Αφηρημένο

Ιστορικό

Τα κυκλοφορούντα ενδοθηλιακά κύτταρα και μικροσωματίδια έχουν προγνωστική αξία στον καρκίνο, και θα μπορούσε να είναι πρόβλεψης της ανταπόκρισης στη χημειοθεραπεία και αντιαγγειογενετικές θεραπείες. Ερευνήσαμε την προγνωστική αξία των κυκλοφορούντων ενδοθηλιακών κυττάρων και μικροσωματίδια σε ασθενείς που υποβάλλονται σε θεραπεία για προχωρημένο μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα.

Μεθοδολογία /Principal Εκτίμηση

Περιφερειακά δείγματα αίματος ελήφθησαν από 60 ασθενείς πριν από την πρώτη γραμμή, με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία +/- μπεβασιζουμάμπη, και μετά τον τρίτο κύκλο της θεραπείας. Δείγματα αίματος από 60 υγιείς εθελοντές Ελήφθησαν επίσης ως έλεγχοι. Τα κυκλοφορούντα ενδοθηλιακά κύτταρα μετρήθηκαν με μία ανοσομαγνητικά τεχνική και μικροσκοπία ανοσοφθορισμού. Η φωσφατιδυλοσερίνη-θετικά μικροσωματίδια αξιολογήθηκαν με κυτταρομετρία ροής. προπηκτική δραστικότητα μικροσωματίων μεσολάβηση μετρήθηκε με τη δοκιμασία Endogen παραγωγή θρομβίνης. Αποτελέσματα: πριν και μετά την αγωγή επίπεδα δεικτών ήταν υψηλότερα σε ασθενείς σε σχέση με τους ελέγχους (ρ & lt? 0,0001). Αυξημένα επίπεδα μικροσωματιδίων συσχετίστηκαν με μεγαλύτερη επιβίωση. Αυξημένα επίπεδα προθεραπείας των κυκλοφορούντων ενδοθηλιακών κυττάρων συσχετίστηκαν με μικρότερη επιβίωση.

Συμπεράσματα /σημαντικότητα

κυκλοφορούντα επίπεδα μικροσωματιδίων και κυκλοφορούντων ενδοθηλιακών κυττάρων συσχετίζονται με την πρόγνωση, και θα μπορούσαν να είναι χρήσιμα ως προγνωστικοί δείκτες σε ασθενείς με προχωρημένο μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα

Παράθεση:. Fleitas Τ, Martínez-Πωλήσεις V, Vila V, Reganon Ε, MeSAdo D, Martín M, et al. (2012) Κυκλοφορούν ενδοθηλιακά κύτταρα και Μικροσωματίδια ως προγνωστικοί δείκτες σε προχωρημένο μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 7 (10): e47365. doi: 10.1371 /journal.pone.0047365

Επιμέλεια: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesu », Ιταλία

Ελήφθη: 20 Απριλίου του 2012? Αποδεκτές: 11 Σεπτέμβρη, 2012? Δημοσιεύθηκε: 15 Οκτωβρίου 2012

Copyright: © Fleitas et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε εν μέρει από μια επιχορήγηση του Fundación para la Investigación, Νοσοκομείο Universitario La Fe – Bancaja. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Τους ακόλουθους κλάδους: Roche Pharma, Amgen, Lilly, MSD και η Bayer συνέβαλε οικονομικά για την αγορά αντιδραστηρίων και για την πρόσληψη ενός τεχνικού εργαστηρίου, σύμφωνα με νομική διαδικασία από την ίδρυση του Νοσοκομείου La Fe για τις δωρεές, χωρίς κανενός είδους συμφέρον από τα αποτελέσματα της μελέτης, και δεν συμμετείχε σε οποιαδήποτε άλλη πτυχή της study.This δεν μεταβάλλει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Ο καρκίνος του πνεύμονα είναι ένας από τους κακοήθεις όγκους με τη μεγαλύτερη συχνότητα σε όλο τον κόσμο. καρκίνο του πνεύμονα μη-μικρών κυττάρων (NSCLC) αντιπροσωπεύει περισσότερο από το 80% των περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα, και οι περισσότεροι από αυτούς έχουν προχωρημένη ή μεταστατική νόσο κατά τη διάγνωση [1].

