Αφηρημένο

Stathmin αποτελεί προγνωστικό δείκτη σε πολλούς καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του ενδομητρίου. Προκλινικές μελέτες, κυρίως στον καρκίνο του μαστού, έχουν προτείνει ότι stathmin μπορεί επιπροσθέτως να είναι ένας δείκτης για προγνωστική απόκριση στο paclitaxel. Αξιολογήσαμε πρώτα την απόκριση σε paclitaxel σε καρκίνο του ενδομητρίου κυτταρικές σειρές πριν και μετά την stathmin knock-down. Στη συνέχεια μελετήθηκε η κλινική απόκριση σε paclitaxel που περιέχει χημειοθεραπεία σε μεταστατικό καρκίνο του ενδομητρίου σε σχέση με το επίπεδο πρωτεΐνης stathmin σε όγκους. επίπεδο Stathmin επίσης προσδιορίστηκε σε μεταστατικές αλλοιώσεις, αναλύοντας τις αλλαγές στην κατάσταση των βιοδεικτών για την εξέλιξη της νόσου. Knock-down του stathmin βελτιωμένη ευαισθησία με την πακλιταξέλη σε ενδομητρίου κυτταρικές γραμμές καρκινώματος με τα δύο φυσικά υψηλότερη και χαμηλότερη ευαισθησία σε paclitaxel. Σε κλινικά δείγματα, υψηλού επιπέδου stathmin καταδείχθηκε ότι συνδέεται με φτωχή απόκριση στην πακλιταξέλη περιέχουν χημειοθεραπεία και σε μειωμένες συγκεκριμένες νόσους επιβίωση μόνο σε ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με τέτοιο συνδυασμό. επίπεδο Stathmin αυξήθηκε σημαντικά από την πρωτοβάθμια στη μεταστατικών βλαβών. Αυτή η μελέτη προτείνει, που υποστηρίζεται από δύο προκλινικά και κλινικά δεδομένα, ότι stathmin μπορούσε να είναι μια έξυπνη βιοδείκτη για απόκριση σε αγωγή με πακλιταξέλη σε καρκίνο του ενδομητρίου. Επαναξιολόγηση του επιπέδου stathmin σε μεταστατικές βλάβες πριν την έναρξη της θεραπείας μπορεί να είναι σχετικό. Επίσης, η επικύρωση σε μια τυχαιοποιημένη κλινική δοκιμή, θα είναι σημαντικό

Παράθεση:. Werner HMJ, Trovik J, Halle ΜΚ, Wik Ε, Akslen LA, Birkeland Ε, et al. (2014) Stathmin πρωτεϊνικό επίπεδο, μια πιθανή πρόβλεψης δείκτης για Ταξάνης Θεραπεία απόκρισης σε καρκίνο του ενδομητρίου. PLoS ONE 9 (2): e90141. doi: 10.1371 /journal.pone.0090141

Επιμέλεια: Rui Medeiros, IPO, Inst Λιμάνι Ογκολογίας, Πορτογαλία

Ελήφθη: 11, Οκτωβρίου 2013? Αποδεκτές: 21 Ιανουαρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 25 Φεβρουαρίου, 2014

Copyright: © 2014 Werner et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Helse Vest , Ερευνητικό Συμβούλιο της Νορβηγίας (803100, 805797) και της νορβηγικής Αντικαρκινική Εταιρεία (Harald Andersens Legat) υποστήριξαν αυτή τη μελέτη. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς αναφέρουν τα παρακάτω συγκρούσεις: Το Πανεπιστήμιο του Μπέργκεν /Haukeland Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο /Dana Farber Cancer Institute /Harvard μέσω BTO (Bergen Teknologioverføring AS): Ορισμένες πτυχές που αφορούν την STMN1 ως προγνωστικός και πρόβλεψης δείκτης για τον καρκίνο του ενδομητρίου υπόκεινται σε εκκρεμότητα τα δικαιώματα πνευματικής ιδιοκτησίας (ΗΠΑ 12 /962.946). Αυτό δεν μεταβάλλει των συγγραφέων και την υιοθέτηση των πολιτικών PLoS ONE για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Stathmin1 (STMN1 στο εξής αναφέρεται ως «stathmin ‘) είναι ένα 18 kD του κυτταροπλάσματος φωσφοπρωτεΐνη, γνωστά να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στον κυτταρικό κύκλο. Stathmin εκφράζεται σε όλους τους ιστούς. Είναι ένα κρίσιμο ρυθμιστή της δυναμικής των μικροσωληνίσκων μέσω μικροσωληνίσκων αποσταθεροποίηση του ιδιότητες, συμπεριλαμβανομένων τόσο για την πρόληψη του πολυμερισμού και δραστική προώθηση των μικροσωληνίσκων αποπολυμερισμού [1] – [4]. Η φωσφορυλίωση του stathmin σε τέσσερα υπολείμματα σερίνης στις αρχές της μιτωτικής φάσης εξασθενεί αποσταθεροποιητική δράση του, επιτρέποντας στα κύτταρα να σχηματίσουν ένα μιτωτικής ατράκτου? αποφωσφορυλίωση τότε λαμβάνει χώρα πριν από την έξοδο της μίτωσης [1], [4]. Stathmin εμπλέκεται επίσης στην ενδοκυτταρική μεταφορά, κινητικότητα κυττάρου, πολικότητα, διατήρηση του σχήματος κυττάρου και ρύθμιση της απόπτωσης [1].

Μια βιοδείκτης ορίζεται ως ένα «χαρακτηριστικό που αντικειμενικά μετράται και αξιολογείται ως δείκτης της φυσιολογικής βιολογικές διεργασίες, παθογόνων διεργασιών ή φαρμακολογικές αποκρίσεις σε μια καθορισμένη θεραπευτική παρέμβαση [5]. Βιοδείκτες μπορούν να διαιρεθούν σε διάφορους τύπους, όπως η προγνωστική? που συνδέονται με την πρόγνωση ενός ασθενούς ανεξάρτητη από τη θεραπεία, και προγνωστική βιοδείκτες? που προσδιορίζουν υποπληθυσμοί των ασθενών που είναι πιθανότερο να (μη) ανταποκρίνονται σε μια θεραπεία [5]. Έτσι, αξιόπιστα προγνωστικά βιοδείκτες είναι υψίστης σημασίας για τη βελτίωση και την εξατομικευμένη θεραπεία

Stathmin υπερεκφράζεται σε πολλά στερεά καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του ενδομητρίου [1], [6] -. [14], και προς τα πάνω ρύθμιση της έχει συνδεθεί με κλινικοπαθολογικών μεταβλητές της επιθετικής ασθένειας όπως αυξημένο κίνδυνο λεμφαδένα μετάσταση [9], [15] και την κακή επιβίωση [6], [9], [10], [12], [13], [16], επιβεβαιώνοντας stathmins ρόλο ως προγνωστικό βιοδείκτη.

