Abstract

Το οιστρογόνο μπορεί να εμπλέκονται στην ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη. Η συσχέτιση μεταξύ γενετικών πολυμορφισμών των υποδοχέων οιστρογόνου α (ESR1) και β (eSR2) και του κινδύνου καρκίνου του προστάτη εξετάστηκε σε μια μελέτη ένθετη-μαρτύρων σε County Ουάσιγκτον, Maryland. περιπτώσεις περιστατικό καρκίνου του προστάτη (n = 269) αντιστοιχήθηκαν σε ένα ή δύο μάρτυρες (n = 440) από την ηλικία, το φύλο, τη φυλή, και η ημερομηνία της αιμοδοσίας. Ενώσεις μεταξύ γονότυπων υποδοχέα οιστρογόνου ή διαιτητική πρόσληψη και την ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη εξετάστηκαν σε όρους μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης. Τα αποτελέσματα από τη μελέτη αυτή έδειξε ότι έξι πολυμορφισμούς μονών ζευγών βάσεων (SNPs) του ESR1 (rs1801132, rs2077647, rs746432, rs2273206, rs851982, rs2228480) και τέσσερα SNPs του eSR2 (rs4986938, rs928554, rs8018687, η RS αριθμός δεν είναι διαθέσιμη για eSR2 5696 bp 3 ‘της STP A & gt? G) δεν συσχετίστηκαν σημαντικά με τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του προστάτη, είτε με αλληλομόρφων ή γονοτυπική συχνότητες. Ωστόσο, μια διαδραστική σχέση με ΔΜΣ παρατηρήθηκε στη σχέση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονότυπους των eSR2 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α (rs4986938) (p = 0,031). Μια αλληλεπίδραση μεταξύ του επιπέδου της πρόσληψης των φυτοοιστρογόνων και γονότυπους των ESR1 Ex1-192G & gt? C (rs746432) και ανάμεσα στο επίπεδο πρόσληψης των φυτοοιστρογόνων και γονότυπους των ESR1 EX8 + 229g & gt? Παρατηρήθηκε μία (rs2228480) και τον κίνδυνο του καρκίνου του προστάτη (p = 0,0009 και p = 0,044, αντίστοιχα). Εν κατακλείδι, επιλεγμένα γενετικών πολυμορφισμών των ESR1 και eSR2, συνολικά, ήταν που δεν συνδέονται με τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του προστάτη. Ωστόσο, μια παραλλαγή του κινδύνου από ΔΜΣ και την πρόσληψη φυτοοιστρογόνα είχε εμπλακεί

Παράθεση:. Chae YK, Huang ΗΥ, Strickland P, Hoffman SC, Helzlsouer K (2009) γενετικών πολυμορφισμών των υποδοχέων των οιστρογόνων α και β και ο κίνδυνος ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη. PLoS ONE 4 (8): e6523. doi: 10.1371 /journal.pone.0006523

Επιμέλεια: Ιωάννα Μαρία Bridger, Πανεπιστήμιο Brunel, Ηνωμένο Βασίλειο

Ελήφθη: 4 του Δεκέμβρη, 2008? Αποδεκτές: 22 Απριλίου 2009? Δημοσιεύθηκε: 5 Αύγ 2009

Copyright: © 2009 Chae et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Η μελέτη υποστηρίχθηκε εν μέρει από τη χορήγηση Έρευνας 1U01AG18033 (το Εθνικό Ινστιτούτο Γήρανσης). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Η ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη μπορεί να είναι ορμονοεξαρτώμενου [1], [2]. Για παράδειγμα, τα ανδρογόνα είναι σημαντικές για την φυσιολογική και υπερπλαστικών ανάπτυξη του προστάτη. Τόσο η τεστοστερόνη και διυδροτεστοστερόνη (DHT) επάγεται προστατικού αδενοκαρκινώματος σε μοντέλα αρουραίων [3]. Αντι-ανδρογόνο θεραπεία ή ορχεκτομή έχει χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία μεταστατικό καρκίνο του προστάτη [4]. Τα οιστρογόνα, καθώς και των ανδρογόνων μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στην καρκινογένεση των κυττάρων του προστάτη [5]. Αρχικά είχε σκεφτεί ότι τα οιστρογόνα διαμεσολαβούν τη δράση τους μέσω των οιστρογόνων α υποδοχέα (ESR1). β υποδοχέα οιστρογόνου (eSR2) ταυτίστηκε να συμμετέχουν στη διαδικασία [6], [7]. Αν και αυτές οι δύο υποδοχείς έχουν κοινή 47% δομικές ομοιότητες, μπορούν να διαφοροποιηθούν με φυσιολογικές ιδιότητες τους [6], [8]. Ενώ ESR1 εντοπίζεται κυρίως στον προστάτη στρώμα [9], eSR2 βρίσκεται κυρίως στο επιθήλιο του προστάτη [10]. ESR1 διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του προστάτη [11] και βρέθηκε να σχετίζεται με τα οιστρογόνα που προκαλείται προστατικής πλακώδους μεταπλασία [12]. Επίσης, η έκφραση της σε επίπεδο όγκου συσχετίζεται αρνητικά με την επιβίωση του καρκίνου του προστάτη [13]. Από την άλλη πλευρά, eSR2 πιστεύεται ότι είναι ένας σημαντικός ρυθμιστής της λειτουργίας του προστάτη [14], ειδικά ως πιθανή «φρένο» για να ανδρογόνων γνώμονα πολλαπλασιασμό [13].

