Abstract

C-αντιδρώσα πρωτεΐνη (CRP) είναι μια καθιερωμένη δείκτη φλεγμονής με δραστηριότητες υποδοχέα σαν πρότυπο αναγνώρισης. Παρά τη στενή σχέση του επιπέδου της CRP με τον κίνδυνο και την πρόγνωση των πολλών τύπων καρκίνου του ορού, παραμένει άπιαστο αν CRP συμβάλλει άμεσα στην ογκογένεση ή απλά να αντιπροσωπεύει έναν δείκτη των παρευρισκομένων. Έχουμε εντοπίσει πρόσφατα επαναλαμβανόμενες μεταλλάξεις στη θέση SNP -286 (rs3091244) στον προαγωγό του

CRP

γονιδίου σε διάφορους τύπους όγκων, γεγονός που υποδηλώνει ότι αντί τοπικά παραγόμενων CRP είναι ένας πιθανός οδηγός της ογκογένεσης. Ωστόσο, είναι άγνωστο εάν η τοποθεσία -286 είναι η μόνη θέση SNP του

CRP

γονίδιο στόχο για μετάλλαξη και αν υπάρχει κάποια συσχέτιση μεταξύ της

CRP

μεταλλάξεις SNP και άλλα συχνά μεταλλαγμένα γονίδια στους όγκους . Στο παρόν, έχουμε εξετάσει τους γονότυπους των τριών κοινών

CRP

μη-κωδικοποίησης SNPs (rs7553007, rs1205, rs3093077) σε όγκο κανονική ζεύγη /δείγμα των 5 τύπων καρκίνου (n = 141). Δεν επαναλαμβανόμενες σωματικές μεταλλάξεις που βρέθηκαν σε αυτές τις SNP θέσεις, υποδεικνύοντας ότι οι -286 SNP μεταλλάξεις κατά προτίμηση επιλέγονται κατά την ανάπτυξη του καρκίνου. Περαιτέρω ανάλυση αποκαλύπτει ότι τα -286 SNP μεταλλάξεις του

CRP

τείνουν να συνυπάρχουν με μεταλλαγμένο

APC

ιδιαίτερα στον καρκίνο του ορθού (

σ

= 0,04? N = 67) . Αντίθετα, οι μεταλλάξεις του

CRP

και

p53

ή

K-ras

φαίνεται να είναι άσχετη. Υπάρχουν αποτελέσματα που υπογραμμίζουν τη λειτουργική σημασία του -286 μετάλλαξη του

CRP

στην ογκογένεση και συνεπάγεται μια αλληλεπίδραση μεταξύ CRP και της οδού σηματοδότησης Wnt

Παράθεση:. Su ΗΧ, Zhou HH, Wang ΜΟΥ, Cheng J, Zhang SC, Hui F, et al. (2014) Μεταλλάξεις του

C-αντιδρώσα πρωτεΐνη

(

CRP

) -286 SNP,

APC

και

p53

στον Καρκίνο του παχέος εντέρου: Επιπτώσεις για μια CRP-Wnt παρεμβολής. PLoS ONE 9 (7): e102418. doi: 10.1371 /journal.pone.0102418

Επιμέλεια: Qing Τραγούδι, Morehouse Ιατρική Σχολή, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 5 Μάρτη του 2014? Αποδεκτές: 18 Ιουνίου 2014? Δημοσιεύθηκε: 15 Ιουλίου 2014

Copyright: © 2014 Su et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα στοιχεία που περιλαμβάνονται στο έγγραφο

Χρηματοδότηση:. Η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Υπουργείο Επιστήμης και Τεχνολογίας της Κίνας [αριθμός επιχορήγηση 2011CB910500]? το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας [αριθμών επιχορήγηση 30930024, 31222015, 31270813, 31170696]? το Υπουργείο Παιδείας της Κίνας [αριθμών επιχορήγηση PCSIRT: IRT1137, 121.108]? Gansu επαρχία [αριθμός επιχορήγησης: 1011FKCA089]? και του Πανεπιστημίου Lanzhou [αριθμούς επιχορήγησης: lzujbky-2013-bt05, lzujbky-2014-86]. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

