Αφηρημένο

Ιστορικό

Εκτός από την αντιφλεγμονώδη δράση του, κινναμαλδεΰδης έχει έχουν αναφερθεί ότι έχουν αντι-καρκινογόνο δράση. Εδώ, ερευνήσαμε επίδρασή της στα κύτταρα του ανοσοποιητικού.

Μέθοδοι

Η ενεργοποίηση του πυρηνικού παράγοντα-κΒ με κινναμαλδεΰδης (0-10 μg /ml) μόνη ή σε συνδυασμό με λιποπολυσακχαρίτη αξιολογήθηκε σε THP1XBlue ανθρώπινο μονοκυτταρική κυτταρική γραμμή και σε ανθρώπινα μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος (PBMCs). Ο πολλαπλασιασμός και η έκκριση των κυτοκινών (IL10 και TNFa) προσδιορίστηκε σε πρωτογενή ανοσοκύτταρα και τις ανθρώπινες κυτταρικές σειρές (ΤΗΡ1, κυτταρικές σειρές Jurkat Ε6-1 και Raji) διεγείρονται με μόνη ή σε συνδυασμό με λιποπολυσακχαρίτη κινναμωμική. Το μονοξείδιο του αζώτου προσδιορίστηκε σε κύτταρα RAW264.7 ποντικού. Επιπλέον, διαφορετικά υποστεί επεξεργασία PBMCs χρωματίστηκαν για CD3, CD20 και Αηηβχίην.

Αποτελέσματα

χαμηλές συγκεντρώσεις (μέχρι και 1 μg /ml) της κινναμαλδεΰδης οδήγησε σε ελαφρά αύξηση της nuclar ενεργοποίηση του παράγοντα-κΒ , ενώ υψηλότερες συγκεντρώσεις οδήγησε σε μια δοσο-εξαρτώμενη μείωση της ενεργοποίησης του πυρηνικού παράγοντα-κΒ (έως 50%) σε κύτταρα ΤΗΡ1 λιποπολυσακχαρίτες διεγερμένα και PBMCs. Κατά συνέπεια, το μονοξείδιο του αζώτου, η ιντερλευκίνη 10 έκκριση καθώς και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων μειώθηκαν σε κύτταρα RAW264.7 λιποπολυσακχαρίτες διεγερμένα, PBMCs και ΤΗΡ1, Raji και Jurkat-E6 κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος με την παρουσία κινναμαλδεΰδης σε συγκέντρωση-εξαρτώμενο τρόπο. Ανάλυση κυτταρομετρίας ροής των PBMCs αποκάλυψε ότι CD3 + ήταν επηρεάζονται περισσότερο από CD20 + κύτταρα σε απόπτωση από κινναμαλδεΰδης.

Συμπέρασμα

Αποδίδουμε τις αντι-φλεγμονώδεις ιδιότητες της κινναμαλδεΰδης με την ικανότητά του να μπλοκάρει την πυρηνική παράγοντας-κΒ ενεργοποίηση σε κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος. Η θεραπεία με κινναμωμική οδήγησε σε αναστολή της βιωσιμότητας των κυττάρων, τον πολλαπλασιασμό και την απόπτωση που επάγεται με δοσο-εξαρτώμενο τρόπο σε πρωτογενείς και αθανατοποιημένα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος. Ως εκ τούτου, παρά περιγράφεται αντι-καρκινογόνες ιδιοκτησίας, η θεραπεία με κινναμαλδεΰδης σε ασθενείς με καρκίνο ενδέχεται να αντενδείκνυται λόγω της ικανότητάς της να αναστέλλει την ενεργοποίηση των κυττάρων του ανοσοποιητικού

Παράθεση:. Roth-Walter F, Moskovskich Α, Gomez-Casado C, Diaz-Perales Α, Oida Κ, Singer J, et al. (2014) Immune κατασταλτική επίδραση κινναμαλδεΰδης Λόγω αναστολή του πολλαπλασιασμού και διέγερση απόπτωσης σε κύτταρα του ανοσοποιητικού: Συνέπειες για τον καρκίνο. PLoS ONE 9 (10): e108402. doi: 10.1371 /journal.pone.0108402

Συντάκτης: Stephen J. Polyak, του Πανεπιστημίου της Ουάσινγκτον, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 21 Μάρτη 2014? Αποδεκτές: 28 Αυγ, 2014? Δημοσιεύθηκε: 1η Οκτωβρίου 2014

Copyright: © 2014 Roth-Walter et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά στοιχεία είναι διαθέσιμα εδώ για Εικόνα 1: https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.1159002, εδώ για Εικόνα 2: https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.1162655 , εδώ Εικ 3: https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.1162660, και εδώ, για Σχ. 4: https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.1162666

Χρηματοδότηση: Η μελέτη αυτή υποστηρίχθηκε από τον αυστριακό Ταμείο Science (FWF) επιχορήγηση P 23398-B11, και να χορηγήσει W1205-B09 σε JS. ΚΕΔ υποστηρίχθηκε από την επιχορήγηση της κατάρτισης από την ισπανική κυβέρνηση (πρόγραμμα FPI, MICINN-Mineco). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Κανέλα χρησιμοποιείται ευρέως στη βιομηχανία ως μέσο μπαχαρικά και αρωματικά, αλλά είναι επίσης μια σημαντική ένωση στην παραδοσιακή ιατρική των βοτάνων. Το αιθέριο έλαιο της κανέλας αποτελείται από & gt? 80% της κινναμαλδεΰδης [1] και το υδατικό εκχύλισμα του μπαχαρικό κανέλα έχει αποδοθεί με αντιοξειδωτικές ιδιότητες [2], [3]. Κινναμική (CA) είναι μια βιοδραστική ένωση που έχει ταυτοποιηθεί ότι έχουν αντι-βακτηριακή [4], [5], αντι-φλεγμονώδη [6], [7], υπογλυκαιμική [8], αντι-μεταλλαξιογόνες [9], [10 ] και αντι-ογκογόνο δράση. Επιπλέον, αποδείχθηκε ότι είναι αντι-πολλαπλασιαστικές και προ-αποπτωτικά σε διάφορες καρκινικές κυτταρικές γραμμές

in vitro

[11] – [15]. Το αντι-καρκινογόνες ακίνητο από την CA επιτυγχάνεται με μιτοχονδριακή αποπόλωση [16] που οδηγεί σε αυξημένα αντιδραστικά είδη οξυγόνου, ενεργοποίηση των προ-αποπτωτικών Bcl-2 οικογένεια πρωτεϊνών, κασπάσης-3 και ενεργοποιείται από μιτογόνο κινάσες πρωτεϊνών [16], [17] καθώς και αναστολή της NF-κΒ και ΑΡ-1 δραστικότητα [15], [18].

