Αφηρημένο

Στόχοι

για να συγκρίνετε τις βιολογικές επιδράσεις των

σπόρους 125I συνεχής χαμηλή δόση επιτοκίου (CLDR) ακτινοβολία και

60Co γ-ray υψηλής δόσης-επιτόκιο (HDR) ακτινοβολία σε μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC ) κύτταρα.

Υλικά και Μέθοδοι

Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα εκτέθηκαν σε

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR ή

60Co γ-ray HDR ακτινοβολία. Το κλάσμα επιβίωσης προσδιορίστηκε χρησιμοποιώντας δοκιμασία σχηματισμού αποικίας. Η εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης ανιχνεύθηκαν με κυτταρομετρία ροής (FCM). Η έκφραση των πρωτεϊνών που σχετίζονται με την απόπτωση κασπάσης-3, διασπασμένης κασπάσης-3, PARP, που διασπάται-PARP, ΒΑΧ και Bcl-2 ανιχνεύθηκαν με δοκιμασία κηλίδος Western.

Αποτελέσματα

Μετά την ακτινοβόληση με

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR, υπήρχε ένα χαμηλότερο κλάσμα επιβίωσης, πιο έντονη αναστολή του κυτταρικού κύκλου (G

1 σύλληψης και G

2 /M σύλληψη στο Α549 και Η1299 κύτταρα, αντίστοιχα) και υψηλότερη αποπτωτική αναλογία για τα κύτταρα Α549 και Η1299 ό, τι μετά

60Co γ-ray HDR ακτινοβολία. Επιπλέον, δοκιμασίες κηλίδος Western αποκάλυψαν ότι

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία αξιοσημείωτα up-ρυθμίζεται η έκφραση του Bax, που διασπάται-κασπάσης-3 και πρωτεΐνες διασπώνται-ΡΑΚΡ και ρυθμισμένα προς τα κάτω την έκφραση της Bcl-2 πρωτεϊνών σε Α549 και Η1299 κύτταρα σε σύγκριση με ακτινοβολία HDR

60Co γ-ray. Ωστόσο, υπήρξε μικρή αλλαγή στο αποπτωτικό δείκτη και την έκφραση της απόπτωσης που σχετίζονται πρωτεΐνες σε φυσιολογικά κύτταρα BEAS-2Β που λαμβάνουν την ίδια μεταχείριση.

Συμπεράσματα

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας οδήγησε σε αξιοσημείωτη αναστολή της ανάπτυξης των Α549 και των κυττάρων Η1299 σε σύγκριση με την ακτινοβολία

60Co HDR γ-ray? Τα κύτταρα Α549 ήταν οι πιο ευαίσθητα στην ακτινοβολία, που ακολουθείται από Η1299 κύτταρα. Αντίθετα, τα φυσιολογικά κύτταρα BEAS-2B ήταν σχετικά ραδιο-ανθεκτικά. Η ανισορροπία του λόγου Bcl-2 /Bax και η ενεργοποίηση των πρωτεϊνών κασπάσης-3 και PARP μπορεί να παίξει καθοριστικό ρόλο στην αντι-πολλαπλασιαστικές επιδράσεις που προκαλούνται από

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR, αν και άλλες δυνατότητες που δεν έχουν αποκλειστεί και θα να διερευνηθεί σε μελλοντικές μελέτες

Παράθεση:. Wang Z, Zhao Z, Lu J, Chen Ζ, ο Μάο Α, Teng G, et al. (2015) Μια σύγκριση των βιολογικές επιδράσεις των

125I Σπόροι Συνεχής χαμηλής δόσης-Rate Ακτινοβολία και

60Co High-Dose-Rate ακτινοβολίας γάμμα για μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα κύτταρα. PLoS ONE 10 (8): e0133728. doi: 10.1371 /journal.pone.0133728

Επιμέλεια: Qinghui Zhang, του Πανεπιστημίου της Νεμπράσκα Ιατρικό Κέντρο, Ηνωμένες Πολιτείες |

Ελήφθη: 23 Ιαν. του 2015? Δεκτές: 1 Ιουλ 2015? Δημοσιεύθηκε: 12 Αυγούστου 2015

Copyright: © 2015 Wang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Νο 12140901402, https://www.nsfc.gov.cn, Φυσικό Ίδρυμα Επιστημών της Κίνας, ZMW? και Νο 20114014, https://www.wsjsw.gov.cn/wsj/n429/n432/n1487/n1508/userobject1ai79649.html, το ταμείο υγείας της πόλης της Σαγκάης και της Επιτροπής Οικογενειακού Προγραμματισμού, ZMW. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή καρκίνο

πνεύμονα είναι η πιο κοινή μορφή καρκίνου και η κύρια αιτία του καρκίνου που σχετίζονται με θανάτους σε πληθυσμούς φύλο ανεξάρτητη, αντιπροσωπεύοντας το 14% όλων των καρκίνων και 28% όλων των θανάτων από καρκίνο που σχετίζονται με όλο τον κόσμο [1, 2] . Ωστόσο, μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) αντιπροσωπεύει περίπου το 80-85% όλων των περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα, και περίπου το 40% αυτών των ασθενών έχουν διαγνωσθεί με προχωρημένο NSCLC ή ιατρικώς μη λειτουργικό ασθένεια με ποσοστό συνολικής επιβίωσης 5-χρόνια μικρότερη . από 15% [1, 3]

Σε ασθενείς που έχουν διαγνωστεί με προχωρημένο NSCLC ή ιατρικά ανεγχείρητο νόσο, η θεραπεία ακτινοβολίας είναι συνήθως μια σημαντική θεραπευτική επιλογή? Αυτή η θεραπεία περιλαμβάνει

60Co γ-ray υψηλής δόσης-επιτόκιο (HDR) ακτινοβολία και

125I σπόρους συνεχής χαμηλή δόση επιτοκίου (CLDR) ακτινοβολία. Αν και εξωτερικά ακτινοθεραπεία εξακολουθεί να είναι μία από τις κύριες μορφές της θεραπείας του καρκίνου για μια ευρεία ποικιλία των κακοήθων ανθρώπινων καρκίνων, έχει σοβαρές παρενέργειες στον περιβάλλοντα υγιή ιστό.