με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία είναι η τυπική θεραπεία για προχωρημένο καρκίνο του πνεύμονα. Αρκετές δυάδων πλατίνα που χρησιμοποιούνται σήμερα με παρόμοια αποτελεσματικότητα, αν και διαφορετικά προφίλ τοξικότητας [2]. Η πρόοδος στην κατανόηση της βιολογίας του καρκίνου έχουν οδηγήσει στην ανάπτυξη φαρμάκων έναντι συγκεκριμένων μοριακών στόχων, όπως ο υποδοχέας του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR) και ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF) και οι υποδοχείς της (VEGFRs). Μερικοί κυτταροτοξικοί παράγοντες και στοχευμένη φάρμακα είναι ασφαλέστερη ή πιο αποτελεσματική σε συγκεκριμένες ιστολογικές υποτύπους, επιτρέποντας έτσι περισσότερο εξατομικευμένες θεραπείες [3]. Bevacizumab, ένα εξανθρωπισμένο αντίσωμα έναντι VEGF, έχει επιδείξει μια μέτρια αύξηση στην επιβίωση χωρίς εξέλιξη (PFS) και τη συνολική επιβίωση (OS) στον NSCLC όταν συνδυάζεται με χημειοθεραπεία. Ωστόσο, η χρήση του περιορίζεται σε ασθενείς με κυτταρική ιστολογία μη πλακώδους [4]. Παρά τις εξελίξεις αυτές, μόνο ένα μικρό ποσοστό των ασθενών που ωφελούνται από τη θεραπεία και οι περισσότεροι από αυτούς πεθαίνουν μέσα σε 2 χρόνια μετά τη διάγνωση. Ως εκ τούτου, υπάρχει ανάγκη για βιοδείκτες που επιτρέπουν την αναγνώριση των ασθενών που είναι πιο πιθανό να ανταποκριθεί στη θεραπεία.

Τα κυκλοφορούντα ενδοθηλιακά κύτταρα (ΧΚΕ) είναι δείκτες της αγγειακής βλάβης [5] που μπορεί να έχει κλινική σημασία σε καρκίνο [6 ] – [7]. CEC καταμέτρηση αυξάνεται σε ασθενείς με καρκίνο [8] – [9] και συσχετίζεται με την εξέλιξη του όγκου [10]. Έχει προταθεί ότι η ποσοτικοποίηση των CECs είναι χρήσιμη για την αναγνώριση των ασθενών που θα μπορούσαν να ωφεληθούν από αναστολείς αγγειογένεσης και για την παρακολούθηση της ανταπόκρισης στη θεραπεία [11]. Σε ασθενείς με προχωρημένο καρκίνο του παχέος εντέρου, ένας υψηλά βασικά CEC αρίθμηση σχετίζεται με μια μικρότερη διάμεση PFS [12] – [13]. Ωστόσο, σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού και με NSCLC, μια αρίθμηση CEC υψηλά βασικά συνδέεται με μια παρατεταμένη PFS [11], [14].

Μικροσωματίδια (ΜΕ) είναι μικρά κυστίδια (100 nm-1 μm) που οφθαλμός απευθείας από την μεμβράνη του πλάσματος [15] – [16]. Αυτά απελευθερώνονται από διάφορα κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων του αίματος, ενδοθηλιακά και καρκινικά κύτταρα [16] – [17]. Η έκθεση της φωσφατιδυλσερίνης στην εξωτερική επιφάνεια της μεμβράνης είναι ένα ιδιαίτερο χαρακτηριστικό των βουλευτών [18]? η παρουσία τους αυξάνει σημαντικά την προπηκτική δραστηριότητα των βουλευτών προάγοντας τη συνάθροιση των συστατικών της πήξης. Επιπλέον, τα καρκινικά κύτταρα παράγουν μια ανύψωση βουλευτών που εκφράζουν παράγοντα ιστού [19] – [21], η οποία τους προσδίδει προπηκτική δυναμικό [22]. Από αυτή την άποψη, έχει αναφερθεί ότι τα επίπεδα των κυκλοφορούντων Βουλευτές συσχετίζεται με Endogen δημιουργίας θρομβίνης (ΕΘΟ) [23]. Βουλευτές αυξημένη σε ασθενείς με καρκίνο και παίζουν ένα ρόλο στην σχετικά με τον καρκίνο υπερπηκτικότητα [20] – [21], [24] – [26]. Επιπλέον, η εκπομπή του μικροκυστιδίων, όπως εξωσώματα και βουλευτές, έχει σημαντικές παθολογικές ρόλους στην εξέλιξη του όγκου, που διευκολύνουν την απελευθέρωση και την εξάπλωση των καρκινικών κυττάρων να παράγουν μεταστάσεις [27]. Βουλευτές που ανακτώνται από το περιφερικό αίμα ασθενών με καρκίνο μπορούν να παρέχουν τις σχετικές πληροφορίες σχετικά με την πρόγνωση και την ανταπόκριση στη θεραπεία.

Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογηθεί CECs, βουλευτές και ΜΡ-μεσολάβηση προπηκτική δραστικότητα σε ασθενείς με προχωρημένο NSCLC, πριν και μετά την κλασική χημειοθεραπεία, για να αναλύσει προγνωστική αξία τους και να δημιουργήσουν την πιθανή σύνδεση τους με την ανταπόκριση του όγκου.

Υλικά και Μέθοδοι

μελέτη και ασθενείς

Αυτή η προοπτική μελέτη συμπεριέλαβε διαδοχικών ασθενών με ΜΜΚΠ αντιμετωπίζεται στο Ογκολογικό Τμήμα Ιατρικής της La Fe Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο με χημειοθεραπεία πρώτης γραμμής των δυάδων με βάση την πλατίνα. Bevacizumab προστέθηκε στη θεραπεία όταν ενδείκνυται. Για να συμπεριληφθεί στη μελέτη, οι ασθενείς πρέπει να πληρούν τα ακόλουθα κριτήρια: ηλικία & gt? 18 χρόνια? σταδίου ΙΙΙΒ ή IV σταδίου ιστολογικά επιβεβαιωμένη NSCLC? Το προσδόκιμο ζωής ≥12 εβδομάδες? ECOG κατάσταση (PS) ≤2 και επαρκή νεφρική, ηπατική, και η λειτουργία του μυελού των οστών.

Η σταδιοποίηση καθορίστηκε από το στήθος και την κοιλιακή αξονική τομογραφία (CT) και τομογραφία σώματος εκπομπής πρωτονίων (PET) σάρωση. Τρεις εβδομάδες μετά τον τρίτο κύκλο της θεραπείας, κλινική αξιολόγηση CT-based διεξήχθη χρησιμοποιώντας τα κριτήρια ανταπόκρισης αξιολόγησης για συμπαγείς όγκους (RECIST) [28]. Μετά τη θεραπεία, οι ασθενείς αξιολογήθηκαν κάθε τρεις μήνες. βιοδείκτες αίματος αξιολογήθηκαν κατά την έναρξη και τρεις εβδομάδες μετά τον τρίτο κύκλο της θεραπείας. Η ομάδα ελέγχου αποτελείτο από υγιή άτομα ταιριάζουν στο φύλο και την ηλικία με τους ασθενείς. Οι ασθενείς και οι έλεγχοι που προβλέπονται από γραπτή συγκατάθεση. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την επιτροπή θεσμικών Ιατροβιολογικών Ερευνών Δεοντολογίας.

βιοδεικτών Αξιολόγηση

Τα δείγματα αίματος ελήφθησαν από κυβοειδείς μη τραυματική διάτρησης της φλέβας, και συλλέγονται σε πλαστικούς σωλήνες Vacutainer ™ (BD Diagnostic) με δύο διαφορετικά αντιπηκτικά: K3 EDTA (4,3 mg) για CECs και κιτρικό νάτριο (129 mM) σε αναλογία 1:09 (ν /ν, κιτρικό νάτριο /αίμα) για βουλευτές και ΕΘΟ. Τα δείγματα διατηρήθηκαν στους 4 ° C και υποβάλλονται σε επεξεργασία μεταξύ 2 και 4 ωρών μετά τη συλλογή. Κιτρικούχο δείγματα αίματος φυγοκεντρήθηκαν στα 1500 χ g για 30 λεπτά στους 4 ° C για να ληφθεί αιμοπετάλια πλάσμα ελεύθερο, και στη συνέχεια αποθηκεύεται στους -80 ° C για να επιτραπεί μεταγενέστερη ανάλυση της παρτίδας.