Ενώσεις που εμφανίζουν τόσο αντι-καρκίνου, καθώς και αντι-φλεγμονώδεις ιδιότητες, όπως CA μπορεί συνεπώς να παρέχει ένα ελκυστικό θεραπευτικό εργαλείο για θεραπεία του καρκίνου. Είναι γνωστό, ότι η χρόνια φλεγμονή είναι ένα έναυσμα για την προώθηση του καρκίνου. Ωστόσο, σε ένα καθιερωμένο όγκο ένα ανοσο-κατασταλτικό περιβάλλον που ήδη υπάρχει και περαιτέρω ανοσοκαταστολή οδηγεί σε προαγωγή όγκων [19] – [23]. Από την άποψη αυτή, ο θάνατος ή η συσσώρευση των δυσλειτουργικών δενδριτικά κύτταρα [24], [25], ρύθμιση προς τα κάτω του HLA τάξης Ι μόρια [26], [27] και αύξηση του αριθμού των ρυθμιστικών Τ κυττάρων [28] εντός όγκοι έχουν αποκτήσει προσοχή. Ανοσοκαταστολή στο περιβάλλον του όγκου οδηγεί σε μειωμένη πολλαπλασιασμό των περιφερικών Τ κυττάρων

in vitro

, η οποία συσχετίζεται με μια πιο αρνητική έκβαση σε ασθενείς με καρκίνο [29]. Κατά συνέπεια, η επιτυχής διέγερση του ανοσοποιητικού συστήματος ως αποτέλεσμα της θεραπείας του καρκίνου έχει αποδειχθεί ότι μειώνουν τις υποτροπές της νόσου και να βελτιώσει την επιβίωση [30].

Έτσι, διάφορες στρατηγικές στην ανοσοθεραπεία του καρκίνου έχουν εμφανισθεί τα τελευταία χρόνια για την καταπολέμηση της ανοσοκατασταλτικής παραγόντων και να δημιουργήσει ένα περιβάλλον κατά του όγκου. Προσεγγίσεις σε ενεργό αντικαρκινική ανοσοθεραπεία περιλαμβάνουν 1) την εισαγωγή των αντιγόνων που σχετίζονται με όγκους ή παράγωγα αυτών ως εμβόλια σε μία ανοσογονική πλαίσιο για να σπάσει την ανοχή του όγκου? [31] 2) απομόνωση ανοσοκυττάρων από ασθενείς με καρκίνο, που ακολουθείται από παλμούς αντιγόνου και /ή διέγερση

ex vivo

πριν την εκ νέου έγχυση στον ασθενή [32], καθώς και 3) το κλείδωμα ανοσοκατασταλτικά μόρια, όπως κυτταροτοξικά Τ λεμφοκυτταρικού αντιγόνου 4 (CTLA4), και προγραμματίζονται πρωτεΐνη κυτταρικού θανάτου 1 (PD1) με μονοκλωνικά αντισώματα [33].

Τα αντι-ογκογόνων ιδιοτήτων, οι οποίες μέχρι στιγμής έχουν αποδοθεί σε κινναμαλδεΰδης, συνάχθηκαν από τα μοντέλα επικέντρωση σε καρκινικά κύτταρα. Ωστόσο, λαμβάνοντας υπόψη τη σημασία των κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος που διηθούν όγκο, που στοχεύουν σε αυτή τη μελέτη για να αξιολογήσει κριτικά τα αποτελέσματά της για την πρωτοβάθμια και απαθανάτισε τα κύτταρα του ανοσοποιητικού.

Υλικά και Μέθοδοι

ηθική δήλωση

Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή θεσμικής ηθικής του Ιατρικού Πανεπιστημίου της Βιέννης (EK-Nr. 949/2011) και ενημέρωσε γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλα τα άτομα πριν από τη συμμετοχή τους στη μελέτη. Υγιείς εθελοντές χωρίς αναφερθεί αλλεργία στο κανέλα δωρεά 15 ml αίματος.

PBMC απομόνωση και κυτταρικές σειρές

Μονοπυρηνικά κύτταρα περιφερικού αίματος (PBMCs) από 6 υγιείς εθελοντές χωρίς αναφερθεί αλλεργία στο κανέλα απομονώθηκαν από ολικού αίματος χρησιμοποιώντας Ficoll-Paque φυγοκέντρηση βαθμίδωσης πυκνότητας όπως περιγράφηκε προηγουμένως [34], [35].

Η ανθρώπινη μονοκυτταρική κυτταρική γραμμή ΤΗΡ1-XBlue, που λαμβάνεται από InvivoGen (San Diego, CA, USA) καθώς επίσης και ΤΗΡ1 , Jurkat Ε6-1, Raji (όλα από την ATCC, Rockville, MD, USA) κυτταρικές σειρές και ανθρώπινα μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος (PBMCs) διατηρήθηκαν σε εναιώρημα σε RPMI-1640 (Gibco Invitrogen, Darmstadt, Germany) που περιέχει απενεργοποιημένο με θερμότητα 10% ορό εμβρύου μόσχου (FCS), 1% πενικιλλίνη /στρεπτομυκίνη και 1% Τ-γλουταμίνη. Σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή, 200 μg /ml ζεοκίνη προστέθηκαν κατόπιν πολλαπλασιασμού σε κύτταρα ΤΗΡ1-XBlue. Ποντικού μακροφάγων RAW264.7, αγοράστηκαν από την ATCC καλλιεργήθηκαν σε τροποποιημένο μέσο Dulbecco Eagle που. (ΫΜΕΜ? Gibco Invitrogen, Darmstadt, Γερμανία) συμπληρωμένο με 10% FCS συν 1% πενικιλλίνη /στρεπτομυκίνη