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία προσφέρει πολλά πλεονεκτήματα σε σχέση με την εξωτερική ακτινοθεραπεία, όπως μια τοπική κατανομή της δόσης, φειδωλοί του φυσιολογικού ιστού, ελάχιστη εισβολής, λίγες επιπλοκές, εξαιρετική ανακούφιση του πόνου και τοπικό έλεγχο [4]. Κατά συνέπεια,

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία έχει σταδιακά έχουν χρησιμοποιηθεί στην τοπική θεραπεία των ασθενών με προχωρημένο και μη εγχειρήσιμο καρκίνο του προστάτη, καρκίνο του πνεύμονα, καρκίνο του παγκρέατος, καρκίνο του παχέος εντέρου και του καρκίνου του οισοφάγου [5-9].

Αν και πολλές κλινικές μελέτες έχουν αναφέρει ότι

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR είναι μια εφικτή διαδικασία ανοσοενισχυτικό για τον έλεγχο των τοπικών συμπτωμάτων και να παρατείνει την επιβίωση σε προχωρημένο NSCLC, λίγες μελέτες έχουν καταδείξει τη διαφορά στις βιολογικές επιδράσεις των

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε κύτταρα NSCLC ή τη διαφορά στο radiosensitivitie των κυττάρων NSCLC.

είναι γνωστό ότι τα καρκινικά κύτταρα χαρακτηρίζονται από ανεξέλεγκτο πολλαπλασιασμό και μειωμένη απόπτωση. Για να διατηρηθεί η γονιδιωματική ακεραιότητα, αρκετές οδούς σηματοδότησης επιδιόρθωση του DNA και των ελέγχων του σημείου ελέγχου του κυτταρικού κύκλου ενεργοποιούνται σε απόκριση προς βλάβη προκαλούμενη από ακτινοβολία. Κύτταρα θα υφίστανται απόπτωση ή θανάτου ήταν η βλάβη του DNA δεν επισκευαστεί ή ήταν να συσσωρεύονται επαρκώς [10]. Η απόπτωση είναι ένας κύριος μηχανισμός στην ΙΚ-επαγόμενο κυτταρικό θάνατο και συνηθέστερα γίνεται μέσω των μιτοχονδρίων που εξαρτάται από ενδογενή οδό, η οποία περιλαμβάνει έναν αριθμό γονιδίων που σχετίζονται με απόπτωση όπως Βαχ, Bcl-2, κασπάσης-3 και PARP [11]. Bcl-2 και Bax αποτελούν ένα από τα πιο σημαντικά ζεύγη γονιδίων που ρυθμίζουν την απόπτωση, και η έκφραση τους είναι σχετικά σταθερό κάτω από κανονικές συνθήκες. Όταν το επίπεδο της πρωτεΐνης Bcl-2 είναι αυξημένη, η ενεργοποίηση της πρωτεΐνης κασπάσης-3 αναστέλλεται. Σε αντίθεση, οι αυξήσεις στην έκφραση της πρωτεΐνης Βαχ προάγουν την ενεργοποίηση της πρωτεΐνης κασπάσης-3 και να επάγει την κυτταρική απόπτωση [11, 12]. Caspase-3 είναι το πιο σημαντικό πρωτεΐνη δήμιος, και τα αποτελέσματα της ενεργοποίησης του στην διάσπαση PARP, η οποία σχετίζεται με την επισκευή βλάβης του DNA, και τελικά την απόπτωση [13, 14].

Για να συγκρίνουμε τις ακτινοβιολογικές επιδράσεις των

σπόροι 125I CLDR ακτινοβολία και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray, μελετήσαμε αυτά τα αποτελέσματα στις πιο κοινές παθολογικές τύπους αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα κυττάρων (Α549 και Η1299) και σε ανθρώπινα κανονικά βρογχικών επιθηλιακών κυττάρων (BEAS-2Β). κλάσμα επιβίωση των κυττάρων αναλύθηκε χρησιμοποιώντας κλωνογονική δοκιμασία, διακοπή του κυτταρικού κύκλου που προκαλείται από IR διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας κυτταρομετρία ροής (FCM), και τα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης Bcl-2, ΒΑΧ, που διασπάται-κασπάσης-3 και διασπάται-PARP ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας κηλίδες Western .

Υλικά και Μέθοδοι

συνθήκες

πολιτισμό τηλέφωνα και ακτινοβολία

στην παρούσα μελέτη, το ανθρώπινο αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα κυτταρικών σειρών Α549 και Η1299 και το φυσιολογικό ανθρώπινο βρογχικά επιθηλιακά κυτταρική σειρά BEAS 2Β ήταν ένα δώρο από την ακτινοβολία Biological Laboratory του Πανεπιστημίου Soochow (Suzhou, Κίνα). Τα κύτταρα διατηρήθηκαν σε μέσο Dulbecco’s τροποποιημένου Eagle (ϋΜΕΜ) συμπληρωμένο με FBS (10%), πενικιλλίνη (100 U /ml), και στρεπτομυκίνη (100 g /ml) σε 37 ° C υγροποιημένο επωαστή με 5% CO

2.

στην παρούσα έρευνα, χρησιμοποιήσαμε ένα in-house

125I μοντέλο σπόροι ακτινοβολίας για CLDR [15, 16, 4], το μοντέλο είναι κατασκευασμένο από υλικά πολυστερίνη, και περιλαμβάνει ένα κάτω πλάκα σπόρων στρώμα και ένα άνω στρώμα της πλάκας κυτταρικής καλλιέργειας. Στο στρώμα της πλάκας των σπόρων, οι σπόροι 14 ισαπέχουν εντός εσοχών (4,5 mm × 0,8 mm) γύρω από μια διάμετρο 35 mm (D) περιφέρεια. Έτσι, ένα 6 × 35 mm D περιφέρεια θα μπορούσε να περιέχει 84 σπόρους, και ένα 6 × 35 mm δίσκο καλλιέργειας κυττάρων θα μπορούσε να τοποθετηθεί στο στρώμα της πλάκας καλλιέργειας κυττάρων. Το ύψος (Η) μεταξύ της πλάκας των σπόρων και του πυθμένα του πιάτου κυτταρικής καλλιέργειας ήταν 12 mm, που δίδει ένα λόγο D /H 2.9. Κατά τη διάρκεια της CLDR, η