Αρκετές μελέτες έχουν προτείνει μια σχέση μεταξύ αυτών δύο υποδοχείς και καρκίνο του προστάτη [15] – [21]. Για παράδειγμα, η έκθεση σε υψηλά επίπεδα οιστρογόνου στις μήτρες μπορεί να οδηγήσει σε μικρότερες ενήλικα προστάτες που είναι ελάχιστα ευαίσθητα στην ανδρογόνων για την ανάπτυξη της υπερπλασίας, της φλεγμονής και δυσπλασία [16]. Αυτή η γενετική αποτύπωση βρεθεί ότι διαμεσολαβείται από ESR1 [16]. Άλλες μελέτες έχουν δείξει σταθερά ότι eSR2 εκφράζεται σε μεταστατικά κύτταρα καρκίνου του προστάτη [17] – [19]. Κατά συνέπεια, τα φυτοοιστρογόνα, χημικές ουσίες που παράγονται από φυτά που μιμούνται τη δράση των οιστρογόνων, μπορεί να ενεργεί σαν eSR2 αγωνιστή. Έχει υποτεθεί ότι φυτοοιστρογόνα μπορεί να είναι προστατευτική έναντι του καρκίνου του προστάτη [20], [21]

έχουν γενετικοί πολυμορφισμοί του ESR1 και eSR2 αναφερθεί ότι σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη [22] – [34]. . Ωστόσο, δεν υπάρχουν βιολογικές λειτουργικές μελέτες έχουν δημοσιευθεί για την υποστήριξη των επιδημιολογικών ευρημάτων, καθώς και αναλύσεις των αλληλεπιδράσεων γονιδίων-περιβάλλοντος σπάνια εκτελούνται. Ο εντοπισμός των περιβαλλοντικών παραγόντων που μπορούν να τροποποιήσουν τη σχέση μεταξύ των γενετικών πολυμορφισμών και τον κίνδυνο της νόσου μπορεί να παρέχει μια ένδειξη για πιθανή λειτουργίες των γενετικών πολυμορφισμών ή στους χώρους των λειτουργικών SNPs. Ο δείκτης μάζας σώματος (ΒΜΙ) μπορεί να είναι ένα πληρεξούσιο δείκτης για την σχετική ποσότητα του λίπους του σώματος, η οποία είναι μια σημαντική πηγή παραγωγής οιστρογόνων σε άνδρες [35]. Διαθεσιμότητα των οιστρογόνων στο σώμα μπορεί να επηρεάσουν την ευαισθησία των υποδοχέων οιστρογόνων, οδηγώντας πιθανώς σε ένα διαφορετικό προφίλ κινδύνου για καρκινογένεση προστάτη. Από την άλλη πλευρά, φυτοοιστρογόνα, πλούσια σε όσπρια, μπορεί να διεγείρει ή να ρυθμίζουν τους υποδοχείς οιστρογόνων, ιδιαίτερα για eSR2 [36].

Μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων ένθετη διεξήχθη για να εξετάσει τις ενώσεις μεταξύ επιλεκτική πολυμορφισμών του ΕΣΡ 1, γονίδια eSR2 και ο κίνδυνος ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη σε μια ομάδα με βάση την κοινότητα στην κομητεία της Ουάσιγκτον, το Μέριλαντ. Διερευνητικές αναλύσεις εξέτασαν πώς η ESR1 και eSR2 SNPs ενδιαφέροντος τροποποίησε τη σχέση μεταξύ ΔΜΣ /φυτοοιστρογόνα και του κινδύνου καρκίνου του προστάτη, αλλά και πώς ΔΜΣ και φυτοοιστρογόνα αλλάξει τη σχέση μεταξύ της ESR1 και eSR2 SNPs του κινδύνου καρκίνου του ενδιαφέροντος και του προστάτη.

υλικά και Μέθοδοι

πληθυσμός Μελέτη

CLUE II ήταν ένα σύνθημα της δεύτερης έρευνας εκστρατείας, «Δώστε μας μια ένδειξη για τον καρκίνο και τις καρδιακές παθήσεις», που πραγματοποιήθηκε στην Ουάσιγκτον County, Maryland το 1989. Η συμμετέχοντες ήταν 10.456 άνδρες και 14.625 γυναίκες (συνολικά 25.081). Περίπου το 30% του ενήλικου πληθυσμού της Ουάσιγκτον County συμμετείχε. Κινητό ρυμουλκούμενα γραφείο χρησιμοποιήθηκαν για τη συλλογή του δείγματος. 20 ml αίματος από κάθε συμμετέχοντα τέθηκε σε 20 ml Vacutainer. Εκτός από κλάσματα πλάσματος, τα λευκά κύτταρα του αίματος και ένα δείγμα με ένα συντηρητικό βιταμίνη C φυλάχθηκαν στους -70 ° C. Buffy παλτά από τα δείγματα χρησιμοποιήθηκαν ως πηγή της ανάλυσης του γονότυπου.

Οι συμμετέχοντες στη μελέτη παρέχονται στοιχεία για την εκπαίδευση, το κάπνισμα (ποτέ, πρώην, ρεύμα), το ύψος, το βάρος, τη χρήση φαρμάκων, και η χρήση της βιταμίνης στο χρόνο πριν από τη χορήγηση ερωτηματολογίου. Μπορούν επίσης συμπλήρωσαν ένα ερωτηματολόγιο σύντομη συχνότητας κατανάλωσης τροφίμων [37] που περιλάμβανε ερωτήσεις σχετικά με το μέγεθος της μερίδας και η συχνότητα της πρόσληψης των 61 είδη διατροφής. Η ετήσια απώλεια-σε-συνέχεια στην ομάδα ήταν λιγότερο από το 1 τοις εκατό.

Μια γραπτή συγκατάθεση για τη συμμετοχή στην έρευνα εκστρατείας λήφθηκε από κάθε συμμετέχοντα κατά το χρόνο της αιμοδοσίας. Η μελέτη αυτή εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του Johns Hopkins Bloomberg Σχολή Δημόσιας Υγείας.

