Αφηρημένο

Ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνηθεί η σχέση μεταξύ σακχαρώδη διαβήτη και του παχέος καρκινογένεση, καθώς και ο πιθανός μηχανισμός που εμπλέκονται σε αυτή την αλληλεπίδραση. μοντέλα αρουραίων Διαβήτης επήχθησαν με μια χαμηλή δόση STZ που ακολουθείται από μια χαμηλή δόση του ϋΜΗ να επάγει καρκίνο του παχέος εντέρου. Μετρήθηκαν Ο σχηματισμός ACF στο κόλον και την επίπτωση, τον αριθμό και το μέγεθος των όγκων. Μετρήθηκε επίσης η δραστικότητα των γλυκολυτικών ενζύμων σε κολονικό ιστούς. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι τόσο ο συνολικός αριθμός των ACF και ο αριθμός των εστιών που περιέχουν ένα διαφορετικό αριθμό κρυπτών αυξήθηκαν σε διαβητικούς αρουραίους. Στο τέλος της πειραματικής θεραπείας, η συχνότητα, ο αριθμός και το μέγεθος των όγκων ήταν επίσης αυξημένη σε διαβητικούς αρουραίους. Συνολικά, αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι ο διαβήτης αυξάνει τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου. Η δραστηριότητα της ΧΚ και ΡΚ σε κολονική ιστούς αυξήθηκε σε διαβητικούς αρουραίους, ενώ η δράση της PDH μειώθηκε. Επιπλέον, οι δραστηριότητες αυτών των ενζύμων σε ενδονεοπλασματική ήταν υψηλότερες από ό, τι εκείνη του in peritumor. Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι ο υψηλός ρυθμός της γλυκόλυσης μπορεί να παίξει κάποιο ρόλο στην καρκινογένεση του παχέος εντέρου σε διαβητικούς αρουραίους

Παράθεση:. Jia Υ, Xu G, Zhou W, Wang Ζ, Meng L, Zhou S, et al. (2014) Diabetes Προωθεί DMH-Induced ορθοκολικού καρκίνου με την αύξηση της δραστηριότητας των γλυκολυτικών ενζύμων σε αρουραίους. PLoS ONE 9 (10): e110455. doi: 10.1371 /journal.pone.0110455

Επιμέλεια: Daotai Nie, Southern Illinois University School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 4 Ιουν 2014? Αποδεκτές: 12 Σεπτεμβρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 17 του Οκτώβρη του 2014

Copyright: © 2014 Jia et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. Η εργασία αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της επαρχίας Shandong (2009ZRB01346). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του παχέος εντέρου είναι μια κοινή γαστρεντερική κακοήθεις όγκους. Είναι η τρίτη πιο κοινή μορφή καρκίνου και η τρίτη κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο στους άνδρες και τις γυναίκες στις Ηνωμένες Πολιτείες [1], [2]. Τα τελευταία χρόνια, με τη βελτίωση του βιοτικού επιπέδου και των αλλαγών στον τρόπο ζωής, η συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του παχέος εντέρου έχει αυξηθεί από έτος σε έτος σε αναπτυσσόμενες χώρες. Αρκετοί παράγοντες κινδύνου παρόμοια βρέθηκε μεταξύ σακχαρώδη διαβήτη και καρκίνου του παχέος εντέρου. Αυτές περιλαμβάνουν ένα «δυτικό τρόπο ζωής», με δίαιτες χαμηλές σε φρούτα και λαχανικά ή φυτικές ίνες και πλούσια σε λίπος και μαγειρεμένο κρέας, καθώς και η περιορισμένη φυσική δραστηριότητα [3], [4]. Επιδημιολογικές ευρήματα μέχρι σήμερα έχουν δείξει ότι ο σακχαρώδης διαβήτης τύπου 2 είναι στενά συνδεδεμένη με τον αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου [3] – [8]. Ωστόσο, ορισμένα αποτελέσματα δεν είναι συμβατοί με την ένωση αυτή, επειδή ο σακχαρώδης διαβήτης είναι μια ομάδα σύνθετων διαταραχών του μεταβολισμού που χαρακτηρίζεται από υπεργλυκαιμία. Αρκετοί παράγοντες που δημιουργούν σύγχυση, συμπεριλαμβανομένης της διάρκειας του σακχαρώδη διαβήτη, τα ποικίλα επίπεδα μεταβολικό έλεγχο, τη χρήση διαφορετικών φαρμάκων για θεραπεία, και την πιθανή παρουσία των χρόνιων επιπλοκών, περιπλέκουν την ακριβή εκτίμηση του κινδύνου καρκίνου σε διαβητικούς ασθενείς. Επιπλέον, διάφοροι παράγοντες επιδημίας από διαφορετικές χώρες, εθνικότητες και οι περιφέρειες μπορούν να επηρεάσουν τη σχέση μεταξύ διαβήτη και καρκίνου [3], [7], [9].

Οι πιθανοί μηχανισμοί που εμπλέκονται στο διαβήτη καρκίνο του διαβήτη που σχετίζονται δύναται να συνδέεται με μακροχρόνια αντοχή στην ινσουλίνη και υπερινσουλιναιμία, τα οποία έχουν εκτεταμένα περιγραφεί μέχρι σήμερα [10] – [13]. Η υπερινσουλιναιμία μπορεί να επηρεάσουν την εμφάνιση και την ανάπτυξη του καρκίνου του παχέος εντέρου μέσω μιας ποικιλίας μηχανισμών. Μια ανώμαλη αύξηση της ινσουλίνης και της ινσουλίνης αυξητικός παράγοντας-1 (IGF-1) στον ορό μπορεί να οδηγήσει στην εμφάνιση όγκων με την προώθηση του μετασχηματισμού και τον πολλαπλασιασμό των ορθοκολικού επιθηλιακών κυττάρων, επηρεάζοντας τον κυτταρικό κύκλο και την αναστολή της κυτταρικής απόπτωσης [10] . Ασθενείς που λαμβάνουν θεραπεία με ινσουλίνη για μεγάλο χρονικό διάστημα, έχουν υψηλότερο κίνδυνο καρκίνου, καθώς και με την αύξηση της διάρκειας της θεραπείας με ινσουλίνη, η συχνότητα εμφάνισης καρκίνου μπορεί να αυξηθεί [12], [13]. Παρ ‘όλα αυτά, είναι πιθανό ότι ένας συγκεκριμένος παράγοντας θα μπορούσε να επηρεάσει τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου, τόσο επηρεάζοντας τις συγκεντρώσεις ινσουλίνης και μέσω άλλων μηχανισμών [14], [15].