Κυττάρων διέγερση

Όλα τα κύτταρα διεγέρθηκαν με CA (SAFC προμήθεια χημικών /Sigma Aldrich, Steinheim, Γερμανία) σε μία περιοχή συγκέντρωσης από 0 έως 10 μg /ml, με ή χωρίς 5 μg /ml (15 000 EU /ml) του LPS από

Ε. coli

055: Β5 (Sigma, St. Louis, MO, USA)

Πυρηνική εξόρυξη

PBMCs (1 × 10

6 κύτταρα /φρεάτιο) σπάρθηκαν σε ένα. 48-φρεατίων και διεγέρθηκαν με CA (0 έως 10 μg /ml) μόνο ή σε συνδυασμό με LPS (5 μg /ml, 15 000 ΕΕ) για 24 ώρες. Στη συνέχεια, πυρηνικά εκχυλίσματα που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας μια εμπορική διαθέσιμα αντιδραστήρια πυρηνικής εκχύλισης και σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (Thermo Scientific, Pierce, Rockford, IL). Εν συντομία, τα κύτταρα πλύθηκαν σε PBS και λύθηκαν σε κυτταροπλασματικά αντιδραστήριο εκχύλισης Ι και II. Μετά την απομάκρυνση κυτταροπλασματικό κλάσμα, πυρηνικές πρωτεΐνες εκχυλίστηκαν χρησιμοποιώντας αντιδραστήριο πυρηνικού εκχυλίσματος και αποθηκεύτηκε στους -80 ° C.

φωσφο-NFkB δοκιμασία ρ65

Phospho-NFkB ρ65 προσδιορίσθηκαν πυρηνικών κλασμάτων χρησιμοποιώντας ένα φωσφο -NFkB p65 ELISA, (InstantOne ELISA, eBioscience, San Diego, CA) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Εν συντομία, σε πυρηνικά εκχυλίσματα, ένα μείγμα κοκτέιλ αντισώματος προστέθηκαν για μία ώρα πριν πλάκα πλύση και προσθήκη αντιδραστήριο ανίχνευσης για 30 λεπτά, σταματώντας την αντίδραση και μετρώντας την οπτική πυκνότητα στα 450 nm.

δοκιμασία ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ

δοκιμασίες ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας κύτταρα ανταποκριτή ΤΗΡ1-XBlue, που εκφράζουν σταθερά ένα ΝΡ-κΒ /ΑΡ-1 που επάγεται εκκρινόμενης ρεπόρτερ αλκαλική φωσφατάση (SEAP), σύμφωνα με το πρωτόκολλο της εταιρίας. Εν συντομία, 1 χ 10

5 κύτταρα /φρεάτιο σπάρθηκαν σε 96 φρεατίων πλάκα και διεγέρθηκαν με CA (0 έως 10 μg /ml) μόνο ή σε συνδυασμό με LPS (5 μg /ml, 15 000 EU /ml ) για 24 ώρες. δραστικότητα ΝΡ-κΒ προσδιορίζεται προσθέτοντας quanti-Μπλε ως υπόστρωμα της εκκρινόμενης αλκαλικής φωσφατάσης στα υπερκείμενα και περαιτέρω επώαση για 8 ώρες στους 37 ° C και 5% CO

2. Στη συνέχεια, η οπτική πυκνότητα (OD) μετρήθηκε στα 625 nm χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο Tecan InfiniteM200 PRO (Tecan Group Ltd, Männedorf, Ελβετία).

Το μονοξείδιο του αζώτου αποφασιστικότητα

Το μονοξείδιο του αζώτου (ΝΟ) συγκεντρώσεις υπερκείμενα προσδιορίστηκαν χρησιμοποιώντας αντιδραστήριο Griess (Sigma Chemical Co. St. Louis, ΜΟ, USA). κύτταρα RAW264.7 (1 χ 10

6 κύτταρα /ml) επωάστηκαν με CA (0 έως 10 μg /ml) παρουσία ή απουσία LPS (5 μg /ml) για 24 ώρες. Στη συνέχεια, ίσο όγκο αντιδραστηρίου Griess προστέθηκε σε υπερκείμενα. Μετά από 10 λεπτών επώαση, OD μετρήθηκε στα 550 nm. Μηδέν έως 100 μΜ νιτρώδες νάτριο (NaNO

2? Sigma) χρησιμοποιήθηκε ως πρότυπο για τον υπολογισμό των μη-επίπεδα

κυτοκίνης ανάλυση

RAW264.7 κύτταρα και τα ανθρώπινα PBMCs (1 ×. 10

6 και 2 × 10

5 κύτταρα /ml, αντίστοιχα) επωάστηκαν με CA (0-10 μg /ml) απουσία ή παρουσία LPS (5 μg /ml, 15 000 EU /ml) . Ελεύθερα κυττάρων υπερκείμενα ανακτήθηκαν και αποθηκεύθηκαν στους -80 ° C μέχρι τη χρήση. Οι συγκεντρώσεις του IL10 και ΤΝΡ-α στα υπερκείμενα προσδιορίστηκαν με ELISA σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (eBioscience, San Diego, CA).