η φλεγμονή είναι απαραίτητη για την ανάπτυξη του καρκίνου [1], [2]. Ως ένα σημαντικό αντιδραστήριο ανθρώπινης οξείας φάσης, C-αντιδρώσα πρωτεΐνη (CRP) χρησιμοποιείται ευρέως ως μη ειδικός δείκτης φλεγμονής [3], [4]. Ωστόσο, συσσωρεύοντας αποδείξεις έχει αποκαλύψει μια στενή συσχέτιση ανάμεσα στο επίπεδο του ορού της CRP και του κινδύνου και την πρόγνωση του καρκίνου του [5]. Λαμβάνοντας υπόψη τις εικαζόμενες λειτουργίες της CRP στην άμυνα του ξενιστή και την έμφυτη ανοσία [6], [7], είναι εύλογο ότι η CRP μπορεί να παίζει άμεσο ρόλο στην ογκογένεση. Πράγματι, η CRP έχει αναφερθεί για την πρόληψη της απόπτωσης των κυττάρων του μυελώματος [8] και να διευκολυνθεί η διεισδυτικότητα των καρκινικών κυττάρων του μαστού [9]. Επιπλέον, η CRP μπορεί να συμβάλει στην δημιουργία ευνοϊκού μικροπεριβάλλον του όγκου μέσω της προώθησης της αγγειογένεσης [10], με αναστολή της καταστροφική ενεργοποίηση του συμπληρώματος [11], [12], και επάγοντας προφλεγμονώδεις κυτταροκίνες από την ανοσολογική και ενδοθηλιακά κύτταρα [3], [ ,,,0],13], [14].

από την άλλη πλευρά, πολυμορφισμοί ενός νουκλεοτιδίου (SNPs) που συνδυάζονται με γενετικά αυξημένες συγκεντρώσεις CRP δεν παρέχουν αυξημένο κίνδυνο καρκίνου στο γενικό πληθυσμό [15]. Αυτό υποδηλώνει ότι κυκλοφορούν CRP δεν είναι αιτιολογικά εμπλέκεται στην ογκογένεση. Περιέργως, σε αντίθεση με τις προαναφερθείσες δραστηριότητες προ-καρκίνου, πρώιμες μελέτες έχουν επίσης τεκμηριωθεί δράσεις κατά του καρκίνου της CRP μέσω ενεργοποίησης μακροφάγων /μονοκυττάρων [16] – [18]. Κατά συνέπεια, ήταν δύσκολο να καθοριστεί εάν CRP είναι αποκλειστικά ένας παθητικός δείκτη ή ένα ενεργό παίκτη στον καρκίνο, ή να τεμαχίσει την ακριβή συμβολή της CRP στην ογκογένεση

Serum CRP παράγεται από ηπατοκύτταρα του ήπατος.? Ωστόσο, συσσωρεύοντας απόδειξη αποκαλύπτει επίσης μια τοπική παραγωγή της CRP με εξω-ηπατικά κύτταρα [3], [19]. Είναι ενδιαφέρον, έχουμε βρει πρόσφατα ότι ο υποκινητής του

CRP

ειδικά μεταλλαγμένο στη θέση SNP (rs3091244) 286 bp ανοδικά της θέσης έναρξης της μεταγραφής σε 109 από 453 δείγματα όγκων, αλλά όχι στα συμφωνημένα φυσιολογικούς ελέγχους [19 ]. Αυτές οι μεταλλάξεις που σχετίζονται με αυξημένη τοπική

CRP

επαγωγή σε όγκους πιθανόν μέσω διακοπής του διατηρημένου CpG μεθυλίωση μοτίβο. Επιπλέον, τα περισσότερα από τα είδη του καρκίνου που εξετάστηκαν λιμάνι ο -286 μετάλλαξη και το κλάσμα της μεταλλαγμένης αλληλόμορφο είναι υψηλή (0.487, 95% CI: 0,477 – 0,517). Τα ευρήματα αυτά υποστηρίζουν έτσι το ρόλο της CRP παράγεται

in situ

ως πιθανός οδηγός καρκίνος που πιθανώς εμπλέκονται σε γενικούς μηχανισμούς που ευνοούν την ογκογένεση [19].