Με την παρουσία του οξυγόνου, τα περισσότερα κύτταρα πρωτίστως μεταβολίζουν τη γλυκόζη σε πυροσταφυλικό μέσω γλυκόλυσης και στη συνέχεια οξειδώνονται πλήρως πυροσταφυλικό σε διοξείδιο του άνθρακα μέσω του κύκλου του κιτρικού οξέος. Ωστόσο, τα καρκινικά κύτταρα παράγουν όσο το 60% του ΑΤΡ τους μέσω γλυκόλυση, και το γλυκολυτικό ρυθμό των κυττάρων του όγκου είναι έως 200 φορές υψηλότερη από εκείνη των φυσιολογικών κυττάρων, ανεξάρτητα από την παρουσία ή απουσία οξυγόνου [16], [17] . Αυτό το φαινόμενο, αναγνωρίζονται πριν περίπου επτά δεκαετίες, είναι γνωστό ως το φαινόμενο Warburg. Αυτό το φαινόμενο προκαλείται από την ανώμαλη έκφραση πολλών γλυκολυτικών ενζύμων. Αρκετά ένζυμα κλειδιά, όπως εξοκινάση (HK) και πυροσταφυλική κινάση (ΡΚ) είναι γνωστό ότι παίζουν έναν κρίσιμο ρόλο στην έναρξη και διατήρηση των υψηλών ποσοστών του καταβολισμού της γλυκόζης του ταχέως αναπτυσσόμενους όγκους [18], [19]. PK έχει επίσης αναφερθεί να συνεισφέρει στη συσσώρευση ενδιαμέσων του γλυκόλυση για τις ακόλουθες αναβολικά διαδικασίες: την σύνθεση των νουκλεϊκών οξέων, αμινοξέα, φωσφολιπίδια και [20]. PK προσδίδει πλεονέκτημα ανάπτυξης σε κύτταρα όγκου, ιδιαίτερα κάτω από συνθήκες υποξίας.

Τα κύρια χαρακτηριστικά του σακχαρώδους διαβήτη είναι η υπεργλυκαιμία και η δυσλειτουργία του μεταβολισμού της γλυκόζης. Λόγω υπεργλυκαιμία, η διαπερατότητα των τριχοειδών αγγείων είναι μειωμένη και τα μιτοχονδριακά ένζυμα που σχετίζονται με μεταβολισμό γλυκόζης ανεστάλησαν [21], επομένως ο μεταβολισμός του άνθρακα της οξειδωτικής φωσφορυλίωσης αναστέλλεται. Σε διαβητικούς ασθενείς, τα φυσιολογικά κύτταρα με χαμηλό ποσοστό της γλυκόλυσης δεν μπορεί να εξασφαλίσει αρκετή ενέργεια από το μεταβολισμό της γλυκόζης και μπορεί να πεθάνουν. Εντούτοις, τα κύτταρα με υψηλό ρυθμό γλυκόλυσης μπορεί να αντισταθμίσει τη ζημιά των ενζύμων στα μιτοχόνδρια και παράγουν περισσότερο ΑΤΡ μέσω γλυκόλυση να διατηρήσει το ταχύ πολλαπλασιασμό και μεταμόρφωση των φυσιολογικών κυττάρων σε καρκινικά κύτταρα. Αρκετά βασικά ένζυμα και πρωτεΐνες που εμπλέκονται στο μεταβολισμό της γλυκόζης σε διαβητικούς αρουραίους διερευνήθηκαν με Mansor et al. [22]. Η δράση της PDH, μία πολύ οργανωμένη ένζυμο του μιτοχονδριακού μεταβολισμού της γλυκόζης, και μεταφορέα γλυκόζης 4 (GLUT4) ήταν σημαντικά μειωμένα. Ο αναστολέας PDH πυροσταφυλική αφυδρογονάση κινάσης 4 (PDK4) επίπεδο αυξήθηκε. Αυτά τα αποτελέσματα αποκάλυψαν το χαμηλό ποσοστό της οξειδωτικής φωσφορυλίωσης στα μιτοχόνδρια σε διαβητικούς αρουραίους.

Στην παρούσα μελέτη, ο διαβήτης προκλήθηκε σε αρουραίους Sprague-Dawley (SD) χρησιμοποιώντας STZ, ακολουθούμενη από την επαγωγή του ορθοκολικού καρκίνου χρησιμοποιώντας DMH. Επιδιώξαμε να διαπιστωθεί αν σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2 σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου σε αρουραίους και τους πιθανούς μηχανισμούς που εμπλέκονται σε αυτή τη διαδικασία.

Υλικά και Μέθοδοι

Αντιδραστήρια

STZ, ϋΜΗ και το μπλε του μεθυλενίου αγοράστηκαν από τη Sigma (St. Louis, ΜΟ). Εμπορικά κιτ για ανοσοχρώση της PCNA ήταν από το Πεκίνο Zhongshan Goldbridge Βιοτεχνολογία Co (Πεκίνο, Κίνα). Τα κιτ δοκιμασίας για την ανίχνευση των δραστηριοτήτων του εξοκινάση (HK) και κινάση πυροσταφυλικού (ΡΚ) αγοράστηκαν από Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, Κίνα).

Ζώα

Εξήντα αρσενικοί αρουραίοι Sprague-Dawley ( SD) αρουραίοι (160-180 g) αγοράστηκαν από την Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd (Πεκίνο, Κίνα). Όλοι οι αρουραίοι στεγάστηκαν σε πρότυπους κλωβούς πολυπροπυλενίου (3 ποντίκια /κλουβί) και διατηρήθηκε σε ένα δωμάτιο κάτω από τυποποιημένες συνθήκες (22 ± 3 ° C, 12 ώρες φως /12 ώρες σκοτάδι, υγρασία 50 ± 10%) με ελεύθερη πρόσβαση σε σβώλους τροφής και νερό βρύσης. Τα ζώα αφέθηκαν να εγκλιματιστούν για 1 εβδομάδα στο τροφή και νερό. Οι αρουραίοι χωρίστηκαν τυχαία σε τέσσερις ομάδες των 15 ζώων εκάστη: (1) η ομάδα ελέγχου? (2) ομάδα STZ? (3) ομάδα ΩΜΗ? και (4) ομάδα STZ + DMH. Οι αρουραίοι της ομάδας ελέγχου και της ομάδας DMH δόθηκαν με μια κανονική δίαιτα σφαιρίδιο (NPD), και εκείνες στην ομάδα STZ και ομάδα STZ + DMH δόθηκαν με μια δίαιτα υψηλής περιεκτικότητας σε λιπαρά (HFD). Η σύνθεση και η παρασκευή του HFD (Πίνακας 1) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [23]. Το σωματικό βάρος των αρουραίων μετρήθηκε μία φορά την εβδομάδα. Όλες οι μελέτες πραγματοποιήθηκαν με την έγκριση της επιτροπής ζωικά πειραματικά δεοντολογική εξέταση της Shandong University School of Medicine.