Κυτταρική βιωσιμότητα δοκιμασία

Κυτταρική βιωσιμότητα προσδιορίσθηκε με ez4u ( Biomedica, Αυστρία) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή. Δύο εκατοντάδες μικρολίτρα του εναιωρήματα κυττάρων (ΤΗΡ1, 1 × 10

4 κύτταρα /φρεάτιο? Raji, 2 × 10

4 κύτταρα /φρεάτιο? Jurkat Ε6-1, 3 × 10

4 κύτταρα /φρεάτιο? και ανθρώπινα PBMCs, 1 × 10

5 κύτταρα /φρεάτιο) επωάστηκαν σε πλάκες 96-φρεατίων με CA (0-10 μg /ml) απουσία ή παρουσία LPS (5 μg /ml, 15 000 EU /ml ) για 24 ώρες. Εν συντομία, 20 μΐ διαλύματος υποστρώματος προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο και επωάστηκαν για 3 h στους 37 ° C, 5% CO

2, πριν από τη μέτρηση OD σε 465 nm με ένα μήκος κύματος αναφοράς 620 nm.

κυτταρομετρίας ροής ανάλυση

τα κύτταρα χρωματίστηκαν για Αννεξίνη V ως δείκτης για πρώιμη απόπτωση και αναλύθηκαν με FACS. Εν συντομία, πρόσφατα απομονωμένα ανθρώπινα PBMCs (2 × 10

5 κύτταρα) επωάστηκαν με CA (0-10 μg /ml) απουσία ή παρουσία LPS (5 μg /ml, 15 000 EU /ml) για 24 ώρες πριν από χρώση με αντι-CD3-APC (κλώνος SK7) και αντι-CD20-ΡΕ (κλώνος 2Η7) για 30 λεπτά στους 4 ° C (και τα δύο αντισώματα ήταν από eBioscience και χρησιμοποιήθηκε σε συγκέντρωση 1 μΐ /50 μΐ ρυθμιστικού χρώσης). Στη συνέχεια, Αηηβχίην-FITC (1 μΐ /δείγμα, eBioscience, San Diego, CA, USA) σε ρυθμιστικό διάλυμα δέσμευσης (10 mM HEPES, 140 mM NaOH, 2.5 mM ΟαΟ

2, ρΗ 7.4) προστέθηκαν στα κύτταρα για 15 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Απόκτηση και την περαιτέρω ανάλυση πραγματοποιήθηκε σε FACSCantoII (BD Biosciences).

Η στατιστική ανάλυση

Η στατιστική ανάλυση έγινε με τη χρήση του πακέτου λογισμικού GraphPad Prism Version 6. Οι τιμές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης (ANOVA) που ακολουθείται από δοκιμή πολλαπλού εύρους του Duncan. Ρ-τιμές των & lt? 0,05 θεωρήθηκαν σημαντικές. Όλα τα αποτελέσματα εκφράστηκαν ως μέση τιμή ± SD.

Αποτελέσματα

Η επίδραση της κινναμαλδεΰδης στην ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ /ΑΡ-1 εξαρτάται από τη συγκέντρωση

αξιολογούνται πρώτα τη συμβολή κινναμαλδεΰδης στην ενεργοποίηση ΝΡ-κΒ. CA έχει αναφερθεί να αμβλύνουν ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ κατά LPS-διέγερση, ως εκ τούτου, ενεργώντας αντιφλεγμονώδη [36], [37]. Ομοίως, παρατηρήσαμε επίσης αναστολή της NF-κΒ /ΑΡ-1 έως και 65% μετά από LPS διέγερση σε κύτταρα ανταποκριτή ΤΗΡ1-XBlue, όταν χρησιμοποιήθηκαν συγκεντρώσεις υψηλότερες από 1 μg /ml. Ωστόσο, σε αντίθεση με άλλες αναφορές [36], [38] – [40], μπορούμε διεγερμένα κύτταρα επίσης με χαμηλότερες συγκεντρώσεις κινναμαλδεΰδης και παρατηρείται σημαντική αύξηση (έως και 40% με τη χρήση 0,1 μg /ml CA) σε ΝΡ-κΒ /ΑΡ-1 ενεργοποίηση σε σύγκριση με LPS μόνο (Σχ. 1Α). Ως εκ τούτου, χαμηλές συγκεντρώσεις CA ενεργοποιηθούν περαιτέρω ΝΡ-κΒ /ΑΡ-1 μονοπάτι, ενώ υψηλότερες συγκεντρώσεις ανέστειλε αυτή την οδό.

A. κύτταρα ΤΗΡ1-XBlue ή Β PBMCs υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με διαφορετικές συγκεντρώσεις CA μόνο (λευκές ράβδοι) ή σε συνδυασμό με LPS διέγερση (μαύρες ράβδοι) για 24 ώρες. Μπάρες αντιπροσωπεύουν τα δεδομένα από Α τρία ανεξάρτητα πειράματα ρυθμίζεται σύμφωνα με μόνη ομάδα LPS και Β τρία ανθρώπινα υποκείμενα. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD, * ρ & lt?. 0.05

Η

Εκτιμήσαμε επίσης την ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ σε κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος του ανθρώπου, χρησιμοποιώντας μονοπύρηνα κύτταρα περιφερικού αίματος (PBMC). Επίσης, εδώ πολύ χαμηλή συγκέντρωση CA οδήγησε σε περαιτέρω ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ, όπως μετρήθηκε με την ανίχνευση της φωσφο-ρ65 στα πυρηνικά κλάσματα των LPS-διεγερμένα PBMCs από υγιή δότη και αύξηση του CA-συγκέντρωση άνω του 1 μg /ml ως αποτέλεσμα ανασταλτικά NF-κΒ. Ως εκ τούτου, CA ήταν σε θέση να αναστέλλει την ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ όταν χρησιμοποιώντας αθανατοποιημένες καθώς και πρωτογενή ανοσοκύτταρα ανθρώπινης προέλευσης σε συγκέντρωση άνω του 1 μg /ml.

Κινναμική επηρεάζει την έκκριση κυτοκίνης και μονοξειδίου του αζώτου σε LPS διεγερμένα ανοσοκύτταρα

Στη συνέχεια αναλύεται η ενεργοποίηση του LPS διεγερμένα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος με CA. Όταν LPS-διεγερμένα PBMCs επωάστηκαν με CA για μετρήσεις απελευθέρωσης κυτοκίνης, συγκεντρώσεις υψηλότερες από 1 μg /ml παρεμπόδισε την έκκριση κυτοκίνης ανοσοκατασταλτικών κυτοκινών όπως IL10 (Εικ. 2Α), καθώς και των φλεγμονωδών κυτοκινών, όπως TNF-α (Εικ. 2Β). Συγκεντρώσεις μικρότερες του 1 μg /ml δεν τροποποίησε επίπεδα IL10 στα υπερκείμενα (δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Επιπλέον, δεν κυτοκίνες καθόλου ανιχνεύθηκαν, όταν τα κύτταρα επωάστηκαν με μόνη CA.