Ποσοτικοποίηση του Συνολικού Μικροσωματιδίων

τα δείγματα πλάσματος που περιέχουν εναιωρήματα ΜΡ αναλύθηκαν με κυτταρομετρία ροής. συζυγή Αννεξίνη V-FITC χρησιμοποιήθηκαν για την ανίχνευση προσβάσιμη φωσφατιδυλοσερίνη επί MP μεμβράνες. Δέκα μι κατεψυγμένα δείγματα πλάσματος αραιώθηκαν σε 500 μL ρυθμιστικού διαλύματος HEPES που περιέχει 2.5 mM ΟαΟ

2 (ρΗ 7,4). Τα δείγματα στη συνέχεια επωάστηκαν για 60 λεπτά στους 4 ° C στο σκοτάδι με 1 μι FITC-αννεξίνης V (TACS Αηηβχίην, Trevigen Inc). Η απόκτηση των γεγονότων ποσοτικοποιήθηκε σε ένα EPICS XL- κυτταρόμετρο (Beckman Coulter) σε υψηλή ταχύτητα ροής για 2 λεπτά κατά την διάρκεια της οποίας αναλύθηκαν 325 μL αυτού του αιωρήματος. Πρότυπο φθορίζοντα σφαιρίδια διαφόρων διαμέτρων χρησιμοποιήθηκαν για τη βαθμονόμηση του μεγέθους (0,5-3,0 μικρά, Megamix, BioCytex) και να ρυθμίσετε την πύλη ανίχνευσης MP σε διάμετρο 0,5 – 1 μm, μετά από μια κατευθυντήρια γραμμή συναίνεση για τη μέτρηση MP [29]. Το μέγεθος των βουλευτών συσχετίζονται με εμπρόσθιας σκέδασης (FS) και αναλυτικότητα τους με την πλευρά διασποράς παραμέτρων (SS). Οι ανάγνωση κανάλια FS, SS και φθορισμού τέθηκαν σε λογαριθμική κέρδος. Για να περιορίσετε το θόρυβο του περιβάλλοντος από τη σκόνη και κρύσταλλα, όλα τα ρυθμιστικά αραίωση διηθούνται χρησιμοποιώντας 0,22 μm φίλτρα (Millipore). Για να διαφοροποιηθούν Βουλευτές από γεγονότα λόγω του θορύβου, βουλευτές ταυτοποιήθηκαν ως σωματίδια & gt? 0,5 ​​και & lt? 1,0 mm σε διάμετρο, και θετική χρώση για αναστολή Annexin V. MP στο πλάσμα παρασκευάστηκε χωρίς ασβέστιο ως αρνητικός έλεγχος. Ο αριθμός των ΡΙΤΟ-αννεξίνης V θετική Βουλευτές υπολογίστηκε και εκφράστηκε ως συμβάντα ανά μί πλάσματος.

Μετρήσεις θρομβίνη Generation

δοκιμασίες ΕΘΟ διεξήχθησαν για να αξιολογηθεί η in vitro ικανότητα παραγωγής θρομβίνης πλάσματος με τη χρήση του βαθμονομημένη αυτοματοποιημένο Thrombogram (CAT, Thrombinoscope BV). Ογδόντα μλ κατεψυγμένων δειγμάτων πλάσματος διανεμήθηκαν σε 96 φρεατίων στρογγυλού πυθμένα πλάκες μικροτίτλων (Greiner Bio-One, ref650061, USA). Κάθε δείγμα απαιτεί δύο κοιλότητες. Είκοσι μι του προτύπου θρομβίνης βαθμονομητή (TS20.00 θρομβίνη βαθμονομητή, Thrombinoscope BV) προστέθηκαν σε ένα φρεάτιο, και 20 μί του φθορισμογόνου υποστρώματος θρομβίνης με ασβέστιο (TS50.00 Fluka Kit Thrombinoscope BV) προστέθηκαν σε αμφότερα τα φρεάτια για να ξεκινήσει ΕΘΟ με συνεχή σύγκριση με το αντιδραστήριο θρομβίνη βαθμονομητή. Η δραστικότητα της θρομβίνης μετρήθηκε ως φθορισμός σε ένα Fluoroskan φθορόμετρο ανάγνωσης Ascent (Thermo Labsystems) εφοδιασμένο με ένα σύνολο 390/460 φίλτρο. Προστέθηκαν αριθ εξωγενή παράγοντα ιστού ή φωσφολιπίδια. Καμπύλες παραγωγής θρομβίνης υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό Thrombinoscope και τα αποτελέσματα εκφράστηκαν ως αιχμή θρομβίνης (ηΜ) (ύψος της καμπύλης).

