Αφηρημένο

σηπτίνεε είναι μια οικογένεια GTP-δεσμευτικές πρωτεΐνες του κυτταροσκελετού που εκφράζονται σε πολλούς συμπαγείς όγκους. Septin 9 (

SEPT9

) ιδίως βρέθηκε υπερεκφράζεται σε διάφορους καρκινώματα. Εδώ, μελετήσαμε την έκφραση του SEPT9 ισομορφής 1 πρωτεΐνης (SEPT9_i1) σε δείγματα ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη. Χρησιμοποιήσαμε ανοσοϊστοχημική χρώση για να μελετηθεί η έκφραση του SEPT9_i1 πρωτεΐνης. Χρώση επίπεδο αναλύθηκε σε συνδυασμό με κλινικά χαρακτηριστικά και την παθολογική βαθμό Gleason και σκορ. Πενήντα ανθρώπινα δείγματα καρκίνου του προστάτη (42 πρωτογενείς όγκους και 8 μεταστατικών βλαβών) βάφτηκαν με SEPT9_i1 αντίσωμα και αναλύθηκαν. SEPT9_i1 πρωτεΐνη εκφράστηκε σε κύτταρα καρκίνου του προστάτη, αλλά απουσιάζει στα φυσιολογικά επιθηλιακά κύτταρα. Η ένταση της χρώσης συσχετίστηκε αναλογικά με προκατεργασία του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA), τα επίπεδα στο αίμα και το σκορ Gleason (

P

& lt? 0,05). SEPT9_i1 ήταν εντόνως εκφρασμένο σε όλες τις μεταστατικές αλλοιώσεις. Μια σημαντική Σύλλογος μεταξύ της έκφρασης SEPT9_i1 και υψηλό σκορ Gleason σε πολυπαραγοντική ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης βρέθηκε. Καταλήγουμε στο συμπέρασμα ότι SEPT9_i1 εκφράζεται σε όγκους του προστάτη υψηλής ποιότητας που υποδηλώνει ότι έχει ένα σημαντικό ρόλο στην ογκογένεση του προστάτη και ότι θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως μοριακός δείκτης για την εξέλιξη του όγκου του προστάτη

Παράθεση:. Gilad R, Meir Κ, Stein Ι, Γερμανικά L, Pikarsky Ε, Mabjeesh NJ (2015) Υψηλή SEPT9_i1 η έκφραση της πρωτεΐνης σχετίζονται με καρκίνους High-Grade προστάτη. PLoS ONE 10 (4): e0124251. doi: 10.1371 /journal.pone.0124251

Ακαδημαϊκό Επιμέλεια: Zoran Culig, Innsbruck Medical University, ΑΥΣΤΡΙΑ

Ελήφθη: 7 Νοέμβρη 2014? Αποδεκτές: 11 Μαρτίου 2015? Δημοσιεύθηκε: 21 Απριλίου, 2015

Copyright: © 2015 Gilad et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:. η εργασία αυτή υποστηρίχθηκε από το Δρ Miriam και Sheldon Adelson Γ Ίδρυμα Ιατρικής Έρευνας (AMRF). Ο χρηματοδότης δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του προστάτη είναι η δεύτερη για τον καρκίνο του πνεύμονα σε συχνότητα σε όλο τον κόσμο και είναι η δεύτερη πιο κοινή μορφή καρκίνου, και μία από τις κύριες αιτίες των θανάτων από καρκίνο μεταξύ των δυτικών άνδρες [1]. Οι κύριοι παράγοντες κινδύνου για καρκίνο του προστάτη είναι η ηλικία και το οικογενειακό ιστορικό. Ο καρκίνος του προστάτη γίνεται πιο κοινά με την προχωρημένη ηλικία επηρεάζει άνδρες ηλικίας 50 και άνω [2]. αδενοκαρκίνωμα του προστάτη κάνει μετάσταση κυρίως στα οστά και λιγότερο συχνά σε λεμφαδένες και μπορεί τοπικά προτέρων για να εισβάλουν γειτονικά όργανα. Οι τρέχουσες θεραπείες περιλαμβάνουν ορμονοθεραπεία, ανοσοθεραπεία και τη χημειοθεραπεία, αλλά δεν υπάρχει θεραπευτική αγωγή για μεταστατικό καρκίνο του προστάτη [3, 4]. Ως εκ τούτου, τα νέα στρατηγικές για τη θεραπεία του καρκίνου του προστάτη και την ταυτοποίηση και το χαρακτηρισμό νέων μοριακών στόχων όπως η ιντερλευκίνη-6 είναι απαραίτητα [5].