Η

Ανάπτυξη του διαβήτη μοντέλο

Μετά από 2 μήνες διατροφικών χειραγώγησης, οι αρουραίοι σε η ομάδα STZ και η ομάδα STZ + DMH εγχύθηκαν ενδοπεριτοναϊκά (ΙΡ) με μια χαμηλή δόση STZ (35 mg /kg σωματικού βάρους? STZ διαλύθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα κιτρικού οξέος 0,1 mol /l, ρΗ 4.4), ενώ οι αρουραίοι στον έλεγχο ομάδα και ομάδα DMH δόθηκε ένα ρυθμιστικό κιτρικού όχημα (ρΗ 4.4) σε έναν όγκο 1 ml /kg, ip Ελήφθησαν δείγματα αίματος αμέσως πριν και 1 εβδομάδα μετά την ένεση STZ ή του φορέα της από την ουραία φλέβα μετά από νηστεία για 24 ώρες.

Ανάπτυξη του ορθοκολικού καρκίνου

Δύο εβδομάδες μετά την έγχυση οχήματος ή STZ, οι αρουραίοι στις ομάδες παρέμβασης εγχύθηκαν (ίρ) με είτε DMH (25 mg /kg σωματικού βάρους? DMH διαλύθηκε σε φυσιολογικό ορό) ή 0,9% NaCl μία φορά την εβδομάδα για 12 εβδομάδες. Μία εβδομάδα μετά την τελευταία ένεση ϋΜΗ, πέντε αρουραίοι από κάθε ομάδα θυσιάστηκαν μετά από νηστεία για 24 ώρες για την ταυτοποίηση ACF. Συλλέχθηκαν δείγματα αίματος με καρδιακή παρακέντηση. ιστοί Colon συλλέχθηκαν και χωρίζεται σε δύο μέρη. Ένα μέρος αποθηκεύθηκε σε υγρό άζωτο για την ανίχνευση της δραστικότητας των ενζύμων, και το άλλο μέρος ήταν για την παρατήρηση των ACF. Δώδεκα εβδομάδες μετά την τελευταία ένεση, τα υπόλοιπα αρουραίοι θυσιάστηκαν για τον υπολογισμό της συχνότητας εμφάνισης όγκου, μέσος αριθμός όγκων και τον όγκο του όγκου. Στη συνέχεια, οι ιστοί κόλου συλλέχθηκαν και χωρίζεται σε δύο μέρη. Ένα μέρος αποθηκεύθηκε σε υγρό άζωτο για την ανίχνευση της δραστικότητας των ενζύμων, και το άλλο μέρος σταθεροποιήθηκε σε 4% παραφορμαλδεΰδη για ανάλυση παθολογία. Όλα τα ζώα θυσιάστηκαν με CO

2 ασφυξία

παραμέτρους του αίματος

Τα δείγματα αίματος συλλέχθηκαν και φυγοκεντρήθηκαν στα 1000 g για 10 λεπτά για να συλλεχθεί ο ορός, το οποίο αποθηκεύτηκε στους. – 20 ° C μέχρι την ανάλυση. Γλυκόζη νηστείας στο αίμα τα επίπεδα (FBG) μετρήθηκαν με τη μέθοδο της οξειδάσης της γλυκόζης (GOD, Applygen Technologies Inc., Πεκίνο, Κίνα). Οι συγκεντρώσεις στον ορό του τριγλυκεριδίων (TG), της ολικής χοληστερόλης (TC), χαμηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνης χοληστερόλης (LDL-C), και χοληστερόλη λιποπρωτεΐνης υψηλής πυκνότητας (HDL-C) προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας αυτοματοποιημένο βιοχημικός αναλυτής (TOSHIBA-40FR). Η ινσουλίνη ορού (INS) συγκεντρώσεις μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA) σετ σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (Cusabio, Wuhan Huamei Biotech Co. Ltd., Wuhan, Κίνα).

Αναγνώριση των ACF

ACF ταυτοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως. Εν συντομία, τα άνω και κάτω τελεία συλλέχθηκαν και πλύθηκαν με 0.01 mol /L PBS ακολουθούμενη από σταθεροποίηση σε 4% ουδέτερη ρυθμισμένου παραφορμαλδεϋδη για 24 ώρες. Οι ιστοί κόλου βάφτηκαν σε 0.5% διαλύματος κυανού του μεθυλενίου για 5 λεπτά, ακολουθούμενο από ένα ξέπλυμα πλύση. Ο συνολικός αριθμός των ACF και ο αριθμός των φυσιολογικών κρυπτών (ACS) σε κάθε εστίαση μετρήθηκαν κάτω από ένα μικροσκόπιο φωτός (40 φορές).

Υπολογισμός της επίπτωσης των όγκων, τον αριθμό και τον όγκο

όγκου συχνότητα είναι ο αριθμός των αρουραίων που αναπτύχθηκαν όγκοι στον ιστό του παχέος εντέρου με την επαναλαμβανόμενη ένεση ϋΜΗ κατά τη διαδικασία ολόκληρο το πείραμα. Οι αρουραίοι που όγκοι κατέστησαν ορατές γενικά με χονδρική εξέταση σε ιστό κόλον στο τέλος του πειράματος ήταν να αναφέρει φέροντες όγκο αρουραίους. Η συχνότητα εμφάνισης όγκων, μέσος αριθμός όγκων και όγκων μεγέθους υπολογίζονται με τους ακόλουθους τύπους [24]:

Η ιστολογική δοκιμασία και πολλαπλασιαζόμενα Cell Nuclear Antigen (PCNA) χρώση

Κανονική ιστό του παχέος εντέρου, του όγκου του παχέος εντέρου και ιστούς γειτονικούς όγκοι συλλέχθηκαν και μονιμοποιήθηκαν σε 4% ουδέτερη ρυθμισμένου παραφορμαλδεϋδη για 24 ώρες. Οι ιστοί εγκλείστηκαν σε παραφίνη κόπηκαν σε 4-μm τμήματα για πλακίδια ιστολογία και χρωματίστηκαν για αιματοξυλίνη και ηωσίνη (ΗΕ) και βαφή PCNA ανοσοκηλιδώσεως με χρησιμοποίηση ενός συμπλόκου μέθοδο στρεπταβιδίνης-βιοτίνης-ανοσοϋπεροξειδάσης (ένα εμπορικό κιτ) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Καφέ-κίτρινο χρωματισμένο πυρήνες θεωρήθηκαν θετικά. Για τον προσδιορισμό της πολλαπλασιαστικής δείκτη, μετρήθηκαν πέντε φακό υψηλής ισχύος (HP) οπτικά πεδία (200 κύτταρα το καθένα) που αποτελείται από ένα σύνολο 1.000 κυττάρων. Η πολλαπλασιαστική δείκτης (ΡΙ) εκφράστηκε ως το ποσοστό των PCNA-θετικών πυρήνων μεταξύ του συνολικού αριθμού των κυττάρων που μετρήθηκαν.

Δοκιμασία της δραστικότητας του ενζύμου

Οι δραστηριότητες του ενζύμου μετρήθηκε τόσο περινεοπλαστικό και καρκινικές περιοχές. Αν δεν βρέθηκαν καθόλου όγκους, τα δείγματα ιστού αποκόπηκαν τυχαία. Κατεψυγμένα ιστού (0,1 g) ομογενοποιήθηκε σε ένα γυάλινο ομογενοποιητή με 0,9 ml φυσιολογικού ορού. Για να διατηρηθεί η δραστικότητα των ενζύμων, η όλη διαδικασία λείανσης έγινε σε πάγο. Μετρήθηκαν Η δραστηριότητα της εξοκινάσης (HK), πυροσταφυλική κινάση (ΡΚ) και αφυδρογονάσης πυροσταφυλικού (ΡΟΗ).

Στατιστικές Αναλύσεις

Όλα τα αποτελέσματα παρουσιάστηκαν ως το μέσο ± S.E.M. και όλες οι τιμές P αναφερθεί είναι δύο-ουρά και η P & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Για τις παραμέτρους με κατανομή Gauss, οι συγκρίσεις του σωματικού βάρους μεταξύ κάθε δύο ομάδων αλλά και μεταξύ NPD που τρέφονται και HFD-τρέφονται αρουραίους, ο «αριθμός των ACF», τα «Όγκοι /Όλες οι αρουραίοι», «Οι όγκοι /όγκου που φέρουν αρουραίους» και « όγκος των Όγκων »μεταξύ ΩΜΗ και η ομάδα STZ + ΩΜΗ, τις δραστηριότητες των ενζύμων μεταξύ περινεοπλαστικό και εντός του όγκου, καθώς και μεταξύ των δύο ομάδων ήταν όλοι πραγματοποιείται με τη χρήση της δοκιμής Τ αταίριαστο μαθητή. Όγκου συχνότητα συγκρίθηκε χρησιμοποιώντας πλατεία τεστ Chi. Η ανάλυση των δεδομένων έγινε χρησιμοποιώντας το στατιστικό πακέτο για κοινωνικές επιστήμες, έκδοση 18 (SPSS λογισμικού, SPSS Inc., Chicago, ΗΠΑ).

Αποτελέσματα

Φυσικές παράμετροι

Ο χρόνος διάρκεια του πειράματος δείχνεται στο Σχήμα 1. μία εβδομάδα μετά την έναρξη του πειράματος, ένας αρουραίος στην ομάδα ελέγχου πέθαναν απροσδόκητα. Λόγω της σοβαρής απώλειας βάρους, ένας αρουραίος στην ομάδα STZ + DMH πέθαναν επίσης 3 εβδομάδες πριν από την παρατήρηση του όγκου.

STZ χορηγήθηκε ως 35 mg /kg, ε.π. και DMH χορηγήθηκε ως 25 mg /kg /εβδομάδα, ε.π. Οι συντμήσεις υποδηλώνουν STZ: στρεπτοζοτοκίνη? ΩΜΗ: 1,2-διμεθυλυδραζίνη? ACF:. Φυσιολογικών κρυπτών εστιών

Η

Το σχήμα 2 απεικονίζει ότι το βάρος του σώματος όλων των αρουραίων συνέχισε να αυξάνεται πάνω από το πρωτόκολλο δύο μήνες, και σίτιση του HFD οδήγησε σε στατιστικά σημαντική αύξηση στο σωματικό βάρος σε σύγκριση με NPD -fed αρουραίους (413,68 ± 2,76 έναντι 370,90 ± 4,69, P & lt? 0,05). Μετά την έγχυση του STZ, το σωματικό βάρος των αρουραίων στην ομάδα ελέγχου και ομάδα STZ συνέχισε να αυξάνεται καθόλη τη διάρκεια του πειράματος, και το βάρος του σε αυτούς στην ομάδα STZ αυξήθηκε ταχύτερα από εκείνες στην ομάδα ελέγχου. Ωστόσο, μαζί με την ένεση του ϋΜΗ, το σωματικό βάρος των αρουραίων άρχισε να μειώνεται και το βάρος του σε αυτούς στην ομάδα STZ + DMH μειώθηκε ταχύτερα από εκείνες στην ομάδα DMH. Στο τέλος του πειράματος, το σωματικό βάρος των αρουραίων στην ομάδα STZ αυξήθηκε σημαντικά σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (581.82 ± 4.88 έναντι 515,07 ± 2,76, Ρ & lt? 0,05). Σε αντίθεση, DMH-επαγώμενη (ομάδα DMH και ομάδα STZ + DMH) βάρη μειώθηκαν σε σύγκριση με εκείνες της ομάδας ελέγχου (461,25 ± 7,68 ή 357.24 ± 9.14 έναντι 515,07 ± 2,76, Ρ & lt? 0,05), και τα βάρη των αρουραίων η ομάδα STZ + ΩΜΗ ήταν χαμηλότερες από εκείνες στην ομάδα ΩΜΗ (357.24 ± 9.14 έναντι 461,25 ± 7,68, P & lt? 0,05)

είναι

οι τιμές εκφράζονται ως μέση τιμή ± SEM. και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ Τ αταίριαστο φοιτητή στο P & lt? 0,05. Κατά την ολοκλήρωση του πειράματος, * P & lt? 0,05 vs. ομάδα ελέγχου.