Ανθρώπινα PBMCs επωάστηκαν με αυξανόμενη συγκέντρωση του Ca παρουσία (μαύροι κύκλοι) ή απουσία (ανοικτό τρίγωνο) του LPS επί 24 ώρες και τα υπερκείμενα αναλύθηκαν για A. IL10 και Β ΤΝΡ-α επίπεδα. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD από PBMCs από τρία άτομα. C. Η έκκριση νιτρικού οξειδίου προσδιορίστηκε σε RAW264.7, διεγερμένα με αυξανόμενη συγκέντρωση του Ca παρουσία ή απουσία LPS μετά από 24 ώρες. Αντιπροσωπευτικά δεδομένα από μία από τρία ανεξάρτητα πειράματα, πραγματοποιήθηκαν εις τριπλούν. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD? * Ρ & lt? 0,05, σε σχέση με τον έλεγχο δειγμάτων σε κάθε ομάδα

Η

Ένα παρόμοιο πρότυπο όπως για την έκκριση κυτοκίνης παρατηρηθεί,, κατά την ανάλυση των ΝΟ εκροής σε LPS διεγερμένα μακροφάγα κύτταρα παρόμοια ποντικού (RAW264.. 7). Επίσης εδώ, η έκκριση ΝΟ ήταν μειωμένη (μέχρι 35%) όταν τα κύτταρα επωάστηκαν με υψηλότερες συγκεντρώσεις του CA (& gt? 1 μg /ml). Ωστόσο, να αυξήσει περαιτέρω το ΝΟ-επίπεδα παρατηρήθηκε χρησιμοποιώντας χαμηλότερες συγκεντρώσεις. έκκριση ΝΟ δεν ανιχνεύθηκε στα κύτταρα χωρίς διέγερση LPS (Σχ. 2C).

Κινναμική επηρεάζει αρνητικά τη βιωσιμότητα και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του ανοσοποιητικού

Τα στοιχεία μέχρι τώρα έδειξαν ότι ανεξάρτητα από κυτοκίνες (pro -ή αντιφλεγμονώδη, TNF-α ή IL10), των μορίων (ΝΟ) καθώς επίσης και πορείες (NF-κΒ /ΑΡ-1) ερευνήθηκε, μια μείωση στην ενεργοποίηση και την παραγωγή σηματοδότησης παρατηρήθηκε όταν χρησιμοποιήθηκε υψηλότερη συγκέντρωση ΑΠ από 1 μg /ml (= 8 μΜ). Ως εκ τούτου, την επόμενη δοκιμή, αν τα παρατηρούμενα αποτελέσματα όπου λόγω της μειωμένης βιωσιμότητας CA-αγωγή κύτταρα του ανοσοποιητικού.

Όπως απεικονίζεται στο Σχ. 3, χαμηλή συγκέντρωση CA (& lt? 1 μg /ml) οδήγησε σε σημαντική αύξηση του πολλαπλασιασμού των πρωτογενών ανθρώπινων PBMCs, παρόμοια με την εξαρτώμενη από τη συγκέντρωση ΝΡ-κΒ-προφίλ CA (Εικ. 1). Μια παρόμοια τάση παρατηρήθηκε επίσης κατά τη χρήση αθανατοποιημένων κυττάρων, όπως τα ανθρώπινα μονοκύτταρα σαν κύτταρα ΤΗΡ1, η Β κυτταρική γραμμή Raji και η κυτταρική γραμμή Τ Jurkat Ε6-1, έστω και αν αυτό δεν έφθασε στατιστική σημασία. Ωστόσο, όλα τα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος που ελέγχθηκαν (ΤΗΡ1, Raji Β κυττάρων, Jurkat Ε6-1 και ανθρώπινα PBMCs) είχαν το κοινό χαρακτηριστικό ότι υψηλότερη συγκέντρωση CA (& gt? 1 μg /ml) μείωσε σημαντικά την κυτταρική βιωσιμότητα και τον πολλαπλασιασμό. Ως εκ τούτου, τα δεδομένα μας επισημαίνουν ότι το ανοσοποιητικό κατασταλτική ικανότητα περιγράφεται από τον CA οφείλεται στην ικανότητά του να μειώσει την viabiltiy των κυττάρων του ανοσοποιητικού σε υψηλότερες συγκεντρώσεις από 1 μg /ml.

A. Ανθρώπινα PBMCs, Β ΤΗΡ-1, Jurkat Ε6-1 C. και D. Raji κύτταρα επωάστηκαν με αυξανόμενη συγκέντρωση του Ca παρουσία (μαύρες ράβδοι) ή απουσία (λευκές ράβδοι) του LPS. Τα βιώσιμα κύτταρα ανιχνεύθηκαν χρησιμοποιώντας δοκιμασία με βάση τετραζόλιο. Οι ράβδοι αντιπροσωπεύουν δεδομένα από μία από τρία ανεξάρτητα πειράματα πραγματοποιήθηκαν εις τριπλούν. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος ± SD, * ρ & lt?. 0.05, σε σχέση με τον έλεγχο δειγμάτων