Εκτός από το -286 SNP, υπάρχουν αρκετές πρόσθετη κοινή μη-κωδικοποίησης SNPs που επηρεάζουν σημαντικά τα αρχικά επίπεδα της CRP στον ορό. Οι εκπρόσωποι περιλαμβάνουν rs7553007, rs1205, και rs3093077 [15], [20], [21]. Είναι συνεπώς ενδιαφέρον αν αυτές οι SNP θέσεις επίσης στόχο για μετάλλαξη σε όγκους. Δείχνουμε εδώ με προσδιορισμό του γονότυπου των 141 όγκου κανονική ζεύγη /δείγμα που δεν επαναλαμβανόμενες μεταλλάξεις συμβαίνουν στο 3

CRP

sites SNP, τονίζοντας έτσι ότι οι -286 μεταλλάξεις είναι εξαιρετικά ειδικό για ογκογένεση. Εξετάσαμε περαιτέρω εάν υπάρχει οποιαδήποτε συσχέτιση μεταξύ των -286 μεταλλάξεις του

CRP

και άλλα συχνά μεταλλαγμένα γονίδια στους όγκους. Η εντοπιστεί συσχέτιση μεταξύ του -286 και

APC

μεταλλάξεις συνεπάγεται μια αλληλεπίδραση της CRP με σηματοδότηση Wnt.

Υλικά και Μέθοδοι

Κατεψυγμένα όγκου /φυσιολογικό ζευγών δειγμάτων ιστού ελήφθησαν από η τράπεζα ιστών του όγκου Νοσοκομείο Gansu Provincial. Γονιδιωματικό DNA απομονώθηκε από ιστούς ή δείγματα αίματος χρησιμοποιώντας Αντιδραστήριο DNAiso ή αίμα Γονιδιώματος DNA Extraction Kit (Takara) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Για την ταυτοποίηση των μεταλλάξεων του γονιδίου, γονιδιακό DNA ενισχύθηκε με ειδικούς εκκινητές (ανθρώπινο

CRP

: προς τα εμπρός: 5′-AGGGGGGAGGGATAGCATTAGAA-3 ‘? Αντίστροφος: 5′-CGTCCTGCTGCCAGTGATACAAG-3’? Ανθρώπινο

ρ53

: προς τα εμπρός: 5′-CTGTCCCTTCCCAGAAAACCT-3 ‘? αντίστροφη: 5′-CCTGGGCATCCTTGAGTTC-3’? ανθρώπινα

APC

: προς τα εμπρός: 5′-TAATACCCTGCAAATAGCAGAAATA-3 ‘? αντίστροφη: 5’-GTGGCAAAATGTAATAAAGTATCAG-3 «? ανθρώπινο

K-ras

: προς τα εμπρός: 5′-ATGACTGAATATAAACTTGTGGTA-3 ‘? αντίστροφος: 5′-CAACACCCTGTCTTGTCTT-3’) που ακολουθείται από ανάλυση αλληλουχίας. Γονότυπων του 24 SNPs (rs7553007, rs1205, rs3093077, rs4073, rs1143627, rs720816, rs723504, rs1876054, rs746961, rs2371923, rs487616, rs953183, rs400328, rs950487, rs759394, rs726402, rs1568645, rs929689, rs2254896, rs1951096, rs1843026, rs1543193, rs718015 , rs16091) πραγματοποιήθηκε από την φασματομετρία μάζας-based υπηρεσία Sequenom (Genergy Βιοτεχνολογίας, Σαγκάη, Κίνα). Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από τους ασθενείς. Όλοι οι ασθενείς είναι Κινέζοι. Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ηθικής του όγκου Νοσοκομείου Gansu Provincial.