μοντέλο ακτινοβολίας 125I ήταν πάντα τοποθετούνται σε ένα προβάδισμα κουτί στην θερμοκοιτίδα? ventholes περιελήφθησαν γύρω από το πλαίσιο προβάδισμα για να επιτραπεί η CO

2 που απαιτούνται για την ανάπτυξη των κυττάρων να εισέλθουν και να αφήσει το προβάδισμα κουτί, το οποίο χρησιμοποιήθηκε για την πρόληψη της διαρροής ραδιενέργειας. Μοντέλο BT-125-1

σπόροι 125I αγοράστηκαν από τη Σαγκάη GMS Pharmaceutical Co., LTD. (Σαγκάη, Κίνα). Η δραστηριότητα της ενιαίας σπόρους

125I ήταν 2,5 mCi, και ο αρχικός ρυθμός δόσης ήταν 18,32 cGy /h. Οι χρόνοι έκθεσης που απαιτούνται για την παροχή διαφόρων δόσεων υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας τον ακόλουθο τύπο:. Οι χρόνοι έκθεσης για απελευθέρωση δόσεις των 200, 400, 600 και 800 cGy από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία με αρχικό ρυθμό δόσης 18,32 cGy /ώρα ήταν 10.97, 22.00, 33.08, και 44,23 ώρες, αντίστοιχα.

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray δημιουργήθηκε χρησιμοποιώντας ένα MeV GWXJ80 κοβαλτίου-60 μονάδα τηλεθεραπείας 1,25 (Power Ινστιτούτο Πυρηνικής της Κίνας) στο Κέντρο ακτινοβολίας, Πανεπιστήμιο Soochow (Suzhou, Jiangsu, Κίνα) [17]. Ο ρυθμός δόσης που χρησιμοποιήθηκε ήταν 0.5 Gy /min. Η απόσταση μεταξύ της πηγής ακτινοβολίας και του επιπέδου των κυττάρων ήταν 0.8 m. Οι χρόνοι έκθεσης που απαιτούνται για την παροχή δόσεις των 200, 400, 600 και 800 cGy χρησιμοποιώντας

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray στο αρχικό ρυθμό δόσης 0,5 Gy /min ήταν 4 8, 12 και 16 λεπτά, αντίστοιχα. Τα κύτταρα υποβάλλονται σε εκθετική αύξηση εκτέθηκαν σε

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR ή να

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 2, 4, 6 και 8 Gy. Τα κύτταρα ελέγχου υποβλήθηκαν στην ίδια διαδικασία χωρίς ακτινοβολία (0 Gy).

Κλωνογόνος

δοκιμασία επιβίωσης

Α549, Η1299 και BEAS-2Β κύτταρα που υφίστανται εκθετική ανάπτυξη θρυψινοποιήθηκαν για να σχηματίσουν ένα αιώρημα μονών κυττάρων και σπάρθηκαν σε πλάκες καλλιέργειας 35-mm σε διάφορες αραιώσεις [18] (οι αριθμοί κυττάρων αποφασίζεται σύμφωνα με τη δόση της ακτινοβολίας, ως εξής: 200 κύτταρα ανά τρυβλίο για τον έλεγχο και 2 θεραπείες Gy, 500 κύτταρα για τη θεραπεία 4 Gy, 1000 κύτταρα για την 6 θεραπείας Gy και 4.000 κύτταρα για 8 η θεραπεία Gy). Μετά από Α24-h επώαση, το Α549, Η1299 και BEAS-2Β κύτταρα εκτέθηκαν σε

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR ή να

60Co HDR ακτινοβολία γ-ακτίνων από 0, 2, 4, 6 ή 8 Gy, μετά την οποία τα κύτταρα τοποθετήθηκαν σε επωαστή 37 ° C και καλλιεργήθηκαν για 10-14 d για να σχηματίσει κλώνους. Στη συνέχεια, οι αποικίες σταθεροποιήθηκαν με μεθανόλη και βάφτηκαν με κρυσταλλικό ιώδες. Αποικίες με περισσότερα από 50 κύτταρα μετρήθηκαν ως μονάδες σχηματισμού αποικιών.

Η ανάλυση κυτταρικού κύκλου με κυτταρομετρία ροής (FCM)

Α549, κύτταρα Η1299 και BEAS-2Β υποβάλλονται σε εκθετική ανάπτυξη εκτέθηκαν σε

σπόροι 125I CLDR ακτινοβολία ή

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray από 0, 2, 4, 6 ή 8 Gy. Μετά την ακτινοβολία, τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν συνεχώς για 24 ώρες. Στη συνέχεια, τα κύτταρα θρυψινοποιήθηκαν και φυγοκεντρήθηκαν στα 1000 rpm για 5 λεπτά. Το υπερκείμενο απορρίφθηκε, και τα κύτταρα πλύθηκαν με ψυχρό ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο (PBS) μία έως δύο φορές και σταθεροποιήθηκαν σε 70% αλκοόλη στους 4 ° C όλη τη νύκτα. Τα κύτταρα στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκαν και πάλι και το διάλυμα στερέωσης απορρίφθηκε. Στη συνέχεια, τα κύτταρα πλύθηκαν με ψυχρό PBS μια ή δύο φορές και στη συνέχεια επωάστηκαν με 10 mg /ml ΚΝάση Α και 500 μg /ml ΡΙ στο σκοτάδι για 15-30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου για να προσδιοριστεί η εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου με FCM.

η απόπτωση ανάλυση FCM

Οι τρεις τύπους κυττάρων ακτινοβολούνται με

σπόρους 125I ή

60 C ° 0, 2, 4, 6 ή 8 Gy 24 ώρες μετά τον εμβολιασμό. Στις 48 ώρες μετά την ακτινοβόληση, τα κύτταρα συλλέχθηκαν, επαναιωρήθηκαν σε 500 μΐ ρυθμιστικού διαλύματος και αναμίχθηκαν με 5 μΐ αννεξίνης V-FITC και 5 μΙ PI για 15-30 λεπτά στο σκοτάδι σε θερμοκρασία δωματίου σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή σύνδεσης (Biuniquer τεχνολογία) για να εξετάσει το αποπτωτικό δείκτη για την ομάδα FCM.