Σήμερα, λίγες πρόβλεψης δείκτες γνωστό σε ανθρώπινους καρκίνους και ακόμα λιγότερο είναι κλινικά εφαρμόζεται. Στον καρκίνο του ενδομητρίου καμία κλινικά επικυρωθεί πρόβλεψης δείκτες είναι ακόμα διαθέσιμα [17]. Και οι δύο στοχευμένες θεραπείες και συμβατικών χημειοθεραπευτικών παραγόντων είναι αποτελεσματική μόνο σε ένα υποσύνολο των ασθενών [18], [19], υπάρχει επομένως μια επείγουσα ανάγκη να εντοπιστούν κλινικά χρήσιμη προγνωστική δείκτες. Τα παραδείγματα που ενσωματώνεται στην κλινική περιλαμβάνουν

KRAS

κατάστασης μεταλλάξεων που δείχνει ανταπόκριση στο cetuximab και panitumumab σε καρκίνο του παχέος εντέρου [18], [20], [21], ALK αναδιάταξη σε μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα πρόβλεψη απάντηση crizotinib [18], [20], [22] και HER2 /neu ενίσχυση ή υπερέκφραση στον καρκίνο του μαστού για την επιλεξιμότητα για τη θεραπεία trastuzumab [18], [20], [23].

ταξάνες είναι μια ομάδα χημειοθεραπευτικούς παράγοντες που χρησιμοποιούνται συχνά στην θεραπεία καρκινώματος του ενδομητρίου. Προκλινικές μελέτες σε μαστού και του καρκίνου του προστάτη και ρετινοβλάστωμα [24] – [28] δίνουν προκλινικές ενδείξεις ότι stathmin μπορεί να είναι ένας δείκτης για προγνωστική απόκριση προς ταξάνια σε αυτούς τους τύπους καρκίνου. Τα υψηλά επίπεδα της stathmin μείωσε την ευαισθησία των κυτταρικών σειρών καρκίνου του μαστού στην πακλιταξέλη και βινκριστίνη [24] και knock-down του stathmin με siRNA αύξησε την ευαισθησία σε πακλιταξέλη και στα δύο του μαστού [25] και τα κύτταρα του προστάτη [27]. Αυτή η επίδραση του επιπέδου της πρωτεΐνης stathmin στην ανταπόκριση στη θεραπεία περιορίστηκε σε αντι-μικροσωληνίσκων παράγοντες. Δυστυχώς, καμία από αυτές τις μελέτες έχουν λάβει αυτή τη γνώση σε ένα επόμενο επίπεδο, την ενσωμάτωση των αποτελεσμάτων με κλινικά δεδομένα. Στον καρκίνο του ενδομητρίου σε γνώση μας καμία μελέτη, προκλινικές ούτε κλινικές, έχουν εξερευνηθεί μια σχέση μεταξύ του επιπέδου stathmin και απάντηση σε πακλιταξέλη που περιέχει χημειοθεραπεία. Στην έκθεση αυτή, δείχνουμε στην ενδομητρίου κυτταρικές γραμμές καρκινώματος, ότι η μείωση των επιπέδων stathmin από stathmin knock-down οδηγεί σε βελτιωμένη απόκριση στο paclitaxel. Δείχνουμε επίσης για πρώτη φορά για το καλύτερο της γνώσης μας, ότι το επίπεδο της πρωτεΐνης stathmin συνδέεται με την απάντηση στην πακλιταξέλη που περιέχει θεραπεία σε κλινικά δείγματα από ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο του ενδομητρίου.

Υλικά και Μέθοδοι

οι κυτταρικές σειρές

Δύο ενδομητρίου καρκινικές κυτταρικές γραμμές επελέγησαν λόγω της διαφοράς στο προφίλ ευαισθησία τους σε πακλιταξέλη? Ishikawa (Sigma, ευαίσθητα) και Hec1B (American Type Culture Collection, μειωμένη ευαίσθητα). Η εγκυκλοπαίδεια (CCLE) δεδομένα Cancer Cell Γραμμής επιβεβαιώνει την διαφορά στην ευαισθησία [29]. Οι γραμμές ελήφθησαν το 2009 και την επαλήθευση της αυθεντικότητας από σύντομες διαδοχική επανάληψη (STR) προφίλ διεξήχθη το 2012 [30], [31]. Οι κυτταρικές σειρές διατηρήθηκαν κάτω από τις συνθήκες που συνιστώνται από τους προμηθευτές.

τηλέφωνα επιμόλυνση

Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε 50-70% συρροή πριν από την επιμόλυνση από λεντοϊού μεταγωγή (Open Biosystems, GIPZ λεντοϊού shRNAmir) . Ένα γονίδιο GIPZ λεντοϊού shRNA στόχος που έχει τεθεί από 3 (V3LHS_411977? V2LHS_62940? V3LHS_383505) σε ΜΟΙ 2,5 χρησιμοποιήθηκε. Ένα μη φίμωση έλεγχο GIPZ λεντοϊού shRNAmir (BV17110_2.80 × 10 8) χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος. Τα κύτταρα επιλέχθηκαν με πουρομυκίνη (1 μg /ml) μετά την επιμόλυνση.

Drugs

Η πακλιταξέλη και η καρβοπλατίνη αγοράστηκαν από τη Sigma.