Αποτελέσματα

Δεν υπάρχουν επαναλαμβανόμενες σωματικές μεταλλάξεις συμβαίνουν σε 3 κοινά

CRP

sites SNP σε όγκους

Για να δούμε αν άλλες μη-κωδικοποίησης SNP θέσεις

CRP

μεταλλάσσονται σε όγκους, προσδιορίσαμε τους γονότυπους των 3

CRP

κοινή SNPs (rs7553007, rs1205, και rs3093077) μαζί με 21 επιπλέον SNPs σε 141 όγκων κανονική ζεύγη /δείγμα 5 τύπους καρκίνου,

δηλαδή

γαστρικού, του πνεύμονα, του οισοφάγου, του παχέος εντέρου και του ορθού. Οι συχνότητες αλληλομόρφων συνδέεται με χαμηλότερα επίπεδα CRP είναι 48,9% για το Α αλληλόμορφο του rs7553007, 47,9% για τα Τ αλληλόμορφο του rs1205, και 79,1% για τα Τ αλληλόμορφο του rs3093077 σε φυσιολογικά δείγματα (Πίνακας 1), παρέχοντας έτσι επαρκή μεγέθη δείγματος για την ανίχνευση της επαναλαμβανόμενες μεταλλάξεις. Ως εκ τούτου, εντοπίσαμε μόνο 1 περίπτωση G & gt? Μια μετάλλαξη στο rs7553007, 0 περίπτωση μετάλλαξης σε rs1205, και 2 περιπτώσεις G & gt? Τ μεταλλάξεις στο rs3093077 στα αντίστοιχα δείγματα όγκων. Μια τέτοια χαμηλή συχνότητα σωματικής μετάλλαξης βρέθηκε επίσης για άλλες 21 εξετάστηκαν μη-κωδικοποίησης θέσεις SNP κατανεμημένα σε 9 διαφορετικά χρωμοσώματα (Σχήμα 1). Αυτά δείχνουν ότι, σε αντίθεση με τις υψηλά επαναλαμβανόμενο

CRP

-286 SNP (rs3091244) μεταλλάξεις [19], το 3

CRP

θέσεις SNP προσδιορίστηκαν στο παρόν είναι μόνο τυχαία μεταλλαγμένα σε όγκους στο παρασκήνιο συχνότητα μετάλλαξης.

3

CRP

SNPs (rs7553007, rs1205, και rs3093077) και 21 επιπλέον SNPs των 141 όγκου κανονική ζεύγη /δείγμα γονότυπος από Sequenom. Αυτά τα δείγματα συλλέχθηκαν από 37 γαστρικό, 12 πνευμόνων, 27 οισοφάγου, του παχέος εντέρου και 24 41 ασθενείς καρκίνο του ορθού. (Α) Οι συχνότητες μετάλλαξης σε κάθε θέσεις SNP. Κανένα από αυτά τα sites είναι recurrently μεταλλαχθεί σε όγκους. Η συχνότητα του

CRP

-286 SNP (rs3091244) μετάλλαξη σε αυτά τα δείγματα παρουσιάζεται για σύγκριση. (Β) Οι συγκεντρωτικές συχνότητες μετάλλαξης του SNPs με ή χωρίς σχετιζόμενη γονίδια. Γονίδιο που σχετίζεται με χώρους SNP τείνουν να εμφανίζουν χαμηλότερες συχνότητες μετάλλαξης αν και χωρίς να φθάσει στατιστική σημασία (δύο δείγματος

t

δοκιμή, δύο-ουρά,

σ

= 0,47).