# P & lt?. 0,05 vs. ομάδα ΩΜΗ

Η

Η ορολογική ανάλυση

Αίμα βιοχημικών δεικτών (FBG, TG, TC, HDL-C, LDL-C, INS) ήταν μετράται αμέσως πριν και μία εβδομάδα μετά την ένεση του οχήματος ή STZ (Πίνακας 2). Τα επίπεδα ορού FBG καθώς TG, LDL-C και INS ήταν όλα σημαντικά αυξημένη σε HFD-τρέφονται αρουραίους σε σύγκριση με NPD τρέφονται αρουραίους πριν από την ένεση του STZ (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Ωστόσο, υπήρχε μια μείωση της HDL-C (0.41 ± 0.02 έναντι 0.51 ± 0.03, Ρ & lt? 0,05). Ένεση STZ οδήγησε σε σημαντική αύξηση του FBG, TG, TC και LDL-C που σχετίζεται με τη σημαντική μείωση της HDL-C. Επιπλέον, αν και η ένεση STZ παρήγαγε μια μείωση του επιπέδου άουτ στο HFD-τρέφονται αρουραίους (72,86 ± 3,75 έναντι 89,72 ± 2,62, Ρ & lt? 0,05), το επίπεδο της INS ήταν ακόμη σημαντικά υψηλότερη από εκείνη του in NPD τρέφονται αρουραίους (72,86 ± 3,75 έναντι 30,90 ± 3,28, P & lt? 0,05).

η

ACF παρατήρηση

Μετά από 12 εβδομάδες ένεση ΩΜΗ, του παχέος ACF εντοπίστηκαν στην ομάδα ΩΜΗ και STZ + ομάδα DMH (Σχήμα 3), αλλά όχι στην ομάδα ελέγχου και ομάδα STZ. Τ test unpaired Student χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση της διαφοράς μεταξύ της ομάδας ϋΜΗ και της ομάδας STZ + DMH. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, ο συνολικός αριθμός των ACF στην ομάδα STZ + DMH ήταν σημαντικά υψηλότερη από ότι στην ομάδα ϋΜΗ (230.80 ± 8.85 έναντι 141,00 ± 5,26, Ρ & lt? 0,05). Ο αριθμός των εστιών που περιέχουν 1 κρύπτη, 2 κρυπτών και ≥3 κρύπτες αυξήθηκαν επίσης σημαντικά. Στην ομάδα STZ + DMH, ο αριθμός των εστιών που περιέχουν περισσότερο από 3 κρύπτες ήταν ακόμη υψηλότερο από εκείνο των εστιών που περιέχουν 2 κρύπτες (74,60 ± 3,11 έναντι 45,40 ± 1,57, Ρ & lt? 0,05). Επιπλέον, ορισμένοι ιστοί που μοιάζουν με όγκο βρέθηκαν στην ομάδα STZ + ΩΜΗ (Σχήμα 3F).

Εικ. 3Α: κανονικές εστίες κρύπτη (100 ×). Σύκο. 3Β: Crypt διεύρυνση και την παραμόρφωση (40 ×). Σύκο. 3C: ACF σχηματίζεται από 2 παρεκκλίνουσα κρύπτες (40 ×). Σύκο. 3D: ACF σχηματίζεται από 3 παρεκκλίνουσα κρύπτες (40 ×). Σύκο. 3Ε: ACF σχηματίζεται από ≥3 παρεκκλίνουσα κρύπτες (40 ×). Σύκο. 3F:. Όγκων που μοιάζει με ιστό (40 ×)

Η

Συχνότητα, τον αριθμό και τον όγκο των παχέος όγκους

Κατά την ολοκλήρωση του πειράματος, όλοι οι αρουραίοι θανατώθηκαν (10 στην ομάδα ϋΜΗ και 9 στην ομάδα STZ + DMH). Επτά ποντίκια στην ομάδα ϋΜΗ και οκτώ στην ομάδα STZ + DMH βρέθηκαν να έχουν όγκους (Πίνακας 4). Η συχνότητα εμφάνισης των όγκων στην ομάδα STZ + DMH ήταν υψηλότερη από ότι στην ομάδα DMH, αλλά η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (88,89% έναντι 70,00%, Ρ & gt? 0,05). Ο όγκος των όγκων, ο συνολικός αριθμός των όγκων και μέσος αριθμός των όγκων στην ομάδα STZ + DMH ήταν σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με εκείνη στην ομάδα DMH (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Ο όγκος του μεγαλύτερου όγκου που βρέθηκαν στην ομάδα STZ + ΩΜΗ ανήλθε σε 665,5 χιλιοστά

3, αλλά ο μικρότερος σε αυτή την ομάδα ήταν μόλις 6 mm

3. Σε αντίθεση, ο όγκος του μεγαλύτερου όγκου στην ομάδα ΩΜΗ ήταν μόνο 75 mm

3, και ο μικρότερος ήταν μόνο 4 mm

3 (σχήμα 4). Η ανάπτυξη όγκων στον εντερικό αυλό παρενέβαινε με τις κινήσεις του εντέρου, με αποτέλεσμα την δύσκολη αφόδευση και την οικοδόμηση των εντερικών αερίων σε ορισμένες αρουραίους (Σχήμα 4D).

Το Σχ. 4Α: Το μεγαλύτερο όγκο που λαμβάνεται από την ομάδα που STZ + DMH. Σύκο. 4Β: Αρκετές μικρών όγκων μαζί απομονωθεί από την ομάδα DMH. Σύκο. 4C: Αρκετές όγκοι που συλλέγονται από ένα αρουραίο στην ομάδα STZ + DMH. Σύκο. 4D:. Η ανάπτυξη του όγκου στον εντερικό αυλό παρεμβαίνει με τις κινήσεις του εντέρου, με αποτέλεσμα την δύσκολη αφόδευση και την οικοδόμηση των αερίων στο έντερο σε ορισμένες αρουραίους

Η

δείκτης πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων του παχέος

PCNA έντονα εκφράζεται σε ϋΜΗ-επαγόμενης καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου, ιδιαίτερα στην ομάδα + STZ DMH. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 5, ο δείκτης πολλαπλασιασμού (ΡΙ) στην ομάδα + STZ DMH ήταν σημαντικά υψηλότερο από εκείνο στην ομάδα DMH (84.5 ± 6.72 έναντι 52.3 ± 5.58, Ρ & lt? 0,05). Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι η θεραπεία DMH προώθησε σημαντικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, η οποία επιταχύνεται από το διαβήτη επαγόμενο από STZ.