πειράματα γραμμή κυττάρων

Οι κυτταρικές γραμμές υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με πακλιταξέλη σε αυξανόμενες συγκεντρώσεις (εύρος 1-500 ηΜ) για 24 ώρες. Όπως κλινικά ταξάνες συνδυάζονται συχνά με παράγωγα πλατίνας σε καρκίνο του ενδομητρίου, υποβάλλαμε σε αγωγή επίσης κύτταρα με ένα συνδυασμό paclitaxel (σε αυξανόμενες συγκεντρώσεις (εύρος 1-500 ηΜ) και καρβοπλατίνη (σταθερή συγκέντρωση, 200 mM) για 24 ώρες για να παρατηρηθεί οποιαδήποτε συνεργική θεραπεία . επιδράσεις κύτταρα στη συνέχεια είτε σταθεροποιούνται σε 2% φορμαλδεΰδη για μικροσκοπική αξιολόγηση της απόπτωσης? χρησιμοποιείται σε ένα ποσοτικό προσδιορισμό πολλαπλασιασμού (MTS) ή υποβάλλονται σε επεξεργασία για ανοσοκηλίδωση πειράματα τουλάχιστον εις τριπλούν

για την αξιολόγηση της απόπτωσης, σε.. τουλάχιστον 150 κύτταρα μετρήθηκαν σε τρεις διαφορετικές περιοχές σε πλάκες 96 φρεατίων. Για τις δοκιμασίες πολλαπλασιασμού, διεξήχθησαν πειράματα εις τριπλούν σε πλάκες των 96 φρεατίων. οι δοκιμασίες διεξήχθησαν με CellTiter 96® AQ

Δοκιμασία πολλαπλασιασμού ueous One Solution κυττάρων (Promega) ακολουθώντας τις οδηγίες από τον κατασκευαστή. Η απορρόφηση καταγράφηκε στα 490 nm χρησιμοποιώντας αναγνώστη πλάκας ELISA (TECAN Magellan Sunrise).

ανοσοστυπώματα εκτελέσθηκαν σύμφωνα με ένα πρότυπο πρωτόκολλο. Εν συντομία, τα κύτταρα αναπτύχθηκαν και κατεργασία σε πλάκες 6-φρεατίων και συλλέγονται σε ρυθμιστικό διάλυμα λύσης μετά την αγωγή με πακλιταξέλη 24 ώρες. Πρωτεΐνες (25 ug) διαχωρίστηκαν με SDS /PAGE και μεταφέρθηκαν σε μια μεμβράνη νιτροκυτταρίνης (Biorad, Νορβηγία). Stathmin ή /και (διασπάται) PARP ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας διασπασμένη PARP (Asp214) (D64E10) (# 5625Cell Σηματοδότησης), αραιωμένο 1:1000 και stathmin (# 3352, Cell Signaling), αραιωμένο 1:1000? β-ακτίνη χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος φόρτωσης (αντι β-ακτίνης αντίσωμα (AC-15) (ab6276) Abcam), αραιωμένο 1:10000. χρησιμοποιήθηκαν συζευγμένο με αλκαλική φωσφατάση δευτερογενή αντισώματα (αντι-κουνελιού IgG (Sigma Aldrich A3687): Αντι-mouse IgG (Sigma Aldrich A3562)). και του υποστρώματος chemoluminiscence (LumiPhos 34150 WB, Θέρμο επιστημονική) για την ανίχνευση

σειρά Ασθενών

οι ασθενείς με διάγνωση και θεραπεία για καρκίνο του ενδομητρίου στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Haukeland, Μπέργκεν, Νορβηγία, είναι μετά την υπογραφή της εν επιγνώσει συναίνεση, προοπτικά και διαδοχικά περιλαμβάνονται σε μια βάση δεδομένων (πληθυσμός με βάση τη ρύθμιση) από το 2001 και μετά, την πρόληψη μεροληψία της επιλογής και την εξασφάλιση της βέλτιστη συλλογή δεδομένων για όλους τους ασθενείς, όπως αναφέρθηκε προηγουμένως [14]. Οι ασθενείς, ωστόσο, έχουν υποστεί επεξεργασία σύμφωνα με τις συνήθεις κατευθυντήριες γραμμές και τα κλινικά δείγματα διερευνήθηκαν ως εκ τούτου, αποτελούνται από προοπτικά συλλέγονται αρχειακό ιστό. Κλινικοπαθολογοανατομικές δεδομένα που συλλέγονται περιλαμβάνουν μεταξύ άλλων ΦΥΓΩ 2009 στάδιο, ιστολογικό υπότυπο, ποιότητας, πρωτοβάθμια και επικουρική θεραπεία, και την παρακολούθηση συμπεριλαμβανομένης της θεραπείας για μεταστατική νόσο. Για τους σκοπούς της παρούσας μελέτης, οι ασθενείς που έλαβαν πακλιταξέλη χημειοθεραπεία που περιέχει (σαν ρουτίνα στο νοσοκομείο μας ένα συνδυασμό paclitaxel και καρβοπλατίνη) μετά από χειρουργική θεραπεία είτε για υπολειπόμενη νόσο ή μετάστασης πριν από τον Απρίλιο του 2011, μελετήθηκαν για ανταπόκριση στην αγωγή σύμφωνα με τα κριτήρια RECIST [ ,,,0],32], με την τελευταία παρακολούθηση εισόδου Ιούλιο του 2013. από το συνολικό 607 ασθενείς στη βάση δεδομένων, εκ των οποίων 121 είχαν συστηματική δηλαδή υποτροπιάζουσα ή υπολειπόμενη νόσο, 57 είχαν δεδομένα απόκρισης σύμφωνα με τα κριτήρια RECIST διαθέσιμα? 33 εκ των οποίων υποβλήθηκαν σε θεραπεία με πακλιταξέλη χημειοθεραπεία που περιέχει. Ορίσαμε καλή απάντηση ως πλήρης ή μερική ανταπόκριση (κριτήρια RECIST), και η κακή ανταπόκριση ως στατική νόσο ή εξέλιξη της νόσου (κριτήρια RECIST). Επιπλέον εξετάσαμε συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωση σε σχέση με το επίπεδο stathmin για όλους τους ασθενείς με καρκίνο του ενδομητρίου και ειδικά για ασθενείς που έλαβαν θεραπεία για μεταστατική νόσο. Ο μέσος χρόνος παρακολούθησης στην ομάδα μας ήταν 34 μήνες (εύρος 0-105 μήνες).