Case διαπίστωση και ελέγχου επιλογής

περιπτώσεις περιστατικό καρκίνου του προστάτη (Διεθνούς Ταξινόμησης των Νόσων, 9η αναθεώρηση, κωδικός 185) εντοπίστηκαν μέσω σύνδεσης με την Washington County Μητρώο Καρκίνου και από το 1992, επίσης στο Μέριλαντ κράτος Αρχείου Νεοπλασιών. Όλες οι περιπτώσεις επιβεβαιώθηκαν παθολογικά (n = 269). Στάδια και των ποιοτήτων που περιγράφονται σύμφωνα με την αμερικανική μεικτής επιτροπής σχετικά με το σύστημα του Καρκίνου /όγκου Κόμβος Μετάσταση (TNM) και το σύστημα Αποτέλεσμα του Gleason, αντίστοιχα.

Θήκες ορίστηκαν ως συμμετέχοντες, οι οποίοι ανέπτυξαν πρωτοπαθή καρκίνο του προστάτη κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης από το 1989 έως το 2002. Κάθε περίπτωση του καρκίνου του προστάτη ξεχωριστά συνδυάζεται με ένα ή δύο ελέγχους σχετικά με την ηλικία (± 1 έτος), το φύλο, την εθνικότητα, και την ημερομηνία της αιμοδοσίας. One-προς-ένα και ένα-προς-δύο ταίριασμα έγινε για 36% και 64%, αντίστοιχα, των περιπτώσεων. Κάθε έλεγχος επιλέχθηκε από την ομάδα CLUE II, δεν είναι γνωστό ότι έχουν καρκίνο, εκτός από βασικοκυτταρικό ή καρκίνο εκ πλακωδών κυττάρων του δέρματος και δεν είναι γνωστό ότι έχουν πεθάνει, κατά τη στιγμή που η αντίστοιχη υπόθεση είχε διαγνωστεί.

Γονοτυπικές

ηπαρινισμένο δείγματα αίματος υποβλήθηκαν σε φυγοκέντρηση σε 1500 g για 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου εντός 6 ωρών από τη συλλογή. Στη συνέχεια χωρίστηκαν σε πλάσμα, λευκής στιβάδας, και των ερυθρών αιμοσφαιρίων και καταψύχθηκαν στους -70 ° C εντός 24 ωρών από τη συλλογή. Γενετικοί πολυμορφισμοί του υποδοχέα οιστρογόνου α (ESR1) και β υποδοχέα οιστρογόνου (eSR2) προσδιορίστηκαν σε δείγματα DNA από δείγματα λευκής στιβάδας Οι κονσέρβες συμμετεχόντων. Η λευκή στιβάδα, παραμένουν κατεψυγμένα μέχρι την εκχύλιση του DNA έγινε. Η μέθοδος αλκαλικής λύσης χρησιμοποιήθηκε για τη διαδικασία εκχύλισης DNA. Όλα γονοτύπων που διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας προσδιορισμούς TaqMan® (Applied Biosystems, Foster πόλη, CA, USA). . Εργαστήριο ερευνητές χειρισμό δείγματα καλύφθηκαν με την κατάσταση της νόσου

Οι υποψήφιες πολυμορφισμούς μονών νουκλεοτιδίων (SNPs) επιλέχθηκαν με βάση τα ακόλουθα κριτήρια: (α) η συχνότητα αλληλόμορφο πάνω από πέντε τοις εκατό σε δημοσιευμένη βιβλιογραφία ή βάσεις δεδομένων, συνιστάται από το εθνικό Ινστιτούτο Καρκίνου [38], (β) επικυρωμένη αντικαταστάσεις αλληλόμορφο, ή /και (γ) λειτουργικές αλλαγές που συνδέονται με την αντικατάσταση αλληλόμορφο που αναφέρονται στη βιβλιογραφία.

Για την περιγραφή παραλλαγές ακολουθίας SNP, προσαρμόσαμε την σύσταση από έναν ονοματολογίας Ομάδα εργασίας [39]. Μεταξύ των ESR1 SNPs, τέσσερα SNPs συμπεριλαμβανομένων Ex4-122C & gt? G, E × 1 + 392T & gt? C, Ex1-192G & gt? C, και EX8 + 229g & gt? Α ήταν στην περιοχή κωδικοποίησης. Το υπόλοιπο του ESR1 SNPs ήταν είτε στην μη-κωδικεύουσα περιοχή πριν από την ATG κωδικόνιο έναρξης της μετάφρασης (-104062C & gt? Τ), ή στην περιοχή ιντρόνιο 6 (IVS6 + 52G & gt? Τ). Όλα τα eSR2 SNPs ήταν στην μη κωδικοποιητική περιοχή μετά τη μετάφραση κωδικόνιο τερματισμού (38 bp 3 ‘από STP G & gt? Α, 5659 bp 3’ του STP A & gt? G, 5696 bp 3 ‘του STP A & gt? G, 5772 bp 3 ‘της STP A & gt? G). Δέκα επιλεγμένα SNPs ήταν ο γονότυπος και στις δύο περιπτώσεις και τους ελέγχους. Μεταξύ των περιπτώσεων, 13,1% (35/269) έλειπαν κάθε ένα γονότυπο και μεταξύ των ελέγχων, 10,5% (46/440). Μέσος λείπει ρυθμός για κάθε ένα γονότυπο ήταν περίπου 18%. (Έχω διαγραφεί το μέρος ακρίβεια.)