κηλίδωση Western

Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα υποβάλλονται σε εκθετική ανάπτυξη εκτέθηκαν σε

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR ή

60Co HDR ακτινοβολία γ-ακτίνων από 0, 4, ή 8 Gy. Τα κύτταρα συλλέχθηκαν, φυγοκεντρήθηκαν και πλύθηκαν δύο φορές με παγωμένο PBS 1 × 24 ώρες μετά την ακτινοβόληση. Ακολούθως, συνολική πρωτεΐνη εκχυλίζεται με ρυθμιστικό διάλυμα λύσης (Beyotime, Κίνα) που περιέχει 1 mM PMSF (Beyotime, Κίνα) και 1 πρωτεάσης ταμπλέτα κοκτέιλ αναστολέα (Roche Applied Science, Mannheim, Germany) προστέθηκαν 10 ml διαλύματος ανά. Στη συνέχεια, η συνολική πρωτεΐνη απομονώθηκε. Μετά από φυγοκέντρηση, το υπερκείμενο μεταφέρθηκε σε νέους σωλήνες. Οι συγκεντρώσεις πρωτεΐνης προσδιορίστηκαν με δοκιμασία BCA (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA). Ένα συνολικό όγκο 20 μΐ δείγματος που περιείχε 50 μg πρωτεΐνης διαχωρίστηκαν με SDS-PAGE και ηλεκτροστυπώθηκαν σε φθοριούχο πολυβινυλιδένιο (PVDF) μεμβράνες (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA). Οι μεμβράνες στη συνέχεια αποκλείστηκαν με 5% άπαχο γάλα σε ΤΒδ-Τ (20 mmol /L Tris-HCl, 150 mmol /L NaCl, και 0.1% Tween-20) για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου και στη συνέχεια επωάστηκαν με το κατάλληλο πρωτογενή αντισώματα όλη τη νύχτα στους 4 ° C. Αφού πλυθεί πλήρως με TBST οι μεμβράνες επωάστηκαν με δευτερεύοντα αντισώματα συζευγμένα με υπεροξειδάση αρμορακίας για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου, μετά την οποία, οι μεμβράνες πλύθηκαν και πάλι με TBST. Στη συνέχεια, οι πρωτεΐνες ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας το σύστημα ενισχυμένης χημειοφωταύγειας (ECL) με προχρωματισμένους δείκτες ως πρότυπα μοριακού μεγέθους

Τα πρωτογενή αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη μας ήταν αντι-β-ακτίνης (1:. Αραίωση 1000, 60008-1 -Ig, Proteintech, USA), αντι-κασπάση-3 (1: 1000 αραίωση, 19677-1-ΑΡ, Proteintech, USA), αντι-ΡΑΚΡ (αραίωση 1: 1000, 13371-1- AP, Proteintech, USA), αντι-Βαχ (αραίωση 1: 1000, 50599-2-Ig, Proteintech, USA) και αντι-ΒοΙ-2 (αραίωση 1: 1000, 12789-1-ΑΡ, Proteintech, USA). Τα δευτερεύοντα αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη μας ήταν ραφανιδική υπεροξειδάση αντίσωμα κατσίκας αντι-αρουραίου IgG (Η + L) (1: 2000, A0192, Beyotime Ινστιτούτο Βιοτεχνολογίας, Κίνα) και υπεροξειδάση κοχλιαρίας σημασμένη IgG αίγας αντι-κουνελιού (Η + L ) (1: 2000., A0208, Beyotime Ινστιτούτο Βιοτεχνολογίας, Κίνα)

Στατιστικές αναλύσεις

Όλα τα αποτελέσματα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± τυπικό σφάλμα (SE) τριών ανεξάρτητων πειραμάτων, και κάθε πείραμα χρησιμοποιήθηκαν τρία παράλληλα δείγματα. Σημαντικές διαφορές στα στοιχεία των διαφόρων ομάδων αξιολογήθηκαν από Φοιτητών

t

test και μονόδρομη ANOVA. Σημαντικότητας ορίστηκε στο P-τιμές κάτω από 0,05.

Αποτελέσματα

Κλωνογόνος επιβίωση

Για να εξεταστεί αν οι αντι-πολλαπλασιαστικές επιδράσεις που προκαλούνται από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία ήταν πιο αποτελεσματικά από εκείνα του

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε Α549, κύτταρα Η1299, και BEAS-2Β και για την ανίχνευση κατά πόσον οι radiosensitivities των τριών κυτταρικών γραμμών ήταν τα ίδια, πραγματοποιήσαμε μια δοκιμασία κλωνογονική επιβίωση. Όπως φαίνεται στο σχήμα 1 (S1 PO), τα κλάσματα επιβίωσης των Α549, Η1299 και BEAS-2Β κύτταρα μετά από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray ήταν σημαντικά μειωμένη σε σύγκριση με εκείνη των κυττάρων ελέγχου ( P & lt? 0,05). Για κύτταρα Α549, το κλάσμα επιβίωσης που επάγεται από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη του

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 4, 6 και 8 Gy (Σχήμα 1Α, Ρ & lt? 0,05)? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν σημαντική σε 2 Gy. Για Η1299 κύτταρα, το κλάσμα επιβίωσης στο

125I σπόρους CLDR ομάδα ακτινοβολία επίσης μειώθηκε σημαντικά σε σύγκριση με εκείνη του

60Co HDR ομάδα ακτινοβολία γ-ray σε 4, 6 και 8 Gy (Σχήμα 1 Β, Ρ & lt? 0,05 ). Ωστόσο, δεν παρατηρήσαμε μια διαφορά στο κλάσμα επιβίωσης μεταξύ φυσιολογικών κυττάρων BEAS-2Β σε αγωγή με τις δύο πηγές ακτινοβολίας στις ίδιες δόσεις (Σχήμα 1 C, Ρ & gt? 0,05). Σχήμα 1δ και 1ε δείχνουν ότι το κλάσμα επιβίωσης από το χαμηλότερο στο υψηλότερο ήταν Α549 & lt? Η1299 & lt? BEAS-2Β τόσο στην

125I σπόρους ομάδα CLDR ακτινοβολία και το

60Co HDR ομάδα γ-ακτίνων-ακτινοβολίας (P & lt? 0,05 .)