Ιστός μικροσυστοιχίες (ΤΜΑ) κατασκευή

TMA του παρήχθησαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως και επικυρώθηκαν σε διάφορες μελέτες [33 ]. Η περιοχή του υψηλότερου επιθετικότητα του όγκου εντοπίστηκε σε όλες τις διαφάνειες αιματοξυλίνη /ηωσίνη για να εξασφαλιστεί η αντιπροσωπευτικότητα του όγκου και τρεις (πρωτογενούς όγκου) ή ένα (μετάσταση) κύλινδροι ιστού (διαμέτρου 0,6 χιλιοστά το καθένα) έχουν τοποθετηθεί σε ένα μπλοκ δέκτη χρησιμοποιώντας ένα custom made όργανο ακριβείας ( Beecher όργανα, Silver Spring, MD, USA). Φορμόλη σταθερά ενσωματωμένα σε παραφίνη (FFPE) ιστό πρωτοπαθούς όγκου ήταν διαθέσιμο σε TMAs από 603 ασθενείς για την αξιολόγηση του επιπέδου stathmin. Από 77 ασθενείς με μεταστάσεις, επιπλέον μεταστατικό ιστός ήταν διαθέσιμο σε TMAs για τη διερεύνηση του επιπέδου stathmin σύγκριση με την αντίστοιχη πρωτογενή όγκο. Πάρα πολύ λίγες περιπτώσεις είχε επιπλέον αξιολογήσιμες μεταστατικών βλαβών, λαμβάνονται πριν από την πακλιταξέλη που περιέχει χημειοθεραπεία, για την αξιολόγηση επίπεδο stathmin, με τα δεδομένα απόκρισης διαθέσιμα, σύμφωνα με τα κριτήρια RECIST και ένα παρόμοιο προφίλ πριν από τη θεραπεία (n = 3) για να επιτρέψει ουσιαστική στατιστικές αναλύσεις ανταπόκρισης σε σχετικά με την κατάσταση των βιοδεικτών σε μεταστατικές βλάβες.

Η ανοσοϊστοχημεία

5 μm πάχους τομές TMA αποκηρώθηκαν με ξυλόλιο /αιθανόλης. Το αντιγόνο ανάκτηση έγινε με μικροκύματα σε TRS ρΗ6 (S1699 Dako Target Ανάκτηση Solution) για 20 λεπτά. Τα πλακίδια αποκλείστηκαν για την υπεροξειδάση (Dako S2023) για 8 λεπτά και επωάστηκε για 60 λεπτά με stathmin (Cell # 3352 σηματοδότηση), αραιωμένο 1:50. EnVision + σύστημα, χρησιμοποιήθηκε δευτερεύον αντίσωμα HRP (Dako K4011), ακολουθούμενη από DAB + χρωμογόνου (ϋΑΚΟ K4011) ως σύστημα ανίχνευσης. Διαφάνειες Ακολούθησε χρώση με αιματοξυλίνη (Dako, S2020).

Βαφή αξιολόγηση

Τυφλωμένος για τα χαρακτηριστικά των ασθενών και τα αποτελέσματα, διαφάνειες βαθμολογήθηκαν από δύο συγγραφείς (HMJW και JT) χρησιμοποιώντας πρότυπο μικροσκόπιο φωτός όπως περιγράφηκε προηγουμένως [34], [35]. Η αξία κάπα, ως μέτρο της αναπαραγωγιμότητας, ήταν 0,73 σε ένα ξεχωριστό σύνολο 68 διαφάνειες σημείωσε ατομικά από HMJW και JT. Υψηλό επίπεδο πρωτεΐνη ορίστηκε ως το ανώτερο τεταρτημόριο, σκοράρει 9, σύμφωνα με τις προηγούμενες εκδόσεις [15]. Σε περίπτωση πολλαπλών μεταστάσεων με διακύμανση επίπεδο stathmin, η βλάβη με υψηλότερο επίπεδο ορίζεται η τελική βαθμολογία για μεταστατικές βλάβες.

Στατιστικά

Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση PASW18 Στατιστικής (προγνωστική ανάλυση λογισμικού, SPSS inc. Chicago, USA). Κατηγορικές μεταβλητές αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας το χ2 τεστ Pearson ή Fisher ακριβή περίπτωση. Δύο όψεων Ρ-τιμές των & lt? 0,05 θεωρήθηκαν σημαντικές. Μονοπαραγοντική ανάλυση του χρόνου από την πρωτογενή επεξεργασία για θάνατο λόγω του ενδομητρίου καρκινώματος (νόσος ειδική επιβίωση) διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας την μέθοδο Kaplan-Meier. Η Cox μέθοδο της αναλογικής κινδύνων χρησιμοποιήθηκε για μια πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης (παραδοχή της αναλογικότητας ελέγχεται από οικόπεδο log log μείον).

Δήλωση Ηθικής

Όλοι οι ασθενείς που υπέγραψε συγκατάθεση πριν από την ένταξη στη μελέτη. Η μελέτη έχει εγκριθεί από τη νορβηγική Επιθεώρηση δεδομένων (961.478 – 2), οι νορβηγικές Κοινωνικών Επιστημών Υπηρεσίες Δεδομένων (15501) και το τοπικό συμβούλιο κριτική Θεσμική (Περιφερειακές Επιτροπές για την ιατρική και την υγεία Δεοντολογίας? REKIII nr 052,01)

Αποτελέσματα

Απάντηση σε πακλιταξέλη σε κυτταρικές σειρές καρκίνου του ενδομητρίου

Απάντηση σε πακλιταξέλη κυμαίνεται από καρκίνο του ενδομητρίου κυτταρικές σειρές [29], [36], [37]. Δείχνουμε κύτταρα Ishikawa είναι ευαίσθητα σε αγωγή με πακλιταξέλη με ένα υψηλό ποσοστό των αποπτωτικών κυττάρων μετά από 24 ώρες θεραπείας (μικροσκοπική καταμέτρηση και δοκιμασία πολλαπλασιασμού) σε αντίθεση με τα κύτταρα Hec1B (Εικ. 1α και 1β). Η συνδυασμένη αγωγή του καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη δεν οδήγησε σε συνεργική επίδραση της θεραπείας (που δεν φαίνεται)

Α:. Μικροσκοπική αξιολόγηση απόπτωσης σε Ishikawa και τα κύτταρα άγριου τύπου Hec1B μετά τη θεραπεία με paclitaxel στις ακόλουθες δόσεις: 0 ηΜ, 5 ηΜ, 10 ηΜ, 50 ηΜ, 100 ηΜ, 250 ηΜ και 500 ηΜ. Τα αποτελέσματα είναι αντιπροσωπευτικά 5 ανεξάρτητων πειραμάτων. Τα τυπικά σφάλματα του μέσου υποδεικνύεται. Β: Κυττάρων μεταβολική δραστηριότητα αξιολογήθηκε με μια δοκιμασία πολλαπλασιασμού (MTS, Promega) σε κύτταρα άγριου τύπου Ishikawa και Hec1B μετά τη θεραπεία με paclitaxel στις ακόλουθες δόσεις: 0 ηΜ, 1 ηΜ, 10 ηΜ, 50 ηΜ, 100 ηΜ, 250 ηΜ και 500 nm. Τα αποτελέσματα είναι αντιπροσωπευτικά 3 (Ishikawa) και 2 (Hec1B) ανεξάρτητα πειράματα.