Στατιστική Ανάλυση

Αρχικά χαρακτηριστικά μεταξύ ασθενών και μαρτύρων συγκρίθηκαν με όρους μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης για την κατηγορηματική μεταβλητές (Πίνακας 1). Με βάση την αυτο-αναφερθεί το ύψος και το βάρος κατά τον χρόνο της αιμοδοσίας, υπολογίσαμε ΔΜΣ ως χιλιόγραμμο ανά τετραγωνικό μέτρο. Οικογενειακό ιστορικό ταυτίστηκε με τον εαυτό έκθεση για την ιστορία του καρκίνου του προστάτη των παππούδων, των πατέρων και αδελφών. Διαιτητικά πρόσληψη λίπους, της ενέργειας, φυτοοιστρογόνα, και ασβεστίου εκτιμήθηκε αθροίζοντας του προϊόντος της συχνότητα κατανάλωσης της κάθε τροφής, την αναφερόμενη εξυπηρετούν το μέγεθος, και το περιεχόμενο ενέργειας ή ανά μερίδα. Συνολική πρόσληψη φυτοοιστρογόνων υπολογίστηκε με βάση ψυχανθών κατανάλωση. Ισοφλαβονών (φυτοοιστρογόνα) περιεχόμενα εκτιμήθηκαν για τα φασόλια (Pinto, lima, τα νεφρά, και άλλα φασόλια, πιθανώς συμπεριλαμβανομένης της σόγιας), τα μπιζέλια, και τα φυστίκια χρησιμοποιώντας State University USDA-Iowa Βάση δεδομένων για την περιεκτικότητα σε ισοφλαβόνες Foods, 1999 [40]. Όλα τεταρτημόριο cut-off που χρησιμοποιήθηκαν με βάση τα δεδομένα στην ομάδα ελέγχου. Υψηλή /χαμηλή πρόσληψη φυτοοιστρογόνα cut-off ήταν το μέσο επίπεδο της πρόσληψης στην ομάδα ελέγχου. Να ασχοληθεί με τα δεδομένα που λείπουν για τα διαιτητικά (κατά μέσο όρο 30% που λείπουν) στον υπολογισμό της συνολικής πρόσληψης ισοφλαβόνες, έγινε ανάλυση του συνυπολογισμού, εισάγοντας το μηδέν ή μέση αντί της απώλειας των δεδομένων, οι οποίες δεν επηρεάζουν τα συνολικά αποτελέσματα.

σύνδεσης μεταξύ των γονότυπων υποδοχέα οιστρογόνου και η ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη εξετάστηκε σε αναλύσεις υπό όρους λογιστική παλινδρόμηση. λόγοι πιθανοτήτων και τα αντίστοιχα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% προήλθαν από τρία διαφορετικά μοντέλα γενετική επίδραση, συμπεριλαμβανομένης κυρίαρχη, υπολειπόμενο και προσθετικό μοντέλα. Επιπλέον, οι αναλύσεις στρωματοποιήθηκαν από το στάδιο του καρκίνου και ποιότητας.

γονιδίων-περιβάλλοντος ενώσεις της αλληλεπίδρασης του ΔΜΣ ή διαιτητικών φυτοοιστρογόνα (ισοφλαβόνες) πρόσληψη για τη σχέση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονότυπους γονίδιο υποδοχέα οιστρογόνων αξιολογήθηκαν τόσο από διαστρωμάτωση αναλύσεις και η δοκιμή του λόγου πιθανοφάνειας (LRT), η οποία σε σύγκριση με τα υπό όρους μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης με και χωρίς όρους αλληλεπίδρασης. Συσχετίσεις μεταξύ ESR1 και eSR2 γονότυπους και τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη αξιολογήθηκαν σε στρώματα των τριών κατηγοριών ΔΜΣ και ξεχωριστά, στρώματα υψηλή /χαμηλή πρόσληψη φυτοοιστρογόνα, από την άνευ όρων λογιστικής παλινδρόμησης με προσαρμογή για την ηλικία και τη φυλή. Η ίδια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση της συσχέτισης μεταξύ BMI ή διατροφικός κίνδυνος καρκίνου πρόσληψη φυτοοιστρογόνα και του προστάτη σε στρώματα των γονότυπων υποδοχέα οιστρογόνου, με προσαρμογή για θερμιδική πρόσληψη στην ανάλυση σχετικά με την πρόσληψη φυτοοιστρογόνα, την ηλικία και τη φυλή. Για ΔΜΣ, ελέγξτε για τάση έγινε στις μέσες τιμές σε κάθε τρεις κατηγορίες. Για γονότυπους, το μοντέλο πρόσθετο θεωρήθηκε στις δοκιμές για την τάση. Όλες οι τιμές p προήλθαν από δοκιμή διπλής όψης και θεωρήθηκαν ότι είναι στατιστικά σημαντική και αν είναι λιγότερο από 0,05. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση STATA στατιστικού λογισμικού, 9.0 (Stata Corporation, College Station, TX, 2005).

Αποτελέσματα

Θήκες και οι έλεγχοι ήταν συγκρίσιμες σε σχέση με την ηλικία, τη φυλή, την εκπαίδευση, ιστορία του καπνίσματος, της χρήσης βιταμινών και διαιτητική πρόσληψη λίπους, συνολικών θερμίδων, φυτοοιστρογόνα, και ασβέστιο (Πίνακας 1). Μεταξύ των 188 περιπτώσεις των οποίων η νόσος στάδια προσδιορίστηκαν, 129 είχαν εντοπισμένη ασθένεια, που ορίζεται ως το στάδιο TNM 0, 1 ή 2, και 59 είχαν προχωρημένη νόσο, που ορίζεται ως ΤΝΜ στάδιο 3 ή 4 (Πίνακας 1). Hardy-Weinberg ισορροπία ελέγχθηκε για Καυκάσιους στους ελέγχους, οι οποίοι ήταν 263 (94%) και 429 (89%) σε κάθε ομάδα. Όλα τα SNPs ήταν σε ισορροπία Hardy-Weinberg, εκτός από eSR2 5659 bp 3 ‘της STP A & gt? G μεταξύ των περιπτώσεων και ESR1 IVS6 + 52G & gt? T, ESR1 -104062C & gt? T, 5659 bp 3’ της STP A & gt? G μεταξύ των ελέγχων (Πίνακας S1). Παρατηρούμενες μεγάλες συχνότητες αλληλόμορφο του ΕΣΡ SNPs από την ομάδα CLUE συγκρίθηκαν με SNP500 ή dbSNP δεδομένων εάν είναι διαθέσιμα, χωριστά για τους Καυκάσιους και Αφροαμερικανούς. Μεταξύ των οκτώ SNPs σε σύγκριση, δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά βρέθηκε με την εξαίρεση των ESR1 EX8 + 229g & gt? Ένα για τους Καυκάσιους (Πίνακας S2)