AC: η διαφορά στο κλάσμα επιβίωσης των Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα μεταξύ

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co γ-ray HDR ακτινοβολία. * Υποδηλώνει σημαντική διαφορά (P & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση της θεραπείας δύο θεραπείες ακτινοβολίας και ελέγχου, και # υποδεικνύει μια σημαντική διαφορά (P & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co γ-ray HDR ακτινοβολία από τις ίδιες δόσεις. D, E: Η διαφορά στο κλάσμα επιβίωσης των τριών κυτταρικών γραμμών που έλαβαν την ίδια αγωγή. * Υποδηλώνει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05). Μπαρ, τυπικό σφάλμα (SE).

Η

G

1 σύλληψης σε κύτταρα Α549 και G

2 /M σύλληψης σε κύτταρα Η1299 και BEAS-2Β

Για να διερευνήσουν αν

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray προκαλούν διαφορετικούς τύπους διακοπή του κυτταρικού κύκλου, αναλύσαμε την κατανομή του κυτταρικού κύκλου μετά την ακτινοβόληση με τις δύο πηγές ακτινοβολίας σε 0, 2, 4, 6 και 8 Gy . Όπως φαίνεται στο Σχήμα 2 (S2 συνόλου δεδομένων), παρατηρήσαμε G

1 σύλληψης σε κύτταρα Α549 και G

2 /M σύλληψη στην Η1299 και τα κύτταρα BEAS-2B μετά την ακτινοβόληση με

σπόρους 125I και

60Co ακτινοβολία των 4, 6 και 8 Gy σε σύγκριση με τα κύτταρα ελέγχου (Ρ & lt? 0,05)? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν σημαντική σε 2 Gy. Επιπλέον, περισσότερα κύτταρα Α549 ήταν το G

1 φάση και πιο Η1299 κύτταρα σε G

2 /M φάση, μετά

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας από ό, τι μετά από

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 4, 6 και 8 Gy? Αυτή η τάση ήταν δοσοεξαρτώμενη (Εικόνα 2Α και 2Β, Ρ & lt? 0,05). Ωστόσο, δεν υπήρξε σημαντική διαφορά στο G

2 /M σύλληψη μεταξύ

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε φυσιολογικά κύτταρα BEAS-2Β (Σχήμα 2C, η P & gt? 0,05). Μετά

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας 4 Gy, το G ποσοστό των κυττάρων Α549

1 φάση ήταν 70,67 ± 0,86%, και οι G

2 /M ποσοστά φάση για τα κύτταρα Η1299 και BEAS-2Β ήταν 21,77 ± 0,31% και 16,86 ± 0,29%, αντίστοιχα. Ωστόσο, μόνο το 59.59 ± 0.41% των κυττάρων Α549 ήταν το G

1 φάσης και 18.85 ± 0.99% των Η1299 κυττάρων και 15,58 ± 0,48% των κυττάρων BEAS-2Β ήταν στο G

2 /M φάση, μετά

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray των 4 Gy? άλλα δεδομένα όπως φαίνεται στο Σχ 2.

Α: G

1 σύλληψη των κυττάρων Α549 ακτινοβολούνται με τις δύο πηγές ακτινοβολίας? B, C: G

2 /M σύλληψη των κυττάρων Η1299 και BEAS-2B μετά την ακτινοβόληση με τις δύο πηγές ακτινοβολίας. * Υποδηλώνει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση 2, 4, 6 και 8 Gy ακτινοβολία από τις δύο πηγές ακτινοβολίας και ελέγχου (0 Gy) θεραπεία, και # υποδεικνύει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση των δύο ακτινοβολία θεραπείες της ίδιας δόσης. Μπαρ, τυπικό σφάλμα (SE).

Η

αναλογία αποπτωτικά του Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα

απόπτωση των κυττάρων που προκαλείται από IR είναι ένα από τα πιο σημαντικά αποτελέσματα της ακτινοθεραπείας όγκων. Ως εκ τούτου, τα αποπτωτικά αναλογίες Α549, Η1299 και BEAS-2Β κύτταρα μετά από ακτινοβόληση με

σπόρους 125I και

60Co γ-ακτίνες σε 0, 2, 4, 6 και 8 Gy εξετάστηκαν (S3 συνόλου δεδομένων). Όπως φαίνεται στο σχήμα 3Α και 3Β, και τα δύο

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray οδήγησε σε σημαντική αύξηση στην αποπτωτική αναλογία Α549 και Η1299 κυττάρων συγκριτικά με τη θεραπεία ελέγχου στις 4, 6 και 8 Gy (Ρ & lt? 0,05), ενώ ο λόγος αποπτωτικά ήταν παρόμοιο στις 2 Gy μεταξύ των δύο τύπων θεραπείας ακτινοβολίας και του ελέγχου. Όπως ήταν αναμενόμενο,

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία οδήγησε σε υψηλότερο ποσοστό των αποπτωτικών Α549 και Η1299 κύτταρα από ό, τι

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 4, 6 και 8 Gy (Σχήμα 3Α και 3Β, Ρ & lt? 0,05). Ωστόσο, δεν υπήρχε διαφορά στην αποπτωτική αναλογία των κυττάρων BEAS-2Β που λαμβάνουν

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας,

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray ή θεραπεία ελέγχου (Σχήμα 3C, P & gt? 0,05). Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3D και 3Ε, η αποπτωτική αναλογία ήταν Α549 & gt? Η1299 & gt? BEAS-2Β τόσο για το

125I ομάδα σπόρους CLDR ακτινοβολία και το

60Co HDR ομάδα ακτινοβολία γ-ray (P & lt? 0,05). Τα αποπτωτικά λόγοι ήταν 18,09 ± 0,42% και 13,79 ± 0,50% για τα κύτταρα Α549 και Η1299 κύτταρα, αντίστοιχα, μετά

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας 4 Gy. Σε αντίθεση, τα αποπτωτικά αναλογίες ήταν μόνο 9,46 ± 0,42% και 8,79 ± 0,22%, αντίστοιχα, μετά

60Co HDR γ-ray ακτινοβολία 4 Gy? άλλα δεδομένα, όπως φαίνεται στο Σχήμα 3.