Η

Σύμφωνα με τα αποτελέσματα του γονότυπου, οι συχνότητες μετάλλαξης των χώρων SNP με και χωρίς συνδέονται γονίδια είναι 0,97% (95% CI: 0,35 – 1,59%) και 1,30% (95% CI: 0,78 – 1,82%), αντίστοιχα . Αν και δεν είναι στατιστικά σημαντική, αυτό υποδηλώνει ότι το γονίδιο που σχετίζεται με θέσεις SNP τείνουν να είναι λιγότερο επιρρεπείς σε τυχαία μετάλλαξη από εκείνες με άγνωστη ένωση, πιθανώς λόγω των περιορισμών που περιορίζουν ζημιές σε γονιδιωματική loci με λειτουργική σημασία. Του γονιδίου που σχετίζεται με SNPs, rs1143627 και rs4073 είναι δύο SNPs υποκινητή που εντοπίζονται στην 31 και 199 bp ανοδικά των θέσεων έναρξης μεταγραφής του

IL-1β

και

IL-8

, αντίστοιχα. χαμηλές συχνότητες μετάλλαξης τους (0.7-1.4%) υποστηρίζουν ότι ο εντοπισμός υποστηρικτής

per se

δεν είναι πιθανόν η αιτία σωματική υπερμετάλλαξη σε το

CRP

-286 SNP -site σε όγκους? μάλλον, η υψηλή συχνότητα της μετάλλαξης -286 θα ήταν το αποτέλεσμα της λειτουργικές συνέπειες που σχετίζονται με την αυξημένη διέγερση

CRP

, η οποία μπορεί να προσδώσει κλώνους κυττάρου ξενιστή επαρκείς πλεονέκτημα να επιβιώσουν και να επεκτείνουν την ανάπτυξη του καρκίνου.

CRP

-286 SNP μετάλλαξη σχετίζεται με μεταλλαγμένο

APC

στην ορθού

Το

CRP

-286 SNP μετάλλαξη είναι πιο διαδεδομένη σε καρκίνους του παχέος εντέρου [19], στο οποίο

p53

,

K-ras

και

APC

είναι μεταξύ των πιο συχνά μεταλλαγμένα γονίδια που προάγουν την ογκογένεση μέσω διακεκριμένων μηχανισμών [22 ] – [24]. έτσι επιδιώξαμε να εξετάσει κατά πόσον υπάρχει σύνδεση μεταξύ αυτών των γεγονότων μετάλλαξης. Μεταλλαγμένα

p53

,

K-ras

και

APC

ταυτοποιήθηκαν με προσδιορισμό της αλληλουχίας των αντίστοιχων περιοχών μετάλλαξης hotspot τους,

δηλαδή

301 έως 1044 του

p53

, 24-442 του

K-ras

, και 3922 έως 4453 του

APC

σε cDNA κυμαίνεται ακολουθία, σύμφωνα με τα στατιστικά στοιχεία της κοσμικής βάσης δεδομένων. Παρά την υψηλή συχνότητα εμφάνισης τους (περίπου 50%), η

CRP-

286 SNP μετάλλαξη δεν δείχνει εμφανή συσχέτιση με μεταλλαγμένες

p53

(n = 35? Πίνακα 2 και Σχήμα 2Α.) Ή

K-ras

(n = 35? πίνακα 3 και το Σχήμα 2Β.). Η έλλειψη σύνδεσης μεταξύ των

p53

και το

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP επιβεβαιώθηκε επίσης σε καρκίνο του οισοφάγου (n = 36?. Πίνακα 4 και Σχήμα 2C), όπου

p53

αντιπροσωπεύει την πιο συχνά μεταλλαγμένο γονίδιο.

το

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP δεν δείχνουν συσχέτιση με μεταλλαγμένες

p53

ή

K-ras

στην κόλον (ΑΒ) ή τον οισοφάγο καρκίνους (C) (ακριβής δοκιμασία του Fisher, two-tailed). Κάθε ορθογώνιο αντιπροσωπεύει ένα δείγμα όγκου με γκρι χρώμα υποδηλώνει άγρια ​​κατάσταση τύπου. Τα ιστογράμματα στα δεξιά δείχνουν τα ποσοστά των ασθενών που φέρουν τις μεταλλάξεις που αναφέρονται στις δύο ομάδες ασθενών με ή χωρίς CRP-286 μεταλλάξεις.