Ο Πίνακας 2 παρουσιάζει τις εκτιμήσεις περίεργο λόγο του κινδύνου καρκίνου του προστάτη για κάθε γονότυπο των οιστρογόνων. SNP του γονιδίου του υποδοχέα. Στην κυρίαρχη, υπολειπόμενο, και πρόσθετο μοντέλα, καμία στατιστικά σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ του SNPs και τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη. Επιπλέον, καμία σημαντική τάση βρέθηκε στον αριθμό των αλληλομόρφων σε σχέση με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη. Από τις δέκα SNPs, μόνο ESR1 Ex4-122C & gt? G συνδέθηκε με συνέπεια με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη σε όλες τις υποομάδες ορίζονται από τα στάδια και βαθμούς του καρκίνου (Πίνακας 2). Ωστόσο, κανένα από τα αποτελέσματα ήταν στατιστικά σημαντική. Μεταξύ προχωρημένες περιπτώσεις καρκίνου του προστάτη, για ESR1, C αλληλόμορφο στο E × 1 + 392T & gt? C συσχετίστηκε με στατιστικά σημαντική μείωση του κινδύνου του καρκίνου του προστάτη. Το αλληλόμορφο Τ στη IVS6 + 52G & gt? T συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη, αλλά η τάση σε κίνδυνο με την επιβάρυνση των Τ αλληλόμορφα δεν ήταν με στατιστικά σημαντική. Για eSR2, ένα αλληλόμορφο σε 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α και Α αλληλόμορφο στο 5659 bp 3’ της STP A & gt? G συσχετίστηκαν με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη προηγμένη αλλά η σχέση δεν ήταν στατιστικά σημαντικές. (Πίνακας 2)

Η

Μεταξύ της ομάδας με χαμηλή πρόσληψη φυτοοιστρογόνα, οι άνδρες που είχαν την παραλλαγή ομοζυγώτες G /G γονότυπο σε ESR1 Ex4-122C & gt?. Ζ είχε μια 5-πλάσια αύξηση των πιθανοτήτων ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη σε σύγκριση με τους άγριου τύπου ομοζυγώτη C /C γονότυπος (Ρ = 0.02, ρ-τιμή για την τάση = 0,04) (Πίνακας 3). Αντίθετα, οι άνδρες που είχαν μια παραλλαγή ομοζυγώτες C /C γονότυπου σε ESR1 E × 1 + 392T & gt? C και G /C, C /C γονότυπου σε ESR1 Ex1-192G & gt? C είχε μια μείωση των πιθανοτήτων εμφάνισης καρκίνου του προστάτη κατά 63% ( P = 0,017, p-τιμή για την τάση = 0,015) και 75% (P = 0,004) σε σύγκριση με άγριου τύπου ομοζυγώτες T /T και G /G γονότυπο, αντίστοιχα (Πίνακας 3).

Η

Γενικά , υπήρχε λίγα στοιχεία που να υποδεικνύουν μία αλληλεπίδραση μεταξύ γονότυπων και ΔΜΣ, εκτός από το ότι οι παχύσαρκοι άνδρες (BMI≥30 kg /m

2) με ετερόζυγο G /A γονότυπο σε eSR2 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α είχε ένα 72 % χαμηλότερο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη (P = 0.026), και ότι περισσότερο αλληλόμορφα Α σε eSR2 5659 bp 3 ‘της STP G & gt? Α σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του προστάτη σε άνδρες με ΔΜΣ & lt? 25 kg /m

2 ( p-τιμή για την τάση = 0.053). Παρόμοια αποτελέσματα παρατηρήθηκαν όταν ΔΜΣ 27 ή 27 kg /m

2 χρησιμοποιήθηκε ως αποκοπής για την ομαδοποίηση (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται)

Σε άνδρες με γονότυπο T /T στο ESR1 E × 1 + 392T & gt.? C, A /A γονότυπο σε ESR1 EX8 + 229g & gt? Α και A /G ή G /G γονότυπο σε eSR2 5696 bp 3 ‘της STP A & gt? G (Πίνακας 4), ομάδα υψηλού φυτοοιστρογόνα είχε ένα 58% (P = 0,048 ), 64% (Ρ = 0,047) και 80% (Ρ = 0.034) χαμηλότερο κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη, αντίστοιχα. Αντίθετα, στους άνδρες με G /C, C /C γονότυπου σε ESR1 Ex1-192G & gt? C, η ομάδα υψηλής φυτοοιστρογόνα είχαν 3,3 φορές περισσότερες πιθανότητες να αναπτύξουν καρκίνο του προστάτη σε σύγκριση με την ομάδα χαμηλής φυτοοιστρογόνα (P = 0,034)

.

Ένα υψηλότερο ΔΜΣ δεν σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη [OR (95% CI) = 0,84 (0,59, 1,19) σε πάνω-βάρους τους άνδρες, και OR (95% CI) = 0,95 (0,57, 1,57) στους παχύσαρκους άνδρες]. Σε άνδρες με ορισμένες SNPs, μια τάση σε μειώσεις στον καρκίνο του προστάτη σημειώθηκε με αυξημένο ΔΜΣ. Ειδικότερα, για τους άνδρες με G /A, G /G γονότυπο σε eSR2 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α, που έχουν ΒΜΙ ≥30 kg /m

2 συσχετίστηκε με μειωμένο τις πιθανότητες ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη κατά 57% σε σύγκριση με έχουν ΒΜΙ & lt? 25 kg /m

2 (p-τιμή για την τάση = 0,01) (Πίνακας 4)