AC: η διαφορά στην αποπτωτική αναλογία Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα που έλαβαν

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co γ-ray HDR ακτινοβολία . * Υποδηλώνει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση 2, 4, 6 και 8 Gy ακτινοβολία από τις δύο πηγές ακτινοβολίας και ελέγχου (0 Gy) θεραπεία, και # υποδεικνύει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05) κατά τη σύγκριση των δύο ακτινοβολία θεραπείες ίδιες δόσεις. D, E: η διαφορά στην αποπτωτική αναλογίες των τριών κυτταρικών γραμμών ακτινοβολείται με

σπόρους 125I και

60Co γ-ακτίνες. * Υποδηλώνει μία σημαντική διαφορά (Ρ & lt? 0,05). Μπαρ, τυπικό σφάλμα (SE).

Η

Η ανισορροπία των Bcl-2 και Bax πρωτεΐνες

Οι κλωνογονική δοκιμασία επιβίωσης, ανάλυση κυτταρικού κύκλου και την κυτταρική απόπτωση αποτελέσματα της ανάλυσης που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας FCM δείχνουν ότι οι διαφορές μεταξύ αυτών των δύο μέθοδοι των ακτινοβολία και το κενό ομάδα ελέγχου δεν ήταν σημαντικές σε 2 Gy ακτινοβολίας? Ως εκ τούτου, επιλέξαμε 4 και 8 Gy για χρήση σε αυτή τη μελέτη. Έχει προταθεί ότι η Bcl-2 και Bax αντιπροσωπεύουν μία από τις πιο σημαντικές ζεύγη γονιδίων για τη ρύθμιση της απόπτωσης [19, 20]. Ως εκ τούτου, Bcl-2 και πρωτεΐνη Bax έκφραση ανιχνεύθηκε με δοκιμασία κηλίδος Western. Όπως φαίνεται στο Σχ 4Α και 4Β, οι δύο

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co HDR ακτινοβολία γ-Χ της 4 και 8 Gy μπορούσε significantl πλειορύθμιση της έκφρασης των Bax πρωτεΐνης και ρυθμίζουν προς τα κάτω την έκφραση της Bcl- 2 πρωτεΐνης σε Α549 και Η1299 κυττάρων συγκριτικά με τη θεραπεία ελέγχου. Οι επιπτώσεις που προκαλούνται από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας ήταν περισσότερο εμφανής από ό, τι εκείνα των

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray. Όπως ήταν αναμενόμενο, δεν υπήρξε αύξηση των Bcl-2 και ΒΑΧ έκφρασης σε κύτταρα BEAS-2B μετά την ακτινοβολία είτε με

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία ή

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray (Σχήμα 4C).

Ένα αντιπροσωπευτικό αποτέλεσμα τριών ανεξάρτητων πειραμάτων με τα ίδια αποτελέσματα φαίνεται. Con:. Έλεγχος

Η

Η ενεργοποίηση της κασπάσης-3 και PARP

Η ενεργοποίηση της κασπάσης-3 και ΡΑΚΡ πρωτεΐνες θεωρείται συνήθως τις βιοχημικές χαρακτηριστικά του αποπτωτικού συμβάντος. Ως εκ τούτου, οι πρωτεΐνες διασπώνται-κασπάσης-3 και διασπάστηκε-PARP εξετάστηκαν με δοκιμασία κηλίδος Western. Όπως απεικονίζεται στο σχήμα 5Α και 5Β, οι εκφράσεις του διασπασμένης κασπάσης-3 και πρωτεΐνες διασπασμένης ΡΑΚΡ ήταν πάνω ρυθμισμένα τόσο από

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray. Επιπλέον, τα επίπεδα έκφρασης του διασπασμένης κασπάσης-3 και διασπάται-PARP ήταν πολύ υψηλότερες σε Α549 και Η1299 κύτταρα που είχαν υποβληθεί σε

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία σε σχέση με εκείνα που είχαν υποβληθεί σε

60Co HDR γ- ακτινοβολία ακτίνων. Ωστόσο, καμία διαφορά ήταν εμφανής στα επίπεδα διασπασμένης κασπάσης-3 και πρωτεΐνες διασπώνται-ΡΑΚΡ μεταξύ των κυττάρων BEAS-2Β που εκτίθενται σε

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία,

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray και ακτινοβολία sham (Σχ 5C ).

Ένας εκπρόσωπος αποτέλεσμα τριών ανεξάρτητων πειραμάτων με τα ίδια αποτελέσματα φαίνεται.

η

Συζήτηση

σε αυτή τη μελέτη,

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας οδήγησε σε πιο αξιοσημείωτο Α549 και Η1299 αναστολή της κυτταρικής ανάπτυξης από ό, τι

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray, το οποίο είναι σύμφωνο με τα αποτελέσματα άλλων ερευνών [21]? Ωστόσο, η διαφορά δεν ήταν σημαντική σε 2 Gy για τις δύο θεραπείες ακτινοβολίας. Έχουμε, επίσης, είδε ξεκάθαρα ότι η ραδιοευαισθησία ήταν Α549 & gt? Η1299 & gt? BEAS-2B, η οποία είναι σε συμφωνία με τα αποτελέσματα που αναφέρθηκαν από Masahiko Nishizaki et al. [22]. Τα αποτελέσματά μας επίσης πρότεινε ότι κύτταρα BEAS-2Β είναι ανθεκτικά στην ακτινοβολία σε σχέση με Α549 και Η1299 κύτταρα.