σηπτίνεε είναι μία οικογένεια πρωτεϊνών που προσδένουν GTP και νήμα που σχηματίζει, περιγράφηκε για πρώτη φορά σε

Saccharomyces cerevisiae

σε μια οθόνη για τα γονίδια που ρυθμίζουν την εκβλάστηση διαδικασία [6]. Από τότε, οι σηπτίνεε έχουν ταυτοποιηθεί σε πολλούς άλλους ευκαρυωτικούς οργανισμούς, που κυμαίνονται από μύκητες σε ανθρώπους [7-9] με μια αξιοσημείωτη απουσία στα φυτά [10]. Πολλοί Septin ισομορφές είναι ασυνήθιστα εκφράζονται σε καρκινώματα [11], και αλλοιωμένη επίπεδα έκφρασης Septin συσχετίζονται έντονα με ογκογόνο φαινοτύπους όπως αυξημένη κυτταρική ανάπτυξη, την κινητικότητα, διεισδυτικότητα, και αντοχή σε αντιδραστήρια μικροσωληνίσκους διαταράσσουν [12, 13].

Είχαμε προηγουμένως ταυτοποιηθεί SEPT9_i1, ένα προϊόν της μεταγραφής που κωδικοποιεί SEPT9_v1 ισομορφή 1 με το μεγαλύτερο Ν-τερματική επέκταση, ως θετικός ρυθμιστής στην υποξική μονοπάτι [14]. SEPT9_i1 αλληλεπιδρά με υποξία παράγοντας 1α (HIF-1α), το οξυγόνο ρυθμίζεται υπομονάδα της HIF-1, που είναι ένας ρυθμιστής κλειδί της υποξικής οδού απόκρισης [15]. Η αλληλεπίδραση είναι ειδική για HIF-1α, αλλά όχι να HIF-2α, και αυξάνει τη σταθερότητα της πρωτεΐνης HIF-1α, καθώς και HIF-1 μεταγραφικής δραστικότητας, που οδηγεί σε αυξημένη πολλαπλασιασμό, την ανάπτυξη του όγκου και την αγγειογένεση. HIF-1 είναι ένας μεταγραφικός παράγοντας που ρυθμίζει τις απαντήσεις και την κυτταρική προσαρμογή στην υποξία οδήγηση μεταγραφής πολλών γονιδίων που είναι σημαντικά για την προσαρμογή και επιβίωση κάτω από υποξία [14]. Μεταξύ αυτών των γονιδίων είναι γλυκολυτικά ένζυμα, η γλυκόζη μεταφορείς Glut-1 και GLUT-3, ενδοθηλίνης-1, αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα, ανθρακική ανυδράση IX, ερυθροποιητίνη και [16]. Ανοσοϊστοχημικές αναλύσεις αποκάλυψαν ότι HIF-1α υπερεκφράζεται σε πολλούς ανθρώπινους καρκίνους [17]. Επιπλέον, η αυξημένη δραστικότητα HIF-1 συνδέεται συχνά με αυξημένη επιθετικότητα του όγκου, αντοχής στη θεραπεία, και τη θνησιμότητα [18].

προηγούμενες μελέτες μας σε διάφορες κυτταρικές σειρές προστάτη και ξενομοσχεύματα έδειξαν ότι SEPT9_v1 mRNA εκφράζεται έντονα σε ανθρώπινο προστάτη δείγματα καρκίνο συγκριτικά με φυσιολογικό ιστό του προστάτη [15]. Στην παρούσα μελέτη, προσδιορίσαμε την έκφραση της SEPT9_i1 πρωτεΐνης σε πρωτογενείς ανθρώπινους ιστούς καρκίνου του προστάτη με τη χρήση ανοσοϊστοχημείας και συσχετίστηκε η έκφραση της με κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά.

