Αφηρημένο

Ιστορικό

Λίγα είναι γνωστά για τα μόρια που συμβάλλουν στην ανάπτυξη των επιθηλιακών καρκινωμάτων των ωοθηκών (EOC), οι οποίες παραμένουν ο πιο θανατηφόρος γυναικολογικός καρκίνος στις γυναίκες. Η χημειοκίνη φρακταλκίνη /CX

3CL1 έχει αναφερθεί ευρέως για να παίξει ένα βιολογικά σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του όγκου και την εξάπλωση. Αναφέρουμε εδώ την πρώτη έρευνα της έκφρασης και του ρόλου του CX

3CL1 στο ΕΓΚ.

Αποτελέσματα

Τα επιθηλιακά κύτταρα από την επιφάνεια της ωοθήκης και τις σάλπιγγες και από καλοήθεις, οριακά και κακοήθεις όγκους όλα βάφονται θετικά για CX

3CL1. Σε δείγματα όγκων από 54 γυναίκες που υποβλήθηκαν σε χειρουργική θεραπεία για EOC διάγνωση, CX

3CL1 ανοσοαντιδραστικότητα ανομοιόμορφα κατανεμημένη σε επιθηλιακά κύτταρα του όγκου, και κυμάνθηκε από ισχυρή (33%) έως ανύπαρκτη (17%). Αυτή η άνιση κατανομή του CX

3CL1 δεν αντικατοπτρίζει τη μορφολογική ετερογένεια του ΕΓΚ. Είναι συσχετίστηκε θετικά με το δείκτη πολλαπλασιασμού Ki-67 και με GILZ (επαγόμενη από γλυκοκορτικοειδή φερμουάρ λευκίνης), προηγουμένως ταυτοποιηθεί ως ενεργοποιητής του πολλαπλασιασμού των κακοηθών κυττάρων EOC. Ιεραρχική ανάλυση ομαδοποίησης, όπως η ηλικία κατά τη διάγνωση, το βαθμό του όγκου, το στάδιο της νόσου, Ki-67 index, CX

3CL1, SDF-1 /CXCL12 και GILZ ανοσοχρώση βαθμολογίες, διακρίνονται δύο μεγάλες συστάδες που αντιστοιχούν σε χαμηλά και τα υψηλά επίπεδα του πολλαπλασιασμού και της διαφορετικής από την άποψη της GILZ και CX

έκφραση 3CL1.

GILZ

υπερέκφραση του καρκινώματος που προέρχονται από BG1 γραμμή κυττάρων οδήγησε σε παράλληλες αλλαγές στην CX

3CL1 προϊόντα. Αντίθετα, CX

3CL1 προωθείται μέσω της σύνδεσης με CX

ενεργοποίηση 3CR1 ΑΚΤ της και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων BG1. Σε ένα μοντέλο υποδόριου ξενομοσχεύματος ποντικού, η υπερέκφραση του

GILZ

σχετίστηκε με υψηλότερη έκφραση του CX

3CL1 και ταχύτερη ανάπτυξη του όγκου.

Συμπέρασμα

Τα ευρήματά μας υπογραμμίζουν την προηγουμένως παραγνωρισμένη συστατική έκφραση του CX

3CL1 προηγούμενες ογκογένεση στα επιθηλιακά κύτταρα των ωοθηκών. Μαζί με GILZ, αυτό χημειοκινών αναδύεται ως ρυθμιστής του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, το οποίο μπορεί να είναι πιθανή κλινική σημασία για την επιλογή της καταλληλότερης θεραπείας για τους ασθενείς ΕΓΚ

Παράθεση:. Gaudin F, Nasreddine S, Donnadieu AC, Emilie D, Combadière C, Prévot S, et al. (2011) Προσδιορισμός της χημειοκίνης CX

3CL1 ως νέα ρυθμιστική αρχή της κακοήθη πολλαπλασιασμό κυττάρων σε επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών. PLoS ONE 6 (7): e21546. doi: 10.1371 /journal.pone.0021546

Επιμέλεια: Λιν Ζανγκ, University of Pennsylvania, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: May 23, 2011? Δεκτές: 1 Ιούν 2011? Δημοσιεύθηκε: 7, Ιούλ, 2011

Copyright: © 2011 Gaudin et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από την Ligue contre le καρκίνου (Comité Val d’Oise), το Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM), το Πανεπιστήμιο Paris-Sud, και η Ευρωπαϊκή Ένωση FP6 (INNOCHEM, χορηγεί αριθμό LSHB-CT -2005 – 518.167). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών (EOC) αποτελεί την έκτη πιο κοινή μορφή καρκίνου και την πέμπτη συχνότερη αιτία θανάτου από καρκίνο σχετίζονται μεταξύ των γυναικών στις ανεπτυγμένες χώρες [1]. Λόγω της σιωπηλή φύση του πρώιμου σταδίου της νόσου, οι περισσότερες γυναίκες με EOC έχουν διαδοθεί ασθένεια (

δηλαδή

επέκταση στο περιτόναιο και μετάσταση στο επίπλουν) κατά τη στιγμή της διάγνωσης και παρουσιάζουν προχωρημένη νόσο, με πέντε- ποσοστό επιβίωσης χρόνο κάτω από 30% [2]. Παρά τα υψηλά ποσοστά επίπτωσης και θνησιμότητας των EOC, οι παράγοντες που εμπλέκονται στην αιτιολογικός ωοθηκών καρκινογένεση παραμένουν σαφώς καθορισμένο, περιορίζοντας την αποτελεσματικότητα των θεραπευτικών πρωτοκόλλων.