Είναι γνωστό ότι κάθε φάση του κυτταρικού κύκλου περιέχει σημεία ελέγχου που επιτρέπουν τη σύλληψη πρόοδο του κυτταρικού κύκλου σε είτε ενεργοποιούν μηχανισμοί επιδιόρθωσης ή ενεργοποιούν την αποπτωτική καταρράκτη των κυττάρων και θάνατο των κυττάρων μετά από βλάβη του DNA που προκαλείται από IR ή άλλους παράγοντες [23, 24]. Στη μελέτη μας, σημαντική G

1 σύλληψη των κυττάρων Α549 προκλήθηκε περισσότερα από

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR παρά από

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 4, 6 και 8 Gy, η οποία είναι σύμφωνη με άλλες μελέτες η οποία αξιολόγησε του παγκρέατος και καρκίνο του προστάτη κύτταρα [25, 26]. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειώσουμε ότι υπήρξαν και κάποιες διαφορές. Για παράδειγμα, Junjie Wang ανέφεραν ότι

125I σπόρους ακτινοβολία CLDR οδήγησε σε μακροχρόνια G

2 /M σύλληψη των κυττάρων Α549 σε 4 Gy με αρχικό ρυθμό δόσης 2,77 cGy /h [21], η οποία είναι σε αντίθεση με την σημαντική G

1 σύλληψης με αρχικό ρυθμό δόσης 18,32 cGy /h παρατηρήθηκαν στη μελέτη μας. Η διαφορά στην αρχική ρυθμού δόσης και μία ποικιλία άλλων παραγόντων, όπως η κατάσταση των κυττάρων μπορεί, τουλάχιστον εν μέρει, αντιπροσωπεύουν τη διαφορά αυτή. Οι ειδικοί μηχανισμοί που διέπουν αυτό το φαινόμενο είναι άγνωστοι. Ωστόσο, υπήρχε G

2 /M σύλληψης σε κύτταρα Η1299 και BEAS-2Β που λαμβάνουν την ίδια μεταχείριση. Geyer και συνεργάτες ανέφεραν G

1 σύλληψης σε κύτταρα Α549 και G

2 /M συλλήψεως Η1299 κύτταρα κάτω από τις ίδιες συνθήκες ακτινοβόλησης, και καμία G

1 σύλληψης παρατηρήθηκε σε IR-κατεργασμένα κύτταρα που στερούνται της ρ53 [27]. Τα αποτελέσματα αυτά είναι παρόμοια με τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης. Αν και υπήρχε σημαντική G

2 /M σύλληψη των φυσιολογικών κυττάρων BEAS-2B, η έκταση της G

2 /M σύλληψης που προκλήθηκαν από τις δύο πηγές ακτινοβολίας ήταν παρόμοια, η οποία είναι συνεπής με την ικανότητα σχηματισμού αποικιών που παρατηρήθηκαν σε η παρούσα μελέτη.

η απόπτωση, γνωστή και ως προγραμματισμένος κυτταρικός θάνατος, είναι ο κύριος μηχανισμός του IR-επαγόμενο κυτταρικό θάνατο. Για να διατηρηθεί η γονιδιωματική ακεραιότητα, πολλαπλές οδούς επιδιόρθωσης του DNA σηματοδότησης και ελέγχου σημείου ελέγχου κύκλου κυττάρου ενεργοποιούνται σε απόκριση προς βλάβη προκαλούμενη από ακτινοβολία, αλλά αν αυτές οι διαδικασίες επιδιόρθωσης αποτυγχάνουν ή ανεπανόρθωτη βλάβη συσσωρεύεται σε ορισμένο βαθμό, την κυτταρική απόπτωση ή κυτταρικός θάνατος επάγεται [10] . Σύμφωνα με τις παρατηρήσεις μας,

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία οδήγησε σε υψηλότερο ποσοστό των αποπτωτικών Α549 και Η1299 κύτταρα από ό, τι

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray, ενώ η αποπτωτική αναλογία των κυττάρων BEAS-2Β που προκαλείται από τις δύο πηγές ακτινοβολίας στις 2, 4, 6 και 8 Gy ήταν παρόμοια με εκείνη των κυττάρων ελέγχου, η οποία ήταν σύμφωνη με άλλες μελέτες [19]. Στη μελέτη μας, η διαφορά μεταξύ των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται με τη χρήση

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία και

60Co ακτινοβολία γάμμα HDR ray μπορεί να φαίνεται περίεργο. Για Χ ή ακτίνες γ, ρυθμός δόσης είναι από τους κύριους παράγοντες που καθορίζουν τις βιολογικές συνέπειες μιας δεδομένης απορροφούμενη δόση? καθώς ο ρυθμός δόσης μειώνεται και ο χρόνος έκθεσης παραταθεί, η βιολογική δράση της χορηγούμενης δόσης γενικά μειώνεται [28]. Ωστόσο, όταν ο ρυθμός δόσης μειώνεται σε λιγότερο από 1 Gy /h, μειώνοντας τον ρυθμό δόσης θα μπορούσε να οδηγήσει σε αυξημένη θανάτωση κυττάρων? Αυτή η επίδραση έχει ονομάστηκε ένα αποτέλεσμα αντίστροφη δόση-ρυθμό και χαμηλή δόση υπερ-ακτινοευαισθησία (HRS) [29].

Στη μελέτη μας, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας μια δοκιμασία κλωνογονική επιβίωση, την ανάλυση του κυτταρικού κύκλου και την κυτταρική ανάλυση απόπτωσης χρησιμοποιώντας FCM πρότεινε ότι οι διαφορές μεταξύ της ομάδας θεραπείας δοκιμάστηκαν ακτινοβολίας και του τυφλού ομάδα ελέγχου δεν ήταν σημαντικές κατά 2Gy? Ως εκ τούτου, εστιάσαμε σχετικά με τις πιθανές μοριακών μηχανισμών που διέπουν την πιο ξεχωριστή αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση του

125I σπόρους CLDR ακτινοβολίας σε σύγκριση με το

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray σε 4 και 8 Gy.