Ο ΡΙ εκφράζεται ως το ποσοστό των PCNA-θετικών πυρήνων μεταξύ του συνολικού αριθμού των κυττάρων που μετρήθηκαν. Οι τιμές εκφράζονται ως μέση ± S.E.M. και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ Τ αταίριαστο φοιτητή στο P & lt? 0,05. * Ρ & lt?. 0,05 vs. ομάδα DMH

Η

Ανάλυση γλυκολυτικών ενζύμων

Όχι σχηματισμό όγκου ανιχνεύθηκε στην ομάδα ελέγχου και ομάδα STZ, ως εκ τούτου αυτά τα δείγματα κολικού ιστού αποκόπηκαν τυχαία . Στην ομάδα ϋΜΗ και ομάδα STZ + DMH, του παχέος δείγματα συλλέχθηκαν από περινεοπλαστικό και τις ενδοογκική περιοχές αντίστοιχα. Οι δραστηριότητες του Χονγκ Κονγκ, ΡΚ και PDH σε κολονικό ιστούς μετρήθηκαν και παρουσιάζονται στο Σχήμα 6.

Όχι σχηματισμό όγκου ανιχνεύθηκε στην ομάδα και STZ ομάδα ελέγχου, έτσι αναλύσουμε τα δείγματα τυχαία. Τα δείγματα συλλέχθηκαν από την ενδοογκική και περινεοπλαστικό περιοχές αντίστοιχα στην ομάδα ϋΜΗ και ομάδα STZ + DMH. Μετρήθηκαν οι δραστηριότητες του εξοκινάση (HK), κινάση πυροσταφυλικού (ΡΚ) και αφυδρογονάσης πυροσταφυλικού (ΡΟΗ) σε κολικό ιστούς. Οι τιμές εκφράζονται ως μέση ± S.E.M. και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ Τ αταίριαστο φοιτητή στο P & lt? 0,05. Σύκο. 6Α: Ανάλυση του HK. * Ρ & lt? 0,05 vs. ομάδα ελέγχου.

# P & lt? 0,05 έναντι Peritumor αντίστοιχα.

$ P & lt? 0,05 vs. ομάδα ΩΜΗ αντίστοιχα? Σύκο. 6Β: Ανάλυση του PK. * Ρ & lt? 0,05 vs. ομάδα ελέγχου.

# P & lt? 0,05 έναντι Peritumor αντίστοιχα? Σύκο. 6C: Ανάλυση των PDH. * Ρ & lt? 0,05 vs. ομάδα ελέγχου.

# P & lt? 0,05 έναντι Peritumor αντίστοιχα.

$ P & lt? 0,05 vs. ομάδα ΩΜΗ αντίστοιχα. Σύκο. 6D: Ανάλυση του Χονγκ Κονγκ, ΡΚ και PDH δραστηριότητες σε διαφορετικά χρονικά πορεία στην ομάδα STZ + ΩΜΗ. * P & lt? 0,05 έναντι Ξεκινήστε σημείο αντίστοιχα.

# P & lt?. 0,05 έναντι ένεση STZ αντίστοιχα

Η

Όπως φαίνεται στο Σχήμα 6Α, οι δραστηριότητες του Χονγκ Κονγκ στις εντός του όγκου των ιστών στην ομάδα ΩΜΗ και η ομάδα STZ + ΩΜΗ ήταν σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με το ότι σε περινεοπλασματικής ιστούς και φυσιολογικούς ιστούς (συμπεριλαμβανομένου ομάδα ελέγχου και STZ ομάδα, Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Η δραστηριότητα του HK στην ομάδα STZ ήταν επίσης υψηλότερη από ότι στην ομάδα ελέγχου και περινεοπλαστικό ιστών στην ομάδα ϋΜΗ (61,26 ± 1,57 έναντι 44,61 ± 1,48 και 48,01 ± 1,70, Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Ανεξάρτητα από την ενδοογκική ή περινεοπλαστικό τοποθεσία, η δραστηριότητα HK στην ομάδα STZ + DMH ήταν υψηλότερη από ότι στην ομάδα DMH (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα).

Οι δραστηριότητες των PK (Σχήμα 6Β) στην εντός του όγκου ιστούς του κόλου σε ομάδα ϋΜΗ και ομάδα STZ + DMH ήταν σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με εκείνη περινεοπλαστικό ιστούς και ήταν επίσης υψηλότερες από ό, τι στην ομάδα ελέγχου (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Ωστόσο, καμία διαφορά στις ενδοογκική ιστούς βρέθηκε μεταξύ ομάδα ϋΜΗ και της ομάδας STZ + DMH. Η δραστηριότητα των ΡΚ στην ομάδα STZ ήταν υψηλότερη από ότι στην ομάδα ελέγχου (111.42 ± 4.10 έναντι 82.40 ± 4.96, Ρ & lt? 0,05) και ήταν υψηλότερες από τις περινεοπλασματικής ιστών στην ομάδα STZ + DMH, χωρίς να φθάσει στατιστική σημασία (Ρ & gt? 0.05). Η δραστηριότητα των ΡΚ σε περινεοπλαστικό ιστούς στην ομάδα STZ + DMH ήταν υψηλότερη από ό, τι στην ομάδα ελέγχου (102,66 ± 4,68 έναντι 82,40 ± 4,96, Ρ & lt? 0,05) παρατηρήθηκε, αλλά καμία διαφορά μεταξύ της ομάδας ελέγχου και των περιογκική ιστούς του ομάδα DMH

Μια σημαντική μείωση της δράσης της PDH (Σχήμα 6C) βρέθηκε σε διαβητικούς αρουραίους σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου. (1.34 ± 0.05 έναντι 2.32 ± 0.05, Ρ & lt? 0,05). Επιπλέον, η δράση της PDH στην ενδοογκική ιστό σημαντικά μειωμένη σε σύγκριση με τα περινεοπλασματικής ιστούς (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα). Τόσο στις introtumoral και περιογκική ιστούς, η δραστηριότητα των PDH στην ομάδα STZ + DMH ήταν σημαντικά χαμηλότερη από την ομάδα DMH (Ρ & lt? 0,05, αντίστοιχα)