Η επιθηλιακά μικροπεριβάλλον του όγκου αποτελείται από ένα συγκρότημα ιστού που περιέχει διάφορους τύπους κυττάρων. Τα περισσότερα από αυτά τα κύτταρα παράγουν και /ή να ανταποκριθούν σε χημειοκίνες, η οποία μπορεί να παίζουν σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη και την εξέλιξη των πρωτογενών επιθηλιακών όγκων [3] – [5]. Έχουμε δείξει, για παράδειγμα, ότι η α-CXC χημειοκίνη στρωματικών κυττάρων προερχόμενοι Factor-1 SDF-1 /CXCL12 συμβάλλει στο δίκτυο ανοσοκατασταλτική εντός μικροπεριβάλλον του όγκου, κυρίως με την ενορχήστρωση της πρόσληψης των προ-DC2s [6]. Δείξαμε επίσης ότι CXCL12 ρυθμίζει αγγειογένεση όγκου και ότι αυτό είναι κρίσιμης σημασίας για την ανάπτυξη του όγκου [7]. Αντιθέτως, λίγα εάν κάτι είναι γνωστά σχετικά με το ρόλο της χημειοκίνης φρακταλκίνη /CX

3CL1 σε EOC, αν και έχει αποδεικνύεται να διαμεσολαβεί ισχυρή κυτταρική προσκόλληση [8] και η παρουσία του σε επιθηλιακούς ιστούς είναι ευρέως τεκμηριωμένο [9] – [10]. CX

3CL1 υπάρχει σε δύο μορφές. Η μορφή αγκυροβολημένες στην μεμβράνη μεσολαβεί στην σταθερή προσκόλληση των κυττάρων που εκφράζουν τον υποδοχέα του μοναδικού, CX

3CR1, στο ενδοθήλιο υπό φυσιολογικές ροής, μέσω του δικού της λειτουργίας εγγενή πρόσφυση και μέσω της ενεργοποίησης ιντεγρίνης [11] – [12]. Η διαλυτή μορφή απελευθερώνεται μέσω διάσπασης σε μια θέση κοντά στην μεμβράνη [13]. Όπως και άλλα συμβατικά χημειοκίνες, προσλαμβάνει κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος που φέρουν CX

3CR1, όπως Τ-λεμφοκύτταρα και κυτταροτοξικά κύτταρα ΝΚ, δενδριτικά κύτταρα ή ένα μεγάλο υποπληθυσμό CD14

+ μονοκύτταρα [8]. Ως αποτέλεσμα τόσο της προσκόλλησης και χημειοελκτικό δραστηριότητες της χημειοκίνης, το CX

3CL1 /CX

3CR1 σύμπλοκο μπορεί να μεσολαβήσει είτε προ- ή αντι-όγκου αποτελέσματα [14]. Παγκρεατικού πόρου κύτταρα αδενοκαρκινώματος που φέρουν CX

3CR1 προσκολλώνται ειδικά σε CX

3CL1 εκφράζουν κυττάρων νευρικής προέλευσης και μεταναστεύουν σε απόκριση σε CX

3CL1 που παράγεται από νευρώνες και νευρικές ίνες, συμβάλλοντας στην περινευρική διάδοση σε καρκίνο του παγκρέατος [15 ]. Ο καρκίνος του προστάτη κύτταρα που εκφράζουν CX

3CR1 τηρούν ανθρώπινο μυελό των οστών ενδοθηλιακά κύτταρα και μεταναστεύουν προς ένα μέσο ρυθμισμένο με οστεοβλάστες, τα οποία εκκρίνουν τη διαλυτή μορφή της χημειοκίνης που συμβάλλουν στην υψηλή πιθανότητα προστατικά καρκινικά κύτταρα μετάσταση στον σκελετό [16] – [17]. Αντιθέτως, διαλυτή CX

3CL1 (SCX

3CL1) απελευθερώνεται στο μικροπεριβάλλον του όγκου μπορεί να είναι ένα ενεργό συστατικό της απόκρισης κατά του όγκου [18] – [21], καθιστώντας το εμβολιασμός ποντικών με κύτταρα καρκινώματος τροποποιηθεί ώστε να παράγουν CX

3CL1 μια ισχυρή απόκριση κατά του όγκου, λόγω της χημειοέλξη των κυττάρων ΝΚ [22], ή κάνοντας CX

3CL1 έκφραση με κύτταρα καρκίνου κόλου ένας παράγοντας που μείωσε δραστικά τους μεταστατικό δυναμικό [23].

στην παρούσα εργασία, ερευνήσαμε την έκφραση του CX

3CL1 σε υγιείς και κακοήθεις ωοθηκών ιστούς και το ρόλο της στην εξάπλωση των κακοηθών επιθηλιακών κυττάρων των ωοθηκών. Αυτό χημειοκινών παρήχθη από τις δύο υγιείς και κακοήθη επιθηλιακά κύτταρα των ωοθηκών και την παραγωγή της στην EOC συσχετίστηκε θετικά με το δείκτη πολλαπλασιασμού των κυττάρων. Είναι ενδιαφέρον, ήταν επίσης συσχετίζεται με την έκφραση του που προκαλείται από γλυκοκορτικοειδή φερμουάρ λευκίνης (GILZ), μια πρωτεΐνη 17 kDa φερμουάρ λευκίνης ανακαλύφθηκε ως δεξαμεθαζόνη επαγόμενη μεταγραφή σε θυμοκύτταρα ποντικού, και ότι έχουμε δείξει πρόσφατα για να ενισχύσει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε EOC και να ενεργοποιήσετε ΑΚΤ, ένα κρίσιμο μόριο σηματοδότησης στην ογκογένεση [24], [25]. Τα ευρήματά μας υποστηρίχθηκαν από παράλληλες και συμπληρωματικά στοιχεία συσσωρευτεί σε δείγματα όγκων από ασθενείς με διάγνωση για EOC, στην κυτταρική σειρά καρκίνου των ωοθηκών BG-1 και σε ένα μοντέλο υποδόριας ξενομοσχεύματος ποντικού. Παρέχουν περαιτέρω κατανόηση του ρόλου του CX

3CL1 σε κακοήθη πολλαπλασιασμό των κυττάρων και την ανάπτυξη του όγκου, που συνδέονται στενά με GILZ.

Αποτελέσματα

Ανίχνευση CX

3CL1 σε υγιείς και κακοήθη ωοθηκών ιστούς

Η κυτταρική έκφραση του CX

3CL1 εξετάστηκε από immunohistochemisty (IHC) σε τομές που απομονώθηκαν από τρεις υγιείς ωοθήκες, οκτώ ορώδες και βλεννώδες καλοήθεις όγκους (ορισμένοι εξακολουθούν να περιέχουν φυσιολογικό ωοθηκικό ιστό), οκτώ ορώδες και βλεννώδες οριακά όγκων, δύο κοκκιοκυτταρικών όγκων των ωοθηκών και από 54 δείγματα διηθητικού ΕΓΚ. CX

3CL1 σαφώς ανιχνεύθηκε σε ωοθήκη επιφανειακό επιθήλιο (ΟΣΕ) κύτταρα και στο επιθήλιο των σαλπίγγων (Σχήμα 1Α). Σε ορώδες και βλεννώδες καλοήθεις και οριακά όγκους, CX