Η

Stathmin knock-down από ιογενή επιμόλυνση

μικροσκοπία φθορισμού έδειξε ένα ποσοστό επιμόλυνσης του 70-80% σε η έναρξη των πειραμάτων, με σημαντικά μειωμένα επίπεδα stathmin στα knock-down κυτταρικές σειρές stathmin σε σχέση με κυτταρικές σειρές άγριου τύπου (Σχήμα 2α και 3α.) τον έλεγχο knock-down και

Α:. Ανοσοστύπωμα μετά την επιμόλυνση κυττάρων με ένα stathmin βραδέος ιού shRNAmir ( «stmn kd») ή ένα μη-σίγησης ελέγχου ( «μη SIL), καθώς και η γονική κυτταρική σειρά (άγριου τύπου? ‘WT). Οι κηλίδες χρωματίστηκαν για stathmin, και β-ακτίνης για έλεγχο φόρτωσης. Β: Ishikawa κυτταρική σειρά άγριου τύπου, μη σίγηση και stathmin knock-down μετά την θεραπεία με πακλιταξέλη για 24 ώρες στις ακόλουθες δόσεις: 0 ηΜ, 5 ηΜ, 10 ηΜ, 50 ηΜ, 100 ηΜ, 250 ηΜ και 500 ηΜ. Το επίπεδο του κατακερματισμού των κυττάρων ενδείκνυται σε ένα ένθετο, ως πληρεξούσιος της εξέλιξης στην αποπτωτική διαδικασία. διαμάντια? άγριου τύπου, τρίγωνα? μη φίμωση και σταυρούς? stathmin knock-down κύτταρα. C: Ανοσοστύπωμα Ishikawa άγριου τύπου, ελέγχου (μη σίγηση) και stathmin knock-down κυτταρικές γραμμές μετά από θεραπεία με πακλιταξέλη για 24 ώρες στις ακόλουθες δόσεις: 0 ηΜ, 100 ηΜ και 250 ηΜ. Το στύπωμα χρώση για διασπασμένης ΡΑΚΡ και stathmin, με β-ακτίνη που χρησιμεύει ως έλεγχος φόρτωσης. D: Αριστερά: Ishikawa άγριου τύπου (WT) κυτταρική γραμμή και δεξιά: Ishikawa stathmin knock-down ( «Stmn kd») κυτταρική γραμμή. Μικροσκοπική εικόνες των κυττάρων μετά από θεραπεία για 24 ώρες με 0 ηΜ (άνω σειρά) ή 500 ηΜ (κάτω σειρά) paclitaxel επίσης καταδεικνύουν αυξημένο ποσοστό κατακερματισμού για τα stathmin knock-down κύτταρα Ishikawa (δεξιά κάτω πλαίσιο) σε σύγκριση με το αγρίου τύπου (αριστερά κάτω πίνακας)

η

Α:. Ανοσοστύπωμα μετά τη διαμόλυνση κυττάρων με ένα stathmin βραδέος ιού shRNAmir ( «stmn kd») ή ένα μη-σίγησης ελέγχου ( «μη SIL), καθώς και η γονική κυτταρική σειρά (wild -τύπου? «WT»). Οι κηλίδες χρωματίστηκαν για stathmin, και β-ακτίνης για έλεγχο φόρτωσης. Β: Hec1B κυτταρική σειρά άγριου τύπου, μη σίγηση και stathmin knock-down γραμμές, μετά από θεραπεία με πακλιταξέλη για 24 ώρες στις ακόλουθες δόσεις: 0 ηΜ, 5 ηΜ, 10 ηΜ, 50 ηΜ, 100 ηΜ, 250 ηΜ και 500 ηΜ. C: Αριστερά: Hec1B άγριου τύπου (WT) κυτταρική γραμμή και δεξιά: Hec1B stathmin knock-down ( «Stmn kd») κυτταρική γραμμή. Εμφανίζονται μικροσκοπικές εικόνες των κυττάρων μετά από θεραπεία για 24 ώρες με 0 ηΜ (άνω σειρά) ή 500 ηΜ (κάτω σειρά) paclitaxel καταδεικνύοντας αυξημένο κυτταρικό θάνατο για τους stathmin knock-down κύτταρα Hec1B (δεξιά κάτω πλαίσιο) σε σύγκριση με Hec1B άγριου τύπου (αριστερά κάτω πίνακα).

η

σε δύο knock-down κυτταρικές σειρές stathmin (Ishikawa και Hec1B), παρατηρήθηκε βελτίωση της ανταπόκρισης στη θεραπεία πακλιταξέλη (Σχ. 2β και 3β). κύτταρα Hec1B δείχνουν μια στατιστικά σημαντική αύξηση της αποπτωτικό ρυθμό μετά stathmin knock-down. Ενδεχομένως λόγω της εγγενούς μεγαλύτερη ευαισθησία σε πακλιταξέλη σε κύτταρα Ishikawa, knock-down δεν έχει ως αποτέλεσμα μια παρόμοια μεγάλη αύξηση σε κυτταρικό θάνατο. Ωστόσο, σημειώνεται μια σαφώς αυξημένο ποσοστό κατακερματισμού στα επεξεργασμένα κύτταρα stathmin knock-down Ishikawa σε αντίθεση με τα κύτταρα ελέγχου, τα οποία μπορεί να θεωρηθεί ως ένδειξη περαιτέρω ενεργοποίηση του αποπτωτικού μονοπατιού (ένθετο Σχήμα 2β.). Χρησιμοποιώντας ανοσοκηλίδος, προσπαθήσαμε να επικυρώσει περαιτέρω αυτή ενισχύεται αποπτωτική ενεργοποίηση οδό διάσπασης αποδεικνύουν PARP σε χαμηλότερη συγκέντρωση πακλιταξέλης για Ishikawa μετά stathmin knock-κάτω σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 2c). Μικροσκοπικά εικόνες των Ishikawa και Hec1B άγριου τύπου και stathmin knock-down κύτταρα μετά από αγωγή με πακλιταξέλη 24 ώρες με 0 ηΜ (έλεγχος) και 500 ηΜ φαίνονται στα Σχήματα 2d και 3c. Εξετάσαμε την επίδραση της stathmin knock-down με την ευαισθησία στην καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη ως μονοθεραπεία-καρβοπλατίνη συνδυαστικής θεραπείας χωρίς να τηρηθεί αυξημένη ευαισθησία ή συνεργιστικά αποτελέσματα (δεν απεικονίζεται).