Υλικά και Μέθοδοι

δείγματα ιστών

Η επιτροπή δεοντολογίας του Ιατρικού Κέντρου του Εβραϊκού Πανεπιστημίου-Hadassah ενέκρινε την εν λόγω μελέτη (IRB πρωτόκολλο 0500-12-HMO). Αρχειακό υλικό πριν από το έτος 2000, είχε εγκριθεί για χρήση από την επιτροπή δεοντολογίας του Ιατρικού Κέντρου του Εβραϊκού Πανεπιστημίου-Hadassah, με κατάργηση του εν επιγνώσει συναίνεση, σύμφωνα με το κράτος του Ισραήλ Δίκαιο της γενετικής πληροφορίας, 2002. Όλες οι αρχειακό δείγματα που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη ελήφθησαν από την θεσμική biorepository στο Hadassah Medical Center. Όλα τα δείγματα της μελέτης ήταν πριν από το έτος 2000 και όλα ήταν de-εντοπίστηκαν. Αυτή ήταν μια αναδρομική μελέτη σε μια σειρά από 50 παραφίνη-ενσωματωμένες προστάτη δείγματα καρκίνου: 38 από ριζική προστατεκτομή, 6 από τη ριζοσπαστική cystoprostatectomy και 6 από διουρηθρική εκτομή του προστάτη (TUR-P). Αυτής της συλλογής, οκτώ δείγματα εξαιρέθηκαν από τη μελέτη λόγω τεχνικών προβλημάτων στην επεξεργασία των ιστών αφήνοντας 42 πρωτογενείς όγκους σε διάφορα στάδια για την τελική αξιολόγηση (Πίνακας 1). Οκτώ επιπλέον μεταστατικών βλαβών από 8 διαφορετικούς ασθενείς, του μυελού των οστών (3), λεμφαδένες (2) και των οστών (3) αναλύθηκαν ξεχωριστά. Ένα δείγμα από κάθε ασθενή αναλύθηκε και κανένας από τους ασθενείς έλαβαν εισαγωγική θεραπεία.

Η

Ανοσοϊστοχημεία

Α κουνελιού πολυκλωνικό αντίσωμα που κατευθύνεται προς το Ν-άκρο της SEPT9_i1 είχε προηγουμένως παραχθεί [15] και περαιτέρω χαρακτηρίζεται από (Σχήμα 1Α και 1Β). Ανοσοϊστοχημική χρώση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το ίδιο πρωτόκολλο για όλους τους ιστούς. Εν συντομία, 4 μm μονιμοποιηθεί με φορμαλίνη τομών εγκλεισμένων σε παραφίνη αποπαραφινοποιήθηκαν, επανυδατώθηκαν και ανάκτηση αντιγόνου διεξήχθη σε 25mM κιτρικό ρυθμιστικό διάλυμα ρΗ 6 με θέρμανση στους 125 ° C για 3 λεπτά σε decloaking θάλαμο (Biocare Medical). Οι τομές επωάστηκαν με αντι-SEPT9_i1 αντίσωμα σε 1:. 2000 αραίωση επί μία νύκτα στους 4 ° C

εμβρυϊκά κύτταρα ανθρώπινου νεφρού ΗΕΚ-293Τ διαμολύνθηκαν παροδικά με Flag-SEPT9_i1 κατασκευάσει ή κενό φορέα (EV). (Α) Ολόκληρα κυτταρικά εκχυλίσματα παρασκευάστηκαν και αναλύθηκαν με 4-20% SDS-PAGE και ανοσοκηλίδωση (ΙΒ) με αντισώματα προς Flag (1: 2000), SEPT9_i1 (1: 3000), προάνοσο ορό (1: 3000) ή αντίσωμα SEPT9_i1 (1: 3000) προ-επωάστηκαν με 10 μΜ του πεπτιδίου ανοσογόνου για 4 ώρες. (Β) Το ίδιο κυτταρικά εκχυλίσματα υποβλήθηκαν σε ανοσοκαθίζηση (ΙΡ) με τη χρήση αντισώματος αντι-Flag και οι immuneprecipitates υποβλήθηκαν σε 4-15% SDS-PAGE και στη συνέχεια ανοσοστυπώθηκαν με αντισώματα αντι-Flag ή αντι-SEPT9_i1. χρώσης (C) Αντιπροσωπευτική SEPT9_i1 σε δείγματα ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη. Σκορ 0: καμία χρώση SEPT9_i1, 1: χρώση χαμηλή SEPT9_i1 2: μέσο χρώση SEPT9_i1 και 3: υψηλή χρώση SEPT9_i1. Μεγέθυνση x200, μπαρ κλίμακα 50 μm.