3CL1 ανοσοαντιδραστικότητα ανιχνεύθηκε σε πολλαπλασιαζόμενα καρκινικά κύτταρα που προέρχονται από το επιθήλιο (Εικόνα 1, Β και C). CX

3CL1 έκφραση ανιχνεύθηκε σε δείγματα EOC, συμπεριλαμβανομένου του ορώδης, σαφής-κυττάρων, ενδομητριοειδές και βλεννώδες ιστολογική υποτύπους (Εικόνα 1D). Σε αυτούς τους όγκους, ανιχνεύθηκε κυρίως στα κακοήθη κύτταρα, καθιστώντας τα καρκινικά κύτταρα την πιο σημαντική πηγή CX

3CL1 στην EOC. Σε συμφωνία με αυτό το εύρημα, CX

3CL1 ανιχνεύθηκε σε επιθηλιακά κύτταρα από κακοήθη ασκίτη, με υψηλότερα επίπεδα έκφρασης στο CD326

κλάσμα + (Σχήμα 1 Ε). CX

3CL1 περιορίστηκε στο κυτταρόπλασμα των κακοήθων επιθηλιακών κυττάρων και δεν ανιχνεύθηκε σε πυρήνες. CX

3CL1 ήταν απούσα από μη-επιθηλιακών κυττάρων των ωοθηκών κοκκιωδών όγκοι (Σχήμα 1 F).

(Α) υγιείς ωοθήκη, CX

3CL1 ανοσοαντιδραστικότητα στον ΟΣΕ (i) και σάλπιγγα (ii) . (Β) υδαρής (i) και βλεννώδες (ii) καλοήθεις επιθηλιακούς όγκους των ωοθηκών. (Γ) υδαρής (i) και βλεννώδες (ii) οριακά επιθηλιακών όγκων των ωοθηκών. (D) Κακοήθη επιθηλιακών όγκων των ωοθηκών: βλεννώδες (i), ενδομητριοειδές (ii), σαφής-κυττάρων (iii) και ορώδες (iv), CX

3CL1 ανοσοαντιδραστικότητα σε επιθηλιακά κύτταρα περιορίζεται στο κυτταρόπλασμα, δεν χρώση στους πυρήνες των κυττάρων του όγκου. (Ε) Cytocentrifuged CD326

– μη επιθηλιακά (i) και CD326

+ επιθηλιακών (ii) κύτταρα που απομονώνονται από κακοήθη ασκίτη συλλέγεται από ένα ασθενή με διάγνωση επεμβατική EOC. CX

3CL1 ανιχνεύεται στο CD326

+ κυττάρων, αλλά και σε ορισμένες CD326

– κύτταρα. (F) Μη-επιθηλιακών κοκκιώδη καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών, απουσία CX

3CL1 ανοσοχρώση. (Α-Ρ) μεγέθυνση χ 40.

Η

Messenger RNA για CX

3CL1 οπτικοποιήθηκε με RT-PCR, η οποία παρήγαγε ένα προϊόν του αναμενόμενου μεγέθους (387 bp) από τρία δείγματα υγιείς ωοθήκη , σε έξι δείγματα από καλοήθεις όγκους των ωοθηκών, τρία οριακά δείγματα και εννέα EOC δείγματα. Επίσης ανιχνεύθηκε στο BG1, SKOV3 και καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών γραμμές OVCAR3. Αντιπροσωπευτικά δεδομένα δείχνονται στο Σχήμα 2Α. Η ποσότητα του mRNA ποσοστώθηκε με πραγματικού χρόνου PCR σε πέντε EOC δείγματα. Είναι συσχετίστηκε θετικά με την ένταση της χρώσης IHC σε μια κλίμακα επτά σημείων (τεστ Spearman, το

P

& lt? 0,05, r = 0,88) (Σχήμα 2Β). Μια πρωτεΐνη 90-kDa, που αντιστοιχεί στο αναμενόμενο μέγεθος του πλήρους μήκους CX

3CL1, ανιχνεύθηκε σε δείγματα βιοψίας EOC, σε CD326

+ επιθηλιακά κύτταρα από κακοήθη ασκίτη και SKOV3, BG1 και OVCAR3 κύτταρα (Σχήμα 2C). CX

3CL1 είναι ένα μόριο δεσμευμένη σε μεμβράνη με την περιοχή χημειοκίνης σε ένα ομοιάζουν με μουκίνη στέλεχος. Η διάσπαση στη βάση αυτού του μίσχου από μεταλλοπρωτεϊνάσες παράγει ένα διαλυτό χημοκίνης, το οποίο λειτουργεί ως ένα κλασικό χημειοελκτικό [13]. Στη συνέχεια διερευνήθηκε κατά πόσον SCX

3CL1 απελευθερώθηκε από τα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Είναι ανιχνεύθηκε σε κακοήθη ασκίτη (που κυμαίνονται από 1,3 να 1,5 ng /ml). Επίσης πραγματοποιούνται αναλύσεις ELISA σε υπερκείμενα καλλιέργειας. Οι μεγαλύτερες ποσότητες του SCX

3CL1 ανακτήθηκαν από το υπερκείμενο καλλιέργειας των κυττάρων OVCAR3, η οποία έδωσε το ισχυρότερο σήμα σε κηλίδες Western (Σχήμα 2D). Τα ευρήματά μας υπογραμμίζουν την προηγουμένως παραγνωρισμένη συστατική έκφραση του CX

3CL1 για υγιή επιθήλιο των ωοθηκών σωλήνων επιφάνεια και Fallopian, υποδεικνύοντας ότι ΕΓΚ μπορούν να προέρχονται από οποιοδήποτε από αυτά τα επιθήλια. Εμείς αποκαλύπτουν επίσης ότι CX

3CL1 παραγωγής από κακοήθη επιθηλιακά κύτταρα προηγείται ογκογένεση.