μια ένωση αλληλεπίδραση με ΔΜΣ για τη σχέση μεταξύ καρκίνου του προστάτη. κινδύνου και γονότυπους ΕΣΡ προτάθηκε για eSR2 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α (P = 0,031). Αλληλεπίδραση σύνδεσης με το επίπεδο πρόσληψης των φυτοοιστρογόνων για τη σχέση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονότυπους ΕΣΡ προτάθηκε για δύο ESR1 Ex1-192G & gt? C (P = 0.0009) και ESR1 EX8 + 229g & gt? Α. (P = 0,044)

Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, δεν υπήρχε συνολική συσχέτιση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονοτυπική και αλληλομόρφων συχνότητες ESR1 και eSR2 SNPs. Ανάμεσα σε αυτούς που είχαν διαγνωστεί με προχωρημένο καρκίνο του προστάτη, οι ενώσεις μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονότυπων ήταν ενδεικτικά για τέσσερα SNPs: ESR1 E × 1 + 392T & gt? C, ESR1 IVS6 + 52G & gt? T, eSR2 38 bp 3 ‘της STP G & gt? Α και eSR2 5659 bp 3 ‘της STP A & gt? G. Διερευνητικές αναλύσεις υποδεικνύουν δυνητικές αλληλεπιδράσεις μεταξύ της περιβαλλοντικής έκθεσης (ΔΜΣ /φυτοοιστρογόνα), και πολυμορφικών παραλλαγών στα γονίδια των υποδοχέων οιστρογόνων με αποτέλεσμα την απόκλιση των κινδύνων του καρκίνου του προστάτη.

Όσον αφορά την ESR1, οκτώ μελέτες έχουν ασχοληθεί με το ίδιο ερώτημα με την παρούσα μελέτη έκανε. Σε μια ιαπωνική μελέτη, κωδικόνιο 10 (Τ → C) συσχετίστηκε με μια 2-φορές αυξημένο κίνδυνο για καρκίνο του προστάτη (OR = 2,03, 95% CI: 1,17 – 3,53) [22]. Μια άλλη μελέτη, επίσης στην Ιαπωνία, ανέφεραν σημαντική συσχέτιση του Τ /Τ γονότυπο του θέση ΡνυΙΙ στο ESR1 (OR = 3,44? 95% CI: 1,97 – 5,99) [23]. Η διαπίστωση αυτή επιβεβαιώθηκε από μια μελέτη στο Ηνωμένο Βασίλειο (OR = 4,65? 95% CI: 1,60 – 13,49) [24] και μια ινδική μελέτη (OR = 2,15, 95% CI: 1,06 – 4,37) [25]. Σε μια μελέτη στις ΗΠΑ, μια πιθανή συσχέτιση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και ESR1 ιστοσελίδα ιντρονικές περιορισμού, XbaI και PuII, αλλά η ένωση δεν ήταν στατιστικά σημαντική. [26]. Μια άλλη μελέτη διαπίστωσε σύνδεσης μεταξύ της γονότυπο AG, καθώς και η παρουσία του αλληλόμορφου G εντός του XbaI ESR1 SNP και του κινδύνου καρκίνου του προστάτη, αλλά καμία συσχέτιση μεταξύ του

Ρνυ

II SNP και του καρκίνου του προστάτη σε μαύρο άνδρες [27 ]. Σε μια γαλλική μελέτη, την παραλλαγή του πολυμορφισμού GGGA από την ESR1 συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του προστάτη [28], [29]. Πρόσφατα, Cunningham et al. έχουν αναφερθεί null συσχέτιση μεταξύ ESR1 SNP: IVS1-397, g34288C /T (rs2234693), IVS1-351, g3433A /G (rs9340799), ESR1 ΤΑ επανάληψη πολυμορφισμός και τον κίνδυνο του προστάτη [30]. Αντιστρόφως, McIntyre et al. παρατηρήθηκε ότι ο κίνδυνος καρκίνου του προστάτη ήταν μεγαλύτερη με ESR1 (ΤΑ)

24 και (ΤΑ)

25 φορείς [31]. Ωστόσο, κανένας από τους SNPs που αναφέρθηκαν παραπάνω επικαλύπτονται με τα SNPs που εξετάστηκαν σε αυτή τη μελέτη.

Σύμφωνα με τα ευρήματα της μελέτης μας, Ακύρωση-Tassin et al. (2003) ανέφεραν καμία συσχέτιση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη και γονότυπους των ESR1 E × 1 + 392T & gt? C και eSR2 EX8 + 229g & gt? A [28]. Στη μελέτη αυτή, ESR1 Ex4-122C & gt? G δείχθηκε να συνδέεται με τον καρκίνο του μαστού [41] και την εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη [42], η οποία είναι ανάλογη με τα ευρήματά μας υψηλότερου κινδύνου για να διαγνωστεί ότι έχουν προχωρημένη νόσο. Ωστόσο, οι συγγραφείς δεν βρίσκουν μια συσχέτιση με την επίπτωση του καρκίνου του προστάτη. Επιπλέον, Medeiros et al. (2003) ανέφεραν μια σύνδεση του ESR1 Ex4-122C & gt? G δυσμενών παραμέτρων έκβασης, όπως η υψηλή παθολογικό βαθμό και κλινικό στάδιο [42], εύρημα συμβατό με τη δική μας ότι το κλινικό στάδιο συνδέθηκε με τους γονότυπους των ESR1 Ex4-122C & gt? G ( p τιμή από chi-square test = 0,05).