Τέσσερα σημεία σε χρονική πορεία του πειράματος επιλέχθηκαν

να. δείχνουν τις αλλαγές αυτών των τριών ενζύμων δραστηριότητα στην ομάδα STZ + ΩΜΗ (Σχήμα 6D). Δεν αρουραίοι θυσιάστηκαν στο σημείο σημείο εκκίνησης και ένεση ϋΜΗ, και τα δεδομένα σε αυτά τα δύο σημεία αντικαταστάθηκαν από τα δεδομένα στην ομάδα ελέγχου και την ομάδα STZ στο τέλος του πειράματος, αντιστοίχως. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 6D, οι δραστηριότητες του Χονγκ Κονγκ και PK ήταν όλα αυξήθηκαν σημαντικά μετά το σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2 προκλήθηκαν (62.26 ± 2.06 έναντι 44.61 ± 1.48, 100,79 ± 1,49 έναντι 80,54 ± 4,27, P & lt? 0,05). Ότι, υπήρχε μια μείωση στη δραστηριότητα της PDH (1.34 ± 0.05 έναντι 2.32 ± 0.05, Ρ & lt? 0,05). Επιπλέον, τα τρέχοντα αποτελέσματα έδειξαν ότι η επαναλαμβανόμενη έγχυση ΩΜΗ οδήγησε σε περαιτέρω αύξηση στο Χονγκ Κονγκ και την PK και μείωση των δραστηριοτήτων PDH (P & lt? 0,05, αντίστοιχα).

Συζήτηση

Ένας από τους κύριους στόχους της παρούσας εργασίας ήταν να προσδιοριστεί εάν σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2 θα μπορούσε να αυξήσει τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου σε ένα ζωικό μοντέλο. Ο δεύτερος στόχος ήταν η διερεύνηση των πιθανών μηχανισμών που εμπλέκονται στη διαδικασία αυτή. Ως εκ τούτου, οι δραστηριότητες του Χονγκ Κονγκ, ΡΚ και PDH σε ορθοκολικό ιστούς μετρήθηκαν για να αξιολογηθεί η συνεισφορά των μεταβολικών αλλαγών στη διαδικασία της ογκογένεσης. Έτσι, οι αρχικές μας προσπάθειες κατευθύνονταν προς τη δημιουργία ενός μοντέλου διαβήτη τύπου 2, που θα αντανακλά στενά την φυσική ιστορία και μεταβολικά χαρακτηριστικά του ανθρώπινου διαβήτη τύπου 2, μετά από το οποίο καρκίνο του παχέος εντέρου προκλήθηκε χρησιμοποιώντας ΩΜΗ.

Το ζωικό μοντέλο διαβήτη τύπου 2 επάχθηκε χρησιμοποιώντας σίτιση υψηλή περιεκτικότητα σε λιπαρά, σε συνδυασμό με μια χαμηλή δόση STZ (35 mg /kg). Mansor et al. έχουν αναφέρει ότι αυτό το μοντέλο θα μπορούσε όχι μόνο αναπαράγουν την παθολογία του ανθρώπινου διαβήτη, αλλά επίσης μιμούνται τη διαδικασία της νόσου, αλλά η δόση του STZ πρέπει να επιλέγονται προσεκτικά [22]. Οι διαβητικοί αρουραίοι που επάγεται από διάφορες δόσεις STZ (15, 25, 35, 45 και 55 mg /kg) σε συνδυασμό με HFD μελετήθηκαν από τον Κ Srinivasan et al. [23]. Οι μεταβολικές μεταβολές που προκαλούνται από υψηλότερες δόσεις STZ (45 και 55 mg /kg) έμοιαζε με το φαινότυπο του διαβήτη τύπου 1. Αντίθετα, χαμηλές δόσεις STZ (15 και 25 mg /kg) δεν παράγουν σημαντική υπεργλυκαιμία. Ως εκ τούτου, HFD σε συνδυασμό με μία χαμηλή δόση STZ (35 mg /kg) ήταν η πιο επιθυμητή μέθοδος επαγωγής διαβήτη τύπου 2. Στη μελέτη μας, μετά από 2 μήνες από διαιτητικό έλεγχο, οι HFD τρέφονται αρουραίους ήταν ήδη ήπια υπεργλυκαιμικά και το σωματικό βάρος αυξήθηκε γρήγορα λόγω της κατανάλωσης του μια διατροφή πλούσια σε ενέργεια με τη μορφή των κορεσμένων λιπών σε σύγκριση με NPD-τρέφονται αρουραίους. Εν τω μεταξύ, το επίπεδο της INS αυξάνεται σημαντικά σε σχέση με τις ομάδες NPD-τρέφονται. Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι οι HFD-τρέφονται αρουραίους είχε ήδη προβάλει αντίσταση στην ινσουλίνη με αντισταθμιστική υπερινσουλιναιμία [25]. Μετά την έγχυση του STZ, το επίπεδο των βιοχημικών δεικτών του αίματος στα HFD-τροφοδοτούνται ομάδες ήταν σημαντικά αυξημένη, με εξαίρεση την HDL-C και INS. Η μείωση του INS μπορεί λόγω της καταστροφής των βήτα κύτταρα του παγκρέατος με ένεση STZ [26], [27], αλλά το επίπεδο της INS ήταν ακόμα υψηλότερη από εκείνη των NPD-τρέφονται αρουραίους. Όπως καταδεικνύεται Srinivasan, οι αυξημένες συγκεντρώσεις γλυκόζης παρέμειναν σχετικά σταθερές σε αυτό το μοντέλο, το οποίο θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για μακροχρόνιες μελέτες για διαβητικές επιπλοκές [23].