(Α)

CX

3CL1

mRNA ανιχνεύθηκε με συμβατική PCR στο αναμενόμενο μέγεθος (387 bp ) σε αντιπροσωπευτικά δείγματα από 2 υγιείς ωοθήκες, 5 cystadenomas (καλοήθεις όγκοι), 2 οριακή όγκων, 5 αδενοκαρκινώματα (κακοήθεις όγκοι) και στα ΕΓΚ κυτταρικές γραμμές που παράγονται, SKOV3, OVCAR3 και BG1. Η λευκή κάθετη γραμμή που χωρίζει λωρίδες δεν τρέχουν στην ίδια πηκτή. (Β)

CX

3CL1

επίπεδα mRNA ήταν ποσοτικά με PCR πραγματικού χρόνου και εκφράζονται ως

CX

3CL1

περιεχόμενο κανονικοποιούνται με εκείνη του

β-ακτίνης

. Το διάγραμμα δείχνει την κατανομή των βαθμολογιών ανοσοχρώση έναντι του ποσού των

CX

3CL1

mRNAs κανονικοποιούνται με εκείνες του

β-ακτίνης

για 5 δείγματα του ΕΓΚ. Κάθε σύμβολο αντιπροσωπεύει ένα άτομο δείγμα κίνηση τριπλούν (μέση τιμή)? δοκιμασία Spearman, το

P

& lt? 0,05, r = 0.88. (C) CX

3CL1 ανοσοκηλιδώσεις της συνολικής πρωτεΐνης λύματα από δείγματα EOC, από CD326

+ επιθηλιακά δείγματα κακοήθους ασκίτη κυττάρου εμπλουτισμένο, και από κυτταρικές σειρές OVCAR3 SKOV3, BG1 και. Το CX

3CL1 πρωτεΐνη αναφέρεται ως μπάντα -90 kDa. Οι β-ακτίνης επίπεδα εμφανίζονται για εξομάλυνση. (Δ) Ανίχνευση με ELISA των SCX

3CL1 στο μέσο καλλιέργειας 24 h κυττάρων BG1, OVCAR3 και SKOV3 (δεδομένα είναι μέσοι ± SEM τριών ξεχωριστών πειραμάτων)? μη ανιχνεύσιμα SCX

3CL1 στο μέσο καλλιέργειας των κυττάρων ΗΕΚ-293Τ (ΗΕΚ), που χρησιμοποιείται ως αρνητικός μάρτυρας.

Η

CX

3CL1 συσχετίζεται με Ki-67 και GILZ στην EOC

CX

3CL1 ανοσοχρώση ήταν ετερογενή σε δείγματα EOC, που εκτείνονται από την απουσία ανιχνεύσιμης χρώσης (σκορ 0, 9/54) με ισχυρή ανοσολογική αντίδραση (σκορ 5-7, 18/54). Ως εκ τούτου, ερευνήθηκε κατά πόσον οι διαφορές σε CX

3CL1 επίπεδα έκφρασης που συνδέονται με την έκφραση δύο δεικτών πολλαπλασιασμού: Ki-67, το οποίο χρησιμοποιείται συνήθως για τη διάγνωση [26] και GILZ, την οποία πρόσφατα αναγνωρισθεί ως παράγοντας ελέγχου της διάδοσης κακοήθων κυττάρων ΕΓΚ [25]. Ανοσοαντιδραστικότητα για CX

3CL1, GILZ και Ki-67 βαθμολογήθηκε σε μια κλίμακα επτά σημείων με βάση την χρώση ένταση και ο βαθμός χρώσης διαδοχικών τομών των θραυσμάτων του ΕΓΚ από 54 ασθενείς. Υπήρξε μια πολύ σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ των βαθμολογιών για Ki-67 και εκείνα για GILZ, όπως αναμενόταν (Πίνακας 1). Είναι ενδιαφέρον, σημαντικές θετικές συσχετίσεις βρέθηκαν μεταξύ CX

3CL1 και Ki-67 και μεταξύ CX

3CL1 και GILZ, για ολόκληρη την ομάδα των 54 ασθενών (Σχήμα 3, Α και Β). Οι βαθμολογίες ανοσοχρώση για αυτές τις πρωτεΐνες επίσης συσχετίστηκαν σε ορώδες καρκίνωμα και μη ορώδες καρκίνωμα (Πίνακας 1).

(Α και Β) CX

3CL1 και Ki-67 τελικό σκορ (Α, δοκιμή Spearman,

P

& lt? 0,01, r = 0,38) και CX

3CL1 και GILZ τελική βαθμολογία (Β, Spearman test,

P

& lt? 0,0001, r = 0.59) σχετίστηκαν θετικά σε 54 EOC δείγματα συμπεριλαμβανομένων ορώδες (μαύρα τετράγωνα) και μη ορώδες (λευκά τετράγωνα) δείγματα. (C) δενδρόγραμμα που παράγεται από ιεραρχική agglomerative ανάλυση διασποράς για τα 54 δείγματα που μελετήθηκαν ΕΓΚ, κατά την ηλικία κατά τη διάγνωση, το στάδιο της νόσου, βαθμός, Ki-67, GILZ, CX

επίπεδα ανοσοδραστικότητας CXCL12 3CL1 και. Δύο συστάδες προσδιορίζονται, με χαμηλή (επάνω) και υψηλή (κάτω) επίπεδα πολλαπλασιασμού. Οι σχετικές δείγματα επισημαίνονται με τους αριθμούς.

Η

CXCL12, μια χημειοκίνη που παράγεται από τα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών [6], έχει εμπλακεί στον έλεγχο του πολλαπλασιασμού σε αυτά τα κύτταρα [27]. Όπως δείξαμε προηγουμένως σε μια ομάδα 183 ασθενών [28], CXCL12 ανοσοαντιδραστικότητα σε καρκινικά κύτταρα ήταν ετερογενής, με βαθμολογίες από 0 (μη ανιχνεύσιμη παραγωγή) που λαμβάνεται σε 16 ασθενείς και των 5 έως 7 (ισχυρή ανοσοαντιδραστικότητα) που λαμβάνεται σε οκτώ ασθενείς σε μας ομάδα των 54 ασθενών. Δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ των τελικών σκορ για CXCL12 και CX

3CL1, ή μεταξύ των τελικών σκορ για CXCL12, GILZ και Ki-67. Μια ανάλυση των επτά σύνολα δεδομένων, όπως η ηλικία κατά τη διάγνωση, το στάδιο της νόσου, την ταξινόμηση, GILZ, Ki-67, CX

3CL1 και CXCL12 ανοσοαντιδραστικότητες, βασίζεται σε μια agglomerative ιεραρχική προσέγγιση ομαδοποίησης αποκάλυψαν δύο μεγάλες ομάδες, όπως φαίνεται από το δενδρόγραμμα που παράγεται από η στατιστική ανάλυση (Σχήμα 3C). Τα κύρια χαρακτηριστικά διακρίνουν τα δύο μεγάλα συμπλέγματα, που αντιστοιχούν σε χαμηλά και υψηλά επίπεδα πολλαπλασιασμού, παρουσιάζονται στον Πίνακα 2. Όπως αναμενόταν, η παραγωγή CXCL12 δεν διέφερε σημαντικά μεταξύ των δύο ομάδων. Αντίθετα, CX