Η

Κινναμική επηρεάζει όχι Τ κύτταρα από τα κύτταρα Β

Σε ένα επόμενο βήμα, διερευνήσαμε την ευαισθησία των Β και Τ κυττάρων σε PBMC-παρασκευάσματα προς CA μέσω κυτταρομετρίας ροής. PBMCs χρωματίστηκαν για CD3 (Τ κυτταρικό υποδοχέα) ως δείκτη για τα κύτταρα Τ, CD20 (Β αντιγόνο λεμφοκυττάρων) ως δείκτης για κύτταρα Β και για το δείκτη πρώιμη απόπτωση αννεξίνης V. Όπως απεικονίζεται στο Σχ. 4, συγκέντρωση πάνω από 1 μg /ml του CA οδήγησε σε απόπτωση και των δύο κυττάρων Τ (Σχ. 4Α) και Β κύτταρα (Σχ. 4Β) με δοσο-εξαρτώμενο τρόπο, ενώ από τη φόρτωση με χαμηλότερες συγκεντρώσεις απέτυχε να αλλάξει αριθμούς κυττάρων. Η θεραπεία με υψηλές συγκεντρώσεις CA (5 και 10 μg /ml) αύξησε τον αριθμό των αποπτωτικών κυττάρων Τ έως 8 φορές, ενώ αύξηση των αποπτωτικών κυττάρων Β ήταν 3,5 φορές σε σύγκριση με χωρίς θεραπεία ελέγχους.

Ανθρώπινα PBMCs ήταν επωάστηκαν με CA και χρωματίστηκαν για CD3, CD20 και Αηηβχίην και αναλύθηκαν με κυτταρομετρία ροής. Τα δεδομένα από τρία ανεξάρτητα πειράματα παρουσιάζονται ως μέση ± SD του Αηηβχίην θετικών Α CD3 + κυττάρων και Β CD20 + κύτταρα.

Η

Συζήτηση

CA έχει αποδοθεί πολλές φαρμακολογικές ιδιότητες, όπως είναι αντι-φλεγμονώδη, αντι-ulcerogenic, αντιπυρετικό, αντιμικροβιακή, αντιδιαβητικά, αλλά επίσης έχει δραστικότητα κατά του όγκου [39]. Έχουμε σκοπό να διερευνήσει αυτές τις ανακήρυξε τεράστια ευεργετικές ιδιότητες με μεγαλύτερη λεπτομέρεια, ιδίως με την εστίαση να κατανοήσει τον αντίκτυπο σε κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος και ως εκ τούτου την αξιολόγηση των πιθανών έμμεση συμβολή του στην εξέλιξη του καρκίνου. Καρκίνος ορίζεται ως η μη ρυθμιζόμενη ανάπτυξη κακοηθών κυττάρων, η οποία προκαλείται σε 90-95% από περιβαλλοντικούς παράγοντες, όπως οι ρύποι, η δίαιτα, η έκθεση στον ήλιο, μολύνσεις, σωματική αδράνεια και η παχυσαρκία, και μόνο σε 5-10% μπορεί να συνδεθεί με γενετική ελαττώματα [41]. Η πιθανότητα να αναπτύξουν καρκίνο αυξάνεται με την ηλικία και έχει συσχετιστεί με μειωμένη ανοσοεπιτήρηση στους ηλικιωμένους [42]. Πράγματι, το μικροπεριβάλλον του καρκίνου είναι πολύ ανοσοκατασταλτική και ως εκ τούτου επανενεργοποίηση και διαμόρφωση του ανοσοποιητικού συστήματος είναι ο πρωταρχικός στόχος των εμβολίων του καρκίνου [43]. σχήματα του ανοσοποιητικού-ρυθμιστική προσφέρουν μία ελκυστική προσέγγιση, δεδομένου ότι συχνά έχουν λιγότερες παρενέργειες από τα υπάρχοντα χημειοθεραπευτικά φάρμακα. Από την άποψη αυτή, το κλείδωμα της ανασταλτικής αντιγόνο CTLA4 επί Τ κυττάρων με αντι-ΟΤΙ_Α4 αντισώματα οδηγεί σε ενεργοποίηση των Τ κυττάρων [44], [45] και έχει αποδειχθεί ότι οδηγεί σε σημαντικά οφέλη επιβίωσης σε δύο τυχαιοποιημένες μελέτες φάσης ΙΙΙ σε ασθενείς με προχωρημένο μελάνωμα, τονίζοντας τη σημασία της ενεργοποίησης του ανοσοποιητικού συστήματος στον καρκίνο [46], [47].

Έτσι, μελετήσαμε την ικανότητα του ανοσοποιητικού-ρυθμιστική της CA για την απαθανάτισε και πρωτογενή κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος. Στην πρώτη μας προσέγγιση, διερευνήσαμε τις επιπτώσεις της στην ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ, αφού ΝΡ-κΒ είναι ιδιοσυστατικά ενεργοποιημένη σε έναν αριθμό αιματολογικών και συμπαγών όγκων και είναι ένας από τους σημαντικότερους παράγοντες μεταγραφής που σχετίζονται με τον καρκίνο εξέλιξη [48], η αναστολή της απόπτωσης, εισβολή ιστού και μετάσταση [49]. Έτσι, η αναστολή του NF-κΒ σε κακοήθη κύτταρα θεωρείται ευεργετική. Είχαμε τη δυνατότητα να αναπαράγει δεδομένα από τη βιβλιογραφία, ότι η NF-κΒ ενεργοποίηση με LPS διεγείρονται αθανατοποιημένων μονοκύτταρα αναστέλλεται με την προσθήκη του CA σε συγκεντρώσεις πάνω από 8 μΜ [36] – [40], αλλά έχει ενδιαφέρον παρατηρήσαμε μια σημαντική αύξηση της ΝΡ κΒ όταν χρησιμοποιήθηκαν χαμηλότερες συγκεντρώσεις των ΠΑΥ. Εμείς έτσι υποθέτουμε, ότι ένα ανοσοκατασταλτικό όγκων μικρο-περιβάλλον θα μπορούσε να διαμορφωθεί όταν CA θα μπορούσε να εφαρμοστεί σε αρκετά υψηλές συγκεντρώσεις. Από την άλλη πλευρά χαμηλή συγκέντρωση CA, η οποία επιτυγχάνεται με μέτρια κατανάλωση κανέλα, ενεργοποιεί περαιτέρω το ανοσοποιητικό σύστημα, αν και δεν είναι επαρκής για την καταπολέμηση των ταχέως αναπτυσσόμενους όγκους. Ως εκ τούτου, η μέτρια κατανάλωση CA-που περιέχουν τα τρόφιμα φαίνεται μάλλον να είναι ένα προφυλακτικό, και όχι ένα θεραπευτικό μέσο. Σημαντικά, τα δεδομένα μας δείχνουν ότι οι υψηλές δόσεις θα μπορούσε ακόμη και να αντενδείκνυται.