Η

Η

Αντίθετα, δύο φορές σε εμπλουτισμό μεταλλαγμένων

APC

παρατηρήθηκαν σε όγκους του παχέος εντέρου με ταυτόχρονη

CRP

-286 SNP μεταλλάξεις (n = 38? Πίνακας 5 και Σχήμα 3Α). Ωστόσο, μια τέτοια συσχέτιση δεν έφτασε τη στατιστική σημαντικότητα πιθανώς λόγω του περιορισμένου μεγέθους του δείγματος που θα μπορούσε να λάβει. Έχουμε έτσι εξετάστηκε περαιτέρω 67 όγκου /φυσιολογικό ζευγών δειγμάτων του καρκίνου του ορθού (Πίνακας 6 και Σχήμα 3Β), η οποία είναι πολύ παρόμοια με καρκίνο του παχέος εντέρου τόσο στο κυτταρικό τύπο προέλευση και γονιδιωματικών μεταβολών [25] δείχνει υψηλή συχνότητα εμφάνισης και των δύο

APC

[25] και οι

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP [19]. Πράγματι, η συνύπαρξη αυτών των δύο μεταλλάξεις σε αυτό το σύνολο του δείγματος έγινε πιο εμφανής (αναλογία πιθανοτήτων: 5,56, 95% CI: 1,17 – 26,36) και σημαντική (

σ

= 0.04). ως εκ τούτου τα αποτελέσματα αυτά υποδεικνύουν ότι η CRP και APC μπορούν να συνεργάζονται σε επικαλυπτόμενα μονοπάτια κατά την ανάπτυξη του καρκίνου του παχέος εντέρου.

Το

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP τείνουν να συνυπάρχουν με το

APC

μεταλλάξεις στο κόλον (Α) (ακριβής δοκιμασία του Fisher, δίπλευρη,

σ

= 0,47) και του ορθού (Β) (ακριβής δοκιμασία του Fisher, δίπλευρη,

σ

= 0.04 ). Κάθε ορθογώνιο αντιπροσωπεύει ένα δείγμα όγκου με γκρι χρώμα υποδηλώνει άγρια ​​κατάσταση τύπου. Τα ιστογράμματα στα δεξιά δείχνουν τα ποσοστά των ασθενών που φέρουν APC μεταλλάξεις σε δύο ομάδες ασθενών με ή χωρίς CRP-286 μεταλλάξεις.

Η

Η

Συζήτηση

Το

in vitro

δραστηριότητες της CRP [3], [4], [6], [11], [13], [14], όπως η αναγνώριση ενδογενών ή εξωγενών σημάτων κινδύνου, ρύθμιση της ενεργοποίησης του συμπληρώματος, επαγωγή των προφλεγμονωδών αποκρίσεων των κυττάρων, να οδηγήσει στην ιδέα ότι η CRP μπορεί να λειτουργήσει ως διαλυτός υποδοχέας αναγνώρισης προτύπων στην έμφυτη ανοσία και άμυνα του ξενιστή [6], [7]. Ωστόσο, η έλλειψη συνεπούς υποστήριξης από την έρευνα σχετικά με τα ζωικά μοντέλα [26] – [34], ανθρώπινα υποκείμενα [35], [36] και τη γενετική επιδημιολογία [15], [20], [21], [37] καθιστά αβέβαιο αν CRP παίζει σημαντικό ρόλο στη χρόνια φλεγμονή

in vivo

ή απλά να αντιπροσωπεύει έναν μη ειδικό δείκτη, όπως άφησε να εννοηθεί από οξεία πρότυπο έκφρασης του φάση. Σε αυτό το πλαίσιο, η αναγνώριση της υψηλής επαναλαμβανόμενες

CRP

-286 SNP μεταλλάξεις σε πολλούς τύπους καρκίνου στον άνθρωπο [19] παρέχει πειστικές αποδείξεις ότι αυτή η πρωτεΐνη είναι ένα δυναμικό πρόγραμμα οδήγησης της ογκογένεσης και βασική συνιστώσα του ρυθμιστικού το δίκτυο της φλεγμονής.