Ποσοτικοποίηση των κυκλοφορούντων ενδοθηλιακών κυττάρων

Η απομόνωση και ποσοτικοποίηση των ΜΑΕΚ εκτελούνται σε πλήρες αίμα από έναν ανοσομαγνητικά τεχνική, ακολουθώντας ένα πρωτόκολλο που συναίνεσης [30]. CECs απομονώθηκαν από ολικό αίμα στους 4 ° C με PanMouse Μ450 Dynabeads (Dynal, Oslo, Norway) επιστρωμένα με sEndo1 (Biocytex, Μασσαλία, Γαλλία), ένα μονοκλωνικό αντίσωμα που εγείρεται έναντι του ενδοθηλιακού αντιγόνο CD146. Για να αποφευχθεί η μη-ειδική πρόσδεση των λευκοκυττάρων στα CD146 επικαλυμμένα σφαιρίδια, τα κύτταρα επωάστηκαν μετά ανοσομαγνητικά απομόνωση με FITC-επισημασμένο Ulex Europaeus λεκτίνη-1, (UEA1) (Sigma Aldrich, Inc) για 1 ώρα στο σκοτάδι, επιβεβαιώνοντας έτσι την ενδοθηλιακή φύση του τα απομονωμένα κύτταρα. Τα δείγματα πλύθηκαν και εναιωρήθηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα, και τα κύτταρα μετρήθηκαν υπό μικροσκόπιο φθορισμού χρησιμοποιώντας ένα θάλαμο Nageotte. Εμπύρηνα κύτταρα & gt? 10 μm σε μήκος, με περισσότερους από πέντε ανοσομαγνητικά σφαιρίδια που επισυνάπτεται και χρώση θετική UEA1 θεωρήθηκαν ως ΧΚΕ. Ομίλων μετρήθηκαν ως ένα κελί. Ο αριθμός των CECs εκφράστηκε ως κύτταρα ανά ml αίματος. Αναπαραγωγιμότητα δοκιμάστηκε εκτελώντας έξι αντίγραφα δέκα διαφορετικά δείγματα.

Στατιστική Ανάλυση

Τα αποτελέσματα δίδονται ως μέσες τιμές ± τυπικές αποκλίσεις (SD) για τις συνεχείς μεταβλητές και ως ποσοστά για τις κατηγορικές μεταβλητές. δοκιμή Kolmogorov-Smirnov χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογηθεί κατά πόσον κάθε παράμετρος ακολούθησε μια κανονική κατανομή. Ανάλυση διακύμανσης (ANOVA) με την post hoc ανάλυση Bonferroni χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση των διαφορών επιπέδου δείκτη μεταξύ των τύπων δειγμάτων (έλεγχος, περιπτώσεις προεπεξεργασίας και περιπτώσεις μετά τη θεραπεία). Διμεταβλητά συσχέτιση διεξήχθη χρησιμοποιώντας το τεστ συσχέτισης Spearmańs. OS και PFS αναλύθηκαν με τη βοήθεια της μεθόδου Kaplan-Meyer, και οι καμπύλες επιβίωσης των υποομάδων συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία log-rank. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με το λογισμικό του υπολογιστή SPSS, έκδοση 15.0 για Windows (SPSS Inc., Chicago, Ill, USA). Πιθανότητα τιμές & lt? 0,05 θεωρήθηκαν ως στατιστικά σημαντικές