Τέσσερις προηγούμενες μελέτες έχουν δημοσιευθεί σχετικά σχέση μεταξύ πολυμορφισμών στην eSR2 και τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη. Μία μελέτη διεξήχθη στην Κίνα, και ο γονότυπος και αλληλόμορφο συχνότητα του rs3829768 (A /G) και rs1271572 (C /A) στην ανάντη περιοχή του εγγύς υποκινητή ήταν σημαντικά χαμηλότερη σε προστάτη περιπτώσεων καρκίνου από τους ελέγχους (Ρ & lt? 0,01) [32 ]. Η άλλη μελέτη διεξήχθη στην Σουηδία με ευρήματα ότι γονότυπος και η συχνότητα αλληλόμορφου του rs2987983 (T /C) στην περιοχή προαγωγού συνδέθηκε με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη [33], και ότι το προστατευτικό αποτέλεσμα του φυτοοιστρογόνα για τον καρκίνο του προστάτη ήταν σημαντική μεταξύ των ανδρών με φορείς ομόζυγο για το αλληλόμορφο άγριου τύπου (ΤΤ) της ίδιας SNP [34]. Των πρόσφατων, δύο μελέτες έχουν αναφερθεί μηδενική συσχέτιση μεταξύ eSR2 CA επανάληψης πολυμορφισμού και του καρκίνου του προστάτη [30], [31]. Σε μια γαλλική μελέτη, επιπλέον 14 eSR2 SNPs είχαν σημειωθεί ότι δεν έχει καμία σχέση με τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του προστάτη [29]. Συνεπής με τα ευρήματά μας, Cunningham et al. [30] παρατηρήθηκε μηδενική συσχέτιση μεταξύ eSR2 3’togene, g.49888G /Α (rs4986938). Εκτός από αυτή τη μία μελέτη [30], οι προηγούμενες μελέτες δεν έχουν αναφερθεί στη SNPs περιλαμβάνεται στην παρούσα μελέτη. Για παράδειγμα, ενώ μια μελέτη στην Σουηδία διερευνήθηκε τέσσερα SNPs στην περιοχή προαγωγού και εσώνια του eSR2, ο SNPs που εξετάστηκαν σε αυτή τη μελέτη ήταν στην κατάντη μη κωδικοποιητική περιοχή του eSR2 [33], [34].

μερικές επιδημιολογικές μελέτες υποστήριξαν την υπόθεση ενός προστατευτικού σχέση μεταξύ φυτοοιστρογόνα (ισοφλαβόνες) πρόσληψης και του προστάτη και του μαστού [20], [21]. Η μελέτη μας, ωστόσο, δεν δείχνουν ότι οι συνολικές προστατευτική συσχέτιση της πρόσληψης των φυτοοιστρογόνων για τον καρκίνο του προστάτη, αλλά βρήκε μια προτεινόμενη αλληλεπίδραση με δύο ESR1 SNPs (rs746432, rs2228480). Σουηδική μελέτη εντόπισε rs2987983 στην περιοχή του υποκινητή του eSR2, η οποία δεν περιλαμβάνεται στη μελέτη μας, ως πιθανή τροποποιητή επίδραση στη σχέση μεταξύ της πρόσληψης φυτοοιστρογόνα και του κινδύνου καρκίνου του προστάτη [34]. Θα πρέπει να σημειωθεί δύο πλευρές των δεδομένων σχετικά με την πρόσληψη φυτοοιστρογόνα. Πρώτον, τα στοιχεία που λείπουν μπορεί να τεθεί σε κίνδυνο την εγκυρότητα για την αξιολόγηση της συσχέτισης ανάμεσα στην κατανάλωση φυτοοιστρογόνων και τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του προστάτη. Σε ένδειξη ΙΙ, το ερωτηματολόγιο συχνότητας κατανάλωσης τροφίμων δεν περιλαμβάνουν τα φασόλια σόγιας ή προϊόντα σόγιας, όπως το γάλα σόγιας και tofu. Ωστόσο, αυτά δεν αναμένεται να είναι μια κύρια πηγή φυτοοιστρογόνων σε αυτόν τον πληθυσμό. Περαιτέρω, κατά το χρόνο της εγγραφής μελέτη CLUE το 1989, τα προϊόντα σόγιας δεν ήταν διαδεδομένη στην αμερικανική διατροφή. Αυτή η μελέτη υπολόγισε το ποσό των φυτοοιστρογόνων (ισοφλαβόνες) πρόσληψη αθροίζοντας τις προσλήψεις των τριών ψυχανθών ειδών (φασόλια, αρακάς, φιστίκια), τα οποία ήταν οι βασικές πηγές φυτοοιστρογόνα στην αμερικανική διατροφή. Συνοψίζοντας τις προσλήψεις των ψυχανθών ειδών, δεδομένου ότι λείπει ένα στοιχείο οδήγησε σε δεδομένα που λείπουν για το άθροισμα όλων των στοιχείων, το ποσοστό των ελλειπόντων στοιχείων ανέβηκε στο 30% περίπου. Ένα υψηλό ποσοστό των ελλειπόντων στοιχείων μειώνει σημαντικά το μέγεθος του δείγματος που διατίθενται για τη στατιστική ανάλυση, και κατά συνέπεια μειώνει την στατιστική ισχύς. Ωστόσο, στην ανάλυση του συνυπολογισμού, εισάγοντας το μηδέν ή μέση αντί της απώλειας των δεδομένων δεν επηρεάζει τα συνολικά αποτελέσματα. Δεύτερον, το ποσό των φυτοοιστρογόνα που καταναλώνεται στην κομητεία της Ουάσιγκτον ήταν πολύ μικρότερη από ότι στην Νοτιοανατολική Ασία, όπου η σόγια καταναλώνεται συνήθως σε μέτρια έως μεγάλη ποσότητα. Αυτό μπορεί να είναι ένας από τους λόγους που εξηγεί τις διαφορές που διαπιστώθηκαν μεταξύ των μελετών στην Ασία και την παρούσα μελέτη [21].