Στην παρούσα μελέτη, η DMH μοντέλο επαγόμενης καρκινογένεσης του παχέος εντέρου χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση του κινδύνου του καρκίνου σε διαβητικούς αρουραίους υπό το φως του σχηματισμού ACF και την επίπτωση του όγκου. Mohania D et al, ανέπτυξε με επιτυχία μια ορθοκολικό καρκίνο μοντέλο με αυτόν τον παράγοντα [28]. επιλέχθηκε ως ένα ενδιάμεσο βιολογικό δείκτη αξιολόγησης στην παθογένεση του καρκίνου του παχέος εντέρου ACF. ACF αναφέρονται στην ανώμαλη αλλαγή της κανονικής εστίες. Greaten εστιών, επιθηλίου πάχυνση και εστίες με πολλά ή πολλαπλές μεταλλάξεις συγκεντρώνονται σε ένα εστιακό διανομής είναι τα χαρακτηριστικά της ACF [29] – [32]. Τόσο σε τρωκτικά ή ανθρώπους, στην παθογένεση του καρκίνου του παχέος εντέρου που προκαλείται από καρκινογόνους παράγοντες, ACF είναι προκαρκινικές αλλοιώσεις του καρκίνου του παχέος εντέρου και θεωρούνται ότι είναι καλό βιολογικοί δείκτες για την αξιολόγηση της επίδρασης των φαρμάκων που χρησιμοποιούνται για την πρόληψη και τον έλεγχο του σχηματισμού του καρκίνου του παχέος εντέρου σε αρουραίους [32], [33]. Rodrigues et al. απέδειξαν ότι η DMH επαγόμενη ορθοκολικού καρκίνου σε μοντέλο αρουραίων είναι ένα έγκυρο εργαλείο για τη διερεύνηση της σύνδεσης του ACF με καρκίνο του παχέος εντέρου. ACF μπορεί να θεωρηθεί ως πρώιμη μορφολογική δείκτες στην παθογένεση καλά διαφοροποιημένοι όγκοι στην καρκινογένεση κόλον [32]. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης έδειξαν ότι ο αριθμός των ACF και ο αριθμός των εστιών που περιέχουν διαφορετικό αριθμό κρυπτών στην ομάδα STZ + DMH αυξημένη σε σύγκριση με την ομάδα DMH. Στην ομάδα ΩΜΗ, 89,4% ACF είχαν ένα ή δύο κρύπτες, και μόνο το 10,6% ACF είχε τρεις ή περισσότερες κρύπτες. Ωστόσο, στην ομάδα STZ + DMH, η συχνότητα εμφάνισης των ACF με μία ή δύο κρύπτες ήταν 67,7% και 32,3% είχαν τρεις ή περισσότερες κρύπτες. Αντίθετα, η ομάδα STZ είχε κανένα σχηματισμό ACF. Επιδημιολογικές ευρήματα έχουν δείξει ότι η συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του παχέος εντέρου σε ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη ήταν στενά συνδεδεμένη με την διάρκεια του σακχαρώδη διαβήτη. Έτσι, προκύπτει ότι χρειάζεται μια πολύ μεγαλύτερος χρόνος για τους αρουραίους στην ομάδα STZ να αναπτύξουν ACF. Η σημαντική αύξηση των εστιών που περιέχουν ≥3 κρύπτες και η ανίχνευση του όγκου που μοιάζει με ιστό στην ομάδα STZ + DMH έδειξε ότι η παρουσία του σακχαρώδη διαβήτη συντομευθεί η διάρκεια της ογκογένεσης. Σύμφωνα, Zaafar et al. ανέφεραν ότι ο διαβήτης προωθεί το μέγεθος του κυττάρου και τις φλεγμονώδεις αντιδράσεις στο στρώμα του βλεννογόνου, όπως λεμφοειδή πολλαπλασιασμό, συμφόρηση των αιμοφόρων αγγείων και ίνωση [34]. Στο τέλος της παρούσας μελέτης μας, οι όγκοι βρέθηκαν τόσο στην ομάδα ΩΜΗ και η ομάδα STZ + ΩΜΗ. Η συχνότητα εμφάνισης, ο αριθμός και το μέγεθος των όγκων στην ομάδα STZ + DMH αυξημένη σε σύγκριση με εκείνη της ομάδας DMH. Σε αντίθεση, δεν παρατηρήθηκαν όγκοι βρέθηκαν στην ομάδα STZ. Ότι δεν υπάρχουν βλάβες σε γενικές γραμμές έγιναν ορατά με το ακαθάριστο εξέταση στη μελέτη Zaafar [34]. Διαφορετικές ζώα επιλέχθηκαν στα πειράματα μπορεί να είναι η πιθανή εξήγηση για αυτό το φαινόμενο. Οι ποντικοί που χρησιμοποιούνται σε πείραμα τους, ενώ επιλέχθηκαν οι αρουραίοι στη μελέτη μας. Το χάσμα του μεγέθους του σώματος μπορεί να αντανακλά το μέγεθος του όγκου, οπότε οι όγκοι ήταν δύσκολο να απεικονιστεί σε ιστούς ποντικών κόλον. Ωστόσο, δεν υπήρξε σημαντική διαφορά στη συχνότητα των όγκων μεταξύ της ομάδας STZ + DMH και ομάδα DMH σε τρέχον αποτέλεσμα. Οι πιθανές εξηγήσεις για αυτό το φαινόμενο μπορεί να περιλαμβάνει το περιορισμένο μέγεθος του δείγματος, με μόνο 15 αρουραίοι σε κάθε ομάδα. Συνολικά, αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι οι διαβητικοί αρουραίοι έχουν υψηλό κίνδυνο ορθοκολικού καρκίνου.

ταχύ πολλαπλασιασμό είναι το κύριο χαρακτηριστικό των καρκινικών κυττάρων. Πυρηνικό αντιγόνο πολλαπλασιαζόμενων κυττάρων (PCNA) είναι ένα DNA σφιγκτήρας που δρα ως παράγοντας επεξεργασιμότητας για δ πολυμεράση DNA σε ευκαρυωτικά κύτταρα και είναι απαραίτητη για την αντιγραφή. Bostick et al. έχουν αναφέρει ότι η έκφραση του PCNA είναι στενά συνδεδεμένη με τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε ιστό του παχέος εντέρου και μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως ένα πολύ αξιόπιστο δείκτη για την αξιολόγηση της δυναμικής πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων [35]. Η παρούσα μελέτη έδειξε ότι το PCNA ήταν ιδιαίτερα εκφράζεται σε όλους τους ιστούς του όγκου και ότι η έκφραση του PCNA αυξήθηκε σε κολονικό ACF σε σύγκριση με εκείνη των κανονικών εντερικών αδένων. έκφραση PCNA μπορεί να αντανακλά δραστικότητα κυτταρικού πολλαπλασιασμού και χρησιμοποιείται ως ένα αξιόπιστο δείκτη για την αξιολόγηση της κινητικής του πολλαπλασιασμού των κυττάρων του όγκου. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι PCNA εκφράστηκε σε ϋΜΗ-επαγόμενης καρκινικά κύτταρα κόλου, και η ισχυρότερη δραστικότητα πολλαπλασιασμού παρατηρήθηκε στην ομάδα DMH + STZ. Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι η θεραπεία με STZ θα μπορούσε να προωθήσει τον πολλαπλασιασμό DMH επαγόμενη κύτταρο.

Προηγούμενη υπόθεση σχετικά με τους πιθανούς μηχανισμούς που εμπλέκονται στον καρκίνο DM σχετίζονται ήταν η μη φυσιολογική αύξηση του ινσουλινοειδούς αυξητικού παράγοντα-1 (IGF-1) και