Υψηλό επίπεδο stathmin προβλέπει φτωχή ανταπόκριση με την πακλιταξέλη σε κλινικά δείγματα

Στη συνέχεια διερευνήθηκε δείγματα όγκων των ασθενών για να δει αν θα μπορούσε να παρατηρηθεί μια παρόμοια συσχέτιση μεταξύ του επιπέδου stathmin και την ανταπόκριση στη θεραπεία. χρώση Stathmin ήταν κυρίως κυτταροπλασματική, όπως αναφέρεται στη βιβλιογραφία [15], [38]. Αντιπροσωπευτικά εικόνες από ανοσοϊστοχημεία με ασθενές (κανονικό) και ισχυρή χρώση (υψηλή) stathmin φαίνεται στο σχήμα 4α. Εξαιρουμένων μεταστατικό ασθενείς που λαμβάνουν αντι-ορμονική θεραπεία μόνο, οι ασθενείς με μεταστατική νόσο που λαμβάνουν πακλιταξέλη που περιέχει χημειοθεραπεία είχαν παρόμοια κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά, όπως οι ασθενείς αντιμετωπίζονται με διαφορετικό τρόπο. Συμπεριλαμβανομένων των ασθενών που έλαβαν θεραπεία με αντι-ορμονικά φάρμακα μόνο, κυρίως ευπαθείς ηλικιωμένοι ασθενείς, κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά εξακολουθούν να παραμένουν παρόμοια, εκτός από το ότι αυτή η υποομάδα ήταν σημαντικά μεγαλύτερα (Πίνακας 1). Ασθενείς με κανονικό επίπεδο stathmin απάντησε σαφώς πολύ καλύτερη (κριτήρια RECIST) στη θεραπεία από τους ασθενείς με υψηλό επίπεδο stathmin (Εικ. 4β). επίπεδο Stathmin δεν προέβλεψαν απάντηση σε άλλα χημειοθεραπευτικά σχήματα ή τρόπους θεραπείας

Α:. Εικόνες εκπρόσωπος της αδύναμης ανοσοϊστοχημική χρώση stathmin (επάνω) και ισχυρής (υψηλή ή παθολογική) χρώση stathmin (κάτω) στο ενδομήτριο καρκίνωμα. Μπαρ (κάτω δεξιά γωνία) μέτρο 40 μm. Β: Η κλινική ανταπόκριση σε πακλιταξέλη για όλους τους ασθενείς καρκίνο του ενδομητρίου με αξιολογήσιμη ασθένεια σύμφωνα με τα κριτήρια RECIST και διαχωρίζονται για την κανονική έναντι υψηλού επιπέδου stathmin. Κακή απόκριση (RECIST: στατική νόσο ή εξέλιξη της νόσου) που αναφέρεται στο μπλε, καλή απόκριση (RECIST: πλήρης ή μερική ανταπόκριση) αναγράφεται με κόκκινο χρώμα. C:. Σύγκριση υψηλό επίπεδο πρωτεϊνών (παθολογική) stathmin στην πρωτοβάθμια και μεταστατικών βλαβών

Η

Προσεγγίζοντας από μια διαφορετική οπτική γωνία, σε γενικές γραμμές, οι ασθενείς με υψηλό επίπεδο stathmin έδειξε μειωμένο συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωσης, σύμφωνα με stathmins ρόλο ως προγνωστικό βιοδείκτη (Εικ. 5α). Ωστόσο, κατά την υποομάδα των ασθενών με μεταστατική νόσο έλαβαν θεραπεία με πακλιταξέλη χημειοθεραπεία που περιέχει, ειδικά ως προς ασθένεια επιβίωση ήταν σημαντικά φτωχότερη σε εκείνους τους ασθενείς με υψηλή σε σύγκριση με την κανονική stathmin (ρ = 0,03, σχ. 5β). Σε ασθενείς που έλαβαν άλλες θεραπείες για την μεταστατική νόσο, την πρόγνωση ήταν άσχετη με το επίπεδο stathmin (p = 0.76, Σχ. 5γ. Για να αποκλειστεί σύγχυση με γνωστές σημαντικές κλινικοπαθολογοανατομικές προγνωστικές μεταβλητές, πραγματοποιήσαμε μια πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης για τις δύο υποομάδες να εξετάσει την επίδραση του επιπέδου stathmin στην επιβίωση μετά τη θεραπεία για μεταστατική νόσο, διορθωμένη για το στάδιο ΦΥΓΩ και ιστολογική υπότυπο. Stathmin επίπεδο πρωτεΐνης παρέμεινε ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της νόσου ειδικά επιβίωσης στην υποομάδα των ασθενών που έλαβαν πακλιταξέλη που περιέχει χημειοθεραπεία (n = 38, HR 2,3, CI 1,1 -5.2), προσαρμοσμένο για το στάδιο ΦΥΓΩ και ιστολογική υπότυπο, αλλά όχι στην υποομάδα που λαμβάνουν άλλες θεραπείες (n = 43, HR 1,1, CI 0,4 – 2,7)

Α:. Όλοι οι ασθενείς με πλήρη δεδομένα (n = . 476) Αριθμός νόσου συγκεκριμένα γεγονότα εντός παρενθέσεων Β:. Όλοι οι ασθενείς με μεταστατική νόσο που έλαβαν αγωγή με πακλιταξέλη (n = 38) Αριθμός της νόσου συγκεκριμένα γεγονότα εντός παρενθέσεων C:.. Όλοι οι ασθενείς με μεταστατική νόσο που έλαβαν διαφορετικές θεραπείες (n = 43). Αριθμός νόσου συγκεκριμένα γεγονότα εντός παρενθέσεων.

Η

διαφωνούσαν στο καθεστώς των βιοδεικτών στην πρωτοβάθμια και μεταστατικών βλαβών

Το ποσοστό των ασθενών με υψηλό επίπεδο stathmin ήταν σημαντικά υψηλότερη σε μεταστάσεις σε σύγκριση με πρωτογενείς βλάβες με παθολογική (υψηλή) επίπεδα σημειώνεται σε 18% του τελευταίου (n = 84 477 πρωτογενών βλαβών με χρώση stathmin διαθέσιμα) σε σύγκριση με 37% στη μεταστατική δείγματα (n = 29 79) (Εικ. 4γ).