Αποτελέσματα

Χαρακτηριστικά Ασθενών, θεραπείες και Αποτέλεσμα

Από τον Ιανουάριο του 2009 και τον Σεπτέμβριο του 2010, εξήντα ασθενείς και εξήντα υγιή άτομα ήταν. περιλαμβάνεται. Ο Πίνακας 1 συνοψίζει τα κλινικά χαρακτηριστικά της ομάδας μελέτης. Οι θεραπείες που λαμβάνονται από ασθενείς που περιγράφεται στον Πίνακα 2. Η πιο αξιοσημείωτη τοξικότητα σχετιζόμενη με τη θεραπεία ήταν αιματολογικές, με το 15% του βαθμού 3-4 ουδετεροπενικό πυρετό, και δύο θάνατοι από αυτήν την αιτία (και οι δύο ασθενείς έλαβαν σισπλατίνη + ντοσεταξέλη). Μόνο 2 ασθενείς παρουσιάζονται με θρομβωτικών επεισοδίων κατά τη διάρκεια της θεραπείας: ένας ασθενής με πνευμονική θρομβοεμβολή, και ένας ασθενής με εν τω βάθει φλεβική θρόμβωση (δύο ασθενείς έλαβαν σισπλατίνη + ντοσεταξέλη). Δύο ασθενείς παρουσιάζονται με σοβαρή πνευμονική αιμορραγία, ένας από αυτούς που σχετίζονται με bevacizumab. Όσον αφορά την αποτελεσματικότητα, περισσότερο από το ήμισυ των ασθενών παρουσίασε αντικειμενική ανταπόκριση (58,3%). Η διάμεση PSF ήταν 10 μήνες (95% CI, 7,9 έως 12 μήνες) και η διάμεση OS ήταν 11 μήνες (95% CI, 8,8 έως 13,1 μήνες). Μόνο 36 ασθενείς ήταν εν ζωή κατά το χρόνο προγραμματιστεί για την δεύτερη εκχύλιση του αίματος.

Η

Κυκλοφορούν δείκτης Επίπεδα και Ανάλυση συσχέτισης

Τα επίπεδα των ΜΑΕΚ, βουλευτές και ETG σε ασθενείς και μάρτυρες φαίνονται στον πίνακα 3. τα μέσα επίπεδα του CECs και βουλευτές ήταν σημαντικά υψηλότερα (Ρ & gt? 0,0001) σε ασθενείς σε σύγκριση με τους μάρτυρες. Ωστόσο, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των προ και μετά τη θεραπεία τα επίπεδα των ΜΑΕΚ και βουλευτές. Επίπεδα ETG αυξήθηκαν σημαντικά σε ασθενείς, μόνο σε δείγματα προεπεξεργασίας (P & lt? 0,01)

Η

Οι συσχετίσεις μεταξύ των επιπέδων των κυκλοφορούντων δεικτών έδειξαν ότι τα επίπεδα MP συσχετίζεται θετικά με τα επίπεδα ETG, τόσο πριν (Spearman r. = 0,60, P & lt? 0.001) και μετά τη θεραπεία (Spearman r = 0,68, P & lt?. 0.001)

κυκλοφορούν Μαρκαδόροι και της κλινικής έκβασης

Η ανάλυση των ενώσεων μεταξύ κυκλοφορούντων δεικτών και της κλινικής έκβασης έδειξαν ότι οι βουλευτές βασικά επίπεδα & gt? 3278 MP /μL (που αντιστοιχεί στο 99

ο εκατοστημόριο σε ελέγχους) σχετίστηκαν με καλύτερη PFS (15 έναντι 9 μηνών? p = 0.04) και OS (16 έναντι 10 μήνες? p = 0,04) . Καμία τέτοια συσχέτιση βρέθηκε για CECs ή ETG (Πίνακας 4). Επιπλέον, τα βασικά επίπεδα των ΜΑΕΚ & gt? 152 κύτταρα /mL (που αντιστοιχεί στο 75