3CL1 και GILZ ανοσοαντιδραστικότητες στα καρκινικά κύτταρα ήταν υψηλότερες για την ομάδα με το υψηλότερο επίπεδο διάδοσης. Παρά το σχετικά μικρό αριθμό ασθενών, ο αριθμός των καρκίνων σε FIGO στάδια III και IV ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα του υψηλού πολλαπλασιασμού. Αντιθέτως, η ηλικία κατά τη διάγνωση και βαθμού δεν διέφερε μεταξύ των δύο ομάδων. Έτσι, τα υψηλότερα ποσοστά πολλαπλασιασμού συνδέθηκαν με την προς τα πάνω ρύθμιση GILZ και CX

3CL1 έκφρασης.

Η

GILZ απορυθμίζει CX

3CL1 έκφραση

Ανοσοϊστοχημική στοιχεία έδειξαν σαφώς ότι GILZ επίπεδα σε κακοήθη κύτταρα συσχετίζεται θετικά με CX

3CL1 επίπεδα, γεγονός που υποδηλώνει έναν πιθανό ρόλο για GILZ στη ρύθμιση CX

3CL1 παραγωγής. Ελέγξαμε την υπόθεση αυτή με τον καθορισμό των ποσών των CX

3CL1 mRNA και πρωτεΐνης σε pGILZ (υπερεκφράζουν GILZ) και CTRL (που παράγουν μικρή ποσότητα GILZ) κυττάρων BG1. Όπως ήταν αναμενόμενο, το περιεχόμενο GILZ (mRNA και πρωτεΐνη) ήταν σημαντικά υψηλότερη σε σχέση με το pGILZ CTRL κλώνους. Παράλληλες αυξήσεις του CX

3CL1 mRNA και πρωτεΐνης που απεικονίζεται στην RT-PCR, IHC και κηλίδες Western (Σχήμα 4, Α, Β και C). Επιπλέον, τα κύτταρα απελευθερώνονται pGILZ μεγαλύτερες ποσότητες SCX

3CL1 από τα κύτταρα ελέγχου (Εικόνα 4D). Χρησιμοποιώντας μια Ab στοχεύουν στην εξωκυτταρική περιοχή του CX

3CL1, κηλίδες Western των προϊόντων λύσης των κυττάρων BG1 σε επεξεργασία με φορβόλη-12-μυριστική-13-οξικό άλας (ΡΜΑ), μια πρωτεϊνική κινάση C (PKC) ενεργοποιητή, έδειξε την απουσία της 90-kDa ζώνη που αντιστοιχεί στο πλήρες μήκος του CX

3CL1. Αντίθετα, αυτή η θεραπεία αύξησε την απελευθέρωση της SCX

3CL1 στο υπερκείμενο. (Σχήμα 4, Γ και Δ). Στο σύνολό τους, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι CX

3CL1 παραγωγής από επιθηλιακά κακοήθη κύτταρα των ωοθηκών απορυθμίζεται από GILZ.

(Α)

CX

3CL1

ένταση του σήματος PCR σε CTRL και pGILZ κύτταρα BG-1 ποσοτικοποιείται με πυκνομετρία με κανονικοποίηση εναντίον του σήματος για

β-ακτίνης

? Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως

CX

3CL1 /β-ακτίνης αναλογίες

. αντιπροσωπευτικό Ένα πείραμα από τρία. (Β) Η ανοσοχρώση για CX

3CL1 στην CTRL και pGILZ BG1 cytocentrifuged κύτταρα. Μεγέθυνση χ 40. (Γ) ολικής κυτταρικής πρωτεΐνης εκχυλίσματα κυττάρων CTRL και pGILZ BG1 καλλιεργήθηκαν με ή χωρίς 100 ng /ml ΡΜΑ για 24 ώρες αναλύθηκαν με κηλίδωση Western με ένα συγκεκριμένο Ab αναγνωρίζει την εξωκυτταρική περιοχή του CX

3CL1. CX

3CL1 επίπεδα ποσοτικοποιήθηκαν με πυκνομετρία, με εξομάλυνση εναντίον του σήματος για β-ακτίνη? Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως CX

αναλογίες 3CL1 /β-ακτίνης. Ένα αντιπροσωπευτικό πείραμα από τρία. (D) ιστογράμματα δείχνουν την απελευθέρωση του SCX

3CL1 στο υπερκείμενο των κυττάρων που έλαβαν ή όχι με ΡΜΑ, όπως μετρήθηκε με ELISA. Τα αποτελέσματα είναι τα μέσα ± SEM τριών ανεξάρτητων πειραμάτων. *

P & lt? 0,05

, απουσία έναντι παρουσία του PMA και

#

P & lt? 0,05

, CTRL έναντι pGILZ BG1 κύτταρα (αταίριαστα

t

test)

CX

3CL1 αυξήσεις κακοηθών κυττάρων πολλαπλασιασμό

Δείξαμε ότι SCX

3CL1 απελευθερώνεται από τα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών από την αποβολή του συνδεδεμένου με μεμβράνη χημειοκινών που υποδηλώνει ότι SCX

3CL1 μπορεί να είναι ένα δραστικό συστατικό του καρκινικών μικροπεριβάλλοντος. Εδώ, ρωτήσαμε αν αυτό χημειοκινών έχει επιπτώσεις στον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων, όπως προτείνεται από τη συσχέτιση του CX

3CL1 και Ki-67 ανοσοκηλιδώσεις σε δείγματα ΕΓΚ. Αυτό πολλαπλασιαστική δράση μπορεί να προκύψει από έναν αυτοκρινή επίδραση του CX

3CL1, η οποία εξαρτάται από την έκφραση της μοναδικής υποδοχέα της, CX

3CR1 [8]. Διαπιστώσαμε

CX

3CR1

mRNA με συμβατική RT-PCR στο αναμενόμενο μέγεθος (340 bp) σε όλα τα δείγματα που εξετάστηκαν EOC (Ν = 14) και στις τρεις κυτταρικές σειρές EOC, BG1, SKOV3 και OVCAR3. Κυτταρομετρίας ροής αναλύει περαιτέρω αποκάλυψε μεμβράνης CX