Ανάδοχος μεταλλάξεις στο

TERT

[38], [39] και

CRP

[19] αποτελούν τα πρώτα δείγματα ότι οι μη-κωδικοποίησης ρυθμιστικές περιοχές μπορούν επίσης να να στοχεύουν στην προώθηση ογκογένεση με ρύθμιση της έκφρασης αντί των δραστηριοτήτων των βασικών γονιδίων. Ωστόσο, είναι κάπως μοναδική στην περίπτωση

CRP

ότι η μετάλλαξη συμβαίνει σε ένα κοινό SNP θέση. Αυτό δημιουργεί την ανησυχία αν sites SNP είναι γενικά πιο ευάλωτες σε γενετικές αλλαγές, που οδηγούν στην υψηλή συχνότητα των μεταλλάξεων των επιβατών. Για την αντιμετώπιση του προβλήματος αυτού, έχουμε γονότυπος 24 SNPs των 141 όγκου κανονική ζεύγη /δείγμα. Αυτές οι SNPs βρίσκονται στις 9 διακριτές χρωμοσώματα, και αποτελούνται από 3 SNPs του

CRP

, 2 υποστηρικτής SNPs φλεγμονωδών κυτοκινών, 1 SNP ενός μη-κωδικοποίησης του γονιδίου, 18 SNPs με άγνωστη ένωση. Παρ ‘όλα αυτά, όλες οι θέσεις SNP βρέθηκαν να μεταλλαχθεί σε όγκους με χαμηλή συχνότητα μόνο φόντο. Συνεπώς, η άκρως επαναλαμβανόμενες μετάλλαξη στο

CRP

-286 θέση SNP είναι πιθανότατα το αποτέλεσμα της επιλογής με την ανάπτυξη του καρκίνου, αλλά όχι απλώς λόγω γενικές ιδιότητες που συνδέονται με την θέση SNP ή γονιδιωματικού τοποθεσίας. Είναι, ωστόσο, εξακολουθεί να είναι δυνατή η μετάλλαξη -286 είναι απλά μια συνέπεια της ογκογένεσης και περαιτέρω λειτουργικές δοκιμασίες που απαιτείται για να διευκρινίσει το σημείο αυτό.

Ωστόσο, είναι ενδιαφέρον ότι αν και η 4 εξετάστηκαν

CRP

SNPs όλα επηρεάζουν το επίπεδο της CRP στον ορό, μόνο η -286 SNP έχει ως στόχο από την ογκογένεση. Αυτό θα σήμαινε ότι τα αποτελέσματα των άλλων 3 SNPs είναι δευτερεύουσες στο -286 SNP, η οποία μπορεί εν μέρει να εξηγηθεί από την εξάρτηση του

CRP

έκφρασης με υποκινητή CpG μεθυλίωση, μια ουσιαστική επιγενετική μηχανισμό στη γονιδιακή αποσιώπηση [ ,,,0],40]. Πράγματι, έχουμε δείξει πρόσφατα ότι η υψηλή έκφραση CRP συσχετίζεται με χαμηλή μεθυλίωση υποστηρικτής, και το αντίστροφο [19]. Από τις 5 CpG μοτίβα σε

CRP

υποκινητή, ο εξελικτικά συντηρημένη -286 CpG φαίνεται να είναι το κλειδί, ιδιαίτερα για εξωηπατική τύπους κυττάρων, για τον καθορισμό του βασικό επίπεδο

CRP

έκφραση [19] . Καθώς η πλειοψηφία των -286 μεταλλάξεις είναι C & gt? Μεταβάσεις Α /Τ που διαταράσσουν το μοτίβο μεθυλίωσης, είναι κατανοητό ότι τέτοιες γενετικές αλλοιώσεις τη σειρά του θα συμβάλει στην ενεργοποίηση της δραστηριότητας υποστηρικτής του

CRP

πιθανόν μέσω της μείωσης του ανασταλτικό σήμα μεθυλίωση και τη διευκόλυνση της πρόσδεσης των παραγόντων μεταγραφής με την υποκείμενη αλληλουχία E-box [41]. Αυτά μπορεί να επιτρέψει τελικά την μετέπειτα συμμετοχή των άπω ρυθμιστικά στοιχεία που περιέχει το άλλο

CRP

SNPs.