στα ζεύγη δειγμάτων πρωτογενούς-μετάσταση, το 35% των μεταστατικών βλαβών έδειξαν υψηλό επίπεδο stathmin. Παρατηρήθηκε μία ασυμφωνία του 26% μεταξύ των μεταστατικών βλαβών και προκριματικές τους. Στο 16% υπήρξε μια αλλαγή σε υψηλό επίπεδο σε μεταστάσεις και σε 10% σε κανονικό επίπεδο.

Συζήτηση

πρωτεϊνικό επίπεδο Stathmin έχει αποδειχθεί ότι είναι ένας προγνωστικός δείκτης της επιθετικής νόσου σε πολλούς καρκίνους , συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του ενδομητρίου, όπου η υψηλή στάθμη stathmin σε πρωτογενή όγκο προσδιορίζει ασθενείς με υψηλό κίνδυνο για υποτροπή της νόσου και λεμφαδένα μεταστάσεων [6], [9], [10], [12], [13], [15], [16 ]. Ο προσδιορισμός και η ανάπτυξη της πρόβλεψης βιοδείκτες είναι υψίστης σημασίας για την αύξηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας και τη μείωση των περιττών ανεπιθύμητες ενέργειες, όχι μόνο σε στοχευμένες θεραπείες, αλλά και σε χημειοθεραπευτικά καθεστώτων, όπως και για τις δύο μετρήσεις που μόνο ένας υποπληθυσμός θα ανταποκρίνονται καλά, ειδικά στο μεταστατικό πλαίσιο, αλλά με το παρόν πολύ περιορισμένη διαθέσιμα εργαλεία για την πρόβλεψη αυτών των ασθενών [39], [40]. Κανένα από τα σημαντικά κλινικοπαθολογοανατομικών παράγοντες, όπως το στάδιο της νόσου ή ιστολογική υπότυπο, είναι σήμερα γνωστό για να βοηθήσει διάκριση δυναμικό ανταποκρίθηκαν από μη ανταποκρινόμενοι με την πακλιταξέλη που περιέχει χημειοθεραπεία στον μεταστατικό ρύθμιση. Μελετώντας μεγάλο μέρος του πληθυσμού με βάση σειρά με υψηλής ποιότητας κλινική σχολιασμού όπως η σειρά μας, σε συνδυασμό με προκλινικές πειράματα είναι ένα χρήσιμο και χρόνο αποτελεσματικό εργαλείο για να διερευνήσει τις δυνατότητες πρόβλεψης βιοδείκτες, η οποία μπορεί στη συνέχεια να δοκιμαστούν σε κλινικές δοκιμές.

σύμφωνα με την προηγούμενη

in vitro

αποτελέσματα στον καρκίνο του μαστού, δείχνουμε σε καρκίνο του ενδομητρίου κυτταρικές σειρές που, ανεξάρτητα από το αρχικό επίπεδο stathmin, ευαισθησία στο paclitaxel αυξηθεί και έτσι την απόπτωση ταχεία μετά την επιτυχή stathmin knock-down. Αυτό φαίνεται από την άμεση μικροσκοπική καταμέτρηση και στα κύτταρα Ishikawa τεκμηριώνεται επίσης με ανοσοαποτύπωση εστιάζοντας στην διάσπαση PARP. διάσπαση PARP είναι μια καθιερωμένη δείκτης της απόπτωσης, διακρίνει από άλλους μηχανισμούς κυτταρικού θανάτου, όπως νέκρωση. Η αυξημένη αποπτωτική σχηματισμό σώμα σημειώνεται από μικροσκόπιο των knock-down κυτταρικές σειρές stathmin ταιριάζει με αυξημένη απόπτωση [41], [42].

Σε μας προοπτικά συλλέγονται, αναδρομικά ανέλυσε σειρά ασθενών, αποδείξαμε επίσης μια εντυπωσιακή διαφορά σε απόκριση σε πακλιταξέλη χημειοθεραπεία που περιέχει συγκρίνοντας ασθενείς με φυσιολογική σε εκείνους με υψηλό επίπεδο stathmin, επίσης κατά τη διόρθωση για τις πιο σημαντικές κλινικοπαθολογοανατομικών προγνωστικές μεταβλητές. Ακόμα και όταν εξερευνώντας μια τέτοια μεγάλη κλινική σειρά με τους ασθενείς του καρκίνου του ενδομητρίου, όπως η δική μας, που συλλέγονται πάνω από περισσότερα από 10 χρόνια, με την κατάλληλη παρακολούθηση και RECIST [32] συμβατό τεκμηρίωση της απάντησης, τελικά μόνο ένας μικρότερος αριθμός των ασθενών που είχαν υποβληθεί σε θεραπεία με τη θεραπεία ενδιαφέροντος, υπογραμμίζοντας τη δυσκολία συλλογής σειρά με επαρκή αριθμό ασθενών για ειδικές μελέτες δείκτη? αλλά την ίδια στιγμή τη σημασία να εκμεταλλευτεί αυτά τα μεγάλα μελλοντικά συλλέγονται με βάση σειρά πληθυσμού για την έξυπνη βιοδείκτες προτείνεται σε προκλινικές μελέτες, και να διερευνήσει πιθανή κλινική ισχύ πριν από το στάδιο των κλινικών δοκιμών. Η στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ υψηλού επιπέδου stathmin και η κακή ανταπόκριση πακλιταξέλη σύμφωνα με τα κριτήρια RECIST σε κλινικά δείγματα και το γεγονός ότι το επίπεδο stathmin έχει ανεξάρτητη προγνωστική αξία σε ασθενείς που λαμβάνουν πακλιταξέλη για μεταστατική νόσο, δεν παρουσιάζουν σε ασθενείς που δεν κάνουν, σε αναλύσεις επιβίωσης, υποστηρίζει την πιθανότητα ότι το επίπεδο της στάθμης stathmin μπορεί να ενεργεί όχι μόνο ως προγνωστικός δείκτης αλλά και ως προγνωστικό δείκτη για την ανταπόκριση στη θεραπεία πακλιταξέλη σε ενδομητρίου καρκινώματα.

