακτηριστικό και επίμονη παρά τη θεραπεία του καρκίνου του θυρεοειδούς [39],. Η περαιτέρω μελέτη θα πρέπει να διεξάγεται για να προσδιοριστεί η πρόγνωση των ασθενών με ακρομεγαλία.

Εν κατακλείδι, το ποσοστό του καρκίνου του θυρεοειδούς ήταν εξαιρετικά υψηλό (25%) στη μελέτη μας, και ήταν η πιο κοινή μορφή καρκίνου μεταξύ των ασθενών μας με ακρομεγαλία. Ανεξέλεγκτη ακρομεγαλία συνεπάγεται ότι επίμονα αυξημένα επίπεδα GH και IGF-1 μπορεί να είναι παρούσα σε ασθενείς με υψηλό κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του θυρεοειδούς. Ως εκ τούτου, η τακτική του θυρεοειδούς ΗΠΑ έλεγχο και FNAC για όλες τις ύποπτες όζους του θυρεοειδούς θα πρέπει να εξετάζεται σε όλους τους ασθενείς με νεοδιαγνωσμένο ακρομεγαλία και ανεπαρκή έλεγχο της νόσου. PTC που αναπτύσσεται σε ασθενείς με μεγαλακρία μπορεί να έχει διαφορετική πρόγνωση ή να αντιμετωπίζονται με διαφορετικό τροπικότητα, επειδή μια υπερδραστήρια άξονα GH-IGF-1 μπορεί να παίζει έναν κυρίαρχο ρόλο στην ανάπτυξη της PTC και όχι το

BRAF

μετάλλαξη V600E. Περαιτέρω μελέτες για το θέμα αυτό που απαιτείται, καθώς αυτό ήταν ένα ενιαίο κέντρο, αναδρομική μελέτη με μικρό μέγεθος δείγματος.