ο εκατοστημόριο σε ασθενείς) συσχετίστηκαν με χειρότερη OS (16 μήνες έναντι 9 μηνών, αντίστοιχα? Log rank 4.3? P = 0,04) (Σχήμα 1 )

το ανώτατο όριο αναφοράς υπολογίστηκε ως αξίες των ΜΑΕΚ & gt? 152 κύτταρα /ml (που αντιστοιχεί στα 75

ο εκατοστημόριο της ομάδας ασθενών) CECs:.. κυκλοφορούντα ενδοθηλιακά κύτταρα

Συζήτηση

Τα αποτελέσματα της τρέχουσας μελέτης δείχνουν ότι η CEC, τα επίπεδα βουλευτής, και ETG αυξημένα σε ασθενείς με ΜΜΚΠ σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες. Η χημειοθεραπεία δεν άλλαξε τα επίπεδα αυτών των δεικτών. Βρήκαμε επίσης μια συσχέτιση μεταξύ υψηλών επιπέδων MP, τόσο πριν όσο και μετά τη θεραπεία, και την επιβίωση. Επιπλέον, έχουμε παρατηρήσει μια σύνδεση μεταξύ των επιπέδων προεπεξεργασίας των ΜΑΕΚ και την επιβίωση.

Τα αποτελέσματά μας δείχνουν μια συσχέτιση μεταξύ των υψηλών πριν και μετά τη θεραπεία επίπεδα των βουλευτών και πλέον η επιβίωση. Για την καλύτερη γνώση μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που δείχνει μια τέτοια ένωση σε ασθενείς με NSCLC. Υπάρχει αυξανόμενο ενδιαφέρον για το χαρακτηρισμό των βουλευτών και στο δυνητικό ρόλο τους ως βιοδείκτες στις διάφορες ασθένειες [31]. Σε ασθενείς με ευνουχισμό ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη, υψηλής προερχόμενο από αιμοπετάλια επίπεδα ΜΡ συσχετίστηκαν με ένα σύντομο επιβίωση [32]. Μια μελέτη σε ασθενείς με σύνδρομο αναπνευστικής δυσχέρειας έδειξαν θετική συσχέτιση μεταξύ των υψηλών επιπέδων των βουλευτών που προέρχονται από λευκοκύτταρα και της επιβίωσης [33]. Τα αποτελέσματα από μια πειραματική μελέτη με ένα μοντέλο καρκινώματος πνεύμονα ποντικού Lewis, απέδειξαν ότι λεμφοκυττάρων που προέρχονται από βουλευτές που ασκείται αντιαγγειογενετική και προ-απόπτωσης που οδήγησαν στην αναστολή της ανάπτυξης του όγκου με τη μείωση των επιπέδων του VEGF [34]. Παρά το γεγονός ότι δεν έχουμε χαρακτηρίζεται βουλευτές από την κυτταρική καταγωγή τους, τα ευρήματα αυτά θα μπορούσαν να παρέχουν και εξήγηση για τη θετική συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων MP και επιβίωσης που έχουμε βρει στην παρούσα μελέτη.

Μια ισχυρή συσχέτιση παρατηρήθηκε μεταξύ των επιπέδων MP και ETG. Αυτό το εύρημα είναι σε συμφωνία με τα προηγούμενα δεδομένα, υποδεικνύοντας ότι η παρουσία των βουλευτών στο πλάσμα επηρεάζει σημαντικά ΕΘΟ τόσο κανονικό [35] και παθολογικών καταστάσεων [23], [36]. Η αύξηση του αριθμού των κυκλοφορούντων Βουλευτές και η συσχέτισή τους με υψηλά επίπεδα ETG που παρατηρήθηκε στη μελέτη μας επιβεβαιώνει το ρόλο της ETG σε υπερπηκτικότητας του καρκίνου, όπως έχει ήδη αναφερθεί [29] – [33]. Επιπλέον, όπως αποδείχθηκε πρόσφατα, η μέτρηση της ETG μπορεί να εντοπίσει ασθενείς με καρκίνο που διατρέχουν υψηλό κίνδυνο φλεβικής θρομβοεμβολής [37].