σε αντίθεση με προηγούμενες μελέτες κοιτάζοντας stathmin ως πιθανή προγνωστική δείκτη, κυρίως στην

in vitro

μελέτες για τον καρκίνο του μαστού, σε αυτή τη μελέτη ήταν σε θέση να δοκιμάσει και να επιβεβαιώσει τη σύνδεση σε κλινικά δείγματα από ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με το φάρμακο που μας ενδιαφέρει? χρησιμοποιώντας δεδομένα από ένα καλά σχολιασμένο προοπτικά συλλέγονται σειρές ασθενών. Τόσο η προκλινικές και κλινικές δοκιμές υποστήριξη που επηρεάζει το επίπεδο stathmin ευαισθησία στην πακλιταξέλη. Έχουμε διερευνηθούν και να αποκλειστεί ότι το αποτέλεσμα αυτό μπορεί να γενικευθεί σε άλλους χημειοθεραπευτικούς παράγοντες, όπως η καρβοπλατίνη, επίσης, χρησιμοποιούνται συχνά στον καρκίνο του ενδομητρίου.

συστάσεις Πληροφόρησης για δείκτη όγκου προγνωστικές μελέτες (Παρατήρηση) κατευθυντήριες γραμμές έχουν αναπτυχθεί με στόχο την τη βελτίωση της μεθοδολογικής ποιότητας και της διαφάνειας αναφορά σε τέτοιες μελέτες [43]. Η τρέχουσα μελέτη έχει διεξαχθεί σύμφωνα με αυτές τις κατευθυντήριες γραμμές για τη βελτίωση της ποιότητας και γενική ισχύ των αποτελεσμάτων της.

Οι ταξάνες, που αρχικά απομονώθηκε από το φλοιό του δέντρου πουρνάρι, ανήκουν στην οικογένεια των αντι-μικροσωληνίσκων χημειοθεραπευτικούς παράγοντες , με πακλιταξέλη ως πρωτότυπο τους. Με απλά λόγια, ταξάνες δεσμεύονται σε β-τουμπουλίνη, προκαλώντας μικροσωληνίσκων να αντισταθεί αποπολυμερισμό, αναστολή προόδου του κυτταρικού κύκλου και την προώθηση μιτωτική σύλληψη και τον κυτταρικό θάνατο [44]. Η καρβοπλατίνη, αντίθετα, είναι ένας από τους παράγοντες πλατίνας που βασίζεται, αλληλεπιδρώντας με το DNA και να παρεμβαίνει με την επισκευή του DNA. Όπως stathmin είναι ένα κρίσιμο ρυθμιστής της δυναμικής των μικροσωληνίσκων, λαμβάνεται υπόψη ο τρόπος δράσης των φαρμάκων, η θετική επίδραση των stathmin knock-down με την ανταπόκριση πακλιταξέλη και η απουσία της στην καρβοπλατίνη ευαισθησία, είναι επίσης βιολογικά αληθοφανής.

δείχνουν ένα υψηλότερο ποσοστό υψηλού επιπέδου stathmin σε μεταστατικό (37%) σε σύγκριση με το πρωτογενές βλάβες (18%). Διαφορά στην κατάσταση stathmin σημειώθηκε στο ένα τέταρτο των ζευγών δειγμάτων, παραλληλίζοντας ευρήματα π.χ. καρκίνο του μαστού, όπου οι διαφορές μεταξύ των πρωτογενών και μεταστατικών βλαβών παρουσιάζεται στο 14 με 55% και 0-40% για τους υποδοχείς ορμονών και HER2 αντίστοιχα [45] – [47]. Στον καρκίνο του ενδομητρίου, λίγες μελέτες συζητήσουν τις διαφορές στην κατάσταση δείκτη μεταξύ πρωτογενών και μεταστατικών βλαβών [38], [48], [49]. Η ενδονεοπλασματική ετερογένεια περιγράφεται καλά στον καρκίνο και μια πιθανή σύγχυση παράγοντας σε πολλές μελέτες, ανεξάρτητα από τη χρήση διαφανειών πλήρους ιστού ή ΤΜΑ. διακύμανση μεταξύ των παρατηρητών είναι απίθανο να είναι η μόνη εξήγηση για αυτά που περιγράφονται διαφορές. Επίσης, μια πρόσφατη μελέτη αξιολόγησης της κατάστασης της μετάλλαξης, μια μέθοδος θεωρείται λιγότερο υποκειμενικό από ανοσοϊστοχημική βαθμολόγησης, σε πολλαπλές μεταστατικές βλάβες από έναν ασθενή με νεφροκυτταρικό καρκίνωμα, η στήριξη που ανιχνεύονται αλλαγές βιοδείκτη από την πρωτοβάθμια στη μεταστατικές βλάβες είναι πραγματικές και μπορεί να σχετίζεται με και αφορούν εξέλιξης του όγκου [39]. Οι αλλαγές στην κατάσταση των βιοδεικτών από την πρωτοβάθμια στη μεταστατικών βλαβών υποστηρίζουν την ανάγκη για επαναλαμβανόμενες βιοψίες σε μεταστατικές αλλοιώσεις, να αφορούν την καλύτερη ανταπόκριση της θεραπείας στους πιθανούς πρόβλεψης βιοδεικτών, αλλά και να προσφέρει μόνο θεραπείες με πιθανή θετική επίδραση όταν πρόβλεψης βιοδείκτες είναι διαθέσιμα [47], [50 ], [51]. Για τον καρκίνο του μαστού, η Αμερικανική Εταιρεία Κλινικής Ογκολογίας (ASCO) ενημέρωσε το 2007 ήδη αυτή για την κατάσταση των ορμονικών υποδοχέων, οι δοκιμές πρέπει να θεωρηθεί ότι επαναλαμβάνεται σε μεταστατική νόσο, αν τα αποτελέσματα ήταν να επηρεάσουν τη διαχείριση των ασθενών [52].

Συμπέρασμα

Αυτά τα αποτελέσματα, συμπεριλαμβανομένων των προκλινικών δεδομένων και για πρώτη φορά στοιχεία από κλινικά δείγματα, υποστηρίζουν ότι stathmin μπορεί να είναι μια έξυπνη βιοδείκτη για την ανταπόκριση στη θεραπεία πακλιταξέλη στον καρκίνο του ενδομητρίου. Ωστόσο, οι επιβεβαιωτικές μελέτες, ιδανικά από τυχαιοποιημένες κλινικές μελέτες που απαιτούνται. Η ασυμφωνία βιοδεικτών για την εξέλιξη του όγκου είναι σύμφωνη με άλλες μελέτες σε όγκο βιοδείκτη ετερογένεια και υποστηρίζει την ανάγκη για επαναλαμβανόμενες βιοψία σε μεταστατική νόσο.

Ευχαριστίες

Britt Edvardsen, Ellen Valen, Gerd Lillian Hallseth,