Όσον αφορά βιοδιαθεσιμότητα κινναμαλδεΰδης και αλκοόλ της, καθώς και οξύ παράγωγο απορροφώνται γρήγορα από το έντερο, μεταβολίζεται και απεκκρίνεται κυρίως στα ούρα, η οποία φαίνεται να είναι ανεξάρτητη της δόσης (μέχρι 250 mg /kg), τα είδη και το φύλο. οι συγκεντρώσεις στο αίμα της κινναμαλδεΰδης μετά από ενδοφλέβια χορήγηση 5,15, ή 25 mg /kg σε αρσενικούς και θηλυκούς αρουραίους F344 μειώθηκε με διφασικό τρόπο [50], [51]. Η αρχική φάση συσχετίζεται με την ταχεία εμφάνιση του κινναμωμικού οξέος στο αίμα, στην οποία εκτιμάται 37-60% της κινναμαλδεΰδης οξειδώνεται προς κινναμικό οξύ μέσα σε 30 λεπτά. Η δεύτερη φάση με χρόνο ημιζωής 1,7 h Υποτίθεται ως έκλυση κινναμαλδεΰδης από πρωτεΐνη προσαγωγές σχηματίζεται κατά τη διάρκεια της αρχικής φάσης [52]. Σε μια πρόσφατη μελέτη από του στόματος χορήγηση του ΑΠ είχε ως αποτέλεσμα μια βιοδιαθεσιμότητα 20% [53]. Επιπλέον σε μια παρόμοια έκθεση μετά από του στόματος χορήγηση, η συγκέντρωση CA στο αίμα βρέθηκαν να είναι 1 μg /ml [52] και μέχρι 10 μg /ml για κινναμωμικού οξέος [54] και διατηρείται επί 24 ώρες παρά τη σχετικά βραχεία βιολογική ημιζωή της 1,7 h.

Ως εκ τούτου, η υψηλή τοπική συγκέντρωση των κινναμαλδεΰδης και τα παράγωγά της είναι εφικτοί

in vivo

κατά την κατάποση και θα μπορούσε να ασκήσει μια παρατεταμένη ανοσο-κατασταλτικό αποτέλεσμα.

σε μας επόμενη προσέγγιση, περαιτέρω επικεντρώθηκε στις ανοσο-κατασταλτικά ιδιότητες των κινναμαλδεΰδης από τη διερεύνηση των επιπτώσεων της στην έκκριση κυτταροκινών στην πρωτοβάθμια PBMCs ενεργοποιήθηκαν με LPS. Σύμφωνα με καταστολή της οδού ΝΡ-κΒ, παρατηρήσαμε μια εξαρτώμενη από τη συγκέντρωση προς τα κάτω ρύθμιση της φλεγμονώδους και ρυθμιστικών μεσολαβητών ΤΝΡ-α, IL10 και ΝΟ που εμπλέκεται στην ανάπτυξη και την πρόοδο των διαφόρων μορφών καρκίνου [55], [56]. Ωστόσο, η εξέχουσα μείωση μεσολαβητής έκκριση των πρωτογενών κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος κατά την επώαση με CA πρότεινε ότι αυτό μπορεί να οφείλεται σε αλλαγές του ρυθμού του μεταβολισμού. Πράγματι, τα δεδομένα μας δείχνουν καθαρά ότι CA οδηγεί σε έντονη μείωση της κυτταρικής βιωσιμότητας των αθανατοποιημένων καθώς και πρωτογενή κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος. Περαιτέρω ανάλυση του πληθυσμού ανοσοκυττάρων σε ανθρώπινα υποκείμενα αποκάλυψε ότι ειδικά Τ κύτταρα ήταν πιο έντονα επιρρεπή σε CA-επαγόμενη απόπτωση από Β κύτταρα. Τα ληφθέντα αποτελέσματα είναι πολύ σημαντικά, αφού κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα παραμένουν ισχυροί μεσολαβητές της ανοσίας κατά του όγκου και διήθηση όγκου από Τ κύτταρα έχουν δειχθεί ότι είναι ένας καλός προγνωστικός παράγοντας σε ωοθηκών, του παχέος εντέρου, του μαστού, νεφρών, του προστάτη και του τραχήλου της μήτρας [43] . Επιπλέον, υπάρχουν δύο

in vivo μελέτες

, χρησιμοποιώντας εκχύλισμα κανέλας ως θεραπευτικό του καρκίνου παράγοντα. Αναφέρουν μειωμένη ανάπτυξη όγκου μελανώματος ποντικού, όταν σίτιση εκχύλισμα κανέλας σε μεγάλες δόσεις (400 μg /g βάρους σώματος) επί 20 έως 30 ημέρες [37], [57] σε ποντίκια. Ωστόσο, έδειξε επίσης μια σοβαρή μείωση των δευτερευουσών ανοσοποιητικού όργανα όπως η σπλήνα και οι λεμφαδένες [28]. Σε αυτές τις μελέτες είναι πολύ υψηλές δόσεις CA χρησιμοποιείται, λαμβάνοντας υπόψη ότι CA είναι γνωστό ότι έχει χαμηλή τοξικότητα με μια θανατηφόρα δόση χαμηλή (LDlow) με τη γονική εφαρμογή 200 μg /g σωματικού βάρους [58]. Η παρατηρούμενη μείωση των ταχέως αναπτυσσόμενων κυττάρων, όπως το ανοσοποιητικό και τα καρκινικά κύτταρα θα μπορούσε, επομένως, να είναι το γενικό χαρακτηριστικό του περιγραφόμενου χαμηλής τοξικότητας της CA.