έκφραση 3CR1 τόσο CD45

+ και CD45

– κύτταρα από κακοήθη καρκινικά δείγματα. Στην CD45

– κλάσμα, το οποίο είναι πολύ εμπλουτισμένο σε κακοήθη επιθηλιακά κύτταρα των ωοθηκών, το ποσοστό των CX

3CR1

+ κύτταρα κυμαινόταν από 20% έως 95% (Σχήμα 5Α). Σε κύτταρα BG1, το επίπεδο σταθερής κατάστασης της μεμβράνης CX

έκφραση 3CR1 ήταν αδύναμη (& lt? 10% των συνολικών κυττάρων) υπό βασικές συνθήκες (σχήμα 5Β). Είναι ενδιαφέρον ότι, το κλάσμα του CX

+ κύτταρα 3CR1

αυξήθηκε αξιοσημείωτα με όξινη κατεργασία, μια διαδικασία που είναι γνωστό ότι ο διαχωρισμός της προσδέματος από τον υποδοχέα της. Σε μια άλλη πλευρά, μειώνοντας τη συγκέντρωση του FBS από 10% σε 1% σε μέσο καλλιέργειας οδήγησε σε αυξημένη έκφραση μεμβράνης του CX

3CR1 σε κύτταρα BG1 (Σχήμα 5C). Αντίθετα, το επίπεδο της επιφάνειας CX

3CR1 ήταν χαμηλότερη στα κύτταρα pGILZ, τα οποία παράγουν μεγαλύτερες ποσότητες SCX

3CL1 από τα κύτταρα CTRL. Με βάση αυτά τα ευρήματα, χρησιμοποιήσαμε κύτταρα CTRL BG1 καλλιεργήθηκαν σε μέσο συμπληρωμένο με 1% FBS για να μετρηθεί η πολλαπλασιαστική επίδραση του ανασυνδυασμένου ανθρώπινου (rh) CX

3CL1 από [

3Η] -θυμιδίνης. Τα αποτελέσματα από εννέα ανεξάρτητα πειράματα έδειξαν ότι rhCX

3CL1 διπλασίασε κατά προσέγγιση την ταχύτητα του πολλαπλασιασμού των κυττάρων μετά από 24 ώρες θεραπείας (Σχήμα 6Α). Αυτή η απόκριση καταργήθηκε με την προσθήκη ενός CX

3CL1 αναλογικό με ένα τροποποιημένο Ν-άκρο το οποίο συνδέεται με CX

3CR1 και δρα ως ανταγωνιστής (Σχήμα 6Β) [29]. Τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν μια πολλαπλασιαστική δράση των εξωγενών CX

3CL1 μέσω της σύνδεσης με CX

της 3CR1. Είμαστε δίπλα διερευνηθεί κατά πόσο η ενδογενής CX

3CL1 διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων. Για το σκοπό αυτό, τα κύτταρα pGILZ BG1, οι οποίες παράγουν μεγάλες ποσότητες ενδογενούς CX

3CL1, υποβλήθηκαν σε θεραπεία με το CX

3CL1 αναλογικό ανανεώνεται κάθε 24 ώρες για 72 ώρες. Υπό αυτές τις συνθήκες, ο ρυθμός πολλαπλασιασμού των κυττάρων ήταν σημαντικά μειωμένη, υποκείμενες ένα ρόλο για ενδογενή CX

3CL1 στη ρύθμιση του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων (Σχήμα 6C).

(Α) Επίπεδα CX

3CR1 και του παν-αιμοποιητικών δείκτη CD45 προσδιορίστηκαν με κυτταρομετρία ροής σε 2 πρόσφατα διαχωρισθεί δείγματα των δειγμάτων ΕΓΚ. Οι αριθμοί δείχνουν τις συχνότητες του CX

3CR1

+ CD45

– κύτταρα. (Β) Εκπρόσωπος προφίλ FACS για CX

3CR1 επίπεδα στα κύτταρα BG1. Αριστερά, επιφανειακή έκφραση του CX

3CR1 υπό βασικές συνθήκες? μέση, επιφανειακή έκφραση του CX

3CR1 στα κύτταρα μετά από όξινη επεξεργασία? δεξιά, η έκφραση του CX

3CR1 σε διαπερατά κύτταρα. Οι αριθμοί δείχνουν το ποσοστό του CX

3CR1

+ κύτταρα (μέση τιμή ± SEM) για 3 ανεξάρτητα πειράματα. (Γ) Ιστογράμματα δείχνουν την ένταση φθορισμού του CX

χρώση 3CR1 στην επιφάνεια των κυττάρων CTRL BG1 καλλιεργούνται παρουσία 1% ή 10% FBS, και των κυττάρων CTRL και pGILZ BG1 καλλιεργούνται παρουσία 1% FBS. Οι αριθμοί δείχνουν το ποσοστό του CX

3CR1

+ κύτταρα για ένα αντιπροσωπευτικό πείραμα από τρία.

Η

(Α-Γ) Πολλαπλασιασμός μετρήθηκε από [

3Η] -θυμιδίνης (Α) σε κύτταρα CTRL επωάστηκαν με ή χωρίς 10 ng /ml rhCX

3CL1 για 24 ώρες, 9 ανεξάρτητα πειράματα. Ιστογράμματα αντιπροσωπεύουν μέσο ± SEM, paired t test,

**

P

& lt? 0.001? (Β) σε κύτταρα CTRL επωάστηκαν με ή χωρίς 10 ng /ml rhCX

3CL1 για 24 ώρες, με την παρουσία ή απουσία 10 μg /ml CX

ανταγωνιστής 3CR1? κάθε σύμβολο αντιπροσωπεύει ένα μεμονωμένο δείγμα κίνηση τριπλούν, οι γραμμές αντιπροσωπεύουν μέσες τιμές, *

P

& lt? 0,05,

t

δοκιμή, ένα αντιπροσωπευτικό πείραμα από 3? (Γ) σε κύτταρα pGILZ με και χωρίς αγωγή με 10 μg /ml CX

ανταγωνιστής 3CR1 αντικαθίσταται κάθε 24 ώρες για 72 ώρες, κάθε σύμβολο αντιπροσωπεύει ένα άτομο δείγμα κίνηση τριπλούν, γραμμές αντιπροσωπεύουν μέσες τιμές, *

P

& lt? 0,05,

t

δοκιμή, ένα αντιπροσωπευτικό πείραμα από 3. (D) ολικής κυτταρικής πρωτεΐνης εκχυλίσματα κυττάρων CTRL καλλιεργήθηκαν παρουσία και απουσία 10 ng /ml rhCX

3CL1 αναλύθηκαν με κηλίδωση Western με ειδικά Abs. ρΑΚΤ επίπεδα ποσοτικοποιήθηκαν με πυκνομετρία, με εξομάλυνση εναντίον του σήματος για το σύνολο της ΑΚΤ. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως λόγοι ρΑΚΤ /ΑΚΤ. Μία κηλίδα, αντιπροσωπευτικά τριών διεξαχθεί, δείχνεται.