Η

HRP-συζευγμένο αντι-αντίσωμα κουνελιού (Vector Labs) χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση του πρωτογενούς αντισώματος. Διαφάνειες αναπτύχθηκαν με διαμινοβενζιδίνη (DAB) και με αιματοξυλίνη.

Ποσοτική αξιολόγηση των ανοσοχρώση και σκοράροντας

Όλες οι διαφάνειες εξετάστηκαν από δύο ανεξάρτητους ερευνητές (RG και το ΕΚ), οι οποίοι δεν γνώριζαν για όλες τις κλινικές και παθολογικές δεδομένων. Ένταση της χρώσης βαθμολογήθηκε ως 0 (καμία έκφραση), 1 (ασθενής), 2 (μέτρια) και 3 (ισχυρή). Πραγματοποιήσαμε επίσης υπολογιστική ανάλυση εικόνας χρησιμοποιώντας ένα αυτοματοποιημένο σύστημα μικροσκοπίου σάρωσης και ανάλυση εικόνας ARIOL-SL50 (Applied Imaging) για την αξιολόγηση της έντασης της χρώσης του δείγματος, ουσιαστικά όπως περιγράφεται [19]. Διαφάνειες σαρώθηκαν και όλες οι περιοχές του όγκου που σημειώνονται. Από κάθε όγκου 10 ξεχωριστά πεδία, τυχαία επιλεγμένα, αναλύθηκαν και ομαλοποιήθηκαν σύμφωνα με τους κατασκευαστές ρύθμιση (ενότητα Hersight). Τα αποτελέσματα της ανάλυσης παρουσιάζονται ως κανονικοποιημένη μέση ένταση όπως υπολογίζεται από το λογισμικό ARIOL-SL50.

Παροδική επιμόλυνση, εκχύλιση πρωτεϊνών, προσδιορισμούς ανοσοκαθίζησης, και ανοσοαποτύπωσης ανάλυση

Ανθρώπινα εμβρυϊκά νεφρικά (ΗΕΚ 293Τ κύτταρα) σπάρθηκαν σε 70% συρροή σε πλάκες 6 cm και επιμολύνθηκαν με 3 μg πλασμιδίου που εκφράζει πρωτεΐνη Flag-SEPT9_i1 ή κενό φορέα (EV), με χρήση αντιδραστηρίου επιμόλυνσης GenePORTER (Gene Therapy Systems, Inc., San Diego, CA) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [15]. Ολικά κυτταρικά εκχυλίσματα παρασκευάστηκαν και οι συγκεντρώσεις πρωτεΐνης προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας ένα κιτ δικιγχονινικού οξέος προσδιορισμού πρωτεϊνών (Pierce, Rockford, IL) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [15]. Ανοσοκαταβύθιση διεξήχθη χρησιμοποιώντας πυριτική Ezview Red ANTI-FLAG συγγένειας (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, ΜΟ), και ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή. Οι πρωτεΐνες στη συνέχεια αναλύθηκαν με SDS-PAGE και ανοσοκηλίδωση με αντισώματα όπως εμφανίζεται στο Σχ. βασικά όπως περιγράφηκε προηγουμένως [15]. Πρωτογενή αντισώματα ήταν πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού για SEPT9_i1, η οποία είχε προηγουμένως παραχθεί [15] και την αντίστοιχη προ-άνοσο ορό της ή να Flag (Sigma-Aldrich, St. Louis, ΜΟ). Δευτερογενές αντίσωμα ήταν υπεροξειδάση ραδικιού κατσίκας συζευγμένο αντι-ποντικού ή κουνελιού (Jackson ImmunoResearch, West Grove, ΡΑ).