Αντίθετα, καρκινογόνο ανησυχίες αυξηθεί κατά Mereto et al [59], ο οποίος πρότεινε κινναμαλδεΰδης ως αδύναμο υποστηρικτής της ηπατικής καρκινογένεσης λόγω της δυνατότητάς της να είναι κλαστογόνος και την ικανότητά της να προκαλεί μικροπυρήνων στο ήπαρ του αρουραίου

in vivo

. Υπάρχουν επίσης μια ανθρώπινη έκθεση περίπτωση, η οποία συνδέονται σχηματισμό στοματικό καρκίνωμα μετά την κατανάλωση έως και πέντε συσκευασίες των ούλων κανέλα μάσημα ημέρα σε ένα 24-year-old μη καπνιστή [60].

Ακόμα, σε μια 2-ετή μελέτη NTP που διεξήχθησαν σε ποντίκια και αρουραίους, στους οποίους μέχρι 200 ​​mg /kg σωματικού βάρους CA, ταΐστηκαν και οι οποίες αντιστοιχούν στη μέγιστη συγκέντρωση στην οποία δεν παρατηρούνται δυσμενείς επιδράσεις επίπεδο, NOAEL για μακροπρόθεσμη μακροπρόθεσμα αποτελέσματα, δεν υπάρχουν ενδείξεις της νεοπλασίας παρατηρήθηκαν [61]. Η μελέτη υπογραμμίζει το γεγονός, ότι η κατανάλωση του ΑΠ δεν μπορεί να είναι καρκινογόνο, όταν το ποσό που προσλαμβάνεται είναι μέτρια.

Σε επίπεδο ΑΠ μοριακή ως αλδεΰδη διαθέτουν α, β-ακόρεστων ολεφινικών υποκατάστατα είναι γνωστό ότι σχηματίζουν πρόσθετα με κυτταρική θειόλη ομάδες κυρίως με μη πρωτεϊνικό σουλφυδρύλια όπως κυστεΐνη και η γλουταθειόνη μέσω πυρηνόφιλη προσθήκη στον β-άνθρακα [62]. Έτσι, στερώντας κύτταρα του αντιοξειδωτικού γλουταθειόνη, τα κύτταρα περιορίζονται στην ικανότητά τους να εξουδετερώνουν τις ελεύθερες ρίζες και τα αντιδραστικά οξυγονούχες ενώσεις. Το πιο σημαντικό, καταστρέφουν τα κύτταρα γλουταθειόνης-επίπεδα έχει επίσης σοβαρές επιπτώσεις σε σίδηρο μεταβολισμό τους, οι οποίες τελικά οδηγούν στο θάνατο των κυττάρων [63]. Επιπλέον, είναι γνωστό ότι δρα επί των πρωτεϊνών μεμβράνης πλάσματος, όπως το δυναμικό υποοικογένεια κανάλι κατιόν παροδική υποδοχέα μέλος 1 (TRPA1) [64], έναν αισθητήρα για περιβαλλοντικούς ερεθισμούς, το κρύο και να τεντώσει και TLR4 εμποδίζοντας TLR4 ολιγομερισμού τους, κατά την LPS διέγερση , αλλά όχι με τη στόχευση κατάντη μορίων σηματοδότησης [40]. Οι συνέπειες της αναστολής TLR4-ολιγομερισμό, επομένως, είναι η ανεπάρκεια της ενεργοποίησης του ΝΡ-κΒ και επακόλουθη έκκριση κυτοκινών. Σύμφωνα με τα δεδομένα μας, δείχνουμε εδώ ότι όχι μόνο τα καρκινικά κύτταρα, αλλά σε ειδικές ανοσοκύτταρα είναι ιδιαίτερα ευαίσθητοι σε CA οδηγώντας στην αναστολή του ΝΡ-κΒ με τη σταθεροποίηση της κυτταρικής μεμβράνης και την πρόληψη TLR4 ολιγομερισμό καθώς και την αναστολή της περαιτέρω ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού κυττάρων και την απελευθέρωση κυτοκινών. Επιπλέον, CA επάγεται apoptotosis στα λεμφοκύτταρα, πιθανότατα στερώντας κύτταρα της γλουταθειόνης.

Δεδομένου ότι ο στόχος του καρκίνου του ανοσοποιητικού θεραπεία δεν είναι για την καταστολή του ανοσοποιητικού συστήματος, αλλά στην αποκατάσταση ενεργοποιήσει τα κύτταρα ανάπαυσης από τη διαφοροποίηση, η οποία είναι επί του παρόντος εφαρμοστεί με επιτυχία κατά τη χρήση αντι-CTLA4 αντισώματα, μια πιο διαφοροποιημένη προσέγγιση για τη χρήση της ΑΠ πρέπει να υποστηρίζεται για θεραπεία κατά του καρκίνου, ειδικά αφού έχει μια έντονη ανοσοκατασταλτική επίδραση στα κύτταρα Τ, συμπεριλαμβανομένου του πληθυσμού Τ κυττάρων τελεστών.

τα δεδομένα μας δείχνουν ότι η μέτρια κατανάλωση CA είναι ευεργετική για το ανοσοποιητικό σύστημα σε υγιείς οργανισμούς, αλλά ότι CA-θεραπεία σε υψηλές δόσεις μπορεί να είναι ωφέλιμη μόνο όταν ασχολείται με τον καρκίνο από αιμοποιητικά κύτταρα όπως το λέμφωμα και λευχαιμία, όπου το ανοσοποιητικό σύστημα είναι ήδη καταστέλλεται και τα οποία αντιπροσωπεύουν τις πιο κοινούς καρκίνους της παιδικής ηλικίας. Ωστόσο, η θεραπεία άλλων κυτταρικών τύπων με CA, στην οποία εκ νέου ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού συστήματος είναι εξαιρετικά επιθυμητό, ​​π.χ. καρκινώματα, σαρκώματα ή όγκους των γεννητικών κυττάρων (των ωοθηκών ή των όρχεων) μπορεί να έρχονται σε αντίθεση με την εφαρμογή της.

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε την κα Άννα Willensdorfer για την εξαιρετική τεχνική βοήθεια.