Η

ΑΚΤ υπερενεργοποίηση συχνά παρατηρείται σε καρκίνους των ωοθηκών και σχετίζεται με τον έλεγχο του πολλαπλασιασμού των κυττάρων σε EOC [30], [31] [32] – [33]. Επίπεδα ρΑΚΤ, το οποίο είναι η δραστική μορφή ΑΚΤ, ήταν υψηλότερα σε rhCX

3CL1-επεξεργασμένα κύτταρα BG1 (Σχήμα 6D). Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν έντονα ότι η πολλαπλασιαστική επίδραση του CX

3CL1 /CX

3CR1 ζευγάρι συνδέεται με την ενεργοποίηση ΑΚΤ. GILZ έχει προηγουμένως αναγνωριστεί ως μία πολλαπλασιαστική παράγοντα ενεργοποίησης ΑΚΤ στην EOC [25]. Για να επιβεβαιώσετε ότι CX

3CL1 δράση περιλαμβάνει την ενεργοποίηση ΑΚΤ

in situ

, μετρήσαμε Ki-67 και ρΑΚΤ αποτελέσματα σε δείγματα EOC σημείωσε 0 για GILZ και είτε παράγει είτε όχι CX

3CL1. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, ο πολλαπλασιασμός και η φωσφορυλίωση της ΑΚΤ ήταν υψηλότερα στα δείγματα που παράγουν CX

3CL1. Συνολικά, τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ότι η πολλαπλασιαστική επίδραση του CX

3CL1 σε επιθηλιακά κακοήθη κύτταρα των ωοθηκών είναι συνεχόμενες για να CX

δεσμευτική 3CR1 ότι ενεργοποιεί ΑΚΤ.

Η

In vivo

αντίκτυπο της GILZ υπερέκφραση

Τέλος, διερευνήθηκε η επίδραση των GILZ και CX

3CL1 στην αύξηση του όγκου

in vivo

χρησιμοποιώντας ένα μοντέλο υποδόριου ξενομοσχεύματος ποντικού. BG1 κυττάρων είτε υπερεκφράζουν GILZ (pGILZ) ή όχι (CTRL) ενέθηκαν υποδορίως σε αθυμικά γυμνά ποντίκια και η ανάπτυξη του όγκου παρακολουθήθηκε επί 35 ημέρες. Οι μέσοι όγκοι του όγκου γραφικής παράστασης στο Σχήμα 7Α. Οι όγκοι που αναπτύσσονται από κύτταρα pGILZ είχαν σημαντικά μεγαλύτερες ποσότητες από αυτές που αναπτύσσονται από CTRL, σε κάθε δεδομένη χρονική στιγμή. Western blots των εκχυλισμάτων ξενομοσχεύματος και ανοσοκηλίδωση έδειξε παράλληλες αυξήσεις σε GILZ και CX

3CL1 επίπεδα πρωτεΐνης (Σχήμα 7, Β και C). Έτσι,

GILZ

υπερέκφραση συνδέεται σαφώς με υψηλότερα επίπεδα CX

3CL1 παραγωγής σε όγκους, με αποτέλεσμα υψηλότερα ποσοστά πολλαπλασιασμού και της ανάπτυξης των όγκων.

(Α) κύτταρα pGILZ ή CTRL BG1 (40 × 10

6 κύτταρα /ml) εγχύθηκαν υποδορίως στην δεξιά πλευρά γυμνών ποντικών. Το μέγεθος του όγκου μετρήθηκε κάθε 5 ημέρες, για 35 ημέρες (Ν = 3 ποντικοί ανά ομάδα). Ο όγκος του όγκου [mm

3] υπολογίζεται ως εξής: (μήκος [mm]) χ (πλάτος [mm])

2 χ 0,5 **

P

& lt? 0.001 (ασύζευκτα

t

test). (Β) Η συνολική κυτταρική πρωτεΐνη εκχυλίσματα ξενομοσχευμένων όγκων αναλύθηκαν με κηλίδωση Western με ειδικά Abs. επίπεδα CX

3CL1 και GILZ ήταν ποσοτικά με πυκνομετρία, με εξομάλυνση εναντίον του σήματος για β-ακτίνη? Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως CX

3CL1 ή GILZ /αναλογίες SS-ακτίνης. Ένας εκπρόσωπος κηλίδα τριών διεξάγεται εμφανίζεται. (C) Serial τμήματα pGILZ και CTRL ξενομοσχεύτηκε όγκων βάφτηκαν για CX

3CL1, GILZ και Ki-67. Αρνητικός μάρτυρας: καμία επισήμανση ανιχνεύθηκε όταν κάθε πρωτογενούς Ab παραλείφθηκε. Μεγέθυνση x 40.

Η

Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, αποκάλυψε ότι CX

3CL1 ήταν συστατικά που παράγονται στην EOC και ερεύνησε το ρόλο αυτού του χημειοκινών στην ανάπτυξη του όγκου. Η παραγωγή αυτού του χημειοκίνης προηγήθηκε κακοήθειας στο ΟΣΕ, και βρέθηκε επίσης στις σάλπιγγες των υγιών γυναικών και σε καλοήθεις όγκους. Ανοσοϊστολογική ανάλυση αποκάλυψε ότι CX

3CL1 παραγωγής σε δείγματα ΕΓΚ συσχετίστηκε με τα επίπεδα του Ki-67 και GILZ, δύο δείκτες του πολλαπλασιασμού σε κακοήθη επιθηλιακά κύτταρα των ωοθηκών. Ιεραρχική ανάλυση ομαδοποίησης προσδιορίζονται δύο μεγάλες ομάδες, με υψηλά και χαμηλά επίπεδα πολλαπλασιασμού, που διαφέρει ως προς GILZ και CX

3CL1 επίπεδα.