Στατιστικές αναλύσεις

Περιγραφική στατιστική του δείγματος της μελέτης χρησιμοποιήθηκαν για να συνοψίσουμε τα χαρακτηριστικά συμμετέχοντα. αναλύσεις χρησιμοποιήθηκαν για να εκτιμηθεί η σχέση μεταξύ «χαρακτηριστικά των ασθενών» και σημαίνει συσχέτισης Spearman διμεταβλητή του. Σε μια πολυπαραγοντική ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης, το αποτέλεσμα ήταν η μέση ένταση χρώσης SEPT9_i1. Οι ανεξάρτητες μεταβλητές περιλάμβαναν την ηλικία και το σκορ Gleason. Προσαρμοσμένη β και SE υπολογίστηκαν. Το καλύτερο μοντέλο καθορίστηκε λαμβάνοντας υπόψη προσαρμοσμένο R

2. Όλες οι δοκιμασίες ήταν αμφίδρομες και η στατιστική σημαντικότητα ορίστηκε ως

P

αξία & lt? 0,05. Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του PASW Statistics 17.0 για Windows.

Αποτελέσματα

Τα κύρια χαρακτηριστικά των συμμετεχόντων των οποίων δείγματα χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη περιγράφονται στον Πίνακα 1. Η διάμεση ηλικία ήταν 65 έτη, με διάμεση PSA 5,9 ng /ml και η πλειοψηφία είχε Gleason score ≥ 7. βάφονται τα δείγματα όλων των ασθενών με χρήση SEPT9_i1-ειδικό αντίσωμα [15]. Εμείς χαρακτηριζόμενη πρώτα την ειδικότητα του SEPT9_i1 αντισώματος. Flag-tagged SEPT9_i1 κατασκεύασμα εκφράστηκε παροδικά σε κύτταρα ΗΕΚ-293Τ και υποβλήθηκαν σε ανοσοκηλίδωση με αντισώματα προς Flag, SEPT9_i1 και SEPT9_i1 παρουσία του πεπτιδίου ανοσογόνου [15], καθώς και με τον προάνοσο ορό (Εικ 1Α). Σημαία και αντισώματα SEPT9_i1 αντιδρούν με ένα 70 kDa ζώνη που αντιστοιχεί στο Flag-SEPT9_i1 πρωτεΐνη ενώ το προάνοσο ορό δεν παρουσίασαν καμία αντιδραστικότητα (Σχήμα 1Α). Περαιτέρω, η ανοσοαντιδραστικότητα του SEPT9_i1antibody σχεδόν καταργήθηκε πλήρως όταν το πεπτίδιο ανοσογόνο προστέθηκε (Σχήμα 1Α). Επιπλέον, οι ανοσοκαταβυθίστηκε ειδών με αντίσωμα Flag αναγνωρίστηκε επίσης από αντι-SEPT9_i1antibodies (Σχήμα 1Β). Αυτά τα αποτελέσματα είναι σύμφωνα περαιτέρω την ειδικότητα του παραγόμενου αντι-SEPT9_i1antibodies.

Σε μη νεοπλασματικά προστάτη παρατηρήσαμε εξέχοντα κυτταροπλασματική χρώση SEPT9_i1 στα περισσότερα βασικά κύτταρα ενώ αυλού κύτταρα ήταν αρνητικά (εικ 1C). Στρωματικά κύτταρα χρώση και στις δύο νεοπλασματικών και μη νεοπλασματικών περιοχών ήταν μεταβλητή. Τα καρκινικά κύτταρα παρουσίασαν μεταβλητή ένταση χρώσης, το οποίο έτεινε να είναι κυτταροπλασματική ωστόσο, σε ορισμένες περιπτώσεις, ήταν πυρηνική. Η ένταση χρώση των καρκινικών κυττάρων σε μερικές περιπτώσεις ήταν μεταβλητή. Σε αυτές τις περιπτώσεις η βαθμολογία ανατέθηκε με βάση την πιο άφθονη ένταση χρώσης. Κάθε δείγμα στη συνέχεια δέχεται από 0 έως 3 για το επίπεδο έκφρασης SEPT9_i1 (Σχήμα 1 C). Στη συνέχεια συσχετίστηκαν SEPT9_i1 ένταση χρώσης με κλινικά χαρακτηριστικά και βρήκε ισχυρή και σημαντική συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων έκφρασης SEPT9_i1 και το σκορ Gleason (