Παρατηρήσαμε τη σύνδεση μεταξύ των υψηλών επιπέδων προεπεξεργασίας των ΜΑΕΚ και κακή επιβίωση. Δεν υπάρχουν πειστικά στοιχεία σχετικά με την προγνωστική αξία των ΜΑΕΚ σε καρκίνο. Οι περισσότερες μελέτες συμφωνούν ότι τα υψηλά επίπεδα των ΜΑΕΚ που σχετίζεται με κακή πρόγνωση [10], [12] – [13]. Ωστόσο, άλλες μελέτες έχουν δώσει αμφιλεγόμενα αποτελέσματα [11], [14]. Beerepoot et al. [10] μελέτησαν τα επίπεδα των βιώσιμων CECs σε ασθενείς με διάφορους τύπους καρκίνου? διαπίστωσαν ότι μετράει CEC ήταν υψηλότερες σε ασθενείς από ό, τι σε υγιή άτομα, και ότι η χημειοθεραπεία αυξήθηκε CEC μετράει. Οι συγγραφείς αυτοί ορίζονται CECs ως CD146 +, με επιπλέον χρώση με CalceinAM να ποσοτικοποιηθεί βιώσιμα κύτταρα? δεν υπάρχουν άλλα δείκτες, όπως UEA1, χρησιμοποιήθηκαν για να επιβεβαιωθεί η ενδοθηλιακή φύση των κυττάρων. Η μελέτη από Kawaishi et al. [14] διαπίστωσε συσχέτιση μεταξύ αυξημένων επιπέδων προ-επεξεργασία των ΜΑΕΚ και καλή πρόγνωση σε ασθενείς με NSCLC. Σε αυτή τη μελέτη, η ενδοθηλιακή CD146 δείκτη, ο δείκτης DNA DAPI, και οι CD105 δείκτη ενεργοποίησης χρησιμοποιήθηκαν για την επιλογή ΧΚΕ, μαζί με CD45 να απορρίψει αιμοποιητικών κυττάρων. Αντίθετα, σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνωμα που έλαβαν θεραπεία με χημειοθεραπεία και bevacizumab, Ronzoni et al. [12] βρέθηκε ανάπαυσης CEC μετράει να είναι χαμηλότερη σε ασθενείς που πέτυχαν ακτινολογική ανταπόκριση σε σύγκριση με τους ασθενείς που δεν επιτυγχάνουν ανταπόκριση. Η μελέτη από Matsusaka et al. [13], έδειξε ότι οι ασθενείς με επίπεδα προ της θεραπείας του CXCR4-θετικών CECs & gt? 20% των μονοπύρηνων κυττάρων είχαν χειρότερη PFS και OS. Τα αποτελέσματα αυτά συμφωνούν με εκείνα που ελήφθησαν στη μελέτη μας, όπου τα υψηλά επίπεδα των ΜΑΕΚ σχετίστηκαν με την κακή OS. Λαμβάνοντας υπόψη την ποικιλία των τεχνικών που χρησιμοποιούνται για την ποσοτικοποίηση των ενδοθηλιακών κυττάρων, οι προσπάθειες για τον εντοπισμό των πλέον κατάλληλων κυτταρικών φαινοτύπων για κάθε κλινική κατάσταση και να εξηγήσει την τρέχουσα διαμάχες.

Τα ευρήματά μας παρέχουν νέα στοιχεία σχετικά με την προγνωστική αξία των βουλευτών και CECs σε ασθενείς με NSCLC. Ο ρόλος των βουλευτών και CECs ως πιθανούς βιοδείκτες σε ασθενείς με NSCLC, αντιμετωπίζεται με συμβατική χημειοθεραπεία ή στοχευμένες θεραπείες, δικαιολογούν περαιτέρω μελέτη, δεδομένου ότι μια καλύτερη κατανόηση του ρόλου τους μπορεί να ανοίξει νέες προοπτικές στους τομείς της διάγνωσης και της θεραπείας.

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς θα ήθελα να ευχαριστήσω τον Rafael Rosell και Stefano Indraccolo για την παροχή χρήσιμων παρατηρήσεων σχετικά με το χειρόγραφο. Μπορούν επίσης να ευχαριστήσω Josefa Llorens, Ursula Salinas και Adela Mañez για τεχνική βοήθεια τους.