In vitro

, GILZ υπερπαραγωγή οδηγεί σε αύξηση του CX

3CL1 παραγωγή σε κύτταρα BG1. CX

3CL1 αυξάνει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων BG1 μέσω του υποδοχέα της, CX

3CR1, και μια παράλληλη αύξηση παρατηρείται στην ρΑΚΤ επίπεδα. Σε ξενομοσχεύτηκε ποντίκια, η υπερέκφραση των δύο GILZ και CX

3CL1 σχετίζεται με ταχύτερη ανάπτυξη του όγκου. Τα αποτελέσματα αυτά υπογραμμίζουν τη σχέση μεταξύ GILZ και CX3CL1 ως βασικό ρυθμιστή της κακοήθους πολλαπλασιασμού των κυττάρων και την ανάπτυξη του όγκου.

Σύμφωνα με τις πρόσφατες υποθέσεις σχετικά με την προέλευση και την ιστογένεση του ΕΓΚ, όγκοι τύπου Ι, οι οποίες πιστεύεται ότι περιλαμβάνει όλες τις μεγάλες histotypes, προέρχονται από τον ΟΣΕ, η οποία παραδοσιακά θεωρείται ότι είναι η πηγή του νεοπλαστικού μετασχηματισμού. Αντίθετα, οι όγκοι τύπου II, οι οποίες πιστεύεται ότι περιλαμβάνουν σχεδόν αποκλειστικά υψηλής ποιότητας ορώδες καρκίνωμα, πιστεύεται ότι προκύπτουν από την περιφερική περιοχή των σαλπίγγων [34] – [36]. Τόσο ο ΟΣΕ και οι σάλπιγγες είναι σήμερα πιστεύεται ότι είναι πιθανές πηγές των νεοπλασματικών ΕΓΚ και οι δύο προέρχονται από την εμβρυϊκή Müllerian αγωγού [37]. CX

3CL1 έχει ανιχνευθεί στον ανθρώπινο ενδομήτριο [38] και των σαλπίγγων [39]. Διαπιστώσαμε επίσης CX

3CL1 στον ΟΣΕ, υποδεικνύοντας περαιτέρω ότι η παραγωγή του CX

3CL1 από τα επιθηλιακά κύτταρα των ωοθηκών προηγείται ογκογένεση. CX

3CL1 ανιχνεύθηκε επίσης σε καλοήθεις και οριακά τα καρκινικά κύτταρα, γεγονός που υποδηλώνει ότι η παραγωγή της δεν συνδέεται με κακοήθεια.

ωοθηκών επιθηλιακών όγκων είναι μορφολογικά ετερογενείς και έχουν χαρακτηριστεί από παθολόγους σε ορώδες, σαφείς κυττάρων, ενδομητριοειδές και βλεννώδες υποτύπους με βάση την ιστοπαθολογική εξέταση. Κάθε υπότυπος χαρακτηρίζεται από ένα συγκεκριμένο προφίλ mRNA, γενετικούς παράγοντες κινδύνου και μοριακά χαρακτηριστικά [34] [40] – [41], υποδηλώνοντας ότι καρκίνωμα των ωοθηκών είναι μια ετερογενής νόσος [42]. Παρά αυτήν την ετερογένεια, βρήκαμε καμία σημαντική συσχέτιση μεταξύ CX

3CL1 επίπεδα και ιστολογικό τύπο στη σειρά, η οποία περιελάμβανε αντιπροσωπευτικά δείγματα των τεσσάρων κυριότερων ιστολογικών τύπων ΕΓΚ. Όπως GILZ και CXCL12, CX

3CL1 εκφράζεται ευρέως σε EOCs και η παρουσία του δεν αντικατοπτρίζει τη μορφολογική ετερογένεια του ΕΓΚ [25] [28].

Οι χημειοκινών, συμπεριλαμβανομένων CXCL12, παράγονται τοπικά σε ωοθηκών όγκους και να συμβάλει στην μικροπεριβάλλον του όγκου [5] – [6]. Εδώ, έχουμε εντοπίσει CX

3CL1 ως ένα άλλο συστατικό του μικροπεριβάλλοντος ΕΓΚ. Επιθηλιακά κύτταρα από κακοήθη ασκίτη, δείγματα όγκου και από τρεις κυτταρικές γραμμές καρκίνου των ωοθηκών, δηλαδή BG1, OVCAR3 και SKOV3, εμφανίζεται χρώση για CX

3CL1. CX

3CL1 περιοριζόταν στο κυτταρόπλασμα και ήταν απούσα από πυρήνες. Τα κύτταρα περιείχαν CX

3CL1 με μοριακό βάρος 90 kDa που αντιστοιχεί στη μορφή μεμβράνης του CX

3CL1, από το οποίο η διαλυτή μορφή προέρχεται χύνοντας [8]. Η παραγωγή του SCX

3CL1 σε υπερκείμενα καλλιέργειας παραλληλίζεται εκείνη της μορφής δεσμευμένη σε μεμβράνη, γεγονός που υποδηλώνει ότι η παραγωγή του SCX

3CL1 σε EOC μικροπεριβάλλον ενισχύθηκε σε όγκους με ισχυρή CX

3CL1 ανοσοαντιδραστικότητα. Είναι ενδιαφέρον ότι η τοπική απελευθέρωση του CX

3CL1 μπορεί επίσης να εξαρτάται CXCL12, που παράγεται από τα επιθηλιακά ωοθηκών κακοήθη κύτταρα σε EOC και είναι γνωστό ότι ρυθμίζουν την διάσπαση του CX

3CL1 από νευρώνες [43]. Δεν μπορούμε να αποκλείσουμε την πιθανότητα ότι CXCL12 διεγείρει τις μεταλλοπρωτεϊνάσες που συμμετέχουν στην CX

3CL1 διάσπαση σε EOCs, όπως συμβαίνει σε καλλιέργειες νευρώνων. Πράγματι, η περαιτέρω διερεύνηση του θέματος απαιτείται να συνάψει.

Η ένταση του CX

3CL1 χρώση και το κλάσμα των κυττάρων του όγκου χρωματίστηκαν για CX

3CL1 ήταν μεταβλητή στην ομάδα μας των 54 ασθενών με προχωρημένο πρωτοβάθμια ΕΓΚ. Αυτή η ετερογένεια στην παραγωγή του CX

3CL1 συσχετίστηκε θετικά με τα επίπεδα GILZ. Σας ευχαριστούμε Δρ.