P

= 0.01, Πίνακας 2). Στην πολυπαραγοντική ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης για τη συσχέτιση μεταξύ των χαρακτηριστικών των ασθενών και η μέση SEPT9_i1 ένταση χρώσης, το σκορ Gleason ήταν ο μόνος ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας (RR 2,0, 95% CI 0,15 έως 3,85,

P

= 0,035). Εμείς στρωματοποιημένη ένταση χρώσης SEPT9_i1 είτε με τη χρήση οπτικής βαθμολόγησης (Σχήμα 2Α) ή με ηλεκτρονικά ανάλυση εικόνας με ένα αυτοματοποιημένο σύστημα ανάλυσης εικόνας (ARIOL-SL50) (Σχήμα 2Β), σύμφωνα με σκορ Gleason. Υπήρχε σημαντικά υψηλότερο επίπεδο της χρώσης SEPT9_i1 όπως το σκορ Gleason ήταν υψηλότερη (Σχήμα 2)

Μέση SEPT9_i1 ένταση χρώσης ± SE της κάθε ομάδας σκορ Gleason (score 5:. 3 ασθενείς, το σκορ 6: 8 ασθενείς, βαθμολογία 7: 19 ασθενείς, σκοράρει 8: 3 ασθενείς, σκοράρει 9: 6 ασθενείς και το σκορ 10: 2 ασθενείς) υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας είτε την οπτική βαθμολόγηση (Α) ή αυτοματοποιημένη ανάλυση εικόνας με το σύστημα ARIOL-SL50 (Β)

επόμενο αναλύεται μεταστατικό δείγματα καρκίνου του προστάτη από διαφορετικές τοποθεσίες, συμπεριλαμβανομένων των οστών (3 δείγματα), του μυελού των οστών (3 δείγματα) και των λεμφαδένων (2 δείγματα). Όλες οι μεταστατικές αλλοιώσεις ήταν έντονα θετικά για SEPT9_i1 χρώση (Σχήμα 3). Συνολικά, η υψηλή έκφραση του SEPT9_i1 στον καρκίνο του προστάτη υψηλής ποιότητας και στον προστάτη μεταστάσεις του καρκίνου του υποδηλώνει ότι SEPT9_i1 είναι υποψήφια δείκτης για την εξέλιξη του όγκου.

μεταστατικών βλαβών του καρκίνου του προστάτη από τον μυελό των οστών, λεμφαδένες και των οστών ανοσοχρωματίστηκαν με SEPT9_i1 . Αριστερό πάνελ είναι χαμηλή (x100) μεγέθυνση (LM) (γραμμή κλίμακας 100 μm) και το δεξιό πάνελ είναι υψηλή (x200) μεγέθυνση (HM) (γραμμή κλίμακας 50 μm). Σημείωση υψηλό επίπεδο χρώσης SEPT9_i1 σε όλες τις μεταστάσεις.

Η

παρατηρήθηκαν Συζήτηση

Τα υψηλά επίπεδα έκφρασης SEPT9_i1 σε διάφορες κακοήθειες συμπεριλαμβανομένης της λευχαιμίας [20] και του καρκίνου του μαστού [11]. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε ότι η έκφραση της πρωτεΐνης SEPT9_i1 συνδέεται σημαντικά με σκορ Gleason (Σχήματα 1 και 2 και Πίνακας 2). Μέχρι αυτές τις μέρες, το Gleason ταξινόμησης και το σύστημα βαθμολόγησης παραμένει ένας από τους πιο ισχυρούς προγνωστικούς παράγοντες για τον καρκίνο του προστάτη [21]. Το πιο σημαντικό, μια σημαντική έντονη χρώση SEPT9_i1 παρατηρήθηκε σε μεταστάσεις του αδενοκαρκινώματος του προστάτη σε διάφορες τοποθεσίες (Σχήμα 3). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η έκφραση της πρωτεΐνης SEPT9_i1 συσχετίζεται έντονα με την επιθετικότητα και την εξέλιξη του όγκου. Παρομοίως, Stanbery et al. έδειξε ότι η υψηλή έκφραση της πρωτεΐνης SEPT9_i1 στο κεφάλι και το λαιμό πλακωδών κυττάρων καρκινώματα συσχετίστηκε με κακή κλινική έκβαση [22]. Επιπλέον, βρήκαν ότι η υψηλή έκφραση συσχετίζεται με SEPT9_i1 τόσο προηγμένα Τ και Ν στάδιο [22]. Συλλογικά, αυτά τα κλινικά δεδομένα υποστηρίζουν προηγούμενες μελέτες που δείχνουν το ρόλο της SEPT9_i1 στην ογκογένεση [15, 23-25].