Η υψηλή υποτροπής και διεισδυτικότητα του

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP σε όγκους προτείνουν ότι τοπικά παραγόμενων CRP, αντί των κυκλοφορούντων CRP, οδηγεί την ανάπτυξη του καρκίνου. Αυτό το παράδοξο μπορεί να εξηγηθεί από το στενό της εξάρτησης από τις δράσεις της CRP σε φλεγμονώδεις μικροπεριβάλλοντα [3], [13], [14], [36]. Η κυκλοφορούσα CRP παράγεται από το ήπαρ ως ένα πενταμερές που δείχνει κυρίως αντι-φλεγμονώδεις δραστηριότητες [7], [42], [43]. Εκτός ηπατοκύτταρα, εξωηπατική κύτταρα είναι επίσης σε θέση να εκκρίνουν CRP τοπικά σε απόκριση προς φλεγμονώδεις διεγέρτες. Επιπλέον, ενεργοποιεί εμπλουτισμένο σε φλεγμονώδεις τόπους θα προκαλέσει άμεσες αλλαγές διάπλασης στην πενταμερή CRP δημοσιεύσετε του

in situ

παραγωγής [44] – [49], για να απελευθερώσει το πλήρες δυναμικό σε δέσμευση συνδέτη [47], [48] , [50], ρύθμιση συμπληρώματος [46], [48], [51] – [54] και η διέγερση των προφλεγμονωδών και αγγειογόνων αποκρίσεων κυττάρων [48], [49], [55] – [61]. Ως εκ τούτου, η τοπική αφθονία της CRP και τις αλληλεπιδράσεις της με το άγχος μικροπεριβάλλον θα πρέπει να είναι πιο σχετική με την εξέλιξη της νόσου? ενώ τα κυκλοφορούντα επίπεδα CRP αντανακλούν κυρίως την υποκείμενη φλεγμονώδη κατάσταση.

Η απορύθμιση της οδού σηματοδότησης Wnt είναι η πιο συχνή εκδήλωση που παρατηρείται σε καρκίνο του παχέος εντέρου, η οποία συνήθως εκδηλώνεται με μεταλλάξεις απενεργοποιήσεως του

APC

ή ενεργοποίηση μεταλλάξεις του

β-κατενίνης

[25]. Μία άμεση συνέπεια της

APC

αδρανοποίηση είναι η σταθεροποίηση του

β-κατενίνης

και την ανώμαλη ενεργοποίηση των κατάντη γονιδίων στόχων [62]. Ως εκ τούτου ενδιαφέρον ότι

CRP

έχει δειχθεί ότι είναι ένας στόχος της είναι

β-κατενίνης

[63]. Επιπλέον, τα αποτελέσματά μας αποκαλύπτουν ότι η

CRP

-286 μεταλλάξεις SNP τείνουν να συνυπάρχουν με μεταλλαγμένο

APC

στο κόλον και του ορθού όγκων. Αυτά θα σήμαινε ότι οι δύο εκκριτική μόρια,

δηλ.

CRP και Wnt, μπορεί να ενεργεί σε ανατροφοδότηση και συνεταιριστικές τρόπους για την προώθηση της ογκογένεσης, η οποία αξίζει περαιτέρω έρευνες. Δεδομένης της έκτροπα ενεργοποιημένη σηματοδότηση Wnt και άκρως επαγόμενη

CRP

έκφραση σε όγκους, τοπική στόχευση και τα δύο μόρια μπορεί να είναι μια πιθανή επιλογή για τον ορθοκολικό θεραπεία του καρκίνου.

Ευχαριστίες

Ευχαριστούμε τον κ . Jing Zhao για την εξαιρετική τεχνική βοήθεια του.