Όσον αφορά τη δοκιμή για τη διαδραστική αποτελέσματα, το επίπεδο σημαντικότητας (σφάλμα τύπου Ι) είναι η πιθανότητα ψευδώς αναφέρουν σημαντική αλληλεπίδραση. Υποθέτοντας ότι τα ίδια αποτελέσματα σε όλη την στρώματα, η πιθανότητα να βρεθεί τουλάχιστον μία σημαντική αλληλεπίδραση από τύχη και μόνο όταν αναλαμβάνουν 20 ανεξάρτητες αναλύσεις υποομάδων όπως στον πίνακα 4 είναι 65% [43]. Όταν η διορθωμένη τιμή p για υπερ-φουσκωμένα ποσοστό ψευδώς θετικών [44], 0,0025 (0,05 ÷ 20), εφαρμόζεται σε πίνακα 4, μια αλληλεπίδραση παραμένει στατιστικά σημαντική: με ESR1 Ex1-192G & gt? C (log τεστ λόγου πιθανοφανειών: p = 0,0009 & lt?. 0,0025), γεγονός που υποδηλώνει ότι αυτό το SNP ήταν ένα ισχυρό τροποποιητή επίδραση στη συσχέτιση μεταξύ της διατροφικής πρόσληψης του κινδύνου φυτοοιστρογόνα και του καρκίνου του προστάτη

ένας σημαντικός περιορισμός αυτής της μελέτης είναι ότι μόνο ένα υποσύνολο των γνωστών SNPs σε δύο γονίδια, ESR1 και eSR2, εξετάστηκαν :. Μόνο 3 από τα 10 επιλεγμένα SNPs (ESR1 E × 1 + 392T & gt? C, eSR2 EX8 + 229g & gt? Α, και ESR1 Ex4-122C & gt? G) μελετήθηκαν κατά το παρελθόν [28], [42], όπου null ενώσεις με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη παρατηρήθηκαν, σύμφωνα με τα ευρήματα της μελέτης μας. Ωστόσο, για τα υπόλοιπα 7 SNPs που επιλέγονται, η ομάδα μας ήταν η πρώτη που δεν αναφέρουν συνολική συσχέτιση μεταξύ αυτών των SNPs και συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του προστάτη.

Λειτουργίες όλων των υποψήφιων SNPs παραμένουν ασαφείς. Όλα τα τέσσερα ESR1 SNPs στα εξόνια ήταν συνώνυμη πολυμορφισμοί χωρίς συνδέονται αλλαγή αμινοξέος. Ως εκ τούτου, είναι απίθανο ότι αυτά τα πολυμορφισμοί είναι αιτιολογικοί. Ωστόσο, μπορεί να είναι σε ανισορροπία σύνδεσης με ένα άγνωστο παραλλαγή αιτιολογικός. Ή, μπορούν να προκαλέσουν μια διαρθρωτική αλλαγή στο RNA, αλλάζοντας την αποτελεσματικότητα της μετάφρασης, και ως εκ τούτου, οδηγώντας σε μεταβολή του ποσοστού έκφρασης του γονιδίου ESR1 [22]. Η κατάσταση είναι η ίδια για τα άλλα SNPs είτε σε μη-κωδικοποιητικές περιοχές ή σε ιντρόνια, δικαιολογούν περαιτέρω λειτουργική ή έκφραση μελέτες.

Δοκιμές του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) έχουν χρησιμοποιηθεί όλο και περισσότερο για τη διαλογή και τη διάγνωση του προστάτη καρκίνο από τις αρχές της δεκαετίας του 1990. Διαφορική χρήση των τεστ PSA μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων μπορεί να οδηγήσει σε προκατάληψη ανίχνευσης. Στη μελέτη αυτή, δεν υπήρχε καμία ένδειξη υπερ-διαγνώσεις του πρώιμου καρκίνου με τη χρήση δοκιμών PSA και δακτυλική εξετάσεις (DRE) [44]. Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στο ρυθμό εξέταση PSA μεταξύ ασθενών και μαρτύρων. Είχαμε λίγες Αφροαμερικανοί και δεν Ασιάτες στην ομάδα, γι ‘αυτό δεν εξετάζει τις οργανώσεις σε διάφορες εθνοτικές ομάδες.

Εν ολίγοις, δεν υπάρχει συνολική στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ του κινδύνου καρκίνου του προστάτη καθώς και τις επιλεγμένες δέκα SNPs σε ESR1 και παρατηρήθηκε γονίδια eSR2. Ωστόσο, τέσσερα SNPs (rs2077647, rs2273206, rs4986938, rs928554) μπορεί να συνδέεται με αυξημένο κίνδυνο για να διαγνωστεί να έχουν προχωρημένο στάδιο της νόσου. Επιπλέον, μπορεί να υπάρχει ένα διαδραστικό αποτελέσματος μεταξύ ΔΜΣ /φυτοοιστρογόνα και γονότυπους ΕΣΡ σχετικά με τον κίνδυνο καρκίνου του προστάτη. Περαιτέρω έρευνες χρειάζονται για να δούμε αν η μελέτη είναι να αναπαραχθεί σε άλλους πληθυσμούς, ειδικά σε άλλες εθνοτικές ομάδες, και για να μάθετε πώς η αλληλεπίδραση γονιδίων-περιβάλλοντος μπορεί να εξηγηθεί κάτω από τα βιολογικά μοντέλα.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Πίνακας S1.

Hardy Weinberg ισορροπία (HWE) μεταξύ Καυκάσου περιπτώσεις και τους ελέγχους

doi: 10.1371 /journal.pone.0006523.s001

(0,02 MB XLS)

Πίνακας S2.

Παρατηρήθηκε οιστρογόνων συχνότητας SNP υποδοχέα σε ελέγχους CLUE και τα δεδομένα SNP500 /dbSNP από τη φυλή

doi: 10.1371 /journal.pone.0006523.s002

(0,02 MB XLS)

Ευχαριστίες

ευχαριστούμε τα μέλη του προσωπικού του George W. Comstock Κέντρο για τη Δημόσια Υγεία Έρευνα και Πρόληψης για τη βοήθειά τους στη διαχείριση της συλλογής δεδομένων και των δεδομένων. Ευχαριστούμε επίσης τον Χάρη Chan (Νοσοκομείο Παίδων της Βοστόνης) για τη βοήθειά της στην ανάλυση ανάλυση πρόσληψη φυτοοιστρογόνα και Jung Eun Lee (Harvard School of Public Health) για τη βοήθειά της στην αναθεώρηση και επιμέλεια του χειρογράφου.