Ενεργή επιτήρηση είναι μια από τις αποδεκτές μεθόδους που χρησιμοποιούνται για τη μείωση της θεραπεία των ασθενών με καρκίνο του προστάτη χαμηλού κινδύνου . Τέτοιοι ασθενείς παρακολουθούνται με δακτυλική φυσική εξέταση, περιοδικές αξιολογήσεις της PSA στο αίμα και επαναλάβετε βιοψίες του προστάτη, και σε ορισμένες πρόσφατες πρωτόκολλα επιλεκτική απεικόνιση χρησιμοποιώντας πολυπαραμετρική endorectal MRI [26]. Η θεραπεία τότε προσφέρεται σε αυτούς με σημάδια εξέλιξης. Δυστυχώς, πολλές αναφορές δείχνουν ότι ένα σημαντικό μέρος (περίπου 30%) των ανδρών με καρκίνο του προστάτη χαμηλού κινδύνου ταξινομείται εσφαλμένα και πρέπει να λάβουν άμεση οριστική θεραπεία [27]. Ωστόσο, επί του παρόντος δεν υπάρχει ακριβές μοντέλο για να προβλέψει ποια από εκείνους τους ασθενείς με νόσο του χαμηλού κινδύνου θα πρέπει να αντιμετωπίζονται αμέσως πριν προχωρήσει κατά τη διάρκεια της επιτήρησης [28]. Δεδομένου ότι η έκφραση SEPT9_i1 πρωτεΐνη συσχετίζεται έντονα με την εξέλιξη του όγκου και των μεταστάσεων, προτείνουμε SEPT9_i1 ως νέου δείκτη που μπορεί να γίνει διάκριση μεταξύ χαμηλού κινδύνου έναντι του καρκίνου του προστάτη υψηλότερου κινδύνου για την επιλογή των καλύτερων των ασθενών σε ενεργητικά προγράμματα επιτήρησης. Φυσικά, απαιτούνται περαιτέρω μελέτες δικαιολογείται να ελέγξει την υπόθεση αυτή.

Ένας από τους περιορισμούς της μελέτης μας είναι η έλλειψη μακροπρόθεσμων κλινική έκβαση για σύγκριση με παθολογική ένταση χρώσης των SEPT9_i1. Ένας άλλος περιορισμός είναι ο σχετικά μικρός αριθμός των ασθενών στην ομάδα μας, αν και ήταν επαρκές για την επίτευξη στατιστικής σημαντικότητας.

Συμπεράσματα

Συνολικά, τα δεδομένα μας δείχνει σαφώς ότι η έκφραση SEPT9_i1 στον καρκίνο του προστάτη συνδέεται στενά με το πιο ισχυρό παθολογική προγνωστικός παράγοντας, το σκορ Gleason. Επιπλέον, τα υψηλά επίπεδα έκφρασης SEPT9_i1 ανιχνεύθηκαν σε όλες τις μεταστάσεις αδενοκαρκινώματος του προστάτη που υποδηλώνει ότι SEPT9_i1 έχει ένα ρόλο στη διεισδυτικότητα και εξέλιξης του όγκου. Απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να καθοριστεί η δυνατότητα εφαρμογής των SEPT9_i1 ανοσοχρώση σε κλινικό περιβάλλον.

Ευχαριστίες

Το έργο χρηματοδοτήθηκε από το Δρ Miriam και Sheldon Adelson Γ Ίδρυμα Ιατρικής Έρευνας (AMRF).