Η απόπτωση συνηθέστερα συμβαίνει μέσω μιτοχόνδρια που εξαρτάται από ενδογενή οδό, η οποία είναι μια πολύπλοκη διαδικασία που περιλαμβάνει μια σειρά από πρωτεΐνες σχετίζονται με την απόπτωση, συμπεριλαμβανομένων της κασπάσης-3, PARP, Βαχ και Bcl-2 et al. [11]. Η λειτουργία των πρωτεϊνών Bcl-2, γνωστή επίσης και ως πρωτεΐνη προ-επιβίωσης Bcl-2, είναι να αναστέλλουν την απόπτωση και παρατείνει την επιβίωση των κυττάρων. Υπερ-έκφραση της πρωτεΐνης Bcl-2 σχετίζεται με κακή απόκριση σε θεραπεία καρκίνου του πνεύμονα [30]. Bax, μια προ-αποπτωτική πρωτεΐνη της οικογένειας Bcl-2, παίζει ένα ρόλο κλειδί στην διαμεσολάβηση της αποπτωτικής απόκρισης [12]. Η αναλογία του Bcl-2 για να Bax θεωρείται συνήθως ένας καθοριστικός στην έναρξη της απόπτωσης [31]. Caspase-3 πρωτεΐνη είναι η πιο σημαντική πρωτεΐνη εκτελεστή. Η λειτουργία του PARP είναι η ρουτίνα επιδιόρθωση της βλάβης του DNA, και PARP είναι το κύριο υπόστρωμα της κασπάσης-3. Ως εκ τούτου, η ενεργοποίηση των πρωτεϊνών κασπάσης-3 και PARP ήταν συνήθως θεωρούνται οι βιοχημικές χαρακτηριστικά της απόπτωσης [30, 32]. Στη μελέτη μας, η ανισορροπία μεταξύ των πρωτεϊνών Bcl-2 και πρωτεΐνη ΒΑΧ και τα υψηλότερα επίπεδα διασπαστεί-κασπάσης-3 και πρωτεΐνες διασπώνται-PARP θα μπορούσε εν μέρει να προωθηθεί η αυξημένη απόπτωση φαίνεται στο Α549 και Η1299 κυττάρων μετά την ακτινοβόληση με

σπόρους 125I σε σύγκριση με το

60Co γ-ακτίνες. Για ένα κύτταρο να επιβιώσει από την θανατηφόρα βλάβη του DNA DSBs που προκαλείται από την έκθεση ακτινοβολίας πρέπει να ανιχνεύονται γρήγορα, και πρέπει να ξεκινήσει μηχανισμούς επιδιόρθωσης του DNA. Μερικοί ερευνητές έχουν δείξει ότι η μεγαλύτερη θανάτωση κυττάρων που προκαλείται από την αναποτελεσματική ενεργοποίηση ή χαμηλότερη ενεργοποίηση του (ΑΤΜ) γονίδιο τηλαγγειεκτασία μεταλλαγμένη αταξία αισθητήρα βλάβη του DNA σε κύτταρα ακτινοβολούνται σε χαμηλή δοσολογία (LDR) ακτινοβολία σε σύγκριση με υψηλό ρυθμό δόσης (HDR) ακτινοβολία ακόμη και όταν το DNA έχει ήδη υποστεί βλάβη. Επιπλέον, οι ATM που συνδέεται με μονοπάτια επιδιόρθωσης ενδέχεται να μην ενεργοποιούνται μετά από ακτινοβόληση με ακτινοβολία LDR [33, 28]. IR είναι γνωστό ότι προκαλεί G

2 /Μ ή G

1 σύλληψης και να επάγει απόπτωση σε ακτινοβολημένα κύτταρα [19]. Ωστόσο, στην παρούσα μελέτη, οι δύο θεραπείες ακτινοβολία προκάλεσε μία ελαφρά μείωση στο κλάσμα επιβίωσης και σημαντικές G

2 /M σύλληψης, αλλά απέτυχε να διεγείρει σημαντικές απόπτωση σε κύτταρα BEAS-2Β.

Συμπεράσματα

Εν κατακλείδι, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι

125I σπόρους CLDR ακτινοβολία οδηγεί σε πιο αξιοσημείωτη αναστολή της ανάπτυξης των Α549 και Η1299 κύτταρα από εκείνο του

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray. Βρήκαμε επίσης ότι τα κύτταρα Α549 ήταν το πιο ευαίσθητο στην ακτινοβολία, που ακολουθείται από Η1299 κύτταρα, ενώ κύτταρα BEAS-2B ήταν πιο ανθεκτικά στις δύο θεραπείες ακτινοβολίας από Α549 και Η1299 κύτταρα. Επιπλέον, αυτή η μελέτη έδειξε ότι μια ανισορροπία του λόγου /Bax Bcl-2 και την ενεργοποίηση της κασπάσης-3 και των πρωτεϊνών ΡΑΚΡ θα μπορούσε εν μέρει ευθύνονται για την αντι-πολλαπλασιαστική δράση που προκαλείται στα Α549 και κύτταρα Η1299 με

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR. Ωστόσο, αυτή η μελέτη επικεντρώθηκε μόνο στα γεγονότα σχετίζονται με την απόπτωση και δεν επικεντρώνονται σε βάθος για τον κυτταρικό κύκλο επισκευή βλάβης του DNA και τα σημεία ελέγχου λόγω των περιορισμών του χρόνου και τη χρηματοδότηση. Παρ ‘όλα αυτά, τα στοιχεία μας δείχνουν κάποιες θεμελιώδεις ακτινοβιολογικές επιδράσεις στα κύτταρα NSCLC όταν υποβάλλονται σε

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR.

Υποστήριξη Πληροφορίες

S1 συνόλου δεδομένων. Τα κλάσματα επιβίωση των Α549, κύτταρα Η1299 και BEAS-2Β μετά

ακτινοβολία 125I σπόρους CLDR και

60Co HDR ακτινοβολία γ-ray

doi:. 10.1371 /journal.pone.0133728.s001

(DOC )

S2 συνόλου δεδομένων. Η κατανομή του κυτταρικού κύκλου μετά την ακτινοβόληση με

σπόρους 125I και

60Co γ-ακτίνες. (%)

Doi: 10.1371 /journal.pone.0133728.s002

(DOC)

S3 συνόλου δεδομένων. Τα αποπτωτικά αναλογίες Α549, Η1299 και BEAS-2B κύτταρα μετά από ακτινοβόληση με

σπόρους 125I και

60Co γ-ακτίνες. (%)

Doi: 10.1371 /journal.pone.0133728.s003

(DOC)